Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 423442.pdf: 1209531 bytes, checksum: 4d513a858906ef3ce6edee1972e580be (MD5) Previous issue date: 2010-03-31 / Introdu??o: A s?ndrome metab?lica (SM) ? caracterizada por um conjunto de anormalidades metab?licas e hemodin?micas, estando associada com risco aumentado de diabetes mellitus tipo 2 (DM2) e eventos cardiovasculares. Citocinas inflamat?rias, como a interleucina 6 (IL6) e fator de necrose tumoral-alfa (TNF-α) que contribuem para a resist?ncia a insulina, afetam a fun??o vascular, causando doen?a ateroscler?tica. Al?m disso, v?rios estudos t?m associado ? presen?a de agentes infecciosos como a Chlamydia pneumoniae com a inicia??o e ou progress?o da aterosclerose. Objetivo: Avaliar os n?veis s?ricos de citocinas pr?-inflamat?rias (TNF-alfa e IL-6) e de anticorpos anti-Chlamydia pneumoniae em pacientes com SM com e sem eventos cardiovasculares. Material e m?todos: Estudo transversal constitu?do por 147 indiv?duos do ambulat?rio de risco cardiometab?lico do Servi?o de Cardiologia do Hospital S?o Lucas da PUCRS, dos quais 100 (68%) com SM sem eventos cardiovasculares e 47(32%) com SM e eventos, sendo 13 (6,11%) com IAM e 10 (4,7%) AVC. O diagn?stico da SM foi determinado pelos crit?rios do NCEP-ATPIII. Interleucina-6, TNF-α e anticorpos anti-Chlamydia pneumoniae IgG e IgA foram determinados por ensaio imunoenzim?tico (Elisa), Prote?na C reativa ultra sens?vel (PCR-us) foi mensurada por nefelometria; colesterol HDL e triglicer?deos pelo m?todo enzim?tico colorim?trico. Resultados: Do total de participantes, 108 (72,8%) eram do sexo feminino e 39 (26,5%) eram do sexo masculino. A idade m?dia dos sujeitos com eventos foi de 61,26 ? 8,5 e de 59,32 ? 9,9 para os indiv?duos sem eventos. (p=0,279).O grupo com SM e sem evento apresentou maior peso, altura, IMC e circunfer?ncia abdominal comparado ao grupo com SM com evento. Hipertens?o, dislipidemia, Intoler?ncia a glicose e tabagismo predominaram no grupo com eventos card?acos, sem diferen?as estat?sticas. IL-6, TNF-α e doen?a vascular perif?rica apresentaram n?veis maiores nos indiv?duos com eventos (p=0,001). Observou-se n?veis mais elevados de anticorpos IgG para Chlamydia pneumoniae no grupo sem eventos, enquanto que IgA foi maior no grupo com eventos quando comparados os dois grupos. N?veis s?ricos para PCR-us foram semelhantes entre os grupos n?o apresentando diferen?as estat?sticas significativas. Com rela??o ao IAM e o AVC, estes sujeitos apresentaram marcadores inflamat?rios significativamente maiores (p=0,001), quando comparados aos controles. Marcador de fase aguda (PCR-us) n?o apresentou diferen?a significativa, assim como a presen?a de Chlamydia IgG e IgA. Associa??o positiva foi observada com o uso de estatinas, hipoglicemiantes orais, injet?veis e antiinflamat?rios n?oesteroidais no grupo com eventos. Conclus?o: Existe associa??o entre n?veis elevados de IL6 e TNF-α com a s?ndrome metab?lica, em pacientes com eventos cardiovasculares, comparados aos sem eventos. A PCR-us n?o demonstrou ser um marcador de risco para estes eventos. Quando avaliamos os pacientes com SM, com IAM e AVC, verificamos que os n?veis de anticorpos IgG e IgA anti-Chlamydia pneumoniae n?o foram estatisticamente significativos quando comparados ao grupo sem eventos cardiovasculares.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 446130.pdf: 1910036 bytes, checksum: 59d877dc63ef59118f780b6e08cf8f9f (MD5) Previous issue date: 2013-01-28 / Tuberculosis remains the most common cause of death due to an infectious agent. Among targets identified in Mycobaterium tuberculosis genome, enzymes of the shikimate pathway deserve special attention. Shikimate kinase is the fifth enzyme of the shikimate pathway, which has been identified in fungi, apicomplexans, plants and prokaryotes. This metabolic route is composed of seven steps, which converts erythrose-4-phosphate and phosphoenol pyruvate to chorismic acid and is responsible for the biosynthesis of aromatic amino acids. Shikimate kinase has been shown to be essential to the survival of Mycobacterium tuberculosis, and since it is absent in human, this enzyme is considered to be a target for chemotherapeutic for development of antitubercular drugs. The aim here is to identify possible inhibitors, focusing on simulations of molecular docking in the ATP-binding site of the enzyme. The program used in the simulations was the Molegro Virtual Docker and protein-ligand interactions were tested in 12 crystallographic structures and then, it was choosen a protocol which generated docking RMSD values below 2 ?. Application of this docking protocol to a decoy dataset generated a enrichment factor of 24.57, which is considered adequate for molecular docking simulations focused on kinases. The present docking protocol was then applied to a small-molecule database with over 80,000 entries. Analysis of the results identified 5 potencial shikimate kinase inhibitors. Examination of the intermolecular interaction between enzyme and the ligands identified the main structural features responsible for ligand-binding affinity. This is the first molecular docking study focused on the ATP-binding pocket of shikimate kinase. / A Tuberculose continua sendo a causa mais comum de morte em decorr?ncia de um agente infeccioso. Entre os alvos identificados no genoma do Mycobaterium tuberculosis, enzimas da via do chiquimato merecem aten??o especial. A chiquimato quinase ? a quinta enzima da via do chiquimato, e tem sido identificada em fungos, organismos do filo apicomplexa, plantas e procariontes. Esta via metab?lica ? composta por sete passos, que catalisam sequencialmente a convers?o de eritrose-4-fosfato e fosfoenolpiruvato em corismato; e ? respons?vel pela bioss?ntese de amino?cidos arom?ticos. Chiquimato quinase parece ser essencial para a sobreviv?ncia do Mycobacterium tuberculosis, uma vez que ? ausente no homem, esta enzima ? considerada como um alvo para o desenvolvimento de quimioter?picos e medicamentos contra a tuberculose. O objetivo ? identificar poss?veis inibidores, focando as simula??es de docking molecular no s?tio de liga??o do ATP da enzima. O programa usado nas simula??es foi o Molegro Virtual Docker e a intera??o prote?na-ligante foi testada em 12 estruturas cristalogr?ficas e logo ap?s, escolhido um protocolo de docking a partir de valores de RMSD abaixo de 2?. O m?todo foi validado usando o melhor protocolo de re-docking no Virtual Screening atrav?s do Fator de Enriquecimento que obteve resultado de 24,57%, que ? considerado adequado para as simula??es de docking molecular focados em quinases. O presente protocolo de docking foi aplicado em um banco de dados com mais de 80.000 mol?culas. A an?lise dos resultados identificaram 5 potenciais inibidores da chiquimato quinase. Na an?lise das intera??es intermoleculares entre a enzima e os ligantes foram identificadas caracter?sticas estruturais respons?veis pela afinidade da liga??o pelo ligante. Este ? o primeiro estudo de docking molecular focado no bols?o de liga??o do ATP da chiquimato quinase.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 447910.pdf: 2718272 bytes, checksum: 970052e8ca9abce5d0dd93f2976d56d7 (MD5) Previous issue date: 2013-03-15 / The emergence and spread of resistance mechanisms in Gram-negative bacilli have complicate the treatment of serious nosocomial infections. Due to the ineffectiveness of the automated detection of KPC producer isolates there is a need to develop better methodologies. One possibility is to evaluate the ertapenem resistance, which has greater sensitivity to detect the expression of KPC producing isolates. However, the specificity may be reduced due to the resistance attributed to other mechanisms, such as AmpC gene expression or ESBL production associated with the loss of porin. This study included 128 samples of Gram-negative bacilli of Klebsiella pneumoniae and Enterobacter spp. resistant to ertapenem. Disk diffusion and E-test? method were applied to determine the susceptibility to imipenem, meropenem and ertapenem. Isolates intermediate and resistant to ertapenem were evaluated and additional resistance mechanisms conferred by blaTEM, blaSHV, blaCTX-M, blaCTX-M-2 and blaKPC for Klebsiella pneumoniae and Enterobacter cloacae genes were investigated by PCR technique. The presence of outer membrane protein (OMP) was investigated by dot blot. The gene blaTEM was detected in 52.9% and 10.3%; blaSHV in 29.4% and 0.94%; blaCTX-M in 41.4% and 1.9%, and blaCTX-M-2 in 23.5% and 1.9% of K. pneumoniae and Enterobacter cloacae isolates, respectively. blaKPC gene was present in 12.6% of Enterobacter spp. isolates. The OmpC and OmpF were present in 3.8% of Enterobacter cloacae isolates. Resistance genes and outer membrane proteins carbapenemases producing strains indicates that several resistance mechanisms contribute to therapeutic failure and point to the need for better detection methods and surveillance strategies. / A emerg?ncia e dissemina??o dos mecanismos de resist?ncia em bacilos Gram-negativos t?m complicado o tratamento de s?rias infec??es nosocomiais. Devido ? inefic?cia dos sistemas automatizados na detec??o de isolados produtores de KPC (Klebsiella pneumoniae produtora de carbapenemase) h? a necessidade do desenvolvimento de melhores metodologias. Uma possibilidade ? avaliar os isolados quanto ? resist?ncia ao ertapenem, o qual tem maior sensibilidade para detectar a express?o dos isolados produtores de KPC. Contudo, a especificidade pode ser reduzida devido ? resist?ncia conferida por outros mecanismos, tais como a express?o do gene AmpC ou a produ??o de ESBL associado a perda de porina. Este estudo incluiu 128 amostras de bacilos Gram-negativos de Klebsiella pneumoniae e Enterobacter spp. resistentes ao ertapenem. O m?todo de disco difus?o e E-test? foram aplicados para determinar a suscetibilidade para imipenem, meropenem e ertapenem. Os isolados com suscetibilidade intermedi?ria e resistentes para ertapenem foram avaliados e posteriormente foram investigados os mecanismos de resist?ncia atrav?s da presen?a dos genes blaTEM, blaSHV, blaCTX-M, blaCTX-M-2 e blaKPC para Klebsiella pneumoniae e Enterobacter spp., por meio da t?cnica de PCR. A presen?a de prote?na da membrana externa (OMP) foi investigada por meio de dot blot. O gene blaTEM foi detectado em 52,9% e 10,3%; blaSHV em 29,4% e 0,94%; blaCTX-M em 41,4% e 1,9% e blaCTX-M-2 em 23,5% e 1,9% dos isolados de K. pneumoniae e Enterobacter spp., respectivamente. O gene blaKPC estava presente em 12,6% dos isolados de Enterobacter spp. As porinas OmpC e OmpF estavam presentes, concomitantemente, em 3,8% dos isolados de Enterobacter cloacae. A detec??o da presen?a dos genes de resist?ncia e as prote?nas da membrana externa nos isolados produtores de carbapenemases indica que eles podem estar associados aos diversos mecanismos de resist?ncia, contribuindo para a falha terap?utica e apontando para a necessidade de melhores m?todos de detec??o e estrat?gias de vigil?ncia.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-05-19T12:54:32Z No. of bitstreams: 1 DIS_ROBERTA_MONTEIRO_KATZAP_COMPLETO.pdf: 1440611 bytes, checksum: 60581bcd966d13bb2ed8592af3528373 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-19T12:54:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_ROBERTA_MONTEIRO_KATZAP_COMPLETO.pdf: 1440611 bytes, checksum: 60581bcd966d13bb2ed8592af3528373 (MD5) Previous issue date: 2016-03-02 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / Chronic kidney disease patients on peritoneal dialysis therapy are susceptible to infections, with peritonitis being the primary cause of technique failure. Peritoneal fluid culture is one of the essential elements for proper diagnosis and treatment of peritonitis. The aim of this study was to compare the time required to obtain a positive culture using different laboratory methods. An in vitro cross-sectional study comparing different laboratory techniques for preparation and culture of bacteria in peritoneal fluid. The research was conducted with 21 sterile dialysis fluid bags with 1.5% glucose concentration, and 21 peritoneal dialysis bags containing peritoneal fluid drained from patients without peritonitis, assisted at the Nephrology Unit from HSL-PUCRS. Fluids from the 42 peritoneal dialysis bags were contaminated by injecting a coagulase-negative Staphylococcus suspension and then prepared for culture using four distinct techniques - A (direct culture), B (post-centrifugation culture), C (direct culture after 4h sedimentation), and D (culture after 4h sedimentation and centrifugation) ? followed by seeding. In the 21 contaminated sterile bags, the mean times to obtain a positive culture with techniques D (19.6 h ?2.6) and C (19.1 h ?2.3) were longer in comparison to A (15.8 h ?3.0; p<0.01), but not statistically different from group B mean (19.0 h ?3.2). The same occurred in the 21 bags drained from patients, with mean times for techniques D (14.0 h ?1.9) and C (14.5 h ?1.7) being longer than technique A (12.22 h ?1.94; p<0.05), however not statistically different from technique B (13.2 h ?1.3). The sedimentation and centrifugation steps were unnecessary and may delay antibiotics sensitivity test result by approximately 8 hours. / Pacientes com doen?a renal cr?nica que realizam terapia de di?lise peritoneal est?o suscet?veis a infec??es, sendo peritonite a principal causa de fal?ncia do m?todo. A cultura do l?quido peritoneal ? um dos elementos essenciais para o manejo cl?nico e tratamento adequados da peritonite. O objetivo deste estudo foi comparar o tempo necess?rio para obter uma cultura positiva, com diferentes m?todos laboratoriais. Estudo transversal, in vitro, comparando diferentes t?cnicas laboratoriais de preparo e cultura para bact?rias em l?quido peritoneal. O estudo foi feito com 21 bolsas de l?quido de di?lise peritoneal est?reis, com concentra??o de 1,5% de glicose, e em 21 bolsas contendo l?quido peritoneal drenado de pacientes sem peritonite, atendidos pelo Servi?o de Nefrologia do HSL-PUCRS. O dialisado das 42 bolsas de di?lise peritoneal foi contaminado, injetando-se suspens?o de Staphylococcus coagulase negativa e, em seguida, submetido a quatro t?cnicas distintas ? A (cultura direta); B (cultura p?s-centrifuga??o); C (cultura ap?s sedimenta??o de 4 h); e D (cultura ap?s sedimenta??o de 4 h e centrifuga??o) ? de preparo e semeadura. Nas 21 bolsas est?reis contaminadas se verificou que as m?dias de tempo para positivar a cultura nas t?cnicas D (19,6 h ?2,6) e C (19,1 h ?2,3) foram maiores, comparadas ? A (15,8 h ?3,0; p<0,01), mas estatisticamente n?o diferentes da m?dia do grupo B (19,0 h ?3,2). O mesmo aconteceu nas 21 bolsas drenadas dos pacientes, com tempos m?dios para as t?cnicas D (14,0 h ?1,9) e C (14,5 h ?1,7) superiores ao tempo da t?cnica A (12,22 h ?1,94; p<0,05), por?m n?o estatisticamente diferente da t?cnica B (13,2 h ?1,3). As etapas de sedimenta??o e centrifuga??o foram desnecess?rias, podendo postergar em quase oito horas o resultado final da cultura, comparativamente ? cultura direta, atrasando o resultado do teste de sensibilidade aos antibi?ticos.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:43:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VanessaMAS_DISSERT.pdf: 1312665 bytes, checksum: c571f23a201e08178fefee625ed7591a (MD5) Previous issue date: 2012-09-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Em infec??es parasit?rias helm?nticas a eosinofilia ? um dos fatores essenciais ? resist?ncia do hospedeiro, entretanto, infec??es com protozo?rios raramente resultam em eosinofilia perif?rica. O objetivo deste estudo foi identificar infec??es por enteroparasitas em crian?as e associ?-las com eosin?filos sangu?neos e fecais. Os exames parasitol?gicos efetuados pelo m?todo de Blagg, a pesquisa de eosin?filos pelo tric?mio e colora??o por Leishman foram realizados em 346 crian?as. Amostras positivas para parasitas representaram 80,1% e negativas 19,9%. A eosinofilia absoluta perif?rica foi encontrada em 55,9% das crian?as, sendo 82,7% representado por crian?as parasitadas e destacando que 54,9% dos infectados por protozo?rios apresentaram eosin?filos acima de 500c?lulas/mm3. Das 62 crian?as com amostras fecais positivas para eosin?filos, 77,4% eram parasitadas por helmintos e/ou protozo?rios. A presen?a dos cristais de Charcot-Leyden nas fezes foi positiva em 39,1% das amostras, se mostrando estatisticamente significante nas crian?as parasitadas com helmintos (p=0,022). As crian?as s?o residentes em ?reas end?micas de parasitoses intestinais e como p?de ser observado a maior parte das crian?as que apresentaram eosinofilia e eosin?filos nas fezes eram parasitadas por helmintos e/ou protozo?rios

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:15:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008- Guilherme Gomes Verocai.pdf: 1894302 bytes, checksum: 5ccd7810baade85b48a7205abe9c4126 (MD5) Previous issue date: 2008-02-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The objective of the present study was to establish trial infections in adult dogs by administering T. canis larvae recovered from tissues of experimentally infected mice and to evaluate patent infection by determining the pre-patent period (PPP) and the number of recovered nematodes in relation to the different infective larvae doses. T. canis females were collected from naturally infected dogs. These were dissected and the eggs were obtained from their uteri followed by posterior incubation at 27?1? C under 75 ?10% RH. After 60 days, mice were orally infected by the embryonated eggs gathered from the culture. The mice were killed 26 days post-infection (dpi) and then submitted to necropsy. Its organs and carcasses were processed by the Acid-Isolation Technique for the recovery of larvae, which were quantified and subdivided in aliquots for the dogs infection. Twelve adult male Beagle dogs from the Kennel of the Laboratory of Experimental Chemotherapy in Veterinary Parasitology, Department of Animal Parasitology, Veterinary Institute, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro were used in our study. They were considered free from parasitism, however with previous history of exposition. The animals were divided in two groups of six animals each. The dogs from Group I were infected with 60 larvae, and the ones from Group II with 300 larvae, which were recovered from the brains and carcasses of the paratenic hosts. To evaluate the PPP we used the coproparasitological techniques of Centrifugal flotation, Sedimentation and Sedimentation centrifugal flotation on days +8, + 12 and, consecutively between days +16 e + 56. For the recovery of nematodes from feces, the dogs were treated on days +57, +58 e +59 with piperazine. The animals from Group I reached the PPP on 48?5.37 dpi, and Group II on 41.5?5.09 dpi, presenting statistically significant difference between the periods (p<0.05). Ten nematodes were collected from Group I, with the mean intensity of 1.66?1.63, resulting in 2.78?2.73% of recovery. The 85 nematodes collected from Group II, presented mean intensity of 14.17?28.12, resulting in 4.72?9.39% of recovery from the total of administered larvae. Non-statistical difference was noted regarding the total recovered nematodes. It is possible to establish patent T. canis infection in adult dogs by administering larvae recovered from tissues of experimentally infected mice. / O objetivo do presente estudo foi promover a infec??o experimental de c?es adultos atrav?s da administra??o de larvas de T. canis obtidas de tecidos de camundongos experimentalmente infectados. E, conseq?entemente, avaliar a infec??o patente, determinando o per?odo pr?patente (PPP) e o n?mero de nemat?ides recuperados em rela??o as diferentes quantidades de larvas infectantes administradas. F?meas de T. canis foram coletadas de animais naturalmente infectados, estas foram dissecadas para obten??o dos ovos e posterior cultura em solu??o de formalina a 2%, em estufa climatizada do tipo B.O.D. ? temperatura de 27?1? C, com umidade relativa de 75 ?10%. Ap?s 60 dias, camundongos foram infectados com os ovos embrionados oriundos da cultura. Os roedores foram eutanasiados 26 dias p?s-infec??o (dpi), submetidos ? necropsia. Seus ?rg?os e carca?as submetidos ? T?cnica de Isolamento ?cido para recupera??o das larvas, as quais foram subdivididas em al?quotas para infec??o dos c?es. Foram utilizados 12 c?es machos adultos da ra?a Beagle, pertencentes ao Canil do Laborat?rio de Quimioterapia Experimental em Parasitologia Veterin?ria do Departamento de Parasitologia Animal, Instituto de Veterin?ria da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. Os animais eram comprovadamente livres de infec??o pelo nemat?ide, por?m com pr?vio hist?rico de parasitismo pelo nemat?ide em quest?o. Os animais foram divididos em dois grupos de seis animais cada. Sendo os animais do Grupo I infectados com 60 larvas e, os pertencentes ao Grupo II com 300 larvas, sendo estas recuperadas apenas dos c?rebros e carca?a dos hospedeiros parat?nicos. Para avalia??o do per?odo pr?-patente foram empregadas em associa??o, as t?cnicas coproparasitol?gicas de Centr?fugo-flutua??o Simples, Sedimenta??o Simples e Sedimento-centr?fugo-flutua??o nos dias +8, + 12 e, consecutivamente entre os dias +16 e + 56. Para recupera??o dos nemat?ides os animais foram vermifugados nos dias +57, +58 e +59 com um produto a base de piperazina. Os animais do Grupo I atingiram o PPP, em m?dia, aos 48 ?5,37dpi, j? os do Grupo II aos 41,5?5,09 dpi, havendo diferen?a estat?stica entre os per?odos (p<0,05). Foram recuperados ao todo dez nemat?ides dos animais do Grupo I, com uma intensidade m?dia de 1,66?1,63, resultando num total de recupera??o de 2,78?2,73%. Enquanto, no Grupo II, foi recuperado um total de 85 helmintos, com uma intensidade m?dia de 14,17?28,12 parasitos por animal, perfazendo 4,72?9,39% do total de larvas administradas. N?o havendo diferen?a significativa entre os grupos em rela??o ao total de recupera??o de nemat?ides. ? poss?vel estabelecer infec??o patente em c?es adultos a partir da administra??o das diferentes cargas de larvas recuperadas de tecidos de camundongos experimentalmente infectados.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 459170.pdf: 2176701 bytes, checksum: a35f9eb08768c0d90b70f0dca32cbe46 (MD5) Previous issue date: 2014-03-31 / The mycobacterial DNA-binding protein 2 (MDP2) of Mycobacterium tuberculosis is a small, basic protein known to bind to DNA in a non-specific manner and to anchor the nucleoid to the plasma membrane, promoting its unpacking. Motivated by a prior intrinsic disorder pre-diction in silico, we have used a complementary set of techniques to characterize this pro-tein, such as heat and chemical stability, gel filtration, limited proteolysis and electrophoret-ic mobility. Our results suggest that the MDP2 is structurally disordered, since it (1) was pre-dicted to be an IDP, having 86 % of its structure disordered; (2) resisted to denaturation in-duced by boiling temperature and to the chemical thrichloroacetic acid (TCA); (3) migrated anomalously on SDS-PAGE, appearing to be 1.4-fold higher its calculated molecular weight; and (4) was highly sensitive to proteolysis performed by proteinase K in comparison to glob-ular proteins. We also accomplished two experiments to determine the quaternary structure of the MDP2, such as gel-filtration and glutaraldehyde crosslinking. These two experiments showed that the protein has a tendency of self-aggregation, forming large clusters of pro-tein. We also performed the site-directed mutagenesis by allelic exchange in the hns gene, in order to develop a M. tuberculosis strain lacking the protein MDP2. The result of this knock-out showed that the hns gene is not essential for the survival of the mycobacteria, confirm-ing previous results performed by transposon mutagenesis. Combined with previous results related to MDP2 from other works, we speculate that this protein uses its highly disorder N-terminal region to bind to DNA through its KAAK and PAKK sequences in a non-specific man-ner. Thereby the MDP2 may act as a promiscuous protein inside the cell, binding to different regions of nucleoid by forming large clusters of proteins, in order to perform the DNA un-packing and to regulate several genes of the mycobacteria. We hope this work may contrib-ute to a better understanding of the mycobacterial metabolism, since the M. tuberculosis still stands a major global threat. / A prote?na micobacteriana ligadora de DNA 2 (MDP2) de Mycobacterium tuberculosis ? uma prote?na pequena e de car?ter b?sico, conhecida por se ligar ao DNA de uma forma n?o es-pec?fica e de ancorar o nucle?ide ? membrana plasm?tica promovendo o seu desempacota-mento. Motivados por uma predi??o de desordem intr?nseca in silico pr?via, n?s usamos um conjunto de t?cnicas complementares para caracterizar esta prote?na, tais como determina-??o da estabilidade ao calor e a desnaturantes qu?micos, gel filtra??o, prote?lise limitada e mobilidade eletrofor?tica. Nossos resultados sugerem que a MDP2 ? estruturalmente de-sordenada, uma vez que ela (1) foi predita por ser uma prote?na intrinsecamente desorde-nada (IDP), possuindo 86 % da sua estrutura desordenada; resistiu ? desnatura??o induzida por temperatura de fervura e pela a??o qu?mica do ?cido tricloroac?tico (TCA); (3) migrou anomalamente em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), aparentando ser 1,4 vezes maior que o seu peso molecular calculado; e (4) foi altamente sens?vel ? prote?lise realizada pela protei-nase K, em compara??o ?s prote?nas globulares. N?s tamb?m realizamos dois experimentos para determinar a estrutura quatern?ria da prote?na, como a gel filtra??o e o crosslinking por glutaralde?do. Estes dois experimentos mostraram que a prote?na tem uma tend?ncia a auto agrega??o, formando grandes aglomerados em solu??o. Tamb?m foi realizada a muta-g?nese s?tio-dirigida por troca al?lica no gene hns, com o intuito de desenvolver uma cepa de M. tuberculosis sem a prote?na MDP2. O resultado deste nocaute mostrou que o gene hns n?o ? essencial para a sobreviv?ncia da micobact?ria. Combinado com resultados pr?vios de outros trabalhos relacionados ? MDP2, n?s especulamos que esta prote?na usa sua regi?o N-terminal altamente desordenada para se ligar ao DNA por meio das suas sequ?ncias repetiti-vas KAAK e PAKK de uma forma n?o espec?fica. Desta forma, a MDP2 deve atuar como uma prote?na prom?scua dentro da c?lula, ligando-se a diferentes regi?es do nucle?ide pela for-ma??o de grandes aglomerados de prote?na, com o objetivo de realizar o desempacotamen-to do DNA e de regular diversos genes micobacterianos. N?s esperamos que este trabalho possa contribuir para um melhor entendimento do metabolismo micobacteriano, uma vez que o M. tuberculosis ainda ? uma grande amea?a global.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 392212.pdf: 1435232 bytes, checksum: c5e320809f8271743be3719e2d01aeda (MD5) Previous issue date: 2007-06-12 / Introdu??o e Objetivos: As infec??es por HTLV-I/II se caracterizam pelo tropismo viral por infectar c?lulas T humanas e promover um estado de prolifera??o espont?nea deste tipo celular. Leucemia e doen?as inflamat?rias graves, com destaque para as doen?as neurol?gicas, est?o fortemente associadas ?s infec??es por HTLV-I/II e o tratamento usual destas patologias envolve a administra??o de antiinflamat?rios da classe dos glicocortic?ides. Embora haja relatos de resist?ncia farmacol?gica ? terapia com glicocortic?ides, n?o se sabe ao certo se essa condi??o se deve ? infec??o viral ou ao hospedeiro. Neste estudo, avaliou-se a rela??o entre prolifera??o celular espont?nea e sensibilidade de linf?citos T aos efeitos dos glicocortic?ides (dexametasona - DEX). Materiais e M?todos: C?lulas mononucleares de sangue perif?rico foram isoladas de pacientes assintom?ticos e livres de tratamento, com infec??o por HTLV-I (n=18) e HTLV-II (n=10), e foram cultivadas na presen?a e na aus?ncia do mit?geno fitohemaglutinina (PHA 1%). C?lulas foram tamb?m cultivadas com PHA 1% e concentra??es variadas de DEX (10-9 a 10-4 M). Para fins comparativos, as mesmas avalia??es foram realizadas em sujeitos saud?veis (Controle, n=11). Resultados e Discuss?o: Os pacientes com HTLV-I/II apresentaram taxas similares de prolifera??o estimulada (PHA 1%) e n?o-estimulada (PHA 0%), bem como sensibilidade compar?vel ? DEX. N?o houve diferen?a na freq??ncia de indiv?duos resistentes versus sens?veis ? DEX entre os grupos HTLV-I e HTLV-II. Entretanto, linf?citos T de pacientes com prolifera??o espont?nea n?o responderam ao est?mulo mitog?nico por PHA e foram mais resistentes ? modula??o por DEX do que as c?lulas de pacientes com prolifera??o normal. Os resultados aqui apresentados sugerem que a baixa resposta cl?nica ? terapia com glicocortic?ides pode estar associada a um estado de prolifera??o celular espont?nea decorrente da infec??o por HTLV.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MagdaFDC.pdf: 1127289 bytes, checksum: e8f867febd165499040c2d067e137209 (MD5) Previous issue date: 2005-02-23 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / No Brasil, a Leishmania chagasi ? a esp?cie que causa a leishmaniose visceral (LV). A Leishmania tem a capacidade de causar um estado de parasitismo intracelular nos macr?fagos. A destrui??o dos parasitas, tanto no in?cio da infec??o, como na fase tardia, depende da ativa??o de macr?fagos por citocinas. Leishmania evade da resposta imunol?gica do hospedeiro e sobrevive sem o macr?fago durante a doen?a. A infec??o por Leishmania chagasi pode induzir hepatites, independente da co-infec??o com v?rus de hepatites (A-E). A infec??o por GBV-C est? sendo associada com prote??o ? progress?o da doen?a, e aumento da sobreviv?ncia em indiv?duos HIV-1 soro positivos. Neste estudo, objetivou-se avaliar se a infec??o subcl?nica por Leishmania Chagasi depende da modula??o de outros pat?genos dentre eles o v?rus da hepatite G. Um total de 322 indiv?duos, residentes em ?reas end?micas para LV e um total de 82 pacientes de banco de sangue participaram deste estudo. Usando a t?cnica de RT-PCR seguida do sequenciamento do fragmento da PCR da regi?o 5 NTR e submetendo-se os dados obtidos a um banco de genes (BLAST) para uma an?lise comparativa de seq??ncias do Genebank obteve-se uma identidade de 98% do clone GBV1 com o isolado 34,5 da hepatite G v?rus, 5 -UTR, parcial seq??ncia (AF489995. 1). Dentre os fen?tipos avaliados, DTH+, DTH-, e LV constatou-se uma maior preval?ncia do fen?tipo DTH+ nos indiv?duos GBV-C positivos se comparados com DTH- e LV( DTH+ 57%, DTH- 10%,LV 33%).Um subgrupo de 4 indiv?duos de fen?tipo LV e positivos para GBV-C no ano de 1996 foi submetido a novas coletas em 2004. An?lises bioqu?micas de enzimas,AST,ALT , YGT,LDH, Fosfatasse Alcalina e bilirrubinas foram realizadas, bem como, dosagens de marcadores de outras hepatites.Constatou-se que as dosagens bioqu?micas n?o sofreram altera??es significativas e que os pacientes positivos no ano de 1996 para GBV-C; no ano de 2004 apresentaram HVAG positivo, com marcadores negativos, para hepatite B e C. Sugerimos uma poss?vel intera??o do v?rus da hepatite G com pacientes do fen?tipo LV e DTH+, com poss?vel ativa??o da resposta imune celular

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CristinaMMS_capa_a_pag35.pdf: 5157389 bytes, checksum: 72dd53cd535a848cb4b5ddc870bdf84e (MD5) Previous issue date: 2009-03-12 / Pesquisas acerca das Infec??es Hospitalares mostram a gravidade do problema na sa?de e a exist?ncia de poucos profissionais das ?reas do Direito e da Sa?de especializados nas implica??es jur?dicas relacionadas com o controle das Infec??es Hospitalares. Assim, este estudo multidisciplinar tem como objetivos: apreender as Representa??es Sociais das Implica??es Jur?dicas das Infec??es Hospitalares e de seu Controle, elaboradas pelos profissionais do direito e da sa?de e analisar o impacto destas representa??es sobre Infec??es Hospitalares e seu controle no ?mbito do Hospital Get?lio Vargas, em Teresina, no Estado do Piau?. Trata-se de um estudo de car?ter explorat?rio, desenvolvido em hospital p?blico com profissionais do Direito e da Sa?de, subsidiado na Teoria das Representa??es Sociais, de Serge Moscovici. Os dados foram coletados atrav?s de entrevista em profundidade e da observa??o. As informa??es apreendidas foram processadas no software Alceste 4.8, possibilitando a an?lise lexical e estat?stica pela Classifica??o Hier?rquica Descendente, que permitiu identificar no discurso classes representativas de palavras de interesse da investiga??o. Os resultados indicaram que os sujeitos do estudo, atrav?s das suas representa??es sociais, defendem os direitos dos usu?rios da sa?de e conhecem a pr?tica das pol?ticas de sa?de, preven??o das Infec??es Hospitalares e de seu Controle. Por?m, demonstraram pouca preocupa??o com as implica??es jur?dicas inerentes ?s sua pr?ticas mesmo estando sujeitos a responder civil e penalmente pelas ocorr?ncias geradas por iatrogenia no exerc?cio da profiss?o