A obesidade na infância e adolescência tem aumentado de forma bastante acentuada, e quando observada nos primeiros anos de vida leva um maior risco para hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia e alterações cardiovasculares na vida adulta. Uma correlação positiva tem sido observada entre a BMI (Body Mass Index, ou índice de massa corporal) e alterações metabólicas e hematológicas, implicando em alterações na capacidade de cicatrização, na defesa imunológica e celular e no desenvolvimento de diferentes patologias. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos das fases iniciais da hipercolesterolemia, ou seja, nas idades infantil e juvenil e com pequeno aumento de colesterol, sobre os tecidos bucais e a capacidade de cicatrização. A Ratos Wistar (40g de peso) foi oferecido uma ração preparada com 1% de aumento (em peso) de colesterol + 20% de gordura (óleo de soja) por um período de 2 e 6 semanas para avaliação dos tecidos bucais. Após 2 semanas do uso da ração enriquecida com colesterol foram realizadas feridas cirúrgicas no dorso dos animais para avaliação da cicatrização. Ao final dos tratamentos propostos, os animais foram sacrificados, e colhidas as peças utilizadas (sangue, pele, língua, palatos e região gengival). O sangue coletado foi centrifugado e o soro foi utilizado para avaliação das lipoproteínas - colesterol total, HDL, LDL, VLDL e triglicérides em espectrofotômetro de absorbância. As peças colhidas foram levadas para fixação e descalcificação de acordo com a necessidade, processadas para inclusão em parafina, cortadas com 6 µm de espessura, montadas em lâminas de vidro e coradas com hematoxilina e eosina. Essas peças foram utilizadas para avaliação histológica dos tecidos e do processo de cicatrização, por meio de técnicas morfométricas. Os dados colhidos foram apresentados em valores médios, e as diferenças analisadas por testes estatísticos adequados para a comparação entre as amostras. Nossos resultados mostram que a hipercolesterolemia provocou alterações em tecidos epiteliais e que esses efeitos parecem ser progressivos, ou seja, se tornam mais expressivos com o uso continuado de alimentação com índice de colesterol aumentado, e que existe um aparente atraso no processo de cicatrização nos indivíduos que utilizam dieta hipercolesterolêmica. Consideramos que essas alterações podem tornar esses indivíduos mais suscetíveis a alterações bucais e prejudicar as reações teciduais frente a injúrias, o que pode ser preocupante durante um tratamento odontológico, principalmente cirúrgico mas também em situações de reabilitação oral ou em tratamentos odontológicos de rotina. / Obesity in childhood has becoming a concern. Obesityy is associated with increased triglycerides, decreased high-density lipoprotein cholesterol levels, and increased low-density lipoprotein cholesterol and may lead to increased risk for hypercholesterolemia and cardiovascular complications in adult life. Clinical symptoms and signs of elevated cholesterol levels do not occur until adulthood, but subclinical aspects may be observed in children and adoslecentes. There are no studies on the effects of hypercholesterolemia in children, adolescents or in adults on oral tissues. We propose to study the influence of early age hypercolesterolemia in epithelial oral tissues and on wound healing. Male albino Wistar rats (40g) received enriched cholesterol diet (1%) for 2 and six weeks for epithelial evaluation. After 2 weeks, one control group (receiving standard pellet diet) and treated (hypercholesterolemic diet) received surgical wounds at the dorsum. Animals were sacrifed 1, 3 and 7 days after surgery. At the end of both periods (2 and 6 weeks) animals were sacrificed for epithelial evaluation. At the sacrifice time, serum were collected for evaluation of triglycerides, total cholesterol, HDL, LDL and VLDL. Were collected skin, tongue, palate and gingival tissues. Skin samples were also used for evaluation of the wound healing. All the observation were made at light microscopy. Data were statistically analysed by Mann Whitney U test for comparison between two samples. P[U] ≤0.05 were considered statistically significant. The enriched cholesterol diet significantly increased the total cholesterol, triglycerides, LDL and VLDL plasma content, and the study provide support for the hypothesis that hypercholesterolemia may be associated with deficiencies in the wound healing process. An important clinical implication of this study is the identification of alterations epithelium on oral tissues and in early phases of wound healing associated with subclinical but important alterations in cholesterol levels.

A homeostase do colesterol é mediada por proteínas envolvidas na absorção (NPC1L1), regulação (SREBP1, SREBP2, SCAP), síntese (HMGCR) e remoção plasmática (LDLR). Os fármacos inibidores da síntese (vastatinas) e absorção (ezetimiba) do colesterol são potentes agentes hipocolesterolemiantes. Alterações em vários genes têm sido associadas a diferenças na resposta a diversos agentes terapêuticos. Com a finalidade de estudar os efeitos de hipolipemiantes e polimorfismos sobre a expressão dos genes HMGCR, LDLR, SREBF1a, SREBF2, SCAP e NPC1L1, foram selecionados 25 indivíduos com hipercolesterolemia familial (HF), 72 com hipercolesterolemia não familial (HNF) e 125 indivíduos normolipidêmicos e sem doença cardiovascular (NL). Os indivíduos HF foram tratados com sinvastatina (40 mg/dia/4 sem) combinada ou não com ezetimiba (10 mg/dia/4sem) e os HNF foram tratados com atorvastatina (10 mg/dia/4sem). Amostras de sangue foram obtidas antes e após o tratamento para a extração de DNA e RNA e analise do perfil lipídico sérico. A expressão de mRNA dos genes SREBF1a, SREBF2, SCAP, HMGCR, LDLR e NPC1L1 em células mononucleares do sangue periférico (CMSP) foi determinada por RT-PCR em tempo real empregando-se o gene da GAPD como controle endógeno. Os polimorfismos SREBF1a 36delG, SREBF2 G1784C e SCAP A2386G foram determinados por PCR-RFLP. Os indivíduos HF apresentaram maior expressão de mRNA dos genes NPC1L1, HMGCR e LDLR que os grupos HNF e NL (p<0,05). O efeito da atorvastatina sobre a expressão dos genes estudados parece depender da expressão basal nos indivíduos HNF. A variação da expressão após o tratamento com atorvastatina nos pacientes do grupo HNF esteve correlacionada nos genes: SREBF1a e SREBF2; SREBF1a e SCAP; SREBF1a e LDLR; SREBF2 e SCAP; SREBF2 e LDLR; HMGCR e LDLR. O tratamento com sinvastatina e ezetimiba não modificou o padrão de expressão dos genes estudados no grupo HF. Os polimorfismos SREBF2 G1784C e SCAP A2386G parecem estar relacionados com diminuição da expressão de mRNA após o tratamento com atorvastatina. Foi observado que os portadores do genótipo GG do polimorfismo SREBF2 G1784C apresentaram maiores concentrações séricas de colesterol total e LDL-C após o tratamento com atorvastatina. O polimorfismo SCAP A2386G parece estar associado com maiores concentrações de apoB em pacientes do grupo HNF antes do tratamento com atorvastatina. Os resultados são sugestivos que os genes HMGCR, LDLR e NPC1L1 são regulados diferentemente de acordo com o estado metabólico do indivíduo e a taxa de expressão de mRNA é influenciada pelos polimorfismos SREBF2 G1784C e SCAP A2386G após o tratamento com atorvastatina / The regulation of cholesterol is mediated by proteins involved in the absorption (NPC1L1), regulation (SREBP1, SREBP2, SCAP), synthesis (HMGCR) and removal of plasma cholesterol (LDLR). Potent hypocholesterolemic agents inhibit cholesterol synthesis (statins) and its absortion (ezetimibe). Changes in several genes have been associated to different responses to various therapeutic agents. In order to evaluate the association between genes involved in the metabolism of cholesterol and their response to lipid lowering drugs, patients with familial (FH, n = 25) and non familial hypercholesterolemia (NHF, n = 72) were selected. Additionally, 125 normolipidemic individuals and without cardiovascular disease were selected (NL). The HF group were treated with simvastatin (40 mg/day/4 weeks) combined or not with ezetimibe (10 mg/day/4weeks). The NHF group were treated with atorvastatin (10 mg/day/4weeks). Blood samples were obtained prior to and following treatment for extraction of DNA and RNA, and serum lipid profile analysis. The mRNA expression of SREBF1a, SREBF2, SCAP, HMGCR, LDLR, and NPC1L1 genes was determined by real time RT-PCR using the GAPD gene as endogenous control. The polymorphisms SREBF1a-36delG, SREBF2 G1784C, and SCAP A2386G were determined by PCR-RFLP. Individuals with HF showed higher expression of mRNA of genes NPC1L1, HMGCR and LDLR when compared with HNF and NL groups (p <0.05). The effect of atorvastatin on the gene expression seems to depend on the baseline expression in HNF subjects. The change of expression after treatment with atorvastatin in group HNF was correlated as followed: SREBF1a and SREBF2; SREBF1a and SCAP; SREBF1a and LDLR; SREBF2 and SCAP; SREBF2 and LDLR; HMGCR and LDLR. Treatment with simvastatin and ezetimibe did not change the gene-expression profile in HF group. The polymorphisms SREBF2 G1784C, and SCAP A2386G appear to be related to a decreased expression of mRNA after treatment with atorvastatin. HNF group Carriers of GG genotype of SREBF2 G1784C polymorphism had higher serum concentrations of total cholesterol and LDL-C after therapy. The SCAP A2386G polymorphism seems to be associated with higher concentrations of apoB in patients from HNF group prior to treatment with atorvastatin. The results suggest that the HMGCR, LDLR and NPC1L1 genes are regulated according to the metabolic status of the individual, and the expression rate of mRNA is influenced by SREBF2 G1784C and SCAP A2386G polymorphisms after atorvastatin therapy.

A hipercolesterolemia familiar (HF) é uma doença caracterizada por elevadas concentrações do colesterol das lipoproteínas de baixa densidade (LDL) e doença coronariana (DAC) prematura. Os remanescentes de quilomícrons são removidos principalmente pelo seu receptor específico (RLP), mas também pelo receptor da LDL. Este último encontra-se defeituoso na maior parte dos casos de HF e poderia levar a menor remoção plasmática dos quilomícrons. Há controvérsias se existem distúrbios do metabolismo dos quilomícrons em portadores de HF. Mais ainda não se sabe se estes defeitos poderiam contribuir para o desenvolvimento de DAC na HF. O objetivo deste estudo foi avaliar se portadores de HF apresentam defeitos na remoção plasmática de quilomícrons artificiais e seus remanescentes em relação a indivíduos normolipidêmicos. Foi avaliado também em estudo transversal se existe associação da cinética dos quilomícrons com a presença de DAC subclínica medida pela calcificação da artéria coronária (CAC). Foram estudados 36 pacientes portadores de HF e 50 controles normolipidêmicos pareados para idade e sexo. A remoção plasmática dos quilomícrons foi medida pelo decaimento radioisotópico da emulsão de quilomícrons artificiais injetada após jejum. A CAC foi determinada por tomografia computadorizada cardíaca nos portadores de HF. As taxas fracionais de remoção (TFR) dos quilomícrons e de seus remanescentes representadas pelo decaimento do 14C-éster de colesterol (TFR 14C-CE em min-1) foram menores nos portadores de HF em comparação aos normolipidêmicos: mediana (intervalos) 0,0013 (1,5.10-9;0,082) vs. 0,012 (1,51.10-9;0,017) p= 0,001. Não houve diferença em relação à remoção dos triglicérides da emulsão representada pelo decaimento da 3H-triglicérides (TFR 3H-TG em min-1) entre os grupos: 0,027 (0,0004;0,23) e 0,03 (0,0004;0,4) respectivamente nos grupo HF e controle (p= 0,26). Não foram encontradas diferenças significativas nas TFR tanto do 14C-CE 0,0007 (1,47. 10-9; 0,082) e 0,0013 (1,6. 10-9; 0,038) p= 0,67 como do 3H-TG 0,025 (0,0004; 0,07) e 0,0029 (0,009; 0,23), p=0,80 respectivamente nos portadores de HF apresentando (n=20) ou não CAC (n= 16). Em conclusão os portadores de HF apresentaram diminuição significativa da remoção dos quilomícrons e seus remanescentes em comparação com normolipidêmicos. Contudo, não foi encontrada associação entre esses distúrbios e a presença da DAC subclínica / Familial hypercholesterolemia (FH) is characterized by high concentrations of low density lipoproteins (LDL) cholesterol and early onset of coronary artery disease (CAD). Chylomicron remnants are removed mainly by their specific receptors (RLP) but also by the LDL receptor. The latter is defective in most cases of FH and could lead to lower plasma removal of chylomicrons and their remnants. There is controversy whether there are disorders of chylomicron metabolism in patients with FH. Moreover, it is unclear if these defects could contribute to the development of CAD in FH. The aim of this study was to evaluate whether there are defects on the removal from plasma of chylomicrons and their remnants in FH patients in comparison with normolipidemic subjects. We also evaluated in a cross sectional study the association of chylomicron kinetics with the presence of subclinical CAD represented by coronary artery calcification (CAC). We studied 36 patients with FH and 50 normolipidemic controls matched for age and sex. The plasma removal of chylomicrons was measured by isotopic decay of artificial chylomicron emulsion injected after fasting. CAC was determined by cardiac computed tomography in FH patients. The fractional catabolic rates (FCR) of chylomicrons and remnants removal represented by 14C-cholesteryl ester decay (14C-CE FCR in min-1) were lower in FH in comparison with normolipidemics: median (ranges) 0.0013 (1.47.10-9; 0.082) vs. 0.012 (1.51.10-9, 0.169) p = 0.001. There was no difference regarding the removal of emulsion triglyceride represented by 3H-triglyceride decay of ( 3H- TG FCR in min-1) between the groups: 0.026 (0.0004; 0.23) and 0.031 (0.0004; 0.4) respectively in FH and in normolipidemics (p = 0.264). There were no significant differences in both the 14C-CE FCR 0.0007 (1.47.10-9; 0.08) and 0.0013 (1.61.10-9; 0.038) p = 0.67 and in the 3H-TG FCR 0.025 (0.0004; 0.075) and 0.029 (0.0095; 0.23), p = 0.80 respectively in FH patients presenting (n = 20) or not CAC (n = 16). In conclusion patients with FH had a significant decrease on the removal from plasma of chylomicrons and their remnants compared with normolipidemics. However, no association between these disorders and the presence of CAC was found

Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2016-10-07T13:20:43Z No. of bitstreams: 1 Sheila Adriana Pereira.pdf: 2003897 bytes, checksum: 206de26fdf0a454a14f8e59e44ef8daa (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-07T13:20:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sheila Adriana Pereira.pdf: 2003897 bytes, checksum: 206de26fdf0a454a14f8e59e44ef8daa (MD5) Previous issue date: 2016-06-28 / Obesity represents a global public health problem, being a disorder influenced by genetic and environmental factors. It is an important cause of morbidity and mortality worldwide and the disease characteristics, has been understood as a chronic disorder of inflammatory nature. Several studies of polymorphisms associated with the metabolic syndrome, has been performed in obese children and adolescents, demonstrating significant relationship with this pathology. The several inflammatory cytokines exert significant influence in the development and maintenance of obesity for her role in the regulation of energy homeostasis and metabolism. The aim of this study was to evaluate the association of the polymorphism of SNP 1082G / A in the interleukin-10 gene promoter with the Children and Youth obesity in 48 cases and 45 controls, associated with the lipid profile. In this study case-control was used to ARMS-PCR methodology for allelic determination. Of obese individuals, 27 (56%) had the genotype A / G, followed by 13 (27%) with genotype A / A and 8 (17%) with genotype G / G. Of the analyzed controls, 28 (62%) had Genotype A / G, followed by 9 (20%) with genotype A / A and 8 (18%) with genotype G / G. In the analysis it was found that the presence of the SNP-1082G / A polymorphism was similar in both groups, no representing risk factor to obesity. Also there was a significant difference in HDL cholesterol levels in both groups, linking obesity to low levels of HDL in adolescents and reforcing the relevance of this parameter. / A obesidade corresponde a um problema mundial de saúde pública, sendo uma desordem influenciada por fatores genéticos e ambientais. Consiste em uma importante causa de morbidade e mortalidade no mundo todo e, pelas características da doença, tem sido entendida como uma desordem crônica de natureza inflamatória. Diversos estudos de polimorfismos associados com a síndrome metabólica, tem sido realizados em crianças e adolescentes obesos, demonstrando significativa relação com essa doença. As diversas citocinas inflamatórias exercem influência significativa no desenvolvimento e na manutenção da obesidade por seu papel na regulação da homeostase energética e no metabolismo. O presente estudo teve como finalidade associar o polimorfismo da citocina anti-inflamatória IL-10 e a possível relação desta com a obesidade. Foi avaliado a associação do polimorfismo do SNP 1082G/A no promotor do gene da interleucina-10 com a obesidade infanto juvenil em 48 casos e 45 controles, associando com o perfil lipídico. Nesse estudo tipo caso-controle foi utilizada a metodologia de ARMS-PCR para a determinação alélica. Dos indivíduos com obesidade, 27 (56%) apresentaram o genótipo A/G, seguidos de 13 (27%) com o genótipo A/A e 8 (17%) com o genótipo G/G. Dos controles analisados, 28 (62%) apresentaram genótipo A/G, seguidos de 9 (20%) com genótipo A/A e 8 (18%) com o genótipo G/G. Nas análises foi verificado que a presença do polimorfismo SNP- 1082G/A foi semelhante nos dois grupos, apresentando maior prevalência de heterozigotos para o loco da IL-10. Conclui-se com o presente estudo que as frequências alélicas e genotípicas foram semelhantes nos dois grupos analisados não sendo possível sugerir tal alteração como fator de risco para obesidade. Foi evidenciada uma significativa diferença dos níveis séricos de colesterol HDL, reforçando-se a importância da avaliação desse parâmetro que se mostrou em níveis inferiores nos indivíduos obesos.

Introdução: Atualmente as Doenças Crônicas não Transmissíveis (DCNTs) são um dos maiores problemas de saúde pública da sociedade. É bastante claro o papel da dieta no controle do colesterol e na incidência de doenças cardiovasculares. Neste sentido, o amaranto desperta grande interesse devido a sua propriedade hipocolesterolemizante. Estudos sugerem que seu efeito hipocolesterolemizante está associado à inibição da enzima HMG-CoA redutase, chave na síntese do colesterol endógeno. Objetivo: Avaliar a atividade enzimática hepática da HMG-CoA redutase de hamsters alimentados com proteína de amaranto. Metodologia: Trinta hamsters foram divididos em 5 grupos e receberam dieta diferenciadas pela fonte protéica. Os grupos I e Icol receberam dieta com 20% de proteína de amaranto e os grupos caseína C e Ccol receberam dieta com 20% de caseína. Os grupos \"col\" apresentavam dieta com 0,1% de colesterol e 13,5% de gordura de coco. O metabolismo lipídico foi acompanhado através do monitoramento das concentrações plasmáticas de colesterol total, triacilgliceróis, HDL, e fração não-HDL nos animais. A excreção de colesterol e ácidos biliares foram quantificados nas fezes dos animais e o grau de esteatose hepática foi determinada através de análises histológicas do lobo direito do fígado. A atividade da enzima HMGR nos fígados foi medida por meio do Kit CS 1090 da Sigma-Aldrich com adaptações segundo Cong et al, 2012. A análise é baseada em espectrometria com absorbância de 340nm a 37ºC, que representa a oxidação de NADPH pela HMG-CoA redutase, na presença do substrato HMG-CoA. Conclusões: A proteína de amaranto pode ser considerado um aliado na redução dos agravos gerados pela dislipidemia, uma vez que reduziu significativamente os níveis de colesterol plasmático e gordura hepática, além de ser demonstrado seu efeito na redução da atividade da enzima HMG-CoA redutase dos animais hipercolesterolemizados que se alimentaram com proteína de amaranto. Uma vez verificado o efeito hipocolesterolemizante e seu possível mecanismo de ação por meio da enzima HMG-CoA redutase, espera-se com isso, estimular o consumo pela população brasileira produção de amaranto no Brasil, como alternativa para diversificar a dieta e a agricultura. / Introduction: Nowadays, Non-Communicable Chronic Diseases (NCCD) are a major challenge in health public. It is evident the role of diet in the control of cholesterol and incidence of cardiovascular disease. In this sense, amaranth arouses great interest due to its hypocholesterolemic property. Studies suggest that amaranth\'s hypocholesterolemic effect is associated with the inhibition of the enzyme HMG-CoA reductase, known as the key process to the endogenous cholesterol synthesis. Objective: Evaluate the hepatic enzymatic activity of HMG-CoA reductase in hamsters fed with amaranth protein. Methodology: Amaranth protein was isolated according to the conventional isoelectric precipitation methodology. Thirty hamsters were divided in 5 groups and were fed diets with different protein source. Experimental groups (I and lcol) had a diet containing 20% of protein amaranth and control groups(C and Cool) received a diet with 20% of casein. Moreover, groups \"col\" had also a diet with 0.1% cholesterol and 13.5% coconut oil in their composition. The lipid metabolism was accompanied through monitoring of plasma concentrations of total cholesterol, triglycerides, HDL and non-HDL fraction in animals. Excretion of cholesterol and bile acids were quantified in the feces of animals and the degree of hepatic steatosis was determined by histological analysis of the liver\'s right lobe. The HMGR enzyme activity in the liver was measured by the CS 1090 Kit from Sigma-Aldrich adjusted in accordance with Cong et al, 2012. The analysis is based on spectrometry with absorbance of 340nm at 37 ° C, which represents the oxidation of NADPH by HMG-CoA reductase in the presence of HMG-CoA substrate. Conclusions: Amaranth protein can be considered as an ally in reducing of injuries generated by dyslipidemia, since it significantly reduced levels of plasma cholesterol and hepatic fat. Furthermore, it was demonstrated its effect on reducing activity of HMG-CoA reductase enzyme in hypercholesterolemic animals, which were fed with amaranth protein. Therefore, once verified the hypocholesterolemic effect of amaranth and its possible action mechanism through HMG-CoA reductase enzyme, stimuli on the production of amaranth are expected as an alternative to diversify the diet and agriculture.

A influencia dos polimorfismos genéticos de HMGCoA redutase (HMGCR) e LDL receptor (LDLR) na resposta a atorvastatina (10 mg/dia/4semanas) foi avaliada em individuos hipercolesterolemicos (HC). Amostras de sangue foram coletadas de 153 HC e 182 normolipidemicos (NL) para determinações de lipideos séricos e extração de DNA. Polimorfismos de troca única (SNP) HMGCR (A11898T e T24558G) e LDLR (C16730T, C20001T, G26857A) foram detectados. por PCR-RFLP. Os alelos HMGCR 11898T e 24558G foram associados com menores triglicérides e VLDL-C séricos nos grupos NL e HC (p<0,05). Além disso, o SNP HM0CR T24558G foi relacionado com HDL-C e apoAI séricos aumentados em resposta a atorvastatina no grupo HC. O alelo LDLR 20001 C foi associado com maior apoAI sérica basal no grupo NL (p=O,034) e com melhor resposta de apoAI a atorvastatina no grupo HC (p=O,045). Foi observada relação entre o haplótipo heterozigoto LDLR 20001 C/16730T e redução significativa de apoB e aumento de apoAI no soro após o tratamento com atorvastatina (p<O,05). Em conclusão, os SNPs HMGCR A 11898T e T24558G influenciam os triglicérides e VLDL-C séricos independentemente do estado lipêmico e o haplótipo LDLR 20001 C/16730T está associado com melhor resposta de apoB e ApoAI séricos em resposta a atorvastatina. / Influence of the HMGCoA reductase (HMGCR) and LDL receptor (LDLR) gene polymorphisms on response to atorvastatin (10 mg/day/4weeks) was evaluated in hypercholesterolemic (HC) individuais. Blood samples were collected from 153 HC and 182 normolipidemic (NL) individuais for serum lipids determinations and DNA extratcion. Single nucleotide polymorphisms (SNP) HMGCR (A11898T e T24558G) and LDLR (C16730T, C20001T, G26857A) were detected by PCR-RFLP. HMGCR 11898T and 24558G alleles were associated with lower serum triglycerides and VLDL-C in NL and HC groups (p<0.05). Moreover, the SNP HMGCR T24558G was related to increased serum HDL-C and apoAI in response to atorvastatin in the HC group. The LDLR 20001 C allele was associated with higher basal serum apoAI in the NL group (p=0.034) and with better response of apoAI to atorvastatin in HC group (p=0.045). There was a relationship between heterozygote LDLR 20001 C/16730T haplotype and a significant reduction of apoB and increase in apoAI serum leveis after atorvastatin treatment (p<0.05). In conclusion, the HMGCR A11898T e T24558G SNPs influence serum triglycerides and VLDL-C independently of the lipemic status and LDLR 20001 C/16730T haplotype is associated with better serum apoB and Apol response to atorvastatin treatment.

Um dos principais fatores de risco de doenças cardiovasculares, a hipercolesterolemia afeta um quinto da população brasileira, e é atualmente a principal causa de morte no Brasil e segunda maior de internações hospitalares, segundo a Sociedade Brasileira de Cardiologia. São utilizados agentes hipolipemiantes nos pacientes com propensão a doenças cardiovasculares associadas. A sinvastatina pertencente a classe dos inibidores da HMG-CoA redutase (3-hidroxi-3-metilglutaril-coenzima A) e o ezetimiba pertencente a classe dos inibidores da absorção do colesterol são fármacos hipolipemiantes. Este trabalho possui como objetivo o desenvolvimento e a validação de métodos bioanalíticos através da cromatografia liquida de alta eficiência acoplada ao detector de espectrometria de massas para a determinação simultânea quantitativa de ezetimiba e sinvastatina e seus metabólitos em plasma humano. O presente trabalho foi dividido nas seguintes etapas: (i) obtenção das amostras de pacientes provenientes do HU onde foi administrado a associação ezetimiba+sinvastatina, (ii) obtenção dos padrões de ezetimiba, sinvastatina e padrão interno, (iii) caracterização dos fármacos utilizando técnicas de análises térmicas, ressonância magnética nuclear e espectrometria de infra-vermelho, (iv) obtenção dos padrões dos metabólitos de ezetimiba (ezetimiba glucoronideo) e sinvastatina (sinvastatina hydroxy acid ammonium salt), (v) seleção do método analítico, fase móvel e tipo de extração nas amostras de plasma compatível com o detector de espectrometria de massas e (vi) teste no cromatógrafo líquido de alta eficiência acoplado ao detector de espectrômetro de massas. A separação cromatográfica foi realizada utilizando coluna Poroshell 50mm x 2,1mm, com partícula de 1,8 &#181;m, eluição isocrática usando ácido fórmico 0,1%: acetonitrila (50:50, v/v), vazão 0,7 mL/min e volume de injeção de 10 &#181;L. A temperatura da coluna foi de 30ºC e a detecção foi realizada em equipamento do tipo QTOF, usando fonte ESI no modo positivo para o ezetimiba e sinvastatina e modo negativo para o ezetimiba glucoronideo e sinvastatttina hidroxi-ácida. A monitoração dos íons produto foram: ezetimiba (m/z 409,1489>392,3123), sinvastatina (m/z 418,2719>419,2892), ezetimiba glucoronídeo (m/z 585,1810>521,0673) e sinvastatina hidroxi-ácida (m/z 453,3090>239,0501). Os métodos analíticos foram validados de acordo com os requerimentos vigentes da ANVISA e Farmacopéia Americana. Portanto, os métodos propostos demonstraram ser lineares, precisos, exatos e adequados para a quantificação simultânea de ezetimbe e sinvastatina e seus metabólitos (ezetimiba glucoronídeo e sinvastatina hidroxi-ácida) em plasma humano / One of the main risk factor, hypercholesterolemia which affects a fifth of the Brazilian people, particularly in people with more than 45 years old and currently is the main cause of death in Brazil and the second one of hospital admissions, according to the Brazilian Cardiology Society. It must be used lipid-lowering agents in patients with trend to cardiovascular disease associated. Simvastatin belongs to the HMG-CoA Reductase Inhibitors class ((3-hydroxy-3-metilglutaril-coenzyme A) and ezetimiba belongs to cholesterol absorption inhibitors and they are hypolipidemic. The aim of this work is to develop and validate Bioanalytical methodology using high performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry (QTOF) to determinate simultaneously quantity of ezetimiba and simvastatin and their metabolites in human plasma. This study was divided into the following steps: (i) obtaining samples of patients from HU where ezetimibe+sinvastatina were administered, (ii) obtaining of ezetimibe, simvastatin and 4-methoxycoumarin (used as internal standard) standards, (iii) charactherization of drugs using techniques of termal analysis, nuclear magnetic ressonance and infra-red spectroscopy, (iv) obtaining of ezetimibe metabolite standard (glucuronide ezetimibe) and simvastatin metabolite standard (simvastatin hydroxy acid ammonium salt), (v) selection of analytical method, mobile phase and type of drugs extraction in human plasma samples to be used mass spectrometry, (vi) tests in the high efficiency liquid chromatography coupled to charged aerosol detector and mass spectrometry detector. Chromatographic separation was carried out using a Poroshell C18 column 50 mm x 2,1 mm with particle size of 1,8 &#181;m, isocratic elution using 0,1% formic acid: acetonitrile (50:50, v/v), flow rate 0,7 mL/ min and injection volume of 10 &#181;L. The column temperature was set at 30ºC and detection was performed in one equipament like QTOF, using ESI source, positive mode. Monitoring of the product ions were: ezetimibe (m/z 410,1557), simvastatina (m/z 419,2784), ezetimibe glucoronídeo (m/z 611,5756) and simvastatina hidroxi-ácida (m/z 552,2250). Analytical methods were validated according to the current ANVISA and United States Pharmacopoeia guidelines. Therefore, the proposed methods showed evidence to be linear, accurate and precision, suitable to the simultaneous quantitation of ezetimibe and simvastatin and their metabolites (ezetimibe glucoronídeo e sinvastatina hidroxi-ácida) in human plasma

A obesidade na infância e adolescência tem aumentado de forma bastante acentuada, e quando observada nos primeiros anos de vida leva um maior risco para hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia e alterações cardiovasculares na vida adulta. Uma correlação positiva tem sido observada entre a BMI (Body Mass Index, ou índice de massa corporal) e alterações metabólicas e hematológicas, implicando em alterações na capacidade de cicatrização, na defesa imunológica e celular e no desenvolvimento de diferentes patologias. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos das fases iniciais da hipercolesterolemia, ou seja, nas idades infantil e juvenil e com pequeno aumento de colesterol, sobre os tecidos bucais e a capacidade de cicatrização. A Ratos Wistar (40g de peso) foi oferecido uma ração preparada com 1% de aumento (em peso) de colesterol + 20% de gordura (óleo de soja) por um período de 2 e 6 semanas para avaliação dos tecidos bucais. Após 2 semanas do uso da ração enriquecida com colesterol foram realizadas feridas cirúrgicas no dorso dos animais para avaliação da cicatrização. Ao final dos tratamentos propostos, os animais foram sacrificados, e colhidas as peças utilizadas (sangue, pele, língua, palatos e região gengival). O sangue coletado foi centrifugado e o soro foi utilizado para avaliação das lipoproteínas - colesterol total, HDL, LDL, VLDL e triglicérides em espectrofotômetro de absorbância. As peças colhidas foram levadas para fixação e descalcificação de acordo com a necessidade, processadas para inclusão em parafina, cortadas com 6 &micro;m de espessura, montadas em lâminas de vidro e coradas com hematoxilina e eosina. Essas peças foram utilizadas para avaliação histológica dos tecidos e do processo de cicatrização, por meio de técnicas morfométricas. Os dados colhidos foram apresentados em valores médios, e as diferenças analisadas por testes estatísticos adequados para a comparação entre as amostras. Nossos resultados mostram que a hipercolesterolemia provocou alterações em tecidos epiteliais e que esses efeitos parecem ser progressivos, ou seja, se tornam mais expressivos com o uso continuado de alimentação com índice de colesterol aumentado, e que existe um aparente atraso no processo de cicatrização nos indivíduos que utilizam dieta hipercolesterolêmica. Consideramos que essas alterações podem tornar esses indivíduos mais suscetíveis a alterações bucais e prejudicar as reações teciduais frente a injúrias, o que pode ser preocupante durante um tratamento odontológico, principalmente cirúrgico mas também em situações de reabilitação oral ou em tratamentos odontológicos de rotina. / Obesity in childhood has becoming a concern. Obesityy is associated with increased triglycerides, decreased high-density lipoprotein cholesterol levels, and increased low-density lipoprotein cholesterol and may lead to increased risk for hypercholesterolemia and cardiovascular complications in adult life. Clinical symptoms and signs of elevated cholesterol levels do not occur until adulthood, but subclinical aspects may be observed in children and adoslecentes. There are no studies on the effects of hypercholesterolemia in children, adolescents or in adults on oral tissues. We propose to study the influence of early age hypercolesterolemia in epithelial oral tissues and on wound healing. Male albino Wistar rats (40g) received enriched cholesterol diet (1%) for 2 and six weeks for epithelial evaluation. After 2 weeks, one control group (receiving standard pellet diet) and treated (hypercholesterolemic diet) received surgical wounds at the dorsum. Animals were sacrifed 1, 3 and 7 days after surgery. At the end of both periods (2 and 6 weeks) animals were sacrificed for epithelial evaluation. At the sacrifice time, serum were collected for evaluation of triglycerides, total cholesterol, HDL, LDL and VLDL. Were collected skin, tongue, palate and gingival tissues. Skin samples were also used for evaluation of the wound healing. All the observation were made at light microscopy. Data were statistically analysed by Mann Whitney U test for comparison between two samples. P[U] &le;0.05 were considered statistically significant. The enriched cholesterol diet significantly increased the total cholesterol, triglycerides, LDL and VLDL plasma content, and the study provide support for the hypothesis that hypercholesterolemia may be associated with deficiencies in the wound healing process. An important clinical implication of this study is the identification of alterations epithelium on oral tissues and in early phases of wound healing associated with subclinical but important alterations in cholesterol levels.

Made available in DSpace on 2015-02-04T21:42:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 jonas darc.pdf: 2555119 bytes, checksum: bcf84dbdff98b0ca3f219039f94b9e10 (MD5) Previous issue date: 2009-08-18 / Na década passada, observou-se importante progresso na prevenção de doenças cardiovasculares (DCV) por meio de intervenções em suas causas. Diante de novas evidências científicas, a cardiologia está passando por um processo gradual de transição entre a conduta intervencionista e a preventiva. Essa mudança na postura quanto à abordagem da doença aterosclerótica, que é hoje a maior causa de morbimortalidade no mundo (mais de 15 milhões de mortes anualmente, com projeção para 2020 de um número 40% maior), deve-se à observação de grandes ensaios clínicos. Esses estudos têm revelado que a terapêutica médica agressiva sobre os fatores de risco reduziu substancialmente a ocorrência de novos eventos, e conseqüentemente, o número de hospitalizações e de procedimentos. Este estudo tem por objetivo analisar as distribuições espaciais e temporais dos casos de morte por infarto agudo do miocárdio e as comorbidades em adultos, na cidade de São Paulo. Este é um estudo ecológico descritivo e analítico, de desenho misto, pois abordará os problemas nos âmbitos espaciais e temporais. Foram obtidos dados de mortes por infarto agudo do miocárdio (Código Internacional de Doenças 10ª Revisão: I21 e I22) na cidade de São Paulo no período de 2002 a 2007, através do Programa de Aprimoramento de Informações de Mortalidade e dados populacionais através do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística. Foram calculadas taxas padronizadas de óbitos por distritos para a população total e por sexo para o período do estudo. Foram descritas as distribuições percentuais dos quintis das taxas de mortalidade padronizadas por zonas da cidade. Foram realizadas descrições das prevalências de comorbidades temporalmente. RESULTADOS: Durante o período do estudo foram registrados 383.363 casos de óbitos. Destes, 32.538 foram de óbitos por infarto agudo do miocárdio. Observou-se também que a mortalidade na população masculina (55,4%) foi maior que na feminina (44,5%), porém, sem diferença estatística significativa (p = 0,4). A mortalidade por infarto agudo do miocárdio demonstrou um padrão constante nos primeiros três anos, com uma queda significativa no ano de 2005, mas retomou a tendência de crescimento nos anos seguintes. O padrão sazonal do infarto agudo do miocárdio se assemelha ao das doenças respiratórias, com picos freqüentes no período do inverno. Quando calculados os coeficientes de mortalidade padronizada para ambos os sexos da população da cidade de São Paulo, observou-se uma maior proporção de áreas com maiores coeficientes de mortalidade na Zona Central (30%). As Zonas Sul (18,5%) e Leste (19,4%) apresentaram valores semelhantes. A Zona Central apresentaram as menores proporções de distritos com os mais altos coeficientes de mortalidade por IAM (30,0%). As Zonas Central e Sul apresentaram as maiores proporções de distritos com os menores coeficientes de mortalidade (30% e 33,3%, respectivamente). Em relação as comorbidades associadas ao infarto agudo do miocárdio, a maior prevalência foi observada para a hipertensão arterial sistêmica isolada (27,8%) ou associada ao diabetes (8%). O diabetes isolado esteve presente em 5,5% dos casos. A hipercolesterolemia isolada esteve presente em 0,3% dos casos e em 0,8% associada à hipertensão arterial. A distribuição percentual destas comorbidades no decorrer do período de estudo mostrou-se estável.

A hipercolesterolemia é o maior fator de risco para doença arterial coronária e é responsável por um número significante de doenças e mortes. Há evidências que o exercício físico diminui o risco cardiovascular exercendo efeitos benéficos sobre os fatores de risco, incluindo o metabolismo lipídico. Mudanças que ocorrem no metabolismo da LDL podem não ser detectadas através das dosagens rotineiras de lípides plasmáticos. Portanto, avaliamos os efeitos do exercício físico no metabolismo de uma nanoemulsão lipídica artificial com comportamento metabólico semelhante ao da LDL. Foram avaliados 12 indivíduos hipercolesterolêmicos sedentários (H) e 12 indivíduos normolipidêmicos sedentários (N) que foram submetidos a treinamento durante 4 meses. Nos grupos controle, foram estudados 8 indivíduos hipercolesterolêmicos sedentários controle (HC) e 8 indivíduos normolipidêmicos sedentários controle (NC) que não realizaram exercício físico. A emulsão marcada com éster de colesterol -14C (EC-14C) foi injetada endovenosamente. Amostras de sangue foram coletadas em tempos prédeterminados (5 min, 1, 2, 4, 6, 8, 24 horas) após a injeção, para determinação da radioatividade, das curvas de decaimento plasmático e cálculo da taxa fracional de remoção (TFR) dos lípides marcados, por análise compartimental. As avaliações foram feitas antes e após o protocolo de treinamento físico e nos grupos controle foram realizadas 2 avaliações, sendo a segunda 4 meses após a primeira. No grupo H, as concentrações plasmáticas de colesterol total e LDL-c diminuíram (5%, p= 0,0334 e 14%, p= 0,0058), respectivamente, enquanto que, HDL-c, TFR-EC-14C e lag time aumentaram (13%, p= 0,0142; 36%, p= 0,0187; 37%, p= 0,0039), respectivamente após o treinamento físico. No grupo N, a concentração plasmática da HDL foi maior (15%, p= 0,0243), após o treinamento. Nos grupos HC e NC os parâmetros avaliados foram semelhantes. Portanto, o exercício físico acelera a remoção plasmática da LDL em indivíduos hipercolesterolêmicos, indicado pela maior TFR-EC-14C. Este efeito pode ser um dos mecanismos pelos quais o exercício previne a doença arterial coronária. / Hypercholesterolemia has become one of the major risk factors for arterial coronary disease. As such, it is also responsible for a significant number of diseases and deaths. Evidence suggests that physical exercise can, in fact, decrease the risk of cardiovascular diseases by exerting beneficial effects upon the risk factors, including lipid metabolism. The changes that do occur in LDL metabolism are generally not detected by routine clinical laboratory plasma lipid exams. In the present study, the effects of physical exercise on the metabolism of an artificial lipidic nanoemoulsion with similar LDL metabolic behavior were analyzed. 12 hypercholesterolemic sedentary individuals (H) and 12 normolipidemic sedentary individuals (N) were studied. These 24 participants were submitted to a routine training program during a 4-month period. The control group was divided into two groups: one of 8 hypercholesterolemic sedentary individuals (CH) and the other with 8 normolipidemic sedentary individuals (CN) which did not partake in any exercise program. An emulsion labeled with 14Ccholesteryl ester (14C-CE) was endovenously injected into all 4 groups. Blood samples were collected at pre-determined periods (5 min, 1, 2, 4, 6, 8 and 24 hours) after the injection of the emulsion, in order to determine the radioactivity of the plasma decay curves and calculate the fractional clearance rate (FCR) of the labeled lipids for compartimental analysis. Evaluations were made before and after the exercise training protocol. The control groups under went 2 evaluations, the second one 4 months after the first evaluation. In the H group, total cholesterol and LDL-c plasma concentrations decreased (5%, p=0.0334 and 14%, p=0.0058), respectively. HDL-c, 14C-CE-FCR and lag time, on the other hand, increased (13%, p=0.0142; 36%, p=0.0187; 37%, p=0.0039) after exercise training. HDL plasma concentration for the N group was higher (15%, p=0.0243), after exercise training. In groups CH and CN the parameters evaluated were similar. Therefore, exercise accelerates the removal of LDL plasma in hypercholesterolemic individuals as indicated by a higher 14C-CE-FCR. This effect can thus be one of the mechanisms by which exercise can prevent arterial coronary disease.