Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:47:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340689.pdf: 1732443 bytes, checksum: e761e41bf16c7ac60e439fc76dfb9a08 (MD5) Previous issue date: 2016 / Introdução: As infecções pelo vírus da hepatite B (HBV) e pelo vírus da imunodeficiência humana adquirida (HIV) são problemas mundiais de saúde pública. O HBV e o HIV partilham das mesmas vias de transmissão, o que torna bastante frequente a coinfecção por esses dois vírus. Crianças e adolescentes, filhos de mães soropositivas para o HIV apresentam elevado risco de contaminação também pelo HBV. O objetivo deste estudo foi estabelecer a prevalência dos marcadores de infecção e imunidade pelo vírus da hepatite B e a cobertura vacinal contra hepatite B em crianças e adolescentes, filhos de mães soropositivas para o HIV, atendidos no Hospital Infantil Joana de Gusmão, na cidade de Florianópolis, Santa Catarina. Métodos: o estudo foi realizado no período de janeiro a outubro de 2015, e participaram deste, 104 pacientes, com idade entre 0 e 15 anos, filhos de mães comprovadamente soropositivas para o HIV. Dados sóciodemográficos foram obtidos dos pacientes. Os marcadores da hepatite B, HBsAg, anti-HBc e anti-HBs foram realizadas através da metodologia de imunoensaio de micropartículas por quimioluminescência (CMIA), utilizando o equipamento ADVIA Centaur XP, e reagentes, controles e calibradores SIEMENS®. Resultados: Não se verificou prevalência dos marcadores HBsAg e anti-HBc total. O marcador de imunidade anti-HBs, apresentou prevalência de 59,6% nos pacientes estudados; 43,3% dos pacientes estudados apresentavam títulos iguais ou maiores que 10,0 mUI/mL, em 16,3% os títulos estavam entre 3,1 e 10,0 mUI/mL e em 40,4% o título foi menor que 3,1 mUI/mL. A cobertura vacinal foi de 70,58%. Conclusões: A prevalência dos marcadores HBsAg e anti-HBc total observada foi menor que os resultados verificados em 1999 e 2014, em estudos feitos na mesma região, tendo como população alvo os adultos infectados pelo HIV e crianças e adolescentes da população em geral. Considerando o que foi verificado nas carteiras de vacinação, a cobertura vacinal da população estudada, foi de 70,58%. Contudo, se considerarmos esta cobertura vacinal e o percentual de pacientes que apresentaram títulos de anti-HBs, mas não apresentaram carteira de vacinação, a cobertura pode ser estimada em 92,9%. / Abstract : Introduction: Infection with hepatitis B (HBV) virus and the human immunodeficiency virus (HIV) are global public health problems. HBV and HIV share the same transmission routes, making it common coinfection by these two viruses. For this reason, children and adolescents, born from HIV-positive mothers are at high risk also for HBV infection. The aim of this study was to determine the prevalence of infection and immunity markers of hepatitis B virus and the vaccine coverage against hepatitis B in children and adolescents, born from HIV-positive mothers, accepted at Joana de Gusmão Children's Hospital in the city of Florianópolis, Santa Catarina. Methods: The study was performed from January to October 2015, and 104 patients were enrolled, between 0 and 15 years of age, born from proven HIV-positive mothers. Demographic social data were collected from patients. The blood tests included HBsAg, Total anti-HBc and anti-HBs were performed by Chemiluminescence Microparticle Immunoassay by ADVIA Centaur XP SIEMENS®.Results: There was not prevalence of HBsAg and anti-HBc in this study. Marker of immunity anti-HBs had a prevalence of 59.6% in the studied patients; 43.3% of patients had equal or higher titers than 10.0 mIU/ml, in 16.3% of titers were between 3.1 and 10.0 mIU/mL and 40.4% titers was lower than 3.1 mIU / mL. Vaccination coverage was 70,58%.Conclusions: The prevalence of HBsAg and anti-HBc is lower than the results recorded in 1999 and 2014 in studies in the same area, targeting the HIV-infected adults population and children and adolescents of general population. Considering what was found in the vaccination record cards, vaccination coverage of the population studied was 70,58%. However, if we consider this vaccination coverage and the percentage of patients who had anti-HBs titles, but did not have vaccination records, this coverage could be estimated at 92.9%.

Tese (Doutorado) - Universidad Complutense de Madrid, Facultad de Odontología. / Made available in DSpace on 2012-10-19T00:25:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0

Introdução/Objetivo: Existem evidências indicando que a resposta virológica sustentada (RVS) ao tratamento com interferon pode estar associada com menor incidência de carcinoma hepatocelular (CHC) em pacientes com cirrose causada pelo vírus da hepatite C (VHC). O objetivo do presente estudo foi comparar a incidência de CHC em cirróticos com RVS versus sem RVS. Métodos: Foram selecionados 85 pacientes com cirrose compensada (Child A) secundária ao VHC, confirmada por biópsia, sem quaisquer outras causas de doença hepática. Todos foram submetidos a tratamento com interferon ± ribavirina por pelo menos 24 semanas. Antes do tratamento nenhum paciente apresentava evidência de CHC à ultrassonografia abdominal (US). RVS foi definida como RNA do VHC negativo (PCR qualitativo com limite de detecção de 50 UI/ml) 24 semanas após o final do tratamento. Foram incluídos apenas pacientes com seguimento semestral com US e alfa-fetoproteína e anual com PCR por mais de 12 meses após o final do tratamento. O CHC foi diagnosticado por biópsia ou achados coincidentes de lesão focal com diâmetro superior a 2cm na US e tomografia computadorizada helicoidal trifásica com sinais de hipervascularização arterial. Resultados: Dos 85 pacientes, 38 (45%) alcançaram RVS e 47 (55%) não. A média do seguimento em pacientes com RVS versus sem RVS foi de 32,1 ± 20 meses (variação: 12-84 meses) e 28,2 ± 18 meses (variação: 12-96 meses), respectivamente (P=0,51). O CHC foi diagnosticado em 1 (3%) dos 38 pacientes com RVS e 8 (17%) dos 47 pacientes sem RVS (P=0,02; Razão de chance: 0,13; Intervalo de confiança de 95%: 0,006-0,9). As características pré-tratamento foram semelhantes entre os pacientes com e sem RVS, tanto demográficas (idade e sexo) quanto clínicas (Child A, média da dose total de interferon e tempo de seguimento). Além da ocorrência de CHC, a única outra variável com diferença significativa encontrada entre os grupos com e sem RVS foi o percentual de pacientes com genótipo 1 (13% versus 35%, respectivamente; P = 0,04). Comparando-se os pacientes com e sem CHC, a única variável com diferença estatisticamente significativa encontrada foi o percentual de RVS (11% versus 49%, respectivamente; P = 0,03). Conclusões: Pacientes com cirrose pelo VHC que atingem RVS têm menor incidência de CHC quando comparados àqueles sem RVS. A única diferença entre os grupos com e sem CHC foi a ocorrência de RVS. Este achado indica que a ausência do VHC pode tanto representar fator protetor direto contra o CHC, quanto servir como marcador indireto para identificar cirróticos com menor probabilidade de desenvolver CHC. / Background/Aim: There is strong evidence that sustained virologic response (SVR) to interferon treatment has an impact on the incidence of hepatocellular carcinoma (HCC) in patients with hepatitis C virus (HVC) related cirrhosis. The aim of this study was to compare the rate of HCC among HCV cirrhotics with vs without SVR. Methods: Eighty five biopsy proven cirrhotic patients with HCV infection (PCR positive), without any other form of liver disease were included. All were treated with interferon (IFN) ± ribavirin (RBV) for at least 24 weeks. Before treatment, all patients were compensated (Child A) and had no evidence of HCC on abdominal ultrasound (US). None had previous hepatic decompensation. SVR was defined as negative HCV-RNA (qualitative PCR with a limit of detection of 50 IU/ml) 24 weeks after end of treatment. Patients followed every 6 months with US and alpha-fetoprotein (AFP) for > 12 months after end of therapy were included. HCC was diagnosed by liver biopsy and/or coincident findings of focal lesion > 2 cm on US and spiral CT with arterial hypervascularization. Results: Thirty eight (45%) were SVRs and 47 (55%) were not. Mean follow-up was 32,1 ± 20 months (range:12-84 months) in SVRs vs 28,2 ± 18 months (range:12-96 months) in no-SVRs (P=0.51). HCC was diagnosed in 1 (3%) of 38 SVRs vs 8 (17%) of 47 patients without SVR (P=0.02; OR:0.13, 95% CI:0.006-0.9). All had similar pre-treatment characteristics (age, sex, liver function, Child A, total interferon dose and follow-up time). Besides HCC incidence, the only significant difference between SVRs and no-SVRs was the rate of genotype 1 (13% vs 35%, respectively, P = 0.04). Comparing patients with and without HCC, the only significant difference was found in the rate of SVR (11% vs 49%, respectively; P = 0,03). Conclusion: HCV cirrhotics with SVR have a lower incidence of HCC compared to those without SVR. The only difference between the groups with and without HCC was the rate of SVR. This finding may indicate that either absence of HCV-RNA truly protects against HCC, or acts as surrogate marker to identify cirrhotics that have a low probability of HCC development on long-term follow-up.

Submitted by MARIANA DE SOUZA DORNA null (mari_dorna@yahoo.com.br) on 2016-04-12T12:59:53Z No. of bitstreams: 1 Tese Mariana Dorna Final.pdf: 2044261 bytes, checksum: 5b4fff48d33c5f6bf6496fa5e80f2b82 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-04-13T16:08:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 dorna_ms_dr_bot.pdf: 2044261 bytes, checksum: 5b4fff48d33c5f6bf6496fa5e80f2b82 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-13T16:08:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dorna_ms_dr_bot.pdf: 2044261 bytes, checksum: 5b4fff48d33c5f6bf6496fa5e80f2b82 (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução. O virus da Hepatite C é um ads principais causa de cirrose hepática e carcinoma hepatocelular. O objetivo do tratamento com Interferon Peguilado e ribavirina é alcançar a cura. Não obstante, ainda não há metodologia padrã-ouro para a valiação da composição corporal desses pacientes. O obejtivo desse estudo foi avaliar a associação dos valores pré-tratamento do Ângulo de Fase, e sua variação, com a resposta virológica na semana 24 e resposta virológica sustentada no tratamento com Interferon Peguilado e Ribavirina. Método. Foi realizado um estudo prospectivo, por 6 meses, de Abril de 2010 a Junho de 2013. Bioimpedância Elétrica, tetrapolar, unifrequência foi realizada no pré-tratamento e na semana 24 de tratamento. Exames bioquímicos e biópsia hepática foram coletados dos prontuários médicos. Resultados. Foram avaliados 87 pacientes com idade média de 49.78 ± 10.51,47.12% do sexo masculino. A media do ângulo de fase foi de 6.56 ± 0.78°. No total, 49 (56.32%) obtiveram resposta virológica na semana 24 de tratamento e 43 (49.4%) atingiram resposta virológica sustentada. Em relação aos pacientes genótipo-1 51% obtiveram resposta virológica na semana 24, 24, 46% resposta virológica sustentada e 54% foram não-respondedores. Na população estudada, 38.88% dos pacientes virgens de tratamento e do genótipo- 1alcançaram resposta virológica sustentada,36.84% dos pacientes em retratamento obtiveram resposta virológica sustentada. Quanto aos pacientes nãogenótipo-1 57.14% obtiveram resposta virológica sustentada, e, entre eles,70% eram virgens de tratamento. No que diz respeito à resposta virológica sustentada (p>0.05). Em relação a resposta virológica na semana 24, os valores do ângulo de fase não mostraram diferença estatística entre os grupos. Ângulo de Fase não esteve associado à resposta virológica na semana 24(OR:1.423; CI95%: 0.328- 6.172; p: 0.637). A variação do ângulo de fase durante as 24 semanas de tratamento esteve, no entanto, associado à resposta virológica na semana 24 de tratamento antiviral(OR:1.099; CI95%:1.027-1.176; p:0.006). Conclusão. Nossos achados sugerem que os valores do ângulo de fase no pré-tratamento não estiveram associados nem a resposta virológica na semana 24, nem a resposta virológica sustentada. No entanto, sua variação (delta) nas 24 semanas de tratamento esteve associado a resposta virológica na semana 24. / Background. Hepatitis C virus is one of the major causes of liver chirrosis and hepatocellular carcinoma. The objective of the treatment with Pegylated Interferon and Ribavirin was to achieve the cure of the virus. So far, we have no gold-standard methodology to assess the body composition of these patients. The aim of our study was to evaluate the association of baseline Phase Angle (PhA), and it’s variation, with virological response treatment week 24 with Pegylated Interferon and Ribavirin and sustained virological response. Methods. Patients were prospectively evaluated for 6 months, from April 2010 to June 2013. A tetrapolar single-frequency bioimpedance were performed at baseline and at treatment week 24. Biochemical and liver biopsy data were collected from the patient´s medical chart. Results. A total of 87 patients with mean age of 49.78 ± 10.51 y were studied ,47.12% were male. The phase angle mean was 6.56 ± 0.78°.A total of 49 (56.32%) of them achieved virological response at treatement week 24 and 43 (49.4%) reached sustained virological response. Considering the genotype- 1 population 51% achieved virological response at tw 24, 46% SVR and 54% were non-responders. Among the population studied, 38.88% of näive genotype-1 patients achieved sustained virological response, 36.84% of previous NR achieved sustained virological resposnse. Regarding non gentotype-1 population 57.14% achieved SVR and among them 70% were naive. Considering sustained virological response, baseline Phase Angle values showed no statistical difference between the groups (p>0.05).Regarding virological response at treatment week 24, Phase Angle values showed no statistical difference between the groups Phase angle was not associated with virological response at treatment week 24 (OR:1.423; CI95%: 0.328-6.172; p: 0.637). The variation of phase angle during the 24 weeks of treatment was associated with virological response at 24 week (OR:1.099; CI95%:1.027-1.176; p:0.006). Conclusion. Our findings suggest that PhA was not associated neither with virological response at treatment week 24 to sustained virological response. However, its variation (delta) within 24 weeks of treatment was associated with virological response at tw24.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-18Bitstream added on 2014-06-13T20:34:30Z : No. of bitstreams: 1 nogueira_ct_me_arafcf.pdf: 255888 bytes, checksum: d417d37d80e882645bd66ae985054789 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os perfis metabólicos correlacionam-se com a infecção pelo VHC e são prognósticos da resposta viral em pacientes crônicos. Porém, pouco se sabe a respeito da associação entre perfis lipídicos e carga viral do VHC entre infecções dos genótipos 1, 2 ou 3. Portanto, o objetivo deste trabalho foi estudar a influência da viremia e dos genótipos do VHC sobre o metabolismo lipídico através das variações de lipoproteínas séricas (colesterol total, LDL, HDL, VLDL, triglicérides) e apolipoproteína B (Apo B) em hepatopatas crônicos, avaliando se o VHC predispõe os indivíduos ao aparecimento de complicações vasculares. O grupo amostral constituiu-se de um total de 150 pacientes crônicos do VHC com genótipos 1, 2 ou 3, e de um grupo controle de 20 indivíduos saudáveis (10 homens e 10 mulheres) em idade adulta (20 à 50 anos). Os níveis séricos de HDL (28%), VLDL (26%) e triglicérides (26%) nos portadores crônicos do VHC se mostraram diminuídos em relação ao grupo controle, enquanto os níveis de LDL (25%) e Apo B (29%) se mostraram elevados, resultados que foram mais importantes nos portadores do genótipo 3a. Observou-se correlação positiva entre a viremia e alterações nos níveis de apo B (r = 0,5763) nos portadores do genótipo 1b. Assim, foi pressuposto que o risco de pacientes portadores do VHC desenvolverem complicações vasculares é elevado, pois 1% de redução nos níveis de LDL está associado com uma redução de 2-3% no risco de desenvolvimento de doenças cardíacas, e como cerca de 90% da proteína na LDL se constitui de apo B, sua concentração plasmática indica o número total de partículas potencialmente aterogênicas. Desta forma, o perfil lipídico auxilia no diagnóstico da severidade da infecção hepática causada pelo VHC e ainda atua como um bom sinal prognóstico. / The metabolic profiles correlate with the hepatitis C virus infection and are prognostics for the viral reply in chronic patients. However, little is known regarding the distinguishing association between lipid profiles and hepatitis C viral load in patients carrying genotypes 1, 2 or 3. Therefore, the objective of this work was to study viremia and genotypes on the lipid metabolism through the serum lipoprotein variations (total cholesterol, LDL, HDL, VLDL, triglycerides) and apolipoprotein B (Apo B) in chronic carriers of this infection, evaluating if the HCV premakes the individual to the lipidic disequilibrium and favors the appearance of vascular complications. The amostral group consisted of 150 HCV chronic patients with genotypes 1, 2 or 3, and a control group consisted of 20 healthful individuals (10 men and 10 women) in adult age (20 to 50 years). The levels of HDL (28%), VLDL (26%) and triglycerides (26%) of the HCV chronic patients were lower than the control group, while the LDL levels (25%) and the Apo B levels (29%) were higher. These findings were more significant in the genotype 3a carrying patients. Positive correlation occurred between the viremia and the alterations in the Apo B levels (r = 0.5763) in the genotype 1b carrying patients. Consequently it was inferred that the risk of HCV patients to develop vascular complication is elevated. In general, 1% of reduction in the LDL levels is associated with a reduction of 2-3% in the risk of development of cardiac illnesses, and, as about 90% of the protein in the LDL is constituted of apo B, its plasmatic concentration indicates the total potentially atherogenics particles number. The lipid profile aids in the diagnosis of the severity of the hepatic infection and equally acts as a good signal prognostic, therefore its analysis must be carried through in all the cases of advanced hepatic infection.

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-06Bitstream added on 2014-11-10T11:57:26Z : No. of bitstreams: 1 000773465_20150110.pdf: 677474 bytes, checksum: 3ab409c79c33f6f910c52214a6fc684c (MD5) Bitstreams deleted on 2015-01-16T10:37:56Z: 000773465_20150110.pdf,Bitstream added on 2015-01-16T10:38:38Z : No. of bitstreams: 1 000773465.pdf: 1856915 bytes, checksum: 31cff2133ada813ddd49b0c93615b201 (MD5) / Neste trabalho foram investigados a fibroína da seda (silk fibroin, SF) com o peptídeo antigênico da proteína NS5A-1 derivado do vírus da hepatite C (HCV) e nanopartículas de vanadato de ítrio dopadas com európio em filmes nanoestruturados. Dois foram os tópicos abordados: i) interação e organização estrutural do peptídeo com a fibroína. ii) imobilização do peptídeo, da fibroína e nanopartículas em filmes automontados (Layer-by-Layer, LbL), visando estudar a interação específica peptídeo antigênico-anticorpo e a produção de protótipos de imunossensores. As interações fibroína-peptídeo foram estudadas em solução e em filmes LbL pelas técnicas espectroscópicas de dicroísmo circular e luminescência. Os resultados indicaram que há uma mudança conformacional da fibroína em solução para a fibroína em filmes, de aleatória para folha-β, respectivamente, e que o filme de fibroína induz a estrutura secundária do peptídeo que não possui uma conformação bioativa em solução. O crescimento dos filmes LbL foi monitorado por espectroscopia UV-visível, e pôde-se observar um crescimento linear a cada deposição realizada. Além do estudo fundamental das interações a nível molecular, os sistemas foram utilizados para o desenvolvimento de protótipos de imunossensores. A interação peptídeo antigênico-anticorpo foi estudada por medidas de detecção eletroquímica, elétrica e óptica. Para a detecção eletroquímica realizou-se medidas de voltametria cíclica, indicando uma diminuição na corrente quando em presença dos anticorpos anti-HCV e testes em amostras reais soropositivas para o vírus, que indicaram uma maior densidade de elétrons nos voltamogramas referentes às amostras infectadas. A detecção elétrica foi analisada por espectroscopia de impedância elétrica, e observou-se que há um aumento no sinal da capacitância e das perdas dielétricas de acordo com o aumento da concentração... / The present study investigated the silk fibroin (SF) with the antigenic peptide of the NS5A-1 protein of the hepatitis C virus (HCV) and nanoparticles of yttrium vanadate doped with europium immobilized on nanostructured films. Two main topics were explored: i) interaction and structural organization of the peptide with fibroin. ii) immobilization of the peptide together with fibroin and nanoparticles in LbL films (Layer- by- Layer), in order to study the specific interaction peptide antigen-antibody and production of prototype immunosensors. The fibroin-peptide interactions were studied in solution and in LbL films by spectroscopic techniques of circular dichroism and luminescence. The results indicate that there is a conformational change of fibroin in the fibroin solution in film, sheet to random coil-B, respectively, and that the fibroin film induces the secondary structure of the peptide does not possess a bioactive conformation in solution. The growth of the LbL films was monitored by UV-visible spectroscopy, and could observe a linear growth every deposit made. Besides the fundamental study of interactions at the molecular level, the systems were used for the development of prototype immunosensors. The peptide antigen-antibody interaction was studied by electrochemical, electrical and optical detection measures. For electrochemical detection, were made cyclic voltammetry measurements indicating a decrease in current when in the presence of anti-HCV antibodies, and were made tests on real samples seropositive for the virus, which indicated a higher density of electrons in voltammograms respect to infected samples. The electrical detection was analyzed by electrical impedance spectroscopy, and it was observed that there is an increase in the signal of capacitance and the dielectric losses in accordance with the increase in antibody concentration. This increase in signal is higher for films containing smaller number of bilayers and...

Base Teórica: Alguns estudos têm sugerido que a infecção crônica pelo HCV tem efeitos diretos e indiretos no tecido pulmonar, incluindo um declínio acelerado do VEF1. É necessário conhecer o quão prevalente é esta infecção nos pacientes com DPOC, o que pode justificar o rastreamento do HCV nesta população. Objetivos: Determinar a prevalência de infecção pelo HCV em uma amostra de pacientes com DPOC e comparar as características clínicas e funcionais entre os pacientes HCVpositivos e HCV-negativos. Métodos: Foi realizado um estudo transversal. Foram incluídos no estudo 187 pacientes ambulatoriais com diagnóstico de DPOC. A positividade ao exame anti-HCV era determinada e confirmada pelo HCV-RNA. Resultados: A prevalência de infecção pelo HCV foi de 7,5%. Os pacientes HCV-positivos tinham um VEF1 pós-broncodilatador (% do previsto) menor (34,7 ± 8,6%) que os pacientes HCV-negativos (42,7 ± 16,5%) (p = 0,011). Todos os pacientes HCV-positivos foram classificados nos estádios III e IV, de acordo com os critérios do GOLD. O escore de dispnéia na escala MMRC foi maior nos pacientes HCV-positivos (mediana = 4) do que nos pacientes HCV-negativos (mediana = 2) (p = 0,023). O índice BODE foi maior nos pacientes HCV-positivos (mediana = 6) do que nos pacientes HCV-negativos (mediana = 4) (p = 0,027). Conclusões: Nossos resultados sugerem uma alta prevalência de infecção crônica pelo HCV em pacientes com DPOC. Os pacientes HCV-positivos tinham achados sugestivos de uma doença mais grave. / Background: A number of studies have suggested that chronic HCV infection have direct and indirect effects on pulmonary tissue, including an accelerated decline of FEV1. It is necessary to know how prevalent this infection is in patients with COPD, what could justify the screening of HCV in this population. Objectives: To determine the prevalence of HCV infection in a sample of COPD patients, and to compare the clinical and functional characteristics between HCV-positive and HCVnegative patients. Methods: We performed a cross-sectional study. One hundred eighty seven COPD outpatients were included in the study. Anti-HCV antibody positivity was determined and confirmed by HCV-RNA. Results: The prevalence of HCV infection was 7.5%. The HCV-positive patients had a postbronchodilator FEV1 (% predicted) lower (34.7 ±8.6%) than HCV-negative patients (42.7 ± 16.5%) (p = 0.011). All HCV-positive patients were classified in stages III or IV (GOLD). The MMRC dyspnea scale score was higher in HCV-positive patients (median = 4) than in HCVnegative patients (median = 2) (p = 0.023). BODE index was higher in HCV-positive (median = 6) than in HCV-negative patients (median = 4) (p = 0.027). Conclusions: Our results suggest a high prevalence of chronic HCV infection in patients with COPD. The HCV-positive patients had findings suggestive of a more severe disease.

Introdução: Mais do que 50% dos pacientes infectados pelo vírus da hepatite crônica C (HCV) não respondem ao tratamento com interferon convencional (IFN) associado a ribavirina (RBV). O objetivo do nosso estudo foi avaliar a efetividade do retratamento com alfapeginterferona 2a ou 2b (PEG-IFN 2a ou 2b) concomitantemente com RBV, em pacientes com HCV, genótipo 2 e 3, que foram não-respondedores ou recidivantes ao primeiro tratamento convencional com IFN/RBV e identificar possíveis fatores preditivos de resposta virológica sustentada (RVS). Métodos: No período de setembro de 2003 a março de 2009 uma coorte de 216 pacientes portadores de hepatite C foram acompanhados em um serviço especializado, implementado no Sistema Único de Saúde-Rio Grande do Sul/Brasil. Todos os pacientes foram retratados com PEG-IFN 2a ou 2b, na dose de 180 mcg ou 1,5 mcg/Kg de peso corporal por semana, respectivamente, associado a RBV na dose de 1.000-1.250mg/dia por 48 semanas. O HCV-RNA foi testado por Polymerase Chain Reaction (PCR) nas semanas 12 (por PCR quantitativo), 48 e 72 (por PCR qualitativo). A resposta virológica (RV) nas 48 semanas e a RVS nas 72 semanas foram considerados para avaliação de eficácia do tratamento. As análises foram realizadas nos pacientes que receberam pelo menos 1 dose de PEG-IFN 2a ou 2b. Resultados: A taxa de RVS para os não-respondedores ao primeiro tratamento foi de 34,4% e para os recidivantes foi de 50% (P=0,031) através do teste exato de Fisher. Foram identificados como fatores preditivos que contribuem na melhora da RVS, a idade (P=0,005), ser recidivante ao tratamento anterior (P=0,023) e apresentar exame de biópsia hepática Metavir F0-F2 (P=0,004), os demais fatores avaliados não demonstraram diferença estatística significativa. Na avaliação do perfil de segurança 51 pacientes (23,6%) interromperam precocemente o tratamento. Destes, 18,5% por eventos adversos onde os mais freqüentes foram anormalidades laboratoriais (40%), óbito (20%) e cirrose descompensada (17,5%). Conclusões: Este é o primeiro estudo pragmático realizado no cenário da realidade do SUS brasileiro que avalia a efetividade do retratamento com PEG-IFN 2a ou 2b e RBV. Esta alternativa de retratamento para pacientes que falharam à terapias prévias anti-HCV, tem demonstrado uma promissora taxa de RVS, desde que seja feita uma seleção cuidadosa dos pacientes com fatores preditivos de resposta e monitorizados os eventos adversos.

Resumo: O presente trabalho refere-se ao desenvolvimento de duas metodologias: imobilização da proteína do core do vírus da Hepatite C (VHC) em matriz híbrida siloxano-poli (propileno óxido) como suporte sólido para ELISA e um imunossensor amperométrico para detecção de anticorpos anti-VHC. Para atingir este objetivo, o RNA-VHC extraído de amostras de soro (genótipo 1b) foi submetido à técnica de RT-PCR e posterior amplificação da seqüência de 408pb do core do VHC. Este produto foi clonado em vetor pET42a. O vetor recombinante foi introduzido em bactérias da linhagem BL21 (DES). Após o cultivo das colônias, a indução foi realizada em concentração final de 0,4mM de IPTG. As bactérias foram lisadas e as frações solúvel e insolúvel, analisadas em gel de poliacrilamida 15%, mostrando uma banda aparente de 44kDa, tamanho esperado da proteína recombinante fusionada a GST. A proteína recombinante do core foi purificada e confirmada por imunodetecção utilizando soro positivo para VHC e apresentou ausência de reatividade cruzada com amostras positivas para outras doenças infecciosas. Na primeira metodologia, a proteína do core foi imobilizada em matriz híbrida siloxano-poli (propileno óxido) preparada por sol-gel como suporte sólido em teste de ELISA para a detecção de anticorpos anti-VHC. As condições adequadas para o estabelecimento desta técnica envolveram 1,25ng da proteína/disco, conjugado com peroxidase na diluição 1:10000 e diluição do soro de 1:40. Este procedimento foi comparado ao ELISA convencional. O desenvolvimento desta matriz híbrida para imunodetecção mostrou bom desempenho, reprodutibilidade e simplicidade durante a síntese, sendo vantajoso para aplicação comercial. / Abstract: The present work reports the development of two methodologies: hepatitis C vírus core protein immobilization into hybrid matrix siloxane-polypropyleneglycol prepared by sol-gel process used as solid phase in ELISA and an amperometric immunosensor for detection of antibodies anti-VHC. Toward to achieve this aim, the HCV RNA from serum (genotype 1b) was submitted to RT-PCR techniqueand subsequent amplification of the HCV core 408pb. This product was cloned into pET42a vector. The recombinant plasmid was transformed into BL21 (DES) cell line strain. Cell cultures were grown and induced with final concentration of 0,4mM of IPTG. After induction, the cell were harvest and the soluble and insoluble fractions were analyzed by polyacrilamide gel 15% showing a band with an approximate molecular weight of 44kDa, expected size for this GST-fused recombinant protein. The recombinant protein was purified and confirmed by immunological detection using HCV positive serum and showed absence of cross reactivity with positive samples for others infectious diseases. In the first methodology, the core protein immobilization into hybrid matrix siloxane-polypropyleneglycol prepared by sol-gel process was used as solid phase in ELISA for detection of antibodies anti-VHC antibody. 1,25ng protein per disc, a peroxidase conjugate diluition of 1:10000 and a serum dilution of 1:40 were adequate for the establishment of the procedure. This procedure performance of the siloxane-polypropyleneglycol discs as a matrix for immnunodetection, showed easy synthesis, good performance and reproducibility for commercial application. The second consisted on the immobilization of core protein into hybrid matrix siloxane-polypropyleneglycol prepared by sol-gel process and deposited on the pencil graphite electrode surface by dip-coating process for development of an amperometric immunosensor. / Orientador: Paulo Inácio da Costa / Coorientador: Hideko Yamanaka / Banca: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Banca: Maria Valnice Boldrin / Banca: Flávio Henrique da Silva / Banca: Marília Almeida Antunes Rossini / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-06-22Bitstream added on 2014-06-13T18:31:09Z : No. of bitstreams: 1 teixeira_lbc_me_botfmvz.pdf: 3120181 bytes, checksum: 3181d271a5e87cedca9b186e0f737df8 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As hepatites crônicas são comumente encontradas em muitas raças de cães na prática veterinária e independentemente da causa evoluem para um quadro de fibrose e conseqüentemente cirrose. Nos homens os quadros de hepatites crônicas e cirrose podem evoluir para lesões displásicas e conseqüentemente neoplásicas. Esta evolução do processo, como ocorre nos homens, não é bem definida nos cães. Alguns autores acreditam que possa ocorrer uma progressão das hepatites crônicas caninas para carcinomas hepatocelulares. Marcadores imunoistoquímicos são utilizados com o objetivo de avaliar o potencial pré-neoplásico das hepatites crônicas caninas. No presente trabalho, os marcadores imunoistoquímicos PCNA, caspase-3 e p53 foram utilizados com vistas a nos fornecer informações sobre a proliferação e apoptose dos hepatócitos e possíveis alterações genéticas que induzam a carcinogênese hepática. Os resultados obtidos mostram que as hepatites crônicas nos cães expressam estes marcadores em maior quantidade que o tecido hepático normal e de maneira mais próxima às lesões hepáticas neoplásicas o que permite afirmar que estas lesões têm potencial de sofrer alterações neoplásicas. / Chronic hepatitis is usually found in several breeds of dogs in veterinary practice, and independently of the cause it progress to a stage of fibrosis and consequently cirrhosis. In men chronic hepatitis and cirrhosis may progress to dysplasic and neoplasic lesions. The evolution of this process, as occurs in men is not well established in dogs. Some authors believe that the progression of chronic canine hepatitis for hepatocellular carcinomas can occur. Some immunohistochemical markers can be used to assess the pre-malignant potential of the canine chronic hepatitis. In this study, the immunohistochemical markers PCNA, caspase-3 and p53 were used to give information about the proliferation and apoptosis index of the hepatocytes and the possible genetic alterations that can lead the hepatic carcinogenesis. Results show that the expression of these markers are higher in chronic canine hepatitis than in normal hepatic tissue and closer to the expression in the hepatocellular carcinomas, which allows us to confirm that these lesions have the potential of undergoing neoplasic alterations.