Retinoblastoma (Rb) é o tumor ocular mais frequente na infância e cada grande Centro deve conhecer o perfil dos seus pacientes. Foi realizado um estudo do tipo coorte retrospectivo e incluiu pacientes com Rb atendidos entre 1983 e 2012 nos Serviços de Oncologia Pediátrica, Oftalmologia e Genética Médica do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). De um total de 165 registros no período foram efetivamente incluídos 140 pacientes, sendo 95,0% destes provenientes de municípios do Rio Grande do Sul. Os sinais mais frequentes ao diagnóstico foram: leucocoria (73,6%) e estrabismo (20,7%). Identificamos a seguinte distribuição: doença unilateral (65,0%), bilateral (32,9%) sendo 80,4% com doença multifocal (p=0,015), trilateral (2,1%). A idade média dos pacientes por ocasião dos primeiros sinais e sintomas foi de 18,1 meses [mediana=12,0] e a idade média ao diagnóstico foi 23,5 meses [mediana=16,5]. Cinquenta pacientes (35,7%) foram diagnosticados no 1º ano de vida. O tempo de diagnóstico médio da coorte foi 5,4 meses [mediana=3,0], (amplitude=0-77,0). A idade média aos primeiros sinais e sintomas do grupo com critérios de hereditariedade foi de 12,3 meses enquanto a do grupo não hereditário foi de 21,6 meses (p=0,001), enquanto a idade média ao diagnóstico foi de 15,9 meses vs. 28 meses, respectivamente (p<0,001). Entretanto não houve diferença na sobrevida entre esses subgrupos. O estadiamento ocular dos pacientes ao diagnóstico na sua maioria foi avançado (classificação de Reese V em 76,5%, Internacional D ou E em 78,1%), sendo que 35,2% dos unilaterais e 34,8% dos bilaterais já apresentavam doença extraocular em pelo menos um olho ao diagnóstico. Quinze pacientes (10,7%) tinham doença metastática ao diagnóstico. Em relação ao tratamento, diferentes modalidades foram utilizadas, sendo a maioria dos pacientes submetidos à cirurgia, sendo esta enucleação em 88,1% e exenteração em 11,9%. Uma parcela significativa dos pacientes foi tratada com quimioterapia sistêmica (57,1%) e/ou radioterapia (37,1%). Do total de pacientes recrutados, 131 (93,6%) permaneceram vinculados ao hospital até 2012 ou até o óbito. Destes, 32 (22,9%) recidivaram, resultando em 19 óbitos com 84,2% por progressão do Rb. Uma segunda neoplasia primária esteve presente em 4,3% (N=6) e dentre esses, um paciente teve uma terceira neoplasia primária. O tempo de seguimento médio foi 323,2 meses [300,3; 346,1]. As sobrevidas nos diferentes subgrupos foram as seguintes: sobrevida global 86,4%; no não metastático 92,0%; no metastático 40,0%; entre os intraoculares 94,0%; entre os extraoculares 68,5%; entre os unilaterais e bilaterais ambos com cerca de 88,0%; entre os trilaterais (N=3) todos foram a óbito; entre os unilaterais intraoculares 94,9% e extraoculares 75,0% e entre os bilaterais intraoculares 94,5% e extraoculares 68,4%. No nosso meio, o diagnóstico de Rb ainda é feito predominantemente em estadios avançados o que reduz a sobrevida dos pacientes e o índice de preservação do olho e da visão, além de aumentar a intensidade dos tratamentos realizados e consequentemente, toxicidade e efeitos tardios destes. Avaliações clínicas e oftalmológicas periódicas nos primeiros anos de vida da criança oferecem maior oportunidade de um diagnóstico precoce e o encaminhamento rápido à um Centro de Referência multidisciplinar que contemple cuidados terciários em Oftalmologia e Oncologia Pediátrica é fundamental. Existe grande necessidade de investimentos regionais que facilitem o acesso ao diagnóstico e tratamento do Rb, o tumor ocular mais frequente na infância. / Retinoblastoma (Rb) is the most frequent ocular tumor diagnosed in children and every pediatric hospital must be familiar with its clinical presentation and patient characteristics. A retrospective cohort study was undertaken, with patients diagnosed with retinoblastoma from 1983 until 2012, treated at the Pediatric Oncology Unit, Ophthalmology Unit, and Medical Genetics Unit of the Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Of a total of 165 registries during this time frame, 140 patients were included in this study, with 95% of them from the state of Rio Grande do Sul. The most frequent signs and symptoms at diagnosis were: leukocoria (73.6%) and strabismus (20.7%). The following distribution was identified: unilateral disease (65.0%), bilateral disease (32.9%), being 80.4% with multifocal disease, (P=0,015), and trilateral disease (2.1%). The average age of patients at the appearance of the first sign or symptom was 18.1 months [median=12.0] and the average age at diagnosis was 23.5 months [median=16.5]. Fifty patients (35.7%) were diagnosed during their first year of age. The average time to diagnosis was of 5.4 months [median=3.0], (amplitude=0-77.0). In the hereditary retinoblastoma group, the average age at the appearance of the first sign or symptom was 12.3 months, whereas the non-hereditary group presented the first sign or symptom on average at 21.6 months (P=0,001). The average age at diagnosis was 15.9 months vs. 28 months for the hereditary and non-hereditary patients, respectively (P<0.001). However, no significant difference in overall survival was found when both groups were compared. Ocular staging at diagnosis was, for the most part, advanced disease, (Reese V classification: 76.5%, Internacional Classification of Retinoblastoma D or E in 78.1% patients), being that 35.2% of cases were comprised of unilateral disease and 34.8% of patients with bilateral disease already presented with extraocular lesions in at least one eye at diagnosis. Fifteen patients (10.7%) presented with metastasis at diagnosis. With regards to treatment, differnet modalities were employed, being that most patients underwent surgery with enucleation in 88.1% and e exenteration in 11.9%. A significant number of patients received systemic chemotherapy (57.1%) and/or radiotherapy (37.1%). Of all patients included, 131 (93.6%) remained in follow up at the hospital until 2012 or until their demise. Of these patients, 32 (22.9%) relapsed, leading to 19 deaths, 84.2% of them due to disease progression. Secondary malignancies were present in 6 patients (4.3%) and, of these, one patient presented with two different secondary malignancies. The average time of patient follow up was 323.2 months [300.3; 346.1]. Overall survival was of 86.4%, with the following time frames among the different patient subgroups: 92.0% for non-metastatic patients, 40.0% for metastatic patients, intraoculares 94.0% for patients with intraocular disease, and 68.5% for patients with extraocular lesions. With regards to unilateral or bilateral disease, overall survival was of 88.0%; for patients with trilateral disease, (N=3) all patients expired. Survival of patients with unilateral and intraocular disease was of 94.9%; patients with unilateral and extraocular disease presented a overall survival of 75.0%. Patients with bilateral intraocular lesions overall survival was of 94.5%, whereas patients with bilateral and extraocular disease had an overall survival of 68.4%. In our setting, Rb diagnosis still occurs when the patients already manifest advanced disease, which reduces considerably their overall survival and preservation of the ocular globe and vision. Moreover, late diagnosis requires more agressive treatments, and consequently leads to more frequent toxicities and late side effects. Periodic clinical and ophthalmologic evaluations during the first years of a child's life offer a greater chance of early diagnosis and referral to a multidisciplinary pediatric oncology center, which is crucial for the patient’s well being. There is much need of further investments which facilitate patient access to diagnosis and treatment for Rb, which is the most common ocular tumor in children.

Retinoblastoma (Rb) é o tumor ocular mais frequente na infância e cada grande Centro deve conhecer o perfil dos seus pacientes. Foi realizado um estudo do tipo coorte retrospectivo e incluiu pacientes com Rb atendidos entre 1983 e 2012 nos Serviços de Oncologia Pediátrica, Oftalmologia e Genética Médica do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). De um total de 165 registros no período foram efetivamente incluídos 140 pacientes, sendo 95,0% destes provenientes de municípios do Rio Grande do Sul. Os sinais mais frequentes ao diagnóstico foram: leucocoria (73,6%) e estrabismo (20,7%). Identificamos a seguinte distribuição: doença unilateral (65,0%), bilateral (32,9%) sendo 80,4% com doença multifocal (p=0,015), trilateral (2,1%). A idade média dos pacientes por ocasião dos primeiros sinais e sintomas foi de 18,1 meses [mediana=12,0] e a idade média ao diagnóstico foi 23,5 meses [mediana=16,5]. Cinquenta pacientes (35,7%) foram diagnosticados no 1º ano de vida. O tempo de diagnóstico médio da coorte foi 5,4 meses [mediana=3,0], (amplitude=0-77,0). A idade média aos primeiros sinais e sintomas do grupo com critérios de hereditariedade foi de 12,3 meses enquanto a do grupo não hereditário foi de 21,6 meses (p=0,001), enquanto a idade média ao diagnóstico foi de 15,9 meses vs. 28 meses, respectivamente (p<0,001). Entretanto não houve diferença na sobrevida entre esses subgrupos. O estadiamento ocular dos pacientes ao diagnóstico na sua maioria foi avançado (classificação de Reese V em 76,5%, Internacional D ou E em 78,1%), sendo que 35,2% dos unilaterais e 34,8% dos bilaterais já apresentavam doença extraocular em pelo menos um olho ao diagnóstico. Quinze pacientes (10,7%) tinham doença metastática ao diagnóstico. Em relação ao tratamento, diferentes modalidades foram utilizadas, sendo a maioria dos pacientes submetidos à cirurgia, sendo esta enucleação em 88,1% e exenteração em 11,9%. Uma parcela significativa dos pacientes foi tratada com quimioterapia sistêmica (57,1%) e/ou radioterapia (37,1%). Do total de pacientes recrutados, 131 (93,6%) permaneceram vinculados ao hospital até 2012 ou até o óbito. Destes, 32 (22,9%) recidivaram, resultando em 19 óbitos com 84,2% por progressão do Rb. Uma segunda neoplasia primária esteve presente em 4,3% (N=6) e dentre esses, um paciente teve uma terceira neoplasia primária. O tempo de seguimento médio foi 323,2 meses [300,3; 346,1]. As sobrevidas nos diferentes subgrupos foram as seguintes: sobrevida global 86,4%; no não metastático 92,0%; no metastático 40,0%; entre os intraoculares 94,0%; entre os extraoculares 68,5%; entre os unilaterais e bilaterais ambos com cerca de 88,0%; entre os trilaterais (N=3) todos foram a óbito; entre os unilaterais intraoculares 94,9% e extraoculares 75,0% e entre os bilaterais intraoculares 94,5% e extraoculares 68,4%. No nosso meio, o diagnóstico de Rb ainda é feito predominantemente em estadios avançados o que reduz a sobrevida dos pacientes e o índice de preservação do olho e da visão, além de aumentar a intensidade dos tratamentos realizados e consequentemente, toxicidade e efeitos tardios destes. Avaliações clínicas e oftalmológicas periódicas nos primeiros anos de vida da criança oferecem maior oportunidade de um diagnóstico precoce e o encaminhamento rápido à um Centro de Referência multidisciplinar que contemple cuidados terciários em Oftalmologia e Oncologia Pediátrica é fundamental. Existe grande necessidade de investimentos regionais que facilitem o acesso ao diagnóstico e tratamento do Rb, o tumor ocular mais frequente na infância. / Retinoblastoma (Rb) is the most frequent ocular tumor diagnosed in children and every pediatric hospital must be familiar with its clinical presentation and patient characteristics. A retrospective cohort study was undertaken, with patients diagnosed with retinoblastoma from 1983 until 2012, treated at the Pediatric Oncology Unit, Ophthalmology Unit, and Medical Genetics Unit of the Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Of a total of 165 registries during this time frame, 140 patients were included in this study, with 95% of them from the state of Rio Grande do Sul. The most frequent signs and symptoms at diagnosis were: leukocoria (73.6%) and strabismus (20.7%). The following distribution was identified: unilateral disease (65.0%), bilateral disease (32.9%), being 80.4% with multifocal disease, (P=0,015), and trilateral disease (2.1%). The average age of patients at the appearance of the first sign or symptom was 18.1 months [median=12.0] and the average age at diagnosis was 23.5 months [median=16.5]. Fifty patients (35.7%) were diagnosed during their first year of age. The average time to diagnosis was of 5.4 months [median=3.0], (amplitude=0-77.0). In the hereditary retinoblastoma group, the average age at the appearance of the first sign or symptom was 12.3 months, whereas the non-hereditary group presented the first sign or symptom on average at 21.6 months (P=0,001). The average age at diagnosis was 15.9 months vs. 28 months for the hereditary and non-hereditary patients, respectively (P<0.001). However, no significant difference in overall survival was found when both groups were compared. Ocular staging at diagnosis was, for the most part, advanced disease, (Reese V classification: 76.5%, Internacional Classification of Retinoblastoma D or E in 78.1% patients), being that 35.2% of cases were comprised of unilateral disease and 34.8% of patients with bilateral disease already presented with extraocular lesions in at least one eye at diagnosis. Fifteen patients (10.7%) presented with metastasis at diagnosis. With regards to treatment, differnet modalities were employed, being that most patients underwent surgery with enucleation in 88.1% and e exenteration in 11.9%. A significant number of patients received systemic chemotherapy (57.1%) and/or radiotherapy (37.1%). Of all patients included, 131 (93.6%) remained in follow up at the hospital until 2012 or until their demise. Of these patients, 32 (22.9%) relapsed, leading to 19 deaths, 84.2% of them due to disease progression. Secondary malignancies were present in 6 patients (4.3%) and, of these, one patient presented with two different secondary malignancies. The average time of patient follow up was 323.2 months [300.3; 346.1]. Overall survival was of 86.4%, with the following time frames among the different patient subgroups: 92.0% for non-metastatic patients, 40.0% for metastatic patients, intraoculares 94.0% for patients with intraocular disease, and 68.5% for patients with extraocular lesions. With regards to unilateral or bilateral disease, overall survival was of 88.0%; for patients with trilateral disease, (N=3) all patients expired. Survival of patients with unilateral and intraocular disease was of 94.9%; patients with unilateral and extraocular disease presented a overall survival of 75.0%. Patients with bilateral intraocular lesions overall survival was of 94.5%, whereas patients with bilateral and extraocular disease had an overall survival of 68.4%. In our setting, Rb diagnosis still occurs when the patients already manifest advanced disease, which reduces considerably their overall survival and preservation of the ocular globe and vision. Moreover, late diagnosis requires more agressive treatments, and consequently leads to more frequent toxicities and late side effects. Periodic clinical and ophthalmologic evaluations during the first years of a child's life offer a greater chance of early diagnosis and referral to a multidisciplinary pediatric oncology center, which is crucial for the patient’s well being. There is much need of further investments which facilitate patient access to diagnosis and treatment for Rb, which is the most common ocular tumor in children.

A hemocromatose hereditária é caracterizada pelo aumento da absorção intestinal de ferro, acarretando progressivo acúmulo no organismo. Os objetivos foram: 1- determinar as frequências das mutações p.C282Y, p.H63D e p.S65C no gene HFE e avaliar os efeitos nas concentrações dos parâmetros do ferro em doadores de sangue; 2- pesquisar mutações nos genes: 2.1- HFE, 2.2- HJV e HAMP, 2.3- TFR2 e SLC40A1, em pacientes portadores de sobrecarga de ferro primária. Participaram 542 doadores de sangue provenientes do Hemocentro da Santa Casa de São Paulo. Foram incluídos 51 pacientes que apresentavam saturação de transferrina &#8805; 50% (para mulheres) e &#8805; 60% (para homens) e ausência de causas secundárias. Os genótipos para as mutações nos genes HFE foram avaliados pela PCR-RFLP. Foi realizado sequenciamento direto bidirecional para cada éxon dos genes, utilizando o sequenciador Genetic Analizer 3500XL®. Nos doadores de sangue, as frequências dos alelos HFE 282Y, HFE 63D e HFE 65C foram 2,1, 13,6 e 0,6%, respectivamente. Os homens que doaram pela primeira vez, portadores do genótipo HFE 282CY, apresentaram maiores valores de saturação de transferrina; e também os portadores dos genótipos HFE 63DD e 63HD apresentaram maiores concentrações de ferritina sérica, em relação aos de genótipo selvagem. Para os pacientes, 72,5% (37/51) apresentaram ao menos 1 alteração no gene HFE e 11 foram identificados como homozigotos para a mutação p.C282Y. Uma mutação não descrita na literatura (p.V256I) foi identificada no gene HFE e a modelagem molecular (análises de ligação e estrutural) detectou que a mutação não reduziu a afinidade entre as proteínas HFE e &#946;2-microglobulina. No sequenciamento dos éxons dos genes HJV e HAMP foram identificadas as alterações já descritas: HJV p.E302K, HJV p.A310G, HJV p.G320V e HAMP p.R59G. Para o gene TFR2, foram identificados 3 polimorfismos já descritos (p.A75V, p.A617A e p.R752H). No gene SLC40A1 foram observados 6 polimorfismos (rs13008848, rs11568351, rs11568345, rs11568344, rs2304704 e rs11568346) e 1 alteração não descrita previamente na literatura (p.G204S). As conclusões foram: 1- em relação aos doadores de sangue, a presença dos alelos HFE 282Y e HFE 63D foi associada ao maior aporte de ferro nos homens que não doaram sangue anteriormente. 2.1- Para os pacientes com sobrecarga de ferro, a mutação p.C282Y em homozigose, ou em heterozigose composta com a p.H63D, foi a mais frequente alteração encontrada (33,3%). 2.2- O diagnóstico molecular de hemocromatose juvenil (HJ) no Brasil (HJV p.G320V em homozigose) foi relatado. As mutações funcionais HJV p.E302K e HAMP p.R59G foram identificadas, sendo possível que estas alterações possam estar contribuindo para consequências fenotípicas juntas as outras mutações em regiões intrônicas ou regulatórias dos genes. 2.3- Mutações funcionais nos genes TFR2 e SLC40A1 não foram identificadas. / Hereditary hemochromatosis (HH) is characterized by increased intestinal iron absorption, which leads to a progressive accumulation of iron in the body. The aims were: 1- to assess the frequency of HFE gene mutations (p.C282Y, p.H63D and p.S65C) and to identify their relationship to iron status in blood donors; 2- to search in primary iron overload patients: 2.1- HFE, 2.2- HJV and HAMP, 2.3- TFR2 and SLC40A1 gene mutations. Blood donors (n=542) were recruited from Hemocentro of Santa Casa Hospital, Sao Paulo, Brazil. The study included 51 patients with transferrin saturation &#8805; 50% (women) and &#8805; 60% (men) and absence of secondary causes. The genotypes for HFE mutations were evaluated by PCR-RFLP. Subsequent bidirectional sequencing for each gene was performed using the Genetic Analizer sequencer 3500XL®. The frequencies of HFE 282Y, HFE 63D and HFE 65C alleles were 2.1, 13.6 and 0.6% in blood donors, respectively. The first time male donors carrying heterozygous genotype for the p.C282Y mutation had higher transferrin saturation values; and men carrying HFE 63DD and 63HD genotypes had higher serum ferritin concentrations when compared to the wild genotype. Thirtyseven (72.5%) out of the 51 patients presented at least one HFE mutation and 11 were identified as homozygous for the mutation p.C282Y. One novel mutation (p.V256I) in the HFE gene was indentified and molecular modeling (free energy and structural analysis in silico) showed that p.V256I mutation did not reduce the affinity binding between HFE and &#946;2-microglobulin. Sequencing in the HJV and HAMP genes revealed HJV p.E302K, HJV p.A310G, HJV p.G320V and HAMP p.R59G alterations. Sequencing in the TFR2 gene observed 3 polymorphisms (p.A75V, p.A617A e p.R752H); and sequencing in the SLC40A1 gene identified 6 polymorphisms (rs13008848, rs11568351, rs11568345, rs11568344, rs2304704 e rs11568346) and 1 p.G204S non-described mutation. The conclusions were: 1- for blood donors, the presence of HFE 282Y and HFE 63D alleles were associated with alterations on iron status only in first time male blood donors. 2.1- For patients with iron overload, the p.C282Y mutation in homozygous or in compound heterozygous with p.H63D, was the most frequent molecular change found (33.3%). 2.2- The molecular diagnosis of Juvenil Hemochromatosis (JH) in Brazil (homozygous genotype for the HJV p.G320V) was reported. The HJV p.E302K and HAMP p.R59G functional mutations were found and, it is conceivable that they may be contributing to phenotypic consequences together to other mutations in intronic or regulatory regions. 2.3- Functional mutation in the TFR2 and SLC40A1 genes were not identified.

Apresentamos uma generalização para as classes das álgebras quase inclinadas e quase hereditárias, que chamamos de álgebras m-quase inclinadas e m-quase hereditárias. Para estas últimas, pode-se obter uma trissecção de suas categorias de módulos determinada pelas subcategorias L^m = {X indecomponível; dimensão projetiva de Y é menor ou igual a m, para cada antecessor Y de X} e R = {X indecomponível; dimensão injetiva de Y é menor ou igual a 1, para cada sucessor Y de X}, além de ser possível mostrar que se existe um módulo E_m de forma a obtermos a igualdade de conjuntos {X módulo; Hom(E_m, \\tau X) = 0} = {X módulo; dimensão projetiva de X é menor ou igual a m}, então E_m é soma de somandos de módulos em R e todo caminho de indecomponíveis com início em um somando E de E_m e final em um módulo projetivo pode ser refinado a um caminho de morfismos irredutíveis, que é ainda seccional. Como consequência desse resultado obtém-se que as álgebras m-quase hereditárias são caracterizadas pelo fato de que todos seus módulos projetivos pertencem a L^m. É possível verificar que toda álgebra m-quase inclinada de dimensão global m+1 é m-quase hereditária e, consequentemente, que toda álgebra hereditária por partes de tipo mod H, para alguma álgebra hereditária H, com dimensão global m+1 é m-quase hereditária. Apresentamos ainda um exemplo de uma álgebra 2-quase hereditária que não é 2-quase inclinada, não sendo válida, portanto, a recíproca do resultado acima. Buscamos, dessa forma, estabelecer condições que quando assumidas sobre uma álgebra 2-quase hereditária possam garantir que esta é 2-quase inclinada e, em particular, hereditária por partes. Recorremos, para isso, à aplicação obtida por meio de uma adaptação de resultados de Happel, Reiten e Smalo, que sob certas hipóteses permite concluir que uma álgebra é álgebra de endomorfismos de um objeto inclinante. Como resultado, mostra-se que uma álgebra 2-quase hereditária com certas outras propriedades e que satisfaz as condições (H1), (H2) e (H3) é 2-quase inclinada. / We present a generalization of the classes of quasitilted and almost hereditary algebras, which we call m-quasitilted and m-almost hereditary algebras. For the latter one, we can obtain a trisection of their module categories determined by the following subcategories L^m = {X indecomposable; projective dimension of Y is at most m for each predecessor Y of X} and R = {X indecomposable; injective dimension of Y is at most 1 for each successor Y of X}. Moreover, if there exists a module E_m such that {X; Hom(E_m, \\tau X) = 0} = {X; projective dimension of X is at most m} then E_m is a sum of direct summands of modules in R and any path of indecomposable modules starting in a module E which is a direct summand of E_m and ending in a projective module can be refined to a path of irreducible morphisms, which is also sectional. This result on paths allow us to obtain a characterization for m-almost hereditary algebras in terms of their projective modules. It is also possible to prove that any m-quasitilted algebra with global dimension m+1 is a m-almost hereditary algebra and as a consequence we can obtain that any piecewise hereditary algebra of type mod H, for some hereditary algebra H, and with global dimension m+1 is m-almost hereditary. We present an example of a 2-almost hereditary which is not 2-quasitilted, which entails that the converse of the above mentioned result does not hold true. Thus we seek for conditions which can ensure that a given 2-almost hereditary is 2-quasitilted and, in particular, a piecewise hereditary algebra. For this, we use the correspondence obtained as an adaptation of results of Happel, Reiten and Smalo, which under certain assumptions shows that an algebra is an endomorphism algebra of a tilting object. It is shown that a 2-almost hereditary algebra with some other properties and satisfying (H1), (H2) and (H3) is 2-quasitilted.

Introdução: Câncer gástrico é uma doença multifatorial influenciada por fatores externos e hereditários. Embora a síndrome do câncer gástrico difuso hereditário causada por mutações germinativas no gene CDHl seja uma condição rara, sua influência sobre a incidência de câncer gástrico no Brasil, que é considerado um país de alta incidência desta neoplasia, é desconhecida. Objetivos: Avaliar a frequência de variantes germinativas em CDHl e os hábitos de dieta/estilo de vida em pacientes diagnosticados câncer gástrico com idade precoce «55 anos) no Brasil. Metodologia: De outubro de 2013 a agosto 2015, foram recrutados 88 pacientes consecutivos e não aparentados diagnosticados com câncer gástrico em idade precoce em um hospital público brasileiro. Todos os éxons e regiões intrônicas flanqueadoras do CDHl foram sequenciados. Os hábitos de dieta/estilo de vida dos pacientes com câncer gástrico em idade precoce foram comparados com informações sobre os hábitos da população armazenados em bancos de dados populacionais brasileiros. Resultados: Dos 88 pacientes, 51,1% eram do sexo feminino e a média de idade no momento do diagnóstico do câncer era de 39 anos (variação, 20-55); 23% relataram história familiar de câncer gástrico em parentes de primeiro ou de segundo. A maioria dos tumores era do tipo difuso (74%), pouco diferenciado (74%) e localizava-se no terço médio ou distal do estômago (67%). No total, 24 variantes germinativas foram detectadas: 3 (12.5%) benignas, 17 (70.8%) provavelmente benignas e 4 (16.7%) variantes de significado clínico incerto (VSI). Todas as VSI são mutações missense e nunca foram relatadas previamente na literatura: c.313T> A, c.387G> T, c.1676G> A e c.1806C> A. Os pacientes com câncer gástrico diagnosticados em idade precoce apresentaram maior consumo de carne vermelha (OR: 2.591, IC 95%: 1.371-4.894) e carne processada (OR: 3.093, IC 95%: 1.591- 6.009) em comparação com os hábitos alimentares da população brasileira. Conclusão: De acordo com o nosso conhecimento, esta é a maior série investigando a contribuição de mutações germinativas de CDHl em pacientes diagnosticados com câncer gástrico em idade precoce na América Latina. Para um país considerado de alta incidência, a frequência encontrada de variantes germinativas em CDHl foi maior do que o esperado; 4 novas mutações missense foram identificadas e mais estudos são necessários para confirmar a patogenicidade dessas variantes. Fatores de risco modificáveis, como o consumo de carne vermelha e/ou de carne processada podem ter contribuído para o desenvolvimento de câncer gástrico em idade precoce na população estudada / Introduction: Gastric cancer is a multifactorial disease influenced by inherited and noninherited factors. Although hereditary diffuse gastric cancer syndrome caused by germline mutation in CDHl is arare condition its contribution to gastric cancer burden in Brazil, which is considered a high-incidence country for this neoplasia, is unknown. Objectives: To evaluate the frequency of CDHl germline variants and the dietjlifestyle habits in early-onset gastric cancer (EOGC, < 55 years old) patients in Brazil. Methodology: From October 2013 to August 2015, a total of 88 unrelated and consecutive patients attending a Brazilian public hospital with EOGC were enrolled. Ali CDHl exons and intronic boundaries were sequenced. The dietjlifestyle habits of EOGC patients have been compared to Brazilian population data bases. Results: Of 88 patients, 51.1% were female and the mean age at gastric cancer diagnosis was 39 years (range 20-55); 23% reported family history of gastric cancer in first- or second-degree rei atives. The majority of the tumors were diffuse (74%), poorly differentiated (74%), and located in the middle and distal-third of the stomach (67%). In total, 24 germline variants were detected: 3 (12.5%) benign, 17 (70.8%) likely benign, and 4 (16.7%) variants of unknown significance (VUS). Ali VUS were missense novel mutations: c.313T > A, c.387G > T, c.1676G > A, and c. 1806C > A. EOGC patients had ahigher red (OR: 2.591, 95% CI: 1.371-4.894) and processed (OR: 3.093, 95% CI: 1.591-6.009) meat intake compared to eating habits of the Brazilian population. Conclusion: To our knowledge, this is the largest series investigating the contribution of CDHl germline mutations in EOGC cancer in Latin America. For a high-incidence country, the incidence of CDHl germline variants was higher than expected; 4 novel CDHl missense mutations were identified and further studies are warranted to confirm their pathogenicity. Modifiable risk factors, such as the consumption of red and/or processed meat may have contributed to early- onset gastric cancer development in our studied population

Orientador: Carmen Sílvia Bertuzzo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-23T00:44:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rueda_LidianeCamila_D.pdf: 2777204 bytes, checksum: dc2eb94ba9de0c91e1c7a3fed2fbd3e4 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O câncer colorretal tem importância elevada frente a sua incidência e morbidade. Dentre os casos hereditários, o câncer colorretal hereditário sem polipose (HNPCC), ou Síndrome de Lynch, é responsável por cerca de 5% do total de casos. No HNPCC, a alteração genética herdada é a inativação de um dos alelos dos genes envolvidos em reparo do DNA, sendo os principais os genes hMLH1 e hMSH2. O objetivo deste trabalho foi investigar, em indivíduos com diagnóstico clínico de HNPCC, a presença de mutações nos genes MLH1 e MSH2, associar as variáveis clínicas com o gene mutado e investigar os familiares de portadores de HNPCC aos quais tivemos acesso, com relação a mutações germinativas. A investigação das mutações foi realizada por meio de sequenciamento direto dos éxons, região promotora e regiões de junção. Foram analisados 65 indivíduos divididos em três grupos, sendo (I) 46 pacientes portadores de câncer colorretal inclusos nos Critérios de Amsterdã, (II) dois familiares portadores de câncer colorretal e (III) 17 familiares sem câncer, todos da região metropolitana de Campinas, atendidos no Hospital de Clínicas da UNICAMP. Em 21 (45,65%) dos pacientes foram encontradas mutações deletérias. As mutações deletérias nos genes MLH1 e MSH2 estavam na proporção de 34,78% (16 pacientes) e 10,86% (5 pacientes), respectivamente. As mutações não deletérias nos genes MLH1 e MSH2 estavam na proporção de 65,22% dos pacientes (30 alterações) e 50% dos pacientes (23 alterações), respectivamente. Foi possível identificar 23 mutações potencialmente deletérias entre os pacientes com HNPCC por meio de sequenciamento dos genes MLH1 e MSH2, com uma porcentagem de detecção de 50%. Parece não haver variações nas características clínicas do tumor quando a mutação germinativa ocorre no gene MLH1 ou MSH2, com exceção da relação entre presença de mutação no gene MLH1 e idade de manifestação da doença. Como ocorre no resto do mundo a doença mostrou-se extremamente heterogênea em termos moleculares, pois apenas duas mutações se repetiram em dois pacientes. A partir da análise das duas famílias foi possível mostrar a dificuldade para estabelecer a presença da mutação germinativa deletéria que poderia levar à predisposição ao HNPCC, bem como a importância da analise familial no diagnóstico molecular dessa alteração / Abstract: Colorectal cancer has high importance because of its incidence and morbidity. Among the hereditary cases, the hereditary nonpolyposis colorectal cancer (HNPCC) or Lynch syndrome, accounts for about 5% of cases. In HNPCC, the genetic alteration inherited is the inactivation of one of the alleles of genes involved in the DNA repair, being hMSH2 and hMLH1 the main genes. The objective of this study is to investigate the presence of mutations in MLH1 and MSH2 in patients with clinical diagnosis of HNPCC, correlate clinical variables with the mutated gene, and investigate the relatives of patients with HNPCC who we had access to, in relation to germline mutations. Investigation of the mutations was performed by éxons direct sequencing, the promoter and junction regions. Sixty-five individuals, divided into three groups, were studied: (I) 46 patients with colorectal cancer included in the Amsterdam Criteria, (II) two family members of colorectal cancer patients and (III) 17 relatives without cancer, all of them treated at Hospital das Clínicas at UNICAMP and living in the Campinas metropolitan area. Deleterious mutations were found in 21 patients (45.65%). The ratio of deleterious mutations in MLH1 and MSH2 was 34.78% (16 patients) and 10.86% (5 patients) respectively. The ratio of non deleterious mutations in genes MLH1 and MSH2 was 65.22% of patients (30 alterations) and 50% of patients (23 alterations) respectively. Among patients with HNPCC, 23 potentially deleterious mutations were identified, via sequences of MLH1 and MSH2 with a 50% detection rate. It doesn't seem to appear variations in the clinical characteristics of the tumor when a germline mutation occurs in MLH1 or MSH2, with the exception of the relationship between the presence of mutation in the MLH1 gene and age of disease onset. As it occurs throughout the world, the disease present a his molecular extremely heterogeneoty, where only two mutations were repeated in two patients. The analysis of the two families demonstrated not only the difficulty to establish the presence of deleterious germline mutation that could lead to a predisposition to of HNPCC, but also the importance of familial analysis in molecular diagnostics of this alteration / Doutorado / Clinica Medica / Doutora em Ciências

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:38:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_clairton_pereira.pdf: 3571578 bytes, checksum: 9c290ec5c39aa24d7b6ec235d88b0321 (MD5) Previous issue date: 2010-02-22 / Congenital defects and hereditary diseases in cattle, sheep and buffaloes were studied through a review of necropsy files of the Laboratório Regional de Diagnóstico (LRD) of the Faculdade of Veterinária of the Universidade Federal de Pelotas (UFPel) between 1978 and 2009. The occurrence of congenital defects and/or hereditary diseases in cattle, sheep and buffaloes were 0.89%, 0.36% e 7.55% respectively from all received material. The defects were classified according the affected system. From 48 of congenital defects and/or hereditary diseases observed in cattle 21 (43.75%) affected the skeletal system (chondrodysplasia, scoliosis, lateral deviation of mandible, palatoschisis and unclassified malformation) nine (18.75%) the central nervous system (hypoplasia of olfatory and frontal lobes, cerebellar cortical degeneration, spina bifida, congenital hypomielinogenesis, hereditary hypermetria, cerebellar hypoplasia and pachygiria), nine (18.75%) the muscular system (arthrogryposis), three (6.25%) the cardiovascular system (patent ductus arteriosus and unclassified malformation), one (2.08%) the lymphatic system (hereditary lymphatic hypoplasia), one (2.08%) o alimentary system (atresia ani) and one (2.08%) the eye (congenital cataract). In five cases (10.42%) different systems were affected (diprosopus and decephalus dipos dibraqius). In sheep all observed defects affected various systems (anomalous twins and aprosopia). Of eight cases of congenital defects/hereditary diseases diagnosed in buffaloes three (37.5%) affected the muscular system (arthrogriposis and double muscle), two (25%) the integument (mechanobullous dermatosis and albinism), one (12.5%) the central nervous system (hydranencephaly), one (12.5%) the central nervous system/ integument (hydranencephaly/albinism) and one (12.5%) the alimentary system (megaesofagus). It was concluded that the sporadic congenital defects cause little economical losses in cattle. Environmental congenital defects can cause losses in certain localized geographic areas or farms. The hereditary diseases were important by mortality of animals and by spread of undesirable genes in cattle breeding from milk production region in Southern Brazil. In sheep the congenital defects are rare. In water buffaloes the high prevalence of hereditary diseases was a consequence of the high consanguinity of herd and management measures need to be taken to avoid the spread of recessive genes that are difficult to control. / Foi realizado um estudo das malformações congênitas/doenças hereditárias diagnosticadas em bovinos, ovinos e bubalinos através da revisão dos protocolos de necropsia do Laboratório Regional de Diagnóstico (LRD) da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas (UFPel) entre 1978 e 2009. A ocorrência de defeitos congênitos e/ou doenças hereditárias em bovinos, ovinos e bubalinos representou 0,89%, 0,36% e 7,55% respectivamente, de todos os materiais dessas espécies recebidos. Os defeitos foram classificados de acordo com o sistema afetado. Dos 48 casos de defeitos congênitos e/ou doenças hereditárias diagnosticados em bovinos 21 (43,75%) afetaram o sistema esquelético (condrodisplasia, escoliose, desvio lateral da mandíbula, fenda palatina e malformação não classificada) nove (18,75%) o sistema nervoso central (hipoplasia dos lobos frontais e olfatórios, degeneração cerebelar cortical, espinha bífida, hipomielinogênese congênita, hipermetria hereditária, hipoplasia cerebelar e paquigiria), nove (18,75%) o sistema muscular (artrogripose), três (6,25%) o sistema cardiovascular (persistência do ducto arterioso e malformação não classificada), um (2,08%) o sistema linfático (hipoplasia linfática), um (2,08%) o sistema gastrintestinal (atresia anal) e um (2,08%) o olho (catarata congênita). Em cinco casos (10,42%) vários sistemas estavam afetados (diprosopo e dicéfalo dipos dibráquio). Todos os casos de defeitos congênitos observados em ovinos (gêmeos anômalos e aprosopia) afetaram vários sistemas. Dos oito casos de defeitos congênitos e/ou doenças hereditárias diagnosticados em búfalos três (37,5%) afetaram o sistema muscular (artrogripose e hiperplasia muscular), dois (25%) o sistema tegumentar (dermatose mecânico-bolhosa e albinismo), um (12,5%) o sistema nervoso central (hidranencefalia), um (12,5%) o sistema nervoso central/tegumentar/fotorreceptor (hidranencefalia/albinismo), e um (12,5%) o sistema gastrintestinal (megaesôfago). Concluiu-se que os defeitos congênitos esporádicos têm pouca importância em bovinos. Defeitos congênitos de causas ambientais podem trazer prejuízos econômicos importantes em determinadas regiões ou estabelecimentos. As doenças comprovadamente hereditárias são importantes não só pela mortalidade mas, também, pela possibilidade de disseminação de genes indesejáveis nas diferentes raças, principalmente aquelas criadas em pequenas propriedades rurais da bacia leiteira da região. Em ovinos os defeitos congênitos são raros. Em bubalinos a alta frequência de doenças hereditárias na raça Murrah foi atribuída a alta consanguinidade do rebanho e medidas de controle devem ser tomadas para evitar-se a contínua disseminação, principalmente dos genes recessivos que são mais difíceis de controlar.

La maladie de Stargardt est la plus fréquente des maculopathies héréditaires et peut être regardée comme un modèle juvénile de certaines dégénérescences maculaires liées à l’âge. Elle résulte de mutations récessives du gène ABCA4, responsables d’une accumulation toxique de sous-produits de la vitamine A dans la rétine. Dans ce contexte, des approches thérapeutiques pharmacologiques se développent qui visent à diminuer la concentration de ces composés toxiques par réduction de la concentration rétinienne en vitamine A. L’utilisation de compétiteurs de cette vitamine ont permis d’atteindre cet objectif chez la souris abca4-/-. La souris n’est toutefois pas un bon modèle pour la maladie de Stargardt ; chez l’homme les mutations du gène ABCA4 sont responsables d’une dégénérescence des photorécepteurs maculaires i.e. en majorité des cônes. Or, la souris étant un animal nocturne, sa rétine est particulièrement pauvre en cônes. Au demeurant, alors que la maladie de Stargardt se caractérise par une dégénérescence des photorécepteurs, ceci n’est jamais observé chez la souris abca4-/-, même à un stade avancé, en dépit d’une accumulation des dérivés toxiques de la vitamine A. Ainsi, s’il est possible de réduire l’accumulation de dérivés toxiques de la vitamine A dans la rétine de ces animaux par l’utilisation de compétiteurs, rien ne permet de présager de leur effet neuroprotecteur. Il en est de même pour les essais de thérapie génique qui se développent directement chez le patient faute de modèle animal pertinent.Nos travaux de thèse ont porté sur la création d’un modèle animal plus adéquat. Le rongeur diurne Arvicanthis ansorgei a été choisi en raison de la richesse de sa rétine en cônes et son appartenance à la famille des muridés proches des rongeurs de laboratoire. Nous avons entrepris de produire un animal transgénique par interférence de l’ARN. Après avoir confirmé l’expression d’Abca4 dans les bâtonnets et les cônes de l’animal et caractérisé la séquence de l’ADNc, nous avons recherché une séquence d’ARN antisens et une construction lentivirale permettant d’interférer efficacement sur l’expression du gène abca4 dans les photorécepteurs. Cette dernière étape a abouti avec l’identification du vecteur lentiviral pLKO1 qui a permis la production d’ARN antisens dans les photorécepteurs de souris et de rats transgéniques. En revanche, les séquences ARN antisens utilisées jusqu’alors n’ont pas permis d’interférer efficacement sur l’expression du gène. D’autre part, des protocoles de reproduction assistée ont été développés chez A. ansorgei prenantpour modèle ceux existant chez les rongeurs de laboratoire. Ceci a autorisé l’obtention de nombreux embryons en dépit de nombreuses difficultés rencontrées au cours de ces manipulations à des fins de procréation résultant d’un manque de connaissances du cycle sexuel d’A. ansorgei. L’implantation de ces embryons dans l’oviducte de femelles pseudogestantes s’est heurtée aux mêmes difficultés. Néanmoins le succès de cette entreprise a été obtenu une fois, encourageant à poursuivre ces manipulations dans une cohorte élargie d’animaux.Les anophtalmies et microphtalmies sévères sont des anomalies précoces du développement oculaire. Elles résultent d’un défaut d’induction ou d’invagination de la vésicule optique primaire ou d’un défaut de fermeture de la fente colobomique. Ces malformations sont responsables de grande malvoyance voire de cécité totale. D’origine génétique, elles se transmettent selon tous les modes de transmission. Dans la famille qui a fait l’objet des travaux de ce mémoire, la microphtalmie récessive autosomique s’observait dans deux fratries consanguines réunies par une boucle de consanguinité commune.... / Pas de résumé en anglais

This thesis is concerned with the theoretical and computational aspects of generating solutions to problems involving materials with fading memory, known as viscoelastic materials. Viscoelastic materials can be loosely described as those whose current stress configuration depends on their recent past. Viscoelastic constitutive laws for stress typically take the form of a sum of an instantaneous response term and an integral over their past responses. Such laws are called hereditary integral constitutive laws. The main purpose of this study is to analyse adaptive finite element algorithms for the numerical solution of the quasistatic equations governing the small displacement of a viscoelastic body subjected to prescribed body forces and tractions. Such algorithms for the hereditary integral formulation have appeared in the literature. However the approach here is to consider an equivalent formulation based on the introduction of a set of unobservable interval variables. In the linear viscoelastic case we exploit the structure of the quasistatic problem to remove the displacement from the equations governing the internal variables. This results in an elliptic problem with right hand side dependent on the internal variables, and a separate independent system of ordinary differential equations in a Hilbert space. We consider a continuous in space and time Galerkin finite element approximation to the reformulated problem for which we derive optimal order a priori error estimates. We then apply the techniques of the theory of adaptive finite element methods for elliptic boundary value problems and ordinary differential equations, deriving reliable and efficient a posteriori error estimates and detailing adaptive algorithms. We consider the idea of splitting the error into space and time portions and present results regarding a splitting for space time projections. The ideas for splitting the error in projections is applied to the finite element approximation and a further set of a posteriori error estimates derived. Numerical studies confirm the theoretical properties of all of the estimators and we show how they can be used to drive adaptive in space and time solution algorithms. We consider the extension of our results for the linear case to the constitutively nonlinear case. A model problem is formulated and the general techniques for dealing with a posterior error estimation for nonlinear space time problems are considered.

La télangiectasie hémorragique héréditaire (HHT) est une maladie rare (1/10.000). Son incidence est plus élevée (pouvant atteindre 1/1000) dans certaines zones géographiques dont la région Poitou-Charentes. Cette maladie autosomique dominante est causée par des mutations d'un des trois gènes identifiés ENG, ACVRL1 et SMAD4 codant pour des protéines de la voie BMP spécifiquement exprimés dans les cellules endothéliales. Le nombre croissant de mutations détectées chez les patients et l'expressivité variable de certaines mutations nous a ammené à déterminer les conséquences de mutations afin d'établir une corrélation génotype/phénotype. Cette corrélation est importante pour le conseil génétique et évidemment le diagnostic prénatal. Dans ce contexte, nous avons étudié aux niveaux cellulaire et moléculaire les effets de plusieurs mutations. L'effet délétère de ces mutations sur la protéine et/ou l'épissage de l'ARN a été évalué. Nous avons montré que sur les 23 mutations d'ACVRL1 : 1) 18 mutations faux-sens affectent la fonctionnalité de la protéine en réponse à BMP9 et 3 mutations sont de simples polymorphismes, 2) la mutation exonique c.733A>G (p.Ile245Val) affecte l'épissage de l'exon 6, 3) La mutation c.1048+5G>A de l'intron 7 en dehors du site consensus induit un épissage aberrant de l'exon 7. En ce qui concerne l'ENG, nous avons analysé 4 mutations et nous avons montré que la mutation c.1088G>A (p.Cys363Tyr) a un impact sur l'activité du récepteur et que les mutations c.1134G>A (p.Ala378Ala) et c.1060C>T (p.Leu364Leu) altèrent l'épissage de l'exon 8. Ce travail montre l'importance de l'étude approfondie de toute nouvelle mutation par des études in silico, in vitro et in cellulo à différents niveaux cellulaires. Des études in vivo ultérieures peuvent compléter et appuyer la stratégie expérimentale que nous avons suivie. / Hereditary hemorrhagic telangiectasia (HHT) is a rare disease (1/10.000). Its incidence is higher in certain geographic areas including the Poitou-Charentes region (1/1000). This autosomal dominant disease is caused by mutations in one of three identified genes ENG, ACVRL1 and SMAD4 encoding BMP pathway proteins specially expressed in endothelial cells. The increasing number of mutations detected in patients and the variable expressivity of certain mutations has taken us to determine the consequences of mutations to establish a genotype/phenotype correlation. This correlation is important for genetic counseling and obviously for prenatal diagnosis. In this context, we investigated the effects of several mutations at the cellular and molecular levels. The deleterious impact of these mutations on the protein and/or RNA splicing was evaluated. We have shown that for the 23 mutations of ACVRL1: 1) 18 missense mutations affect the functionality of the protein in response to BMP9 and 3 are polymorphisms, 2) exonic mutation c.733A>G (p. Ile245Val) affects the splicing of the exon 6, 3) mutation c.1048+5G>A in intron 7 off the consensus site induces an aberrant splicing of exon 7. Concerning the ENG, we analyzed 4 mutations and we showed that the mutation c.1088G> A (p.Cys363Tyr) has an impact on the activity of the receptor and that the mutations c.1134G> A (p.Ala378Ala) and c.1060C> T (p.Leu364Leu) inhibit the splicing of exon 8. This work shows the importance of the comprehensive study of any new mutation by in silico, in vitro and in cellulo studies at different cellular levels. The in vivo studies can further complement and support the experimental strategy that we followed.