Submitted by MÔNICA SOUSA CAMPOS (monicabioufg@yahoo.com.br) on 2018-05-30T18:29:47Z No. of bitstreams: 1 Campos, Mônica Sousa.pdf: 6442713 bytes, checksum: b70652123809d9c255cdb371d59e5fd2 (MD5) / Approved for entry into archive by Paula Torres Monteiro da Torres (paulatms@sjrp.unesp.br) on 2018-05-30T20:03:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 campo_ms_do_sjrp_int.pdf: 6442713 bytes, checksum: b70652123809d9c255cdb371d59e5fd2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-30T20:03:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 campo_ms_do_sjrp_int.pdf: 6442713 bytes, checksum: b70652123809d9c255cdb371d59e5fd2 (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A crisina é um composto natural biologicamente ativo encontrado predominantemente em flores de maracujá azul, em mel, camomila, própolis e casca de frutas. Possui propriedades potentes como efeito anti-inflamatório, antioxidante e tem sido empregada para o tratamento de desordens reprodutivas. Essa flavona tem o potencial de aumentar os níveis de testosterona endógena, tanto por inibir a enzima aromatase, quanto por estimular a esteroidogênese testicular. Alterações no metabolismo hormonal mediadas por interferências exógenas podem interferir na fisiologia prostática resultando em modificações na atividade secretora da glândula e na regulação dos receptores hormonais. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da exposição à crisina sobre a próstata e gônadas de gerbilos adultos. Para avaliar o potencial androgênico da crisina, nós analisamos, comparativamente, os efeitos da testosterona sobre estes mesmos órgãos. Machos e fêmeas de gerbilos com 90 dias de idade foram tratados com crisina (50 mg/kg/dia) ou com cipionato de testosterona (1 mg/kg/semana) e divididos tem 3 subgrupos que foram eutanasiados após 3, 7 e 21 dias de tratamento. As próstatas foram coletadas para análises morfológicas, morfométrico-estereológicas, imuno-histoquímicas e ultraestruturais. Testículos e ovários foram submetidos a análises morfológicas e morfométrico-estereológicas. Os níveis séricos de testosterona e 17β-estradiol foram mensurados por ELISA. Machos e fêmeas tratados com crisina não apresentaram aumento dos níveis séricos de testosterona. No entanto, apenas as fêmeas tratadas com crisina durante 21 dias demonstraram aumento nos níveis séricos de estradiol. Foram observados tanto na próstata ventral masculina, quanto na próstata feminina em todos os tempos de tratamento com crisina, aumento da frequência de receptores androgênicos (AR), maior taxa de proliferação e hiperplasia glandular. Além disso, foi observada nas fêmeas em todos os tempos de exposição com crisina maior frequência imunomarcação para receptor estrogênico alfa (ERα). Ultraestruturalmente, machos e fêmeas tratados com crisina apresentaram intenso desenvolvimento das organelas da rota biossintética-secretora, acompanhada de intensa remodelação estromal, enquanto toxicidade celular foi observada apenas nas fêmeas. Nas gônadas masculinas o tratamento com crisina preservou a morfologia testicular. Em fêmeas, observou-se um maior número de folículos ovarianos em maturação. Comparativamente o tratamento com cipionato de testosterona foi capaz de causar lesões na próstata e gônadas, visto que focos de neoplasia intraepitelial prostática e degeneração gonadal foram observados em ambos os sexos. Esses resultados demonstram que a exposição à crisina, preservou a morfologia testicular normal, aumentou o número de folículos ovarianos em crescimento, aumentou a atividade secretória e alterou a regulação de receptores hormonais na próstata, potencializando a resposta desta glândula aos efeitos biológicos dos esteróides endógenos. Assim nas condições experimentais desse estudo embora a crisina e a testosterona evocassem alterações morfológicas semelhantes na próstata gerbilos masculina e feminina, a suplementação com crisina foi mais favorável à saúde da próstata. Contudo, a administração de crisina como agente fitoterápico deve ser considerada com precaução, visto que esse flavonóide parece exercer efeitos diferenciais em machos e fêmeas. / Chrysin is a naturally occurring biologically active compound found predominantly in blue passion flower, honey, chamomile, propolis and fruit peel. It has potent anti-inflammatory and antioxidant properties and has been used for the treatment of reproductive disorders. This flavone has the potential to increase endogenous testosterone levels both by inhibiting the aromatase enzyme and stimulating testicular steroidogenesis. Changes in hormone metabolism mediated by exogenous interferences may interfere with the prostatic physiology resulting in changes in the secretory activity of the gland and in the regulation of hormonal receptors. Thus, the objective of this study was to evaluate the effects of the exposure to chrysin on the prostate and gonads of adult gerbils. To evaluate the androgenic potential of chrysin, we comparatively analysed the effects of testosterone on these organs. Male and female gerbils aged 90 days were treated with either chrysin (50 mg/kg/day) or testosterone cypionate (1 mg/kg/week), subdivided into 3 subgroups and euthanized after 3, 7 and 21 days of treatment. The prostates and gonads were collected for morphological, morphometric-stereological, ultrastructural and immunehistochemical analyses. The testes and ovaries were subjected to morphological and morphometric-stereological analyses. Serum levels of testosterone and 17β-estradiol were determined using ELISA methods. Males and females treated with chrysin did not show increase in serum testosterone levels. However, only the females treated with chrysin for 21 days showed increase in the serum levels of estradiol. It was observed in both ventral prostate of males and in prostate of females in all the times of treatment with chrysin an increase in the frequency of androgen receptors (AR), a higher rate of proliferation and glandular hyperplasia. In addition, it was observed in all exposure times of females treated with chrysin a higher immunoreactivity frequency for alpha estrogen receptor (ERα). As to ultrastructure, males and females treated with chrysin showed intense development of the organelles of the biosynthetic-secretory route, accompanied by intense stromal remodeling. Cell toxicity was observed only in females. In the gonads of males the treatment with chrysin preserved testicular morphology. In females, we observed a larger number of ovarian follicles in maturation. Comparatively, the treatment with testosterone cypionate was able to cause lesions in the prostate and gonads, since the foci of prostatic intraepithelial neoplasia and gonadal degeneration were observed in both sexes. These results demonstrate that exposure to chrysin preserved normal testicular morphology, increased the number of ovarian follicles in growth, higher activity of secretory and changed the regulation of hormone receptors in the prostate potentiating the response of this gland to the biological effects of endogenous steroids. Therefore, under the experimental conditions of this study, although the chrysin and testosterone evoked similar morphological changes to those in the prostate of both sexes, supplementation with chrysin appeared to be more favorable to the prostate health. However, the chrysin intake as a phytotherapic agent should be considered with caution given that this flavonoid seems to exert distinct effects in males and females.

Orientadores: Sebastião Roberto Taboga, Fernanda Cristina Alcantara dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-13T09:12:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fochi_RicardoAlexandre_M.pdf: 6294791 bytes, checksum: 5a053efb4a1014d267ce5deceabfb000 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A próstata não é um órgão exclusivo do sistema reprodutor masculino, estando presente em fêmeas de diversas espécies de roedores e também na espécie humana. A próstata feminina tem sido considerada homóloga à próstata ventral masculina, sendo composta por um pequeno conjunto de glândulas e ductos entremeados a um estroma fibromuscular. Em fêmeas adultas de gerbilos da Mongólia (Meriones unguiculatus) a próstata apresenta uma localização parauretral, mostrando íntimo contato com a parede da uretra proximal e mediana. Em machos, a atuação dos reguladores hormonais, principalmente andrógenos e estrógenos, que influenciam a fisiologia prostática são bastante conhecidos. Em fêmeas, no entanto, os fatores que influenciam a atividade prostática são pouco conhecidos, embora já se saiba que as alterações hormonais comuns à senescência estejam associadas à instalação de lesões prostáticas. É sabido também que as oscilações hormonais que ocorrem durante o ciclo reprodutivo das fêmeas influenciam a morfofisiologia de vários órgãos do sistema reprodutor. Embora se saiba que a próstata feminina seja um órgão funcional e sensível à ação de hormônios esteróides, não é conhecido, até o momento, se as oscilações hormonais que ocorrem durante o ciclo reprodutivo podem alterar a biologia desta glândula. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar os aspectos morfofuncionais da próstata feminina durante o ciclo estral de gerbilos da Mongólia, o qual é constituído por quatro fases distintas, a saber: proestro, estro, diestro I e diestro II. Para isso, foram empregadas análises morfológicas, morfométricoesterológicas, sorológicas, imunocitoquímicas e enzimáticas. Os resultados obtidos com este estudo demonstraram que as oscilações hormonais que ocorrem durante o ciclo estral alteram a estrutura e funcionalidade da próstata feminina do gerbilo. Estas alterações compreendem um crescente desenvolvimento prostático e aumento da atividade secretória, em relação à secreção do antígeno prostático específico (PSA) e às glicoproteínas PAS positivas, durante as fases de proestro e estro, e uma gradual diminuição da atividade secretória e do desenvolvimento glandular nas fases de diestro I e II. O mesmo ocorreu com a atividade fosfatásica ácida prostática presente em todo o ciclo, a qual mostrou uma menor freqüência de ácinos com ausência de marcação na fase estro e uma maior freqüência nasfases subseqüentes (diestro I e II). Acredita-se, com base nos dados coletados, que estas oscilações cíclicas na morfofisiologia prostática sejam determinadas pelos picos hormonais de estrógeno no diestro II e pelos altos níveis de progesterona no estro, os quais interagem com os níveis constantes de andrógenos durante todo o ciclo estral. / Abstract: The prostate is not an exclusive organ of the male reproduction system, found in females of several rodents' species and also in humans. The female prostate has been considered homologue to the male ventral prostate and it is formed by a small cluster of glands and ducts inserted into a fiber muscular stroma. In adult female Mongolian gerbils (Meriones unguiculatus), the prostate presents a paraurethral location, showing close contact with the wall of urethra in its proximal and median regions. In males, the hormone action, mainly androgens and estrogens that influence the prostate physiology are well known. In females, however, the factors that influence the prostate activity are little know, although it is known that the hormonal changes, common to senescence, are associated with the genesis of prostate lesions. It is also known that hormonal oscillations that occur during the female's reproductive cycle influence the morphophysiology of several organs of the reproductive system. Although the female prostate is a functional organ and sensitive to the action of steroid hormones, it is not known, until now, if hormonal oscillations that occur during the reproductive cycle can alter the biology of this gland. Thus, the aim of this work was to evaluate the morphofunctional aspects of the female prostate during the Mongolian gerbil estrous cycle, which consists of four distinct phases, considering proestrus, estrus, diestrus I and diestrus II. For this, were employed morphological, morphometricstereological, serological, and enzyme immunocytochemistry analysis. The data showed that hormonal oscillations during the estrous cycle alter the structure and function of the gerbil female prostate. These changes include an increased prostate development and an increased secretory activity, in relation to the secretion of prostate specific antigen (PSA) and PAS positive glycoproteins, during the estrus and proestrus stages, and a gradual reduction in secretory activity and of the glandular development in the diestrus I and II stages. The same occurred with prostatic acid phosphatase activity, present throughout the cycle, which showed a lower frequency of acini with lack of marking in estrus phase and a higher frequency in subsequent phases (diestrus I and II). It is believed, based on collected data, that these morphophysiological cyclical changes in prostate are determined by hormonal peak of estrogen in diestrus II and the high levels of progesterone in estrus, which interact with the constant levels of androgens throughout the estrous cycle. / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Texto em português e inglês / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T04:58:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Biancardi_ManoelFrancisco_D.pdf: 15374332 bytes, checksum: b70012fe11a604131b1622adb07d2654 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Pesquisas recentes tem mostrado que a predisposição às desordens prostáticas tem origem nos momentos iniciais da vida. Portanto, o entendimento detalhado da organogênese prostática e dos mecanismos envolvidos na predisposição à estas desordens são de fundamental importância para se compreender a etiologia das patologias prostáticas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a organogênese prostática normal e a influência da exposição à testosterona durante a vida intrauterina e puberal sobre a próstata de fêmeas e machos senis do gerbilo da Mongólia. Para isto, o presente trabalho foi dividido em duas etapas. Na primeira, grupos de fêmeas grávidas de gerbilo receberam injeções subcutâneas de testosterona (500 µg/dose) 4 dias antes do parto (grupos TG e TG + T) e/ou durante a vida pós-natal (grupos C + T e TG + T). Os filhotes destas mães envelheceram até serem mortos com 1 ano de idade. Na segunda etapa, foi realizado um estudo normativo da organogênese do lobo ventral da próstata de machos. Para isto, fetos machos de 20 a 24 dias de gestação (E20 - E24), além de recém nascidos de 1 dia de idade (P1), foram empregados no estudo. Todos os fragmentos teciduais foram dissecados e fixados em metacarn ou paraformaldeído 4%, sendo processados para inclusão em parafina. Posteriormente, as seções teciduais foram submetidas à análises biométricas, morfológicas, estereológicas, imuno-histoquímicas, de imunofluorescência e de reconstrução tridimensional. Os resultados mostraram que somente os machos velhos do grupo TG + T foram acometidos por hiperplasia adenomatosa associada à inflamação, embora nos animais dos outros grupos experimentais também foram observados focos hiperplásicos na próstata. Já as fêmeas expostas à testosterona na fase pré-natal (grupos TG e TG + T) apresentaram uma maior heterogeneidade de alterações em decorrência do tratamento, que envolveram desde malformações do sistema reprodutor até a formação de tecido ectópico ao redor da vagina, além da presença de lesões prostáticas também caracterizadas por focos hiperplásicos adenomatosos. Estes resultados mostram que a exposição anormal à testosterona afeta a organogênese prostática tanto em machos quanto em fêmeas, alterando os processos normais do desenvolvimento e aumentando a suscetibilidade ao desenvolvimento de doenças ao longo do envelhecimento. Em relação ao estudo da organogênese prostática, foi observado que os brotos ventrais emergem do epitélio uretral entre o 20º e o 21º dia de vida pré-natal, atingindo o pé mesenquimal ventral (VMP) e iniciando o processo de morfogênese de ramificação no primeiro dia de vida pós-natal. Os achados também demonstraram que a camada de musculatura lisa parece ter um papel central neste processo, a qual pode atuar como uma barreira física à expansão dos brotos em direção ao VMP. Em relação aos receptores nucleares, o receptor de andrógeno apresentou uma expressiva imunomarcação no mesênquima periuretral, enquanto que células com marcação para receptor alfa de estrógeno foram identificadas tanto nos brotos como no mesênquima periuretral. Por fim, os resultados demonstram que a organogênese prostática, além de envolver uma série de eventos finamente regulados, é um processo extremamente sensível e determinante para a saúde da glândula ao longo da vida / Abstract: Recent researches have been shown that the predisposition to prostatic disorders has its origin during moments of early life. Therefore, the detailed understanding of prostate organogenesis and the mechanisms underlying in predisposing to these disorders are extremely important in order to highlight the etiology of prostatic pathologies. Thus, the aim of this work was to evaluate the normal prostate organogenesis and the influence of testosterone exposure during prenatal and pubertal life on the prostate of male and female Mongolian gerbil. To this, the present work was divided into two phases. First, groups of pregnant female received subcutaneous injections of testosterone (500 µg/dosage) four days before the parturition (groups TG and TG + T) and/or during postnatal life (groups C + T and TG + T). The offspring of these mothers aged, being killed with one-year-old. In a second moment, we realized a normative study of the organogenesis of male ventral prostate lobe. To this, male fetus with 20 and 24 (E20 - E24) days of gestation, besides newborn with one-day-old (P1), were employed in this study. All tissue fragments were dissected and fixed in methacarn or 4% paraformaldehyde, being processed for paraffin embedding. Following, tissue sections were submitted to biometrical, morphological, stereological, immunohistochemical, immunofluorescence and three dimensional reconstruction analyses. The results showed that only the old males of TG + T group were affected by adenomatous hyperplasia associated with inflammation, although in other male experimental groups we also observed hyperplastic foci in the prostate. The female exposed to testosterone during prenatal phase (TG and TG + groups) have demonstrated a higher heterogeneity of alterations due treatment, being characterized by reproductive system malformations, formation of ectopic prostatic tissue surrounding vaginal wall, besides the presence of prostatic lesions characterized by adenomatous hyperplasic foci. These findings show that abnormal prenatal exposure to testosterone affect the prostate morphogenesis in both male and female, disrupting normal developmental processes and increasing the susceptibility to the development of prostatic diseases during aging. Regarding the prostate organogenesis study, it was observed that the first ventral buds emerge from the ventral urethral epithelium between the 20th and 21th day of prenatal life, reaching the ventral mesenchymal pad (VMP) and initiating the branching process at the first day of postnatal life. We also noted that the smooth muscle layer seems to have a central play during this process, which may act as physical barrier to the buds heading to VMP. Regarding the nuclear receptors, the androgen presented a high immunomarking at the periurethral mesenchyme, whereas cells with positive marking for estrogen receptor alpha were identified either in the periurethral mesenchyme or in the buds. Finally, the results demonstrate that the prostate organogenesis, besides involving a series of events finely regulated, is an extremely sensitive and crucial to the health of the gland throughout the life / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Sebastião Roberto Taboga, Fernanda Cristina Alcântara dos Santos / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T18:00:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Perez_AnaPauladaSilva_D.pdf: 9263858 bytes, checksum: 6ed11b7c4d0102ec555e0f333c5a35e7 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Os disruptores endócrinos (DE) são agentes exógenos que interferem no funcionamento do sistema endócrino. O 17?-etinilestradiol (EE), um importante componente dos contraceptivos orais é um exemplo de DE. Alguns estudos com roedores machos e fêmeas relataram que a exposição aos DE durante o período pré-natal foi capaz de eliciar proliferações patológicas no sistema reprodutor, incluindo a próstata do animal adulto. Entretanto, pouco se sabe sobre a real ação do estrógeno nas próstatas de machos e fêmeas, principalmente quando se leva em consideração o comportamento de ambas às próstatas durante o desequilíbrio dos níveis de hormônios esteroides que ocorre na puberdade e durante o envelhecimento dessas glândulas. Assim o presente estudo, teve como objetivos avaliar por análises morfológicas, sorológicas e imunohistoquímica quais foram os efeitos da exposição à baixa dose de EE durante os períodos pré-natal e puberal sobre a próstata ventral masculina e na próstata feminina de gerbilo senil. Deste modo, nós dividimos os grupos experimentais de acordo com o período de exposição ao EE (15µg/kg/dia). EE/PRÉ durante o período pré-natal, EE/PUB durante a puberdade e o EE/PRÉ-PUB durante o período pré-natal e puberdade. A exposição à estrógenos sintéticos durante o desenvolvimento afeta o eixo hipotálamo-pituitária gonadal, alterando a produção de hormônios esteroides. Os resultados revelaram que a exposição ao EE durante o desenvolvimento prostático alterou os níveis de hormônios esteroides, diminuindo os níveis de testosterona nos machos senis dos grupos EE/PRÉ e EE-PRÉ/PUB e aumento, nas fêmeas senis do grupo EE/PRÉ. Os níveis de estradiol aumentaram nas fêmeas do grupo EE/PRÉ-PUB. A interação epitélio-estroma também foi afetada pela exposição ao EE durante o desenvolvimento, dado evidenciado pela diminuição da imunorreatividade de ?-actina de músculo liso em regiões com presença de lesões invasivas, principalmente na próstata ventral de macho senil. A frequência de células positivas de p63 diminuiu na próstata ventral masculina do grupo EE/PRÉ, provavelmente a camada basal diminui em locais onde se observa foco com NIP e, aumentou na próstata feminina do grupo EE/PUB. Entretanto, esses dados mostraram que a próstata ventral de machos senil foi mais sensível aos efeitos da exposição ao EE, comparado à próstata de fêmeas senis. A senescência é caracterizada pela queda dos hormônios sexuais¸ e nessa fase aumenta as doenças prostáticas em machos e fêmeas. A exposição ao EE durante fases críticas como o pré-natal e a puberdade acentuaram as alterações na estrutura glandular da próstata e aumentaram o desenvolvimento de lesões prostáticas na senescência. Assim como o período pré-natal, o puberal também foi considerado uma fase crítica na exposição ao EE sobre a próstata de gerbilos machos e fêmeas senis. O consumo de EE durante a gestação ou na puberdade altera significativamente a saúde prostática masculina e feminina durante o envelhecimento, e o gerbilo foi considerado um bom modelo para esse estudo / Abstract: Endocrine disruptor (ED) are exogenous agents that interfere in the endocrine system function. 17?-ethinylestradiol, an important component of oral contraceptives is an example of ED. Studies with male and female rodents have reported that exposure to ED during the prenatal period is able to elicit aberrant pathological proliferations in the reproductive system, inclusive in the prostate of the adult animal. However, the amount known about the actual action of estrogen on male and female prostate, mainly as is the behavior of both prostates during imbalance between androgen and estrogen that occurs in pubertal period and during senescence of these glands. Thus the present study aimed to evaluate by morphological, serological, histopathological and immunohistochemical methods, as the exposure to low dose of ethinylestradiol during the prenatal and pubertal periods acts on ventral male prostate and female prostate of senile gerbil. Thus, we divided the experimental groups according to the period of exposure to EE (15?g/kg/day). EE/PRE during the prenatal period, EE/PUB during puberty and EE/PRE-PUB during the prenatal period and puberty. Exposure to synthetic estrogens during development affects the hypothalamic-pituitary-gonadal axis this alters the production of steroid hormones. The results showed that exposure to EE during developing prostate changed steroid hormones levels, decreasing testosterone levels in senile male of EE/PRE and EE-PRE/PUB groups and increased in senile female of EE/PRE group. The estradiol levels enhanced in females of EE /PRE-PUB group. In addition, EE exposure during the prenatal and pubertal periods altered the immunoreactivity of AR, ER? and ER?, as the function of these receptors are critical for prostate development, changes these signaling pathways contributed to increase of development of lesion and inflammation prostate in males and females during senescence. The stromal-epithelium interaction was also affected by exposure to EE during developing, was observed by decreased immunoreactivity of smooth muscle ?-actin in regions where noted invasive lesions, mainly in the ventral male prostate of senile gerbil. Frequencies positive cells of p63 decreased in the ventral male prostate of EE/PRE group, the basal layer decreases in locals with NIP focus, and these frequencies increased the female prostate EE/PUB group. However, these data showed that the ventral male prostate of senile gerbil was more sensible to effects of exposure to EE compared to female prostate. Senescence is characterized by reducing of sexual hormones, in this phase increases the prostatic diseases in males and females. Exposure to EE during critical periods as prenatal and puberty accentuated the changes in prostate glandular structure and increased the developing prostatic lesions in senescence. As prenatal period, pubertal was also considered a critical phase during the exposure to EE on male and female prostate of senile gerbil. The use of EE during gestational or puberty phases significantly alters male and female prostate health during aging, and the gerbil was considered a good model for this study / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T21:03:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fochi_RicardoAlexandre_D.pdf: 82352124 bytes, checksum: 0b04a033b507e3af74ad263a5b3faa8a (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A próstata, glândula do sistema genital que tem origem embrionária a partir do seio urogenital, não é exclusiva do sistema reprodutor masculino, sendo também encontrada em fêmeas de vários mamíferos, incluindo humanos e roedores. No macho ela pode apresentar-se altamente desenvolvida em razão da maior quantidade do hormônio testosterona, e, apesar de pouco desenvolvida em fêmeas, devido à baixa quantidade desse mesmo tipo hormonal, é uma glândula funcional. Em fêmeas adultas de gerbilos, a próstata possui uma localização parauretral, exibindo íntimo contato com a parede proximal e medial da uretra, a qual é homóloga a próstata ventral de roedores machos. Embora se conheça a influência da progesterona na fisiologia do sistema reprodutor feminino e masculino, poucos estudos exploram a sua influência, especificamente, sobre a glândula prostática. Desta forma, este trabalho avaliou os aspectos morfofuncionais da glândula prostática masculina e feminina, resultantes da influência da progesterona, e de suas interações com o estradiol e a testosterona. Para isso, gerbilos machos e fêmeas foram castrados cirurgicamente no início do período puberal, aos 45 dias de idade. Ao completarem 90 dias de idade, os gerbilos receberam doses subcutâneas de progesterona ou desse somado a estradiol e testosterona, durante 14 dias. Nos animais castrados de ambos os sexos a próstata mostrou uma morfologia regredida, com uma redução significativa na sua capacidade de secreção, da quantidade de células receptoras de androgênio (AR) e receptoras de estrógeno ? (ER?), porém sem alterar a marcação para receptor de estrógeno ? (ER?). Dessa forma, a castração cirúrgica foi bastante importante, uma vez que permitiu mimetizar de forma satisfatória um ambiente prostático com baixos níveis hormonais. Nos dois sexos, a administração de progesterona isoladamente conseguiu reverter alguns desses efeitos, com uma melhora considerável no padrão secretório da glândula, porém estruturalmente essas mudanças ocorreram de forma moderada. Nesses animais, foi observado um aumento expressivo dos ERs ? e ?, além da presença de células receptoras de progesterona (PR). Em relação aos ARs foi evidenciado que a progesterona pode apresentar características indutoras ou inibitórias dependendo da sua concentração. O tratamento, simultâneo com a progesterona, de estradiol e testosterona desencadeou uma reestruturação glandular mais intensa nos machos e fêmeas, resultando em hipertrofia e hiperplasia do epitélio e do estroma glandular, recuperação do padrão de secreção e amplitude alveolar. Essas características, no entanto, foram acompanhadas pelo surgimento de lesões prostáticas como neoplasias intraepiteliais e o surgimento de debris celulares. A interação da progesterona com o estradiol também regulou positivamente os AR, ER? e ER?, porém não apresentou qualquer efeito sobre os PRs quando comparado aos animais tratados somente com progesterona. Em adição, nesses animais houve um aumento acentuado da proliferação celular, o qual foi contrabalanceado pelo aumento também do índice de morte celular. Nos animais tratados com progesterona e testosterona, a próstata também se desenvolveu e mostrou um aumento das células AR-positivas e do índice apoptótico, havendo, entretanto uma redução dos ER?, ER? e PR. Dessa forma, é razoável concluir que a próstata feminina e masculina comporta-se de forma bastante semelhante frente à ação dos hormônios progesterona, estradiol e testosterona. Ademais, embora a progesterona apresente efeitos estruturais razoáveis na glândula prostática, a sua interação com o estrógeno e a testosterona é capaz de promover uma intensificação desses efeitos, sem recriar, porém um ambiente homeostático semelhante aos dos animais intactos. A progesterona também mostrou ser um fator regulador em potencial da atividade proliferativa e apoptótica prostática, opondo-se aos efeitos da testosterona e do estradiol. Outro fator importante é a descoberta de que a progesterona pode induzir ou inibir a presença de células AR-positivas na glândula, e que esse dualismo funcional é resultado do efeito dose-dependente desse hormônio sobre a próstata / Abstract: The prostate is a gland of reproductive system that arises from the urogenital sinus, being located around the urethra below the bladder. The existence of this gland is not exclusive of the male reproductive system, being found in females of various species, including rodents and humans. In the male, it can be highly developed due to the increased amount of the testosterone, and although poorly developed in females, due to the low quantity of this hormone, it is a functional gland. The prostate of female gerbils has a paraurethral location, showing a closer contact with the proximal and medial urethra wall, being homologous to the ventral prostate of male rats. This study evaluates the morphofunctional aspects of the prostate gland in males and females, regarding the influence of progesterone, and their interactions with estradiol and testosterone. For this, male and female gerbils were surgically castrated in early pubertal period, at 45 days of age. At 90 days of age, the gerbils received subcutaneous doses of progesterone alone or associated to testosterone or estradiol during 14 days. In castrated animals of both sexes, prostate showed a regressed morphology, with a significant reduction in its secretion capacity, the amount of androgen receptor cells (AR) and estrogen receptor ? (ER?), but without changing the labeling for estrogen receptor ? (ER?). Thereby, surgical castration was very important, since it allowed mimetize a prostatic environment with low hormone levels. In both sexes, the administration of progesterone alone could reverse some of these effects with a considerable secretion improvement, but structurally these changes occurred in a moderate way. In these animals, we observed a significant increase of ER ? and ?, besides the presence of progesterone receptor (PR) cells. Regarding ARs, it was shown that progesterone can have inductor or inhibitory characteristics depending on its concentration. The treatment with progesterone plus estradiol and progesterone plus testosterone triggered a more intense prostate restructuration in male and female, resulting however in a hypertrophy and hyperplasia of the glandular epithelium and stroma, besides recovery of the alveoli amplitude and pattern of cellular secretion. These characteristics, however, were followed by the development of prostatic lesions like intraepithelial neoplasia and cellular desquamation. The progesterone and estradiol interaction also upregulated the AR, ER? and ER?, however had no effect on the PRs when compared to the animals treated with progesterone alone. In addition, in these animals there was a marked increase in cellular proliferation, which was counterbalanced by increased cell death. In animals of either sex treated with progesterone and testosterone, the prostate also became developed and showed an increase of AR-positive cells and apoptotic index, although there was a reduction of ER?, ER? and PR. Thus, it is reasonable to conclude that the female and male prostate behaves similarly after the progesterone, estradiol and testosterone administration. Moreover, although the progesterone has reasonable structural effects on the prostate gland, its interaction with estrogen and testosterone can intensificate these effects, but do not recover a homeostatic environment similar to that of intact animals. The progesterone also proved to be a potential regulatory factor of the proliferative and apoptotic activity, opposing the effects of testosterone and estradiol. Another important finding is that progesterone can induce or inhibit the presence of ARpositive cells in the gland, and this functional dualism is the result of dose-dependent effect of this hormone on the prostate / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Sebastião Roberto Taboga, Fernanda Cristina Alcântara dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T11:48:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Shinohara_FilipeZardini_M.pdf: 6449198 bytes, checksum: a8c73825ded0555e83a4ee262c264de8 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital quando liberada / Abstract: The abstract is available with the full electronic document when available / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Sebastião Roberto Taboga, Fernanda Cristina Alcântara Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T07:20:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_DiegoAugustoLopesda_M.pdf: 2979999 bytes, checksum: 9599710cd18bf699e32f5e46a65eb134 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A próstata feminina é uma glândula funcionalmente ativa encontrada em diversas espécies de mamíferos, incluindo humanos e roedores. Em fêmeas adultas de gerbilos, a próstata apresenta localização parauretral, exibindo íntimo contato com a parede da uretra média e distal. Esta glândula é homóloga a próstata ventral de roedores machos, sendo formada por um conjunto de glândulas e ductos inseridos em um estroma fibromuscular. O estudo da morfofisiologia prostática nas fases do ciclo estral tem demonstrado que a próstata feminina é influenciada pelas oscilações nos níveis séricos de estradiol e progesterona. Assim, tornam-se necessários estudos que avaliem o efeito da exposição ao estradiol em longo prazo, com o objetivo de observar como este esteróide atua no desenvolvimento de lesões prostáticas. Além disso, de igual importância é avaliar a interação dos estrógenos com outros esteróides circulantes, a fim de se avaliar quais associações hormonais são necessárias para manter o equilíbrio homeostático da próstata feminina do gerbilo. A partir do proposto, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da administração prolongada de estradiol, e de estradiol + testosterona, sobre a próstata de fêmeas ovariectomizadas. Para isso, as fêmeas adultas foram submetidas à intervenção cirúrgica para remoção dos ovários e, após 10 dias de recuperação, foram submetidas à administração de estradiol, e de estradiol + testosterona. Após trinta dias de tratamento, os animais foram sacrificados e as glândulas prostáticas submetidas a análises morfológicas, morfométrico-estereológicas e sorológicas. Alterações morfológicas e fisiológicas foram observadas em todos os grupos experimentais. A restrição hormonal resultante da ovariectomia causou grande regressão glandular e diminuição da atividade secretora, aspectos revertidos pela exposição dos animais ao estrógeno isolado e conjugado à testosterona. Entretanto, esses hormônios não foram capazes de reestabelecer a histoarquitetura normal do tecido. Foram observadas, inclusive, algumas lesões presentes principalmente nos grupos tratados, tais como inflamações e neoplasias intraepiteliais. A imunorreação para o ER-? foi reduzida nos núcleos do estroma prostático após castração e foi recuperado com os tratamentos. Já a localização de ER-? no núcleo das células epiteliais mostrou-se muito semelhante em todos os grupos. Sugere-se, ainda, uma atuação do estradiol na regulação dos níveis séricos de prosgesterona e testosterona. Sendo assim, conclui-se que a histoarquitetura normal da glândula nas fêmeas está relacionada ao equilíbrio entre os hormônios ovarianos e que, dentre eles, o estradiol e a testosterona desepenham papel importante na homeostasia prostática desses animais / Abstract: The female prostate is a functional gland found in several mammal species, including humans and rodents. In adult female gerbils, the prostate shows paraurethral localization, exhibiting intimate contact with medial and distal urethra wall. This gland is homologous to ventral prostate in male rodents, composed by a group of acini and ducts inserted into a fibromuscular stroma. Prostate morphophysiology estudies during estrous cycle have shown that female prostate is influenced by estradiol and progesterone serum levels oscillations. Thus, studies which evaluate the effect of long-term exposure to estradiol become necessary, in order to observe the way this steroid acts by on prostate lesions development. Furthermore, it is also important to evaluate hormonal interaction among estradiol and other serum steroids with the aim of evaluating which hormonal associations are necessary to maintain the homeostatic balance of gerbil female prostate. Hence, this study role was to evaluate the effect of estradiol and estradiol plus testosterone long-term exposure on the prostate of ovariectomized females. To make it possible, adult females underwent to surgical intervention to remove both ovaries and, after 10 days recovering, they received estradiol or estradiol plus testosterone doses. After 30 days of treatment, the animals were euthanized and de prostate glands were submitted to morphological, morphometric-estereological and serological analysis. Morphological and physiological alterations were observed in all experimental groups. Hormonal deprivation caused by castration brought glandular atrophy and decreased secretory activity. These aspects were reverted by animals exposure to isolated estrogen and estrogen plus testosterone conjugation. However, these hormones were not able to reestablish the tissue normal histoarchitecture. Some lesions were even observed mainly in tratment groups, like inflammations and intraepithelial neoplasias. The imunoreaction for ER-? decreased in prostate stroma nuclei after castration and was restablished with treatments. On the other hand, the epithelium ER-? expression was similar in all groups. It also seems that there is a role played by estradiol in testosterone and progesterone serum levels regulation. In conclusion, normal histoarchitecture of gerbil female prostate is related to ovarian hormones balance and estradiol and testosterone play an important role in prostatic homeostasis in these animals / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Coorientador: Silvana Gisele Pegorin de Campos / Banca: Ana Claudia Polli Lopes / Banca: Ana Paula Girol / Banca: Maria Tercilia Vilela de Azeredo Oliveira / Banca: Claudia Regina Bonini Domingos / Resumo: A incidência de câncer de mama tem aumentado consideravelmente ao longo dos anos. Frente a esta alta taxa epidemiológica a atenção às causas desta doença tem sido significativa em meio a grupos de pesquisa. Fatores genéticos e algumas situações de risco, como a exposição a componentes químicos disruptores endócrinos, podem estimular o seu desenvolvimento. O bisfenol A (BPA), utilizado na manufatura de plásticos e resinas, pode ser liberado destes componentes e exercer efeitos estrogênicos, causando distúrbios na função endócrina e aumentando a predisposição à carcinogênese. Alguns estudos têm demonstrado os efeitos do BPA em longo prazo, de modo que sua exposição durante o período de desenvolvimento embrionário inicial e perinatal pode predispor a glândula mamária (GM) ao desenvolvimento de câncer em indivíduos já adultos. Seu mecanismo de ação, assim como o do estradiol endógeno, baseia-se principalmente na ligação a receptores celulares hormonais, podendo estimular a proliferação, promovendo um desbalanço nos ciclos de renovação celular mamária. Para o estudo de carcinogênese o gerbilo da Mongólia (Meriones unguiculatus) é um modelo experimental interessante, já que possui capacidade de desenvolver tumores espontâneos em órgãos hormônio-responsivos, mimetizando, naturalmente, o ambiente de um indivíduo predisposto à tumorigênese. Assim, os objetivos deste trabalho foram (1) caracterizar morfologicamente a GM de fêmeas de gerbilo da Mongólia em diferentes estágios... / Abstract: The incidence of breast cancer has increased considerably over the years. Facing this high epidemiological rate, attention to the causes of this disease has been significant among research groups. Genetic factors and some risk situations, such as exposure to chemical endocrine disrupting components may stimulate its development. Bisphenol A (BPA), a compound used in the manufacture of plastics and resins, can be released from these components and exert estrogenic effects, causing disturbances of endocrine function and increasing the predisposition to carcinogenesis. Some studies have demonstrated the long-term effects of BPA, in a way that exposure during embryonic development (perinatal phase) may predispose the mammary gland (MG) to development of cancer in adults. Its mechanism of action, as that of endogenous estradiol, is mainly based on cellular hormonal receptors binding, which can stimulate the proliferation, promoting an imbalance of breast cell cycles and renewal. For these carcinogenesis studies, the Mongolian gerbil (Meriones unguiculatus) is an interesting experimental model, since it has the ability to develop spontaneous tumors in hormone-responsive organs, naturally mimicking the environment of an individual predisposed to tumorigenesis. Thus, the aims of this study were to (1) characterize morphologically the mammary gland of Mongolian gerbil females at different stages of functionality, (2) describe morphological changes found in the MG of adult females ... / Doutor

Orientadores: Sebastião Roberto Taboga, Silvana Gisele Pegorin de Campos / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T14:53:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncalves_BiancaFacchim_D.pdf: 8580892 bytes, checksum: 1e3927b5ad73e189b4b4245aa141895e (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Um dos principais desafios no campo de pesquisa do câncer prostático é a busca por sistemas modelo que permitam a investigação dos aspectos patológicos, bioquímicos e genéticos desta doença. O gerbilo Meriones unguiculatus tem possibilitado a avaliação de lesões prostáticas e sua evolução de estágio benigno para maligno (invasivo) após período relativamente curto de tratamento com o carcinógeno N-Metil-N-Nitrosuréia (MNU), um potente causador de metilação do DNA por ação direta. Assim, o presente trabalho teve por objetivos: 1) Determinar a incidência, multiplicidade e latência tumoral de lesões espontâneas e quimicamente induzidas nos lobos prostáticos ventral e dorsolateral do gerbilo; 2) Investigar se o estradiol exerce papel protetor e/ou promotor sobre neoplasias induzidas por MNU; 3) Avaliar o potencial promotor da dieta hiperlipídica sobre a carcinogênese induzida na próstata ventral; 4) Analisar a participação de produtos alterados de genes ras e do status global de metilação do DNA do epitélio prostático no processo tumoral mediado por MNU. Para tanto foram utilizados animais adultos submetidos à dose única intraperitoneal de MNU (50mg/Kg), exceto o grupo controle. Os grupos experimentais foram submetidos à exposição crônica de andrógeno, estradiol ou dieta hiperlipídica por 14 e 28 semanas. As metodologias aplicadas envolveram análises quantitativas e estatísticas de multiplicidade e incidência de lesões prostáticas, peso corporal, acúmulo de gordura corporal, peso prostático, dosagens hormonais, índice proliferativo, cariometria, frequência de células AR-positivas e basais, status global de metilação e determinação da expressão de proteínas. O modelo de indução tumoral prostática por MNU associado à testosterona no gerbilo se mostrou eficaz, pois reduziu a latência tumoral e permitiu o estudo de estágios avançados da carcinogênese após curto período. As neoplasias se manifestam inicialmente no lobo dorsolateral e requerem um tempo maior para se estabelecer no lobo ventral. No entanto, a progressão de lesões pré-malignas para malignas ocorre de maneira mais significativa no lobo ventral. Isso indica que a progressão tumoral ocorre de maneira distinta entre os lobos prostáticos e que vias alternativas estão possivelmente envolvidas nesse processo. A longa exposição a altas doses de estrógeno foi capaz de prevenir e reduzir a taxa de crescimento tumoral. Apesar dos efeitos terapêuticos contra a progressão neoplásica, a terapia estrogênica levou ao estabelecimento de um epitélio com características distintas da próstata normal, como: mudanças no padrão de metilação do DNA e aumento de células basais e AR positivas. Juntos, esses eventos contribuíram para criar um ambiente epitelial instável que pode provocar a recidiva das lesões em períodos subsequentes. A associação entre MNU e dieta hiperlipídica promoveu aumento na incidência de lesões estimuladas pelo carcinógeno isoladamente, as quais apresentaram maior número de células AR-positivas, ruptura da camada de músculo liso indicando microinvasão tumoral, e alta reatividade para metaloproteinase do tipo 2. A análise molecular indicou alta expressão das proteínas Ras em tecidos induzidos por MNU, sugerindo a participação dessa via na promoção e progressão de tumores prostáticos. Assim, conclui-se que a dieta hiperlipídica pode ser considerada um agente promotor da carcinogênese prostática, e o gerbilo representa um bom modelo para estudos histopatológicos / Abstract: One of the major challenges in the field of prostate cancer research is the search for model systems that allow the investigation of pathological, biochemical and genetic factors of this disease. The gerbil Meriones unguiculatus has enabled the evaluation of prostate lesions and evolution from benign to malignant (invasive) stage after a relatively short period of treatment with the carcinogen N-methyl-N-nitrosourea (MNU), a potent causative of DNA methylation by direct action. Thus, this study aimed to: 1) Determine the incidence, multiplicity, and tumor latency of spontaneous and chemically-induced lesions in ventral and dorsolateral gerbils' prostatic lobes; 2) Investigate whether estradiol exerts protective and/or promoter hole on neoplasms induced by MNU; 3) Evaluate the promotional potential of high-fat diet on induced-carcinogenesis in ventral prostate; 4) Analyze the involvement of altered ras gene products and the global DNA methylation status of prostate epithelium on MNU-mediated tumor process. Therefore, we used adult animals subjected to a single intraperitoneal dose (50mg/kg) of MNU, except the control group. The experimental groups were subjected to chronic exposure of androgen, estradiol or high-fat diet for 14 and 28 weeks. The methodologies involved quantitative and statistical analysis of multiplicity and incidence of prostatic lesions, body weight, body fat accumulation, prostate weight, hormonal measurements, proliferative index, karyometry, frequency of AR-positive and basal cells, global methylation status and determination of protein expression. The model of prostatic tumor induction by MNU associated with testosterone in the gerbil was effective because it reduced tumor latency and allows the study of advanced stages of carcinogenesis after short period. Neoplasms manifest initially in dorsolateral lobe and require a longer time to be established in ventral lobe. However, the progression from premalignant to malignant lesions occurs more significantly in the ventral lobe. This indicates that tumor progression occurs differently between prostatic lobes and alternative pathways maybe possibly involved in this process. Long exposure to high doses of estrogen was able to prevent and reduce the rate of tumor growth. Despite therapeutic effects against neoplastic progression, estrogen therapy led to the establishment of an epithelium with distinct characteristics from normal prostate, such as changes in the pattern of DNA methylation and increased amount of basal cell and ARpositive cells. Together, these events contributed to create an unstable epithelial compartment that can cause lesions recurrence in subsequent periods. The association between MNU and high-fat diet promoted an increase in incidence of lesions stimulated by carcinogen alone, which had a higher number of AR-positive cells, disruption of the smooth muscle layer indicating tumor microinvasion and high reactivity for metalloproteinase type 2. Molecular analysis indicated high expression of Ras proteins in tissues induced by MNU, suggesting the involvement of this pathway in the promotion and progression of prostate tumors. Thus, we conclude that the high-fat diet can be considered a promotional agent of prostate carcinogenesis and that gerbil is a good model for histopathological studies / Doutorado / Biologia Celular / Doutora em Biologia Celular e Estrutural