Submitted by GUILHERME RODRIGUES TEODORO null (guilhermerte@uol.com.br) on 2016-03-18T16:38:35Z No. of bitstreams: 1 Tese versao final guilherme em pdf.pdf: 1687373 bytes, checksum: 7ecfd9e5312d17f5c4885c915efc1671 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-03-21T20:00:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 teodoro_gr_dr_sjc.pdf: 1687373 bytes, checksum: 7ecfd9e5312d17f5c4885c915efc1671 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-21T20:00:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 teodoro_gr_dr_sjc.pdf: 1687373 bytes, checksum: 7ecfd9e5312d17f5c4885c915efc1671 (MD5) Previous issue date: 2016-02-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade frente a Candida albicans da fração enriquecida em fenólicos (FE) das folhas de Buchenavia tomentosa além das substâncias ácido gálico (AG), corilagina, kaempferol e vitexina, substâncias fenólicas que foram previamente detectadas no extrato aquoso de B. tomentosa livres ou encapsuladas em ciclodextrinas. Para tal, foi realizado teste de microdiluição com cepas padrão e isolados clínicos e análise química da FE por espectrometria de massa (ESI-MS). Detectou-se que o extrato acetônico foi a FE e AG foi a substância fenólica mais eficiente contra C. albicans. O efeito de FE e AG contra os fatores de virulência de C. albicans foram analisados. FE e AG foram encapsulados em 2-hidroxipropil-beta-ciclodextrina e tiveram sua análise química realizada. As CIMs e CFMs dos encapsulados foram determinadas, porém apenas o AG encapsulado teve sua ação anti-biofilme e in vivo verificadas. A citotoxicidade de AG e FE livres e encapsulados foi determinada. As CIMs variaram de 5,0 e 0,625 mg/ml para o ácido gálico e 2,5 e 0,019 mg/ml para FE. AG e as outras moléculas foram encontradas na FE. Não foram encontrados CFMs. Os fenólicos estudados também foram encontrados em FE por ESI/MS. Tanto FE quanto AG tiveram efeito direto nos fatores de virulência de C. albicans, exceto sobre a secreção de exoenzimas. Não houve diferença na CIM entre as substâncias livres e encapsuladas. AG encapsulado teve melhor ação anti-biofilme do sua forma livre. Foi verificada melhora clínica de lesões eritematosas no palato de ratos, porém não foi possível. A citotoxicidade das substâncias livres ou encapsuladas variou de moderava a leve para FE e foi moderada para AG. Após as análises, observou-se o efeito anti-C. albicans de FE e AG. AG encapsulado apresentou promissor efeito anti-biofilme e aparente melhora clínica nas lesões sugestivas de candidose eritematosa na mucosa palatar dos ratos. / The aim of this study was to evaluate the effectiveness against Candida albicans of fraction enriched in phenolic (FE) of Buchenavia leaves tomentosa beyond substances gallic acid (GA), corilagin, kaempferol and vitexin, phenolic substances previously detected in the aqueous extract of B. tomentosa, free or encapsulated in cyclodextrins. Microdilution test with standard strains and clinical isolates besides the chemical analysis of FE by mass spectrometry (ESI-MS) were carried out. The acetone extract was the FE and AG was the most efficient phenolic substance against C. albicans. The effect of FE and AG against the virulence factors of C. albicans was also analyzed. FE and AG were encapsulated into 2-hydroxypropyl-beta-cyclodextrin (HP-β-CD) and had their chemical analyses made. MICs and MFCs of encapsulated have been determined. Solely the GA encapsulated had its anti-biofilm and in vivo action verified. Cytotoxicity of free and encapsulated GA and FE were determined. The MIC ranged from 5,0 to 0,625 mg/ml for GA and 2,5 and 0,019 mg/ml for FE. MFCs values were not found. All phenolics molecules were found in FE by ESI/MS. AG and FE had a direct effect on virulence factors of C. albicans, except on the secretion of exoenzymes. There was no difference in the CIM between free and encapsulated substances. The anti-biofilm effect was better in GA encapsuladed than its free form. A clinical improvement of sugestives erythematous lesions on the palate of rats was observed, although the hyphaes were not found in the palatar mucosa. The cytotoxicity for all substances was moderated. After the analysis, we observed the anti-C. albicans effect of GA and FE. AG encapsulated showed promising anti-biofilm effect and apparent clinical improvement in lesions suggestive of erythematous candidiasis in palatar mucosa of rats. / FAPESP: 2012/16805-5 / FAPESP: 2013/00037-1 / CAPES - PDSE: 99999.000217/2014-00

No presente trabalho avaliou-se os efeitos de duas formulações fitoterápicas comerciais contendo soja [Glycine max (L.) Merr], Soyfemme® da Ache Laboratórios Farmacêuticos S.A e Isoflavine® da Herbarium Laboratório Botânico Ltda. sobre a fertilidade e o desenvolvimento ponderal de ratos Wistar, bem como o desenvolvimento ponderal das progênies. As dosagens foram obtidas através da recomendação dos fabricantes sendo a dose terapêutica recomendada 4,3 mg.kg-1. Constituíram-se oito grupos experimentais, um grupo controle negativo (GC-) que recebeu água destilada, um grupo controle positivo (GC+) que recebeu isoflavonas semelhantes às da soja na dose de 4mg.kg-¹, três grupos tratados com o fitoterápico Soyfemme® e três grupos tratados com Isoflavine® em três doses 4,3mg.kg-1, 21,5mg.kg-1 e 43mg.kg-1, respectivamente, GS1, GS2, GS3 e GI1, GI2, GI3. Os animais foram tratados diariamente por via oral, em fases determinadas. Os machos foram tratados durante 91 dias, sendo 70 dias antes do acasalamento e o restante durante o acasalamento. As fêmeas foram tratadas antes e durante o acasalamento, gestação e lactação.Metade das fêmeas prenhes sofreu cesariana no 21º dia de gestação, o restante das fêmeas pariu a termo e as suas proles foram avaliadas até a manifestação das características sexuais nos machos (descida dos testículos à bolsa escrotal e separação prepucial) e nas fêmeas (abertura do canal vaginal) e até a realização do teste de comportamento em campo aberto, aos 75 dias de idade. Os resultados mostram que as formulações fitoterápicas não interferiram no desenvolvimento ponderal dos machos tratados nem das suas progênies, mas interferiram no desenvolvimento ponderal das fêmeas antes do acasalamento. As formulações fitoterápicas interferiram no número total de espermatozóides armazenados na cauda do epidídimo e na morfologia espermática nos grupos tratados de forma dose dependente. O número de espermatozóides x 106 armazenados na cauda do epidídimo (x ± epm) foi de (GC- = 1978,8 ± 184,4; GC+ = 1322 ± 142,6; GS1 = 1735 ± 90,3; GS2 = 1448,3 ± 222,3; GS3 = 1174 ± 219,8; GI1 = 2071,6 ± 156,5; GI2 = 1864 ± 203,2; 1121,7 ± 175,9). O percentual de alterações morfológicas nos espermatozóides foi de (GC- = 6%; GC+ = 8,8%; GS1 = 13,3%; GS2 = 19,7%; GS3 = 22,6% e GI1 = 12,3%; GI2 =28,8% e GI3 =27,7%). As taxas de19,7%; GS3 = 22,6% e GI1 = 12,3%; GI2 =28,8% e GI3 =27,7%). As taxas de acasalamento apresentaram diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle negativo nas três doses do fitoterápico Isoflavine® (GC- = 69,2%; GC+ = 45,5%; GI1 = 22,2%; GI2 = 22%; GI3 = 37,5%) enquanto que os grupos tratados com o fitoterápico Soyfemme®, apenas a dose maior (GC- = 69,2%; GS3 = 30%). As taxas de gestação apresentaram diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle negativo no grupo controle positivo e a dose maior do fitoterápico Isoflavine® (GC- = 81,3; GC+ = 20%; GI3 = 0%). As taxas de perdas pós-implantação apresentaram diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle negativo em diferentes doses testadas dos dois fitoterápicos (GC- = 0%; GS3 = 21%; GI1 = 11,1%; GI2 = 8%). As taxas de parto foram diferentes estatisticamente do grupo controle negativo nos dois fitoterápicos (GC- = 100%; GS2 = 50%; GI2 = 50%). As taxas de desmame e viabilidade foram diferentes em relação ao grupo controle negativo apenas os grupos do fitoterápico Soyfemme® (GC- = 100%; GS2 = 0%; GS3 = 61,5). Na taxa de viabilidade GS2 diferiu de GC- (GC- = 100%; GS2 = 60%). Nas taxas de natalidade, apenas a maior dose do fitoterápico Isoflavine® apresentaram diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle negativo (GC- = 100%; GI2 = 55,5%). As fêmeas tratadas como fitoterápico Soyfemme® que sofreram cesarianas foram diferentes estatisticamente do grupo controle negativo no número de filhotes e no peso do útero gravídico. Com relação às progênies, não houve alterações nos grupos, no que se refere ao desenvolvimento ponderal individual, na massa corporal total da ninhada e no teste de comportamento em campo aberto. / In these work the effects of two commercials phytoterapics formulations containing [Glycine max (L.) Merr] soy Soyfemme® of Ache Laboratórios Farmacêuticos S.A and Isoflavine® of Herbarium Laboratório Botânico Ltda were evaluated on fertility, development weight of Wistar rats and of their offspring. Doses was obtained through the manufacturer recommendation be the therapeutical dose 4,3 mg.kg-1. The animals were divided in eight experimental groups, one negative control group (GC-), that received distillated water, one positive control group (GC+), that received similar soy isoflavones and three groups were treated with phytoterapic formulation Soyfemme® and three groups were treated with phytoterapic formulation Isoflavine® in three doses, 4,3mg.kg-1, 21,5m.kg-1 and 43mg.kg-1, respectively, GS1, GS2, GS3 and GI1, GI2, GI3. The animals were treated daily orally, in determined phases. The males were treated during ninety days, seventy days before the mating and twenty one during the mating. The females were treated before and during the mating, pregnancy and lactation.Half of the pregnant females were submitted to a cesarean section on the 21st day of pregnancy. The rest of the female were allowed to give birth, and their pups were evaluated until the manifestation of the sexual characteristics and until open field habituation task. The results showed that phytoterapics formulations have not interfered in the weight development of the male treated and neither their offspring but, have interfered weight development before mating females. Both phytoterapics formulations have interfered in the total number of spermatozoa stored in the caudal epididymis and the sperm morphology, in dose dependency. The number of stored spermatozoa in the caudal epididymis (x ± epm) was GC- = 1978,8 ± 184,4; GC+ = 1322 ± 142,6; GS1 = 1735 ± 90,3; GS2 = 1448,3 ± 222,3; GS3 = 1174 ± 219,8; GI1 = 2071,6 ± 156,5; GI2 = 1864 ± 203,2; 1121,7 ± 175,9. The percentage of morphologic modifications in the sperms was: GC- = 6%; GC+ = 8,8%; GS1 = 13,3; GS2 = 19,7; GS3 = 22,6 e GI1 = 12,3%; GI2 =28,8% e GI3 =27,7%. The index the of mating have presented statistic difference among the groups in three doses the Isoflavine® related to the negative control group (p < 0,01) (GC- = 69,2%; GC+ = 45,5%; GI1 = 22,2%; GI2 = 22%; GI3 = 37,5%) while the groups treated withSoyfemme® only the higher dose (GC- = 69,2%; GS3 = 30%). The index of pregnancy have presented statistic difference among the groups related to the negative control group in the positive control group and the Isoflavine® higher dose (p < 0,01) (GC- = 81,3; GC+ = 20%; GI3 = 0%). The index of pos-implantation loss presented statistic difference among the groups related to the negative control group in different doses in both phytoterapics (GC- = 0%; GS3 = 21%; GI1 = 11,1%; GI2 = 8%). The delivery index were different statistically to the negative control group in both phytoterapics (GC- = 100%; GS2 = 50%; GI2 = 50%). The index of the weanling and viability was different statistically related to the negative control only Soyfemme® (GC- = 100%; GS2 = 0%; GS3 = 61,5%). The viability index (GC- = 100%; GS2 = 60%). In the birth index only the higher dose presented statistic difference related to the negative control group Isoflavine® phytoterapic (GC- = 100%; GI2 = 55,5%). Females treated with Soyfemme® in the higher doses submitted to a cesarean section were different statistically to the negative control group in the pup numbers and the uterine gravidic weight. Concerning the pups there wasn’t any modification among the groups in terms of individual weight development, in the weight young’s and the open field habituation task.

Resumo não disponível.

Orientador: Clélia Akiko Hiruma-Lima / Coorientador: Lúcia Regina Machado da Rocha / Banca: Elfriede Marianne Bacchi / Banca: Joel Mesa / Banca: Alessandra Gambero / Banca: Cláudia Helena Pellizzon / Resumo: A doença ulcerosa péptica é um comprometimento da mucosa gástrica e duodenal de pacientes decorrente do ataque de fatores lesivos endógenos e/ou exógenos sobre este tecido. Dentre os fatores endógenos que favorecem o surgimento desta doença, destacam-se o enfraquecimento da barreira mucosa e o déficit de seus componentes protetores (como o muco e o bicarbonato) que, conseqüentemente contribuem para o avanço dos fatores lesivos sobre a mucosa péptica desprotegida. Entretanto, o freqüente e progressivo contato que os indivíduos têm com os fatores exógenos, como o uso constante de medicamentos (drogas antiinflamatórias não-esteroidais, antibióticos, dentre outros), o aumento na produção de ácido gástrico e o ataque da bactéria Helicobacter pylori são apontados como os mais freqüentes indutores de lesões ulcerosas. O estudo de novos compostos oriundos de plantas medicinais potencializa a descoberta de novos protótipos que podem ser utilizados na terapêutica. Estudos anteriores realizados no Laboratório de Ensaios Biológicos com Produtos Naturais (UNESP/Botucatu) caracterizaram fitoquimicamente o óleo essencial de Citrus aurantium, uma espécie medicinal que possui fortes indicativos de uso popular para gastrites e distúrbios do trato gastrintestinal, apontando a presença do monoterpeno ~-mirceno (1.43%) como um dos constituintes minoritários de sua composição. A proteção promovido pelo \3-mirceno, na dose de 7.5 mg/kg, variou de 60 a 86% de proteção da mucosa gástrica e duodenal o que representa uma ação equivalente a 13 vezes à promovida pela cimetidina (dose 100 mg/kg) ou 4 vezes o efeito do lansoprazol (30 rng/kg), duas drogas antiulcerogênicas padrão usadas na terapêutica. A etapa seguinte foi elucidar outros mecanismos de ação deste monoterpeno que envolveu a caracterização se sua propriedade antissecretória e cicatrizante gástrica. Para um melhor entendimento do trabalho, os resultados ... / Abstract: / Doutor

Orientador: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Lizandra Amoroso / Banca: Arthur dos Santos Mascioli / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito das cascas do barbatimão verdadeiro (Stryphnodendron adstringens Mart.) Coville, sobre o desempenho de frangos de corte e a atividade terapêutica no controle da eimeriose aviária. Foi utilizado um total de 700 pintos Cobb, machos, de um dia que foram distribuídos aleatoriamente em cinco tratamentos com quatro repetições. Os tratamentos corresponderam ao controle negativo não infectado, um controle positivo infectado e não tratado, outro controle positivo infectado tratado com salinomicina e dois tratamentos infectados e tratados com 1,5 e 3,00 ppm de barbatimão. As aves foram desafiadas com cepas contendo a espécie de Eimeria maxima. Foram avaliados parâmetros clínicos através da contagem de oocistos nas fezes e mortalidade. Realizou-se a determinação do consumo de ração, conversão alimentar, ganho de peso, peso vivo e viabilidade criatória das aves. Nos índices zootécnicos avaliados houve diferença estatística no consumo de ração nas fases inicial e crescimento. Com 42 dias houve diferença na conversão alimentar, peso vivo e viabilidade criatória. Houve redução da contagem de oocistos nas fezes das aves tratadas com barbatimão 1,5 e 3,00 ppm. No escore de lesão os tratamentos controle positivo desafiado tratado com salinomicina e com barbatimão 3,00 ppm apresentaram as menores médias. Sendo assim, infere-se que o fitoterápico proveniente de cascas moídas de barbatimão nas doses testadas 1,5 e 3,00 ppm auxilia no controle da eimeriose aviária, de forma progressiva à dose utilizada, atuando na redução de oocistos eliminados e no escore de lesão / Abstract: The objective of this study was to evaluate the effect of peels barbatimão true (Stryphnodendron adstringens Mart.) Coville on the performance of broilers and therapeutic activity in the control of avian eimeriosis. Was used a total of 700 Cobb chicks, males of a day that were randomly assigned to five treatments with four replications. The treatments corresponded to the uninfected negative control, a positive control infected and not treated, another positive control treated with salinomycin and infected two treatments infected and treated with 1.5 and 3, 00 ppm barbatimão. Birds were challenged with strains containing the species of Eimeria maxima. Clinical parameters were evaluated by counting oocysts in the feces and mortality. Was carried out to determine the feed intake, feed conversion, weight gain, weight alive and production viability of poultry. Indexes evaluated in statistical difference in feed intake in early and growth. With 42 days was no difference in feed conversion, live weight and production viability. Was reduction of oocyst count in feces of treated birds barbatimão with 1.5 and 3.00 ppm. Injury score in the positive control treatments challenged treated with salinomycin and barbatimão 3.00 ppm had the lowest averages. Accordingly, it is inferred that the herbal medicine from milled peels barbatimão the doses tested 1.5 and 3.00 ppm helps to control avian eimeriosis progressively the dose used, aimed at reducing oocysts eliminated and the lesion score / Mestre

Orientadora: Profª. Drª. Marilene da Cruz Magalhães Buffon / Coorientador: Profª. Drª. Raquel Rejane Bonato Negrelle / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Saúde Coletiva. Defesa: Curitiba, 30/06/2017 / Inclui referências, anexos e apêndice / Resumo: As plantas medicinais e a fitoterapia constituem as práticas integrativas e complementares com maior abrangência no Sistema Único de Saúde. Tais práticas apresentam alta relevância pois cerca de 80% da população mundial utilizam-nas em seus cuidados básicos de saúde. Dessa forma, o uso de plantas medicinais deve estar baseado em conhecimento científico que comprove a eficácia e segurança, e respaldado em políticas públicas adequadas. Com a finalidade de evitar o uso inadequado desta prática medicinal, o Ministério da Saúde buscou estimular a inserção da fitoterapia, entre outras práticas, no Sistema Único de Saúde. O presente estudo foi subdividido em 5 capítulos (artigos). Inicialmente, discutiu-se sobre as possibilidades e potencialidades da inserção das práticas integrativas e complementares, com ênfase nas plantas medicinais e fitoterapia, nos modelos de atenção em saúde hegemônicos, que privilegiam a prática dita tecnológica, com exclusão das práticas tradicionais. Em seguida, apresenta-se a sequência temporal e a evolução dos marcos legais associados às políticas públicas de plantas medicinais e fitoterápicos no Brasil. Os três últimos capítulos baseiam-se em levantamento etnobotânico e etnofarmacológico sobre o uso de plantas medicinais junto à comunidade da área de abrangência da Unidade de Saúde da Família Itambezinho, localidade rural do município de Campo Largo (Paraná, Brasil), onde buscou-se identificar as espécies vegetais utilizadas, forma e indicação de uso, assim como o local de obtenção das mesmas; comparar o emprego de plantas medicinais pela população estudada com o descrito na literatura, de modo a identificar incongruências e riscos de utilização inapropriada. A população amostral foi composta por 31 famílias, sendo que o maior número de entrevistados foram mulheres que possuíam entre 18 e 80 anos de idade, com escolaridade inferior a 8 anos de estudo e renda familiar inferior a 2 salários mínimos. O instrumento de coleta abordou questões socioeconômicas, questões relacionadas ao consumo de plantas medicinais e ao uso concomitante com medicamentos convencionais. Após a entrevista, foram coletadas amostras das plantas citadas, a fim de estabelecer a identificação botânica. Foram registradas 426 referências etnobotânicas junto aos entrevistados, associadas a 120 espécies predominantemente herbáceas. Dentre as plantas identificadas, as mais citadas foram Mentha arvensis L., Melissa officinalis L., Ruta graveolens L., Zingiber officinale Roscoe e Tanacetum vulgare L. Realizou-se ainda estudo sobre as plantas medicinais utilizadas com finalidade odontológica, e discutiu-se sobre riscos, contraindicações e/ou toxicidade associadas ao uso destas plantas medicinais, bem como potencial interação com medicamentos convencionais. Palavras-chave: Atenção Primária à Saúde, Etnofarmacologia, Medicina Tradicional, Plantas Medicinais, Terapias Complementares. / Abstract: Medicinal plants and phytotherapy constitute the integrative and complementary practices with greater coverage in the Unified Health System. These practices are highly relevant since around 80% of the world's population use them in their basic health care. Thus, the use of medicinal plants should be based on scientific knowledge to prove the effectiveness and safety and backed by appropriate public policies. In order to avoid the inappropriate use of this medicinal practice, the Ministry of Health sought to stimulate the insertion of phytotherapy, among other practices, in the Unified Health System. This study was subdivided into 5 chapters (articles). Initially, it was discussed about the possibilities and potential of the integration of integrative and complementary practices, with emphasis on medicinal plants and phytotherapy, in hegemonic health care models, that favor said technological practice, excluding traditional practices. Then, presents the temporal sequence and the evolution of the legal frameworks associated with the public policies of medicinal plants and herbal medicines in Brazil. The last three chapters are based on ethnobotanical and ethnopharmacological survey on the use of medicinal plants in the community of the area covered by the Itambezinho Family Health Unit, located in rural area of Campo Largo (Paraná, Brazil), where it was sought to identify the plant species used, form and indication of use, as well as the place of obtaining them; to compare the use of medicinal plants by the study population with that described in the literature in order to identify inconsistencies and risks of inappropriate use. The sample population consisted of 31 families, with the largest number of interviewees were women who were between 18 and 80 years old, with education less than 8 years of study and family income less than 2 minimum wages. The collection instrument addressed socioeconomic issues, issues related to the consumption of medicinal plants and the concomitant use of conventional medicines. After the interview, samples of the plants were collected, in order to establish the botanical identification. A total of 426 ethnobotanical references were registered among the interviewees, associated with 120 predominantly herbaceous species. Among the plants identified, the most cited were Mentha arvensis L., Melissa officinalis L., Ruta graveolens L., Zingiber officinale Roscoe and Tanacetum vulgare L. A study was also carried out on medicinal plants used for dental purposes, and the risks, contraindications and/or toxicity associated with the use of these medicinal plants were discussed, as well as potential interaction with conventional medicines. Keywords: Primary Health Care, Ethnopharmacology, Traditional Medicine, Medicinal Plants, Complementary Therapies.

Submitted by Naira Buzzo Anhesine null (nbanhesine@hotmail.com) on 2018-03-16T20:58:37Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de Mestrado_Naira Anhesine_VERSÃO FINAL.pdf: 14436445 bytes, checksum: f33c3d0298d9a260445f47abae8dcef1 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Carolina Gonçalves Bet null (abet@iq.unesp.br) on 2018-03-21T17:22:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 anhesine_nb_me_araiq_int.pdf: 12655628 bytes, checksum: 2d97859506140c833897e11b85dd720b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-21T17:22:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 anhesine_nb_me_araiq_int.pdf: 12655628 bytes, checksum: 2d97859506140c833897e11b85dd720b (MD5) Previous issue date: 2018-03-09 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O gênero Erythrina (Fabaceae) é amplamente conhecido pela forte presença de alcaloides eritrínicos, os quais são uma classe de metabólitos secundários descritos como marcadores quimiotaxonômicos do gênero. Estes alcaloides também são responsáveis por uma série de atividades biológicas relacionadas ao tratamento de desordens como insônia, ansiedade, depressão e epilepsia, dentre outras ações no Sistema Nervoso Central, tornando as espécies deste gênero potenciais drogas vegetais para o desenvolvimento de fitoterápicos. A eficácia de tais medicamentos só é possível se houver controle de qualidade rigoroso de todo o processo produtivo para garantir segurança toxicológica e constância na ação terapêutica, os quais são requisitos fundamentais exigidos para os medicamentos modernos. Um dos meios utilizados para tal fim é o perfil cromatográfico (fingerprint), o qual é indicado pela Farmacopeia Chinesa como um método potencial e mais confiável para o controle de qualidade de misturas complexas, como plantas medicinais. Neste contexto, o intuito deste trabalho é desenvolver método por UPLC-DAD-MS para obtenção de perfil cromatográfico dos extratos hidroalcoolicos de três espécies de Erythrina: E. verna, E. falcata e E. dominguezii, amplamente citadas em compêndios de medicina popular. Por apresentarem mesmo nome popular, mulungu, o controle de qualidade das espécies deste gênero faz-se necessário já que apresentam composições químicas diferentes. A abordagem empregada neste trabalho foi o preparo de uma amostra representativa e complexa (MIX) contendo as três espécies em estudo e seus quatro órgãos selecionados (folhas, cascas, flores e frutos) para que o método desenvolvido pudesse abranger todos eles. Contrariamente à metodologia tradicional e demorada utilizada para o desenvolvimento de método cromatográfico, empregou-se o software Fusion Method Development da S-Matrix® o qual maneja estatística complexa e modelos matemáticos possibilitando o desenvolvimento de método de forma rápida e eficaz. Através de suas quatro etapas (triagem, otimização, simulação de robustez e ajuste fino) foi possível determinar as variáveis cromatográficas mais influentes bem como obter um método cromatográfico em um curto período de tempo. Através das análises quimiométricas (PCA e OPLS-DA) foi possível observar que os órgãos e as espécies são diferentes entre si sendo que os alcaloides eritrinicos são os marcadores responsáveis pela diferenciação entre eles. Dessa forma, o controle de qualidade das espécies deste gênero, através de perfil cromatográfico, é necessário visto que apresentam composições químicas diferentes. Adicionalmente, visando obter padrões fitoquímicos para análises quantitativas, foram isoladas três substâncias do extrato da casca de E. dominguezii, sendo uma delas um flavonoide glicosilado identificado como vicenina-2, enquanto as outras duas, isoladas de uma fração supostamente constituida por alcaloides, são inéditas, pertencendo a uma classe nova de metabólitos secundários e não são alcaloides. Para tais estruturas, serão realizadas análises cristalográficas para confirmação estrutural. / The genus Erythrina (Fabaceae) is widely known for the strong presence of alkaloids, which are a class of secondary metabolites described as chemotaxonomic markers of the genus. These alkaloids are also responsible for a number of biological activities related to the treatment of disorders such as insomnia, anxiety, depression and epilepsy, among other actions in the Central Nervous System, making the species of this genus potential plant drugs for the development of herbal medicines. The efficacy of such drugs is only possible if there is strict quality control of the entire production process to ensure toxicological safety and consistency in therapeutic action, which are fundamental requirements for modern medicines. One of the means used for this purpose is the fingerprint, which is indicated by the Chinese Pharmacopoeia as a potential and more reliable method for quality control of complex mixtures, such as medicinal plants. In this context, the aim of this work is to develop a method by UPLC-DAD-MS to obtain a chromatographic profile of the hydroalcoholic extracts of three species of Erythrina: E. verna, E. falcata and E. dominguezii, widely cited in compendia of popular medicine. Because they present the same popular name, mulungu, the quality control of the species of this genus is necessary since they present different chemical compositions. The approach used in this work was the preparation of a representative and complex sample (MIX) containing the three species under study and its four selected organs (leaves,stem barks, flowers and fruits) so that the developed method could cover all of them. Contrary to the traditional and timeconsuming methodology used for the development of a chromatographic method, Fusion Method Development, software designed by S-Matrix®, was used, which handles complex statistics and mathematical models, making it possible to develop a method quickly and efficiently. It was possible to determine the most influential chromatographic variables as well as to obtain a chromatographic method in a short period of time through its four steps (screening, optimization, robustness simulation and fine tuning). Through the chemometric analysis (PCA and OPLS-DA) it was possible to observe that the organs and the species are different from each other and that the erythrin alkaloids are the markers responsible for the differentiation between them. In this way, the quality control of the species of this genus, through a chromatographic profile, is necessary since they have different chemical compositions. Additionally, in order to obtain phytochemical standards for quantitative analysis, three substances of the E. dominguezii stem bark extract were isolated, one of them being a glycosylated flavonoid identified as vicenin-2, while the other two, isolated from a fraction supposedly constituted by alkaloids, are unpublished, belonging to a new class of secondary metabolites and are not alkaloids. For such structures, crystallographic analyzes will be performed for structural confirmation. / 16/09235-9

Submitted by LUCAS DE PAULA RAMOS null (lucas93paula@hotmail.com.br) on 2017-01-20T14:09:20Z No. of bitstreams: 1 Dissertação (correções biblioteca).pdf: 4172563 bytes, checksum: 3cfab803e9b5a294021bdd02082d4128 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2017-01-24T17:04:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ramos_lp_me_sjc.pdf: 4172563 bytes, checksum: 3cfab803e9b5a294021bdd02082d4128 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-24T17:04:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ramos_lp_me_sjc.pdf: 4172563 bytes, checksum: 3cfab803e9b5a294021bdd02082d4128 (MD5) Previous issue date: 2016-12-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo do trabalho foi investigar se os extratos de Pfaffia paniculata K. e Juglans regia L. possuem ação antifúngica, antibacteriana e toxicidade celular, com testes in vitro. Para os testes antifúngicos foram utilizadas cepas ATCC de Candida spp., e para os testes antibacterianos foram utilizadas cepas ATCC de Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans e Pseudomonas aeruginosa. Para a atividade antimicrobiana primeiramente foram determinados os valores da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e da Concentração Microbicida Mínima (CMM) dos extratos pelo método de microdiluição em caldo, segundo Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Os micro-organismos que apresentaram CMM foram selecionados para os testes em biofilme, no qual foi preparado em fundo de placa com 96 poços, por 48 h. Após os biofilmes foram tratados por 5 min. utilizando as concentrações de 200, 100 e 50 mg dos extratos. Para mensuração da biomassa foi utilizado o teste de Cristal violeta (CV), e para avaliar a atividade metabólica foi utilizado o teste de MTT. A citotoxicidade foi avaliada sobre fibroblastos gengivais humanos (FMM-1) utilizando os mesmos parâmetros de tratamento utilizados para os testes em biofilmes. Foram avaliadas a viabilidade celular pelos testes de MTT, vermelho neutro e cristal violeta. Os dados obtiveram distribuição normal e foram analisados por ANOVA e teste de Tukey, com significância de 5% (p<0.05%). O extrato de P. paniculata demostrou ação antifúngica em biofilmes, com reduções médias de 29,4 e 42,7% nos testes de CV e MTT. Já a ação antibacteriana foi restrita a S. mutans e P. aeruginosa com reduções médias de 15,7 e 28,6% nos respectivos testes. O extrato de J. regia também demostrou ação antifúngica com redução média de 22,2% na biomassa e 31,4% na atividade metabólica. A ação antimicrobiana ficou restrita a P. aeruginosa com reduções médias de 17,7 e 15,6%, indicados pelos testes de CV e MTT. Quanto a citotoxicidade, a média entre os três testes realizados, indicou que após exposição ao extrato de P. paniculata 58,8% das células continuaram viáveis e para J. regia a viabilidade foi de 65,1%. Conclui-se queo extrato de P. paniculata demostrou ação antifúngica sobre todas as cepas de Candida spp. testadas e demostrou ação antibacteriana para P. aeruginosa e S. mutans. As concentrações de 200, 100 e 50 mg do extrato demostraram ser citotóxicas conforme nova diretriz de toxicidade. J. regia demostrou ação antifúngica sobre todas as cepas de Candida spp. testadas e demostrou ação antibacteriana sobre P. aeruginosa. Apenas a concentração de 200 mg do extrato se mostrou tóxica a FMM-1. / The aim of this study was to investigate whether extracts of Pfaffia paniculata K. and Juglans regia L. have antifungal, antibacterial and cellular toxicity, with in vitro tests. ATCC strains of Candida spp. Were used for antifungal tests, and ATCC strains of Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans and Pseudomonas aeruginosa were used for the antibacterial tests. For the antimicrobial activity, the values of the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and the Minimal Microbicidal Concentration (CMM) of the extracts were determined by the microdilution method in broth, according to Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). The microorganisms that presented CMM were selected for the biofilm tests, in which it was prepared on a 96-well plate bottom for 48 h. After the biofilms were treated for 5 min. Using the concentrations of 200, 100 and 50 mg of the extracts. To measure the biomass, the Violet Crystal test (CV) was used, and the MTT test was used to evaluate the metabolic activity. Cytotoxicity was assessed on human gingival fibroblasts (FMM-1) using the same treatment parameters used for biofilm tests. Cell viability was evaluated by the MTT, neutral red and violet crystal tests. The data obtained normal distribution and were analyzed by ANOVA and Tukey test, with significance of 5%. The extract of P. paniculata showed antifungal action in biofilms, with average reductions of 29.4 and 42.7% in CV and MTT tests; The antibacterial action was restricted to S. mutans and P. aeruginosa with mean reductions of 15.7 and 28.6% in the respective tests. The extract of J. regia also demonstrated antifungal action with an average reduction of 22.2% in biomass and 31.4% in metabolic activity. The antimicrobial action was restricted to P. aeruginosa with mean reductions of 17.7 and 15.6%, indicated by CV and MTT tests. As for cytotoxicity, the mean of the three tests carried out indicated that after exposure to P. paniculata extract 58.8% of the cells remained viable and for viability the viability was 65.1%. In conclusion the extract of P. paniculata showed antifungal action on all strains of Candida spp. Tested and demonstrated antibacterial action for P. aeruginosa and S. mutans. The concentrations of 200, 100 and 50 mg of the extract proved to be cytotoxic according to the new toxicity guideline. J. regia demonstrated antifungal action on all strains of Candida spp. Tested and demonstrated antibacterial action on P. aeruginosa. Only the 200 mg concentration of the extract was shown to be toxic to FMM-1.

Orientador: Ana Maria Soares Pereira / Coorientador: Bianca Waléria Bertoni / Banca: Filipe Pereira Giardini Bonfim / Banca: Sonia Marli Zingaretti / Banca: Marcia Ortiz Mayo Marques / Banca: Juliana da Silva Coppede / Resumo: Uncaria tomentosa Willd. ex Roem. & Schult. e Uncaria guianensis Gmell. são plantas medicinais nativas da Amazônia, utilizadas na medicina tradicional com ação anti-inflamatória, sofrem pressão antrópica como o desmatamento e extrativismo predatório para uso e necessitam de cuidados em relação à conservação. U. tomentosa é uma das plantas medicinais que compõe a lista da relação nacional de medicamentos essenciais (RENAME) disponibilizada pelo Ministério da Saúde para os municípios brasileiros, através do Sistema Único de Saúde (SUS) e a U. guianensis apesar de não estar nesta lista apresenta também alcaloides oxindólicos pentacíclicos, como marcadores químicos, sendo utilizada popularmente como anti-inflamatória e sua ocorrência na natureza é maior quando comparada à U. tomentosa. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a diversidade genética e química entre os indivíduos de U. tomentosa e U. guianensis por marcador molecular SRAP (Sequence-Related Amplifield Polymosphism) e quantificar os alcaloides oxindólicos pentacíclicos mitrafilina e isomitrafilina em folhas por HPLC. A coleta do material foi feita nos estados do Acre, Amazonas, Amapá e Pará. Para ambas as espécies foram coletadas oito populações, em municípios distintos com 20 indivíduos cada. A genotipagem de U. tomentosa foi realizada utilizando três combinações de primers e os fragmentos submetidos à eletroforese em gel de poliacrilamida. A genotipagem de U. guianensis foi realizada usando quatro combinações de primers e os fragmentos analisados no equipamento 4300 DNA Analyser LI-COR®. A quantificação dos alcaloides oxindólicos pentacíclicos mitrafilina e isomitrafilina foi realizada de acordo com método já descrito na literatura com algumas modificações. Nas populações avaliadas de U. tomentosa a variabilidade genética foi maior dentro (75%) das populações do que entre ... / Abstract: Uncaria tomentosa Willd. ex Roem. & Schult. and Uncaria guianensis Gmell. are medicinal plants natives from Amazonia state, used in the ocidental medicine for its anti-inflammatory effect, which are suffering from the actions of mankind by deforestation and predatory extraction, requesting care for their conservation. U. tomentosa is one of the medicinal plants that make up the national ratio of the list of essential drugs (RENAME) made available by the Ministry of Health to the municipalities through the Unified Health System (SUS) and U. guianensis although this is not list also features pentacyclic oxindole alkaloids, as markers, being popularly used as anti-inflammatory and its occurrence in nature is higher compared to U. tomentosa. The objectives of the present study were to evaluate the chemical and genetical diversity between individuals of U. tomentosa and U. guianensis by molecular marker SRAP (Sequence-Related Amplifield Polymosphism) and quantify pentacyclic oxindolic alkaloides mitraphylline and isomitraphylline in leaves via HPLC. Samples were collected in the states of Acre, Amazonas, Amapá and Pará. For both species, 20 samples were collected from each of the eight populations coming from different locations. The genotyping of U. tomentosa was realized by using the combination of three primers and the fractions submitted to an electrophoresis in acrylamide gel. The genotyping of U. guianensis was realized by using the combination of four primers and the fractions analyzed with a 4300 DNA Analyser LICOR®. The quantification of pentacyclic oxindole alkaloides mitraphylline and isomitraphylline were realized by using the existing method with some modifications. The U. tomentosa populations showed higher genetic variability inside the same population(75%) than between different populations (25%). The value of Fst was 0,246, showing that the populations are following the Island Model ... / Doutor

Orientador: Fabiana Pilarski / Banca: Fabiana Garcia Scaloppi / Banca: Talita Thomaz Nader / Resumo: Esta revisão tem como objetivo principal levantar possibilidades de aplicações da fitoterapia no tratamento de infestação causada por monogenóideos em peixes. Atualmente, com a intensificação da aquicultura, há o surgimento de surtos de doenças parasitárias e bacterianas que devastam economicamente a criação de peixes. Com isso, o uso indiscriminado de antimicrobianos e desinfetantes é frequente, a fim de controlar mortalidades e evitar grandes perdas econômicas. Estes podem resultar na contaminação dos peixes e de todos os organismos envolvidos na cadeia alimentar aquática, bem como do ambiente. Sendo assim, é necessária a procura por tratamentos alternativos eficazes e seguros e dentro dessa demanda, destaca-se a fitoterapia, prática milenar usada na medicina popular e na produção animal que tem se mostrado promissora, por utilizar produtos naturais com atividade antimicrobiana, imunoestimulante e antiparasitária (contra vírus, protozoários e helmintos). O uso de fitoterápicos tem se mostrado muito promissor na aquicultura, no entanto, como ainda é uma prática nova, pouco se conhece sobre os efeitos destes produtos nos patógenos e seus hospedeiros na aquicultura. / Abstract: This review aims clarify the role of herbal medicine, its numerous benefits and how it can be applied in the treatment of infestation caused by monogenean in fish. Currently, with the aquaculture intensification, there is the appearance of outbreaks of parasitic and bacterial diseases that economically devastate the fish production. Thus, use indiscriminate of antimicrobials and disinfectants is often to control mortalities and avoid huge economic losses, however, can result in contamination of fish and all bodies involved in the aquatic food chain and the environment. Therefore, the demand for safety and effective alternative treatments are needed, and the herbal medicine, millennial practice used in human medicine and animal production that has shown promise for using natural products with antimicrobial activity, immunostimulant and antiparasitic (against virus, protozoan and helminth). The use of herbal medicines has been shown to be very promising in aquaculture, however, it is still a new practice, little is known about the effects of these products on pathogens and their hosts. / Mestre