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Variabilidade genetica em algumas especies de Bulbophyllum Thouars (Orchidaceae) de campos ruprestesFarinaci, Juliana Sampaio, 1972- 16 March 2001 (has links)
Orientadores: Vera Nisaka Solferini, João Semir / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-27T14:18:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2001 / Resumo: Bulbophyllum ipanemense, 8. involutum e 8. weddellii são orquídeas de campos rupestres que crescem diretamente sobre as rochas e são polinizadas por fêmeas de Pholeomyia (Diptera: Milichidae). Dezesseis amostras destas espécies, coletadas em diferentes localidades nos Estados de Minas Gerais, São Paulo e Bahia foram analisadas citoge netica mente. Somente cinco destas amostras apresentaram-se constituídas por indivíduos diplóides, com 2n=38, sendo as demais possivelmente poliplóides, com 2n=ca.72. As amostras diplóides foram analisadas quanto à estruturação e variabilidade genéticas através de eletroforese de isozimas utilizando oito locos enzimáticos. Foi encontrado grande polimorfismo enzimático e alta variabilidade genética (He entre 36,9% e 49,7%). O valor de !ir (=0,0524) para 8.ipanemense indica uma estruturação genética moderada, mas que não deve ser negligenciada. Estes resultados não são esperados em espécies de distribuição disjunta, cujos polinizadores são pequenos insetos que, julga-se, não sejam capazes de voar longas distâncias. Assim, a alta homogeneidade genética entre as amostras estudadas sugere que a dispersão de sementes nestas espécies deve ser um fator mais importante na manutenção do fluxo gênico do que geralmente se julga. Também é possível que amostras de diferentes localidades estejam sujeitas a diferentes pressões seletivas, pois o fluxo gênico não é totalmente livre, mesmo entre amostras de localidades bastante próximas. Isto indica que as amostras locais devem de fato representar populações distintas. A comparação com outro trabalho realizado com orquídeas também rupícolas e miiófilas de campos rupestres indica que a alta variabilidade encontrada pode estar relacionada às características ecológicas comuns a estas plantas. A alta incidência de indivíduos poliplóides sugere que esta possa ser uma característica com algum valor adaptativo no ambiente que estas plantas ocupam / Abstract: Bulbophyllum ipanemense, B. ínvolutum and B. weddellíl are orchids trom 'campos rupestres' that grow directly on rocks and are pollinated by Pholeomyia (Diptera: Milichidae) females. Sixteen samples of these plants, collected in different localities in .Minas Gerais, São Paulo and Bahia were analyzed citogenetically. Only five out of these sixteen samples were constituted by diploid individuals, with 2n=38. The other samples have putative polyploids, with 2n=ca.72. Eight loci were studied in the diploid samples through isozyme electrophoresis. Genetic variability was high, with great enzymatic polymorphism and He between 36.9% and 49.7%. The & score (=0.0524) in B.ipanemense suggests moderate, but not negligible, genetic structure. These results were not expected for species with disjunct distribution whose pollinators are small insects, as they are not supposed to be able to fly great distances. Therefore, genetic homogeneity shown by the studied samples suggests that seed dispersal might be more important for gene flow maintainance than it is generally thought. As gene flow is not completely free, even between samples from rather dose localities, it is also possible that the different localities are exposed to different selective pressures. This indicates that the local samples may actually represent distinct populations. Comparison with similar results from another study of rupiculous and fly-pollinated orchids from 'campos rupestres' indicates that the high genetic varlability may be related to the ecological features that these plants have in common. The high incidence of polyploids in Bulbophyllum may suggest some relation between polyploidization and titness / Mestrado / Genetica Vegetal e Melhoramento / Mestre em Genética e Biologia Molecular
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Estudos cromossomaticos em especies de Myrtaceae Juss. no sudeste do BrasilCosta, Itayguara Ribeiro 11 May 2004 (has links)
Orientador: Eliana Regina Forni-Martins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:10:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2004 / Resumo: A família Myrtaceae destaca-se como uma das famílias com maior riqueza de espécies na maioria das formações vegetacionais no sudeste do Brasil (cerrado, campos rupestres, floresta atlântica e florestas deciduais). Dada a sua grande riqueza de espécies, ocorrência em diferentes tipos de ambientes e grande semelhança morfológica entre suas espécies, apresenta inúmeros problemas taxonômicos. Estudos cromossômicos em espécies de Myrtaceae neotropicais (subfamília Myrtoideae) ainda são escassos. Grande parte dos estudos realizados concentra-se em espécies autralianas e africanas (subfamílias Leptospermoideae e Chamelaucioideae). Nas Myrtoideae, tem-se indicação de que a poliploidia é freqüente, ao contrário do restante da família, onde predominam espécies displóides. Estes estudos objetivaram: 1) contribuir para o conhecimento cromossômico da família, mediante a determinação de números cromossômicos; 2) fornecer subsídios para o entendimento da circunscrição e delimitação de suas espécies; 3) avaliar a importância da poliploidia na evolução do grupo e 4) fazer inferências sobre o processo reprodutivo de algumas espécies. A constância do número diplóide 2n=22 (exceto para os poliplóides) e o pequeno tamanho dos cromossomos dificultaram o uso de dados cariotípicos como subsídio à taxonomia da família Myrtaceae. A ocorrência de n=11 e 2n=22 em todas as espécies, distribuídas em todos os nove gêneros analisados, distribuídos nas diferentes subtribos (Eugeniinae, Myrciinae e Myrtiinae), não subsidia o esclarecimento de dúvidas taxonômicas, como a distinção ou junção dos gêneros Myrcia, Marlierea e Gomidesia e entre Myrciaria e Plinia. A ocorrência de poliploidia nos diferentes gêneros, em meio a outras espécies diplóides, não tem valor como caráter taxonômico em nível genérico. Foi possível verificar a ocorrência de raças cromossômicas (citótipos) diferenciadas pelo nível de ploidia em várias espécies. Foi confirmada a freqüente ocorrência de poliploidia (20% das espécies analisadas) ao contrário das variações por disploidia. Não foi verificada nenhuma anormalidade no processo meiótico, o que dá indícios de regularidade no processo de reprodução sexuada / Abstract: Myrtaceae is one of the most representative families in southeast Brazilian vegetational formations (savanna, ¿campos rupestres¿, atlantic forest and deciduos forest). Given the great number of species, morphological similarities between species and occurrence in varied habitats, the family presents many taxonomic problems. Chromosomic studies in Neotropical species of Myrtaceae (Myrtoideae) are still scarce. Most of the previously accomplished studies documented Australian and African species (Leptospermoideae and Chamelaucioideae). In the Myrtoideae, it is known that poliploidy is frequent, in opposition to the remainder of the family, where disploid species predominate. These studies aimed to: 1) contribute to the chromosomic knowledge of the family, by means of the chromosomic numbers determination; 2) supply subsidies for towards the circunscription and delimitation of the species; 3) evaluate the importance of poliploidy in the evolution of the group and 4) derive inferences on the reproductive processes of the some species. The constancy of the diploid number 2n=22 (with exception of poliploids) and the small chromosome size complicated the use of the karyotypic data as subsidies to taxonomy of the Myrtaceae family. The occurrence of n=11 and 2n=22 in all species of the genera analized, doesn't clarify taxonomic doubts, such as the unification or separation of genera like Myrcia, Marlierea and Gomidesia and Myrciaria and Plinia. Poliploidy occurrence in different genera, amongst diploid species, has no value as a taxonomic character at the generic level. It was possible to verify the occurrence of chromosomic races (cytotypes), differentiated by ploidy level in several species. We observed the high frequence of poliploidy (20%), in opposite of the disploidy variations. No abnormality in the meiotic process was verified, indicating regularity of the sexual reproduction process / Mestrado / Mestre em Biologia Vegetal
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Indução à tetraplodia e desempenho zootécnico de ostras Crassostrea gigas (thunberg 1793) triploides em Santa CatarinaMelo, Emílio Mateus Costa January 2016 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Gradução em Aquicultura, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-03-28T04:12:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2016 / O estudo teve como objetivos a produção de ostras do Pacífico (Crassostrea gigas) tetraploides, utilizando choques de indução com 6-dimetilamino-purina (6-DMAP) e térmico (25-36º C), em substituição à citocalasina-B (CB), em embriões diploides, no momento da saída do primeiro corpúsculo polar. Além disso, o estudo buscou um melhor entendimento sobre o desempenho zootécnico obtido com o cultivo de ostras triploides em diferentes locais nas Baías Norte e Sul da ilha de Santa Catarina, avaliando parâmetros como peso fresco total, altura e sobrevivência (experimentos I, II e III) e ainda aspectos reprodutivos, como índice de condição e histologia desses organismos quando expostos às condições de cultivo no sul do Brasil. Os resultados obtidos com a indução a tetraploidia em ostras do Pacífico foram promissores, obtendo-se larvas tetraploides em todos os tratamentos testados, sendo indicada a substituição da CB pelos outros tratamentos (6-DMAP e temperatura). Na análise de desempenho zootécnico de ostras triploides, em ambos os experimentos as ostras triploides mostraram melhores resultados que às ostras diploides em peso fresco total e altura no período de verão. Quanto a sobrevivência, as ostras triploides foram superiores às ostras diploides apenas no experimento I, não havendo diferença estatística ao final dos experimentos II e III. Já as análises dos índices de condição de ostras triploides apresentaram um padrão semelhante ao encontrado para ostras diploides, apresentando os maiores valores durante o mês de agosto de 2015 e os menores em fevereiro de 2016 para ostras 2N e 3N em ambos locais de cultivo. Já na histologia, as ostras 3N apresentaram um padrão semelhante às ostras 2N quanto ao ciclo reprodutivo, indicando que as potenciais melhorias encontradas para ostras 3N no Brasil não estão ligadas apenas à diminuição da atividade reprodutiva desses organismos e sim a outros fatores que precisam ser avaliados em posteriores estudos.<br> / Abstract : The study aimed to the production of Pacific oysters (Crassostrea gigas) tetraploid, using induction shocks with 6-dimethylamino-purine (6-DMAP) and heat (25-36º C), replacing cytochalasin-B (CB) in diploid embryos, the output of the first polar body. In addition, the study sought a better understanding of the growth performance achieved by growing triploid oysters at different locations in the bays north and south of the island of Santa Catarina, evaluating parameters such as the total fresh weight, height and survival (experiment I, II and III), and even reproductive aspects, as a condition index and histology of these organisms when exposed to growing conditions in southern Brazil. The results obtained with the induction tetraploidy in Pacific oysters were promising, yielding tetraploid larvae in all treatments, with the substitution indicated by CB other treatments (6-DMAP and temperature). In the production performance analysis of triploid oysters, in both experiments triploid oysters were higher than diploid oysters in the total fresh weight and height in the summer period. As for survival, the triploid oysters were higher than diploid oysters only in experiment I, with no statistical difference at the end of the experiments II and III. As for the analysis of the index condition of triploid oysters showed a pattern similar to that for diploid oysters, with higher rates during the month of August 2015 and the lowest in February 2016 for 2N and 3N oysters in both cultivation sites. As for histology, the 3N oysters showed a pattern similar to 2N oysters on the reproductive cycle, indicating that potential improvements found for 3N oysters in Brazil are not linked just to decreased reproduction of these organisms but the other factors that need to be evaluated in later studies.
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Estudos genético-moleculares no gênero Paspalum L. (Poaceae: Panicoideae: Paniceae) / Genetic and molecular studies in the genus Paspalum L. (Poaceae: Panicoideae: Paniceae)Cidade, Fernanda Witt 18 August 2018 (has links)
Orientador: Anete Pereira de Souza / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-18T10:32:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2011 / Resumo: No Brasil, a pecuária bovina é baseada principalmente na utilização de pastagens para alimentação animal, sendo a maioria destas cultivadas. O lançamento de novas cultivares de forrageira e os avanços no manejo das pastagens permitiram que o Brasil se tornasse, atualmente, um dos maiores produtores mundiais de bovinos e o maior exportador de carne bovina do mundo. Contudo, poucas opções de forrageiras estão disponíveis para o cultivo de pastagens no Brasil, principalmente para as regiões tropicais, sendo que a maioria dessas é constituída de poucas cultivares de gramíneas africanas do gênero Urochloa (Syn. Brachiaria). Há uma necessidade eminente de diversificação das pastagens e, o gênero Paspalum se destaca dentre as gramíneas nativas com potencial forrageiro a contribuir para a diversificação de espécies em pastagens tropicais. Paspalum inclui aproximadamente 400 espécies distribuídas, principalmente, em regiões tropicais e subtropicais das Américas. O Brasil é o maior centro de origem e diversidade deste gênero, com ocorrência de espécies de grande potencial forrageiro, havendo vários acessos disponíveis em bancos de germoplasma. Para que os programas de melhoramento possam utilizar de forma adequada os bancos de germoplasma existentes, é necessário um conhecimento da quantidade e da distribuição da diversidade genética dessas coleções. Nesse sentido, no presente trabalho, marcadores microssatélites foram isolados e caracterizados em duas espécies de Paspalum (P. atratum e P. notatum) para o estudo de diversidade genética de acessos de bancos de germoplasma de Paspalum. Um total de 21 microssatélites foi desenvolvido para P. atratum e 26 para P. notatum. A transferibilidade desses marcadores foi avaliada para 35 espécies de Paspalum, sendo que doze microssatélites foram utilizados na caracterização de 214 acessos de Paspalum de diferentes espécies. Os microssatélites foram úteis na identificação das espécies de Paspalum, auxiliando de forma efetiva na organização dos acessos mantidos nos bancos de germoplama, fornecendo também subsídios para programas de melhoramento genético do gênero. Adicionalmente, 57 acessos de P. notatum foram avaliados com o uso de 30 microssatélites, em conjunto com caracterísitcas fenotípicas e citogenéticas. A maioria desses locos apresentou grande potencialidade para uso na discriminação de cultivares e acessos. As avaliações conjuntas indicaram que os microssatélites foram eficientes e robustos na separação dos acessos de P. notatum em três variedades botânicas (var. notatum, var. saurae e var. latiflorum), os quais agruparam-se em sete grupos geneticamente distintos. Os microssatélites desenvolvidos, assim como os dados de diversidade genética gerados nesse trabalho, são um passo em direção a um melhor entendimento do gênero e uma ferramenta para que novos trabalhos possam ser realizados / Abstract: In Brazil, the production of cattle is based primarily on the use of pastures for animal feed, most of these cultivated. The release of new cultivars of forage and advances in pasture management has enabled Brazil to become currently one of the largest producers of cattle and the largest exporter of beef in the world. However, few options are available for fodder cultivation of pastures in Brazil, mainly in tropical regions, where most of these consists of a few varieties of African grasses of the genus Urochloa (Syn. Brachiaria). There is a clear need to diversify pastures and the genus Paspalum stands out among the native grasses with forage potential to contribute to the diversification of species in tropical pastures. Paspalum includes about 400 species distributed mainly in tropical and subtropical regions of the Americas. Brazil is the largest center of origin and diversity of this genus, with the occurrence of species of high forage yield potential, and several accessions available in germplasm banks. In order to make good use of the existing germplasm collections for breeding purposes it is necessary to know the quantity and distribution of genetic diversity of these collections. In that sense, in the present work, microsatellite markers were isolated and characterized in two species of Paspalum (P. notatum and P. atratum). These markers were used as a tool to study genetic diversity of germplasm banks of Paspalum. A total of 21 microsatellites was developed for P. atratum and 26 for P. notatum. The transferability of these markers was evaluated for 35 species of Paspalum, in which twelve microsatellites were used to characterize 214 accessions of different species of Paspalum. The microsatellites were useful in identifying the species of Paspalum, effectively assisting in the organization of accessions maintained in germplasm banks, as well as providing subsidies to breeding programs of the genus. Additionally, 57 accessions of P. notatum were evaluated using 30 microsatellites, together with phenotypic and cytogenetic characteristic. Most of these loci showed a great potential for cultivar and accessions discrimination. Joint evaluations indicated that the microsatellites were efficient and robust in the separation of the accessions evaluated in to seven genetically distinct groups, which corresponded to the three botanical varidades described for the species (var.notatum, var. sourae, and var. latiflorum). Microsatellites developed, as well as data of genetic diversity generated in this work are a step toward a better understanding of the genus and a tool for further work / Doutorado / Genetica Vegetal e Melhoramento / Doutor em Genetica e Biologia Molecular
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Caracterização de polimorfismos e assinaturas de seleção em genótipos de cana-de-açúcar (Saccharum spp.) através de genotipagem-por-sequenciamento / Characterization of polymorphisms and selection signatures in sugarcane genotypes (Saccharum spp.) by genotyping-by-sequencingMenegatto, Leonardo Sartori 24 February 2017 (has links)
A cana-de-açúcar (Saccharum ssp.) é uma cultura valiosa na produção de alimento, fibra e energia para o Brasil e, especialmente, para o estado de São Paulo. Com o advento da biotecnologia, alternativas de melhoramento genético têm despertado a atenção da comunidade científica, sendo etapas cruciais para tais avanços o sequenciamento e a caracterização do genoma das espécies cultivadas. Dada sua natureza poliploide, com frequente aneuploidia, a cana-de-açúcar apresenta dificuldades às práticas convencionais em genômica, de maneira que é vantajoso fazer uso de recursos de sequenciamento de nova geração e de espécies próximas para elucidar de forma mais efetiva o genoma da gramínea. Uma contribuição interessante, nesse sentido, é a caracterização funcional de polimorfismos genéticos existentes entre genótipos do gênero Saccharum, auxiliando investigações relacionadas à genômica de poliploides complexos, desenvolvendo um recurso a ser utilizado futuramente por melhoristas. Esse trabalho realizou a caracterização da variabilidade genômica a partir de dados genotípicos de indivíduos do Painel Brasileiro de Genótipos de Cana-de-Açúcar, obtidos via genotipagem-por-sequenciamento, utilizando como referência o genoma já sequenciado do sorgo. Os sítios variantes (sobretudo polimorfismos de nucleotídeo único) foram detectados com o software FreeBayes e suas possíveis funções e posições foram anotadas com o programa SnpEff. Utilizaram-se estatísticas de genética de populações, como a frequência alélica para várias classes de polimorfimo, o Teste de McDonald & Kreitman (busca de evidêcias de evolução adaptativa) e a heterozigosidade combinada (busca de regiões genômicas com assinatura de seleção), de modo a identificar regiões genômicas potencialmente envolvidas em eventos evolutivos. Os resultados demonstraram a perda de variabilidade entre os genótipos melhorados em relação aos ancestrais, com evidências de assinaturas de seleção, envolvendo questões sensíveis ao funcionamento da maquinaria celular (como respiração e fotossíntese) e a características valoradas para a cultura (destacando-se a resistência a patógenos e a biossíntese da sacarose). Tais indícios fornecem subsídios à compreensão do genoma e ao melhoramento genético desse poliploide. / Sugarcane (Saccharum ssp.) is a valuable crop for food, fiber and energy production in Brazil, especially to the São Paulo State. With the advent of biotechnology, alternatives to breeding have enticed attention of the scientific community, with genome sequencing and characterization being crucial steps to these advances. Because sugarcane is polyploid, with frequent aneuploidy, it presents difficulties to the application of standard practices in genomics, such that it is advantageous to make use of next generation sequencing alternatives and resources from related species to more effectively elucidate the genome of this grass. Thus, an interesting contribution is the functional characterization of genetic polymorphisms from the Saccharum genus, aiding investigations related to genomics of complex polyploids, developing a resource to be used in the future by breeders. Our goal was to perform this characterization with genotypic data from individuals of the Brazilian Panel of Sugarcane Genotypes, obtained by genotyping-by-sequencing (GBS), using as reference the previously sequenced sorghum genome. We called the variants (mainly single nucleotide polymorphisms) with FreeBayes and annotated their functions and positions with SnpEff. We used population genetics statistics, such as the allele frequency, the McDonald & Kreitman Test and the pooled heterozygosity, to identify genomic regions potentially involved in evolutionary events. The results showed a loss of variability between bred genotypes in relation to the ancestors, with evidences of selective sweeps, involving regions related to the cellular machinery (such as respiration and photosynthesis) and specific crop traits (especially disease resistance and sucrose biosynthesis). These results support understanding of the genome and breeding efforts in this polyploid grass.
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Biologia da polinização, reprodução e genética de duas populações de Tibouchina pulchra Cogn. (Melastomataceae) em gradiente altitudinal no sudeste do Brasil / Pollination, reproductive biology and genetic of two populations of Tibouchina pulchra Cogn. (Melastomataceae) at altitudinal gradient in southeastern BrazilBrito, Vinícius Lourenço Garcia, 1985- 07 December 2010 (has links)
Orientador: Marlies Sazima / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-16T08:56:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2010 / Resumo: As montanhas apresentam alta diversidade e diferentes condições ambientais ao longo de curtas distâncias. Assim, as montanhas são ideais para estudos ecológicos e evolutivos que podem somar valores e aprimorar projetos de conservação. Em altitudes elevadas as condições ambientais podem reduzir a quantidade de polinizadores, principalmente de abelhas. Desta forma, em espécies estritamente melitófilas, características como a fenologia, o sistema reprodutivo, o fluxo de pólen e a estrutura genética das populações pode variar ao longo do gradiente, uma vez que a transferência de grãos de pólen aos estigmas co-específicos também varia ao longo do gradiente. No caso de áreas de elevada altitude, a transferência de pólen é limitada (limitação de pólen), reduzindo as possibilidades de polinização cruzada. O presente estudo tem por objetivo obter informações sobre a biologia da polinização, reprodução e genética de duas populações de Tibouchina pulchra (Melastomataceae) ocorrentes em duas áreas de gradiente altitudinal: Núcleo Santa Virgínia (NSV) e Núcleo de Desenvolvimento Picinguaba (NDP) do Parque Estadual da Serra do Mar. Foram feitas observações mensais para definir padrões e estratégias de floração, registrar dados sobre a biologia floral e reprodutiva, além de verificar a riqueza e abundância dos polinizadores e caracterizar as interações dessa espécie com as abelhas visitantes. Material genético de 44 indivíduos do NSV e 45 indivíduos do NDP foram coletados para o desenvolvimento e caracterização de 12 loco microssatélites polimórficos e estes foram utilizados para fazer análises de agrupamento, ordenação bayesiana e medidas de diversidade genética nas duas populações. Os aspectos da biologia reprodutiva são diferentes entre as duas áreas: na área elevada a florada é mais intensa, a produção de pólen é menor, há limitação na transferência de pólen, mas a fertilização de sementes provindas de polinização cruzada manual é maior. Na outra área são produzidos mais frutos e há maior riqueza e abundância de polinizadores. Ocorre diferenciação genética entre as populações, mas com uma interface de contato entre elas, além de menor diversidade genética na população da área elevada. Estes resultados indicam que a ausência de polinizadores na região de altitude elevada está associada a diferentes estratégias na biologia floral e reprodutiva para balancear a limitação de pólen. Além disso, diferentes dinâmicas de fluxo gênico mediado pelo pólen nas duas populações e as características de distribuição e reprodução podem influenciar a estrutura e a diversidade genética de Tibouchina pulchra ao longo da Serra do Mar / Abstract: Mountains have high diversity and many environmental conditions at short distances. Hence, they are an ideal place to develop ecological and evolutionary studies that can improve conservation projects. At high altitudes, the environmental conditions reduce pollinator abundance, mainly bees. Therefore, traits such as phenology, breeding system and genetic structure of plant populations pollinated by bees could vary in an altitudinal gradient, because pollen grain transference to co-specific flowers varies also. At high altitudes pollen transference is limited (pollen limitation) reducing cross-pollination. The main goal of the present study was to obtain information about pollination biology, breeding system and genetic structure of two populations of Tibouchina pulchra (Melastomataceae) that occur in two different areas of an altitudinal gradient: Núcleo Santa Virgínia (NSV) and Núcleo de Desenvolvimento Picinguaba (NDP) of Parque Estadual da Serra do Mar. Field work was done monthly to describe the flowering patterns and strategies, record floral and reproductive biology, verify pollinator diversity and characterize the interactions among this plant species and bee visitors. Genetic material was collected from 44 Tibouchina pulchra individuals of NSV and 45 individuals of NDP to developed and characterize 12 microsatellite polymorphic loci, which were used to analyze population's genetics by different methods. At the higher area the plants have greater flowering intensity, the flowers produce less pollen grains and the stigmas receive less pollen, but set more seeds after manual cross pollination than individuals at the lower area, where pollinator diversity is higher and plants produce more fruits. There is genetic differentiation, but also an interface contact between the two populations. The population at higher altitude has less genetic diversity than the one at lower altitude. The lack of pollinators at the higher area is associated with different floral and reproductive strategies to compensate pollen limitation. Moreover the genetic structure and diversity respond to different dynamics of pollen flow and the patterns of distribution and reproduction of Tibouchina pulchra at the altitudinal gradient of Serra do Mar / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Biologia Vegetal
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Estudos evolutivos em Myrtaceae : aspectos citotaxonomicos e filogeneticos em Myrteae, enfatizando Psidium e generos relacionadosCosta, Itayguara Ribeiro 13 August 2018 (has links)
Orientador: Eliana Regina Forni-Martins / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-13T10:03:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2009 / Resumo: Myrtaceae é considerada uma das mais importantes famílias em diversidade de espécies nos neotrópicos, principalmente ao longo da Mata Atlântica e do Cerrado, representando de 10 a 15% da diversidade destes biomas. Myrteae é a mais diversificada tribo (73 gêneros e 2375 espécies) da família. Em termos gerais, os representantes sul-americanos de Myrtaceae são considerados táxons complexos e estudos biossistemáticos são fundamentais para uma melhor delimitação taxonômica de suas espécies. Provavelmente, a dificuldade de identificação das mirtáceas brasileiras possa ser atribuída à especiação decorrente de hibridação e poliploidia, com aparecimento de tipos recombinantes com características intermediárias entre os taxa originais, sendo o fluxo gênico interrompido por diferenciação cromossômica, especialmente pela duplicação do número cromossômico. Este trabalho teve como objetivos principais contribuir para o conhecimento citotaxonômico / citogenético da família, bem como aprimorar a filogenia da tribo Myrteae, onde as relações entre os gêneros ainda são incertas, enfatizando Psidium e gêneros relacionados (grupo Pimenta). Em termos gerais, a poliploidia surgiu de maneira independente ao longo da diversificação das diferentes linhagens na família, ocorrendo em 16% das espécies com número cromossômico conhecido, além de ser observada uma redução drástica de números cromossômicos em relação à x = 11, chegando a x = 5 e x = 6 na tribo Chamelaucieae, clado que concentra metade dos registros poliplóides. Na tribo Myrteae, a ocorrência do número cromossômico x = 11 é quase constante, com exceção de 26% das espécies analisadas que são poliplóides. Eugenia e Psidium, dois dos principais gêneros de Myrteae nos neotrópicos e Decaspermum, essencialmente australasiano, registram a maioria das variações poliplóides da tribo, o que possivelmente tenha favorecido a colonização de novos habitats e ampliado a distribuição geográfica em relação aos demais gêneros da tribo. Do ponto de vista cariotípico, os cromossomos em Myrteae são pequenos (<2mm), porém é observado certo grau de assimetria nos cariótipos de espécies com de frutos carnosos quando comparadas com as de frutos secos, nas quais os cariótipos são altamente simétricos. Do ponto de vista molecular, a variação no número de sítios DNAr 45S forneceu subsídios para a diferenciação de espécies em alguns complexos de Psidium, bem como indicou a possível origem alopoliplóide em um par de citótipos de P. cattleianum, sendo este o primeiro trabalho desta natureza em Myrtaceae. O tamanho do genoma em Myrteae é pequeno e correspondeu diretamente ao nível de ploidia das espécies. Em Psidium, esta variação foi da ordem de 9x e os resultados obtidos para espécies do complexo P. grandifolium podem ser utilizados em discussões taxonômicas, além de fornecer indícios adicionais sobre a evolução alopoliplóide entre algumas populações de P. cattleianum. Estas abordagens são inéditas para representantes de Myrteae. A análise filogenética (94 espécies de 38 gêneros) confirmou o monofiletismo de Myrteae, bem como do gênero Psidium e suas relações de parentesco dentro do grupo Pimenta. O gênero-irmão de Psidium é Myrrhinium. São reconhecidos sete grupos informais: grupo Eugenia, grupo Myrceugenia, grupo Myrcia, grupo Myrteola, grupo Pimenta, grupo Plinia e grupo Australasiano. Futuramente, serão explorados os caracteres macromorfológicos e biogeográficos que sustentem uma nova proposta de classificação para os gêneros de Myrteae. / Abstract: Myrtaceae is one of the most diverse families in Neotropical region; principally belong to Mata Atlântica and Cerrado, reaching 10 to 15% of biodiversity of these biomes. Myrteae is the most generically tribe (73 genera and 2375 species) in this family. Generally, South-American taxa are considered a complex group and biosystematic studies are necessary to understand the taxonomic delimitation of their species. Probably, the identification difficulties of Brazilian Myrtaceae would be due to speciation by hybridization and polyploidy, appearing species with intermediate characters between parental taxa and the genetic flow blocked by chromosomal differentiation, principally by chromosome duplication. This work aims to contribute to Cytotaxonomical/Cytogenetical knowledge in Myrtaceae and to update the Myrteae phylogeny, where the relationships between some genera are unclear, emphasizing Psidium and related genera (Pimenta group). Polyploidy evolves independently belong to diverse lineages belong Myrtaceae, reaching 16% of species that the chromosome numbers are know, besides is observed a drastic reduction of chromosome numbers in relation to x = 11, reaching to x = 5 or x = 6 in the Chamelaucieae tribe, this tribe concentrates half of polyploid records in Myrtaceae. In Myrteae, the occurrence of chromosome number x = 11 is practically constant, exception to 26% of polyploid species. Eugenia and Psidium are two of the principal Neotropical genera of Myrteae and Decaspermum, an Australasian genus, presents the majority of polyploidy variations in Myrteae, that would explicate the widespread distribution and the new habitat colonization in relation to the others genera in Myrteae. The chromosome length are small (<2mm), wherever was observed asymmetric karyotypes in fleshy-fruited taxa against dry-fruited taxa whit higher symmetric karyotypes. The variation of DNAr 45S loci supplied additional parameters to species differentiation in some Psidium complexes and supplied indications about the possible allopolyploid origin in cytotypes of P. cattleianum, being this the first approach with molecular cytogenetic in Myrtaceae. The species of Myrteae presents a very small genome, and was observed a positive correlation with ploidy levels. In Psidium, the variation of genome size was 9x and the obtained results for P. grandifolium complex would be useful in taxonomic discussions besides supply additional characters about the allopolyploid origin in some populations of P. cattleainum. This approach also represents new records in Myrteae. The phylogenetic study (94 species and 38 genera) confirm that the tribe Myrteae and the genus Psidium are monophyletic. The sister group of Psidium is Myrrhinium. Seven informal clades are recognized: Eugenia group, Myrceugenia group, Myrcia group, Myrteola group, Pimenta group, Plinia group e Australasian group. In the future, we will to explore morphological and biogeographical characters that would be support a new classification of Myrteae. / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal
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Biossistematica das especies do complexo Anemopaegma arvense (Vell.) Stellf. ex de Souza (Bignoniaceae, Bignonieae) = aspectos anatomicos, citologicos, moleculares, morfologicos e reprodutivos / Biossystematics of the Anemopaegma arvense (Vell.) Stellf. ex de Souza complex (Bignoniaceae, Bignonieae) : anatomical, cytological, molecular, morphological and reproductive aspectsFiretti-Leggieri, Fabiana 15 August 2018 (has links)
Orientadores: João Semir, Lucia Garcez Lohmann / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-15T14:46:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2009 / Resumo: O complexo Anemopaegma arvense é constituído por espécies e variedades de difícil delimitação. As opiniões dos taxonomistas, baseadas em caracteres morfológicos, são controversas em considerálas uma única espécie altamente polimórfica ou separá-las. Com o intuito de auxiliar na circunscrição de tais táxons, realizou-se um estudo biossistemático que englobou os seguintes assuntos: morfologia e morfometria de caracteres vegetativos e reprodutivos, anatomia da lâmina foliolar, contagem cromossômica, aplicação de marcadores AFLP para a delimitação genética, fenologia, biologia floral e polinização, sistema reprodutivo e hibridação e, poliembrionia em espécies do gênero com distintos níveis de ploidia. As morfoespécies do complexo diferem principalmente na morfologia foliar, sendo os táxons de Anemopaegma acutifolium caracterizados por folíolos elípticos a estreitamente oblanceolados com razão comprimento/largura do folíolo 3,5 a 18,5, os de A. arvense por folíolos lineares a estreitamente oblanceolados (razão 22,2 a 45,5) e, A. glaucum por folíolos largamente oblanceolados, oblongos a obovados (razão entre 1,69 e 3,9). A partir de caracteres morfológicos, como crescimento indeterminado dos ramos, exclui-se A. scabriusculum do complexo. O estudo morfométrico de caracteres foliares se mostrou útil para a separação das espécies. Já a morfometria de caracteres reprodutivos não foi informativa para a delimitação de tais táxons. Anatomicamente, as espécies e morfoespécies do complexo diferem quanto à disposição dos estômatos, tipo de epiderme constituição do sistema vascular da nervura mediana e composição da bainha dos feixes vasculares das nervuras laterais. Dentre as morfoespécies de A. acutifolium, A. acutifolium "típica" difere das demais por possuir folíolos anfiestomáticos e A. acutifolium "sarmentosa" por apresentar epiderme da face adaxial com desdobramentos pontuais. Já A. arvense é caracterizada pela ausência de cordões floemáticos no sistema vascular da nervura mediana e por possuir a margem destituída de parênquima fundamental subepidérmico. As morfoespécies de A. glaucum, "típica" da Bahia e "não glauca", são diferenciadas das demais pela ausência de calotas de fibras sobre o xilema nas nervuras laterais de grande e médio calibre. A. scabriusculum difere das outras espécies por possuir extensão de bainha nos feixes vasculares de grande e médio calibre e estômatos agrupados nas regiões internervurais com câmaras subestomáticas unidas. A contagem cromossômica revelou a condição poliplóide das espécies e morfoespécies do complexo, tendo estas 2n = 80. Os marcadores AFLP, apesar de serem bastante utilizados para a separação de táxons em nível infra-específico, não se mostraram eficientes para a delimitação das espécies do complexo Anemopaegma arvense. Quanto ao comportamento fenológico, A. acutifolium, A. arvense e A. glaucum apresentaram eventos anuais de brotamento, floração e frutificação. Já os indivíduos de A. scabriusculum têm dois a três eventos de floração e frutificação por ano. As flores das espécies são bastante semelhantes quanto à morfologia e recursos produzidos e são polinizadas pelas mesmas espécies de abelhas. Através de polinizações controladas constatou-se que tais espécies são auto-compatíveis e interférteis, havendo, portanto, alta probabilidade de formação de híbridos em populações simpátricas destas espécies. Notou-se uma relação positiva entre poliploidia e poliembrionia nas espécies do gênero aqui abordadas, tendo as sementes das espécies poliplóides mais de um embrião e as da espécie diplóide, A. album, somente um embrião. / Abstract: Anemopaegma arvense complex is constituted by species and varieties of difficult delimiting. Taxonomists opinions based upon morphologic features are controversial as to considering them either an only highly polymorphic species or separating them into different taxa. In order to help with the circumscription of such taxa, a biosystematic study was conducted which included the following subjects: morphology and morphometry of vegetative and reproductive features, leaflet blade anatomy, chromosome counting, AFLP markers application for genetic delimitation, phenology , floral biology and pollination, reproductive system and hybridization and polyembryony of the genus species with different ploidy levels .The morphs of the complex differ mainly in leaf morphology where the Anemopaegma acutifolium taxa are characterized by elliptical leaflets with the lengh / width ratio of leaflet falling within the range 3,5 to 18,5; A. arvense characterized by linear leaflets to narrowly oblanceolate (ratio between 22,2 and 45,5) and, A. glaucum by leaflets broadly oblanceolate, from oblong to obovate (ratio between 1,69 and 3,9).Taking into account morphologic features such as undetermined growth of the branches, A. scabriusculum may be excluded off the complex. The morphometric study of the leaf features has been found useful for species separation. However, the morphometry of reproductive features were not informative enough for the delimitation of such taxa. Anatomically, the species and morphs of the complex differ from one another as to the stomata disposition, epidermis type, vascular system constitution of the midrib and, composition of the vascular bundle of the lateral veins. Among the A. acutifolium morphs, A. acutifolium "típica" differs from the others for possessing anphistomatic leaflets and, A. acutifolium "sarmentosa" for presenting the adaxial face epidermis with punctual unfoldings. As for A. arvense, it is characterized by the absence of phloematic strings in the midrib vascular system and parenchyma absent in the marginal region. As for the two morphs, A. glaucum "típica" of Bahia and "não glauca", they are differentiated from the others by the absence of fibers caps on the xilem on the lateral ribs of large and medium caliber. A. scabriusculum differs from the other species for possessing extension sheath in the vascular bundles of large and medium caliber and, stomata grouped between vascular bundles presenting substomatic cameras linked to one another. The chromosome counting revealed polyploidy condition of the species and the morphs of the complex, those presenting 2n = 80. The AFLP markers, in spite of being quite utilized for taxa separation in an infraspecific level, were not found efficient for the species delimitation of Anemopaegma arvense complex. With relation to the phenologic behavior, A. acutifolium, A. arvense and A. glaucum presented annual events of sprouting, blooming and fructification. However, A. scabriusculumindividuals presented two to three blooming and fructification events a year. The flowers of the species are very similar to one another as to their morphology and to the resources provided by them and are pollinated by the same species of bees. Through controlled pollinations, it could be verified, that such species are self- ompatible and inter fertile, bearing, therefore, high probability of hybrid formation in sympatric populations of those species. A positive relationship between polyploidy and polyembryony in the species of the genus studied here was observed, as well as the fact that more than one embryo were found for polyploidy species seeds whereas for diploid species, A. album, only one embryo has been registered. / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal
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Mapeamento de QTL em cana-de-açúcar (Saccharum spp.) utilizando marcadores DArt (diversity arrays technology) e microssatélites / QTL mapping in sugarcane (Saccharum spp.) using microsatellite and DArt (diversity arrays technology) markersNunes, Camila de Marillac Costa 30 April 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-04-30 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The first efforts in sugarcane breeding involved crosses between polyploid species, Saccharum spontaneum L. and Saccharum officinarum L.. These crosses produced interspecific hybrids that were successively backcrossed to S. officinarum. This strategy resulted in a considerable increase in the sugarcane genome complexity. Current varieties exhibit high levels of ploidy and heterozygosity, besides varying levels of aneuploidy. These properties make the understanding of sugarcane genome more difficult; and therefore present a challenge to the development of genetic studies with this culture. Among the different approaches to perform the genetic characterization of a species, the development of genetic maps is useful in providing information about its genomic structure. In this work, we report the first linkage maps for sugarcane using both DArT (Diversity Arrays Technology) and SSR (Single Sequence Repeat) markers. We identified markers significantly associated to characters involved in sugar production. Maps were obtained using two populations: one, consisting of 81 genotypes, was derived from the selfing of a single RB97327 plant; the other, consisting of 91 genotypes, was derived from the crossing RB97327 x RB72454. Genomic DNA was extracted from axillary buds. Genotypes for twenty pairs of SSR primers and 7680 DArT markers were identified. Using mendelian segregation analysis a total of 392 DArT and 57 SSR polymorphic markers, in the population of selfing, and 632 DArT and 79 SSR polymorphic markers, in the outcrossing population, were detected to be segregating as single-dose markers. Both maps were obtained using the OneMap software. Critical values for LOD-score of 3.5 and recombination fraction of 0.3 were chosen. In the map obtained with the selfing population, 449 polymorphic markers with 3:1 segregation were used to originate 95 linkage groups for the variety RB97327. This map had a total length of 1217.2 cM. The estimated size of the genome of RB97327 was 10540.9 cM, which suggests that the obtained coverage (11.5%) is still low. For the population derived from crossing, the 711 polymorphic markers with 3:1 and 1:1 segregation originated 136 linkage groups. The map showed a total length of 2722.2 cM. The SSR markers allowed the identification of six possible homeology groups for the female parent RB97327, and nine homeology groups for the integrated map. For each population, framework maps were produced which were then used to investigate putative associations between markers and characters involved in sugar production. QTL were found both using single marker analysis and composite interval mapping. In the population derived from selfing, using single marker analysis, 63 markers were significantly associated to six variables: number of internodes, number of stems per plant, stem length, stem diameter, stem weight and percentage of soluble solids (°Brix). Using composite interval
mapping, three QTL related to stem diameter, length of stem and °Brix were identified. In the population derived from the cross RB97327 x RB724554, using single marker analysis, 60 markers were significantly associated with the same six variables. Using composite interval mapping, two QTL related to diameter and length of stem were detected. / Os primeiros trabalhos de melhoramento genético em cana-de-açúcar envolveram cruzamentos entre espécies poliplóides, Saccharum spontaneum L. e Saccharum officinarum L., os quais originaram híbridos interespecíficos que foram sucessivamente retrocruzados com S. officinarum. Essa estratégia resultou em considerável aumento da complexidade do genoma, de modo que as variedades atuais apresentem elevados níveis de ploidia e heterozigose, além de aneuploidias. Tais características dificultam a compreensão do genoma da cana-de-açúcar e, consequentemente, representam um desafio para o desenvolvimento de estudos genéticos com esta cultura. Dentre os diferentes estudos de caracterização genética, o desenvolvimento de mapas genéticos é importante por fornecer informações acerca da estrutura do genoma de uma espécie. Neste trabalho foram obtidos os primeiros mapas de ligação para cana-de-açúcar utilizando marcadores DArT (Diversity Arrays Technology) e SSR (Single Sequence Repeat). Além disso, foram identificados marcadores significativamente associados aos caracteres envolvidos na produção de açúcar. Para a obtenção dos mapas foram utilizadas duas populações, sendo uma constituída por 81 genótipos derivados da autofecundação de uma planta da cultivar RB97327, e outra constituída por 91 genótipos oriundos do cruzamento RB97327 x RB72454. O DNA genômico foi extraído de gemas axilares. A genotipagem foi realizada a partir de vinte pares de primers SSR e 7.680 marcadores DArT. A análise de segregação mendeliana permitiu a distinção de 392 marcas DArT e 57 marcas SSR polimórficas na população de autofecundação, e 632 DArT e 79 marcas SSR polimórficas na população de fecundação cruzada, com segregação single-dose. Ambos os mapas foram obtidos através do software OneMap utilizando-se um valor crítico de LOD-score igual a 3,5 e de fração de recombinação igual a 0,3. No mapa associado à população de autofecundação, os 449 marcadores DArT e SSR polimórficos com segregação 3:1 foram utilizados para originar 95 grupos de ligação referentes à variedade RB97327. Esse mapa apresentou um comprimento total de 1.217,2 cM. O tamanho estimado do genoma de RB97327 foi de 10.540,9 cM, o que permite afirmar que o mapa obtido apresentou baixa cobertura (11,5%). Para a população derivada de cruzamento, os 711 marcadores DArT e SSR polimórficos com segregação 3:1 e 1:1 originaram 136 grupos de ligação e o mapa apresentou um comprimento total de 2.722,2 cM. Os marcadores SSR também possibilitaram a identificação de seis possíveis grupos de homeologia no mapa referente ao genitor feminino RB97327 e nove no mapa integrado. Para cada população, foram obtidos os mapas framework nos quais foram identificados marcadores DArT e SSR associados aos caracteres envolvidos na produção de açúcar. Em ambas as populações procedeu-se à identificação de QTL a partir de
análises de marcas simples e de mapeamento por intervalo composto. Na população derivada de autofecundação foram identificados, pela análise de marcas simples, 63 marcadores significativamente associados às seis variáveis avaliadas: número de entrenós, número de colmos por planta, comprimento de colmos, diâmetro de colmo, peso médio de colmo e teor de sólidos solúveis (brix). Pelo mapeamento por intervalo composto, três QTL relacionados a diâmetro de colmo, comprimento de colmo e brix foram identificados. Na população proveniente do cruzamento RB97327 x RB724554, foram identificados pela análise de marcas simples, 60 marcadores significativamente associados às seis variáveis. Pelo mapeamento por intervalo composto identificou-se dois QTL relacionados ao diâmetro e ao comprimento de colmo.
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Biologia reprodutiva em acessos de Lippia alba (Mill.) N.E. Brown (Verbenaceae)Campos, Victória Rabelo 22 February 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-02-22 / A biologia reprodutiva de uma espécie está intimamente relacionada com a base genética de uma população e constitui um dos principais fatores relacionados à dispersão e sucesso das angiospermas. Lippia alba (Verbenaceae) é conhecida por vários nomes populares como erva cidreira, falsa melissa e chá de tabuleiro, sendo amplamente utilizada na medicina popular, principalmente devido aos seus
componentes do óleo essencial. A espécie pode ser facilmente encontrada desde regiões tropicais até temperadas possuindo ampla plasticidade fenotípica. Estudos recentes indicam uma possível origem autopoliploide para a espécie, sendo encontrado indivíduos diploides (2n=30), aneuploides (2n=38), triploides (2n=45), tetraploides (2n=60) e hexaploide (2n=90). Apesar da importância, poucas
informações sobre o sistema reprodutivo da espécie estão disponíveis.O presente trabalho teve como objetivo estudar a estratégia reprodutiva da espécie a fim de melhor compreender a origem dos cinco citótipos descritos assim como auxiliar na elucidação da base genética da espécie. Inflorescências de 41 indivíduos foram isoladas no período de março de 2015 a dezembro de 2016. Foram comparados o
número de sementes produzidas entre inflorescências isoladas e não isoladas. Sementes recém coletadas de 20 acessos foram avaliadas quanto ao comprimento e largura. Em seguida, as sementes foram colocadas para germinar em placa de petri contendo papel filtro umedecido e submetidas a temperaturas que variaram de 18ºC-25ºC-40ºC (em ciclos de 24 horas). Para avaliação da quantidade de DNA, uma única semente por vez foi macerada em tampão Marie a 4°C. A solução obtida foi filtrada em malha de 30 μm e corada com iodeto de propídeo. Para genotipagem, extraiu-se o DNA de sementes oriundas de inflorescências isoladas, não isoladas e de folhas da planta-mãe de oito acessos que foram comparados utilizando oito primers de microssatélites. Para uma análise citohistológica do desenvolvimento de botões, amostras foram coletadas anteriormente à antese e foram fixadas em
solução de glutaraldeído por 24h. Análises morfológicas comparativas entre acessos diploide, triploide e tetraploide também foram realizadas, utilizando-se cinco medidas florais. Sementes oriundas de diploides apresentaram maior índice de germinação quando comparado àquelas oriundas dos poliploides. Sementes oriundas de inflorescências isoladas em geral não germinaram. O conjunto de resultados
permitiu concluir que Lippia alba possui um comportamento reprodutivo preferencialmente alogâmico, com comportamento diferenciado entre diploides e poliploides. As análises citohistológicas e citométricas não permitiram excluir a ocorrência de reprodução por apomixia. Os resultados sugerem que Lippia alba
possua vias alternativas de reprodução. / The reproductive biology of a species is closely related to the genetic basis of a population and is one of the main factors related to the dispersion and success of angiosperms. Lippia alba (Verbenaceae) is known by several common names as erva cidreira, falsa melissa, chá de tabuleiro, being widely used in folk medicine mainly due to its essential oil components. The species can be easily found from
tropical to temperate regions, having broad phenotypic plasticity. Recent studies indicate a possible autopoliploidy origin for the species having diploids (2n = 30), aneuploids (2n = 38), triploids (2n = 45), tetraploids (2n = 60) and hexaploid (2n = 90) individuals. Despite the importance of Lippia alba, little information about the species' reproductive system is available. The goal of the present work was to study the reproduction strategy of the species to better understand the origin of the five cytotypes as well as to help the elucidation of the genetic basis of the species. Inflorescences of forty-one individuals were isolated from March 2015 to December 2016. The number of produced seeds was compared between isolated and nonisolated inflorescences. Fresh seeds from 20 accessions were collected and the
measures of length and width were taken. Then the seeds were placed to germinate in petri dishes with moistened filter paper under temperatures ranging from 18°C-25°C-40°C (in 24 hour cycles). To estimate the DNA content, a single seed at a time was chopped in Marie nuclear extraction buffer at 4°C. The solution was filtered through a 30 μm filter and stained with propidium iodide. For genotyping, DNA was
extracted from seeds collected in isolated and non-isolated inflorescences. Leaves were used for DNA extraction of the mother plant of eight accessions that were compared using microsatellite primers. For a cytohistological analysis of the buds’ development, samples were collected before the anthesis and were fixed in glutaraldehyde solution for 24h. Comparative morphological analyzes between diploid, triploid and tetraploid accessions were also performed, using five floral measures. Seeds originating from diploids had a higher germination index when compared to those from the polyploids and the ones originated from isolated inflorescences generally did not germinate. The set of results allowed to conclude that Lippia alba has preferentially an allogamic reproductive behavior, being different between diploids and polyploids. The cytohistological and cytometric analyzes did not allow to exclude the occurrence of apomixis reproduction. The results suggest that Lippia alba has alternative ways of reproduction.
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