RESUMO Esmalte e dentina são substratos dentários simultaneamente presentes na maioria das cavidades preparadas para restaurações adesivas, mas não há estudos sobre a morfologia regional das interfaces de união em uma mesma cavidade. Adesivos autocondicionantes incorporam a smear layer na camada híbrida e, conseqüentemente, as bactérias que porventura estejam presentes nela. Recentemente surgiu um adesivo autocondicionante com propriedades antibacterianas, conferidas pela adição de MDPB ao primer, mas ainda há poucas pesquisas sobre a morfologia da interface de união produzida por este material. Este estudo teve por objetivo analisar a morfologia de interfaces de união em diferentes regiões de cavidades MOD, através de microscopia eletrônica de varredura - MEV, em casos com adesivos autocondicionantes com ou sem MDPB. Como controle, foram usados dois adesivos de frasco único, cuja morfologia está amplamente descrita na literatura. Foram preparadas dezesseis cavidades Classe II em terceiros molares humanos hígidos, que foram restauradas com Z250 e um dos seguintes sistemas adesivos, aplicados segundo instruções dos fabricantes: ABF, Clearfil SE Bond, Single Bond e Prime & Bond NT. Após vinte e quatro horas de armazenamento em água destilada a 37ºC, os dentes restaurados foram seccionados em três planos de corte e preparados para análise em MEV, segundo o protocolo descrito por Montes et al. (2001). Também foram preparadas réplicas dos espécimes em resina epóxica. A morfologia das interfaces de união apresentou diferenças dependendo da região observada e também do tipo de sistema adesivo. A presença de MDPB não alterou a morfologia da interface de união dos adesivos autocondicionantes. A morfologia das interfaces de união em esmalte revelou perfeita adaptação ao substrato para todos os produtos estudados. / ABSTRACT Enamel and dentin are dental substrates simultaneously present in most cavity preparations for bonded restorations. Yet, no study can be found regarding the regional morphology of bonding interfaces present in a same cavity. Self-etching adhesive systems incorporate the smear layer into the formed hybrid layer, and consequently bacteria that might be present. Recently a self-etching system with antibacterial properties provided by the addition of MDPB was introduced in the market, but there is still little research on the interfacial morphology obtained with this material. This study aimed at analyzing the interfacial morphology in different areas of MOD cavities prepared using adhesive systems either with or without MDPB, by means of Scanning Electron Microscopy – SEM. Two single bottle adhesive systems whose morphology is widely described in the literature were used as control groups. Sixteen class II cavities were cut in sound human molars and restores using Z250 resin composite and one of the following adhesive systems, applied strictly according to the manufacturers’ instructions: ABF, Clearfil SE Bond, Single Bond and Prime & Bond NT. After 24-hour storage in distilled water at 37ºC, the teeth were sectioned in three directions and prepared for SEM analysis according to the protocol described by Montes et al. (2001). Replicas were also obtained from each specimen using epoxy resin. The interfacial morphology showed differences depending on the observed area, and also on the adhesive system. The presence of MDPB did not alter the interfacial morphology of the bonded interfaces obtained with self-etching adhesive systems. Bonded interfaces in enamel revealed perfect adaptation for all studied materials.

A qualidade final do preparo do canal destaca-se, dentre outras condições, pela ausência de magma dentinário e pelo aumento da permeabilidade dentinária, de modo a permitir pela primeira, a falta de substrato para desenvolvimento de microbiota e melhor adaptação do material obturador e, pelo segundo a possibilidade de alcançar na maior profundidade do túbulo dentinário as sujidades ali eventualmente presentes e fazer com que a medicação intracanal atue plenamente no sistema endodôntico. Metodologias experimentais de avaliação dessas qualidades aferem isoladamente cada uma delas dificultando a percepção de que a interação de ambas poderia permitir compreender o seu real papel no êxito da terapia endodôntica. O objetivo deste estudo consistiu-se em criar um procedimento capaz de, no mesmo espécime dental, avaliar a presença de magma e o quanto de permeabilidade dentinária radicular se alcança após o preparo químico-cirúrgico e a irrigação-aspiração final com diferentes irrigantes. Quarenta dentes unirradiculares humanos foram preparados com instrumentos rotatórios e Endo-PTC + NaOCl a 1% e divididos em quatro grupos (n=10) no momento da irrigação-aspiração final de acordo com o irrigante a ser empregado: G I (controle) - NaOCl a 1%; G II - EDTA a 17%; G III - EDTA-T a 17% e G IV - MTAD®. Os canais foram preenchidos com azul de metileno a 0,5% e mantidos em frascos por 48 h. Decorrido este tempo, as coroas foram removidas e as raízes foram clivadas no sentido transversal obtendose fragmentos do terço cervical, médio e apical. Os espécimes foram fotografados e analisados no programa ImageLab quanto à penetração do corante. Após esta análise, os fragmentos foram novamente clivados no sentido longitudinal e preparados para MEV. As eletromicrografias foram analisadas por três diferentes avaliadores e qualificadas por escores. As substâncias irrigadoras utilizadas, quando comparadas entre si, tiveram efeitos semelhantes sobre a permeabilidade dentinária, considerando as raízes por inteiras e pelos seus terços. Na avaliação individual das substâncias irrigadoras, as diferenças de permeabilidade entre os terços radiculares não foram estatisticamente significantes, exceto para o EDTA-T cujo terço apical teve menor penetração do corante. Quando a substância irrigadora com ação quelante/desmineralizante foi empregada para irrigação-aspiração final do canal radicular, o magma dentinário foi eficientemente removido enquanto a irrigação somente com NaOCl não foi suficiente para remover o magma. Os três terços do canal radicular apresentaram o mesmo grau de limpeza das paredes da dentina radicular, exceto para o EDTA-T, cujo terço apical apresentou maior quantidade de magma quando comparado aos terços cervical e médio. A vinculação dos resultados estatísticos da permeabilidade dentinária com a remoção do magma dentinário não mostrou a mesma relação uniforme para as substâncias irrigadoras avaliadas, quer na sua totalidade quer nos seus terços, deduzindo-se que maior ou menor permeabilidade necessariamente não corresponde a menor ou maior presença de magma dentinário. As análises da permeabilidade dentinária e da remoção do magma dentinário, com aplicação inicial do corante seguido de processamento para MEV, mostraram-se viáveis nos mesmos espécimes radiculares. / After root canal preparation and removal of smear layer, penetration of intracanal dressing deep in dentinal tubules to reduce microbial growth is enhanced. Removal of smear layer also permits a more effective cleaning of organic tissue and bacteria from within the dentinal tubules and allows a better adaptation of obturation material along root canal walls. Other studies have evaluated smear layer removal and dentinal permeability in isolation on different specimens, making it difficult to interpret the interaction between smear layer and dentin permeability and their real roles in root canal treatment. The aim of this study was to create a procedure to evaluate the presence of smear layer and what its influence is on root dentin permeability after chemomechanical root canal preparation and final irrigation-aspiration with different chemicals using the same specimen. Forty single root human teeth were instrumented with rotary instruments and Endo-PTC + 1% NaOCl and ramdomly divided into four groups (n=10) at the final rinse step, according to the irrigant used: G I (control) - 1% NaOCl; G II - 17% EDTA; G III - 17% EDTA-T and G IV - MTAD®. The root canals were filled with 0.5% methylene blue and maintained in bottles for 48 h. After this time, the crowns were cut off and the roots were transversally split resulting in three fragments: coronal, middle and apical. The specimens were analyzed using ImageLab software to evaluate dye penetration. After this analysis, the fragments were then axially split and prepared for SEM. The photomicrographs were analyzed by three different evaluators and qualified by scores. When the whole roots were analyzed and the irrigants used were compared among themselves, the same effect on dentin permeability was observed. Individual evaluation of the irrigants showed, the differences in the permeability levels for all 3 root canal thirds were not statistically significant, except for the apical third of the EDTA-T irrigation group which exhibited less dye penetration. When a decalcifying irrigant was used for final rinse, the smear layer was efficiently removed. In contrast a final rinse with NaOCl was not enough to remove this layer. In all irrigation experimental groups the three different thirds of the root canals showed the same amount of smear layer removal, except for the EDTA-T group, which exhibited higher amounts of smear layer removal in the apical third compared to coronal and middle thirds. The results of both studies (dentin permeability and smear layer removal) did not show an even relationship for the irrigants evaluated, neither on their smear layer in the entire canal nor was it observed in each root canal thirds evaluated. This inferres that higher or lower dentinal permeability does not necessarily correspond to a higher or lower amount of smear layer presence. The Pearson correlation test supports these statements. The analysis of dentin permeability with initial introduction of a dye followed by the smear layer removal analysis under SEM, was shown to be a feasible procedure using the same root specimen.

As alterações morfológicas do envelhecimento normal do disco intervertebral confundem-se com as patológicas. O objetivo deste estudo foi elaborar um perfil destas alterações. Discos intervertebrais cervicais e lombares foram coletados de 30 indivíduos assintomáticos: 15 jovens e 15 idosos. A morfologia foi analisada por macroscopia, ressonância magnética, histologia, microscopia eletrônica de varredura (MEV) e imuno-histoquímica para os colágenos de tipo I, II, III, IV, V, VI, IX e X. Alterações degenerativas foram mais acentuadas nos discos de idosos. O anel fibroso possui lamelas oblíquas que se adensam com o envelhecimento. A análise histológica não revela um núcleo distinto em nível cervical, porém a MEV o demonstra. As fibras colágenas sofreram intenso remodelamento e formam um padrão único para cada segmento. Alterações em nível cervical são semelhantes às lombares com algumas peculiaridades: substituição cartilagínea é comum. Muitas das técnicas rotineiras de avaliação não conseguem detectar as alterações discais ultraestruturais únicas de cada segmento. / The morphological alterations of normal aging in the intervertebral disc are frequently mistaken for those considered to be pathologic. Our aim is to elaborate a morphological profile of these alterations. Human cervical and lumbar intervertebral discs were harvested from 15 young (<35 years old) and 15 elderly (>65 years old) asymptomatic individuals. Their morphology was studied utilizing macroscopic technique, magnetic resonance, histology, scanning electron microscopy (SEM) and immunohistochemistry against types I, II, III, IV, V, Vi, IX and X collagens. Degenerative changes were more evident in discs of elderly individuals but even young discs displayed significant degeneration. The annulus is composed of oblique lamellae that get denser as they age. Histology frequently did not reveal a distinct nucleus in the cervical segment but SEM did. Collagen fibers form a pattern unique to each segment. Alterations in cervical discs are similar to those in lumbar specimens but include peculiarities. Several alterations could not be detected by MR or normal histology.

O objetivo do estudo foi avaliar o efeito de adesivos autocondicionantes com diferentes pHs aplicados em camadas de esfregaço (CE) fina e espessa na sua resistência de união (RU), adaptação marginal (AM) e micromorfologia. Foram utilizados 47 molares (n=5). A dentina oclusal foi exposta e cada dente foi seccionado em duas metades (unidade experimental) preparadas com lixa 600 (CE fina) e 60 (CE espessa). Os sistemas autocondicionantes foram selecionados conforme a acidez: Clearfil SE Bond (SE- fraco), Optibond Solo primer e adesivo (SO-intermediário), TYrian + One Step Plus (TY–forte). Um sistema convencional, ScotchBond Multi-Uso (MP) também foi estudado. A aplicação dos adesivos foi aleatória e uma reconstrução da porção coronária foi realizada com resina Z-250. Após 24h, os palitos para microtração (0,8mm 2 ) foram preparados. Parte deles foi submetida à microtração (Kratos–0,5mm/min). (Um índice de RU foi calculado levando-se em consideração a contribuição relativa dos tipos de fratura ocorridos). A outra parte foi avaliada em microscopia de luz (400x) quanto à AM tendo sido calculada a largura média de fendas (Lm) na interface de união. Para observação do padrão de condicionamento por MEV, os primers autocondicionantes e o H3PO4 foram aplicados à dentina tratada com lixa 60 e 600, removidos com banhos de álcool e acetona, fixados, desidratados com etanol, secos com HMDS e recobertos com ouro. Para observação dos prolongamentos resinosos, unidades experimentais “restauradas" com Z-250 tiveram a dentina removida com HCl e NaHOCl e as amostras recobertas com ouro. Os dados de RU e AM foram submetidos a ANOVA de 2 fatores (p=0,05). Testes de regressão (p=0,05) foram aplicados para RU e Lm e de cada um com o pH dos primers autocondicionantes. Apenas o fator Adesivo foi significante para RU e Lm e não houve relação entre ambos. Observou-se que TY apresentou RU significativamente inferior aos demais sistemas, semelhantes entre si. A Lm foi tanto maior quanto menor a acidez do sistema autocondicionante e MP apresentou a menor Lm. Em condições de CE espessa, as Lm foram significativamente maiores. Notou-se que o sistema de acidez fraca foi o mais afetado pela CE espessa tanto no padrão de condicionamento como na formação de prolongamentos resinosos. Houve maior remoção da CE com o sistema de acidez forte. Concluiu-se que, nas condições experimentais testadas, apenas o sistema convencional conseguiu aliar altos valores de resistência de união a uma boa adaptação marginal, e ainda reunir aspectos de micromorfologia compatíveis / The objective of this study was to evaluate the effect of different pH self-etch adhesives applied to thick and thin smear layer (SL) on bond strength (BS), marginal adaptation (MA) and micromorphology. 47 molars (n=5) were used. The occlusal dentin was exposed and each tooth was sectioned in two halves (experimental unit) prepared with 600-grit SiC paper (thin SL) and 60-grit (thick SL). The self-etch adhesives were selected according to the acidity: Clearfil SE Bond (SE-mild), Optibond Solo primer and adhesive (SO-intermediary), Tyrian + One Step Plus (TY– strong). An etch-&-rinse system, ScotchBond Multi-Purpose (MP) was also studied. The adhesives application was randomized and a resin composite build-up was made with Z-250. After 24h, the microtensile sticks (0.8 mm2) were prepared. Part of them was submitted to the microtensile bond strength test (Kratos-0.5 mm/min). (A BS index was calculated considering the relative contribution of the fracture types observed in the fractured sticks). The other part had the MA evaluated by light microscopy (400x) for the mean interfacial gap width (Gw) calculation. For the conditioning pattern SEM evaluation, the self-etch primers and the phosphoric acid was applied to dentin (60 and 600-grit), removed with baths of alcohol and acetone, fixed, dehydrated with ethanol, dried with HMDS and gold sputtered. For resin tags observation, restored experimental units were used. The dentin was removed with HCl and NaHOCl and gold sputtered. The BS and MA data was analyzed by 2-way ANOVA (p=0.05). The regression test (p=0.05) was performed for BS and Gw and for both with the self-etch primers pH. A regression test was applied for Gw and Li to evaluate their relationship (p=0.05). Only the Adhesive was significant for BS and Gw and no there was no relationship for them. TY presented significantly lower BS compared to the other adhesives that had similar BS. The higher the pH of the self-etch primers, the larger were the corresponding Gw (Gw x pH regression was significant). MP presented the lowest Gw. With thick SL, the Gw was significantly larger. The mild self-etch adhesive was affected by the thick SL in both the conditioning pattern and tags formation. The SL removal was more extensive with the strong self-etch. It was concluded that only the etch-&-rinse system achieved high BS and good MA with compatible micromorphological aspects

Resumo: Neste estudo avaliou-se a influência do tratamento de superfície para cimentação na resistência à flexão de 4 pontos de zircônia tetragonal policristalina estabilizada por óxido de ítrio (Y-TZP). Por meio de blocos pré-sinterizados de Y-TZP (InCeram 2000 YZ Cubes, Vita Zahnfabrik) foram confeccionadas 120 barras (20mm x 4mm x 1,2mm) de acordo com a norma ISO 6872:2008 e aleatoriamente divididas em 4 grupos: Grupo 1: silicatização (Cojet 30 μm) (n=29); Grupo 2: jateamento com óxido de alumínio (44 μm) (n=29); Grupo 3: ponta diamantada de granulação extra-fina (30 μm) (n=27); Grupo 4: (controle) sem tratamento de superfície (n=29). Em seguida, todas as amostras foram submetidas ao ensaio de flexão de 4 pontos (imersos em água destilada à 370C) em máquina de ensaio universal com velocidade de 0,5 mm/min até o rompimento das mesmas. A análise de difração de raios-X foi utilizada para determinar a transformação de fase. A microestrutura da Y-TZP e o padrão de tratamento de superfície foram analisados por meio de perfilometria óptica e microscopia eletrônica de varredura. Os dados de resistência à flexão foram estatisticamente analisados por meio de ANOVA 1-fator, teste de Tukey HSD (α=0,05) e Weibull (m=módulo; σ0=resistência característica). As médias±desvio-padrão (MPa) foram os seguintes: G1:1207,1±229,7a; G2: 1369,7±272,3a; G3: 874,4±365,4b e G4: 1196,2±284,2a. Os valores de (m) e (σ0) foram: G1: 6,0 e 1300,28; G2: 5,9 e 1477,88; G3: 2,6 e 985,901 e G4: 4,5 e 1308,12. Concluiu-se que a utilização de pontas diamantadas de granulação extra-fina deve ser evitada nos procedimentos prévios à cimentação resinosa de Y-TZP / Abstract: This study evaluated the influence of surface treatment on 4-point bending test of yttrium stabilized policristaline tetragonal zirconia (Y-TZP). From Y-TZP blocks (InCeram 2000 YZ Cubes, Vita Zahnfabrik) were obtained 120 bars (20mm×4mm×1.2mm) according to norm ISO 6872:2008 and randomly divided in 4 groups: Group 1: silicatization (Cojet 30 μm) (n=29); Group 2: sandblasting with aluminium oxide (44 μm) (n=29); Group 3: fine coarse diamond bur (30 μm) (n=27); Group 4: (control) without surface treatment (n=29). As follow, all samples were submitted to the 4-point bending test (immersed in distilled water at 370C) in an universal testing machine with cross-head speed of 0.5 mm/min until the rupture of the samples. X-ray diffraction analysis was utilized to quantify the monoclinic phase. The microstructure of Y-TZP and pattern of surface treatment were analyzed by optic profilometer and scanning electron microscopy. The data of flexural strength (σ4p) were statistically analyzed by 1-factor ANOVA, Tukey HSD (α= 0.05) and Weibull (m= modulus, σ0 = characteristic strength). The mean±standard deviation (MPa) were the following: G1:1207.1±229.7a; G2: 1369.7±272.3a; G3: 874.4±365.4b and G4: 1196.2±284.2a. The values of (m) and (σ0) were: G1: 6.0 and 1300.28; G2: 5.9 and 1477.88; G3: 2.6 and 985.901 and G4: 4.5 and 1308.12. It was concluded that silicatization and sandblasting increased the flexural strength of Y-TZP, diminished the roughness of surface and present higher reliability for cementation of Y-TZP restorations / Orientador: Estevão Tomomitsu Kimpara / Coorientador: Mutlu Özcan / Banca: Paulo Francisco César / Banca: Alfredo Mikail Melo Mesquita / Banca: Rubens Nisie Tango / Banca: Fernando Eidi Takahashi / Doutor

No processo de produção de etanol a partir de cana-de-açúcar, a destilação do mosto fermentado resulta na geração de grande volume de vinhaça. Em média, para cada litro de etanol produzido são gerados aproximadamente 12 litros de vinhaça. Devido ao volume de vinhaça produzido e ao limite de aplicação de vinhaça por área, estabelecido pela CETESB, os gastos com o gerenciamento deste resíduo tornaram-se muito altos (R$ 17,33 por m3, considerando a distribuição por caminhão para uma distância de 20 a 25 Km). Isso levou o setor sucroenergético a buscar alternativas visando diminuir do volume de vinhaça produzida. Dentre essas alternativa, destaca-se o processo de fermentação com alto teor alcoólico. Este processo pode diminuir em até 50% o volume de vinhaça gerado, além de apresentar inúmeras vantagens técnicas, econômicas e ambientais. Por esses motivos, o objetivo deste trabalho foi realizar a adaptação das linhagens de leveduras C22 e Y904 para fermentações com altos teores alcoólicos e verificar as alterações morfológicas das linhagens C22 e Y904 ao longo do processo de adaptação e após a fermentação com alto teor alcoólico, por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Para tal, foram realizadas fermentações com concentrações crescentes de açúcares nos mostos (50 à 274,52 g L-1). No ciclo de fermentação com alto teor alcoólico, a viabilidade das leveduras C22 e Y904 adaptadas foi 70,1% (83,5% e 56,7%, respectivamente); já a viabilidade média das leveduras C22 e Y904 não adaptadas foi 62% (68,8% e 55,2%, respectivamente). As imagens do MEV mostraram que a linhagem C22 adaptada apresentou aspecto morfológico de melhor resposta ao estresse exposto do que as demais leveduras. Conclui-se que a escolha da linhagem e sua adaptação prévia são fundamentais para a condução de fermentações com alto teor alcoólico. / In ethanol production process, the distillation of sugarcane fermented must result in large volume of vinasse. For each liter of ethanol produced around 12 liters of vinasse are generated. Due to the vinasse application limit per area, established by CETESB, the costs to manage this waste became very high (R$ 17,33 per m3, considering the distribution by truck for a distance of 20 to 25 km). This led the sugarcane industry to seek alternatives to reduce the volume of vinasse produced. The process of fermentation with high alcohol content is one of the options; it can reduce by 50% the volume of vinasse generated and presents numerous technical, economic and environmental advantages. For these reasons, the aim of this study was to adapt the yeasts strains C22 and Y904 for fermentations with high alcohol levels and verify the morphological changes of C22 and Y904 strains in the process of adaptation and fermentation with high alcohol content, by scanning electron microscopy (SEM). For this purpose, fermentations with increasing concentrations of sugar in the must (50 to 274.52 g L-1) were performing. In the fermentation cycle with high alcohol content, the viability of C22 and Y904 yeast adapted was 70.1% (83.5% and 56.7%, respectively); the viability of the yeast C22 and Y904 unadapted was 62% (68.8% and 55.2%, respectively). The SEM images showed that the C22 adapted strain presented better morphological response to stress exposure than other yeast strains. We conclude that the choice of yeast strain and his previous adaptation are essential for conducting fermentations with high alcohol content.

Biofilmes são aglomerados complexos de células microbianas que crescem na superfície de um material sólido, como um metal. As superfícies metálicas são amplamente utilizadas em dispositivos biomédicos cirúrgicos e em superfícies de mobiliário intra-hospitalares as quais podem ser infectadas por bactérias epidemiologicamente importantes e permitir o desenvolvimento de um biofilme. O objetivo desse trabalho foi avaliar a superfície topográfica dos metais puros, incluindo: chumbo, cromo, estanho, ferro e níquel, avaliar a aderência bacteriana nestas superfícies, com a consequente formação de biofilme e a potencial citotoxicidade dos metais por meio de microscopia de força atômica (MFA), microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura (MEV). A metodologia constou de observações microscópicas e procedimentos bacteriológicos. A aderência bacteriana foi verificada por meio de MEV e a viabilidade celular bacteriana por contagem de Unidades Formadoras de Colônia (UFC). A citotoxicidade dos metais foi avaliada frente a células CHO-K1 por ensaio XTT. As bactérias selecionadas foram: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa (gram-negativos); Staphylococcus epidermidis e Staphylococcus aureus (gram-positivos) Para realizar o estudo, foram preparados corpos de prova dos metais puros e colocados em contato com cada uma das bactérias (da ordem 108 UFC/mL). Os resultados mostraram a formação de biofilme em cada um dos corpos de prova. A contagem das células viáveis demonstrou a recuperação de 105 UFC/mL para Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus após contato com os metais chumbo, cromo, estanho, ferro e níquel, e para Staphylococcus epidermidis após contato com chumbo, níquel e cromo houve uma redução bacteriana de 103 UFC/mL. Para Staphylococcus epidermidis após contato com estanho foram recuperadas 1,14 x 102 UFC/mL e para o ferro, houve recuperação de 1,3 x 103 UFC/mL. A MEV demonstrou nestas superfícies metálicas, os bacilos e cocos aderidos e agrupados em uma massa amorfa formando biofilme. Os resultados da rugosidade (Ra) de cada uma destas superfícies obtidos por MFA em varredura em 2 microns da superfície, mostram que o Ra do chumbo foi de 38.258 &#956m; estanho 13.481 &#956m; níquel 3.929 &#956m; ferro 3.689 &#956m e cromo 2.097 &#956m. Os resultados do teste XTT, após contato com as células CHO-K1, mostram que o ferro foi citotóxico para estas células (p<0,05) diferença estatisticamente significante em relação ao controle negativo. Os metais puros avaliados nas condições experimentais do estudo mostram que as superfícies dos metais puros não impedem a aderência bacteriana e formação de biofilme das bactérias selecionadas. / Biofilms are complex microbial cell clusters that are growing on the solid material surface, as a metal. The metalic surfaces are widely used in surgical biomedical devices and hospital furniture surfaces which can be infected by important bacteria and to allow biofilm development. The aim of this work was to evaluate the topographic surface of the lead, chromium, tin, iron and nickel pure metals, evaluate bacterial adhesion in these surfaces with subsequent biofilm formation and the potential cytotoxicity of metals through force microscopy atomic (AFM), optical microscopy and scanning electron microscopy (SEM). The methodology consisted of microscopic observations and bacteriological procedures. Bacterial adherence was observed by SEM and the bacterial cell viability by colony forming units colony counts (CFU). The cytotoxicity of metals was evaluated using CHO-K1 cells by XTT assay.The isolated bacteria were: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa (gram-negative), and Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus (gram positive). In order to realize this study, samples of pure metals were prepared and put in touch with each bacteria (in 108 CFU/mL). The results show biofilm formation in each of the specimens. The counting of viable cells demonstrated a recovery 105 CFU/mL for Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus after contact with lead, chromium, tin, iron and nickel metals and Staphylococcus epidermidis after contact with lead, nickel and chromium there was a bacterial reduction of 103 CFU/mL. For Staphylococcus epidermidis after contact with tin were recovered 1.14 x 102 CFU / mL and the iron, there was a recovery of 1.3 x103 CFU/mL. The data show that there was a bacterial reduction of 103 CFU/mL viable cells. Staphylococcus epidermidis on contact with tin were recovered 1,14 x 102 and the iron recovery was 1,3 x 103 UFC/mL. SEM showed the metal surfaces, bacilli and coccus adhered and grouped in an amorphous mass forming biofilm. The results of the roughness (Ra) of each of the surfaces obtained by AFM scan of 2 microns from the surface, show that the RA lead was 38,258 uM; Tin 13,481 uM; Nickel 3,929 uM; iron 3,689 &#956m and chrome 2,097 &#956m. The results of XTT, after contact with the CHO-K1 cells, show that iron was cytotoxic to these cells (p <0.05) statistically significant difference compared to the negative control. Pure metals evaluated in the experimental conditions of the study show that the surfaces of pure metals do not prevent bacterial adherence and biofilm formation of the bacteria selected.

INTRODUÇÃO: A exposição prolongada às partículas ambientais está associada à mortalidade prematura devido às causas cárdio-respiratórias e ao câncer do pulmão. O tamanho e composição destas partículas estão relacionados à maior toxicidade, agravada pela retenção prolongada destas partículas no pulmão. Pode-se postular que partículas com diferentes composições elementares podem ter distribuição diferente ao longo da árvore traqueobrônquica. A captura por micro-dissecção a laser (CML) aparece neste cenário como uma alternativa rápida e eficaz para se obter amostras para estudo da distribuição destas partículas no pulmão. OBJETIVOS: Testar a eficácia da CML no estudo de partículas retidas no pulmão comparando com outra técnica de análise de cortes de parafina (P), já consagrada na literatura. Comparar também o perfil elementar de partículas retidas ao longo da árvore traqueobrônquica e linfonodos em duas cidades com perfis distintos de poluição, através da CML, associada à espectometria de raios-X por dispersão de energia (RX-DE) aliada à microscopia eletrônica de varredura (MEV). MÉTODOS: Vinte e quatro casos autopsiados foram obtidos em duas cidades com perfis distintos de poluição (São Paulo e São José do Rio Preto). As amostras de parênquima pulmonar obtidas do lobo médio do pulmão direito foram coletadas em três regiões: tecido peribrônquico, parênquima pulmonar periférico e linfonodos hilares. Para P, a análise foi feita em áreas visualizadas no MEV correspondentes às áreas de antracose. Estas áreas de antracose foram também micro-dissecadas, usando CML e analisadas através do RX-DE aliado ao MEV. RESULTADOS: Quando os dois métodos foram comparados, a maioria dos elementos encontrados, mostrando diferença significante, foi vista na CML, exceto pelo Ca e Mg (mais comumente encontrados em P). A análise elementar das partículas depositadas ao longo da árvore traqueobrônquica mostra dois grupos de distribuição dos elementos, com deposição predominante peribronquiolar ou com deposição predominante linfonodal. A análise elementar das áreas peribrônquicas descrimina melhor (95.8 %), o tipo de exposição à poluição, sem diferença significante para os outros locais estudados. CONCLUSÃO: Os perfis elementares das partículas retidas ao longo da árvore traqueobrônquica mostram dois grupos com padrão de distribuição distinta. A região proximal é o principal local para discriminação do tipo de exposição do indivíduo, sendo a antracose o carimbo da exposição à poluição. A CML se mostrou também uma ferramenta útil para discriminar áreas de interesse no estudo da análise elementar de partículas retidas no pulmão quando comparada com a análise nos cortes de parafina. / RATIONALE: Prolonged exposure to ambient particles is associated with premature mortality due to cardio respiratory diseases and lung cancer. Size and composition of these particles determine toxicity, aggravated by their long term retention in the lungs. In this context, it is plausible to postulate that different particles with different elemental composition must have distinct distribution patterns along the bronchial tree. Laser capture microdissection (LCM) appears as a rapid and efficient alternative for obtaining representative lung tissue for particle analysis. OBJECTIVES: To test laser capture microdissection (LCM) as a new tool for studying particle retention, comparing to a classical method using paraffin sections (PS). To compare the elemental profile of particles retained along the bronchial tree and lymph nodes in two cities with distinct pollution backgrounds by using LCM, through energy dispersive x-ray (EDX) and scanning electron microscopy (SEM). METHODS: Twenty-four right lung middle lobes from autopsied cases were obtained in two cities with different pollution backgrounds. Lung samples were collected from three distinct regions in the lungs at the time of autopsy: peribronchial tissue, peripheral parenchyma and hylar lymph nodes. For PS, analysis was performed in areas visualized in the SEM correspondent to anthracotic areas. These areas of anthracosis were also microdissected using LCM and analyzed for elemental composition through EDX allied to SEM. RESULTS: When the two methods were compared, the majority of the elements showing significant difference was predominantly found when LCM was used, except for Ca and Mg (more related to PS) Elemental analysis of particles deposited along the bronchial tree shows two groups of distribution: elements with preferable peribronchiolar or preferable lymph node deposition. Elemental profile of peribronchial areas discriminate accurately (95.8 %) the type of pollution exposure, with no statistical difference noted for the other sites. CONCLUSIONS: Elemental profiling of the particles retained along the bronchial tree shows two groups with distinct distribution patterns. The proximal bronchial tree is the main site for discrimination of pollution exposure, with an elemental finger print of anthracosis. LCM has also proven to be a useful tool in discriminating areas of interest for elemental analysis of particles retained in the lung when compared to analysis in PS.

Neste trabalho é apresentado o estudo de alguns dos principais parâmetros envolvidos na fabricação de filmes finos de brometo de tálio (TlBr) por meio da técnica de spray pyrolysis. Investigamos a possibilidade desta técnica vir a se tornar um método alternativo para fabricação de filmes finos de TlBr com qualidade adequada para a confecção de dispositivos detectores de radiação de altas energias, como raios-X e raios-&#947;. O tempo de fabricação e a qualidade dos filmes eram limitados pelo problema da formação de gotas d’água na parte superior da câmara de deposição, o que resultava na incidência destas gotas sobre os filmes, posteriormente. O problema foi resolvido por meio de um sistema de aquecimento extrínseco ao equipamento. A investigação dos parâmetros citados se deu pela variação dos fluxos de nitrogênio e da solução de TlBr, pelas variações da posição dos substratos no porta substrato, da temperatura e do grau de saturação das soluções. As propriedades cristalinas e estruturais dos filmes foram verificadas pela técnica de difração de raios-X e por microscopia eletrônica de varredura, respectivamente. Os resultados mostram que o pico de intensidade dos planos cristalinos preferenciais dos filmes tendem a se tornar mais intensos para soluções saturadas, fabricados com baixo fluxo de nitrogênio e a temperaturas próximas de 100oC. No entanto, dependendo da posição dos filmes sobre o porta-substrato, a intensidade dos picos, assim como a rugosidade superficial, variam significativamente. Com efeito, conseguimos estender o processo de deposição para qualquer tempo desejado, o que implica, a princípio, em filmes mais espessos e de melhor qualidade. / This work presents the results about the investigation of the importance of some of the main parameters related to the fabrication of thin films of thallium bromide (TlBr) using the spray pyrolysis technique. We evaluated the possibilities for the future use of this technique in the development of high quality TlBr thin films to be used as high-energy radiation (such as X- and gamma rays) detectors. The total deposition time as well as the quality of the films were limited due to the formation of water droplets at the inner part of the top surface of the deposition chamber. These droplets would eventually fall over the substrates damaging the sample. This problem was solved by the use of an external heating system. The investigated deposition parameters were: nitrogen and solution flows, substrate position on top of the substrate holder, deposition temperature and composition of the solution. The crystalline and structural properties of the thin films were investigated by X-ray diffraction and Scanning Electron Microscopy. According to the results obtained from the diffraction experiments, the crystalline peaks increase with the saturation of the solution, low nitrogen flow and deposition temperatures close to 100oC. Nevertheless, the substrate position can also influence the crystallinity and amount of deposited material. In summary, we optimized the deposition parameters for the development of thick and high quality films that could be used for the development of sensors in the future.

As características das células musculares e da junção miotendínea do músculo pterigóideo mediai de ratos adultos e com envelhecimento foram estudadas, empregando-se as técnicas de microscopia de luz e eletrônica de varredura e de transmissão. A microscopia de luz mostrou que as fibras musculares inserem-se na superfície óssea mandibular através de tecido colágeno composto por numerosos fibroblastos. Os cortes examinados sob luz polarizada revelaram a presença de fibras colágenas tipo\' e li\' nesta região. Além disso, puderam-se notar os capilares sangüíneos em grande número. Observações ao microscópio eletrônico de varredura ressaltaram as estriações presentes no músculo esquelético. O tecido conjuntivo que constitui o endomísio foi notado quando as amostras foram tratadas com solução de hidróxido de sódio e foi possível observar os diferentes diâmetros apresentados pelas fibras musculares. A microscopia eletrônica de transmissão evidenciou o alinhamento dos sarcômeros e as concentrações de mitocôndrias junto à lâmina basal na terminação da fibra muscular. O estudo da junção miotendínea dos ratos adultos e com envelhecimento identificou as fibras colágenas e os feixes de miofibrilas formando interdigitações que promovem o aumento da superfície de contato nesta região. Os aspectos observados nos músculos de ratos adultos mostraram-se bastante similares aos encontrados nos ratos com envelhecimento. / The mediai pterygoid muscle cells and myotendinous junction characteristics of adult and aging rats were studied, using light microscopy and scanning and transmission electron microscopy techniques. The Iight microscopy showed the muscle fibers inserting in the mandible surface through collagen tissue and numerous fibroblasts. The samples examined in polarized light revealed the presence of type I and 11I collagen fibers in this site. Furthermore, the numerous blood capillaries could be noticed. Observations at the scanning electron microscope evidenced strias present in the skeletal muscle. The connective tissue that constitutes the endomysium could be noticed when the samples were treated with sodium hydroxide solution and it was possible to observe the muscle fibers different diameters. The transmission electron microscopy revealed the sarcomeres alignment and the mitochondria concentration by the basal lamina in the muscle fiber termination. The adult and aging rats myotendinous junction study showed the collagen fibers and the myofibrils bundles developing finger-like processes that increases the contact areas in this site. The aspects seen in adult rats pterygoid muscles were very similar to the ones seen in the aging rats.