Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-06-22T18:15:15Z No. of bitstreams: 1 MayaraCruzRibeiro.pdf: 1477635 bytes, checksum: 3daf1f5d95a16f48c327f3fb3a6b3b89 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-22T18:15:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MayaraCruzRibeiro.pdf: 1477635 bytes, checksum: 3daf1f5d95a16f48c327f3fb3a6b3b89 (MD5) Previous issue date: 2014-04-29 / Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão (FAPEMA) / The diversity of the oscillations in the aquatic environment can be enhanced by the lack of preventive methods in management. The lack of knowledge about the parameters of water quality, such as transparency, alkalinity, hardness, dissolved oxygen, pH, ammonia, nitrite and pollutants cause various problems. The increase in the concentration of ammonia causes toxicity to aquatic organisms as it interacts with the biological parameters and can be intensified by the lack of appropriate management in water. Animals exposed to these contaminants may change in metabolic, immunologic, physiologic, and tissue damage in target organs such as gills and liver processes. The tetra (Bryconops caudomaculatus) is a native species with potential for aquaculture, with great potential for expansion, have high proliferation, short production cycle, accepts artificial food and serves as food for other species. The lack of information and the demand for knowledge about the disturbances caused by these animals increased concentrations of ammonia in the water require more specific studies in these target organs. The objective of this experiment was to evaluate the effects of exposure of un-ionized ammonia (NH3) in juvenile Bryconops caudomaculatus, and morphological and histopathological changes in the gills and liver. 150 juvenile minnows subjected to five treatments in tripicata with concentrations of NH3 (mg L-1) were control 0.003 ± 0.4; 0.15 ± 0.5; 0.30 ± 0.3; 0.50 ± 0.5; 1.00 ± 0.4. After the experimental period, 12 animals from each treatment were collected to obtain the gills and liver. After, target organs passed by fixation, dehydration, and paraffin embedding diafranização processes. The staining technique used was toluidine blue for gills and hematoxylin-eosin for the liver. Analysis of variance was used for parametric data and Kruskal-Wallis test for the descriptive analyzes. Morphological changes were observed in the secondary lamellae in the gills from 0.15 mg L-1 as hyperplasia, hypertrophy, epithelial displacement, lamellar melt, edema, aneurysm rupture lamellar epithelium and increase in width of the lamellae. There was also the presence of liver histopathologies from 0.30 mg L-1 as the capillary congestion, inflammation, pigmentation and endogenous treatment with the highest concentration in hepatocytes showed necrosis. These changes caused by the processes of intoxication impaired vital functions, metabolism, processes of respiration and detoxification of the body, probably in hematopoiesis and osmoregulation. / A diversidade das oscilações no ambiente aquático pode ser intensificada pela falta de metodologias preventivas no manejo. A falta de conhecimento a respeito dos parâmetros de qualidade de água, como transparência, alcalinidade, dureza, oxigênio dissolvido, pH, amônia, nitrito e poluentes, causa vários problemas. A elevação na concentração da amônia causa toxicidade para os organismos aquáticos, pois interage com os parâmetros biológicos e pode ser intensificada pela falta de um manejo adequado na água. Animais expostos a esses contaminantes podem sofrer alterações nos processos metabólicos, imunológicas, fisiológicos, lesões teciduais e nos órgãos-alvo como brânquias e fígado. O lambari (Bryconops caudomaculatus) é uma espécie nativa com potencial para piscicultura, com grandes possibilidades de expansão, tem alta proliferação, ciclo curto de produção, aceita alimento artificial e serve de alimento para outras espécies. A falta de informação e a demanda por conhecimento sobre os distúrbios causados nesses animais pelo aumento das concentrações de amônia na água exigem estudos mais específicos nesses órgãos-alvo. O objetivo deste experimento foi avaliar os efeitos da exposição de amônia não ionizada (NH3) em juvenis de Bryconops caudomaculatus, e as alterações histopatológicas e morfológicas nas brânquias e no fígado. Foram utilizados 150 juvenis de lambaris submetidos a cinco tratamentos, em tripicata, com concentrações de NH3 (mg L-1): controle 0,003 ± 0,4; 0,15 ± 0,5; 0,30 ± 0,3; 0,50 ± 0,5; 1,00 ± 0,4. Após o período experimental foram coletados 12 animais de cada tratamento, para a obtenção das brânquias e do fígado. Após, os órgãos-alvo passaram pelos processos fixação, desidratação, diafranização e inclusão em parafina. A técnica de coloração utilizada foi a Azul de Toluidina para brânquias e a Hematoxilina-Eosina para o fígado. Foi utilizada análise de variância para os dados paramétricos e teste de Kruskall-Wallis para as análises descritivas. Observou-se alterações morfológicas nas lamelas secundárias nas brânquias a partir de 0,15mg L-1, como hiperplasia, hipertrofia, deslocamento epitelial, fusão lamelar, edemas, aneurisma lamelar com ruptura do epitélio e aumento na largura das lamelas. Houve presença também de histopatológias no fígado a partir de 0,30 mg L-1 como congestão nos capilares, processos inflamatórios, pigmentação endógena e no tratamento com maior concentração os hepatócitos apresentaram necrose. Essas alterações causadas pelos processos de intoxicação prejudicaram as funções vitais, metabolização, os processos de respiração e desintoxicação do organismo, hematopoiese e provavelmente na osmorregulação.

As Stanniocalcinas (STC1 e STC2) são hormônios glicoproteicos originalmente encontrados em peixes teleósteos. Em mamíferos, esses hormônios são expressos em uma variedade de tecidos e estão envolvidos em processos como o transporte de cálcio e fosfato pelos rins e intestino, a carcinogênese, a reprodução e o crescimento. Recentemente, foram encontrados efeitos da STC1 e da STC2 no metabolismo intermediário. Sítios de ligação para a STC1 já foram identificados na membrana mitocondrial e resultados preliminares do nosso laboratório demonstraram que a STC1 possui um efeito inibitório sobre a gliconeogênese renal e tanto a STC1 quanto a STC2 diminuem a incorporação de 14C-glicose em 14CO2 no fígado e no músculo gastrocnêmio, respectivamente, de ratos. No entanto, o papel desses hormônios no metabolismo de aminoácidos permanece desconhecido. No presente trabalho, as ações da STC1 e da STC2 foram avaliadas no fígado e no músculo gastrocnêmio excisados de ratos machos (Rattus norvegicus, n=48 animais) de 300±50g, alimentados ad libitum. Os resultados obtidos mostram que a STC1, no fígado, diminuiu a captação do ácido 2-(metilamino)isobutírico, aumentou a atividade da bomba Na+/K+-ATPase, diminuiu a atividade da enzima malato desidrogenase mitocondrial e estimulou a síntese de glicogênio a partir da alanina. A STC2, no fígado, diminuiu a atividade da enzima malato desidrogenase mitocondrial, estimulou a síntese de proteínas a partir de leucina, e estimulou a síntese de glicogênio a partir de alanina. Já, no músculo, a STC2 estimulou a oxidação de leucina e a incorporação desse aminoácido em proteínas. Esses resultados confirmam a existência de ações das STC1 e STC2 no metabolismo de aminoácidos e sugerem, com exceção da ação da STC2 sobre a enzima malato desidrogenase, um papel anabólico para a STC2 em ambos os tecidos. A mesma afirmação não pode ser feita para a STC1, que apresentou efeitos antagônicos no tecido hepático. Por fim, o trabalho mostrou que as ações da STC1 e da STC2 sobre as vias metabólicas dos aminoácidos ocorrem com a utilização de doses muito baixas desses hormônios. / Stanniocalcins (STC) are glycoprotein hormones that were first discovered in teleostean fishes. In mammals, these hormones are expressed in a variety of tissues. Besides its role on the calcium and phosphate transport by the kidneys and intestine, they are involved in processes such as carcinogenesis, reproduction and growth. Recently it has been shown that STC1 and STC2 affect the control of intermediary metabolism. Binding sites for STC1 have been already identified in the mitochondrial membrane. Preliminary results of our laboratory showed that STC1 has an inhibitory effect on renal gluconeogenesis in rats and both STC1 and STC2 decrease the 14C-glicose incorporation into 14CO2 in the liver and the gastrocnemius muscle, respectively. Despite these evidences that STC1 and STC2 have a role in the control of glucose and lipids metabolism, the function of these hormones in amino acids metabolism remains unknown. In the present study, the STC1 and STC2 actions were evaluated in livers and gastrocnemius muscles excised from male rats (Rattus norvegicus, n=48 animals). The rats weighted 300±50g and were fed ad libitum. The results show that STC1 decreased 2-(metilamine)isobutyric acid uptake, increased Na+/K+-ATPase activity, decreased mitochondrial malate dehydrogenase activity and stimulated glycogen synthesis from alanine. All actions of STC1 were shown in the hepatic tissue and this hormone did not affect any parameter in muscular tissue. In the liver, STC2, decreased the mitochondrial malate dehydrogenase activity, stimulated protein synthesis from leucine and stimulated glycogen synthesis from alanine. In muscle, STC2 stimulated leucine incorporation into CO2 and proteins. These results confirm the regulatory role of STC1 and STC2 on amino acid metabolism in muscle and liver of rats. They suggest, with exception to the STC2 action into the hepatic malate dehydrogenase, an anabolic role for STC2 in both tissues. However this cannot be stated for STC1, which show antagonistic effects in the hepatic tissue. Lastly, another important finding of this study is that STC1 and STC2 actions on amino acid metabolism occur with low hormone concentrations.

Made available in DSpace on 2017-07-10T14:57:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jardel_ Nimet.pdf: 1924881 bytes, checksum: 4755b41b1458253b217679d76b6eeead (MD5) Previous issue date: 2016-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Abstract: This study evaluated the use of gill and liver of Astyanax bifasciatus as histological biomarkers for biomonitoring of streams with different uses and land occupation. The fish were collected by electric fishing technique, in six streams classified as afforested, rural and urban, in the basin of the lower Iguaçu River, west region of Paraná State, in December 2014. It was tested the hypothesis that in streams that are influenced by effluents from urban and rural areas occur greater number and histopathological severity in gill and liver of A. Bifasciatus. In this context, the objective of this study was to correlate the presence and degree of histopathology of gill and liver with the environmental variables among streams with different uses and land occupation. The environments considered afforested showed higher values of dissolved Oxygen (DO) and lower conductivity (CO) when compared to the rural and urban environments. The gills of fish from the afforested streams indicated normal functioning of the organ, while in the rural and urban streams, the histopathology in the gills suggested light to moderate damage to the organ. In relation to the liver, the histopathology indicated light to moderate damage in rural streams and moderate to severe damage in urban streams. When considering the abiotic variables and frequencies of histopathology of gill and liver, the afforested streams were separated from rural and urban areas. The histopathology in gills and livers were significantly more severe, corroborating our hypothesis. It was possible to distinguish streams with different uses and land occupation, therefore, these histopatologias showed favorable biomarkers for studies of biomonitoring / Resumo: Este estudo avaliou o uso de brânquia e fígado de Astyanax bifasciatus como biomarcadores histológicos para biomonitoramento de riachos com diferentes usos e ocupação do solo. Os peixes foram coletados por meio da técnica de pesca elétrica, em seis riachos classificados em florestados, rurais e urbanos, na bacia do baixo Rio Iguaçu, região Oeste do Estado do Paraná, em dezembro de 2014. Testou-se a hipótese de que em riachos que sofrem influências de efluentes oriundos de áreas rurais e urbanas ocorrem maior número e severidade histopatológicas em brânquia e fígado de A. bifasciatus. Nesse contexto, este estudo teve como objetivo correlacionar a presença e o grau de histopatologias de brânquia e fígado com as variáveis ambientais entre riachos com diferentes usos e ocupação do solo. Os ambientes considerados florestados apresentaram maiores valores de Oxigênio dissolvido (OD) e menores de condutividade (CO) quando comparados com os ambientes rurais e urbanos. As brânquias dos peixes dos riachos florestados indicaram funcionamento normal do órgão, enquanto que nos riachos rurais e urbanos, as histopatologias nas brânquias sugeriram danos leves para moderados ao órgão. Em relação ao fígado as histopatologias indicaram danos leves para moderados nos riachos rurais e danos moderados para severos nos riachos urbanos. Ao considerar as variáveis abióticas e as frequências das histopatologias de brânquia e fígado, os riachos florestados foram separados dos rurais e urbanos. As histopatologias nas brânquias e fígados foram significativamente mais severas, corroborando a nossa hipótese. Foi possível distinguir os riachos com diferentes usos e ocupação do solo, portanto, essas histopatologias se mostraram biomarcadores favoráveis para estudos de biomonitoramento

Orientador: Eliana Aguiar Petri Nahas / Coorientador: Jorge Nahas Neto / Banca: Lúcia H. S. da Costa Paiva / Banca: Juliana Silva Barra / Banca: Selmo Gelver / Banca: Paulo Traiman / Resumo: Avaliar marcadores clínicos e inflamatórios na doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) em mulheres na pós-menopausa com síndrome metabólica (SM). Estudo transversal, comparativo, envolvendo 180 mulheres na pósmenopausa (idade ≥45 anos e amenorréia ≥ 12 meses) acompanhada no Ambulatório de Climatério do Centro de Especialidades Médicas do Hospital Santa Casa de Belo Horizonte/Minas Gerais, de janeiro de 2011 a agosto de 2012. Os critérios de não inclusão foram: doença hepática (hepatites B e C, doença colestática, insuficiência hepática e tumor); uso de drogas que afetam o metabolismo hepático; etilistas; antecedente de HIV ou câncer; e obesidade mórbida. Foi diagnosticada SM na presença de três ou mais critérios: circunferência da cintura (CC) > 88cm; triglicerídeos (TG) ≥ 150mg/dL; HDL < 50mg/dL; pressão arterial ≥ 130/85mmHg; glicemia ≥ 100mg/dL. A DHGNA foi diagnosticada por meio da ultrassonografia abdominal. As participantes foram divididas em três grupos de acordo com a presença ou ausência de SM e/ou DHGNA: SM isolada (n=53); SM+DHGNA (n=67); sem SM ou DHGNA (controle, n=60). Foram realizadas avaliações clínicas, antropométricas e bioquímicas. O perfil inflamatório incluiu dosagens de adiponectina, interleucina-6 (IL-6) e fator de necrose tumoral alfa (TNF-α). Para análise estatística foram empregados os testes de Tukey, ANOVA, Qui-Quadrado, Correlação de Pearson e regressão logística (odds ratio-OR). As mulheres com SM+DHGNA mostraram-se obesas e com maior CC quando comparadas as mulheres com SM e controle (p<0.05). Assim como, apresentaram valores médios de glicemia e insulina superiores aos demais grupos, com resistência à insulina (RI) (p<0.05). Observou-se elevação dos valores médios de IL-6 e TNF-α e redução da adiponectina entre as mulheres com SM isolada ou associada...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: to assess clinical and inflammatory markers in non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) in postmenopausal women with metabolic syndrome (MetS). In this cross-sectional study, 180 women (age ≥45 years and amenorrhea ≥ 12 months) followed the Belo Horizonte Specialty Clinic from January 2011 to August 2012, were included. Exclusion criteria were: liver disease (hepatitis B and C, cholestatic disease, liver insufficiency and tumor); use of drugs that affect the liver metabolism; alcoholics; HIV or cancer history; and morbid obesity. MetS was diagnosed as the presence of at least three components: waist circumference (WC) > 88 cm, triglycerides (TG) ≥ 150mg/dL, HDL <50mg/dL; blood pressure (BP) ≥ 130/85mmHg; glucose ≥ 100mg/dL. NAFLD was diagnosed by abdominal ultrasound. The participants were divided into three groups according to the presence or absence of MetS and/or NAFLD: MetS alone (n=53); MetS+NAFLD (n=67); or without NAFLD or MetS (controls, n=60). Clinic, anthropometric, and biochemical variables were measured. Inflammatory profile included adiponectin, interleukin 6 (IL-6), and tumor necrosis factor alpha (TNF-α). Statistical analysis employed the ANOVA, Tukey test, Chi-square test, Pearson correlation, and logistic regression (odds ratio, OR). Women with MetS + NAFLD showed obesity, greater WC, higher glucose and insulin levels, with insulin resistance (IR) when compared to MetS alone and controls (p <0.05). Elevated values of IL-6 and TNF-α were observed as well as decreased adiponectin among women with MetS alone or MetS+NAFLD when compared to controls (p <0.05). In multivariate analysis, the variables considered at risk for the development...(Complet abstract click electronic access below) / Doutor

O transplante de fígado é considerado um dos procedimentos mais complexos da medicina moderna. O ensino do paciente é relevante no contexto da saúde e pode contribuir para o sucesso do tratamento. Dentre as atividades do enfermeiro, ressalta-se o papel de educador. No período pós-operatório de transplante de fígado, este profissional deve implementar intervenções educativas direcionadas para o preparo do paciente no enfrentamento das mudanças no estilo de vida, decorrentes de procedimento cirúrgico complexo. Para tal, o primeiro passo consiste no conhecimento das necessidades de informação indicadas pelos receptores de transplante de fígado. O objetivo geral do estudo foi avaliar as necessidades de informação de receptores de transplante de fígado em atendimento ambulatorial em hospital público. A amostra foi composta por 92 receptores de transplante de fígado atendidos em ambulatório de hospital público do interior do Estado de São Paulo. A coleta de dados ocorreu no período de fevereiro a junho de 2014, por meio da aplicação de instrumento adaptado. Os principais resultados da pesquisa indicaram que a maioria dos receptores de transplante de fígado era do sexo masculino (77,17%) e casada (76,09%). A idade média foi de 54,48 anos, a média de anos de estudo foi de 9,02 anos, sendo 70,65% dos receptores moradores na zona urbana. Dos 92 participantes, 46,74% estavam aposentados e 26,09%, afastados de suas atividades laborais e 36,96%, com renda familiar entre dois e três salários-mínimos. Em relação às características clínicas, observou-se que 47,83% dos receptores eram do grupo sanguíneo tipo O, 72,83% tinham escore MELD entre 20 e 29 pontos, 41,30% estavam com cirrose de etiologia viral (B ou C). Dos 92 pacientes, 45,65% tinham IMC entre 18,50 e 24,99 Kg/m2 (peso normal) e 33,70% estavam acima de 25 Kg/m2 (sobrepeso). A média de dias após o transplante foi de 1.508,85 dias, o tacrolimus era empregado como terapia medicamentosa de imunossupressão principal em 36,96% dos receptores e era associado ao micofenolato sódico em 38,04% dos pacientes. As necessidades de informação que obtiveram as médias maiores foram: sugestão de assunto no 3 (média 5,35) refere- se aos sinais e sintomas de complicações (rejeição, infecção, diabetes, hipertensão arterial, entre outras) agrupada na categoria manejo das potenciais complicações; sugestão no 2 (média 5,29) relativa aos efeitos colaterais e cuidados sobre medicamentos (categoria manejo dos medicamentos) e sugestão no 14, alimentação segura após o transplante (média 4,53), também agrupada na categoria manejo das potenciais complicações. Os resultados evidenciados oferecem subsídios sobre o perfil sociodemográfico e clínico de receptores de transplante de fígado na realidade nacional, bem como das necessidades de informação, as quais podem auxiliar o planejamento de intervenções educativas direcionadas para o processo de transplante de fígado, para principalmente melhorar a qualidade da assistência, a adesão ao tratamento e a prevenção de complicações após o transplante / Liver transplantation is considered one of the most complex procedures in modern medicine. The patient education is relevant in the context of health and may contribute to the success of treatment. Among the activities of nurses, the role of educator is highlighted. In the postoperative period of liver transplantation, this professional must implement educational interventions directed to the preparation of the patient in coping with changes in lifestyle resulting from complex surgical procedure. For this, the first step consists in the identification of information needs indicated by liver transplant recipients. This study aimed to assess the information needs of liver transplant recipients in outpatient treatment at a public hospital. The sample consisted of 92 liver transplant recipients assisted in outpatient clinic at a public hospital in the state of São Paulo. Data collection was performed from February to June 2014, through the application of the adapted instrument. The main results indicated that most liver transplant recipients were male (77.17%) and married (76.09%). The average age was 54.48 years, the average years of schooling was 9.02; and 70.65% of recipients lived in the urban area. Of the 92 participants, 46.74% were retired, 26.09% were on leave from work and 36.96% had incomes between two and three minimum wages. Regarding clinical characteristics, 47.83% of recipients were type O blood group, 72.83% had MELD scores between 20 and 29 score points, and 41.30% had cirrhosis of viral etiology (B or C). Of the 92 patients, 45.65% had a BMI between 18.50 to 24.99 Kg/m2 (normal weight) and 33.70% greater than 25 Kg/m2 (overweight). Average days after the transplantation was 1508.85 days, the tacrolimus was used as the primary immunosuppression drug therapy in 36.96% of the recipients, and associated with mycophenolate sodium in 38.04% of the patients. Information needs with the highest averages were: suggestion of topic no 3 (5.35) which refers to the signs and symptoms of complications (rejection, infection, diabetes, hypertension, etc.), grouped in the category management of potential complications; suggestion no 2 (5.29) related to the side effects and care of medicines (category management of medicines); and suggestion no 14, safe food after transplantation (4.53), also grouped in the category management of potential complications. The results show subsidies on the sociodemographic and clinical profile of liver transplant recipients in the national reality and the information needs which may assist the planning of educational interventions directed to the process of liver transplantation, mainly aiming to improve quality of care, adherence to treatment and prevention of complications after transplantation

Em pacientes com doenças relacionadas à sobrecarga de ferro, a contínua quantificação dos níveis de ferro no corpo é necessária. O método biosusceptométrico se apresenta como uma alternativa confiável em relação aos métodos tradicionais devido ser uma medição direta do ferro no fígado não invasiva. O sistema biosusceptométrico desenvolvido no nosso grupo de pesquisa (Biomag) foi analisado, verificado e tornou-se funcional em uma nova localização. Primeiramente foram feitas medições de estabilidade do sinal, avalição da resposta susceptométrica com a utilização de um phantom, avaliação da variabilidade do fator de calibração no tempo; assim como, medidas da resposta susceptométrica para soluções de cloreto férrico (Fe Cl3 6H2 o). Assim, verificando-se o correto funcionamento do equipamento. Foram realizadas medidas biosusceptométricas em 13 voluntários assintomáticos; na segunda parte, foram realizadas medidas em 48 pacientes com doenças relacionadas à sobrecarga de ferro no fígado (talassemia e anemia falciforme). Com os dados coletados foi possível calcular o fator de correção necessário para o cálculo da concentração de ferro nos pacientes; além disso, notar a dependência da contribuição do fluxo magnético do paciente com o raio do torso. Foi estimado que o erro na medida na concentração do ferro hepático para medidas in vivo é de 0,244 mgFe/gwt. Medições em nanopartículas magnéticas (Mn Fe2 O4-citrate) foram feitas para soluções com diferentes concentrações, com dois métodos de medida diferentes. Os resultados mostram o potencial do biosusceptômetro para detectar e localizar nanopartículas magnéticas dentro do corpo humano, ou a quantificação da concentração em soluções, com uma calibração prévia do equipamento / In patients with diseases related with iron overload, the continuous measurement of iron levels in the body is required. The biosusceptometric method presents itself as a reliable alternative to traditional methods because it is a non-invasive direct measurement of iron in the liver. The biosusceptometric system developed in our research group (Biomag) was analysed, verified and became functional at a new location. First, measurements of signal stability were done, evaluation of susceptometric response with the use of a phantom, variability evaluation of calibration factor; as well as measurements of solutions of ferric chloride (Fe Cl3 6H2o). Thus, verifying the correct operation of the equipment. In the first part of in vivo measurements, biosusceptometric measurements were performed in 13 asymptomatic volunteers; in the second part, measurements were performed in 48 patients with diseases related to iron overload in the liver (thalassemia and sickle cell disease). With the collected data it was possible to calculate the correction factor necessary for the calculation of the iron concentration in patients; additionally, a dependence of the magnetic flux with the patient\'s torso radius was found. The error in the in vivo measurement of liver iron concentration was estimated in 0.244 $mgFe/gwt. Measurements on magnetic nanoparticles (Mn Fe2 O4-citrate) were made in solutions with different concentrations, with two different methods of measurement. The results show the potential of the biosusceptometer to detect and locate magnetic nanoparticles within the human body or the quantification of the concentration of solutions with a prior calibration of the equipment

A Terapia Fotodinâmica (TFD) é uma técnica que provoca dano celular pela ação de um fotossensibilizador (FS), com seletividade de localização em tecido tumoral; a luz que, absorvida pelo FS, leva-o a um estado tripleto metaestável; e oxigênio molecular, o qual recebe a energia absorvida pelo FS, passando a um estado singleto de alta capacidade oxidativa. A técnica é bem sucedida no tratamento de lesões como câncer, mas enfrenta, entretanto, dificuldades para a determinação de sua dosimetria. Uma delas é a quantificação da distribuição do FS no tecido tratado. Este trabalho tem três objetivos: a obtenção de informação quantitativa por espectros de fluorescência de fluoróforos em meios turvos; a demonstração da distribuição do FS Photogem&reg; em fígados sadios de ratos Wistar e suas implicações na dosimetria; e a melhoria de um dos modelos existentes para previsão da profundidade de necrose (Ynec), importante parâmetro no estudo da TFD. Realizaram-se os experimentos em três fases: na primeira, tentou-se reconstruir o espectro do fígado sadio a partir de uma composição de espectros isolados de fluoróforos endógenos do fígado. Na segunda, realizaram-se estudos com corantes alimentícios Coralim-Mix&reg; nas cores azul, verde e vermelho e com corantes Exciton&reg; (Coumarin-480 e LDS-722) in vitro e in vivo, visando identificar os espectros dos corantes em misturas com meios turvos e entre eles. Na terceira, aplicou-se Photogem&reg; em ratos Wistar e se coletou a fluorescência do FS nos fígados, relacionando-se a variação na intensidade de fluorescência com a concentração de FS presente e com perfis de necrose obtidos por TFD. Aplicou-se, por fim, os resultados obtidos na melhoria do modelo para previsão da Ynec. A reconstrução dos espectros não foi bem sucedida, tal qual a recuperação dos espectros dos corantes. Os resultados mostraram que muitos fatores contribuem para a distorção da fluorescência coletada, e que a informação obtida é prejudicada se estes forem ignorados. Verificou-se que a distribuição do FS não é homogênea num órgão fotossensibilizado. Obteve-se uma função para distribuição do FS no tecido e, através dela, foi possível melhorar o modelo para a previsão da Ynec. Observou-se que a turbidez do meio afeta de maneira complexa a coleta de fluorescência, criando obstáculos para a quantificação direta de fluoróforos nele inseridos. Fica evidente a necessidade do aprofundamento dos estudos sobre a interação da luz com as partículas dos meios turvos para remover as distorções geradas por estas. Demonstrou-se ainda a importância do mapeamento da distribuição do FS num tecido fotossensibilizado como parte da dosimetria da TFD, e que a espectroscopia de fluorescência é forte candidata à técnica mais apropriada para este mapeamento, desde que dominados os obstáculos à coleta de fluorescência. / Photodynamic Therapy (PDT) is a technique that implies in cell damage by the action of a photosensitizer (PS) with tumor tissue localization selectivity; light at PS absorption spectrum wavelengths, which leads the PS to a metastable triplet state; and molecular oxygen, which earns the energy absorbed by the PS, reaching a high oxidative potential singlet state. The technique has found sucess on the treatment of lesions as cancer. However, it finds difficulties for its dosimetry stablishment, like the quantification of PS distribuition in a photosensitized tissue. This work has three purposes: obtainance of fluorophores quantitative information into turbid media through fluorescence spectroscopy; to show the distribution of the PS Photogem® in healthy Wistar rats’ livers and its consequences on dosimetry; and the upgrade of an existing model for depth of necrosis (Ynec) forecast. There were three experimental stages: the first one was an attemp to rebuild a healthy liver spectrum from a composition using mathematical weights for isolate liver endogenous fluorophores spectra. On the second stage, in vitro and in vivo studies were performed using Coralim-Mix&reg; blue, green and red food dyes and the Exciton&reg; dyes Coumarin-480 and LDS-722, aiming to recover dyes spectra from dyes in turbid solutions and dyes mixtures. On the third one, Photogem&reg; was administered to Wistar rats and fluorescence was collected on rats’ livers, and a relationship was stablished between the changes on fluorescence intensity, PS concentration in the tissue and necrosis profiles obtained via PDT. Results were applied to the upgrade of the Ynec forecast model. Spectra rebuilding, as well as dyes spectra recovering, were not completely reached. Results showed that a great deal of factors contribute to distortions at the collected fluorescence. It was verified that PS distribution is inhomogeneous in a photosensitized organ. It was found a function for the PS tissue distribution and it made possible to upgrade the Ynec forecast model. It was showed that medium turbidity affects in a complex manner the collected fluorescence, making difficult to quantify directly fluorophores in such medium. A need to go deeper into the investigation of light interactions with turbid media so that we may remove distortions they introduce into fluorescence spectra became evident. It was also showed how important is to track PS distribuition in a photosensitized tissue as a part of PDT dosimetry, and how fluorescence spectroscopy seems to be appropriate to perform such tracking, as long as the difficulties on fluorescence collection are overcome.

Recentemente, verificou-se que diferentes protocolos de overtraining (OT) com mesma carga externa, mas realizados em declive (OTR/down), aclive (OTR/up) e sem inclinação (OTR) levaram ao acúmulo de gordura hepática. Sabe-se que perturbando a homeostase do retículo endoplasmático (ER) ocorre o estresse do RE que também está associada com presença de gordura hepática em modelos animais. Com isso, verificamos os efeitos desses modelos de OT nas proteinas relacionadas ao estresse do RE (BiP, IRE1, PERK, eIF2alpha, ATF6beta, and GRP94), apoptose (CHOP, Caspase-3, 4 and 12, Bax and TRAF2) e inflamação (SAPKJNK and IKK) no fígado de camundongos C57BL/6. Uma vez que o treinamento aeróbio pode diminuir o estresse do RE cardíaco e aumentar a capacidade do exercício, também verificou se a queda de desempenho induzida pelos protocolos de OT estaria relacionada com o estresse do RE e apoptose no coração dos animais. Os animais foram divididos em naive (N, animais sedentários), controle (CT, animais sedentários submetidos as avaliações de desempenho), treinado (TR), OTR/down, OTR/up and OTR. Os testes de rotarod, incremental, exaustivo e força de preensão foram usados para avaliar o desempenho. Trinta e seis horas após o teste de força de preensão, os fígados e corações (ventrículo esquerdo) foram removidos e usados para técnica de immunoblotting. Todos os protocolos de OT levaram a respostas similares em relação aos parâmetros de desempenho e mostraram valores significativamente menores de ATF6beta hepática quando comparados com o grupo N. O grupo OTR/down exibiu valores inferiores de caspase-3 clivada no fígado quando comparado com o grupo CT. As proteínas cardíacas relacionadas ao estresse do RE, apoptose e inflamação não foram moduladas nos grupos experimentais. / Newly, we verified that different running overtraining (OT) protocols with same external load but performed in downhill (OTR/down), uphill (OTR/up) and without inclination (OTR), directed to hepatic fat accumulation. Knowing the disruption of endoplasmic reticulum (ER) homeostasis is linked to animal models of fatty liver, we explored the effects of these OT models on the proteins related to ER stress (i.e., BiP, IRE1, PERK, eIF2alpha, ATF6beta, and GRP94), apoptosis (CHOP, Caspase-3, 4 and 12, Bax and TRAF2) and inflammation (SAPKJNK and IKK) in livers of C57BL/6 mice. Because aerobic training can diminish cardiac ER stress and increase exercise capacity, we also verified whether the performance decrease induced by our OT protocols is linked to ER stress and apoptosis in mouse hearts. Rodents were divided into naive (N. sedentary mice), control (CT, sedentary mice submitted to the performance evaluations), trained (TR), OTR/down, OTR/up and OTR groups. Rotarod, incremental load, exhaustive and grip force tests were used to estimate performance. Thirteen six hours after the grip force test, the livers and cardiac muscles (i.e., left ventricle) were removed and used for immunoblotting. All OT protocols led to similar responses of the performance parameters and showed significantly lower values of hepatic ATF6beta compared to the N group. The OTR/down group exhibited inferior values of liver cleaved caspase-3 compared to the CT group. The cardiac proteins related to ER stress and apoptosis were not modulated in the experimental groups.

Orientador: Karen Cristiane Martinez de Moraes / Banca: Camila Andrea de Oliveira / Banca: Dânia Elisa Christofoletti Mazzeo Morales / Resumo: O carcinoma hepatocelular (CHC) ocupa o 5º lugar entre os cânceres mais comum no mundo. No geral, cânceres apresentam alto risco de recorrência na forma de doença metastática. A identificação e caracterização funcional de genes associados à invasão e metástase é crucial para o desenvolvimento de novas terapias orientada contra esse processo. A proteína celular associada a migração e angiogênese (AAMP), está amplamente distribuída em muitos tipos de células com potencial migratório. Associado a isso, vários estudos apontam o papel crucial do metabolismo lipídico na iniciação das metástases. Estudos demonstram que os microRNAs (miRNAs) têm um papel central no controle das funções básicas das células. Um miRNA de grande interesse para este trabalho é o miRNA-149-3p. Em trabalhos realizados anteriormente pelo grupo de pesquisa, foi demonstrado que em células tumorais pulmonares (A549) esse miRNA foi apontado como um elemento de destaque no controle dos processos celulares de migração, pelo controle da proteína celular associada a migração e angiogênese (AAMP). Tendo em vista as doenças hepáticas, cabe avaliar os efeitos do miRNA-149-3p, considerando a existência de alvos putativos a esse miRNA, que se correlacionam diretamente com o metabolismo energético, buscando analisar pontos da via onde ocorre modulação ocasionada por este miRNA. Para as análises optou-se por trabalhar com as células SK-HEP-1 (linhagem metastática) e HEP-G2 (linhagem metabolizadora). Segundo as análises, de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Hepatocellular carcinoma (CHC) ranks 5th among the most common cancers in the world. In general, cancers are at high risk of recurrence in the form of metastatic disease. The identification and functional characterization of genes associated with invasion and metastasis is crucial for the development of new therapies targeted against this process. Cellular protein associated with migration and angiogenesis (AAMP), is widely distributed in many cell types with migratory potential. Associated with this, several studies point to the crucial role of lipid metabolism in the initiation of metastases. Studies have shown that microRNAs (miRNAs) play a central role in the control of basic cell functions. A miRNA of great interest for this work is miRNA-149-3p. In previous studies by the research group, it was demonstrated that in lung tumor cells (A549) this miRNA was indicated as a prominent element in the control of cellular migration processes, by the cellular protein control associated with migration and angiogenesis (AAMP). Considering the hepatic diseases, the effects of miRNA-149-3p can be evaluated, considering the existence of putative targets for this miRNA, which correlate directly with the energetic metabolism, seeking to analyze points of the pathway where the miRNA modulation occurs. For the analyzes we opted to work with the SK-HEP-1 (metastatic line) and HEP-G2 (metabolizing line) cells. According to the analyzes, it has been shown that for both SK-HEP-1 and HEP-G2 the... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Fernando Gomes Romeiro / Banca: Giovanni Faria Silva / Banca: Ana Cláudia de Oliveira / Resumo: Pacientes com cirrose hepática são comumente acometidos por deficiências nutricionais e perda de massa óssea, por mecanismos como baixa ingestão de nutrientes e falta de atividade física. O objetivo deste estudo foi aferir a prevalência de doença óssea na cirrose e avaliar se alterações nutricionais e hepáticas estariam correlacionadas à perda de massa óssea (osteopenia ou osteoporose) em pacientes ambulatoriais atendidos na Faculdade de Medicina de Botucatu (FMB) - UNESP. Avaliações nutricionais e da massa óssea foram feitas por meio de antropometria, medidas de força muscular (pelo handgrip), absorciometria de raios X de dupla energia (dual-energy X-ray absorptiometry - DXA) e exames bioquímicos. A amostra foi de 129 indivíduos (77 homens e 52 mulheres), classificados em Child A (69%), Child B (24,8%) e Child C (6,2%). A média do escore Model for End-Stage Liver Disease (MELD) foi de 10,60 ± 3,99. A prevalência de osteoporose foi de 31,01% e a de osteopenia foi de 32,56%. Os resultados foram avaliados pelo modelo de regressão linear de Backward, mostrando que baixos valores de força muscular pelo handgrip, níveis elevados de paratormônio (PTH) e baixo índice de massa corporal (IMC) foram preditores de baixo t-escore da coluna, enquanto a idade e o IMC foram fatores preditores de baixo t-escore de quadril. A gravidade da doença hepática não influenciou a presença da doença óssea. Como a cirrose acomete mais os ossos da coluna, sugerimos que exames de PTH, handgrip e o IMC sejam utilizados rotineiramente na avaliação de portadores de cirrose, e se esses exames estiverem alterados a densidade óssea seja medida com mais frequência, mesmo na cirrose compensada / Abstract: Cirrhotic patients are often compromised by nutritional deficiencies and loss of bone density through mechanisms as low ingestion of nutrients and lack of physical activity. The aim of this study was evaluate the prevalence of bone alterations and investigate if nutritional and hepatic tests would be related to the bone loss (osteoporosis or osteopenia) in cirrhotic outpatients from the Botucatu medical school (FMB-UNESP). Nutritional, hepatic and bone assessments were performed through anthropometric measurement, handgrip strength, dualenergy X-Ray absorptiometry (DXA) exam and laboratory tests. The study sample was composed by 129 subjects (77 men and 52 women), who were divided according to the Child-Pugh classification as follows: Child-Pugh A (69%), Child- Pugh B (24.8%) and Child-Pugh C (6.2%). The mean of the Model for End-Stage Liver Disease (MELD) score was 10.6 ± 3.99. The rates of osteoporosis and osteopenia were 31.01% and 32.56%, respectively. The results were assessed by backward linear regression model, showing that low handgrip strength, high parathyroid hormone (PTH) and low body mass index (BMI) were predictors of low t-score values in the lumbar spine. Additionally, only age was a predictor of low t-score values in the femoral neck. The model did not select the liver disease severity as a significant predictor of bone disease. As the liver cirrhosis is more aggressive in the lumbar spine, we suggest that handgrip strength, BMI and PTH should be tested in all cirrhotic patients to select the ones with higher risk of bone disease, in order to perform specific bone exams more often when these tests are altered, even in compensated cirrhosis / Mestre