Câncer de bexiga (CB) é a segunda doença mais prevalente do trato urinário. Atualmente as principais terapias para o CB apresentam baixa eficácia, altas taxas de recorrência e vários efeitos adversos. Assim, avalia-se o potencial de novas moléculas para a terapia do CB. Quercetina (QT) é um flavonóide com propriedades inibidora da proliferação celular e apoptótica que são interessantes para o tratamento do câncer, porém é um composto instável e fotossensível, o que inviabiliza sua administração na forma livre. Desta forma, o encapsulamento da QT em carreadores lipídicos nanoestruturados (CLN) funcionalizados com folato (CLN-F) pode ser um sistema efetivo de entrega de QT em células de CB que poderá superar os desafios da terapia intravesical do CB. O encapsulamento da QT pode aumentar a estabilidade da QT, sua permeação pelo urotélio, internalização em células tumorais, seu tempo de residência na bexiga e sua eficácia farmacológica. Os objetivos deste trabalho foram preparar, caracterizar e avaliar a citotoxicidade de QT livre e encapsulada em CLN e CLN-F em células de CB. O CLN e CLN-F foram preparados pelo método de emulsão e sonicação. A funcionalização do CLN foi realizada pela reação do estabilizante Pluronic F68 com folato (PF68F). Esta funcionalização foi avaliada por espectroscopia de ressonância magnética Nuclear (RMN) unidimensional de 1H. Os CLNs foram caracterizados quanto ao diâmetro, índice de polidispersão (PdI), potencial zeta (PZ), cristalinidade, eficiência de encapsulamento (EE) e morfologia. Além disso, foi avaliado o perfil de liberação da QT, a atividade antioxidante e a citotoxicidade da QT livre e encapsulada. A funcionalização foi confirmada pelos espectros de RMN que apresentaram sinais atribuídos ao PF68 e ao folato. O diâmetro, PdI e o PZ dos CLN foram 176,5 nm, 0,124 e -11,4 mV, respectivamente. O CLN-F apresentou 197,9 nm de diâmetro, 0,160 de PdI e -17,5mV de PZ. O encapsulamento da QT não alterou significativamente estes parâmetros para ambas as partículas. Obteve-se uma alta eficiência de encapsulamento da QT, para os dois carreadores (~98%), devido, provavelmente, ao baixo valor de índice de recristalização (~28) dos CLNs. Os CLN apresentam forma esférica, estabilidade por 330 dias e um perfil de liberação sustentada da QT. O IC50 do CLN-F-QT (83,4 ?g/mL) foi menor que o IC50 do CLN-QT (94,9 ?g/mL) provavelmente devido ao aumento da internalização causada pela funcionalização das partículas com folato. Os CLN-QT e CLN-F-QT apresentaram alta atividade antioxidante. Os resultados obtidos sugerem que o CLN-F-Q é um sistema com potencial para a futura terapia do CB, pois apresenta tamanho menor que 200 nm, baixo PdI, alta estabilidade, EE e atividade antioxidante, liberação sustentada além de ser citotóxico para as células RT4. / Bladder cancer (BC) is the second most prevalent tumor of urinary tract. Currently the main BC therapies have low effectiveness, high recurrence rate and several adverse effects. Thus, new molecule have been investigate to CB therapy. Quercetin (QT) is a flavonoid with interesting properties for cancer therapy such as inhibition of cancer cell proliferation and apoptosis. However, QT is an unstable and photosensitive compound. Therefore, QT encapsulated in nanostructure lipid carriers (NLC) functionalized with folate (F-NLC) might be an alternative targeting system of QT for tumor cell and can be strategy to overcome intravesical CB therapy challenges. The QT encapsulation can improve QT stability, increase its permeation in the urothelium and uptake in tumor cells, increase retention time in the bladder and enhancing its pharmacological efficacy. Aims of this study were preparation, characterization of NLC-QT and F-NLC-QT and cytotoxic evaluation of these particles in BC cells. NLC and F-NLC were prepared by ultrasonication method. NLC were funcionalized by conjugated between surfactant Pluronic and folate (PL68F). This conjugation was characterized by proton nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR). The particles were characterized regarding to size, polydispersity index (PdI), zeta potential (ZP), crystallinity, encapsulation efficiency (EE) and morphology. Furthermore, stability, release profile, cytotoxicity and antioxidant activity of QT encapsulated or not in NLC, were evaluated. RMN spectrums confirmed the PF68 functionalization, exhibiting peaks attributed to PF68 and folate. Size, PdI and ZP of NCL were respectively 176.5 nm, 0.124 and -11.4, whereas F-NLC showed 197.9 nm of size, 0.160 of PdI and ZP of -17.5mV. The QT encapsulation did not affect these physical parameters. Low values of crystalization index (~28) might promote high EE of quercetin (~98%). NLC shows spherical shape, sustained release profile of QT and were stable for 330 days. IC50 of NLC-QT (87.4 ?g/mL) was smaller thanthe IC50 of F-NLC-QT (94.9 ?g/mL). This difference might be explained by the increase of NLC uptake by endocytosis mediated by folate receptor. NLC-QT and F-NLC-QT showed high antioxidant activity. Therefore, our results suggest that QT-F-NLC is a carry system with potential for future BC therapy that show size smaller than 200 nm, low PdI, high long-term stability, high EE and antioxidant activity, sustained release and cytotoxic to CB cells (RT4).

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:10:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Helido Guedes Montenegro Filho.pdf: 2333644 bytes, checksum: 3a009dbcac0a54d285c882e1a0f92df4 (MD5) Previous issue date: 2011-06-02 / O presente trabalho é um estudo de caso no qual foi analisado um processo adotado por uma empresa no Polo Industrial de Manaus. O novo processo foi adotado em decorrência de circunstâncias especiais ocorridas junto aos fornecedores que possuem empresas no município de Manaus, e que ora realizam entregas de matérias-primas para a empresa. Foi implantado um processo que elimina a necessidade de comunicação baseado em dados manuais com os fornecedores, promovendo sincronia com a execução das linhas de manufatura, denominado de entrega direta à linha de produção (EDLP). Esta ferramenta habilitou o fornecedor entregar apenas certa quantidade de estoque necessário as ordens de produção, no momento correto da execução na linha de manufatura, evitando assim estoques desnecessários no armazém da empresa. Os fornecedores recebem os pedidos em ciclos de quatro horas, procedendo assim com suas entregas, na certeza que serão prontamente recebidos, sendo suas peças endereçadas diretamente às linhas de manufatura, para conclusão e adequação aos requisitos dos clientes finais da empresa. O método utilizado para estudar a aplicação do conceito do processo de entrega direta à linha de manufatura foi o Estudo de Caso, pois possibilitou a observação de uma realidade através de um método científico, havendo a necessidade de observar aspectos que validam o processo investigativo como, por exemplo, a confecção de um protocolo de pesquisa. Foi necessário elaborar um referencial teórico da literatura disponível sobre assuntos tais como; a Manufatura Enxuta e o uso de JIT e Kanban, a Produção Sincronizada e o uso do MRP e MRP II e no Suprimento Automático o uso de CRP e VMI. Ainda foi necessário elaborar uma pesquisa bibliográfica em assuntos como a utilização de ferramentas de tecnologia de informação (TI) na cadeia de suprimento, processos colaborativos de suprimento entre os quais se destaca o DSD (Direct Store Delivery). Os dados primários foram coletados através de aplicação de questionários individuais sobre o processo junto ao envolvidos de forma habilitar a comparação entre a teoria analisada e os fatos observados pelo público alvo da investigação. Os dados secundários foram levantados através dos procedimentos e instruções de trabalho referentes ao processo de entrega direta à linha de produção, provendo embasamento documental à pesquisa. Foram ainda analisados fluxos e mapas de processo sempre que disponíveis para consulta, tanto na empresa como nos fornecedores que atuam como parceiros. Portanto, baseado nos indícios levantados observou-se a validade das proposições retiradas da teoria. Após a análise do processo de entrega direta à linha de produção, compreende-se que este processo pode colaborar com a redução dos estoques de processo nas empresas através da promoção de um processo alinhado entre a forma como será executado o plano de produção, e a forma como os fornecedores são acionados e devem responder este chamado. Estes aspectos aliados a tecnologia da informação e um processo controlado de execução sincronizada favorecem o processo de entrega direta à linha de produção, levando a empresa a concluir que não há necessidade de manutenção de estoques intermediários desnecessários ao processo de produção realizado nas linhas de produção da empresa.

Em estudos de terapia gênica e vacinação por DNA, a eficiência e a segurança dos vetores que transportam o material genético terapêutico possuem papel fundamental. Vetores não virais são considerados mais seguros, mas menos eficientes em relação aos vetores virais. Em parte, isso se deve à falta de estudos sistemáticos e comparativos no que diz respeito às características físico-químicas desses vetores quando em soluções biológicas e o efeito delas sobre a eficiência de entrega gênica. O objetivo deste trabalho é avaliar o efeito do pH, da força iônica e do tipo tampão de complexação sobre as características físico-químicas de nanopartículas pDNA-protamina e pDNA-protamina-lipofectamina, visando à entrega gênica para diferentes linhagens celulares. Para isso, nanopartículas formadas em diferentes condições foram caracterizadas através de ensaios de espalhamento dinâmico de luz (DLS) e potencial zeta. Os estudos indicaram que o pH, a força iônica, o tipo de tampão e a presença de meio de cultura e soro no ambiente de complexação alteram significativamente o tamanho, a polidispersidade e o potencial zeta das partículas formadas. Finalmente, buscou-se avaliar o efeito dessas características sobre a eficiência de transfecção in vitro de células de macrófagos IC21 e células HeLa. Os estudos de transfecção em células Hela indicam que tanto a composição como as condições de formação das partículas influenciam significativamente a eficiência de transfecção. / In gene therapy and DNA vaccination studies, the efficiency and safety of the vector carrying the therapeutic gene play a fundamental role. Non-viral vectors are considered safer but less effective when compared to viral vectors. In part, this is due to the lack of systematic and comparative studies regarding the physicochemical characteristics of these vectors when prepared in biological solutions and their effect on gene delivery efficiency. The objective of this study was to evaluate the effect of pH, ionic strength and type of complexation buffer on pDNA-protamine and pDNAprotamine- lipofectamine nanoparticles aiming at gene delivery to different cell lines. In order to achieve this goal, nanoparticles formed under different conditions were characterized by dynamic light scattering test (DLS) and zeta potential. Our studies indicated that the pH, the ionic strength, buffer type, and the presence of culture medium and serum in the complexation environment all significantly affect the size, polydispersity, and zeta potential of the particles formed. Finally, we evaluated the effect of these characteristics on the efficiency of transfection in vitro using HeLa cells and macrophages IC21. The transfection studies, especially using Hela cells, indicated that both, nanoparticle composition and the conditions of complex formation, significantly affect the efficiency of the transfections.

Submitted by Johnny Rodrigues (johnnyrodrigues@ufcg.edu.br) on 2018-04-18T16:32:06Z No. of bitstreams: 1 PAULO VICTOR SILVA OURIQUES - DISSERTAÇÃO PPGCC 2014..pdf: 15529498 bytes, checksum: 878a0f70f377ee9edf9e0347c482a19b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-18T16:32:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PAULO VICTOR SILVA OURIQUES - DISSERTAÇÃO PPGCC 2014..pdf: 15529498 bytes, checksum: 878a0f70f377ee9edf9e0347c482a19b (MD5) Previous issue date: 2014-02-15 / A Propaganda Pervasiva diferencia-se das demais formas de veiculação de anúncios por permitir a entrega responsiva ao contexto dos consumidores. Dessa forma, é possível entregar aos consumidores os anúncios mais relevantes, proporcionando maior efetividade à campanha publicitária. Atualmente, os sistemas de entrega de anúncios apenas levam em consideração a relevância do anúncio para o cliente, não se preocupando com a maneira com a qual esses anúncios serão exibidos e nem com a influência causada por essa forma de exibição na relevância do anúncio. Sendo assim, objetiva-se neste trabalho elaborar um mecanismo que permita exibir um anúncio ao consumidor através do canal de veiculação mais apropriada. Para isso,é preciso que este mecanismo leve em consideração a influência que o canal de veiculação exerce sobre a relevância do anúncio e qual o propósito da campanha publiciária à qual pertence o anúncio. Tendo esta infraestrutura desenvolvida, será muito mais fácil elaborar mecanismos de avaliação da campanha publicitária levando em consideração a forma de exibição dos anúncios. Estes mecanismos poderão indicar qual o canal de veiculação que mais impactou o cliente, qual a que obteve maior audiência, qual foi a mais indicada, etc. Para validar os modelos desenvolvidos, foram realizadas baterias de experimentos com foco no impacto do tempo de resposta de um canal de veiculação na relevância do anúncio. A análise dos resultados permite mostrar que é possível sim utilizar o tempo de resposta para escolher o canal mais adequando para veicular um anúncio, assegurando-se que o propósito da campanha publicitária seja satisfeito. / Pervasive Advertising differs from other forms of ad serving because allows responsive delivery to the consumer context. Thus, it’s possible to deliver to consumers the most relevant ads, providing greater effectiveness to advertising campaign. Nowadays the delivering ads systems only consider the relevance of the ad to the client, not worrying about the way those ads are displayed and ignoring the influence caused by this form of display in ad relevance. Thus, the objective of this work is develop a mechanism that shows an ad to the consumer through the most appropriate display interface. For this,the mechanism must to consider the influence that the interface exerts on relevance of the ad. Whith this infrastructure, will be much easier to develop mechanisms for evaluating the hype,considering the way of delivering ads. These mechanisms may indicate the display interface that most impacted the user, which obtained larger audience, which was better indicated, etc. To validate the developed models, experiments focusing on the impact the response time of a channel broadcasting in ad relevance were held. The result analysis shows that it’s possible to use the response time to choose the channel ad serving, ensuring that the purpose of the advertising campaign is satisfied.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:00:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissEMS.pdf: 2946767 bytes, checksum: 0c7cd953c849c0ed69dae475e18c7bfe (MD5) Previous issue date: 2005-11-30 / This work presents a comparison between conventional solid waste collection, also known as door to-door collection which is used by most of the Brazilian s municipalities and the Mandatory Drop-Off Waste Collection At Specific Sites (CLEO), to where the residents must transport their domestic solid waste to be collected. Literature points to the Mandatory Drop-Off (CLEO) as likely to have the lowest cost in the solid waste system. Also, the paper proposes to compare this type of collection with the door-to-door collection. And in addition, to find out the residents opinion about this type of collection, a survey was conducted with the residents of a street segment in Bebedouro-SP, where a drop-off collection is currently made at specific sites, but not in a mandatory way. The survey points that the collection at specific points is 10 to 30 per cent less expensive than the door-to-door collection. (If crew and vehicles are taken in consideration) Bebedouro/SP s survey shows that 75% of respondents are involved and know about the collection of solid waste services. Most of residents that live around main street approved the way that collection and disposal are made, at a central island. However, 60% do not want a container in the curbside of their front house. Another important issue that the respondents declared is their disposition to make a certain sacrifice , like to walk a lot a distance to dispose their solid waste in order to pay their Town s taxes at a discount rate. / Neste trabalho é apresentada uma comparação entre a coleta convencional de resíduos sólidos domiciliares, denominada porta-a-porta, realizada na maioria dos municípios brasileiros e a coleta em locais de entrega obrigatória (CLEO), realizada em pontos específicos, para onde os residentes devem levar os resíduos por eles gerados para serem recolhidos. A literatura aponta este segundo tipo de coleta como o de menor custo no sistema de resíduos sólidos e, neste trabalho buscou-se compara-la com a coleta porta-a porta e conhecer as opiniões a respeito deste tipo de coleta, através de pesquisa com residentes num setor onde é realizada de modo não obrigatório, na cidade de Bebedouro SP. A comparação teórica baseada no modelo de Aguiar (1993) apontou que a coleta em locais de entrega obrigatória pode ser de custo menor que a coleta porta-a-porta em cerca de 10 a 30%, considerando-se a redução de frota e de guarnição. A pesquisa informou que 75% dos respondentes acham-se envolvidos e conhecem os serviços de coleta dos RSD e a maioria aprova o modo como se dispõe e se coleta o lixo, nas lixeiras da ilha central, mas 60% não admitiram ter uma lixeira coletiva na calçada de sua casa. Outro dado importante observado é que a população pesquisada aceita trocar certo sacrifício de sua parte (no caso andar uma distância maior para dispor o lixo) por um benefício concedido pelo poder público (desconto nos tributos municipais).

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JulianaFC_DISSERT.pdf: 2465662 bytes, checksum: 2528260c5aedc6b5fb63748e3692e16a (MD5) Previous issue date: 2013-02-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The drug targeting has been the subject of extensive studies in order to develop site-specific treatments that minimize side effects and become more effective anticancer therapy. Despite considerable interest in this class, drugs like antibiotics also have limitations, and have been neglected. Using new pharmaceutical technologies, the use of magnetic vectors appear as promising candidate for drug delivery systems in several studies. Small magnetic particles bound to the drug of interest can be modulated according to the orientation of a magnet outside the body, locating and holding in a specific site. In this work, we propose the use of High Energy Milling (HEM) for synthesis of a magnetic vector with characteristics suitable for biomedical applications by intravenous administration, and for the formation of an oxacillin-carrier complex to obtain a system for treating infections caused by Staphylococcus aureus. The results of the variation of milling time showed that the size and structural properties of the formed material change with increasing milling time, and in 60 hours we found the sample closest to the ideal conditions of the material. The vector-drug system was studied in terms of structural stability and antimicrobial activity after the milling process, which revealed the integrity of the oxacillin molecule and its bactericidal action on cultures of Staphylococcus aureus ATCC / A vetoriza??o de f?rmaco tem sido alvo de exaustivos trabalhos no intuito de desenvolver tratamentos s?tio-espec?ficos que minimizem efeitos adversos e torne mais efetiva a terapia antineopl?sica. Apesar do grande interesse nessa classe, f?rmacos como os antibi?ticos tamb?m apresentam limita??es, e t?m sido negligenciados. Utilizando novas tecnologias farmac?uticas, o emprego de vetores magn?ticos aparece como candidato promissor para sistemas de entrega de f?rmaco em in?meros estudos. As pequenas part?culas magn?ticas ligadas ao f?rmaco de interesse podem ser moduladas de acordo com a orienta??o de um ?m? externo ao corpo, localizado e retendo o ativo no local de interesse. Nesse trabalho n?s propomos a utiliza??o de Moagem de Alta Energia (MAE) para s?ntese do vetor magn?tico com caracter?sticas apropriadas para aplica??es biom?dicas por via de administra??o intravenosa, e para complexa??o do carreador ? Oxacilina para obten??o de um sistema para tratamento de infec??es por Staphylococcus aures. Os resultados da varia??o do tempo de moagem demonstraram que as propriedades estruturais e de tamanho do material formado se alteram com o aumento do tempo de moagem, e dentre os per?odos estudados, 60 horas foi escolhido como o mais pr?ximo das propriedades ideais do material. A complexa??o vetor-f?rmaco foi estudada em termos de estabilidade estrutural e de atividade antimicrobiana ap?s o processo de moagem, que revelaram a integridade da mol?cula de Oxacilina e de sua a??o bactericida sobre culturas de Staphylococcus aures ATCC

O presente trabalho trata do problema da programação de entrega de concreto produzido em centrais dosadoras. Tal programação engloba as decisões de qual central deverá atender cada cliente e em qual horário cada veículo de entrega deverá ser carregado nessa central, de forma a maximizar a receita marginal total do sistema. São consideradas restrições de capacidade de carregamento de veículos por central, disponibilidade da frota, e garantia de atendimento de todos os pedidos de cada cliente por uma única central. A fim de resolver esse problema de forma eficiente, é proposto um modelo de programação matemática baseado em uma rede espaço-tempo, o qual foi implementado em ambiente de planilha eletrônica, como parte de um sistema de apoio à decisão. O sistema conta com uma interface amigável para o usuário, desenvolvida em linguagem VBA, que apresenta facilidade de preenchimento dos dados de entrada e compreensão dos resultados fornecidos, mesmo por aqueles sem conhecimento em pesquisa operacional. A aplicação do modelo proposto para a resolução de problemas com dados reais confirma que o modelo funciona corretamente, considera as restrições e gera rapidamente a solução ótima. Sendo assim, a ferramenta desenvolvida mostra-se bastante útil para as operações de programação de uma empresa concreteira que opera diversas centrais dosadoras de concreto. / This paper addresses the problem of scheduling concrete delivery produced in concrete batch plants. Such scheduling comprises the decisions of which center should serve each customer and what time each delivery vehicle should be loaded, so as to maximize the total marginal revenue of the system. Vehicle loading capacity constraints per center, fleet availability and the assurance that all orders will be fulfilled by a single concrete center are considered. In order to solve this problem efficiently, we propose a mathematical programming model based on a time-space network, implemented in a spreadsheet environment, as part of a decision support system. The system features a user-friendly interface, developed in VBA, which makes it easy to enter data and understand the results provided, even by those without knowledge in operational research. The implementation of the proposed model to solve problems with real data confirms that the model works properly, taking into consideration the constraints and quickly generating the optimal solution. Thus, the developed tool appears to be very useful for scheduling operations of a company which operates several concrete batch plants.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-16T20:05:43Z No. of bitstreams: 2 Dissertação_LauraFernandaOsmariVendrame.pdf: 3061643 bytes, checksum: d06cb3bc35f9d2bedf0c39b9c8e35276 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T20:05:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação_LauraFernandaOsmariVendrame.pdf: 3061643 bytes, checksum: d06cb3bc35f9d2bedf0c39b9c8e35276 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-03-31 / The use of C60 fullerenes, functionalized or in pristine form, as chemical and biological sensors has become a large field of study and application High stability and low chemical reactivity of these nanostructures provide some difficulties in studying the chemical and physical properties. These difficulties can be overcome through the functionalization process. The purpose of this work is to evaluate through abs initio calculations the structural and electronic properties of the temozolamide molecule interacting with functionalized fullerenes. This drug is very important for the treatment of brain tumors. This study is based on the density functional theory, using the SIESTA computational code. First of all, it was evaluated the isolated functionalized fullerenes behavior, as well as the temozolamide molecule. Subsequently, it was studied the interaction of functionalized fullerenes with temozolamide in order to understand the energetic and structural properties of these structures to support the use of these nanomaterials in future biomedical applications. From the results it is possible to observe the depending on the studied configuration, the binding energy values are not the same. It was found a weak interaction for all functionalized C60 interacting with temozolamide through physical adsorption, with values between 0.43 eV and 1.02 eV for all stable configurations. An interaction through physical adsorption was also observed for themozolamide with pristine fullerenes, with energy value of 0.23 eV. Despite some high energy values, the distance in the interaction between the nearest atoms of the nanostructure and temozolomide does not represent chemical bonds. The interaction of the temozolamide drug with fullerenes is important for the future development of central nervous system nanodrugs improving the performance and slowing the elimination of the drug by the body. / O uso de fulerenos C60, funcionalizados ou na forma pura, como carreadores de fármacos tem se tornado um grande campo de estudo e aplicação. A alta estabilidade e baixa reatividade química destas nanoestruturas trazem algumas dificuldades de manipulação no estudo de suas propriedades químicas e físicas. Estas dificuldades podem ser superadas através do processo de funcionalização. O objetivo deste trabalho é avaliar, por meio de cálculos ab initio as propriedades estruturais e eletrônicas da molécula de temozolamida interagindo com fulerenos puros e funcionalizados. A temozolamida é um medicamento muito importante no tratamento de tumores cerebrais. Este estudo é baseado na teoria do funcional da densidade, utilizando o código computacional SIESTA. Primeiramente, estudamos os fulerenos funcionalizados isolados, bem como a molécula de temozolamida. Posteriormente, estudamos a interação do fulereno puro e funcionalizado, com a temozolamida a fim de compreender suas propriedades energéticas e estruturais. A partir dos resultados é possível observar que, dependendo da configuração estudada, os valores de energia de ligação não são os mesmos. Obtivemos uma interação fraca para todos os C60 funcionalizados interagindo com a temozolamida via adsorção física, com valores entre 0,43 eV e 1,02 eV para as configurações mais estáveis. Uma interação via adsorção física tambem foi observada para a interação da temozolamida com fulerenos puros, com energia de 0,23 eV Apesar de alguns valores altos de energia, a distância na interação entre os átomos mais próximos entre a nanoestrutura e a temozolamida e a baixa transferência de carga, não representam características de ligações covalentes. A interação da temozolamida com fulerenos, através da funcionalização, neste estudo, é importante para contribuir com o futuro desenvolvimento de nanomedicamentos do sistema nervoso central melhorando o desempenho e reatardando a eliminação do medicamento pelo organismo.

Câncer de bexiga (CB) é a segunda doença mais prevalente do trato urinário. Atualmente as principais terapias para o CB apresentam baixa eficácia, altas taxas de recorrência e vários efeitos adversos. Assim, avalia-se o potencial de novas moléculas para a terapia do CB. Quercetina (QT) é um flavonóide com propriedades inibidora da proliferação celular e apoptótica que são interessantes para o tratamento do câncer, porém é um composto instável e fotossensível, o que inviabiliza sua administração na forma livre. Desta forma, o encapsulamento da QT em carreadores lipídicos nanoestruturados (CLN) funcionalizados com folato (CLN-F) pode ser um sistema efetivo de entrega de QT em células de CB que poderá superar os desafios da terapia intravesical do CB. O encapsulamento da QT pode aumentar a estabilidade da QT, sua permeação pelo urotélio, internalização em células tumorais, seu tempo de residência na bexiga e sua eficácia farmacológica. Os objetivos deste trabalho foram preparar, caracterizar e avaliar a citotoxicidade de QT livre e encapsulada em CLN e CLN-F em células de CB. O CLN e CLN-F foram preparados pelo método de emulsão e sonicação. A funcionalização do CLN foi realizada pela reação do estabilizante Pluronic F68 com folato (PF68F). Esta funcionalização foi avaliada por espectroscopia de ressonância magnética Nuclear (RMN) unidimensional de 1H. Os CLNs foram caracterizados quanto ao diâmetro, índice de polidispersão (PdI), potencial zeta (PZ), cristalinidade, eficiência de encapsulamento (EE) e morfologia. Além disso, foi avaliado o perfil de liberação da QT, a atividade antioxidante e a citotoxicidade da QT livre e encapsulada. A funcionalização foi confirmada pelos espectros de RMN que apresentaram sinais atribuídos ao PF68 e ao folato. O diâmetro, PdI e o PZ dos CLN foram 176,5 nm, 0,124 e -11,4 mV, respectivamente. O CLN-F apresentou 197,9 nm de diâmetro, 0,160 de PdI e -17,5mV de PZ. O encapsulamento da QT não alterou significativamente estes parâmetros para ambas as partículas. Obteve-se uma alta eficiência de encapsulamento da QT, para os dois carreadores (~98%), devido, provavelmente, ao baixo valor de índice de recristalização (~28) dos CLNs. Os CLN apresentam forma esférica, estabilidade por 330 dias e um perfil de liberação sustentada da QT. O IC50 do CLN-F-QT (83,4 ?g/mL) foi menor que o IC50 do CLN-QT (94,9 ?g/mL) provavelmente devido ao aumento da internalização causada pela funcionalização das partículas com folato. Os CLN-QT e CLN-F-QT apresentaram alta atividade antioxidante. Os resultados obtidos sugerem que o CLN-F-Q é um sistema com potencial para a futura terapia do CB, pois apresenta tamanho menor que 200 nm, baixo PdI, alta estabilidade, EE e atividade antioxidante, liberação sustentada além de ser citotóxico para as células RT4. / Bladder cancer (BC) is the second most prevalent tumor of urinary tract. Currently the main BC therapies have low effectiveness, high recurrence rate and several adverse effects. Thus, new molecule have been investigate to CB therapy. Quercetin (QT) is a flavonoid with interesting properties for cancer therapy such as inhibition of cancer cell proliferation and apoptosis. However, QT is an unstable and photosensitive compound. Therefore, QT encapsulated in nanostructure lipid carriers (NLC) functionalized with folate (F-NLC) might be an alternative targeting system of QT for tumor cell and can be strategy to overcome intravesical CB therapy challenges. The QT encapsulation can improve QT stability, increase its permeation in the urothelium and uptake in tumor cells, increase retention time in the bladder and enhancing its pharmacological efficacy. Aims of this study were preparation, characterization of NLC-QT and F-NLC-QT and cytotoxic evaluation of these particles in BC cells. NLC and F-NLC were prepared by ultrasonication method. NLC were funcionalized by conjugated between surfactant Pluronic and folate (PL68F). This conjugation was characterized by proton nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR). The particles were characterized regarding to size, polydispersity index (PdI), zeta potential (ZP), crystallinity, encapsulation efficiency (EE) and morphology. Furthermore, stability, release profile, cytotoxicity and antioxidant activity of QT encapsulated or not in NLC, were evaluated. RMN spectrums confirmed the PF68 functionalization, exhibiting peaks attributed to PF68 and folate. Size, PdI and ZP of NCL were respectively 176.5 nm, 0.124 and -11.4, whereas F-NLC showed 197.9 nm of size, 0.160 of PdI and ZP of -17.5mV. The QT encapsulation did not affect these physical parameters. Low values of crystalization index (~28) might promote high EE of quercetin (~98%). NLC shows spherical shape, sustained release profile of QT and were stable for 330 days. IC50 of NLC-QT (87.4 ?g/mL) was smaller thanthe IC50 of F-NLC-QT (94.9 ?g/mL). This difference might be explained by the increase of NLC uptake by endocytosis mediated by folate receptor. NLC-QT and F-NLC-QT showed high antioxidant activity. Therefore, our results suggest that QT-F-NLC is a carry system with potential for future BC therapy that show size smaller than 200 nm, low PdI, high long-term stability, high EE and antioxidant activity, sustained release and cytotoxic to CB cells (RT4).

Um dos principais limitantes do desenvolvimento de protocolos eficientes de terapia gênica e vacinação com DNA provém da baixa eficiência de transferência gênica por parte dos vetores não-virais. Isso surge, principalmente, pela dificuldade de transporte de DNA estrangeiro do exterior para o núcleo das células alvo, devido à presença de inúmeras barreiras. O principal objetivo do trabalho realizado foi o desenvolvimento e caracterização de novos vetores não virais multifuncionais, capazes de realizar eficientemente a entrega de material genético (DNA plasmidial, pDNA) ao núcleo de células de mamífero (HeLa). Para esse fim, complexos binários (CBs) foram formados combinando-se pDNA à protamina ou proteínas recombinantes (TRP3) anteriormente desenvolvidas por nosso grupo. Foi também estudado o encapsulamento destes CBs em lipossomas catiônicos, formados pelos lipídios EPC:DOPE:DOTAP, gerando então complexos pseudo-ternários (CPTs). Os estudos com a protamina revelaram que os CPTs formados apresentavam tamanhos relativamente pequenos (< 123 nm) e com valores de potencial zeta, variando de +22,8 mV a +36,3 mV, nas várias relações mássicas (pDNA:protamina) estudadas (1:0,5; 1:0,7, 1:0,9 e 1:1). Os ensaios de transfecção mostraram que o CPT na relação 1:0,5 (CB) obteve o melhor nível de transfecção das células (17,1%) com um nível de viabilidade celular de 73,2%. Os ensaios utilizando a TRP3 mostraram que os CPTs formados adquiriram tamanhos pequenos (< 134 nm) e valores de potencial zeta entre +36,8 mV e +11,9 mV dependendo da relação mássica do CB (1:1, 1:30 e 1:60). Os ensaios de transfecção mostram que os CPTs formados com a TRP3 aumentaram o nível de transfecção em todas as relações de pDNA-TRP3 usadas (1:1; 1:30 e 1:60). Vale ressaltar que nas relações mássicas 1:30 e 1:60 houve um aumento significativo na transfecção (25,2% e 24,5%, respectivamente). Os ensaios de citotoxicidade mostram que os CBs não afetaram a viabilidade célular, entretanto quando combinada ao lipossoma foi observado aumento da citotoxicidade. Finalmente, os resultados indicam que a TRP3 associada ao lipossoma (CPTs) aumenta a eficiência de entrega de pDNA sugerindo um efeito sinérgico entre essas duas moléculas na superação das várias barreiras físicas, químicas e difusionais encontradas na célula. / One of the major challenges on the development of efficient protocols for gene therapy and DNA vaccination is the low efficiency of gene transfer by non viral vectors. This is mainly attributed to the fact that, during the traffic to target cells nuclei, plasmid vectors must overcome a series of physical, enzymatic and diffusional barriers. The objective of this work was the development and characterization of new multifunctional non-viral vectors, based on lipids and proteins, able to delivery efficiently the foreign pDNA (plasmid DNA) to the nucleus of mammalian cells. A model pDNA containing the reporter gene GFP was complexed to protamine or the recombinant protein (TRP3), forming binary complexes (BC). In addition, we studied the ability of the cationic liposomes (EPC:DOPE:DOTAP) to encapsulate this binary complexes to form pseudo-ternary complexes (PTCs). The studies of size (DLS) and zeta potential revealed that both proteins were able to condense pDNA to form small complexes (BCS and PTCs) (~100 nm) and positively charged (+11,9 mV a +36,8 mV), both interesting characteristics for transfections. However, the CPTs formed by TRP3 was that showed the highest transfections level (25,3%). The cytotoxicity assays indicated the BCs had a low effect on the cell viability. On the other hand, the biggest effect on cell death was found when PTCs were used. The results indicated the TRP3 associated to liposomes (PTCs) increased the delivery efficiency due to differences in the intracellular trafficking, suggesting a synergic effect between these different molecules in the vector in order to overcome the barriers found inside the cell.