INTRODUÇÃO: Carcinomas de mama triplo-negativos (CMTN) constituem um grupo de tumores heterogêneos caracterizados por sobrevida pobre dos pacientes e falta de terapia-alvo. Receptor andrógeno (AR) tem sido descrito no CMTN, mas o impacto prognóstico da expressão nesse subgrupo não está bem claro. OBJETIVO: Investigar a associação do status de expressão AR analisado por imunohistoquímica em casos de CMTN com parâmetros clínicos (idade, sobrevida) e variáveis patológicas (tamanho do tumor, grau do tumor). MÉTODOS: Foram analisados 62 CMTN por imuno-histoquímica automatizada para receptor andrógeno. A imuno-histoquímica foi avaliada por dois diferentes patologistas e a expressão do biomarcador foi avaliada por H-Score (intensidade mais percentagem de coloração). Kaplan-Meyer foi o método usado para avaliar a sobrevida global, tendo as diferenças nas distribuições sido avaliadas com base na expressão do marcador. RESULTADOS: 26% dos CMTNs foram AR positivos (n = 16) e 74% AR negativos (n = 46). Todos os casos de AR positivos ocorreram em mulheres ≥ 40 anos enquanto 13% dos casos de AR negativos foram vistos em mulheres ≤ 40 anos. 93% (52/56) de todos os CMTNs foram carcinoma ductal invasivo do tipo não especial (ICNST) e 93% (14/15) de AR positivos dos casos de ICNST. O tamanho do tumor variou de 2 a 4,9 cm na maioria dos cânceres AR positivos (n = 8/13; 62%). 60% (n = 9/15) dos casos de AR positivos mostraram grau histológico 3 seguidos de 27% de tumores de grau 2. Não se observou diferença entre pacientes AR positivos e AR negativos quando comparados por idade, tamanho do tumor, grau do tumor e tipo do tumor (p > 0,17). A positividade imuno-histoquímica para ARs também não foi associada com melhor sobrevida (p = 0,737; n = 51) ou sobrevida livre da doença (p = 0,552; n = 45) em CMTNs. CONCLUSÃO: Sob o ponto de vista do prognóstico, a imunorreatividade do AR tem sido associada com melhor sobrevida das pacientes. Esse resultado não foi confirmado na presente série. Isso poderia estar relacionado com o pequeno tamanho amostral ou com uma baixa prevalência de casos de AR positivos especificamente nesse subtipo de câncer de mama. Estudos realizados com maiores amostras são necessários para investigar esse biomarcador em CMTNs. / INTRODUCTION: Triple negative breast carcinomas (TNBC) are a heterogeneous group of tumors characterized by poor patient survival and lack of targeted therapies. Androgen receptor (AR) has been described in TNBC but the prognostic impact of the expression in this subgroup of tumors is not clear. OBJECTIVE: To investigate the association of AR expression status by immunohistochemistry in TNBC cases with clinical (age, survival) and pathological variables (tumor size, tumor grade). METHODS: 62 TNBC were analyzed by automated immunohistochemistry for androgen receptor. Immunohistochemistry was scored by two investigators and biomarker expression was assessed by H-Score (intensity plus the percentage of staining). Kaplan-Meier was used to evaluate overall survival, where differences in distributions were evaluated based on marker expression. RESULTS: 26% of TNBC were AR-positive (n = 16) and 74% AR negative (n = 46). All AR-positive cases occurred in women ≥ 40 years, while 13% of AR-negative cases were seen in women ≤ 40 years. 93% (52/56) of all TNBC were infiltrating ductal carcinomas of no special type (ICNST) and 14/15 (93%) of AR-positive cases were ICNST. Tumor size varied from 2-4.9 cm in the majority of AR-positive cancers (n = 8/13; 62%). 60% (n = 9/15) of AR-positive cases showed histological grade 3 tumors, followed by 27% of grade 2 tumors. No differences were observed between AR-positive and AR-negative patients when compared for age, tumor size, tumor grade and tumor type (all p > 0.17). AR immunohistochemical positivity was also not associated with better overall survival (p = 0.737, n = 51) or disease-free survival (p = 0.552; n = 45) in TNBCs. CONCLUSION: From the prognostic point of view, AR immunoreactivity has been associated with better overall patient survival. Unfortunately, this result could not be confirmed in our series. This could be related to the relatively small series of analyzed samples and to the low prevalence of AR-positive cases in this specific breast cancer subtype. Further studies with bigger samples are needed to investigate this biomarker in TNBC.

Orientador: Albina Messias de Almeida Milani Altemani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T12:03:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barreto_IcleiaSiqueira_D.pdf: 12646702 bytes, checksum: 9cc75301ed45a05b163a8e355ac78a7e (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Pólipos tonsilares são lesões não neoplásicas usualmente constituídas por quantidades variáveis de tecidos linfóide, vascular e conjuntivo. Todos são considerados como proliferações hamartomatosas, mas o perfil dos componentes vascular e conjuntivo, necessita de estudo mais aprofundado. O sistema vascular das tonsilas é complexo e inclui estruturas altamente especializadas (Vênulas do Endotélio Alto- VEA), envolvidas no tráfico dos linfócitos para os tecidos linfóides. Foram estudados 14 pólipos tonsilares e 26 tonsilas palatinas, usando CD34 (para vasos sanguíneos e VEA), CD105 (para VEA), D2-40 (para vasos linfáticos), Ki-67 (para índice proliferativo), colágenos I e III, fibronectina e tenascina-C (para proteínas da matriz extracelular). Os pólipos mostraram aumento significante da área linfática total, enquanto o número de vasos (sanguíneos e linfáticos) e a área vascular sanguínea não diferiram significativamente das tonsilas controles. Raras células endoteliais expressaram Ki-67. Nos pólipos, pela primeira vez foi demonstrada a presença de VEAs, as quais foram identificadas em meio ao tecido linfóide. A quantidade deste último correlacionou-se positivamente com a densidade destas estruturas. Os pólipos também apresentaram menor quantidade de fibronectina e colágenos I e III, os quais estavam distribuídos de forma desorganizada. A expressão de tenascina-C foi pouco frequente nos pólipos e nas tonsilas controles. Concluindo, os pólipos tonsilares são compostos por tecido conjuntivo desorganizado e canais linfáticos dilatados, que podem ser consideradas proliferações hamartomatosas. Todavia, o componente linfóide possivelmente é reacional, devido a sua relação com as VEA. O fenótipo altamente diferenciado das VEAs e sua biologia complexa não são condizentes com natureza hamartomatosa / Abstract: Tonsillar polyps are nonneoplastic lesions usually composed of a variable amounts of lymphoid, vascular and connective tissues. All are generally assumed to be hamartomatous proliferations but the profile of vascular and connective components has yet to be explored. The vascular system of the tonsils is complex and includes highly specialized structures (i.e. high endothelial venules -HEVs) involved in lymphocyte homing into lymphoid tissues. In 14 tonsillar polyps and 26 control tonsils an immunohistochemical study was performed using CD34 (for blood vessels and HEVs), CD105 (for HEVs), D2-40 (for lymphatic vessels), Ki-67 (for proliferating index), collagens I and III, fibronectin and tenascin-C (for proteins of the extracellular matrix). The polyps showed increased total lymphatic area, whereas number of vessels (sanguineous and lymphatic) and blood vascular area did not differ significantly from those of control tonsils. Rare Ki-67+ endothelial cells were found. In the polyps, HEV was encountered amid lymphoid tissue and its amount correlated positively with the HEV density. The polyps also presented lesser amounts of fibronectin and collagens I and III which were distributed in a disorganized fashion. Tenascin-C expression was uncommon in the polyps and control tonsils. In conclusion, the tonsillar polyps are composed of disorganized connective tissue and lymphatic channels which can be considered hamartomatous proliferations. However, the lymphoid component is possibly reactive due to its relationship with the HEVs. The highly differentiated phenotype of the HEVs and its complex biology are not in agreement with what would be expected for a component of hamartomatous nature / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Albina Messias de Almeida Milani Altemani / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T08:50:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barreto_IcleiaSiqueira_M.pdf: 3099004 bytes, checksum: e7104aa2bedc2fa4b0a6e9751cf9a4d1 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Pólipos linfóides tonsilares são lesões pouco comuns que têm sido raramente estudadas. Nosso objetivo foi descrever as características clínicas, histopatológicas e imunoistoquímicas em seis pólipos tonsilares, cujo tecido linfóide representava mais que 80 % da lesão, comparando-as com as tonsilas palatinas-controles. Os sintomas apresentados foram de massa tonsilar e/ou disfagia. Não foram detectados fatores predisponentes. Microscopicamente, todos os pólipos continham folículos com centros germinativos, criptas revestidas por linfoepitélio e pequena quantidade de tecido fibroso no centro da lesão. Células B (CD 20+), células T (CD45RO+), plasmócitos (kappa+ e lambda+) e vasos (linfáticos ¿D2-40+ e sanguíneos ¿CD34+), apresentaram distribuição e padrão arquitetural como o esperado para o tecido linfóide da tonsila palatina. Pólipos linfóides tonsilares são, provavelmente, hamartomas caracterizados por um crescimento exagerado dos elementos linfóides, mantendo um padrão arquitetural e uma composição celular similar àquela da tonsila palatina / Abstract: Tonsillar lymphoid polyps are uncommon lesions which have rarely been studied. We aim to describe the clinical, histopathologic, and immunohistochemical features of six tonsillar polyps in which lymphoid tissue represented more than 80% of the lesion, comparing them with sixteen control tonsils. Presenting symptoms were tonsillar mass and/or dysphagia. No predisposing factor was detected. Microscopically all polyps contained follicles with germinal centers, crypts lined by lymphoepithelium and a small amount of fibrous tissue in the centre of the lesion. B cells (CD20+), T cells (CD45RO+), plasma cells (kappa+ and lambda+) and vessels (lymphatic - D2-40+ and blood ¿ CD34+) presented distribution and architectural patterns as expected for lymphoid tissue of a palatine tonsil. Tonsillar lymphoid polyps are possibly hamartomas characterized by overgrowth of lymphoid elements which maintain an architectural pattern and cellular composition similar to those of the palatine tonsil / Mestrado / Anatomia Patologica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Sebastião Roberto Taboga / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T20:16:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cordeiro_RenatoSimoes_D.pdf: 4151474 bytes, checksum: 0ee256bf17ee9f60a582294e99e12f0c (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O crescimento normal, a diferenciação e a manutenção da integridade morfofuncional da glândula prostática são dependentes das interações de concentrações constantes de andrógenos com seus receptores. A necessidade de se estudar esta glândula em resposta aos hormônios e o efeito do bloqueio destes, deve-se ao fato da próstata humana ser o sítio de um grande número de doenças relacionadas à idade, sendo que as de maior importância clínica são o câncer prostático e a hiperplasia prostática benigna, as quais podem ser tratadas por estratégias de remoção de andrógenos. Este estudo teve por objetivo a análise imuno-histoquímica do grau de expressão do receptor androgênico (RA) no lóbulo ventral prostático do gerbilo após terapias de bloqueios androgênicos. Setenta e cinco gerbilos machos foram distribuídos, aleatoriamente, em 3 grupos de 25 animais, cada grupo representando uma fase do desenvolvimento pós-natal: jovem, adulto e senil. Em cada fase foi realizada uma análise morfológica e estereológica dos compartimentos prostáticos, bem como a análise imuno-histoquímica da expressão do RA. Além disso, estabeleceu-se a dosagem hormonal das concentrações séricas de testosterona, como método para verificar a relação da quantidade desse andrógeno com a expressão dos RA. Os resultados demonstraram haver um padrão heterogêneo de distribuição dos RA no lóbulo ventral ao longo do desenvolvimento pós-natal, em que quanto mais jovem for o animal maior a interação de andrógenos estimulando a expressão de RA nos compartimentos prostáticos. As terapias de bloqueios androgênicos diminuíram a expressão de RA no lóbulo ventral e a reposição androgênica após esses bloqueios não apresentou o mesmo grau de intensidade de expressão de RA próximo às condições fisiológicas normais. A regulação e a distribuição do RA nos tecidos prostáticos do gerbilo são mecanismos complexos e que, provavelmente, são geneticamente regulados por andrógenos antes do nascimento ou por outros fatores ainda desconhecidos. O gerbilo parece ser um modelo valioso na tentativa de melhorar o conhecimento do comportamento morfofisiológico e patológico dessa importante glândula em humanos ao longo do envelhecimento e da formulação de novas idéias de terapias de combate ao câncer de próstata / Abstract: The normal growth, differentiation and maintenance of the morphofunctional integrity of the prostate gland are dependent on the interaction of constant levels of androgens with their receptors. The need to study the responses to hormones under several conditions and the effect of their blockage is due to the fact that the human prostate is the site of a great number of age-related diseases, and the ones with a major medical importance are prostate cancer and benign prostatic hyperplasia, which can both be treated with androgen suppression. The aim of this study was to analyze immunohistochemical degree of expression of androgen receptor (AR) of the ventral lobe of the gerbil prostate during different phases of the postnatal development employing differents treatments for androgen blocking. Seventy-five male gerbils were distributed, randomly, into 3 groups of 25 animals each, where each group corresponded to one phase of postnatal development: young, adult and aged phase. In each phase, it was possible to morphologically and stereologically analyze the compartments of prostatic ventral lobe, as well as to immunohistochemically analyze the degree of expression of androgen receptor. In addition, it was possible to establish the hormonal dosage of serum testosterone concentrations given the comparative approach of the expression of androgen receptors. There is a heterogeneous pattern of AR distribution in the prostatic ventral lobe throughout postnatal development, in which the younger animal is the higher, the interaction of circulating androgens that stimulate the AR expression in the compartments prostatics. The androgen blockage therapies decreased AR expression in the ventral lobe, but the androgen reposition after these blockages was not showed the same the degree of expression of androgen receptor near normal physiological conditions. The regulation and distribution of AR along the gerbil prostatic tissues are complex mechanisms that are likely to be genetically regulated by androgens prenatally or by other factors that are still unknown. The gerbil seems to be a valuable model in the attempt to improve the understanding of the morphophysiological and pathological behavior of this important gland in humans throughout aging and to stimulate new therapeutic ideas to fight prostate cancer / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Pólipos adenomatosos colorretais são conhecidos como lesões pré-malignas. Mutações germinativas nas enzimas de reparo (MMR) hMLH1, hMSH2 e hMSH6 são causas reconhecidas de câncer colorretal hereditário não polipóide, induzindo um fenótipo mutante caracterizado por instabilidade de microssatélite (MSI). A MSI também é detectada em cânceres colorretais esporádicos. O Cox-2 é uma enzima induzível que regula a síntese de prostaglandina, sendo fortemente manifestada em locais de inflamação, pólipos adenomatosos colorretais e câncer. Objetivos: Avaliar a imunoexpressão do hMLH1, hMSH2 e Cox-2 em pólipos ressecados através da colonoscopia e associar às características clínico-patológicas (idade, sexo, localização, tamanho, histologia e grau de displasia). Métodos: 138 pacientes com pólipos colônicos, 6 com mucosa colônica normal e 23 pacientes com adenocarcinoma colorretal foram incluídos no estudo. Nenhum paciente apresentava histórico familiar de câncer colorretal. Cento e sessenta e sete amostras foram coletadas e imunocoradas para hMLH1, hMSH2 e Cox-2, usando a técnica ABC-imunohistoquímica e amplificação por tiramida biotinilada. Resultados: A média de idade foi 60,2 + 13,8 (variando de 21 a 90 anos de idade) sendo 77 homens (55,8%) e 61 mulheres (44,2%). Adenomas tubulares estavam presentes em 81,4%, tubulo-viloso em 15,9%, serrilhados em 1,8% e vilosos em 0,9%. A maioria dos adenomas localizava-se na região retossigmoideana (63,5%), seguido pelo ascendente em 14,2%, descendente em 8,2%, ceco em 7,5% e o transverso em 6,7%. Displasia de alto grau foi detectada em 46 (40,4%) e de baixo grau em 68 (59,6%) dos adenomas. Perda de imunoexpressão hMLH1 e hMLH2 foi observada em 20% e 15,5% dos adenomas, respectivamente. O Cox-2 foi positivo em 9% dos adenomas e em 40% dos adenocarcinomas. Além disso, a imunoexpressão Cox-2 foi associada à multiplicidade de adenomas no mesmo paciente (p=0,001). Não houve associação entre a imunoexpressão de marcadores e o sexo, idade, localização, tamanho, histologia ou grau de displasia. Conclusões: 1. A perda de imunoexpressão hMLH1 e hMLH2 em adenomas é relativamente freqüente em pacientes sem histórico familiar de câncer colorretal; 2. O Cox-2 é fortemente manifestado em pólipos adenomatosos e adenocarcinomas colorrretais sendo que sua positividade em adenomas pode indicar um risco maior de lesões múltiplas. / Colorectal adenomatous polyps are known as premalignant lesions. Mutations in the mismatch repair (MMR) enzymes hMLH1, hMSH2 and hMSH6 are recognized causes of hereditary nonpolyposis colorectal cancer and act by inducing a mutator phenotype characterized by microsatellite instability (MSI). MSI is also detected in sporadic colorectal cancers. Cox-2 is an inducible enzyme that regulates prostaglandin synthesis and is overexpressed at sites of inflammation, in colorectal adenomatous polyps and cancer. Aims: To evaluate the immunoexpression of hMLH1, hMSH2 and Cox-2 in resected polyps through colonoscopy, and to associate to the clinicopathologic characteristics (age, gender, location, size, histology and grade of dysplasia). Methods: 138 patients with colonic polyps, 6 with normal colonic mucosa and 23 patients with colorectal adenocarcinoma were enrolled in this study. All patients had no familial history of colorectal cancer. The 167 samples were collected and immunostained for hMLH1, hMSH2 and Cox-2 using the ABC-immunohistochemistry technique and amplification by biotinylated tyramide. Results: The mean age was 60.2 + 13.8 (varying from 21 to 90 years-old) where 77 (55.8%) were men and 61 women (44.2%). Tubular adenomas were present in 81.4%, tubulous-villous in 15.9%, serrated in 1.8%, and villous in 0.9%. The majority of the adenomas were located in the retossigmoid region (63.5%), followed by ascendent in 14.2%, descendent in 8.2%, cecum in 7.5% and transverse in 6.7%. High-grade dysplasia was detected in 46 (40.4%) and low-grade dysplasia in 68 (59.6%) of the adenomas. Loss of hMLH1 and hMLH2 immunoexpression was observed in 20% and 15.5% of the adenomas, respectively. Cox-2 was positive in 9% of the adenomas, and in 40% of the adenocarcinomas. Moreover, Cox-2 immunoexpression was associated to the multiplicity of adenomas in the same patient, p=0.001. There was no association between marker immunoexpression and gender, age, location, size, histology or grade of dysplasia. Conclusions: 1. Loss of hMLH1 and hMLH2 immunoexpression in adenomas is relatively frequent in patients without colorectal cancer familial history; 2. Cox-2 is overexpressed in colorectal adenomatous polyps and adenocarcinomas, and its positivity in adenomas may indicate higher risk for multiple lesions.

Introdução: A prostatectomia radical é uma forma definitiva de tratamento do câncer localizado da próstata. Aproximadamente 40% dos pacientes tratados pela prostatectomia radical apresentaram progressão da doença, mesmo com a doença confinada ao órgão. Acurácia previsão do risco de recorrência é útil para se considerar uma terapia adjuvante ou alguma forma de tratamento investigacional. Observa-se, atualmente, que fatores anatomopatológicos e clínicos são insuficientes para o estadiamento preciso do câncer da próstata. Alguns estudos têm ressaltado a influência dos processos de adesão celular como pré-requisitos para invasão tumoral e metástase, sendo as moléculas CD44 e a família Ezrin-Radixin-Moesin (ERM), citadas como facilitadoras destes processos. Objetivos: Avaliar a expressão do complexo protéico CD44/ERM, no câncer da próstata, bem como sua associação com os fatores prognósticos e sobrevida nesta neoplasia. Material e Métodos: Foram analisados retrospectivamente os blocos de parafina de 100 pacientes, portadores de câncer localizado da próstata comprovado por biópsia transretal da próstata, submetidos à prostatectomia radical, no período de 1995 a 2000, do Departamento de Anatomia Patológica do Hospital Geral de Fortaleza e Laboratório Biopse. As lâminas de todos os casos selecionados para este estudo foram coradas com hematoxilina e eosina e revisadas. A preparação das lâminas foi feita pela técnica de Tissue Microarray. A análise imunohistoquímica foi realizada, utilizado-se para controle positivo um tecido sabidamente com expressão da proteína a ser pesquisada. Foram realizadas duas lâminas de controle negativo. A primeira delas foi feita com a retirada do anticorpo primário e substituição por soro bovino fetal. O segundo controle negativo foi realizado com a retirada da reação do anticorpo secundário e substituição por soro contendo imunoglobulina do mesmo idiotipo do anticorpo primário, mas da mesma espécie. Os dados obtidos foram avaliados através do Teste do Qui-quadrado ou do Teste Exato de Fisher. Foram elaboradas curvas de sobrevivências, segundo o método de Kaplan-Meier. Curvas de sobrevivência foram comparadas através do Teste Log-Rank. Resultados: Os níveis de expressão imunohistoquímica de Ezrin,Radixin, Moezin e CD44V6 no câncer da próstata, foram respectivamente 48,8%, 16,3%, 20,9% e 70,9%. Houve uma diminuição da expressão do Radixin e Moesin quando comparados com os valores de PSA pré-operatório. Esta diminuição da expressão foi estatisticamente significante (p< 0,008 e p< 0,044) para os pacientes portadores de PSA> 10ng/ml no pré-operatório. A expressão do Ezrin teve significância estatística com relação à redução global da sobrevida dos pacientes quando comparado com as outras proteínas de adesão. Conclusão: A expressão da proteína Ezrin no câncer da próstata parece ser fator prognóstico independente na redução da sobrevida global, podendo vir a ser um importante marcador molecular em câncer da próstata / Introduction: Radical prostatectomy is one form of definite treatment of clinically localized prostate cancer. Approximately 40% of the patients treated by radical prostatectomy presented disease progression, even with the disease confined to the organ. Predictive accuracy of the risk of recurrence is useful to be considered as an adjuvant therapy or in some form of investigational treatment. To date, anatomopathological and clinical factors are observed as insufficient for the precise staging of prostate cancer. Some studies have emphasized the influence of cellular adhesion processes as a prerequisite for tumor invasion and metastasis, with the molecules CD44 and the ERM (Ezrin/Radixin/Moesin) family cited as facilitators of these processes. Objectives: To evaluate the expression of CD44/ERM complex protein in prostate cancer, as well as its association with prognostic and survival factors in this neoplasm. Material and Methods: Retrospectively analyzed were the paraffin blocks of 100 prostate cancer patients, proven by transrectal ultrasound-guided prostate biopsy, submitted to radical prostatectomy in the period from 1995 to 2000 at the Department of Pathological Anatomy of the General Hospital of Fortaleza and a private laboratory (Fortaleza, Brazil). The slides of all cases selected for this study were stained with hematoxylin and eosin and reviewed. The preparation of the slides was done by tissue microarray technique. Immunohistochemical analysis was carried out using a tissue known to have expression to the protein being studied as positive control. Two slides of negative control were prepared. The first slide was prepared with the omission of the primary antibody and substitution by fetal bovine serum. The second negative control was prepared with the omission of the secondary antibody response and substitution by serum containing immunoglobulin of the same idiotype of the primary antibody, but of the same species. The obtained data were evaluated through chi-square test or Fishers exact test. Survival curves were prepared following the Kaplan-Meier method. Survival curves were compared by the log-rank test. Results: The immunohistochemical expression levels of Ezrin, Radixin, Moezin and CD44V6 in prostate cancer were respectively 48.8%, 16.3%, 20.9% and 70.9%. There was a reduction of Radixin and Moesin expression when compared with preoperative PSA values. This reduction of expression was statistically significant (p <0.008 and p <0.044) for the patients with preoperative PSA> 10ng/ml. Ezrin expression had statistical significance in relation to reduction of overall patient survival when compared with other adhesion proteins. Conclusion: Ezrin protein expression in prostate cancer seems to be an independent prognostic factor in the reduction of overall survival, being able to become an important molecular marker in prostate cancer

A formação de novos vasos sanguíneos é fundamental para o crescimento tumoral e a disseminação metastática, sendo o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) uma das chaves reguladoras deste processo. O objetivo do presente estudo foi avaliar a expressão imunohistoquímica de VEGF nos hemangiossarcomas e hemangiomas esplênicos, e rever a prevalência das demais afecções esplênicas através da análise retrospectiva do diagnóstico histopatológico de cães submetidos à esplenectomia. Os resultados foram confrontados com os exames laboratoriais, as manifestações clínicas, a presença de arritmias cardíacas e de hemoperitôneo. Participaram do estudo retrospectivo 109 cães atendidos no Serviço de Cirurgia de Pequenos Animais do Hospital Veterinário da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo, entre os anos de 2002 e 2009. A média de idade foi de 10 anos (± 3), não foi observado predileção sexual. Cães sem raça definida foram os mais acometidos, com peso médio de 22 kg (± 13). Cinqüenta e dois por cento (57/109) dos animais foram esplenectomizados devido a afecções não neoplásicas, enquanto que 48% (52/109), por neoplasias esplênicas. Dentre estes, o diagnóstico mais freqüente foi o hemangiossarcoma, acometendo 28 (54%) animais. Os sintomas mais freqüentes foram disorexia, apatia e emese. Cães com neoplasias malignas apresentaram níveis de hematócrito e hemácias significativamente menores que os acometidos por massas benignas. Do mesmo modo, a presença de hemoperitôneo, secundário à ruptura esplênica, correlacionou-se significativamente com a presença de neoplasia maligna. Arritmias cardíacas não foram fatores preditivos para a diferenciação da esplenomegalia. A avaliação imunohistoquímica da expressão tecidual de VEGF foi realizada em 23 hemangiossarcomas e 7 hemangiomas, revelando-se significativamente maior nas neoplasias malignas. Tal resultado sugere que a expressão deste fator pode estar relacionada à proliferação maligna observada nos hemangiossarcomas. / New blood vessel formation is a fundamental event in the process of tumor growth and metastatic dissemination, being the vascular endothelial growth factor (VEGF) one of the key regulators of this process. The aim of this study was evaluate the VEGF immunohistochemical expression in splenic hemangiosarcomas and hemangiomas, and review the prevalence of canine splenic disorders through retrospective analysis of histological diagnosis after splenectomy. The results were confronted with laboratory findings, clinical signs and presence of cardiac arrhythmia and hemoperitoneum. A hundred nine dogs were included in the retrospective study at Veterinary Hospital of School of Veterinary Medicine, University of Sao Paulo, between 2002 and 2009. The average age was 10 year ± 3, without sexual predilection. Mix breeds were the most frequent, and average weigh was 22kg ± 13. Overall, 52% (57/109) of dogs were splenectomized for nonneoplastic disease, although 48% (52/109) were splenectomized for neoplasia. Among these dogs the most common diagnosis was hemangiossarcoma (28 dogs, 54%). Frequently clinical signs included anorexia, lethargy and vomiting. Dogs with malignant neoplasia had significantly lower red blood cells counts and packed cell volume compared with values for dogs with benign masses. Similarly, hemoperitoneum secondary to splenic rupture had a significant correlation with malignant tumor. Cardiac arrhythmia was not useful in differentiating dogs with splenomegaly. Expression of vascular endothelial growth factor was made by immunohistochemical analyses in 23 hemangiosarcomas and 7 hemangiomas being significantly higher in malignant tumor. These data suggest that VEGF expression may contribute to malignant proliferation of hemangiossarcoma.

Orientadores: Albina Messias De Almeida Milani Altemani, Elizabeth Ferreira Martinez / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T03:06:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Montalli_VictorAngeloMartins_D.pdf: 4723030 bytes, checksum: 1764455ec3666d02c7e74ee7c326caed (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: As lesões salivares tumorais compostas por dupla população celular (epitelial e mioepitelial) são consideradas originárias do ducto intercalado e estas lesões são subdivididas em diversas entidades que apresentam sobreposição morfológica, com delimitações entre elas nem sempre nítidas. Entre as neoplasias benignas estão o adenoma pleomórfico (AP) e o adenoma de células basais (ACB). Recentemente foi descrita uma nova entidade tumoral benigna, com composição epitelial e mioepitelial, denominada de lesão do ducto intercalado (LDI). Diante disso, o nosso primeiro objetivo foi analisar os perfis morfológicos e imuno-histoquímicos de LDIs e ACBs classificados em tubulares (ACB-T) e não tubulares (ACB-NT) para verificar se as LDIs e ACB-Ts representam entidades distintas. Ainda, dado o papel crítico da célula mioepitelial na morfogênese das lesões tumorais salivares histogeneticamente relacionadas ao ducto intercalado, nosso segundo objetivo foi avaliar in vitro a influência de fatores do microambiente tumoral (proteínas da matriz extracelular e fatores de crescimento) sobre a morfologia, viabilidade e proliferação de células mioepiteliais advindas de AP. Para a análise morfológica e imuno-histoquímica, foram estudados oito casos de LDIs, nove ACBs-T e 19 ACBs-NT. Todos os ACB-T continham áreas LDI-like, enquanto nos ACB-NT estas eram raras e escassas. As células luminais das LDIs e ACBs-T exibiram positividade para CK7, lisozima, S100 e DOG1. No grupo ACB-NT, poucas células luminais mostraram tal expressão, sendo principalmente positivas para CK14. As células mioepiteliais das LDIs, ACB-T e ACB-NT foram positivas para CK14, calponina, AML e p63, mas essas eram mais numerosas nos ACBs. No estudo in vitro, a morfologia e diferenciação das células mioepiteliais foram avaliadas qualitativamente por imunofluorescência indireta (expressão da vimentina e AML, respectivamente). As células mioepiteliais exibiram morfologia poliédrica em todas as matrizes, independentemente da suplementação do fator de crescimento. AML foi imunoexpressa de forma heterogênea nas células mioepiteliais, porém houve aumento da expressão desta proteína quando acrescentado o TGF- ?1, independentemente do tipo de matriz usada. TGF- ?1 também aumentou significantemente a viabilidade das células mioepiteliais cultivadas na matriz fibronectina. Conclusões: as LDI, ACB-T e ACB-NT formam um continuum de lesões onde as LDIs estão estreitamente relacionadas com o ACB-T, visto que em ambos o imunofenótipo das células luminais e mioepiteliais é semelhante àquele observado nos ductos intercalados. A principal diferença entre LDI e ACB-T é a quantidade de células mioepiteliais, que é maior no último. Além disso, nossos resultados indicam que pelo menos alguns ACBs podem surgir via LDI. Os estudos em cultura de células sugerem que as diferentes matrizes celulares não influenciam a morfologia e diferenciação da célula mioepitelial. Dentre os fatores de crescimento estudados apenas TGF- ?1 associou-se com aumento da expressão de AML (diferenciação celular) e aumentou significantemente a viabilidade celular associado à matriz fibronectina / Abstract: Salivary tumor lesions composed of dual cell population (epithelial and myoepithelial) are considered to originate from the intercalated duct. These lesions are subdivided into several entities that share morphological features. Among the benign tumors are pleomorphic adenomas (PA) and basal cell adenoma (BCA). Recently, a new entity was described that is a benign tumor with epithelial and myoepithelial composition, called intercalated duct lesion (IDL). Our first objective was to analyze the morphological and immunohistochemical profiles of IDLs and BCAs classified into tubular (T-BCA) and non-tubular subtypes (NT-BCA), to determine whether or not IDL and tubular BCA represent distinct entities. Also, given the critical role of myoepithelial cells in the morphogenesis of the salivary tumor lesions histogenetically related to the intercalated duct, our second objective was to evaluate in vitro the influence of tumor microenvironment factors (extracellular matrix proteins and growth factors) on the morphology, viability and proliferation of myoepithelial cells arisen from PA . Eight IDLs, nine tubular BCAs and 19 non-tubular BCAs were studied by immunohistochemical technique. All tubular BCAs contained IDL-like areas, which represented 20-70% of the tumor. In non-tubular BCA, IDL-like areas were occasional and small (<5%). One patient presented IDLs, tubular BCAs and IDL/tubular BCA combined lesions. Luminal ductal cells of IDLs and tubular BCAs exhibited positivity for CK7, lysozyme, S100 and DOG1. In the non-tubular BCA group, few luminal cells exhibited such immunoprofile; they were mainly CK14-positive. Basal/myoepithelial cells of IDLs, tubular BCAs and non-tubular BCAs were positive for CK14, calponin, ?-SMA and p63; they were more numerous in BCA lesions. The in vitro study analyzed morphology and differentiation of myoepithelial cells by vimentin and SMA expressions, respectively, which were qualitatively assessed using indirect immunofluorescence. Myoepithelial cells showed polyhedral morphology in all extra cellular matrixes regardless of the supplementation of growth factors. These cells expressed SMA heterogeneously but when TGF- ?1 was added such expression increased. This modification did not show relationship with the type of extracellular matix. The viability of myoepithelial cells cultured on fibronectin matrix increased significantly with addition of TGF - ?1. Conclusions: IDL, tubular BCA and non-tubular BCA form a continuum of lesions in which IDLs are related closely to tubular BCA. In both, the immunoprofile of luminal and myoepithelial cells recapitulates the normal intercalated duct. The difference between the adenoma-like subset of IDLs and tubular BCA rests mainly on the larger numbers of myoepithelial cells in the latter. Our findings indicate that at least some BCAs can arise via IDLs. The cell culture studies suggest that the different matrixes do not influence the morphology and differentiation of myoepithelial cells. Among the growth factors studied, only TGF - ?1 was associated with an increased expression of SMA (cell differentiation) and a significant increase of the cellular viability associated with the fibronectin matrix / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Orientadores: Ilka de Fátima Santna Ferreira Boin, Cecilia Amélia Fazzio Escanhoela / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T02:58:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ataide_ElaineCristinade_D.pdf: 2429864 bytes, checksum: ec486a6adc404d0751bb752ea469797b (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Introdução: Apesar de sobrevida ao redor de 70% em cinco anos a recidiva do CHC vem suscitando cuidados com índices que variam na literatura entre 6% a 26%. Muitos são os fatores atrelados ao maior risco de recidiva descritos na literatura, sem definição de qual o melhor método que poderia predizer esse evento de alta letalidade. Objetivo: Os objetivos desse estudo foram: avaliar a sobrevida e recidiva tumoral em pacientes submetidos a transplante hepático por CHC e investigar a imunoexpressão dos marcadores imunohistoquimicos: HSP70, Glipican3, Glutamina sintetase, beta-catenina, CK7, Ck19, HepPar1 e PCNA, estudando sua associação com características tumorais e prognóstico de pacientes submetidos a transplante hepático por CHC. Método: Foram estudados 90 pacientes portadores de CHC submetidos a transplante hepático de 1996 a 2010. Foram estudados fatores correlacionados ao aparecimento da recidiva neoplásica como: tamanho da maior lesão, número de lesões, grau histológico, presença de invasão vascular, nível de alfa-feto proteína (AFP) superior a 200 ng/ml e regime de imunossupressão. Foi estudada também a correlação da expressão dos marcadores imunohistoquimicos estudados com cada uma dessas mesmas variáveis. A técnica de estudo imunohistoquimico foi o arranjo em matriz tecidual (TMA). A análise estatística utilizou testes de regressão uni e multivariadas, teste de Cox, teste de Qui-quadrado ou Fisher, teste de Mann-Whitney e para estudo de sobrevida foi utilizado o método de Kaplan Meyer. Resultados: Foi observada recidiva em 7 pacientes (8%).O tempo de cirurgia, quantidade de concentrados de hemácias administrados, valor do MELD calculado no momento da cirurgia e a presença de recidiva foram associados à menor sobrevida. Pacientes com recidiva tumoral apresentaram tendência à presença de invasão vascular, apresentaram maior número de nódulos e maiores nódulos. Em relação aos marcadores imunohistoquimicos pacientes com glutamina sintetase positiva apresentaram tendência à menor sobrevida; e a presença de HepaPar1 negativo apresentou correlação com o aparecimento de recidiva neoplásica. Pacientes com HSP70 positivo apresentaram maior prevalência do grau histológico III. Pacientes com Glipican3 positivo apresentaram nódulos maiores e presença de mais casos com AFP superior a 200 ng/ml. Pacientes com PCNA positivo apresentaram nódulos maiores. Pacientes com HepPar1 negativo apresentaram nódulos maiores e tendência a apresentar mais nódulos. Pacientes com beta-catenina positiva apresentaram maiores nódulos e presença de maior número de pacientes com grau histológico III. Pacientes com CK19 positivo demonstraram tendência a apresentar nódulos maiores (p=0.05). A associação entre beta-catenina e Glipican3 positivos demonstrou correlação com a presença de nódulos maiores com maior evidência estatística do que quando avaliados separadamente (p=0,003). Conclusão: Não foi possível a associação de nenhum desses marcadores com a sobrevida exceto pela presença de glutamina sintetase positiva que apresentou tendência à associação com piora da sobrevida. A imunoexpressão desses marcadores não se correlacionou com o tempo de aparecimento de recorrência tumoral, com exceção da do HepPar1, o qual, quando negativo, correlacionou-se com maior frequência de aparecimento de recidiva. Entretanto, a maioria dos marcadores estudados apresentaram correlação com pelo menos uma das variáveis em estudo, confirmando nossa hipótese de que esses marcadores podem, sim, auxiliar na avaliação do prognóstico de pacientes submetidos a transplante hepático por CHC / Abstract: Introduction: Although overall survival rates have been around 70% after five years, recurrence of HCC has indices in literature ranging from 6 to 26%. There is no consensus therapy for treatment of HCC recurrence after liver transplantation that could lead to a significant increase in survival. Many factors are linked to higher risk of recurrence in the literature, without defining the best method that could predict this highly lethal event. Objective: The aim of this study was first to evaluate the survival and tumor recurrence in patients undergoing liver transplantation for HCC and second to evaluate immunoexpression of immunohistochemical markers: HSP70, Glipican3, Glutamin synthetase, Beta-Catenin, CK7, Ck19, HepPar1 and PCNA, which are capable of assessing the malignant cellular potential, studying its association with tumor characteristics and prognosis of patients undergoing liver transplantation for HCC. Methods: We studied 90 patients who underwent liver transplantation from 1996 to 2010. We evaluated factors related to survival and tumor recurrence. Factors were also studied related to the onset of neoplastic recurrence as size of the largest lesion, number of lesions, histological grade, presence of vascular invasion, AFP level greater than 200 ng / ml and the immunosuppressive regimen. The correlation of expression of immunohistochemical markers studied was correlated with each of these variables. The immunohistochemistry technique was the tissue matrix arrangement (TMA) and the statistical analysis used was regression testing univariate and multivariate, Cox test, chi-square or Fisher test and Mann-Whitney test, while for study of survival the Kaplan Meyer curve was used. Results: The duration of surgery and recurrence was associated with shorter survival. Patients with tumor recurrence tended to have the presence of vascular invasion, showing a higher number of nodules and larger nodules. Regarding the presence of immunohistochemical markers glutamin synthetase showed a positive trend toward lower survival, and presence of HepPar1 negative correlated with the appearance of neoplastic recurrence. HSP70 positive patients had higher prevalence of histologic grade III. Patients with positive Glipican3 showed larger lesions and more patients had AFP greater than 200 ng / ml. PCNA positive patients had bigger lesions. HepPar1 negative patients had larger lesions and tended to have more nodules. Patients with positive Beta-Catenin showed larger nodules and more histologic grade III. Patients with positive CK19 showed a tendency to have larger nodules. The association between Beta-catenin and Glipican3 showed positive association with larger nodules. Conclusion: There was no statistical correlation of these markers and the specific disease survival except for the presence of glutamine synthetase which showed only a positive trend of association with survival. The immunoreactivity of these markers did not correlate with the time of appearance of a recurrent tumor, with the exception of the Hep-Par1, which, if negative, was correlated with higher frequency of occurrence of relapse. However, most of the markers studied showed correlation with at least one of the variables studied, whether of characteristics of the population (AFP level, the presence of recurrence and survival time) or characteristics of the lesion (tumor number, the greater lesion size, presence of vascular invasion and degree of differentiation) confirming our hypothesis that these markers can indeed assist in assessing the prognosis of patients undergoing liver transplantation for HCC / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutor em Ciências da Cirurgia

In couples diagnosed with unexplained infertility, the woman has normal ovulatory cycles and no organic pathology, and the man has normal semen. The period during which the implantation of an embryo can occur is defined as the window of implantation (WOI). For infertile women, disturbances in the endometrium maturation are hypothesized to impair the uterine receptivity for embryo implantaition. However, there are still no methods found to predict endometrial receptivity. Hemoglobin related-proteins hypothesized to be involved in embryo implantation have been found in the endometrium in both fertile and infertile women. The aim of this study was to determine whether there were differences in the expression of hemoglobin-related proteins, hemoglobin-α, cytoglobin, fetal hemoglobin and haptoglobin in the endometrium of fertile and infertile women. Immunohistchemical staining was used. Haptoglobin showed negative expression in glands, luminal epithelium and strong expression in stroma for both gruops. The expression of the hemoglobin-related proteins, hemoglobin-α, cytoglobin, fetal hemoglobin intensity were stronger in fertile than infertile women. More studies are required to find other factors that may have an effect on fertility.