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Analise filogenetica da familia Teiidae (Squamata, Reptilia), a ultra-estrutura de espermatozoide e a sua utilidade filogenetica

Teixeira, Ruscaia Dias 15 July 2003 (has links)
Orientadores: Sonia Nair Bao, Guarino Rinaldi Colli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:57:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Teixeira_RuscaiaDias_D.pdf: 17531780 bytes, checksum: 016a58d00cf880db59332986a7801fe0 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Vários estudos têm sido realizados entre os lagartos da família Teiidae, utilizando diversas linhas de evidência morfológicas, sem resolver as relações filogenéticas entre os gêneros dentro das subfamílias Teiinae e Tupinambinae. A utilização de conjuntos de dados morfológicos tradicionais ainda não utilizados (hemipênis, língua e escamas), e dados morfológicos não tradicionais (a ultra-estrutura de espermatozóide) pode dar subsídio para a construção de uma árvore filogenética mais resolvida e provável para o grupo. A proposta do presente trabalho é buscar uma melhor compreensão das relações de parentesco entre os gêneros de teiídeos, avançar os conhecimentos do novo conjunto de dados morfológicos não tradicionais, a ultra-estrutura de espermatozóide, e avaliar a utilidade filogenética desta nova fonte de caracteres no nível genérico. Os estudos comparativos da ultra-estrutura de espermatozóide indicam altos níveis de variabilidade inter e intra-genérica, sugerindo o uso de espécies como táxons terminais, a fim de melhorar as estimativas da filogenia da família. Apesar da filogenia derivada dos conjuntos de dados morfológicos tradicionais e ultraestrutura de espermatozóide apresentar muitas incongruências com os estudos prévios, ela reflete uma melhor estimativa da história filogenética da família devido ao grande número de caracteres empregados. Comparações do grau de congruência entre as filogenias derivadas pelo conjunto de dados morfológicos tradicionais e a ultra-estrutura de espermatozóide, indicam que a ultra-estrutura de espermatozóide é um bom indicador de filogenia da farm1ia Teiidae, apresentando poucas regiões conflitantes e de pouco suporte com a topologia baseada nos conjuntos de dados morfológicos tradicionais / Abstract: Several studies have attempted to clarify the relationship among the teiid genera, based on several types of morphological data sets. Therefore, the relationships among teiid genera are not completely solved. Increase the number of characters, using new sources of characters, the sperm ultrastructure, and additional traditional morphological characters such as hemipenis, scales, and tongue were included to possibly improve the resolution of Teiidae phylogenetic hypotheses. The proposals of this work are (1) to clarify the phylogenetic relationships of teiids, (2) to expand the knowledge on the new data set, sperm ultrastructure, investigating the level of variability in sperm ultrastructure, in order to reveal intergeneric stability of characters, and (3) to evaluate the usefulness of sperm ultrastructure characters in phylogenetic reconstruction at the generic level. Comparative studies among teiid genera indicate high levels of inter and intra generic levels of variability in sperm ultrastructure characters, suggesting a spliting of genera in species as terminals, in order to give more accurate estimates of phylogeny. Despite the fact that phylogeny derived from the combined data show high levels of incongruence with those of previous studies, it reflects favorably the evolutionary history of the family due to the high number of characters applied (those data sets used in the previous hypotheses, combined with meristic, tongue, hemipenis and sperm ultrastructural data), surely improving the estimates of teiid relationships. Sperm ultrastructure may be a good indicator of phylogeny, producing topologies with major areas in congruence with the traditional morphological phylogeny, having on1y few incongruent areas weak1y supported by the traditional topology / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural
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Estudo ultraestrutural e citoquimico da espermiogenese de percevejos da familia pentatomidae (Hemiptera)

Fernandes, Adrienne de Paiva 26 February 1999 (has links)
Orientador: Sonia Nair Bao / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T20:35:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernandes_AdriennedePaiva_M.pdf: 6560480 bytes, checksum: cb5545c7c98c2ac29b30cb2ab3aa4c47 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Percevejos fitófagos (Hemiptera, Pentatomidae) são as principais pragas de colheitas economicamente importantes ao redor do mundo. Entre os pentatomídeos pragas de leguminosas, o percevejo verde Nezara viridula talvez seja o mais importante, bem como as espécies do gênero Acrosternum. Portanto, a caracterização estrutural e ultraestrutural do espermatozóide destes insetos poderá ser importante futuramente para programar e direcionar o controle bioquímico destas pragas, bem como para a manipulação genética de populações através de machos estéreis e semi-estéreis. A espermiogênese assim como o espermatozóide de Acrosternum aseadum e Nezara viridula são muito semelhantes e portanto, foram descritos conjuntamente. A espermiogênese envolve a elongação nuclear, a condensação da cromatina, a formação do acrosoma, e o desenvolvimento flagelar, com a formação do axonema bem como dos derivados mitocondriais. Durante as fases iniciais da espermátide, o núcleo se parece com o núcleo de uma célula somática. O citoplasma circundante apresenta um complexo de Golgi bem desenvolvido, o qual é impregnado por tetróxido de ósmio - iodeto de potássio no "cis Golgi network", em cisternas cis e em várias vesículas do "trans Golgi network". O produto de reação de atividade fosfatase ácida e glicose-6-fosfatase é observado principalmente na porção "1rans network" do complexo de Golgi. O complexo de Golgi contribui para a formação do acrosoma. Primeiro um grânulo pró-acrosomal é formado pela fusão de vesículas oriundas do Golgi. Este grânulo se ancora no núcleo e sofre diferenciação simultaneamente com o núcleo e o flagelo. O núcleo sofre uma condensação gradual da cromatina com um aumento em sua ele1rondensidade. Durante a sua compactação a cromatina apresenta um aspecto fibrilar, o qual evolui para um arranjo paracristalino e então se toma muito compactada e ele1ron densa. Em espermátides jovens pode ser visto o adjunto do centriolo localizado posteriormente ao núcleo, na região de implantação do flagelo. Próximo ao adjunto do centriolo observamos um bastão ele1ron denso, o qual apresenta marcação positiva com anticorpos para as tubulinas a, J3 e total, e cuja a marcação desaparece nos estádios finais da espermiogênese, sugerindo uma função como cen1ro organizador de microtúbulos. O axonema da espermátide contém uma variedade de elementos tubulares que persistem no espermatozóide. O axonema apresenta o padrão de 9+9+2 microtúbulos que mos1ram produtos de reação de atividade fosfatase ácida, glicose 6-fosfatase e tiamino pirofosfatase. Dois derivados mitocondriais, contendo duas es1ruturas paracristalinas flanqueiam o axonema. Esses derivados mitocondriais são conectados ao axonema por pontes, que juntamente com as estruturas paracristalinas são características sinapomórficas dos espermatozóides dos Heteroptera. Nas fases iniciais da espermiogênese pode ser observado o produto de reação da atividade enzimática para glicose-6-fosfatase no nebenkem e para cito cromo C oxidase nas cristas dos derivados mitocondriais. Nos estádios finais de diferenciação algum produto de reação da atividade enzimática para tiamino pirofosfatase é observado nas estruturas paracristalinas. Assim, podemos observar que durante a espermiogênese de Acrosternum aseadum e Nezara viridula as espermátides sofrem modificações morfofuncionais que têm a participação do sistema complexo de Golgi-retículo endoplasmático, bem como de várias fosfatases e oxidases / Abstract: Phytophagous stink bugs (Hemiptera, Pentatomidae) are the main pests of economicaly important crops throughout the world. Among the several pentatomid pests of legume crops, the southem green stink bug Nezara viridula is perhaps the most imp0l1ant ones as well as the specie A. aseadum of the genus Acrosternul11. Thus, the structural and ultrastructural characterization of these insects spenl1atozoa will be velY imp0l1ant to programmes directed towards the biochemical control of insect pests and genetic manipulation of populations through sterile and semi-sterile males. The spelmiogenesis as well as the spennatozoon of Acroslernul11 aseadul11 and Nezara viridula were found to be very similar and were described together. The spenniogenesis involves nuclear elongation, chromatin condensation, acrosomal fOlmation, and flagellar development, along with fonnation of the axoneme as well as mitochondrial derivatives. During the early spennatid phase, the nucleus resembles that of a somatic cell. The sUITounding cytoplasm contained a well developed Golgi complex which was impregnated with tetroxide osmium potassium iodide on the cis Golgi network, cis cistemae and in several vesicles of the trans Golgi network. The acid phosphatase and glucose-6-phosphatase reaction products were observed mainly in the trans-most pOl1ion of the Golgi complexo The Golgi complex contributes to the formation of the acrosome. Initially, a proacrosomal granule is formed; it is attached to the nucleus and undergoes differentiation simultaneously with the nucleus and the flagellum. The nucleus undergoes a gradual chromatin condensation with an increase in its electron density. During its condensation the chromatin presents a fibrillar aspect which turns into a paracristalline arrangement and then becomes very compact and electron dense. In ear1y spennatids the centriolar adjunct could be seen located posterior to the nucleus in the region of flagellum implantation. Near the centriolar adjunct we observed an electron dense rod that presents positive labelling to antibodies against a, J3 and total tubulin, and this labelling disappears in the final stages of spermiogenesis, suggesting that this structure could be a microtubule organizing center. The spennatid axoneme contained a variety of tubular elements that persists in the spennatozoon. The axoneme has a 9+9+2 microtubular pattern that is reactive to acid phosphatase, glucose-6-phosphatase and thiamine pyrophosphatase. Two mitochondrial derivatives, containing two paraclystalline structures, flanked the axoneme. These mitochondrial derivatives are connected to the axoneme by bridges that together with the paracrystalline structures are synapomorphic characteristics of Heteropteran spermatozoa. ln the early phase of spenniogenesis the glucose-6 phosphatase reaction product was found on the N ebenkem; and cytocht.ome-C oxidase reaction product occurs on the cristae of the mitochondrial derivatives. Ln the final stages of differentiation some reaction product for thiamine was observed on the paracrystalline structures. In conclusion, it is clear that during spermiogenesis of AcroslernU111 aseadum and Nezara viridula, the spermatids undergo morphofunctional modification involving participation of the Golgi complex-endoplasmic reticulum system, as well as of several phosphatases and oxidases / Mestrado / Mestre em Biologia Celular
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Estudo citogenetico e da ultra-estrutura do espermatozoide de especies do genero Colostethus (Anura-Dendrobatidae)

Veiga-Menoncello, Ana Cristina Prado, 1972- 25 February 2005 (has links)
Orientador: Shirlei Maria Recco-Pimentel / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:04:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Veiga-Menoncello_AnaCristinaPrado_D.pdf: 23766572 bytes, checksum: 45ab1d9c3301ffe6e4d15debeccdb147 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A família Dendrobatidae é formada por cerca de 230 espécies agrupadas em 9 gêneros. Colostethus é o maior deles com 128 espécies descritas. Alguns grupos de espécies foram propostos para o gênero, os quais, embora utilizados, foram bastante criticados devido à ausência de apomorfias que suportassem tais agrupamentos. Assim, as relações de parentesco intragenéricas continuam incertas. Neste trabalho, algumas espécies do gênero Colostethus foram estudadas através da análise citogenética e da ultra-estrutura do espermatozóide, a fim de contribuir para um melhor entendimento das relações de parentesco intragenéricas, bem como taxonômicas. Os cariótipos das espécies Colostethus brunneus, C. marchesianus, C. caeruleodactylus, Colostethus sp. 1 (aff. marchesianus), Colostethus sp. 2 (aff. marchesianus), Colostethus sp.(aff. trilineatus) e Colostethus sp. foram analisados pelos métodos de coloração convencional, bandamento C e impregnação por prata. Quando necessário, a técnica de hibridação in situ com sonda de DNAr também foi empregada. A análise da ultra-estrutura do espermatozóide foi realizada em C. nidicola, C. stepheni e em todas as espécies mencionadas acima, com exceção de Colostethus caeruleodactylus e Colostethus sp. 2 (aff. marchesianus). Os dados citogenéticos revelaram a presença de 24 cromossomos em C. brunneus, enquanto as outras espécies apresentaram 22 cromossomos. Diferenças no padrão de heterocromatina foram observadas nos cariótipos das espécies analisadas. No entanto, as espécies de Colostethus com 2n = 22 apresentaram uma banda fracamente corada no braço longo do par 7, a qual possivelmente seja uma homeologia entre estas espécies. A região organizadora do nucléolo (NOR) foi localizada no braço longo do par 4 das espécies C. marchesianus, Colostethus sp. 1 (aff. marchesianus), C. caeruleodactylus e no braço curto de Colostethus sp. (aff. trilineatus). Em C. brunneus, foi encontrada no braço longo do par 3, o qual possui a mesma morfologia do par 4 das referidas espécies. Colostethus sp. 2 (aff. marchesianus) e Colostethus sp., apresentaram a NOR em pares distintos. NORs adicionais e heteromorfismo de tamanho também foram observados em algumas das espécies, os quais puderam ser confirmados após a hibridação in situ com sonda de DNAr. Porém, em um indivíduo de Colostethus sp. 42 (aff. marchesianus) esta técnica evidenciou um sítio adicional, homólogo à sonda de DNAr, nunca observado pelo método AgNOR. As diferenças no número de cromossomos, distribuição de heterocromatina e localização da NOR, possibilitaram a distinção entre as espécies estudadas. A análise da ultra-estrutura do espermatozóide revelou a presença de espermatozóides biflagelados em todas espécies, com exceção de C. stepheni. Considerando-se as estruturas do complexo acrossomal e do aparato flagelar, os espermatozóides das espécies analisadas assemelham-se aos dos bufonóides. Além da presença de um único flagelo, o espermatozóide de C. stepheni também diferiu do padrão observado nas outras espécies, por apresentar mitocôndrias dentro da membrana ondulante, a qual juntamente com a bainha axial mostraram-se bastante dilatadas. Os resultados obtidos através da análise citogenética foram úteis na distinção entre as espécies estudadas, uma vez que estas possuem grande similaridade morfológica, o que dificulta a identificação. Por outro lado, a análise ultra-estrutural contribuiu para o esclarecimento de questões intragenéricas, pois C. brunneus. C. marchesianus, Colostethus sp. 1 (aff. marchesianus) e Colostethus sp. (aff. trilineatus), pertencentes ao grupo ¿brunneus¿ possuem espermatozóides biflagelados, enquanto que em C. stepheni (grupo ¿alagoanus¿) é uniflagelado. Essas espécies estudadas do grupo ¿brunneus¿, são, possivelmente, proximamente relacionadas à Allobates femoralis, cujo espermatozóide também possui dois flagelos, enquanto C. stepheni está mais distante, o que está de acordo com estudos de filogenia molecular. Portanto, dados ultra-estruturais obtidos até o momento não concordam com a criação do grupo ¿trilineatus¿, recentemente proposto, a partir da união dos grupos ¿brunneus¿ e ¿alagoanus¿ / Abstract: The family Dendrobatidae consists of approximately 230 species that are grouped in nine genera. Colostethus is the largest genus with 128 nominal species. Some Colostethus species groups have been proposed and, although used, have been criticized because of the lack of apomorphic characters to support the species groupings. In this work, we examined the cytogenetics and sperm ultrastructure of Colostethus as part of an investigation into the taxonomic and intrageneric relationships of this genus. The karyotypes of Colostethus brunneus, C. marchesianus, C. caeruleodactylus, Colostethus sp. 1 (aff. marchesianus), Colostethus sp. 2 (aff. marchesianus), Colostethus sp. (aff. trilineatus) and Colostethus sp. were analyzed using conventional Giemsa staining, C-banding and Ag-NOR techniques. Fluorescence in situ hybridization (FISH) with an rDNA probe was also used when necessary. The ultrastructure of spermatozoa from all species, except for Colostethus caeruleodactylus and Colostethus sp. 2 (aff. marchesianus) and including C. nidicola and C. stepheni, were also examined. Cytogenetic analysis showed that C. brunneus had 24 chromosomes whereas the other species had 2n = 22 chromosomes. Variations in the Cbanding patterns of the karyotypes were seen in all of the species. However, the Colostethus species with 2n = 22 showed a faintly stained band on the long arm of pair 7, which probably represent a homeology among these species. The nucleolus organizer region (NOR) was located on the long arm of pair 4 of C. marchesianus, Colostethus sp. 1 (aff. marchesianus) and C. caeruleodactylus and on the short arm of the same pair of the Colostethus sp. (aff. trilineatus). In C. brunneus, the NOR was located on the long arm of pair 3, which was morphologically similar to pair 4 in the other species. In Colostethus sp. 2 (aff. marchesianus) and Colostethus sp. the NOR was located on different chromosomal pairs. Additional NOR sites and size heteromorphism were also seen in some species, and were confirmed by FISH with an rDNA probe. However, in one specimen of Colostethus sp. 2 (aff. marchesianus), FISH revealed an additional site that was never seen by silverstaining. The difference in chromosomal number, heterochromatin distribution and NOR localization, made it possible to distinguish among the species. Ultrastructural analysis of the spermatozoa showed the presence of biflagellated spermatozoa in all species, except for C. stepheni. The acrosomal complex structure and flagellar apparatus of the spermatozoa of the species examined resembled those of bufonoids. In contrast to the flagella of the other species, the single flagellum of C. stepheni spermatozoa contained mitochondria in the undulating membrane and a very thickened axial sheath. The results of the cytogenetic analysis were useful for distinguishing among these morphologically similar species. Similarly, ultrastructural analysis of the spermatozoa helped to elucidate intrageneric relationships since C. brunneus, C. marchesianus, Colostethus sp. 1 (aff. marchesianus) and Colostethus sp. (aff. trilineatus), which belonged to the ¿brunneus¿ group, had biflagellate spermatozoa, whereas C. stepheni (¿alagoanus¿ group) had a spermatozoa with a single flagellum. The species in the ¿brunneus¿ group, were probably closely related to Allobates femoralis, which has biflagellate spermatozoa, whereas C. stepheni was not closely related, in agreement with molecular phylogenetic studies. The ultrastructural data obtained so far do not support the creation of the ¿trilineatus¿ group recently proposed based on the unification of the ¿brunneus¿ and ¿alagoanus¿ groups / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural
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Influencia da elevação da temperatura testicular sobre o complexo DNA-proteina e outras caracteristicas de espermatozoides de coelho (Oryctolagus cuniculus)

Beletti, Marcelo Emilio 02 March 1998 (has links)
Orientador: Maria Luiza Silveira Mello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T19:22:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beletti_MarceloEmilio_D.pdf: 6862374 bytes, checksum: b0419773edf5bebb1129e89c11705ca9 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: A influência da elevação da temperatura testicular sobre o complexo DNA-proteína em espermatozóides e outras características que defmem a qualidade do sêmen foi pesquisada em coelhos submetidos por três dias ao criptorquidismo experimental e acompanhada por diversos períodos, cessado o "stress". Constataram-se com relação aos espermatozóides, decréscimo em vigor, motilidade e concentração, bem como aumentos em patologias de cabeça e cauda e em anomalias nos complexos DNA-proteína, reveladas pelo método de "metacromasia induzi da" e pela reação de F eulgen. F oram encontradas variações individuais de resposta ao tratamento, mas também em controles, embora nestes com menor intensidade. Observações de testículos e epidídimos de parte dos coelhos experimentais com microscópio de luz e microscópio eletrônico de transmissão indicaram uma degeneração testicular intensa, porém reversível, onde aparentemente as zônulas de oc1usão entre células de Sertoli e o compartimento basal dos túbulos seminíferos não foram afetados. Para um tempo de observação de 61 dias cessado o criptorquidismo, os parâmetros seminais à exceção da concentração espermática, retomaram aos seus respectivos valores normais. O aumento de anomalias nos complexos DNA-proteína com o criptorquidismo revelou-se relativamente tardio, cessado o "stress", e não muito intenso, embora tenha atingido até um valor de 20 vezes o normal em caso isolado / Abstract: The effect of increase in testis temperature on spermatozoal DNA-protein complexes and other characteristics was studied in rabbits subjected to three days of experimental cryptorchidism and accompanied along several periods, after ceased the stress. A decrease in strength, motility and concentration as well as an increase in head and tail pathologies and DNA-protein anomalies revealed by "induced metachromasy" and Feulgen reaction were observed in the sperm cells. Individual variation in these parameters as an answer to treatment was observed. This was also found to occur in controls, though with a much lower intensity. Light and transmission electron microscopy of the testis and epididymis of part of the experimentals indicated an intense testicular degeneration, though reversible. Apparently the "zonula occludens" of the Sertoli cells and the basal compartment of the seminiferous tubules were not affected. After 61 days ceased the cryptorchidism the seminal parameters, with the exception of the spermatic concentration, returned to normal values. The increase in DNA-protein anomalies with cryptorchidism occurred relatively late and was not very intense once ceased the stress. However it has reached a value up to 20 times the normal values in one isolated case / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Ciências
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Caracterização ultra-estrutural de espermatozoides eupirenes e apirenes de Alabama argillacea Hubner, 1818 (lepidoptera, Noctuidae), ao nivel de testiculo edas vias genitais dos imagos macho e femea ate a espermateca

Medeiros, Marilia 23 June 1986 (has links)
Orientador: Mary Anne Heidi Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Isntituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T06:55:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Medeiros_Marilia_M.pdf: 27036109 bytes, checksum: 9ab7c25dd732a076b47302a356c0862b (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: Imagos machos e fêmeas de Alabama ahg_lla_ea foram dissecados para o estudo da morfologia de seus aparelhos re­ produtores. Os espermatozóides nesses aparelhos foram subm_ tidos ao processo de contrastação negativa e a diferentes me todos de fixação para microscopia eletrônica de transmissão. Os objetivos básicos de nosso trabalho foram: a) caracterizar ultra-estruturalmente, ao nivel do testicu­ 10, os 2 tipos normais de espermatozóides (eupirenes e apire nes) b) descrever, ao nIvel de 6rgãos extra-testiculares dos tra tos genitais de mariposa macho e fêmea, a estrutura fina das modificações sofridas pelos espermatozóides tIpicos e atipi­ coso Ao nivel do testiculo, os espermatozóides eupirene_ (nucleados) e apirenes (anucleados) apresentam-se dispostospa ralelamente em feixes organizados no interior de cistos sep_ rados e bem distintos entre si. Os espermatocistos possuem, em geral, 256 _ 1 espermatozóides, porém há cistos ar:Ürenes com 2 a 3 vezes mais espermatozóides que os eupirenes. Os espermatozóides apirenes intra-testiculares, me nores que os eupirenes, são verdadeiros aparatos flagelares. Suas porções anteriores anucleadas apresentam-se sob a forma de um tronco de cone, com um capuz elétron-denso diferencia­ do que envolve 1 a 2 coroas de microtúbulos. O flagelo dos espermatozóides anucleados é constituido por: a) axonema do tipo 9+9+2, tipico de insetos em geral, com mi crotúbulos acessórios e centrais de conteúdo pouco elétron­ denso; b) 2 pequenos derivados mitocondriais dispostos ao longo da cauda, de tamanho e estrutura semelhantes (região medular com área de natureza paracristalina), que terminalizam jun­tos antes da porção terminal; c) membrana plasmática trilaminar envoltória. Cada um dos espermatozóides eupirenes (nucleados) intra-testiculares é recoberto, total ou parcialmente, por uma coroa radial de apêndices laciniados, desde a cabeça a­ té porções mais posteriores da cauda. Ao longo de todo es­ permatozóide, existe um outro tipo de apêndice, bem diferen ciado dos anteriores, chamado reticular ou corpo satélite. A porção cefálica dos espermatozóides típicos é composta de: a) um núcleo longo, delgado e muito elétron-denso; b) uma estrutura tubular de paredes elétron-densas adjace_ te ao núcleo; e c) um corpúsculo basal atípico abaixo da vesícula tubulare adjacente ã porção basal do núcleo. Não foi identificada ne nhuma estrutura acrosômica. o flagelo de espermatozóides eu pirenes é formado por um axonema de padrão organizacional 9+9+2, como o dos apirenes, porém os 2 microtúbulos cen­ trais são mais elétron-densos que aqueles do axonema de es­ permatozóides atípicos, e os 9 microtúbulos acessórios apre sentam conteúdo fortemente elétron-denso que se cora mais tensamente com vermelho de rutênio, o que indica a presença de glicoproteínas e/ou glicosaminaglicanas. Ao longo do a xonema, dispõem-se 2 derivados mitocondriais de tamanhos di ferentes com arranjo periódico de "cristas" na camada corti­ cal. o maior se estende por quase todo o flagelo, enquanto que o menor e encontrado somente em regiões mais posteriores e terminaliza antes do maior. Na porção terminal, sem a pré sença de derivados mitocondriais, o axonema se desorganiza completamente. A membrana plasmática envoltória possui es­ trutura trilaminar típica. Ao serem liberados do testículo para os ductos g_ nitais, os espermatozóides eupirenes são mantidos em feixes, ao redor dos quais se dispõem os apirenes. Os apêndices la­ ciniados não são mais detectados ao redor dos espermatozói­ des típicos, mas persiste o reticular situado por fora de u­ ma complexa bainha envoltória. Os espermatozóides apirenes extra-testiculares também apresentarn bainha envoltória com nu mero variado de camadas, recoberta por pequenos filarnentos e mais simples que a dos eupirenes. Em órgãos (bursa copulatrix e espermateca) do tra­ to genital de fêmeas inseminadas, os espermatozóides anuclea dos apresentam estrutura semelhante àquela observada nos duc tos genitais do macho, mas os nucleados não mais se dispõem em feixes e nota-se a total ausência do apêndice reticularna região da placa densa na bainha. externa, bem como evidente desvio de todo envoltório em relação ao espermatozóide. Os esperma tozóides apirenes permanecem ao nível da espermateca, onde de eneram, sem sair de seus envoltórios. Os eupirenes abando­ nam suas bainhas e saem da espermateca para fertilizar os ó­ vulos. O papel dos espermatozóides apirenes parece estar re lacionado com o transporte dos eupirenes nos duetos genitais masculinos e da bursa copulatrix até a espermateca da fêmea / Abstract: Male and female moths of Alabama a_gillaeea were dissected out for studying the reproductive systems morphology. The spermatozoa were negative stained and fixed by different methods to transmission electron microscopy. The basic aims of our study were the ultrastructure description of the two normal morphological types of spermatozoa - eupyrene and apyrene - in the testes and the differentiaton of the both types of sperm during the passage through the male and female ducts. In the testis, the eupyrene and apyrene sperrnatozoa are closely associated and aligned in bundles into distinct cysts. The spermatocyst have, in general, 256_ 1 spermatozo_ but some apyrene cysts have a double or triple number of sperm. The intratesticular atypical spermatozoa are smaller than the typical ones. Their anucleated anterior regions seem like truncated cones with amost anterior electron dense cap envolving one or two concentric rnicrotubules rows. The flagellun of anucleated sperm shows an insect typical axoneme 9+9+2 which central and accessory rnicrotubules have a slighter electron dense lumen. The two small mi tochondrial derivatives along the tail have similar size and structure and finish together before the endpiece tail. A typical unit membrane is observed around the axoneme. The eupyrene testicular spermatozoa are surrounded by a radial mantle of lacinate appendages along almost alI their length. There is another type of appendage that runs along the nucleated sperm denominated reticular appendage or satellite body. The head region of the eupyrene sperm has along, slender and very electron dense nucleus, atubular structure with electron dense wall lying near to the nucleus and an atypical basal body below the tubular structure and adj acent to the nucleus basal region. None acrosome s.tructure was observed. The eupyrene flagellun has an axoneme 9+9+2 like that one from apyrene sperrn.The two axoneme central tubules have more electron dense lumina than the ones of the atypical sperm and the electron dense cores of the nine accessory microtubules stain strongly with ruthenium red, probably indicating the presence of glycoproteins andjor glycosaminoglicans. There are two mitochondrial derivatives along the axoneme with different sizes and lengths which . show periodic arranged and modified cristae in their cortical region. One of mitochondrial derivatives is larger and extends further posteriorly than the other. In the endpiece tail, without mitochondrial derivatives, the axoneme is completely disorganized. The plasma membrane has a typical trilaminar organization. After releasing from the testis to the genital ducts,the eupyrene spermatozoa of the same cyst remain associated in bundles. The apirene sperm are randomly arranged between the eypirene bundles. The lacinate appendages are lacking, but the reticular one is still observed along a new complex sheath around the nucleated sperm. The anucleated spermatozoa are surrounded by a less elaborated sheath with different number of concentric rings of material recovered by small filamentous extensions. In the bursa copulatrix and receptaculum seminis of inseminated females, the anucleated spermatozoa are similar to those ones observed in the male genital tract. The nucleated sperm are now disassociated and the reticular appendage is completely lacking on the dense region in the outer sheath, which has óndergane a rotation from its previous position in regard to the internal components of the typical sperm. The atypical spermatozoa remain in the spermatheca where theydegenerate, withaut leaving their awn sheaths.The typical anes hatch from their sheaths and fertilize the eggs. The role af apyrene spermatozoa seems to be related with the transpart af the eupyrene sperm in the male genital ducts and from compulatory pouch to the female spermatheca / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Labilidade a hidrolise acida de alguns diferentes complexos DNA-proteina de espermatozoides

Silva, Maria Jose Lima da 12 December 1984 (has links)
Orientador : Maria Luiza Silveira Mello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T12:11:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_MariaJoseLimada_D.pdf: 2843931 bytes, checksum: 344a27bcd26f8370e4d444434ff98e09 (MD5) Previous issue date: 1984 / Resumo: A cinética de hidrólise de Feulgen foi estudada em espermatozóides de composição diferente em complexos DNA - proteína. Espermatozóides de Bos taurus (proteína nuclear rica em arginina e cistina), Pichropus bergi, Triatoma infestans (proteína nuclear rica em arginina ), Lytechinus variegatus e Apis mellifera ( proteína nuclear rica em lisina ) foram submetidos à reação de Feulgen, variando-se a fixação e os tempos de hidrólise. Valores Feulgen ¿ DNA foram, então, obtidos por citofotometria de varredura automática. Os resultados demonstraram diferenças na cinética de hidrólise em função dos diferentes complexos DNA ¿ proteína presentes na cromatina. Diferenças nos padrões de cinética em função da fixação foram bem nítidas para espermatozóides de touro, gafanhoto e barbeiro e menos intensas para espermatozóides de ouriço-do-mar e abelha. As diferentes cinéticas de hidrólise da cromatina de espermatozóides de barbeiro comparada à de gafanhoto, e de ouriço-do-mar, comparada à de abelha, sugerem que, embora as proteínas nucleares básicas "germinativas" dos dois primeiros sejam ricas em arginina e as dos dois últimos sejam ricas em 1isina, há diferenças nessas proteínas conforme a espécie considerada. A depurinação do DNA foi a1cançada mais rapidamente para espermatozóides de T. infestans ( 20 min. ) e P. bergi ( 10 min. ) quando fixados em etanol-ácido acético. Os espermatozóides anômalos de touro quando fixados em etanol-ácido acético apresentaram uma depurinação mais rápida ( 30 min. ) que os normais ( 1 h.) indicando sua maior labilidade frente à hidrólise ácida. Isto se deve certamente a anomalias de sua proteína nuclear básica ¿germinativa¿. Dos materiais fixados em formol, o máximo de depurinação alcançado mais cedo o foi em material de touro ( espermatozóides normais e com anomalias de cabeça) (30 min.), seguidos de P. bergi, T. infestans, L. variegatus ( todos com 1 h. de hidrólise ) e finalmente Apis mellifera ( 2h. de hidrólise ). A presença de picos secundários na porção descendente das curvas de hidrólise de espermatozóides de gafanhoto e ouriço-do-mar indicam para estes mais de um tipo de complexo ácido apurínico-proteína. Os espermatozóides cuja proteína nuclear "germinativa" é do tipo rica em arginina e/ou, cistina apresentam um complexo ácido apurínico-proteína mais facilmente solubilizável. Dadas as diferenças na cinética de hidrólise da cromatina de espermatozóides portadores de proteína nuclear ¿germinativa¿ diferente, este tipo celular não é recomendável como controle haplóide em avaliações de conteúdo Feulgen DNA de células somáticas diplóides e poliplóides / Abstract: The Feulgen hydrolysis kinetics was investigated in spermatozoa with different composition in DNA ¿ protein complexes. The species used were : Bos taurus ( arginine and cystine-rich nuclear protein ), Pichroplus bergi, Triatoma infestans ( arginine-rich nuclear protein ), Lyteahinus variegatus and Apis mellifera ( lysine-rich nuclear protein ). The spermatozoa were subjected to Feulgen's reaction, by varying the fixative type and the hydrolysis times. Feulgen - DNA values were obtained with an automatic scanning cytophotometric procedure. Differences were demonstrated in the hydrolysis kinetics as a function of differences in composition of the DNA - protein complexes being present in the spermatozoon chromatin. Differences in the profiles of Feulgen hydrolysis curves, having for basis the fixation, were rather clear for bull, grasshopper and blood-sucking insect spermatozoa than for sea-urchin and bee spermatozoa. The different hydrolysis kinetics of chromatin of bloodsucking insect spermatozoa compared to that of grasshopper, sea-urchin and bee sperm cells suggests that, although the first two materials contain an arginine-rich ¿germinative¿ protein and the latter two ones contain a lysine-rich protein, these differ to each other. The DNA depurination was obtained more quickly for T. infestans ( 20min. ) and P. bergi. ( 10min. ) spermatozoa when they were fixed in the ethanol-acetic acid mixture.. Morphologically anomalous bull spermatozoa fixed in the EA mixture presented a quicker depurination ( 30 min ) as compared to the normal cells ( 1 h.). The fast lability to acid hydrolysis in the abnormal cells is certainly due to anomalies in their basic nuclear ¿germinative¿ protein. In the formalin fixed materials the maximal depurination was obtained earlier 1n bull spermatozoa ( 30min. ) followed by sperm cells of P. bergi, T. infestans, L. varie gatus ( all of them one-hour hydrolysis ) and finally Apis mellifera ( two-hours hydrolysis ). The presence of secondary peaks at the descending branch of the hydralysis curves of grasshopper and sea-urchin spermatozoa, indicate for these, more than one kind of apurinic-acid protein complexes. The spermatozoa bearing arginine-and/or cystine-rich nuclear protein contain a more easily soluble apurinic acid protein complex. Due to the differences in hydrolysis kinetics chromatin in spermatozoa bearing different nuclear ¿geminative¿ proteins, this cellular type is not commended as haploid control for evaluation of Feulgen - DNA contents diploid and polyp1oid somatic cells / Doutorado / Genetica / Doutor em Ciências
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Efeito 'in vitro' da adição do levonorgestrel sobre a concentração intracelular de calcio em espermatozoides de homens ferteis

Santis, Luciana Helena de 27 January 2006 (has links)
Orientadores: Luis Antonio Violin Dias Pereira, Luis Guillermo Bahamondes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T16:12:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santis_LucianaHelenade_M.pdf: 1888365 bytes, checksum: c15bc77fd1c517ee962df896bde92224 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O espermatozóide é uma célula altamente especializada, uma vez que apresenta diferenciações morfofisiológicas que garantem o sucesso da fecundação. Com o objetivo de adquirir a capacidade de fecundação precisam passar por três processos seqüenciais, maturação epididimária, capacitação e reação acrossômica (RA). A capacitação é um processo que acontece no trato reprodutor feminino e define-se como uma mudança bioquímica na membrana plasmática do espermatozóide, sendo a presença de progesterona e o aumento na concentração intracelular do cálcio ('Ca POT +2¿) eventos característicos e obrigatórios para a posterior RA. O levonogestrel (LNG) é um progestágeno sintético, semelhante a progesterona, o qual tem sido usado como contraceptivo feminino, seja na contracepção de emergência (CE), nas pílulas contraceptivas combinadas ou com o dispositivo intra-uterino (DIU). Entretanto, na literatura não há dados que relacionem a eficácia contraceptiva do lenovogestrel com possíveis efeitos deste hormônio sobre os espermatozóides humanos. Assim, com o objetivo de adicionar dados a respeito do mecanismo de ação contraceptiva do LNG, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito de 5 concentrações de LNG, comparáveis as concentrações encontradas no plasma sanguíneo de mulheres, após a ingestão de LNG sob a forma de (CE) com a concentração intracelular do cálcio em espermatozóides capacitados de homens férteis. Um total de 24 amostras de sêmen, provenientes de 4 homens férteis foram avaliadas. Os espermatozóides foram selecionados através de um gradiente de Percoll, e foram submetidas a um período de capacitação. Às amostras foi adicionado o corante Fura2/AM e a seguir estas foram expostas às concentrações de 8, 10, 14, 1.000 e 10.000 ng/mL de LNG e a dois controles, um positivo e outro negativo, sendo respectivamente a progesterona (32 'mu' M = 11.000 ng/mL) e a meio de cultivo human tubal fluid (HTF). A seguir as amostras foram avaliadas através da espectrofotometria de fluorescência, com exitação de 340 nm e emissão de 510 nm. A taxa de fluorescência foi convertida em medidas de concentração intracelular de cálcio ([('Ca POT 2+¿]i), utilizando a equação de Grynkiewicz et al. (1985), a qual demonstrou que as concentrações de 8, 10, 14 e 1.000 ng/mL de LNG foram capazes de induzir um aumento na [('Ca POT 2+¿]i significativamente maior quando comparados ao obtido com HTF, e significativamente menor que ao obtido com progesterona (o indutor natural), excetuando-se a concentração de 10.000 ng/ml (32 'mu' M) de LNG, a qual foi estatisticamente similar que a progesterona 11.000 ng/ml (32 'mu' M). Assim, é possível sugerir que o LNG in vitro, em baixas concentrações, aumente a [('Ca POT 2+¿]i nos espermatozóides. No entanto, este mecanismo, de maneira isolada, não deva ser o responsável pela indução da RA. Entretanto a [('Ca POT 2+¿]i obtida através de altas concentrações de LNG (10.000 ng/ml) pode ser sim, um possível mecanismo de ação do LNG como droga contraceptiva / Abstract: The spermatozoa is a highly specialized cell because it contains morfophysiological modifications that guarantees fecundation success. Spermatozoa must undergo three sequential changes before they acquire their fertilizing capacity: maturation in epididymis, capacitation and acrosome reaction (RA). Capacitation is a process that takes place in the female reproductive tract and is defined as a biochemical modification on the spermatozoa plasmatic membrane. The presence of progesterone (P) and the intracellular calcium concentration increase inside the spermatozoa are typical and obligatory events in the capacitation stage for further RA. Levonogestrel (LNG) is a synthetic progestin, similar to P, which has being used as a female contraceptive in several manners, among them they are: emergency contraception (EC), contraceptive pills combine and with the intrauterine system (IUS). Nevertheless, there are no available data or the scientific literature that correlate LNG contraceptive efficacy with possible effects of the hormones over human spermatozoa. Therefore, to add data over the contraceptive action mechanism of LNG, the aim of this study was to evaluate the effect of 5 concentrations of LNG somes comparable to the levels found in serum following ingestion of LNG as EC on the calcium intracellular concentration (['Ca POT 2+¿]i) rates of capacitated spermatozoa of fertile men. A total of 24 semen samples from 4 fertile men were evaluated. The spermatozoa were selected by Percoll gradient, following incubation with human tubal fluid medium supplemented with bovine serum albumin (HTF/BSA) under capacitating conditions. The sperm suspensions were incubated with Fura2/AM Subsequently the cells were exposed to the following concentration of LNG: 8, 10, 14, 1,000 and 10,000 ng/mL, and two controls (positive and negative). The positive control was P (32 'mu' M=11,000 ng/ml) and the negative one was medium (HTF). Cells were transferred to a quartz cuvette to make the reading in the spectrofluorometer at 340 nm excitation with emission at 510nm. Fluorescence measurements were converted to ['Ca POT 2+¿]i by the equation of Grynkiewicz et al. (1985). The Grynkiewicz equation shown that LNG concentration of 8, 10, 14, and 1,000 ng/mL were able to induce increase in the ['Ca POT 2+¿]i with significantly higher values, when compared with the rate obtained with HTF medium ( as a negative control), and significantly lower than the rate obtained with natural P (as a positive control). However, the exception was the LNG concentration of 10,000 ng/mL (32 'mu' M) in which values of ['Ca POT 2+¿]i were similar to those observed with P at a concentration of 11,000 ng/mL (32 'mu' M). In conclusion, it is possible to suggest that although LNG in vitro, in low concentration, increase the ['Ca POT 2+¿]i in the spermatozoids. Despite the fact that this mechanism is not the only responsible for the RA induction the calcium obtained through high concentration of LNG (10,000 ng/ml) might have a contraceptive action in the spermatozoa / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Efeito da adição de levonorgestrel sobre a reação acrossomal de espermatozoides de homens ferteis

Nascimento, Josiane Aparecida Andrade do 02 August 2018 (has links)
Orientador : Luis Guillermo Bahamondes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T17:11:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nascimento_JosianeAparecidaAndradedo_M.pdf: 211690 bytes, checksum: 4616f9409356792384598c8bb5f106f7 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do progestógeno Levonorgestrel (LNG) sobre a reação acrossomal dos espermatozóides in vitro. Quatro homens com fertilidade comprovada foram convidados a participar. Foi requerida a cada um deles a obtenção de amostras de sêmen, colhidas através de masturbação em intervalos de sete ou 14 dias. Após realização da análise de rotina do sêmen, os espermatozóides móveis foram separados do líquido seminal por duas centrifugações consecutivas com solução tampão de fosfato (PBS) e descarte do material sobrenadante e posterior acréscimo, sobre o pellet resultante, de meio Human Tubal Fluid (HTF) suplementado com 35mg/ml de albumina de soro bovino (BSA) segundo a técnica de swim-up. Após a migração dos espermatozóides para o meio de cultura no período de uma hora, os mesmos foram incubados durante 20 horas em estufa de cultura, com temperatura e concentração de CO2 controladas para a ocorrência da capacitação espermática. Após esta incubação, a amostra passou por nova análise de concentração, motilidade e vitalidade e foi dividida em sete alíquotas, as quais receberam respectivamente meio HTF, fluido folicular (FF), uma das quatro concentrações diferentes de LNG ou Etanol (o diluente do LNG). Após incubação dos tratamentos por 15 e 30 minutos, as amostras receberam alíquotas do corante supravital Hoescht 33258 (bis-Benzimide) e as lâminas foram confeccionadas para posterior coloração com fluoresceina isotiocianato conjugada com a lectina de Pisum sativum (FITC-PSA) e leitura da taxa de espermatozóides com reação acrossomal. A leitura da reação acrossomal foi realizada de tal forma que o leitor desconhecia qual dos tratamentos em questão estava sendo avaliado. Somente os espermatozóides vivos, segundo a coloração supravital do Hoescht, foram examinados em relação ao status acrossomal exibido após a exposição aos diferentes tratamentos. Os resultados de cada série de tubos com os diferentes meios agregados foram comparados através da análise de variância (ANOVA) para medidas repetidas, seguida do teste não paramétrico de Wilcoxon para amostras pareadas. Os resultados mostraram, em primeiro lugar, que o LNG e o Etanol não produziram efeito tóxico sobre os espermatozóides, ao menos durante os 30 minutos analisados. Também que nas condições do estudo os espermatozóides capacitaram-se e responderam à indução com o FF. Quando os espermatozóides capacitados foram expostos por 30 minutos às concentrações de 0,64µM, 1,28µM, 2,56µM e 32µM de LNG houve um aumento estatisticamente significativo da taxa de reação acrossomal em relação ao HTF. Entretanto, os valores de indução obtidos pelo FF (controle positivo) resultaram sempre estatisticamente superiores quando comparados aos valores do progestógeno em todas as concentrações estudadas. Considerando que os espermatozóides perdem a capacidade de interagir com o oócito após sofrerem a reação acrossomal, o efeito do LNG poderia resultar em uma indução prematura desse processo nos espermatozóides capacitados, diminuindo assim o potencial fértil. Concluiu-se que talvez este efeito do LNG poderia ser um dos mecanismos de ação possíveis do sistema intra-uterino liberador do LNG, auxiliando assim a compreensão da alta eficácia contraceptiva deste método / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of levonorgestrel (LNG) on the occurrence of acrosome reaction (AR) on capacitated spermatozoa from fertile men. Twenty semen samples from four fertile men were evaluated. Spermatozoa were separated by swim-up, and were incubated for 20 hours under capacitating conditions. Capacitated spermatozoa were exposed to either four different concentrations of LNG (200, 400,800, 10.000 ng/ml), follicular fluid (20 % v/v), ethanol or human tubal fluid medium (HTF) as control. The rate of AR and the ratio of live/dead spermatozoa were assessed after 15 and 30 minutes of incubation at 37ºC and 5% CO2. The different treatments were compared with follicular fluid and HTF medium as controls. The rate of AR after 15 minutes of exposure was significantly higher with follicular fluid than all other treatments with the exception of LNG at 200 ng/ml. At 30 minutes of exposure, follicular fluid induces significantly higher rate of acrosome reaction than the other treatments. Nevertheless, the four LNG concentrations induce greater rate of AR than HTF and ethanol used as a control. High LNG concentration induces higher AR rate. In conclusion, the addition of LNG in vitro to capacitated human spermatozoa was able to increase the rate of acrosome-reacted spermatozoa respect to those incubated in control medium, although lower than induce by follicular fluid / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Tocoginecologia
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Desempenho das tecnicas de fertilização in vitro convencional e injeção intracitoplasmatica, segundo a qualidade do semen

Biazotti, Maria Cristina Santoro 27 February 2004 (has links)
Orientador: Luis Bahamondes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:55:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Biazotti_MariaCristinaSantoro_D.pdf: 1341579 bytes, checksum: 8d625309421d12fbabd4541b332908b4 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Este foi um estudo de coorte retrospectivo, que teve como objetivo comparar as técnicas de fertilização in vitro (FIV) convencional e injeção intracitoplasmática (ICSI), tendo como base algumas características do sêmen. Foram analisados 4.016 procedimentos de reprodução assistida, sendo 1.832 de fertilização in vitro convencional e 2.184 de injeção intracitoplasmática. A avaliação dos gametas e as técnicas de FIV foram realizadas no Laboratório de Reprodução Humana da Clínica Saint-Antoine na cidade de Bois Guillaume ¿ França. Para análise dos dados foram consideradas variáveis independentes o ano de realização dos procedimentos de FIV convencional e ICSI, a idade das mulheres submetidas à FIV, a concentração de espermatozóides, a porcentagem de espermatozóides progressivos rápidos, a porcentagem de espermatozóides normais, a qualidade espermática, o número de óvulos e a técnica de fertilização in vitro. A variável dependente foi a taxa de fertilização. Para avaliação estatística utilizou-se a análise de regressão logística múltipla. A única variável que teve influência na taxa de fertilização foi a técnica utilizada. As variáveis espermáticas estudadas não tiveram influência na taxa de fertilização quando se considerou a amostra de sêmen normal. Concluindo, em mulheres até 38 anos de idade, cujos companheiros tinham sêmen normal ou anormal leve e moderado, a técnica de FIV foi superior à técnica de ICSI, considerando-se a taxa de fertilização / Abstract: This was a retrospective cohort study, which compared the conventional in vitro fertilization technique (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) according to some characteristic of the semen. A total of 4,016 procedures of assisted reproductive procedures, included 1,832 conventional IVF and 2,184 ICSI. The evaluation of gametes and the IVF¿s techniques were performed at the Laboratory of Human Reproduction of the Clínica Saint-Antoine Bois Guillaume, France. For the analysis of the data, it considered as independent variables the year when the procedures (conventional IVF and ICSI) was done, the women's age, the concentration of spermatozoa, the percentage of fast progressive spermatozoa, the percentage of normal spermatozoa, the sperm quality, number of the oocytes and the technique of IVF. The dependent variable was the fertilization rate. For statistical analysis it was use the multiple logistic regression. It was observed that the variable with high association to the fertilization rate was the technique (conventional IVF and ICSI) used. The sperm variables did not have influence in the fertilization rate when it considered sample of normal semen. In conclusion, in women up to 38 years old, whose partners had norm al semen or some anormality, the conventional IVF technique was superior than ICSI, taking into account the fertilization rate / Doutorado / Tocoginecologia / Doutor em Tocoginecologia
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Ciclo reprodutivo anual e caracteristicas morfologicas testiculares do pato domestico (Anas platyrhynchos)

Simões, Karina 23 July 2004 (has links)
Orientador: Antonio Orsi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:24:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simoes_Karina_D.pdf: 5008621 bytes, checksum: 052a8d69de71694b3bfdb0e3ffdcc5b0 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Em aves, a reprodução é um processo cíclico definido, onde a cada ano os órgãos reprodutores crescem e regridem sob a influência de fatores ambientais. Durante o processo de maturação das gônadas e reprodução, o organismo do animal mobiliza energia intensamente. O processo reprodutivo é bem elaborado, incluindo operações especializadas como produção, maturação e liberação de gametas, bem como a síntese de hormônios esteróides sexuais e comportamento sexual. O objetivo do estudo foi conhecer a morfologia testicular do pato doméstico (Anas platyhrynchos) e estabelecer seu ciclo reprodutivo anual, relacionando-o ao nível do hormônio testosterona e a alguns parâmetros do metabolismo energético interligados ao processo reprodutivo. Para isto foram utilizados 36 animais, sendo coletados testículos de 3 animais por mês, visando a descrição morfológica e o estabelecimento do ciclo reprodutivo anual da espécie por meio de microscopia de luz e análise morfométrica. Os espermatozóides foram analisados através de microscopia eletrônica de transmissão e de varredura. Os níveis de testosterona plasmática total foram dosados mensalmente por meio do ¿Kit Cout-A-Count (DPC)¿ e os níveis de glicose sangüínea pelo método colorimétrico. Também foram dosados o glicogênio hepático e muscular pelo método Glicogênio Trinder e lipídeos totais hepático e muscular pelo método de extração com solvente orgânico. O ciclo reprodutivo anual do pato doméstico é caracterizado por quatro fases distintas, se iniciando com a fase reprodutiva no começo do inverno (Julho) e com pico da reprodução na primavera (Outubro), apresentando maiores peso e volume testiculares, e maiores diâmetro dos túbulos seminíferos e altura do epitélio seminífero. A fase regressiva ocorre no final da primavera (Novembro) e início do verão (Dezembro). A fase de quiescência ou repouso testicular é observada durante o verão (Janeiro, Fevereiro), sendo sucedida pela fase de recrudescência que ocorre no outono (Março a Junho), correspondendo à fase mais longa do ciclo. O processo completo da espermatogênese em termos de maturação dos spermatozóides e a espermiação foram notados durante a fase reprodutiva, coincidindo com o pico de testosterona plasmática. Os espermatozóides são caracterizados pela presença de cabeça, curta peça intermediária e uma longa peça principal. No conjunto os espermatozóides são longos, filiformes e cilíndricos. O espermatozóide do pato doméstico é similar ao de outras aves nãopasseriformes correspondendo a um tipo básico de espermatozóide. Concernente ao metabolismo energético somente a glicose sangüínea estava correlacionada ao ciclo reprodutivo anual da espécie, fornecendo energia para o processo reprodutivo / Abstract: In birds, reproduction is a defined cyclic process; in which each year the reproductive organs grow and regress under the influence of environmental factors. During the process of gonadal maturation and reproduction, the organism of the animal intensively mobilizes energy. The reproductive process is well elaborated, including specialized operations such as the production, maturation and release of gametes, as well as the synthesis of sex steroid hormones and sexual behavior. The aim of the present study was to determine the morphology of the testes of the domestic duck (Anas platyrhynchos) and to establish its annual reproductive cycle, correlating it with testosterone levels and some parameters of energy metabolism associated with the reproductive process. Using a total of 36 ducks, testes were collected from 3 animals per month, and the morphology and annual reproductive cycle of the species were determined by light microscopy and morphometric analysis. Spermatozoa were analyzed by transmission and scanning electron microscopy. Total plasma testosterone levels were measured monthly using the Cout-A-Count (DPC) kit and blood glucose levels were determined by a colorimetric method. Hepatic and muscle glycogen was measured by the Trinder glycogen method and total hepatic and muscle lipids using extraction with organic solvents. The annual spermatogenic cycle of the domestic duck is characterized by four distinct phases, starting with the reproductive phase at the beginning of winter (July) and peak reproduction in spring (October), with higher testicular weight and volume, a larger seminiferous tubular diameter and greater seminiferous epithelium height being observed during these periods. The regressive phase occurs at the end of spring (November) and the beginning of summer (December). The phase of quiescence or testicular resting is observed during summer (January, February), followed by the phase of recrudescence that occurs in autumn (March to June), corresponding to the longest phase of the cycle. The complete process of spermatogenesis in terms of spermatozoon maturation and spermiation is noted during the reproductive phase, coinciding with peak plasma testosterone levels. The spermatozoa are long, filiform and cylindric and are characterized by the presence of a head, short middle piece and long principal piece. The spermatozoon of the domestic duck resembles that of other nonpasseriform birds, corresponding to the basic type of spermatozoon. Considering energy metabolism, only blood glucose was correlated with the annual reproductive cycle of the domestic duck, providing energy for the reproductive process / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

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