Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Coorientador: Patricia Simone Leite Vilamaior / Banca: Manoel Francisco Biancardi / Banca: Wellerson Rodrigo Scarano / Resumo: Embora haja indícios de que o óleo mineral apresente atividade estrogênica in vitro, a influência do óleo mineral purificado em estudos de desregulação endócrina é desconhecida. Um modelo interessante para esse tipo de estudo é a próstata, uma glândula dependente de hormônios esteróides para sua manutenção, sendo sensível a substâncias que interferem nas vias endócrinas. Uma alternativa de veículo utilizado em pesquisas científicas é o óleo de milho, entretanto esse óleo possui fitoesteróis em sua composição, o que pode comprometer seu uso em pesquisas principalmente na área de endocrinologia. Como atualmente não há informações da comparação dos efeitos de diferentes veículos sobre a próstata de animais de laboratório, este estudo comparou, pela primeira vez, a ação do óleo mineral e do óleo de milho sobre a morfofisiologia da próstata de gerbilos. Para isso, gerbilos machos adultos (90 dias de idade, n = 6) foram separados em 3 grupos experimentais: controle intacto (CI), gavagem com óleo mineral (MO) e gavagem com óleo de milho (CO). Os óleos, mineral e de milho, foram administrados aos animais de 90 a 115 dias de idade, via gavagem, que logo após, aos 116 dias de idade, foram eutanasiados. As próstatas foram removidas e processadas para análise histológica. Foram realizadas análises morfométricas, biométricas, estereológicas e de imunohistoquímicas para de a detecção de receptores de andrógenos (AR) e estrógenos (ERS1, ERS2). Os níveis séricos de... / Abstract: Even though there are indications that mineral oil has in vitro estrogenic activity, the influence of purified mineral oil in endocrine deregulation studies is unknown. An interesting model for this kind of study is the prostate, a gland dependent on steroid hormones for its maintenance, and sensible to substances that interfere with the endocrine pathways. An alternative vehicle used in scientific researches is the corn oil; nevertheless, this oil has phytosterols in its composition, and this can compromise its use in researches, mainly in the endocrinology area. As it is not an information comparing the effects of different vehicles on a prostate of laboratory animals, this study compared, for the first time, the action of mineral and corn oil on the prostate morphophysiology of gerbils. For this, adult male gerbils (90 days old, n=6) were divided in three experimental groups: intact control (IC), mineral oil (MO) and corn oil (CO). Mineral and corn oil were administered to animals from 90 to 115 days old, by gavage, and the animals were euthanized at 116 days old. Morphometric, biometric, stereological and immunohistochemistry analyses for androgen (AR) and estrogen receptors (ERS1, ERS2) detection were performed. Serum levels of testosterone and estradiol were determined by ELISA assay. Treatment with mineral oil increased the AR and ERS1 expression, besides the serum level of estradiol. On the other hand, the treatment with corn oil decreased the AR expression, and enhanced the ERS1 and ERS2 expression. Furthermore, both treatments raised the muscle layer thickness around the prostatic acini. These data show that both mineral and corn oil caused morphological alterations on the gerbils prostate. Nevertheless, the morphological alterations due to mineral oil exposure were more significant, indicating its potential role as endocrine disrupting / Mestre

This thesis examined the odiferous nature of rodent saliva for the male Mongolian gerbil, male and diestrous female golden hamsters, and male and female degus. Within each species,like-sexed pairs were dichotomized as to dominance or submissiveness and individual animals were presented with salivary samples from dominant pairings, an opposing gender, and a saline control; in an open field arena. Both degus and gerbils did not show any discriminative responding, via sniffs, time spent in proximity of and approaches to allstimuli. Degus discriminated salivary stimuli over the control when allowed to contact the stimuli. Degus preferred, via approaches, female samples. Male hamsters discriminated amongst all stimuli for the three behavioral measures. Dominant males preferred other male cues over diestrous female and saline samples via sniff. For approaches, dominant males preferred other dominant cues over submissive or female cues. Submissives preferred all salivary cues over the control via sniffs, but showed no individual preferences amongst the salivary cues. Female hamsters discriminated amongst all stimuli via sniffs. Dominant females preferred other submissive samples over those of a male and preferred dominant and submissive samples over the control, submissive females preferred all three salivary cues over the control; no other preferences were found. The importance of salivary cues and the odiferous nature of chemical cues of all secretory by-products of rodents are discussed.

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Made available in DSpace on 2016-12-23T13:56:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao de Mayra Cunha Flecher Parte 1.pdf: 411121 bytes, checksum: 2e2fa35dfadad427bfb1686b54ea0759 (MD5) Previous issue date: 2010-04-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Introdução. Nos últimos anos, os gerbils têm sido usados como modelo de Toxocaríase experimental, especialmente, para os estudos de lesões oculares e do Sistema Nervoso Central. Objetivos. Estudar a migração das larvas e as lesões, por meio de estudo imunohistoquímico, em gerbils infectados ou reinfectados com Toxocara canis. Métodos. Gerbils foram infectados com 1.500 ovos embrionados de T. canis e eutanasiados 4, 8, 12, 24, 48, 72 e 96 horas; 7, 15, 30 e 60 dias após a infecção. Intestino delgado e grosso, fragmentos do fígado e do encéfalo foram pressionados entre duas lâminas para a contagem de larvas, e o pulmão, digerido com solução de pepsina ácida para a contagem das larvas no sedimento. De todos os órgãos foram colhidos fragmentos, e fixados em formol tamponado para estudo histológico e imunohistoquímico das lesões, com utilização de um soro policlonal obtido em coelhos infectados com T. canis. Outro grupo de gerbils, previamente infectados foram reinfectados, 30 dias após a primeira infecção, com 1.500 ou 1.000 ovos e sacrificados 4, 8, 48 e 72 horas, e 7, 15, 30 e 60 dias após a reinfecção sendo submetidos aos mesmos procedimentos dos animais com uma única infecção. Resultados. Os resultados mostraram que as larvas migraram nas primeiras 24 horas através do intestino delgado e ceco, a partir desse tempo elas começaram a ser observadas em grande número no fígado, apresentando concentração maior 48 horas após a infecção. Depois começaram a migrar para os pulmões e outros órgãos, reduzindo de número no fígado após uma semana de infecção, e voltando a aumentar após 15 dias, sendo ainda observadas até os 60 dias. Nos pulmões, as larvas foram abundantes após 72 horas, onde induziram grandes áreas de hemorragia, que reduziam em número progressivamente até 30 dias após a infecção. A partir de 96 horas, foram encontradas no encéfalo, onde predominaram até o fim do experimento. Nos animais reinfectados houve um aumento na proporção de larvas contadas no fígado, em relação à primoinfecção, e redução delas no encéfalo. Nos animais que receberam uma infecção, as alterações morfológicas nos diferentes órgãos, exceto nos sistema nervoso, caracterizaram-se por inflamação discreta ou moderada com grande quantidade de eosinófilos e agregados frouxos de macrófagos e eosinófilos. No encéfalo as larvas foram observadas intactas, com reação inflamatória muito escassa. Nos animais reinfectados, as lesões inflamatórias foram mais graves com granulomas epitelióides bem organizados, muitos com larva no centro, inclusive com lesões graves na substância branca de cerebelo. A imunohistoquímica detectou em todos os órgãos, na infecção primária e na reinfecção, antígenos da larva nas áreas de exsudato inflamatório difuso, nos granulomas e ao redor das larvas. Conclusão. Os resultados mostraram que a migração das larvas no gerbil segue o padrão observado em camundongos e ratos com uma fase neurotrópica mais tardia, com concentração de larvas no sistema nervoso central. Na reinfecção há evidencias de resposta imunitária adaptativa tipo TH2 (eosinofilia no exsudato inflamatório e granulomas eosinofílicos), com aumento da retenção de larvas no fígado retardando a sua chegada no encéfalo; embora os granulomas epitelióides nos animais reinfectados, ás vezes, tivessem larvas no seu interior, não havia evidência de agressão a essa larvas / Introduction. In last years, the gerbils have been used as experimental model of toxocariasis, especially for studies of ocular lesions and central nervous system. Objectives. To study the migration of larvae and lesions with immunohistochemical study in gerbils infected or re-infected with Toxocara canis. Methods. Gerbils were infected with 1,500 embryonated eggs of T. canis and euthanized 4, 8, 12, 24, 48, 72 and 96 hours, 7, 15, 30 and 60 days after infection. Small and large intestine, liver and brain fragments were pressed between two slides for larvae counts, and lung, digested with acid pepsin solution for larvae counts in the sediment. Formalin fixed fragments of different organs were paraffin embedded for histology and immuniohistiochenmistry, using anti-Toxocara polyclonal serum obtained from rabbits infected with T. canis. Previously infected gerbils were re-infected 30 days after the first infection, with 1,500 or 1,000 eggs and sacrificed 4, 8, 48 and 72 hours, 7, 15, 30 and 60 days after reinfection and underwent the same procedures for larvae counts and histology and immunohistochemestry studies.. Results. Toxocara larvae migrate within the first 24 hours through the small intestine and cecum; from that time they began to be observed in large numbers in the liver, reaching higher number at 48 hours after infection. Then they began to migrate to the lungs and other organs, decreasing the number in the liver after a week of infection, and increased again after 15 days, and still observed until 60 days. In the lungs, the larvae were abundant after 72 hours, which induced large areas of hemorrhage, and were reduced progressively until 30 days after infection. After 96 hours, larvae start to be found in the brain, where the larval burden increased progressively until the end of the experiment. In re-infected animals was an increase in the proportion of larvae counted in the liver in relation to the first infection, and reduction in the brain, at the same times post infection. In animals that received one infection, the morphological changes in various organs, except in the nervous system, characterized by mild or moderate inflammation with large numbers of eosinophils and loose aggregates of macrophages and eosinophils. In the brain larvae were found intact, with scarce or absent inflammatory reaction. In re-infected animals, inflammatory lesions were more severe in all organs, with well organized epithelioid granulomas, with or without larva. Central nervous system lesions were severe, mainly injury in the white matter and Purkinge cells of cerebellum. Immunohistochemistry detected in all organs from all animals larval antigens in areas of diffuse inflammatory exudates, in granulomas and around intact larvae. Conclusion. The results showed that the Toxocara canis larval migration pattern in gerbils is similar to that described in mice and rats, with a neurotropic later stage, leading to concentration of larvae in the central nervous system. Lesions observed after reinfection showed evidence of a TH2 type adaptive immune response (eosinophils in the exsudate and epitheliod eosinophilic granulomas) that would be in relationship with retention of larvae in the liver, delaying their arrival to the brain. Although larvae were sometimes found inside epithelioid granulomas, there was not evidence that larvae were injured by inflammatory cells

The neosporosis is a disease of great economic importance, is distributed worldwide and is considered today one of the major causes of abortion and neonatal deaths in cattle. The pathogenesis of Neospora caninum infection is not fully understood and some issues in this regard are important in determining the most efficient measures of control and prophylaxis of a flock. The exclusive use of animals in these studies are expensive and time consuming so, some species of animals, such as, the rodents, can be used to make it possible. The gerbils (Meriones unguiculatus) mimic infection in cattle and are considered highly sensitive to replication of the protozoan. This study evaluated the responses of these animal models, at different moments of infection, especially in the amount and severity of acute and chronic/persistent infections by N. caninum. In addition, the research sheds light the tissues preferred location/replication the protozoan in these rodent at different conditions depending on disease progresses. The results are presented in two articles. In chapter one, the aim was to characterize the acute infection by the protozoan for to determine the major tissue sites of replication in experimental models of M. unguiculatus. Thus we have demonstrated that, initially the protozoan made a replication, but there is a distribution in virtually all tissues of the host. In addition, we observed that without an effective action of the immune system to combat agent, the infection progresses to death of animals with characteristic signs rapidity detected between 3 and 5 days after initiation of infection. The second chapter, sought to establish in rodents (M. unguiculatus) chronically infected, which places the N. caninum prefers to develops chronic evolutive form bradyzoites that are characteristic of a phase of persistent disease, especially in regions of the CNS. Furthermore, we note that the dose inoculated interfere significantly in the induction of acute and chronic infection and this is reflected in the amount of detection of nucleic acids in different tissues, above all in the CNS. In this context, it was observed that the emergence of clinical signs was milder without the induction of severe and lethal infections in most chronically infected animals. Thus, through this study we can conclude that highly sensitive techniques are necessary to detect nucleic acids from N. caninum, especially in the CNS tissues in animals chronically infected. / A neosporose é uma enfermidade de grande importância econômica, encontra-se distribuída em todo o mundo e pode ser considerada atualmente, umas das maiores causas de aborto e perdas neonatais em bovinos. A patogenia da infecção pelo Neospora caninum não está totalmente esclarecida e algumas questões a este respeito são importantes para determinar medidas mais eficientes de controle e profilaxia de um rebanho. A utilização exclusiva de bovinos nestes estudos é dispendiosa e demorada, com isso, algumas espécies de animais, como os roedores, podem ser utilizadas para torna-la possível. Os gerbils (Meriones unguiculatus) mimetizam a infecção em bovinos e são considerados altamente sensíveis a replicação do protozoário. Neste estudo foram avaliados as respostas destes modelos animais, em momentos de infecção diferentes, principalmente em relação a quantidade e severidade da infecção aguda e crônica/persistente pelo N. caninum. Além disso, a pesquisa esclarece os tecidos preferenciais de localização/replicação do protozoário nestes roedores em diferentes condições conforme a evolução da doença. Os resultados estão apresentados em dois artigos. No capítulo um, o objetivo foi caracterizar a infecção aguda pelo protozoário, a fim de determinar os principais sítios teciduais de replicação em modelos experimentais de M. unguiculatus. Desta forma conseguimos demonstrar que, inicialmente o protozoário fez uma replicação, mas que há uma distribuição em praticamente todos os tecidos do hospedeiro. Além disso, foi possível observar que sem uma atuação efetiva do sistema imune no combate ao agente, esta infecção evolui para a morte dos animais com sinais característicos rapidamente detectados, entre 3 a 5 dias após o inicio da infecção. Já o segundo capítulo, buscou estabelecer em roedores (M. unguiculatus) cronicamente infectados, quais os locais onde preferencialmente o N. caninum desenvolve a sua forma evolutiva crônica de bradizoitos que são características de uma etapa persistente da doença, principalmente em regiões do SNC. Além disso, observamos que a dose inoculada interfere significativamente na indução de infecção aguda e crônica e isso se reflete na quantidade de detecção de acidos nucléicos nos diferentes tecidos, sobretudo no SNC. Neste contexto, foi possível observar que o aparecimento de sinais clínicos foram mais brandos sem a indução de infecções letais e severas na maioria dos animais cronicamente infectados. Assim, através desse estudo podemos concluir que são necessárias técnicas altamente sensíveis para detectar ácidos nucléicos do N. caninum, especialmente em tecidos do SNC em animais infectados crônicamente.

Submitted by MÔNICA SOUSA CAMPOS (monicabioufg@yahoo.com.br) on 2018-05-30T18:29:47Z No. of bitstreams: 1 Campos, Mônica Sousa.pdf: 6442713 bytes, checksum: b70652123809d9c255cdb371d59e5fd2 (MD5) / Approved for entry into archive by Paula Torres Monteiro da Torres (paulatms@sjrp.unesp.br) on 2018-05-30T20:03:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 campo_ms_do_sjrp_int.pdf: 6442713 bytes, checksum: b70652123809d9c255cdb371d59e5fd2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-30T20:03:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 campo_ms_do_sjrp_int.pdf: 6442713 bytes, checksum: b70652123809d9c255cdb371d59e5fd2 (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A crisina é um composto natural biologicamente ativo encontrado predominantemente em flores de maracujá azul, em mel, camomila, própolis e casca de frutas. Possui propriedades potentes como efeito anti-inflamatório, antioxidante e tem sido empregada para o tratamento de desordens reprodutivas. Essa flavona tem o potencial de aumentar os níveis de testosterona endógena, tanto por inibir a enzima aromatase, quanto por estimular a esteroidogênese testicular. Alterações no metabolismo hormonal mediadas por interferências exógenas podem interferir na fisiologia prostática resultando em modificações na atividade secretora da glândula e na regulação dos receptores hormonais. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da exposição à crisina sobre a próstata e gônadas de gerbilos adultos. Para avaliar o potencial androgênico da crisina, nós analisamos, comparativamente, os efeitos da testosterona sobre estes mesmos órgãos. Machos e fêmeas de gerbilos com 90 dias de idade foram tratados com crisina (50 mg/kg/dia) ou com cipionato de testosterona (1 mg/kg/semana) e divididos tem 3 subgrupos que foram eutanasiados após 3, 7 e 21 dias de tratamento. As próstatas foram coletadas para análises morfológicas, morfométrico-estereológicas, imuno-histoquímicas e ultraestruturais. Testículos e ovários foram submetidos a análises morfológicas e morfométrico-estereológicas. Os níveis séricos de testosterona e 17β-estradiol foram mensurados por ELISA. Machos e fêmeas tratados com crisina não apresentaram aumento dos níveis séricos de testosterona. No entanto, apenas as fêmeas tratadas com crisina durante 21 dias demonstraram aumento nos níveis séricos de estradiol. Foram observados tanto na próstata ventral masculina, quanto na próstata feminina em todos os tempos de tratamento com crisina, aumento da frequência de receptores androgênicos (AR), maior taxa de proliferação e hiperplasia glandular. Além disso, foi observada nas fêmeas em todos os tempos de exposição com crisina maior frequência imunomarcação para receptor estrogênico alfa (ERα). Ultraestruturalmente, machos e fêmeas tratados com crisina apresentaram intenso desenvolvimento das organelas da rota biossintética-secretora, acompanhada de intensa remodelação estromal, enquanto toxicidade celular foi observada apenas nas fêmeas. Nas gônadas masculinas o tratamento com crisina preservou a morfologia testicular. Em fêmeas, observou-se um maior número de folículos ovarianos em maturação. Comparativamente o tratamento com cipionato de testosterona foi capaz de causar lesões na próstata e gônadas, visto que focos de neoplasia intraepitelial prostática e degeneração gonadal foram observados em ambos os sexos. Esses resultados demonstram que a exposição à crisina, preservou a morfologia testicular normal, aumentou o número de folículos ovarianos em crescimento, aumentou a atividade secretória e alterou a regulação de receptores hormonais na próstata, potencializando a resposta desta glândula aos efeitos biológicos dos esteróides endógenos. Assim nas condições experimentais desse estudo embora a crisina e a testosterona evocassem alterações morfológicas semelhantes na próstata gerbilos masculina e feminina, a suplementação com crisina foi mais favorável à saúde da próstata. Contudo, a administração de crisina como agente fitoterápico deve ser considerada com precaução, visto que esse flavonóide parece exercer efeitos diferenciais em machos e fêmeas. / Chrysin is a naturally occurring biologically active compound found predominantly in blue passion flower, honey, chamomile, propolis and fruit peel. It has potent anti-inflammatory and antioxidant properties and has been used for the treatment of reproductive disorders. This flavone has the potential to increase endogenous testosterone levels both by inhibiting the aromatase enzyme and stimulating testicular steroidogenesis. Changes in hormone metabolism mediated by exogenous interferences may interfere with the prostatic physiology resulting in changes in the secretory activity of the gland and in the regulation of hormonal receptors. Thus, the objective of this study was to evaluate the effects of the exposure to chrysin on the prostate and gonads of adult gerbils. To evaluate the androgenic potential of chrysin, we comparatively analysed the effects of testosterone on these organs. Male and female gerbils aged 90 days were treated with either chrysin (50 mg/kg/day) or testosterone cypionate (1 mg/kg/week), subdivided into 3 subgroups and euthanized after 3, 7 and 21 days of treatment. The prostates and gonads were collected for morphological, morphometric-stereological, ultrastructural and immunehistochemical analyses. The testes and ovaries were subjected to morphological and morphometric-stereological analyses. Serum levels of testosterone and 17β-estradiol were determined using ELISA methods. Males and females treated with chrysin did not show increase in serum testosterone levels. However, only the females treated with chrysin for 21 days showed increase in the serum levels of estradiol. It was observed in both ventral prostate of males and in prostate of females in all the times of treatment with chrysin an increase in the frequency of androgen receptors (AR), a higher rate of proliferation and glandular hyperplasia. In addition, it was observed in all exposure times of females treated with chrysin a higher immunoreactivity frequency for alpha estrogen receptor (ERα). As to ultrastructure, males and females treated with chrysin showed intense development of the organelles of the biosynthetic-secretory route, accompanied by intense stromal remodeling. Cell toxicity was observed only in females. In the gonads of males the treatment with chrysin preserved testicular morphology. In females, we observed a larger number of ovarian follicles in maturation. Comparatively, the treatment with testosterone cypionate was able to cause lesions in the prostate and gonads, since the foci of prostatic intraepithelial neoplasia and gonadal degeneration were observed in both sexes. These results demonstrate that exposure to chrysin preserved normal testicular morphology, increased the number of ovarian follicles in growth, higher activity of secretory and changed the regulation of hormone receptors in the prostate potentiating the response of this gland to the biological effects of endogenous steroids. Therefore, under the experimental conditions of this study, although the chrysin and testosterone evoked similar morphological changes to those in the prostate of both sexes, supplementation with chrysin appeared to be more favorable to the prostate health. However, the chrysin intake as a phytotherapic agent should be considered with caution given that this flavonoid seems to exert distinct effects in males and females.

Orientador: Wílson de Mello Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-05T22:40:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_Sergio_D.pdf: 983105 bytes, checksum: 094b900c9660cff1d56f430164ecde05 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Doenças como o câncer e hiperplasia benigna de próstata estão relacionadas à falha no mecanismo de regulação do equilíbrio funcional entre os processos de proliferação celular e apoptose nas células prostáticas. O equilíbrio entre esses processos é controlado por níveis séricos de andrógenos e por fatores de crescimento. A vasectomia pode alterar tal equilíbrio por mecanismo ainda desconhecido. Durante os processos de carcinogênese da próstata, as interações parácrinas entre epitélio e estroma podem ser perturbadas, causando prejuízos tanto para epitélio quanto para musculatura lisa, e resultando em progressão para um estado anaplásico. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a influência da vasectomia sobre os processos de proliferação e morte celular, bem como avaliar a estrutura e a ultra-estrutura da próstata ventral de gerbilo após vasectomia. Foram realizados estudos estruturais (Hematoxilina-eosina; tricrômico de Masson, reticulina de Gömöri e reação de Feulgen), ultra-estrutural (Microscopia eletrônica de transmissão) e imuno-histoquímicos (anti-Ki67, anti-PCNA e anti-Caspase-9) na próstata ventral de gerbilos. Os índices de proliferação celular prostática aumentaram nos gerbilos vasectomizados, porém os índices de apoptose não sofreram alteração pós-vasectomia. O volume relativo do epitélio aumentou, enquanto o volume relativo da luz diminuiu após vasectomia. Contudo, a morfologia geral da próstata ventral de gerbilo não se alterou. Portanto, a vasectomia não provoca alterações estruturais ou ultra-estruturais significativas na próstata ventral de gerbilo. Porém, promove um desequilíbrio entre os processos de proliferação celular e apoptose, em favor da proliferação celular do epitélio na próstata ventral de gerbilo / Abstract: Diseases such as cancer and benign prostatic hyperplasia are related to the disruption in the mechanism of regulating the balance between both processes of cell proliferation and apoptosis in the prostatic cells. That balance is controlled by androgens and growth factors. Vasectomy might alter that balance by unknown mechanism yet. During process of prostatic carcinogenesis, the paracrine interaction between epithelium and stroma can be disrupted, causing damage to epithelium and smooth muscle cells. This results in progression to anaplastic state. Thus this study evaluates the influence of the vasectomy on both processes of cell proliferation and apoptosis in the epithelium of the gerbil ventral prostate, and evaluates structural and ultra-structural alterations induced by vasectomy on the gerbil ventral prostate. It was accomplished structural (Hematoxylineosin, Masson's trichrome, Gömöri¿s reticulin and Feulgen's reaction), ultra-structural (Transmission electron microscopy) and immunohistochemical (anti-Ki67, anti-PCNA e anti-Caspase-9) studies in the ventral prostate of the vasectomized and sham-operated gerbils. The indices of cell proliferation increased significantly in the vasectomized gerbil significantly after vasectomy. The epithelium relative volume increased, while the lumen relative volume decreased post-vasectomy. However the general morphology of the gerbil ventral prostate did not alter. Thus the vasectomy did not promote structural and ultrastructural alterations in the gerbil ventral prostate. But, cause imbalance between both processes of cell proliferation and apoptosis in favor cell proliferation in the epithelium of the gerbil ventral prostate / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Texto em português e inglês / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T04:58:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Biancardi_ManoelFrancisco_D.pdf: 15374332 bytes, checksum: b70012fe11a604131b1622adb07d2654 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Pesquisas recentes tem mostrado que a predisposição às desordens prostáticas tem origem nos momentos iniciais da vida. Portanto, o entendimento detalhado da organogênese prostática e dos mecanismos envolvidos na predisposição à estas desordens são de fundamental importância para se compreender a etiologia das patologias prostáticas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a organogênese prostática normal e a influência da exposição à testosterona durante a vida intrauterina e puberal sobre a próstata de fêmeas e machos senis do gerbilo da Mongólia. Para isto, o presente trabalho foi dividido em duas etapas. Na primeira, grupos de fêmeas grávidas de gerbilo receberam injeções subcutâneas de testosterona (500 µg/dose) 4 dias antes do parto (grupos TG e TG + T) e/ou durante a vida pós-natal (grupos C + T e TG + T). Os filhotes destas mães envelheceram até serem mortos com 1 ano de idade. Na segunda etapa, foi realizado um estudo normativo da organogênese do lobo ventral da próstata de machos. Para isto, fetos machos de 20 a 24 dias de gestação (E20 - E24), além de recém nascidos de 1 dia de idade (P1), foram empregados no estudo. Todos os fragmentos teciduais foram dissecados e fixados em metacarn ou paraformaldeído 4%, sendo processados para inclusão em parafina. Posteriormente, as seções teciduais foram submetidas à análises biométricas, morfológicas, estereológicas, imuno-histoquímicas, de imunofluorescência e de reconstrução tridimensional. Os resultados mostraram que somente os machos velhos do grupo TG + T foram acometidos por hiperplasia adenomatosa associada à inflamação, embora nos animais dos outros grupos experimentais também foram observados focos hiperplásicos na próstata. Já as fêmeas expostas à testosterona na fase pré-natal (grupos TG e TG + T) apresentaram uma maior heterogeneidade de alterações em decorrência do tratamento, que envolveram desde malformações do sistema reprodutor até a formação de tecido ectópico ao redor da vagina, além da presença de lesões prostáticas também caracterizadas por focos hiperplásicos adenomatosos. Estes resultados mostram que a exposição anormal à testosterona afeta a organogênese prostática tanto em machos quanto em fêmeas, alterando os processos normais do desenvolvimento e aumentando a suscetibilidade ao desenvolvimento de doenças ao longo do envelhecimento. Em relação ao estudo da organogênese prostática, foi observado que os brotos ventrais emergem do epitélio uretral entre o 20º e o 21º dia de vida pré-natal, atingindo o pé mesenquimal ventral (VMP) e iniciando o processo de morfogênese de ramificação no primeiro dia de vida pós-natal. Os achados também demonstraram que a camada de musculatura lisa parece ter um papel central neste processo, a qual pode atuar como uma barreira física à expansão dos brotos em direção ao VMP. Em relação aos receptores nucleares, o receptor de andrógeno apresentou uma expressiva imunomarcação no mesênquima periuretral, enquanto que células com marcação para receptor alfa de estrógeno foram identificadas tanto nos brotos como no mesênquima periuretral. Por fim, os resultados demonstram que a organogênese prostática, além de envolver uma série de eventos finamente regulados, é um processo extremamente sensível e determinante para a saúde da glândula ao longo da vida / Abstract: Recent researches have been shown that the predisposition to prostatic disorders has its origin during moments of early life. Therefore, the detailed understanding of prostate organogenesis and the mechanisms underlying in predisposing to these disorders are extremely important in order to highlight the etiology of prostatic pathologies. Thus, the aim of this work was to evaluate the normal prostate organogenesis and the influence of testosterone exposure during prenatal and pubertal life on the prostate of male and female Mongolian gerbil. To this, the present work was divided into two phases. First, groups of pregnant female received subcutaneous injections of testosterone (500 µg/dosage) four days before the parturition (groups TG and TG + T) and/or during postnatal life (groups C + T and TG + T). The offspring of these mothers aged, being killed with one-year-old. In a second moment, we realized a normative study of the organogenesis of male ventral prostate lobe. To this, male fetus with 20 and 24 (E20 - E24) days of gestation, besides newborn with one-day-old (P1), were employed in this study. All tissue fragments were dissected and fixed in methacarn or 4% paraformaldehyde, being processed for paraffin embedding. Following, tissue sections were submitted to biometrical, morphological, stereological, immunohistochemical, immunofluorescence and three dimensional reconstruction analyses. The results showed that only the old males of TG + T group were affected by adenomatous hyperplasia associated with inflammation, although in other male experimental groups we also observed hyperplastic foci in the prostate. The female exposed to testosterone during prenatal phase (TG and TG + groups) have demonstrated a higher heterogeneity of alterations due treatment, being characterized by reproductive system malformations, formation of ectopic prostatic tissue surrounding vaginal wall, besides the presence of prostatic lesions characterized by adenomatous hyperplasic foci. These findings show that abnormal prenatal exposure to testosterone affect the prostate morphogenesis in both male and female, disrupting normal developmental processes and increasing the susceptibility to the development of prostatic diseases during aging. Regarding the prostate organogenesis study, it was observed that the first ventral buds emerge from the ventral urethral epithelium between the 20th and 21th day of prenatal life, reaching the ventral mesenchymal pad (VMP) and initiating the branching process at the first day of postnatal life. We also noted that the smooth muscle layer seems to have a central play during this process, which may act as physical barrier to the buds heading to VMP. Regarding the nuclear receptors, the androgen presented a high immunomarking at the periurethral mesenchyme, whereas cells with positive marking for estrogen receptor alpha were identified either in the periurethral mesenchyme or in the buds. Finally, the results demonstrate that the prostate organogenesis, besides involving a series of events finely regulated, is an extremely sensitive and crucial to the health of the gland throughout the life / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Sebastião Roberto Taboga, Fernanda Cristina Alcântara dos Santos / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T18:00:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Perez_AnaPauladaSilva_D.pdf: 9263858 bytes, checksum: 6ed11b7c4d0102ec555e0f333c5a35e7 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Os disruptores endócrinos (DE) são agentes exógenos que interferem no funcionamento do sistema endócrino. O 17?-etinilestradiol (EE), um importante componente dos contraceptivos orais é um exemplo de DE. Alguns estudos com roedores machos e fêmeas relataram que a exposição aos DE durante o período pré-natal foi capaz de eliciar proliferações patológicas no sistema reprodutor, incluindo a próstata do animal adulto. Entretanto, pouco se sabe sobre a real ação do estrógeno nas próstatas de machos e fêmeas, principalmente quando se leva em consideração o comportamento de ambas às próstatas durante o desequilíbrio dos níveis de hormônios esteroides que ocorre na puberdade e durante o envelhecimento dessas glândulas. Assim o presente estudo, teve como objetivos avaliar por análises morfológicas, sorológicas e imunohistoquímica quais foram os efeitos da exposição à baixa dose de EE durante os períodos pré-natal e puberal sobre a próstata ventral masculina e na próstata feminina de gerbilo senil. Deste modo, nós dividimos os grupos experimentais de acordo com o período de exposição ao EE (15µg/kg/dia). EE/PRÉ durante o período pré-natal, EE/PUB durante a puberdade e o EE/PRÉ-PUB durante o período pré-natal e puberdade. A exposição à estrógenos sintéticos durante o desenvolvimento afeta o eixo hipotálamo-pituitária gonadal, alterando a produção de hormônios esteroides. Os resultados revelaram que a exposição ao EE durante o desenvolvimento prostático alterou os níveis de hormônios esteroides, diminuindo os níveis de testosterona nos machos senis dos grupos EE/PRÉ e EE-PRÉ/PUB e aumento, nas fêmeas senis do grupo EE/PRÉ. Os níveis de estradiol aumentaram nas fêmeas do grupo EE/PRÉ-PUB. A interação epitélio-estroma também foi afetada pela exposição ao EE durante o desenvolvimento, dado evidenciado pela diminuição da imunorreatividade de ?-actina de músculo liso em regiões com presença de lesões invasivas, principalmente na próstata ventral de macho senil. A frequência de células positivas de p63 diminuiu na próstata ventral masculina do grupo EE/PRÉ, provavelmente a camada basal diminui em locais onde se observa foco com NIP e, aumentou na próstata feminina do grupo EE/PUB. Entretanto, esses dados mostraram que a próstata ventral de machos senil foi mais sensível aos efeitos da exposição ao EE, comparado à próstata de fêmeas senis. A senescência é caracterizada pela queda dos hormônios sexuais¸ e nessa fase aumenta as doenças prostáticas em machos e fêmeas. A exposição ao EE durante fases críticas como o pré-natal e a puberdade acentuaram as alterações na estrutura glandular da próstata e aumentaram o desenvolvimento de lesões prostáticas na senescência. Assim como o período pré-natal, o puberal também foi considerado uma fase crítica na exposição ao EE sobre a próstata de gerbilos machos e fêmeas senis. O consumo de EE durante a gestação ou na puberdade altera significativamente a saúde prostática masculina e feminina durante o envelhecimento, e o gerbilo foi considerado um bom modelo para esse estudo / Abstract: Endocrine disruptor (ED) are exogenous agents that interfere in the endocrine system function. 17?-ethinylestradiol, an important component of oral contraceptives is an example of ED. Studies with male and female rodents have reported that exposure to ED during the prenatal period is able to elicit aberrant pathological proliferations in the reproductive system, inclusive in the prostate of the adult animal. However, the amount known about the actual action of estrogen on male and female prostate, mainly as is the behavior of both prostates during imbalance between androgen and estrogen that occurs in pubertal period and during senescence of these glands. Thus the present study aimed to evaluate by morphological, serological, histopathological and immunohistochemical methods, as the exposure to low dose of ethinylestradiol during the prenatal and pubertal periods acts on ventral male prostate and female prostate of senile gerbil. Thus, we divided the experimental groups according to the period of exposure to EE (15?g/kg/day). EE/PRE during the prenatal period, EE/PUB during puberty and EE/PRE-PUB during the prenatal period and puberty. Exposure to synthetic estrogens during development affects the hypothalamic-pituitary-gonadal axis this alters the production of steroid hormones. The results showed that exposure to EE during developing prostate changed steroid hormones levels, decreasing testosterone levels in senile male of EE/PRE and EE-PRE/PUB groups and increased in senile female of EE/PRE group. The estradiol levels enhanced in females of EE /PRE-PUB group. In addition, EE exposure during the prenatal and pubertal periods altered the immunoreactivity of AR, ER? and ER?, as the function of these receptors are critical for prostate development, changes these signaling pathways contributed to increase of development of lesion and inflammation prostate in males and females during senescence. The stromal-epithelium interaction was also affected by exposure to EE during developing, was observed by decreased immunoreactivity of smooth muscle ?-actin in regions where noted invasive lesions, mainly in the ventral male prostate of senile gerbil. Frequencies positive cells of p63 decreased in the ventral male prostate of EE/PRE group, the basal layer decreases in locals with NIP focus, and these frequencies increased the female prostate EE/PUB group. However, these data showed that the ventral male prostate of senile gerbil was more sensible to effects of exposure to EE compared to female prostate. Senescence is characterized by reducing of sexual hormones, in this phase increases the prostatic diseases in males and females. Exposure to EE during critical periods as prenatal and puberty accentuated the changes in prostate glandular structure and increased the developing prostatic lesions in senescence. As prenatal period, pubertal was also considered a critical phase during the exposure to EE on male and female prostate of senile gerbil. The use of EE during gestational or puberty phases significantly alters male and female prostate health during aging, and the gerbil was considered a good model for this study / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Coorientador: Silvana Gisele Pegorin de Campos / Banca: Ana Claudia Polli Lopes / Banca: Ana Paula Girol / Banca: Maria Tercilia Vilela de Azeredo Oliveira / Banca: Claudia Regina Bonini Domingos / Resumo: A incidência de câncer de mama tem aumentado consideravelmente ao longo dos anos. Frente a esta alta taxa epidemiológica a atenção às causas desta doença tem sido significativa em meio a grupos de pesquisa. Fatores genéticos e algumas situações de risco, como a exposição a componentes químicos disruptores endócrinos, podem estimular o seu desenvolvimento. O bisfenol A (BPA), utilizado na manufatura de plásticos e resinas, pode ser liberado destes componentes e exercer efeitos estrogênicos, causando distúrbios na função endócrina e aumentando a predisposição à carcinogênese. Alguns estudos têm demonstrado os efeitos do BPA em longo prazo, de modo que sua exposição durante o período de desenvolvimento embrionário inicial e perinatal pode predispor a glândula mamária (GM) ao desenvolvimento de câncer em indivíduos já adultos. Seu mecanismo de ação, assim como o do estradiol endógeno, baseia-se principalmente na ligação a receptores celulares hormonais, podendo estimular a proliferação, promovendo um desbalanço nos ciclos de renovação celular mamária. Para o estudo de carcinogênese o gerbilo da Mongólia (Meriones unguiculatus) é um modelo experimental interessante, já que possui capacidade de desenvolver tumores espontâneos em órgãos hormônio-responsivos, mimetizando, naturalmente, o ambiente de um indivíduo predisposto à tumorigênese. Assim, os objetivos deste trabalho foram (1) caracterizar morfologicamente a GM de fêmeas de gerbilo da Mongólia em diferentes estágios... / Abstract: The incidence of breast cancer has increased considerably over the years. Facing this high epidemiological rate, attention to the causes of this disease has been significant among research groups. Genetic factors and some risk situations, such as exposure to chemical endocrine disrupting components may stimulate its development. Bisphenol A (BPA), a compound used in the manufacture of plastics and resins, can be released from these components and exert estrogenic effects, causing disturbances of endocrine function and increasing the predisposition to carcinogenesis. Some studies have demonstrated the long-term effects of BPA, in a way that exposure during embryonic development (perinatal phase) may predispose the mammary gland (MG) to development of cancer in adults. Its mechanism of action, as that of endogenous estradiol, is mainly based on cellular hormonal receptors binding, which can stimulate the proliferation, promoting an imbalance of breast cell cycles and renewal. For these carcinogenesis studies, the Mongolian gerbil (Meriones unguiculatus) is an interesting experimental model, since it has the ability to develop spontaneous tumors in hormone-responsive organs, naturally mimicking the environment of an individual predisposed to tumorigenesis. Thus, the aims of this study were to (1) characterize morphologically the mammary gland of Mongolian gerbil females at different stages of functionality, (2) describe morphological changes found in the MG of adult females ... / Doutor