Orientador: Anaglória Pontes / Coorientador: Maria Teresinha de Oliveira Cardoso. / Banca: Paulo Sérgio França / Banca: Adriano Bueno Tavares / Resumo: A histerossonografia (HSN) foi descrita pela primeira vez há três décadas. A infusão de solução salina na cavidade uterina favorece sua exploração e proporciona excelente visualização da anatomia e do interior da cavidade do útero melhor do que com ultrassonografia transvaginal convencional (USG). Para verificar o papel atual da HSN na avaliação da cavidade uterina de mulheres com sangramento uterino anormal (SUA) e assintomática, foi realizado revisão bibliográfica de estudos que compararam a HSN com a USG ou histeroscopia diagnóstica ambulatorial (HTDx). Para isso, pesquisou-se estudos relevantes em bases de dados eletrônicas Medline/PubMed, SciELO/LILACS. A HSN é procedimento ambulatorial, "não invasivo", de melhor custo-benefício, com melhor sensibilidade e especificidade na identificação de anomalias uterinas, causando desconforto mínimo e com baixo índice de complicações. Foi objeto de revisões, não existindo mais dúvidas quanto a sua acurácia. Pode-se concluir que a HSN é ferramenta útil na propedêutica de avaliação da cavidade uterina de mulheres sintomáticas com SUA, infertilidade e perdas gestacionais repetidas, falhas de implantação embrionária em programas com técnicas de reprodução assistida (TRA) / fertilização in vitro (FIV) e naquelas com qualquer alteração uterina intra ou extracavitária na USG. Portanto, está indicada como método de avaliação inicial da cavidade uterina antes de indicar HTDx / Abstract: Sonohysterography (HSN) was firstly described three decades ago. The saline solution infusion into the uterine cavity favors its use and provides excellent visualization of the anatomy and the inner cavity of the uterus better than the conventional transvaginal sonography (USG). To check the current role of HSN in the uterine cavity assessment in women with abnormal uterine bleeding (AUB) and asymptomatic, a literature review comparing HSN with USG and/or ambulatory diagnostic hysteroscopy (HTDx) was carried out. To this end, relevant studies were researched in electronic databases Medline/PubMed, SciELO/LILACS. The HSN is an ambulatory procedure, non-invasive, better cost-benefit, better sensitivity and specificity to identify uterine abnormalities, causing minimal discomfort and low complications rate. It was subject to revision which there is no more doubt about its accuracy. It can be concluded that the HSN is a useful tool in the propedeutics to assess uterine cavity of symptomatic patients with SUA, infertility, recurrent miscarriages, and embryonic implantation failures in assisted reproduction treatment (ART) / in vitro fertilization (FIV) and in any other intra and extra uterine cavity alteration. Hence, USG is indicated as an initial method of assessment of the uterine cavity previously to HTDx / Mestre

Resumo: Nesta pesquisa foram realizadas a histologia e morfometria de ovários, ovidutos e úteros de cadelas. Foram utilizados 15 animais distribuídos em grupos (G) de acordo com as idades em anos, G1 (1 até 3), G2 (maiores de 3 até 5) e G3 (maiores de 5 até 7). Após a realização da ovariosalpingo-histerectomia, ovários, fragmentos de tubas uterinas e útero foram fixados e processados rotineiramente para a inclusão em parafina. As amostras foram coradas pela técnica da Hematoxilina-eosina. Os parâmetros morfométricos analisados foram: diâmetros máximo e mínimo (æm), perímetro (æm), área (æmø), fator de forma do citoplasma e núcleo dos oócitos dos diferentes tipos de folículos e espessura das camadas salpíngicas e uterinas. Os procedimentos estatísticos utilizados foram ANOVA e o teste Tukey (5%). Houve diferenças significativas entre os grupos experimentais para os parâmetros do citoplasma e núcleo de oócitos foliculares e para a espessura das camadas salpíngicas e uterinas. Concluiu-se que de acordo com os resultados desta pesquisa a maturação in vitro, obtém melhores desempenhos na utilização de oócitos de folículos primordiais nas fêmeas correspondentes ao G3 e para oócitos inclusos em folículos secundários e terciários, as do G2; as diferenças nas espessuras das camadas uterinas podem ser uma das explicações para o desenvolvimento diferenciado dos fetos em fêmeas caninas; os valores obtidos neste estudo servirão como subsídios para a biotecnologia da reprodução, diagnóstico e prognóstico de enfermidades que acometem esta espécie. / Abstract: The objectives of this work were the histologyc and morphometric study of ovaries, oviducts and uterus of canines females. There were 15 animals distributed in groups involved according to their age, Group 1 (G1), Group 2 (G2) and Group 3 (G3). To the histological analysis after the accomplishment of the ovariehisterectomy, the ovaries, fragments of oviducts and uterus were fixed and processed routinely for inclusion in paraffin. The samples were stained by haematoxilyn-eosin technique. The morphometric parameters studied were: maximum and minimum diameters (æm), perimeter (æm), area (æm2), roundness factor of nucleus and cytoplasm of oocytes of different kinds of follicles and thickness of oviduct and uterine layers. The statistical procedures used were ANOVA and Tukey's test. There was significantly difference in oocytes of follicles: primordials in the cytoplasm for maximum and minimum diameters, perimeter and area between the G1 and G3, unilaminar primary in the cytoplasm for roundness factor between the G1 and G2, secondary in the nucleus for maximum and minimum diameters, perimeter and area between the G1 and G2 and G2 and G3, tertiary in the nucleus for minimum diameter, perimeter and area between the G1 and G2 and G2 and G3. In the oviduct there was significantly difference in: the infundibulum for mucosa between the G2 and G3, and the serose between the G1 and G3, the ampulla for mucosa and serose between the G1 and G2, the isthmus for serose between the G1 and G2 and G1 and G3. In the uterus there was significantly difference in: the segment 1 of myometrium between the G1 and G3 and G2 and G3, the segment 2 of miometrium between the G1 and G2 and G1 and G3. It concludes that this study will serve as subsidy for the biotechnology of the reproduction, the diagnosis and prognostic of diseases that impaired this specie. / Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Coorientador: Maria Rita Pacheco / Banca: Ivo Walter dos Santos / Banca: Marion Burkhardt de Koivisto / Mestre

Orientador: Kleber Tomás de Resende / Banca: Silvio Doria de Almeida Ribeiro / Banca: Heraldo César Gonçalves / Banca: Telma Teresinha Berchielli / Banca: Izabelle Molina de Almeida Teixeira / Resumo: O objetivo do experimento foi estudar o crescimento do útero grávido e da glândula mamária e as mudanças corporais em cabras leiteiras durante a gestação. A técnica usada foi a do abate comparativo. O experimento foi em esquema fatorial, sendo quatro dias de gestação (0; 80; 110 e 140), duas raças (Saanen e Alpina) e dois tipos de gestação (simples e dupla), sendo que para os componentes do útero grávido o dia zero não foi considerado. O modelo utilizado foi Ln(Y)= (b0 + b1T + b2T2) + ε, sendo T o tempo de gestação e b os parâmetros da equação. Dez cabras não gestantes e não lactantes foram abatidas e 39 foram cobertas. As cabras cobertas, após 30 dias foram distribuídas em dois lotes conforme o número de fetos e subdivididas em seis sub-lotes, três para cada raça. Aos 80; 110 e 140 dias de gestação, um lote de cada raça foi abatido. Antes do abate foram feitas as medidas biométricas. Após o abate, foi removida a glândula mamária e o útero grávido. Os componentes do útero grávido (útero vazio, fetos, membrana placentária, placentomas e fluídos uterinos) foram separados e pesados. Nos fetos foram realizadas medidas morfométricas e identificação do sexo. A glândula mamária foi pesada após a retirada da pele e tetos. O corpo dos animais livre do peso do útero e da glândula mamária foi separado em carcaça, componentes externos (coração, fígado, baço, pulmões e pâncreas), trato digestório, gordura intracavitária, sangue e outros componentes (traquéia, esôfago, diafragma e língua). A dinâmica do crescimento do útero grávido, da glândula mamária e da mudança no corpo materno pode ser estimada por modelos matemáticos biologicamente explicáveis. As medidas morfométricas foram utilizadas com precisão na estimativa da idade e peso fetal. O peso do útero grávido pode ser estimado pelo perímetro abdominal / Abstract: The aim of this experiment was to study the growth of the pregnant uterus and mammary gland and the body changes in dairy goats during pregnancy. It was used the technique of the comparative slaughter. The experimental was a 3x2x2 factorial. The model used was log (Y) = (b0 + b1T + b2T2) + ε, where T was the time of pregnancy and b the parameters of the equation. Ten empty goats and not lactating were slaughtered and 39 were covered. After 30 days this goats (the covered ones) were divided into two lots as the number of fetuses and subdivided into six sub-plots, three for each breed. At 80, 110 and 140 days of gestation, a lot of each breed was slaughtered. Biometric measurements were made before the slaughter, and after this the mammary gland and pregnant uterus were removed. The components of the pregnant uterus ( empty womb, fetuses, placental membranes, placentomes and uterine fluid) were separated and weighted. Morphometric measures and the identification of the sex were made in the fetuses. The mammary gland was weighted after the removal of the skin and ceilings. The animals' body weight without the uterus and the mammary gland was separated in carcass, external components (heart, liver, spleen, lungs and pancreas), digestive tract, intracavitary fat, blood and other components (trachea, esophagus, diaphragm and tongue). The growth dynamics of the pregnant uterus, mammary gland and the change in the maternal body can be estimated by mathematical models that are biologically explainable. The morphometric measurements were used with accuracy to estimate the age and fetal weight. The pregnant uteru's weight can be estimated by abdominal circumference / Doutor

Orientador: Gilson Hélio Toniollo / Banca: Renée Laufer Amorim / Banca: Antonio Carlos Alessi / Resumo: Os órgãos reprodutores das fêmeas caninas sofrem transformações morfológicas e funcionais durante o ciclo estral, sob influência do estrógeno e da progesterona. A proteína CYR61 (proteína rica em cisteína, 61kilodaltons), mediada por citocinas inflamatórias, interleucinas, integrinas e outros, regula processos como proliferação e diferenciação celular, quimiotaxia, angiogênese e tumorgênese. É identificada em endometriose em mulheres, ratas e fêmeas de babuíno, acometidas por endometriose ou hiperplasia endometrial. Objetivou-se com este estudo imunolocalizar e quantificar a expressão da CYR61 em órgãos reprodutores das fêmeas caninas saudáveis, sob diferentes níveis séricos de progesterona e estradiol, e acometidas por piometra. Os tecidos coletados das 100 fêmeas caninas foram submetidos à técnica de imunoistoquímica com anticorpo anti-CYR61, e apresentaram marcação citoplasmática positiva nos componentes epiteliais em maior intensidade quando comparada aos componentes estromais. Foi identificada correlação linear positiva de área com marcação citoplasmática no ovário, corno uterino e corpo do útero, na fase lútea do ciclo estral. As tubas uterinas demonstraram maior expressão e correlação linear positiva com a fase proliferativa do ciclo estral. É possível concluir que a expressão do CYR61 está diretamente relacionada com as alterações morfológicas e funcionais dos órgãos reprodutores femininos, provocadas pelos hormônios ovarianos nas diferentes fases do ciclo estral, de forma particular sobre cada tecido, de acordo com suas funções fisiológicas / Abstract: The reproductive organs of female dogs suffer morphological and functional changes during the estrous cycle, under the influence of estrogen and progesterone. CYR61 protein (cystein-rich protein, 61kilodaltons) mediated by inflammatory cytokines, interleukins, integrins and others, regulates the processes such as cell proliferation and differentiation, chemotaxis, angiogenesis and tumorgenesis. It was identified in endometriosis in women, rats and female baboon, who suffers from endometriosis or endometrial hyperplasia. The objective of this study was the immunolocalization and quantification of CYR61 expression in reproductive organs of healthy canine females under different levels of progesterone and estradiol, and females affected by pyometra. The tissues collected from 100 females dogs were subjected to immunohistochemistry analyses with anti-CYR61, and showed cytoplasmatic positive reaction in higher intensity on epithelial components, when compared with stromal components. This study identified positive linear correlation of cytoplasmatic area with positive reaction on the ovary and uterus in luteal phase of the estrous cycle. The fallopian tubes showed higher expression and positive linear correlation with estradiol, in proliferative phase of the estrous cycle. It was concluded that the CYR61 expression is directly related to the morphological and functional changes of the female reproductive organs, caused by the ovarian hormones at different stages of the estrous cycle in a particular way on each tissue, according to their physiological functions / Mestre

Orientador: Juliana Regina Peiró / Banca: Guilherme de Paula Nogueira / Banca: Valéria Marçal Felix de Lima / Banca: João Pessoa Araujo Junior / Banca: Daniel de Jesus Cardoso de Oliveira / Resumo: A endometrite é um dos problemas de maior frequência e relevância na reprodução de éguas. Os objetivos deste trabalho foram determinar o perfil das concentrações de IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-6, IL-10 e IL-4 presentes no soro sanguíneo e no lavado uterino de éguas com endometrite naturalmente adquirida e naquelas clinicamente saudáveis, bem como definir o padrão da resposta imune (TH1 e TH2); observar se a inflamação local no útero pode gerar inflamação sistêmica; e, verificar se o lavado uterino e o tratamento com enrofloxacina alteram o perfil de concentração das citocinas nestas éguas. Foram utilizadas 12 éguas da raça Quarto de Milha incluídas em programa de transferência de embriões e subdivididas em 2 grupos, com 6 animais cada: GC (animais sadios) e GE (animais com endometrite). Amostras de soro e lavado uterino foram colhidas nos dias 1 (início do cio), 2, 3, 4 e 5 dias após o início do cio. As concentrações de TNF-α, IL-2 e IFN-γ (TH1); IL-4, IL-6, e IL-10 (TH2) foram mensuradas por citometria de fluxo pelo método Cytometric Bead Array (CBA). As diferentes citocinas avaliadas nas amostras de lavado uterino, à exceção da IL-4, apresentaram concentrações mais elevadas em éguas do GE comparadas às do GC no dia 1. A utilização de lavados uterinos seriados associados a antibioticoterapia sistêmica não provocaram alterações significativas nas concentrações de citocinas presentes no útero de éguas do GC. As concentrações séricas de citocinas não diferiram entre os grupos. Nosso... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Endometritis is one of the most frequent and relevant diseases in mares. The goals of this study were to determine the profile concentration of cytokines such as IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-6, IL-10 and IL-4 present in blood serum and uterine lavage of mares with naturally acquired endometritis and those clinically healthy, well as set the pattern of immune response (TH1 and TH2); see if local inflammation in the uterus can cause systemic inflammation; and check whether the uterine lavage and the treatment with enrofloxacin alter the concentration profile of cytokines in these mares. Twelve Quarter Horse mares from an embryo transfer program were divided into 2 groups, with 6 animals each: control group (CG, healthy animals) and experimental group (EG, animals with endometritis). Blood serum and uterine lavage samples were collected on days 1 (onset of estrus), 2, 3, 4 and 5 (after onset of estrus). Concentrations of TNF-α, IL-2 and IFN-γ (TH1); IL-4, IL-6, and IL-10 (TH2) were measured by flow cytometry using the Cytometric Bead Array method (CBA). All cytokines, but not IL- 4, evaluated in the uterine lavage samples showed higher concentrations in mares with endometritis compared to healthy animals on day 1. The use of serial uterine lavages associated with systemic antibiotic therapy did not cause significant changes in concentrations of cytokines in the uterus of mares without endometritis. Serum concentrations of cytokines did not differ between groups. Our results establishe... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Coorientador: José Carlos Peraçoli / Banca: Mara Sandra Hoshida / Banca: Leando Gustavo de Oliveira / Resumo: A pré-eclâmpsia (PE) é uma síndrome específica da gestação humana, caracterizada pelo aparecimento de hipertensão arterial e proteinúria após a 20ª. semana de gestação. É aceito que esta patologia tem origem na placenta, provavelmente em decorrência de fatores envolvidos na sua formação e desenvolvimento. O presente projeto teve como objetivo: 1) Avaliar comparativamente a histopatologia de lesões placentárias em gestantes portadoras de PE e gestantes normotensas; 2) Comparar a frequência de recém-nascidos com restrição de crescimento intrauterino entre os grupos de gestantes estudados. Foram avaliadas 140 gestantes, sendo 20 normotensas e 120 com PE. As gestantes com PE foram classificadas de acordo com o aparecimento das manifestações clínicas em PE precoce (< 34 semanas de gestação - n=40) e PE tardia (≥ 34 semanas de gestação - n= 80). Um fragmento de placenta foi obtido imediatamente após o parto e preparado para análise histopatológica, sendo os cortes histológicos de 4m de espessura colocados sobre lâmina histológica para coloração pelo método de Hematoxilina - Eosina (HE). O exame histológico das placentas mostrou que as patologias mais frequentemente encontradas em gestantes com PE foram aumento de vilos com nós sinciciais, infarto, aumento de depósito de fibrina e hipoplasia de vilos distais. Placentas de gestantes portadoras de PE precoce apresentaram maior percentagem de vilos com aumento de nós sinciciais para a idade gestacional em comparação a gestantes normotensas e com PE tardia. O infarto placentário e a hipoplasia de vilos distais foram mais frequentes em gestantes portadoras de PE quando comparadas às normotensas, enquanto o depósito de fibrina foi maior em gestantes com PE precoce do que nas com PE tardia. Além disso, a percentagem de recém-nascidos com restrição de crescimento intrauterino foi significativamente maior (37,8%) em gestantes com PE precose ... / Abstract: Preeclampsia (PE) is a specific syndrome of human pregnancy, characterized by the onset of hypertension and proteinuria after the 20th week of gestation. It is accepted that this disease originates in the placenta, probably due to factors involved in its formation and development. The objectives of the present study were: 1) To evaluate the histopathology of placental lesions in pregnant women with PE and in normotensive pregnant women; 2) To compare the frequency of newborns with intrauterine growth restriction among the groups of pregnant women studied. One hundred and forty pregnant women were evaluated, of whom 20 were normotensive and 120 were preeclamptic. Pregnant women with PE were classified according to the appearance of clinical manifestations in early-onset PE (<34 weeks of gestation - n = 40) and late-onset PE (≥ 34 weeks gestation - n = 80). A fragment of placenta was obtained immediately after delivery and prepared for histopathological analysis. Placental sections of 4m were placed on a slide for hematoxylin - eosin (HE) staining. Histological examination of placentas showed that the most frequently alterations found in patients with PE were increase villous with syncytial knots, infarction, increased fibrin deposits and distal villi hypoplasia. Placenta of pregnant women with early-onset PE showed higher percentage of villous with syncytial knots for gestation age compared with late-onset PE and normotensive pregnant women. Infarct and distal villi hypoplasia were more frequent in placenta of pregnant women with PE, whereas fibrin deposits were significantly increased in women with early-onset PE than in late-onset PE. Moreover, the percentage of newborns with intrauterine growth restriction was higher (37.8%) in patients with early-onset PE than in late-onset PE (14.3%). Together the results show that pregnant women with early-onset PE showed placentas with higher percentage of lesions and newborns with ... / Mestre

Em bovinos, a mortalidade embrionária associada a falhas no processo de reconhecimento materno da prenhez atinge 30 a 40%. O sucesso da prenhez, depende de uma apropriada interação bioquímica entre o endométrio materno e o concepto. O objetivo dessa tese foi desenvolver uma técnica cirúrgica para monitorar o microambiente uterino de vacas cíclicas e prenhez nos dias 14 a 20 após o estro. Como objetivos específicos foram verificados se a implantação e a presença dos cateteres uterinos afetariam (1) a manutenção da prenhez, (2) a função luteal e (3) o desenvolvimento folicular. Em vacas holandesas, cíclicas e não lactantes, foram implantadas cateteres de silicone em cada corno uterino no segundo dia após o estro (fase preparatória). No dia 15 pós-estro os animais receberam uma injeção de D-clorprostenol e a ovulação foi confirmada por ultrasonografia transretal (US; dia experimental 1). No dia experimental 7, as vacas (n=6) receberam ou não (n=3) transferência de embriões via transcervical no corno uterino ipisilateral ao ovário contendo o corpo lúteo (CL). Nos dias experimentais 14, 16, 18 e 20, estruturas ovarianas foram avaliadas por US, e cada corno uterino foi lavado através dos cateteres implantados no lúmen uterino (três sessões de 6 ml cada). Amostras de sangue foram coletadas nos dias 1 a 20 da fase experimental e concentração de progesterona (P4) foi mensurada por radioimunoensaio. As vacas foram abatidas no dia experimental 20 e a prenhez diagnosticada por visualização macroscópica do concepto após a dissecação do útero. A taxa de presença do concepto no dia 20 experimental foi 0%. No dia experimental 7, um CL e um folículo grande (9 a 17 mm) estavam presentes nos ovários das vacas. A taxa de aumento da concentração de P4 entre os dias 1 a 5 foi de 0 ng/mL/dia em 7/9 vacas. Luteólise ocorreu antes do dia 15 em 3/9 vacas, entre os dias 16 e 20 foi 3/9, e após o dia 20 em 2/9 vacas. Não houve aumento de P4 na fase luteal em uma vaca. Foi verificado ovulação antes do dia 20 em 3/9 vacas. A taxa de aumento do último folículo dominante foi de 1,3mm/dia em 2/9 vacas e menor nos animais restantes. Cistos foliculares, CL sub-luteinizado e endometrite foram diagnosticados em 2/9, 2/9 e 1/9 vacas, respectivamente. Foi possível concluir que as alterações nas funções ovarianas e uterinas foram causadas pela presença e implantação dos cateteres e essas alterações foram incompatíveis com a manutenção da prenhez. A abordagem cirúrgica testada não foi adequada para estudar o microambiente uterino de vacas prenhez / In cattle, embryonic mortality associated with failure in the process of maternal recognition of pregnancy reaches 30 to 40%. Successful pregnancies depend on appropriate biochemical interactions between the maternal endometrium and conceptus. Overall objective was to develop a surgical technique to probe the uterine microenvironment of cyclic and pregnant cows days 14 to 20 post- estrus. Specific objectives were to verify whether presence and operation of uterine catheters would affect (1) maintenance of pregnancy, (2) luteal function and (3) follicular growth. Non-lactating, cyclic, Holstein cows were fitted with a silicone catheter in each uterine horn on day 2 after estrus. On day 15 they received an injection of D-cloprostenol and ovulations were confirmed by transrectal ultrasonography (US; experimental day 1). On experimental day 7, cows received (n=6) or not (n=3) embryos by trans-cervical transfer to the uterine horn ipsilateral to ovary containing the corpus luteum (CL). On experimental days 14, 16, 18 and 20, ovarian strutures were observed by US and each uterine horn was washed through the catheter (three sessions of 6 ml each). Blood samples were collected from experimental days 1 to 20 and progesterone (P4) concentrations were measured by radioimmnoassay. Cows were slaughtered on experimental day 20 and pregnancies were diagnosed by macroscopic visualization of a conceptus after dissection of uterus. Conception rate at day 20 was 0%. On experimental day 7, both a CL and a large follicle (9 to 17mm) were present in ovaries of all cows. Rate of increase of P4 concentrations from days 1 to 5 was 0ng/ml/day in 7/9 cows. Luteolysis occurred before day 15 in 3/9 cows, between days 16 and 20 in 3/9 cows and after day 20 on 2/9 cows. No luteal phase rise in P4 was noticed for one cow. Ovulation before day 20 was verified in 3/9 cows. Rate of growth of the last dominant follicle was 1.3mm/day in 2/9 cows and less in the remaining. Follicular cysts, poorly luteinized CL and endometries were diagnosed in 2/9, 2/9 and 1/9 cows respectively. In summary, alterations in ovarian and uterine functions were caused by presence and operation of uterine catheters and such alterations were incompatible with maintenance of pregnancy. In conclusion, the surgical approach tested was not adequate for studyng the uterine microenvironment of pregnant cows

Objetivo: Avaliar os efeitos dos estrogênios conjugados eqüinos (ECE), isolados ou associados ao acetato de medroxiprogesterona (AMP) sobre os glicosaminoglicanos do colo e do corno do útero de ratas. Métodos: 40 ratas adultas, após 30 dias de ooforectomia foram distribuídas em quatro grupos: GI - controle (veículo); GII - ECE (50 g/Kg, por dia); GIII - AMP (0,2 mg/Kg, por dia) e GIV - ECE (50 g/Kg, por dia) + AMP (0,2 mg/Kg, por dia). As substâncias foram administradas por gavagem por 28 dias consecutivos, sendo que ao final, após anestesia, o colo e o corpo do útero foram retirados e mergulhados em acetona para detecção e quantificação dos glicosaminoglicanos. Os glicosaminoglicanos sulfatados foram submetidos a eletroforese em gel de agarose e o ácido hialurônico a ensaio fluorimétrico (ELISA-like). Os resultados foram analisados pelo teste de t de Student e de ANOVA, complementado pelo teste de Tukey-Kramer (p<=0,05). Resultados: Foi detectada, em todos os grupos, maior concentração de glicosaminoglicanos sulfatados tanto no colo como nos cornos uterinos, em especial do dermatam sulfato. Já a concentração de ácido hialurônico foi maior no corno do que no colo. Com relação ao dermatam sulfato, os estrogênios promoveram incremento, tanto no colo quanto no corpo, sendo que a medroxiprogesterona bloqueou esta ação nos cornos uterinos. Os estrogênios e a medroxiprogesterona, por sua vez, apresentaram ação positiva nos níveis de heparam sulfato no colo do útero, já no corno este efeito foi atribuído à medroxiprogesterona. Conclusões: O perfil e a quantificação dos glicosaminoglicanos nas duas porções do útero de ratas são diferentes. Os glicosaminoglicanos sulfatados, em especial o dermatam sulfato, mostrou-se em maior concentração tanto no colo quanto no corno uterino. Os estrogênios e a medroxiprogesterona têm ação positiva nos glicosaminoglicanos sulfatados do colo, enquanto a medroxiprogesterona apresenta efeito antagônico no corno. O ácido hialurônico apareceu em maior concentração no corno do que no colo uterino. / Objective: To evaluate the effects of conjugated equine estrogens (CEE) alone or associated to medroxyprogesterone acetate (MPg) on glycosaminoglycans (GAGs) in the cervix and horns of the rat uterus. Methods: Thirty days after ovariectomy, 40 adult rats were randomly divided into four groups: GI, control (treated with drug vehicle); GII, CEE (50 ?g/Kg per day); GIII, MPg (0.2 mg/Kg per day), and GIV, CEE + MPg (doses as in GII and GIII). Drugs and vehicle were given by gavage during 28 days. After this the animals were euthanized, the uterine cervix and body were removed, fixed in acetone and further processed for GAGs quantification. Agarose gel electrophoresis was used for sulphated GAGs analyses; the hyaluronic acid was assayed with an ELISA-like method. Statistical analysis was done by the Student\'s t test and the Tukey-Kramer test. Significant differences were set at p<=0.05. Results: In all groups sulphated GAGs concentration (especially dermatan sulphate) was higher than that of nonsulphated GAGs, both in the cervix and in the uterine horns. Hyaluronic acid concentration in uterine horns was higher than in the cervix. With regard to dermatan sulphate, CEE exerted trophic effects both in horns and cervices, whereas MPg blocked this action in the uterine horn. The cervical concentration of heparan sulphate was rised by CEE and by MPg; in the uterine horns the same rise was observed, and this effect was attributed to MPg. Conclusions: The qualitative and quantitative profiles of GAGs in the horns and cervix of rat uterus are distinct. Sulphated GAGs (especially dermatan sulphate) are more concentrated than the non-sulphated ones in both uterine regions. With regard to sulphated GAGs, estrogens and medroxyprogesterone have trophic actions on sulphated GAGs at the cervix, whereas at the uterine horn MPg shows an antagonistic action. The concentration of hyaluronic acid in the uterine horns was higher than in the cervix.

Foram utilizados 15 úteros de macacos Rhesus (Macaca mulatta), sendo 5 fêmeas nulíparas, 5 primíparas e 5 pluríparas. Todas as fêmeas eram maduras sexualmente, tinham de 38 a 87 meses de idade e pesavam entre 4,9 a 7,39 Kg. Em todos os animais foram feitos o estudo topográfico, biometria dos órgãos, microscopia de luz e quantificação de colágeno no miométrio. O útero se situa na pelve, sobre a vagina, entre a bexiga urinária e o intestino reto. O útero é do tipo simples, caracterizado por um fundo globóide, localizado sobre a junção com as tubas uterinas, oco, alongado e com contorno piriforme. Pode ser dividido macroscopicamente em quatro regiões: corpo, fundo, istmo e cérvix uterina. Não foram observadas diferenças macroscópicas e de topografia entre as fêmeas nulíparas, primíparas e pluríparas. O comprimento total do útero nas fêmeas nulíparas tiveram média de 4,12 ± 0,2 cm, nas primíparas 4,32 ± 0,26 cm e nas pluríparas 5,14 ± 0,71 cm. Comparando as mensurações entre as três categorias, observou-se que as fêmeas pluríparas possuem as maiores medidas. O endométro é formado por um epitélio prismático simples e uma lâmina própria que contém as glândulas endometriais, que também possui epitélio prismático simples. Em todos os animais estudados, as glândulas endometriais eram tubulares simples e retas. Em relação à distribuição do colágeno no miométrio, o método de Picrossirius Red, permitiu observar uma ampla distribuição do colágeno por todo o compartimento. A cérvix é constituída por um epitélio prismático simples, possui poucas fibras musculares lisas e consiste principalmente em tecido conjuntivo denso. A porcentagem de colágeno encontrado no miométrio das fêmeas nulíparas teve uma média de 26,32 ± 0,82, nas primíparas 29,07 ± 1,01 e nas pluríparas 38,93 ± 1,07, pelo método de coloração de Picrosirius Red. / Fifteen uterus of rhesus macaques (Macaca mulatta) were used, collected from 5 nulliparous, 5 primaparous and 5 pluriparous individuals. All females were sexually mature, they were 38-87 months of age and weighed between 4,9 to 7,39 Kg. All animals were submitted to study topography, biometry of the organs, light microscopy and quantification of collagen in the myometrium. The uterus is located in the pelvis on the vagina between the bladder and rectum. The uterus has a simple type, characterized by a globular background, located on the junction of the fallopian tubes, hollow, elongated and pear-shaped contour. Grossly it can be divided into four parts: body, bottom, isthmus and cervix. No differences were observed macroscopic and topography between nulliparous, rimiparous and pluriparous. The total length of the uterus in nulliparous females had a mean of 4,12 ± 0,2 cm in primiparous 4,32 ± 0,26 cm and 5,14 ± 0,71 cm in pluriparous. Comparing the measurements among the three categories, it was observed that the sows have greater measures. The endometrial epithelium is formed by a simple prismatic and a lamina propria containing the endometrial glands, wich also has a simple prismatic epithelium. In all studied animals the endometrial glands were simple and straight tubular. Regarding the distribution of collagen around the bay. The cervix is composed of a simple prismatic epithelium, has a few smooth muscle fibers and consists mainly of dense connective tissue. The percentage of collagen found in the myometrium of the nulliparous females had an average of 26, 32 ± 0, 82, 29, 07 ± 1, 01 in primiparous and pluriparous 38,93 ± 1,07, through the staining method of Picrosirius Red.

Em bovinos de corte, maiores diâmetros do folículo pré-ovulatório (FPO) e as subsequentes altas concentrações de progesterona [P4] aumentam o crescimento do concepto e a taxa de prenhez. Formulou-se a hipótese que a modulação do tamanho do FPO e [P4] no diestro subsequente à ovulação do FPO estimulam a expressão endometrial de transcritos e proteínas da famílias das Solute Carrier Proteins (SLC) que estão relacionadas ao transporte de glicose. Vacas Nelore (n=60), solteiras e ciclando receberam duas injeções de PGF2&alpha; (PGF; 0,5mg; i.m.) com intervalo de 14 dias. Dez dias após (dia -10; D-10), receberam um dispositivo intravaginal liberador de P4 e benzoato de estradiol (2mg; i.m.). Para modular o crescimento do FPO e alterar a produção de P4 pós-ovulação, no D-10 os animais receberam PGF (grupo alta P4; AP) ou não (grupo baixa P4; BP). Dispositivos foram removidos e PGF injetada 60 a 42 horas antes da indução da ovulação para o grupo AP e 48 a 30 horas antes da indução para o grupo BP e ovulações foram induzidas com GnRH (buserelina; 10&micro;g; i.m.) no D0. Crescimento e ovulação do FPO e formação do CL foram avaliados por ultrassom e [P4] medidas por radioimunoensaio. No D7 os animais que ovularam foram abatidos (AP, N=18 e BP, N=18), o endométrio foi dissecado e submetido à extração de RNA total para análises de qPCR, extração de proteínas totais para análises de western blotting e incluído em parafina para análises de imunohistoquímica. Diferença entre as médias dos grupos foi determinada pelo teste t de student. O diâmetro máximo do FPO (média ± erro padrão da média; 12,8±0,4 vs. 11,1±0,4mm) foi maior no grupo AP (P<0,01). A [P4] no D7 foi maior no grupo AP (4,5±1,0 ng/mL vs. 3,3±1,1 ng/mL; P<0,05). As concentrações relativas dos transcritos que codificam SLCs foram determinadas por qPCR, usando a ciclofilina como controle endógeno. Não houve diferença na expressão de SLC2A1 (0,91±0,04 vs. 1,02±0,07), SLC2A3 (1,14±0,16 vs. 1,05±0,1), SLC2A4 (1,20±0,14 vs. 1,01±0,05), SLC2A5 (0,95±0,12 vs. 1,04±0,12), SLC5A1 (1,35±0,25 vs. 1,49±0,44), ATP1A2 (1,29±0,17 vs. 1,03±0,1), ATP1B2 (1,20±0,11 vs. 1,06±0,1), SLC37A4 (1,16±0,16 vs. 1,1±0,12), entre os grupos AP e BP respectivamente (P>0.05). Também não foi possível identificar diferença na quantidade proteica de SLC2A1 no endométrio dos animais do grupo AP em relação ao grupo BP. SLC2A1 foi identificada na membrana basal no epitélio luminal (EL), epitélio glandular (EG) e no estroma uterino dos animais. SLC2A4 foi identificada na membrana basal e membrana apical no EL, EG e no estroma uterino dos animais. Em conclusão, a modulação do tamanho do FPO e [P4] no diestro não afetaram a expressão gênica ou proteica dos transportadores de glicose. É possível que ao invés da expressão gênica ou proteica, a atividade transportadora das SLCs, ou ainda, a expressão e função de genes relacionados ao metabolismo de carboidratos, sejam regulados pelo ambiente endócrino peri-ovulatório em vacas. / In beef cattle, changes in the peri-ovulatory endocrine milieu are associated with conceptus growth and fertility. A large size of the pre-ovulatory follicle (POF) and resulting elevated progesterone (P4) concentrations during diestrus affect pregnancy rates positively. Our hypothesis is that modulation of POF size and diestrus P4 concentrations regulate nutrient availability in the uterus. Specifically, optimal glucose concentrations in the histotroph are required for adequate embryo growth during early gestation. The objective was to determine if POF size and resulting P4 concentrations during the first week of diestrus influence gene expression of Solute Carrier Protein (SLC) families that are related to glucose transport. Cyclic, non-lactating Nelore cows received two injections of cloprostenol (PGF; 0.5mg; i.m.) 14 days apart. Ten days later (day -10; D-10), cows received a P4-releasing device along with estradiol benzoate (2mg; i.m.). To modulate the growth of the POF and alter post-ovulatory P4 production, on D-10 animals received PGF (high post-ovulatory P4 group; HP) or not (low post-ovulatory P4 group; LP). The P4-releasing devices were removed and PGF injected 60 to 42 hours before the ovulation induction in the HP group and 48 to 30 hours before the ovulation induction in the LP group. Ovulation was induced with buserelin (GnRH; 10&micro;g; i.m.) on D0. Diameter of POF and ovulation were assessed by ultrasonography starting onD- 2. From D1 to D7, plasma was obtained for measurement of P4 concentration. On D7, cows that ovulated were slaughtered (HP, n=18 and LP, n=18) and endometrium was dissected and subjected total RNA extraction for qPCR analyzes, total protein extraction for western blotting analyzes and included in paraffin for imunohistochemical analyzes. Differences between group means were determined by student\'s t test. Maximum diameter of the POF (mean ± SEM; 12.8±0.4 vs. 11.1±0.4mm) was greater in HP vs. LP (P<0.01). Progesterone concentration on D7 was larger on the HP group (4.5±1.0 ng/mL and 3.3±1.1 ng/mL; P<0.05). Relative concentrations of transcripts coding for facilitative sugar transporters (SLC2A1, SLC2A3, SLC2A4 and SLC2A5), a sodium-dependent glucose co-transporter (SLC5A1) and other transporters related to glucose uptake (ATP1A2, ATP1B2, SLC37A4) were determined by qPCR, using cyclophilin as the endogenous control gene. There were no significant differences in expression of SLC2A1 (mean ± SEM;0.91±0.04 vs. 1.02±0.07), SLC2A3 (1.14±0.16 vs. 1.05±0.1), SLC2A4 (1.20±0.14 vs. 1.01±0.05), SLC2A5 (0.95±0.12 vs. 1.04±0.12), SLC5A1 (1.35±0.25 vs. 1.49±0.44), ATP1A2 (1.29±0.17 vs. 1.03±0.1), ATP1B2 (1.20±0.11 VS. 1.06±0.1) ,SLC37A4 (1.16±0.16 vs. 1.1±0.12), between HP and LP, respectively (P>0.05). There was no difference in the abundance of SLC2A1 protein between groups. The SLC2A1 protein was localized in the luminal epithelium (LE), glandular epithelium (GE) and uterine stroma (US) of animals. The SLC2A4 protein was localized on the basal and apical membrane of the LE, GE and US of animals. In conclusion, modulation of POF size and diestrus P4 concentrations did not affect the expression of glucose transporter genes or proteins. It is possible that activity of SLC proteins rather than gene expression, or alternatively, expression and function of genes related to carbohydrate metabolism, are regulated by the peri-ovulatory endocrine milieu in cows.