Made available in DSpace on 2014-06-12T15:53:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5105_1.pdf: 1249968 bytes, checksum: 7bb0ccd96815e88755b0c108dfde3dc1 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / No mundo investimento para o desenvolvimento de novos métodos de diagnóstico genético e de doenças infecciosas tem se tornado muito freqüente. Biossensores de DNA (genossensores) aparecem como uma nova e eficiente alternativa, com boa sensibilidade e baixo custo. Neste trabalho, o desenvolvimento de novos suportes alternativos para imobilização de ácidos nucléicos tem sido pesquisados com sucesso. A composição do grafite endurecido com polimercaptanas resultam em um suporte rígido, muito fácil de manipular, rápido endurecimento a temperatura ambiente e afinidade química com o DNA. Este suporte mostra um bom resultado da imobilização e na sensibilidade. Ao mesmo tempo foi mostrada uma nova metodologia de hibridização de probe de DNA com sua própria fita complementar, sem indicadores químicos ou métodos eletroquímicos. Uma fina camada de filme de quitosana foi preparada quimicamente e basificada com NaOH e foi usada para modificar um eletrodo de ouro a partir de um cristal de quartz microbalanceado (QCM). Este filme mostrou uma boa performance na imobilazação dos ácidos nucléicos, com uma melhor estabilidade de imobilização em comparação com ácidos nucléicos diretamente imobilizados sobre a superfície do eletrtodo (QCM). Biossensores piezoelétricos foram desenvolvidos para detecção de ácidos nucléicos de leucemia. Este aparelho mostrou uma boa performance sem modificação do eletrodo. Uma nova metodologia de hibridização via dry-adsorption em diferentes condições de temperatura mostrou excelente resultado 60°C. O biossensor LMC exibiu uma excelente especificidade quando se executou o ensaio de hibridização com diferentes seqüências de RNAs e ss-cDNA (E.coli). O biossensor LMC (QCM) é uma ferramenta satisfatória para o diagnóstico da LMC

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-06-07T17:45:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Maria Flávia Karoline dos Santos Garcia.pdf: 1685780 bytes, checksum: 23416b90ca35703dce73b3aaf4d94c5c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-07T17:45:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Maria Flávia Karoline dos Santos Garcia.pdf: 1685780 bytes, checksum: 23416b90ca35703dce73b3aaf4d94c5c (MD5) Previous issue date: 2015-08-07 / CAPES / Leishmaniose visceral é uma zoonose em crescente expansão no Brasil, causada pela Leishmania infantum chagasi, tendo o cão como principal reservatório em ambiente urbano, mantendo o ciclo de transmissão nesses locais. Esta enfermidade é transmitida pelo flebotomíneo Lutzomyia longipalpis. A síntese de novos materiais híbridos, como o nanocompósito de ouro e polianilina (PANI) tem permitido a obtenção de sistemas com propriedades físico-químicas destacadas. Estes compósito híbridos destacam-se porque são formados da junção de dois ou mais materiais de propriedades diferentes, formando um com melhores propriedades. A modificação da superfície do eletrodo com compósitos híbridos tem levado ao desenvolvimento de sensores eletroquímicos com extrema eficiência. O objetivo deste trabalho foi a avaliação voltamétrica e impedimétrica de um sistema nanoestruturado baseado em PANI-AuNps na presença de K3[Fe(CN)6/K4[Fe(CN)6] (1:1), 10 mM, como par redox, para o diagnóstico de Leishmania infantum. Posteriormente o sistema foi avaliado utilizando-se uma sequência primer específico para L. infantum podendo-se assim avaliar a hibridização da fita complementar. As etapas de modificação do eletrodo são observadas na Espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE) na faixa de frequência de 100 mHz a 100 KHz, através do aumento gradativo do diâmetro do semicírculo de Cole-Cole após a adição dos componentes do sistema. Portanto, foi observado um aumento da resistência de transferência de carga (RTC) devido à adsorção destes componentes. O processo de interação do primer-genoma da L. Infantum foi evidenciado através do aumento da RTC devido ao fenômeno de hibridização das fitas complementares, obtendo como resposta um baixo limite de detecção 0.01 pg mL-1.Como esperado, respostas similares foram observadas através da técnica de Voltametria cíclica (VC) na faixa de varredura -0,2V a 0,7V, onde o eletrodo de ouro mostra correntes de pico anódicas e catódicas bem definidas. Posteriormente, após adsorção do compósito PANIAuNps há redução das correntes, sendo mais expressa após adsorção do primer e do genoma. Além das análises de EIE e VC, utilizamos a MEV onde visualizamos os aspectos mais detalhados da modificação da superfície do sistema. Nossos resultados indicaram uma boa sensibilidade, e desta forma o sistema sensor desenvolvido neste trabalho é uma alternativa viável para a biodetecção de leishmaniose. / Visceral leishmaniasis is a zoonosis becoming increasingly widespread in Brazil, caused by Leishmania infantum chagasi, with the dog as the main reservoir in urban environment while maintaining the transmission cycle in these locations. This disease is transmitted by the sand fly Lutzomyia longipalpis. The synthesis of new hybrid materials such as polyaniline (PANI) associated with gold nanoparticles (AuNPs) has allowed the obtaining of systems with physicochemical properties highlighted. These hybrid composite is distinguished because they are formed from the joining of two or more different materials properties, forming with better properties. The electrode surface modification with hybrid composites has led to the development of electrochemical sensors with extreme efficiency. The objective of this work was the voltammetric evaluation and prevent metric of a nanostructured system based on PANI-AuNPs in the presence of K3 [Fe (CN) 6 K4 [Fe (CN) 6] (1: 1), 10 mM, as redox couple for the diagnosis of Leishmania infantum. Subsequently the system was carried out by using a sequence specific primer for L. infantum can be thus evaluate the complementary strand hybridization.The modification steps are observed in the electrode electrochemical impedance spectroscopy (EIS) in the frequency range of 100 mHz to 100 KHz, through the gradual increase of the Cole-Cole semicircle diameter after the addition of system components. Therefore, an increase in charge transfer resistance was observed (RTC) due to the adsorption of these components. The interaction primer-genome of L. infantum was evidenced by increasing the RTC due to the phenomenon of hybridization of complementary strands, obtaining as a reply lower detection limit of 0.01 pg ml-1.As expected, similar responses were observed by cyclic voltammetry technique (VC) in the scan range -0,2V to 0.7V, where the gold electrode shows peak currents anodic and cathodic well defined. Subsequently, after adsorption of the composite PANIAuNps no reduction in current, it is more expressed after adsorption of the primer and the genome. In addition to the analysis of EIS and VC, we use the SEM where we visualize the most detailed aspects of system surface modification. Our results indicated good sensitivity, and thus the sensor system developed in this work is a viable alternative for bio-detection Leishmaniasis.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-04-20T19:32:37Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Maria Isabela de Andrade Pereira.pdf: 9175398 bytes, checksum: 92b168d37c58440a15fb89c41612080c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-20T19:32:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Maria Isabela de Andrade Pereira.pdf: 9175398 bytes, checksum: 92b168d37c58440a15fb89c41612080c (MD5) Previous issue date: 2016-07-15 / FACEPE / A técnica de imagem por ressonância magnética (IRM) é uma poderosa ferramenta de diagnóstico, que apesar de discriminar tecidos saudáveis dos tumorais com boa definição anatômica, muitas vezes necessita de alta concentração de agentes de contraste (ACs) para se atingir a devida diferenciação. Além disso, investigações de eventos com especificidade química a nível celular são limitadas na IRM, as quais podem ser atingidas por técnicas de fluorescência. Devido a essas limitações, ACs nanoparticulados vêm sendo desenvolvidos a fim de aumentar a concentração local de ACs sem que haja aumento da dosagem para que se obtenha um melhor contraste nas imagens, bem como para associar modalidades complementares de imagem em uma só nanopartícula. Assim, o objetivo desse trabalho foi desenvolver um sistema bimodal nanoparticulado baseado na conjugação de quelatos contendo o íon paramagnético gadolínio [Gd (III)] a pontos quânticos, para aplicações em fluorescência e IRM, associando as vantagens de cada técnica a fim de suprir suas respectivas limitações. Preparamos os sistemas bimodais por meio da conjugação covalente entre as carboxilas dos QDs e carboxilas dos quelatos de Gd (III), sendo a etilenodiamina um mediador. Foram testadas diferentes proporções de QDs:quelatos de Gd (III), mas apenas os sistemas com 10, 20 e 30 quelatos por QDs permaneceram estáveis. Para comprovar as propriedades magnéticas dos sistemas, medidas de tempos de relaxação longitudinal (T1) dos núcleos dos prótons de hidrogênio presentes nas moléculas de água foram realizadas a 300 MHz e 25º C. De acordo com os dados relaxométricos, observou-se que todos os sistemas levaram a diminuições em T1, sendo o sistema com 30 quelatos o mais promissor com relaxividade de 535 mM-1.s-1 por QD e 103 mM-1.s-1 por íon Gd (III). Pelo ensaio com resazurina, as células mantiveram-se metabolicamente ativas após incubação com os sistemas bimodais, mostrando que os mesmos praticamente não induzem citotoxicidade. Além disso, os sistemas foram utilizados para marcação de células HeLa, demonstrando também ser potenciais sondas fluorescentes. Assim, os sistemas apresentaram-se como ferramentas promissoras para aquisição de imagens por fluorescência e ressonância magnética nuclear, podendo então ser aplicados para a compreensão de variados processos biológicos. / The magnetic resonance imaging technique (MRI) is a powerful diagnostic tool that can distinguish healthy from tumoral tissues with good anatomic resolution. However, MRI usually needs a high concentration of contrasts agents (CAs) to achieve the adequate differentiation. Moreover, investigations of events with biochemical specificity, at cellular and molecular levels, are limited in MRI, which can be achieved by fluorescence techniques. Due to these MRI’ limitations, nanoparticulate CAs have been developed in order not only to increase the local concentration of CAs, without increase the dosage aiming to obtain a better contrast in the images, but also to associate more than one imaging modalities into a single nanoparticle. Thus, the objective of this work was to develop a nanoparticulate bimodal system, based on the conjugation of chelates containing paramagnetic ions, namely gadolinium [Gd (III)], with quantum dots (QDs), for applications in fluorescence and MRI techniques, taking advantages of each other in order to supply their respective limitations. For this, bimodal nanosystems were prepared by covalent conjugation between carboxyl coated QDs and carboxyl Gd (III)-chelates by using the ethylenediamine as a mediator. Different proportions of QDs:Gd-chelates were tested, however only the systems with 10, 20 and 30 chelates per QD remained stable. In order to verify the magnetic properties of the systems, measurements of the nuclear longitudinal relaxation time (T1) of the proton water molecules were performed at 300 MHz and 298 K. According to relaxometric data, all nanosystems were able to decrease T1 values, being the system with 30 chelates the most promising, presenting a relaxivity of 535 mM-1.s-1 and 103 mM-1.s-1 per QD and per Gd (III) ion, respectively. By the resazurin assay, HeLa cells remained metabolically active after incubation with bimodal nanosystems, showing that QDs-[Gd (III)-chelates] practically do not induce cytotoxicity. Furthermore, bimodal nanosystems were able to label efficiently HeLa cells, demonstrating to be potential fluorescent probes. Thus, the QDs:Gd (III)-chelates nanosystems developed in this study can be considered as promising tools for acquiring images by fluorescence and magnetic resonance, in order to understand a variety of biological processes.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-11T22:42:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Antonio Fernando da Purificação Júnior.pdf: 2087937 bytes, checksum: e1ada69a4a283be1ebcf72e615345586 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-07-18T17:51:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Antonio Fernando da Purificação Júnior.pdf: 2087937 bytes, checksum: e1ada69a4a283be1ebcf72e615345586 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-18T17:51:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Antonio Fernando da Purificação Júnior.pdf: 2087937 bytes, checksum: e1ada69a4a283be1ebcf72e615345586 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / CNPQ / A dengue é uma importante doença de aspecto emergente e um grande desafio para a saúde pública mundial. No mercado, existe apenas uma vacina licenciada que não é totalmente eficaz na prevenção da doença. Também existem dificuldades para se expressar antígenos virais em sistemas procarióticos para uso no diagnóstico sorológico. O presente estudo, por meio da engenharia de proteínas, propõe moléculas alternativas de interesse diagnóstico e/ou vacinal para a dengue. Com o uso de ferramentas computacionais seguindo a estratégia “epitope-scaffolding”, elementos estruturais da NS1 de dengue (epitope) foram transplantados para a TOP7 (scaffold). Os genes sintéticos para as variantes dessa proteína, levando em consideração os 4 sorotipos de dengue, totalizando 4 proteínas recombinantes, foram otimizados, sintetizados comercialmente e clonados em vetor de expressão. As proteínas recombinantes tiveram sua expressão confirmada por ensaios de imunoblot e purificadas por cromatografia de afinidade, apresentando alto rendimento e solubilidade. Foram realizados ELISAs, com soros de pacientes infectados com DENV-3, para avaliação imunológica das proteínas quiméricas expressas. Os sinais detectados para as quimeras sugerem que elas são potencialmente imunogênicas. / Dengue is an important emerging disease and a major public health challenge worldwide. Currently, there is only one licensed vaccine that is not fully effective in preventing the disease. There are also difficulties in expressing viral antigens in prokaryotic systems for use in serological diagnosis. The present study, through the engineering of proteins, proposes alternative molecules to be employed in strategies for diagnostics and/or vaccines for dengue. With the use of computational tools following the epitope-scaffolding approach, structural elements of dengue NS1 (epitopes) were transplanted to the TOP7 protein (scaffold). Synthetic genes for 4 recombinant proteins, taking into account the 4 serotypes of dengue, were optimized, commercially synthesized and cloned into expression vector. The cells of Escherichia coli BL21 were transformed with the respective plasmid constructs. Proteins were confirmed by immunoblot assays and purified by affinity chromatography, exhibiting high yield and solubility. ELISAs, with sera from patients infected by DENV-3, were performed for the immunological evaluation of expressed chimeric proteins. Signals detected for the chimeras suggest that they are potentially immunogenic.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-29T21:52:28Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Juliana Mendes Brandão.pdf: 1401085 bytes, checksum: dc3794e2fd88d4879ae99e1271489212 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-10T23:03:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Juliana Mendes Brandão.pdf: 1401085 bytes, checksum: dc3794e2fd88d4879ae99e1271489212 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-10T23:03:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Juliana Mendes Brandão.pdf: 1401085 bytes, checksum: dc3794e2fd88d4879ae99e1271489212 (MD5) Previous issue date: 2017-03-14 / CAPES / Introdução: A imunohistoquímica (IHQ) é a técnica mais empregada para subtipagem molecular do câncer de mama. Embora suas análises sejam de grande utilidade, o método está sujeito à subjetividade e dependência de variáveis pré-analíticas. Assim, recursos mais precisos e concretos permitiriam maior aperfeiçoamento a esses ensaios. Estudos histoquímicos têm mostrado que alterações quantitativas e qualitativas são observadas em glicoconjugados da superfície celular durante o processo neoplásico. Biomoléculas conjugadas a marcadores luminescentes podem funcionar como sondas luminescentes possibilitando elevar a sensibilidade das análises. Objetivos: Este trabalho teve como objetivo conjugar marcadores luminescentes a lectinas e/ou anticorpos e propor como potenciais sondas luminescentes em histoquímica com lectinas e imunohistoquímica de tumores mamários. Metodologia: Conjugados de lectinas (Con A e UEA-I) com criptato de Eu³⁺ (Crip(Eu³⁺)), foram sintetizados, caracterizados através da atividade hemaglutinante (AH), dicroísmo circular (CD) e espectrofluorimetria; e avaliados como sondas luminescentes em histoquímica com lectinas (HqL) para tecidos mamários humanos normal e transformado (fibroadenoma, FIB e carcinoma ductal invasivo, CDI). Anticorpos anti-uPAR, anti-GP88 e anti-MUC1 foram conjugados ao éster de acridina (EA) e empregadas em imunohistoquímica para tecidos mamários com CDI e normal. Resultados: O conjugado UEA-I-Crip(Eu³⁺) preservou AH e manutenção da estrutura da lectina determinada por DC. Con A-Crip(Eu³⁺) apresentou redução da AH e alteração não significativa em DC. Após conjugação com as lectinas, o Crip(Eu³⁺) manteve sua capacidade de luminescência. A HqL com as sondas lectina-Crip(Eu³⁺) revelou diferenças de marcação entre os tecidos normal e transformados avaliados e equivalentes àquelas resultantes do uso de conjugados lectina-FITC (disponíveis comercialmente). A conjugação dos anticorpos (anti-uPAR, anti-MUC I e anti-GP88) com EA permitiu o reconhecimento de seus respectivos alvos possibilitando sua utilização na IHQ luminescente na qual anti-MUC1-EA demonstrou variação do perfil de expressão de MUC1 em tecido mamário normal e CDI expressa em URL (unidades relativas de luz). Conclusão: as sondas luminescentes, conjugados lectina-Crip(Eu³⁺) se apresentam como potenciais ferramentas na HqL agregando a vantagem de serem fotoestável. Na IHQ luminescente as sondas anticorpos-EA permitem a quantificação da marcação podendo ser aliada à análise ótica para diminuição da subjetividade no diagnóstico inerente a metodologias qualitativas. / Background: Immunohistochemistry (IHC) is the most commonly used technique for molecular subtyping of breast cancer. Although their analyzes are very useful, the method is subject to subjectivity and dependence of pre-analytical variables. Thus, more precise and specific resources would allow further improvement to these trials. Histochemical studies have shown that quantitative and qualitative changes are observed in cell surface glycoconjugates during neoplastic process. Biomolecules conjugated to luminescent markers can function as luminescent probes decreasing the subjectivity of tissue analysis and allowing its quantification. Objectives: This study aimed to conjugate, characterize, evaluate and aplly lectins and/or antibodies to luminescent markers as potential luminescent probes in lectin histochemistry (LHC) and immunohistochemistry of human mammary tissues. Methodology: Lectin (Ulex europeus agglutinin I, UEA-I and Canavalia ensiformis, Concanavalin A, Con A) and Eu³⁺ criptate conjugates were synthesized, characterized via haemaglutinating activity (HA), circular dicroism (CD) and spectrofluorimetry; and evaluated as luminescent probes in LHC to normal and transformed (fibroadenoma, FIB and invasive ductal carcinoma, IDC) human mammary tissues. Antibodies (anti-uPAR, anti-GP88 and anti-MUC I) were conjugated to Acridinum ester (AE) and used in IHC to normal and IDC human breast tissues. Results: UEA-I-Crip(Eu³⁺) conjugate preserved its HÁ and the lectin structure determined via CD while Con A-Crip(Eu³⁺) presented a decrease in the HA and small change in lectin structure. Both conjugates kept their luminescence. LHC with these probes showed different emissions among breast tissues evaluated (normal and with FIB and IDC) and they were equivalent to the results using the same lectins conjugated to FITC (commercially available). Antibodies (anti-uPAR, anti-MUC I and anti-GP88) conjugated to AE allowed the recognition of their respective targets enabling their use in the luminescent IHC in which anti-MUC1-EA demonstred variation in MUC1 expression profile between normal and IDC breast tissues, expressed in relative light units (RLU). Conclusions: Lectins-Crip(Eu³⁺) probes showed to be potential tools in LHC with the advantage of photostability. Luminescent IHC with antibodies-AE probes allowed to quantify the different staining being an allied to the optical analysis since decreases the subjectivity in the diagnostic and prognostic using qualitative methods.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-31T21:16:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Wilson José de Miranda Lima.pdf: 839089 bytes, checksum: 7ce868ac5c26c121ff05d44de3d49198 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-12T19:12:37Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Wilson José de Miranda Lima.pdf: 839089 bytes, checksum: 7ce868ac5c26c121ff05d44de3d49198 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-12T19:12:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Wilson José de Miranda Lima.pdf: 839089 bytes, checksum: 7ce868ac5c26c121ff05d44de3d49198 (MD5) Previous issue date: 2017-07-20 / Carcinoma ductal in situ (CDIS) é uma proliferação de células epiteliais malignas confinadas dentro da membrana basal dos ductos mamários. O estroma tumoral tornou-se um importante tema de investigação na pesquisa do câncer para o entendimento da biologia da doença ecompotencial prognóstico. Estetrabalho objetivou caracterizar o estroma tumoral do CDIS mamário humano por meio da análise da expressão de carboidratos, galectinas e receptores hormonais.Foram analisadas amostras marcadas com as lectinas Concanavalina A (Con A) e Ulex europaeus agglutinin (UEA-I) para identificação dos seguintesbiomarcadores sacarídicosmetil-α-D-manose e α-L-fucose, respectivamente. Também foram analisadas amostras marcadas por imunohistoquímica contra receptores de estrógeno (RE) e progesterona (RP) e Galectinas 1 e 3. Para análise das amostras, utilizou-se o critério de cruzes e posteriormente foi feita comparação com os dados clínico-patológicos (idade, tamanho tumoral, expressão deRE e RP). Para análise dos dados foiutilizado o programa Stata 14 na função de proporção logit. De um total de 62 casos de CDIS, 17 atenderam aos critérios de inclusão do estudo.Onze amostras (64,7%) foram positivas para metil-α-D-manose e 4 (23,6%) para o α-L-fucose. Treze amostras (76,4%) foram positivas para Galectina-1 enove amostras (52,9%) para a Galectina-3. Na maioria dos casos(54,4%), o estroma foi classificado como desmoplásico, seguido por um caráter inflamatório (45,5%). Os dados obtidos pela correlação logit não apresentaram resultados significativos. Não foi possível identificar nenhuma relação entre a expressão estromal dos carboidratos avaliados (metil-α-D-manose e α-L-fucose) e das Galectinas 1 e 3 e os dados clínico patológicos dos pacientes. A ampliação do estudo quanto ao universo amostral e possibilidade de acompanhamento das pacientes são cruciais para um aprofundamento de relação/influência do estroma incialmente como ambiente não-transformado no processo carcinogênico, seu desenvolvimento e modificação e resposta terapêutica. Ajudando e possibilitando a identificação dos fatores com ou sem influência direta ou indireta na progressão deste subtipo de câncer de mama. / Ductal carcinoma in situ (DCIS) is a proliferation of malignant epithelial cells confined inside a basal membrane of the mammary ducts. Tumor stroma has become an important theme of interest in cancer research and potential prognosis. The aim of this study was to characterize tumor stroma of human mammary DCIS by analyzing the expression of carbohydrates and hormone receptors. We analyzed samples stained with the lectins: Concanavalin A (Con A) and Ulex europaeus agglutinin (UEA-I) in order to identify the following saccharidic biomarkers methyl-α-D-manose and α-L-fucose. We still analyzed samples stained by immunohistochemistry againstestrogen receptors (ER) and progesterone receptors (PR) and Galectins 1 and 3. We used the cross-based classification criterion and, posteriorly, it was made a comparison with the clinical-pathological data (age, tumor size, ER and PR positivity). The Stata 14 program was used in the logit proportion function of data. From a total of 62 DCIS cases, 17 were included inthe study.Eleven samples (64.7%) were positive for methyl-α-D-manose and 4 (23.6%) for α-L-fucose. Thirteen samples (76.4%) were positive for Galectin-1 and nine (52.9%) for Galectin-3. In mostof the cases (54.4%), stroma was classified as desmoplastic, followed by an inflammatory character (45.5%). Data obtained by logit co-relation did not present significant results. It was not possible to identify any relationship between the stromal expression of the evaluated carbohydrates (methyl-α-D-manoseand α-L-fucose) and Galectins 1 and 3 with patients clinical-pathological data. The study amplification regarding sample universe and possibility of following-up the patients are crucial for a depth relationship/influence of the stroma as a non-transformed environment in the carcinogenic process, its development and therapeutic response. Helping and enabling the identification of factors with or without, direct or indirect, influence on the progression of this breast cancer subtype.

Made available in DSpace on 2018-08-01T22:56:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_6608_DISSERTAÇÃO MARCEL ARCANJO20131018-84839.pdf: 862453 bytes, checksum: 1cbc6891e31991924d8c8b03ad3aae67 (MD5) Previous issue date: 2013-07-31 / A hematúria enzoótica bovina (HEB) é uma doença crônica causada por Pteridium aquilinum e caracteriza-se pela formação de lesões neoplásicas e não neoplásicas na bexiga dos animais acometidos e não possui tratamento específico. Na região sul do Espírito Santo esta doença possui elevada prevalência e é responsável por grandes perdas econômicas em bovinos leiteiros, decorrentes do diagnóstico tardio da enfermidade. A citologia associada ao uso de biomarcadores poderia auxiliar no diagnóstico precoce desta doença. Objetivou-se avaliar lesões de bexigas de bovinos associadas à hematúria enzoótica por meio das técnicas citopatológica, imunocitoquímica e ensaio do cometa, visando o diagnóstico precoce de danos celulares provocados pela doença. O estudo foi dividido em dois experimentos. No experimento 1, para padronizar a técnica de colheita, obtenção de amostras e realizar a avaliação citopatológica do lavado vesical de bovinos com HEB, utilizaram-se 10 bovinos, fêmeas, adultas, divididos em dois grupos. No grupo A foi recuperado todo o líquido vesical infundido e, no grupo B, apenas o último aspirado foi recuperado. No experimento 2, as células obtidas pelo lavado vesical de bovinos, foram avaliadas por meio da imunocitoquímica com anti-p53 e ensaio do cometa e utilizaram-se, 10 bovinos, fêmeas, adultas, sendo cinco com HEB e cinco sadias. O material foi fixado e submetido aos testes citopatológicos, imunocitoquímicos e ensaio do cometa e avaliado microscopicamente. Os dados obtidos foram analisados por estatística descritiva, análise de variância e teste não paramétrico de Kolmogorov-Smirnov. Em relação à quantidade de células inflamatórias e células epiteliais obtidas por amostra revelou que nos dois grupos do experimento 1, todos os animais apresentavam mais células inflamatórias do que epiteliais, porém, não houve diferença entre o tipo de colheita realizada. As células epiteliais foram encontradas em 60% dos casos e as alterações morfológicas observadas foram discretas não sendo possível classificar nenhuma amostra como hiperplásica ou neoplásica. No experimento 2, observou-se positividade da imunomarcação da p53 em apenas 20% das amostras, sendo uma de animal sadio e outra de animal com 9 HEB. O teste do cometa revelou que tanto nas amostras de animais sadios quanto nas de animais positivos para HEB não se observou a migração de fragmentos nucleares. Os dados deste estudo permitiram concluir que o exame citopatológico do lavado vesical de bovinos pode auxiliar no diagnóstico da HEB e que os dois métodos de colheita empregados mostraram-se adequados para obtenção de amostras viáveis. A avaliação citopatológica permitiu a identificação de lesões não neoplásicas predominantemente inflamatórias e a técnica de imunocitoquímica com a expressão de p53 bem como o teste do cometa não revelaram danos celulares importantes visto que os animais utilizados no experimento não apresentavam lesões neoplásicas.

Made available in DSpace on 2018-08-01T22:56:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_7236_Fernada Adami.pdf: 1615076 bytes, checksum: 67c9a71f25ae12d380b6f2f4b2843221 (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / Devido ao crescimento da ovinocultura e o aumento da demanda em relação aos seus produtos, há a necessidade de se investir na sanidade desses animais. Com isso, torna-se imprescindível a utilização de meios diagnósticos para afecções metabólicas, principalmente a toxemia da prenhez. Esta pesquisa tem como objetivo validar a técnica diagnóstica em fita reagente para &#946;-hidroxibutirato (BHB) em glicosímetro portátil humano em ovelhas da raça Dorper e White Dorper. Foram utilizadas 111 ovelhas hígidas, 79 da raça Dorper e 32 White Dorper, em diferentes fases produtivas, sendo elas vazias (n=44), gestantes (n= 37) e recém-paridas (n= 30). A coleta de sangue foi realizada por punção da veia jugular, com sistema de coleta a vácuo, em tubo sem anticoagulante. Instantaneamente, foi realizada a determinação do &#946;-hidroxibutirato pelo método da fita reagente utilizando-se o glicosímetro portátil e a determinação do &#946;-hidroxibutirato no soro foi realizada em analisador bioquímico automático. A análise estatística foi realizada, mediante o teste de Kolmogorov-Smirnov (p<0,05), verificou-se a distribuição não paramétrica dos dados,sendo eles arranjados de maneira pareada, ao qual o mesmo indivíduo era analisado pelas duas técnicas, foi escolhido o teste de McNemar para a verificação da hipótese de diferença entre os testes. Além disso, foi realizado o cálculo do coeficiente Kappa (IC 95%) para verificar a reprodutibilidade dos testes, associado aos cálculos de sensibilidade e especificidade, considerando o teste laboratorial como padrão ouro. Não houve diferença estatística significativa entre os resultados da fita reagente para corpos cetônicos e da análise bioquímica em laboratório, considerando o total de 111 animais. Nesta análise, a estatística resultou em um índice Kappa de 85%, com sensibilidade da fita reagente de 93% e especificidade de 96%. Na classificação recém-parida, o teste McNemar (p= 0,3173) com IC 95% demonstrou haver um coeficiente Kappa 80,6%, com 93% de sensibilidade e 87% de especificidade. As ovelhas recém-paridas, nesta categoria de grupos, possuem resultados pareados e, desta forma apresentou um coeficiente Kappa de 80,6%, com 93% de sensibilidade e 87% de especificidade. O teste da fita reagente para &#946;-hidroxibutirato em glicosímetro portátil humano foi considerado excelente e confiável, podendo ser utilizado como recurso diagnóstico em ovinos.

Orientador: Carlos Alberto Petta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T10:48:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Matos_AlessandraMachadode_M.pdf: 3642901 bytes, checksum: cc65700f6b838531f70a8362dda17d40 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Introdução: Apesar de muitosestudos mostraremque o tempo para o diagnóstico da endometriose é longo e ocorrer principalmente devido à demora do médico em indicar o procedimento diagnóstico, até os dias atuais as pesquisas têm sido realizadas apenas com enfoque nas pacientes. Objetivo: descrever a conduta utilizada pelos tocoginecologistas membros da Sociedade de Obstetrícia e Ginecologia do Estado de São Paulo (SOGESP) para estabelecer o diagnóstico de endometriose em mulheres inférteis e/ou com dismenorréia e/ou com dor pélvica crônica. Sujeitos e Métodos: Estudo tipo corte transversal, com uso de questionários auto-administrados enviados a todos os filiados à SOGESP. Resultados-: Foram recebidas 1.660 respostas (31,8%). A análise por regressão logística multivariada mostrou que acreditar que a endometriose pode se apresentar em todas as faixas etárias foi uma variável significativamente associada com a do,profissional suspeitar de endometriose em menos de 12 meses nos casos de queixas de infertilidade(OR = 1,81, 95% IC 1,01-3,22),dismenorréia (OR = 2,16, 95% IC 1,18-3,93) e DPC (OR=2,17, 95% IC 1,17-4,00). Houve significância também na variável participar de cursos ou congressos com temas de endoscopia ginecológica e endometriose nos casos de dismenorréia (OR = 1,33, 95% IC 1,05-1,69) e DPC (OR=1,51, 95% IC 1,19-1,91). Conclusões: Este estudo sugere que os ginecologistas que suspeitam de endometriose mais precocemente são os mais informados; logo, deveríamos investir em educação profissional / Abstract: Introduction: Despite several studies have shown that the delay in diagnosis of endometriosis is long and it occurs mostly due to the physician retard in indicating a diagnostic procedure, until these days surveys have been conducted only with patients. Objective: To describe the current attitude utilized by gynaecologists from SOGESP (Sao Paulo State Obstetrics and Gynaecologists Association) to establish the diagnosis of endometriosisin woman with infertility,dysmenorrhoea and/or chronic pelvic pain. Subjects and Methods: A cross-sectional study, in which a questionnaire was sent to ali gynaecologists members of SOGESP. Results: A total of 1660 replieswere received(31,8%). Multiple logistic regression analysis showed that physicians who stated that endometriosis can affect women at ali age ranges was the variable significantly associated with suspicion of endometriosis in less than 12 months in case of ali complaints: infertility (OR = 1.81, 95,% CI1.01-3.22), dysmenorrhoea (OR = 2.16,95% CI1.18-3.93) and chronic pelvic pain (CPP) (OR = 2.17,95% CI 1.17-4.00). This time to diagnosis was also lower in those who participate in congressesand attend talks on Endoscopic Gynaecology and Endometriosis, when the complaint is dysmenorrhoea (OR =1.33, 95% CI1.05-1.69) and CPP (OR =1.51, 95% CI1.19-1.91). Conclusions: Our study sugests that gynaecologists that suspect earlier about endometriosis are those wich are the more informed ones, so we should stimulate professional education / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia

Orientador: Alael de Paiva Lino / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-23T01:36:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Garducci_MarceloGomes_D.pdf: 2103247 bytes, checksum: 781e326b9046eaf6d9b2cdeaeab35077 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Com o objetivo de verificar a validade dos recursos de diagnóstico das estruturas ósseas de suporte e sustentação de incisivos laterais permanentes superiores, ectopicamente posicionados por palatino, e correlacionar o possível comprometimento ósseo destes dentes com interferências oclusais e as inclinações das coroas, foram selecionados 26 pacientes de ambos os sexos, com idades entre 11 anos e 01 mês e 18 anos e 04 meses. Avaliaram-se 37 dentes pelos métodos radiográfico, sondagem periodontal e cirúrgico, sendo que este último permitia a visualização direta do osso de suporte. Concluiu-se que, o exame radiográficoperiapical e a sondagem periodontal são insuficientes para a adequada avaliação das estruturas ósseas de suporte; a avaliação cirúrgica mostrou-se um método seguro para a análise das estruturas ósseas de suporte; a inclinação para vestibular apresentou médias com valores numéricos maiores do comprometimento ósseo quando comparada à inclinação lingual, sem diferenças estatisticamente significantes entre as faces analisadas; as médias do comprometimento ósseo foram significantes para os indivíduos com interferência oclusal dos dentes avaliados, sem diferenças estatisticamente significantes entre as faces estudadas / Abstract: The efficiency of the diagnostic resources for bony structures of permanent maxillar lateral incisors, ectopically palatally positioned, were evaluated in this research. The correlation between crown tipping, occlusal interferences and bone eompromise was also studied. Twenty six patients, both sexes, with ages varying from 11 years and 1 month and 18 years and 4 months were seleeted. Thirty seven perm?lnent maxillar lateral ineisors were evaluated through radiographie exam, pocket probing and surgical method, the last permitting direct view of the support bone. It was concluded that periapical radiography and poeket probing were inadequate for evaluation of bony structures. The surgical proeedure has been shown to be a safe method for evaluation of the bony struetures of eetopieally positioned teeth. The teeth labially tipped presented the highest average of bone compromise when eompared to the teeth palatally tipped, but no signifieance was found among the averages of the analysed faces. There was significant bone eompromise average for evaluated teeth with oeelusal interferences, but there was no significance difference among the studied faces / Doutorado / Ortodontia / Doutor em Ciências