Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-08-22Bitstream added on 2014-06-13T20:34:27Z : No. of bitstreams: 1 coelho_lr_me_botfca.pdf: 1636844 bytes, checksum: 7fc617dcff6a3039cec91cfdc0f7565a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho teve por objetivos buscar alternativas às tradicionais sacolas de papel manteiga, buscando proteção segura aos ataques de insetos-praga e pássaros, maior facilidade no momento da colheita de pêssegos, e verificando também o custo e a praticidade das embalagens. O trabalho foi realizado no Sítio Santa Maria, no município de São Luis do Paraitinga, SP, durante o período de agosto a novembro de 2006, em um pomar comercial de pêssego do cultivar Aurora 2 , de três anos de idade, conduzido em sistema de vaso moderno e espaçamento de 6 x 4 m. O delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados, onde cada planta foi considerada um bloco, utilizando-se 15 tratamentos, 8 repetições (blocos) e 10 frutos por tratamento. Os tratamentos foram os seguintes: T1 - Sacolas de TNT branco de 45 Gramaturas por m2 (45G/m2) fechado, T2 - Sacolas de TNT branco de 45 Gramaturas por m2 (45G/m2) aberto, T3 - Sacolas de TNT branco de 20 Gramaturas por m2 (20G/m2) fechado; T4 - Sacolas de TNT branco de 20 Gramaturas por m2 (20G/m2) aberto; T5 - Sacolas de polipropileno microperfurado transparente (furos de 1mm) fechado; T6 - Sacolas de polipropileno microperfurado transparente (furos de 1mm) aberto; T7 - Sacolas de polipropileno microperfurado 2 transparente (furos de 2mm) fechado; T8 - Sacolas de polipropileno microperfurado transparente (furos de 2mm) aberto; T9 - Sacolas de polietileno microperfurado leitoso (furos de 1mm) fechado; T10 - Sacolas de polietileno microperfurado leitoso (furos de 1mm) aberto; T11 - Sacolas de polietileno microperfurado leitoso (furos de 2mm) fechado; T12 - Sacolas de polietileno microperfurado leitoso (furos de 2mm) aberto; T13 - Sacolas de papel impermeável fechado; T14 - Sacolas de papel impermeável aberto; T15 - Testemunha (sem ensacamento). Os resultados mostraram que o ensacamento não influenciou... / This research aimed to look for alternative bags that could offer protection against fruit-flies and oriental moth attack, offer easy procedure at the harvesting time of peach crops and verify two aspects referred to the bags: the practicability and the cost. The work was conducted at Santa Maria Farm in São Luis do Paraitinga County (São Paulo State), from August to November of 2006, in a tree-year-old peach crop. The cultivar Aurora 2 was conducted in modern vase system with 6m between rows and 4 m between plants. The experimental design followed randomized block, where each plant was considered one block. There were 15 treatments, 8 replications (blocks) and 10 fruits per treatment. The treatments were: T1 - white and closed TNT (tissue non-tissue) bag (45g/m2), T2 - white and opened TNT bag (45g/m2), T3 - white and closed TNT bag (20g/m2), T4 - white and opened TNT bag (20g/m2), T5 - transparent polypropelene microperfurated and closed bag (1mm of diameter), T6 - transparent polypropelene microperfurated and opened bag (1mm of diameter), T7 - transparent polypropelene microperfurated and closed bags (2mm of diameter), T8 - transparent polypropelene microperfurated and opened bag (2mm of diameter), T9 - milky microperfurated polyetilene and closed bag (1mm of diameter), T10 - milky microperfurated polyetilene and opened bag (1mm of diameter), T11 - milky microperfurated polyetilene and closed bag (2mm of diameter), T12 - milky microperfurated polyetilene and opened bags (2mm of diameter), T13 - closed and waterproof paper bag, T14 opened and waterproof paper bag, T15 - check treatment (unbagging fruits). The results showed that bagging did not influenced chemical fruits characteristics, such as, pH, soluble solid contents (SS), titratable acidity (TA), SS/TA ratio, however, produced reasonable bigger and havier fruits. The fruit epiderm color was influenced by baging... (Complete abstract click electronic access below)

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The research objective was to evaluate the damage caused by D. melacanthus in the initial phase of the maize crop. Two field trials were conducted in Rondonópolis, Mato Grosso, and two greenhouse trials occurred in Santa Maria, Rio Grande do Sul. In all experiments artificial infestation of cages was done using laboratory reared stink bugs. In all experiments the experimental design adopted was randomized blocks. In the field trials, the experimental units were 1m x 1m x 1m cages with six corn plants each. One of the trials evaluated the combinations of population levels and coexistence periods of green belly stink bugs adults with the crop and the other one aimed to estimate the economic threshold level of D. melacanthus in corn. In both trials 21 days after emergence (DAE), the number of plants damage by stink bugs (PD) and the plant height were evaluated. The plants height were measured at harvesting, the shoot of dry mass(SDM)was determined , as well as the number of ears per plot (EN), the number of rows per ear (RE), number of kernels per row (KR), the 1,000-grain weight (TGW) and the grain production. In addition a greenhouse trial was done to evaluate the effect of seed treatment with insecticide thiamethoxan on the injuries to maize in the initial phase caused by D. melacanthus. The other trial aimed to compare the damage caused by nymphs and adults D. melacanthus in the initial phase of corn plants. In both experiments the height and dry mass accumulation of roots and shoots were measured. The obtained data was submited to variance analysis, regression tests or mean comparation besides the estimation of the Pearson correlation coefficients for the evaluated characters. The stink bugs damages in the initial phase were reflected at the end of the cycle in most of evaluated characters. The losses were greater when the coexistence period occurred just after the crop emergence, rising with the increase of the coexistence period and the density levels. High correlation was found between height at 21 DAE with SDM, grain production and yield components (EN, RE and KR). The number of ears per plot was the most affected character by the stink bugs attack. The economic threshold level obtained of D. melacanthus in maize was 0.50 stink bugs per m2. The seed treatment with thiamethoxan reduced the damage caused by the stink bugs and provided normal development of plants even when subjected to higher population levels of stink bugs. Four nymphs of D. melacanthus cause injury to corn in initial phase at intensities similar to those caused by an adult. / Este trabalho objetivou estudar os danos causados por D. melacanthus na fase inicial de desenvolvimento da cultura do milho. Foram conduzidos dois experimentos de campo em Rondonópolis, MT, e dois em vasos em Santa Maria, RS. Nos trabalhos foi realizada infestação artificial de gaiolas com percevejos criados em laboratório. Os experimentos foram conduzidos no delineamento experimental de blocos ao acaso. Nos trabalhos de campo, as unidades experimentais consistiram de gaiolas teladas contendo seis plantas de milho. Em um trabalho foram avaliadas combinações de níveis populacionais e períodos de convivência de adultos do percevejo-barriga-verde com a cultura. O outro objetivou determinar o nível de dano econômico de D. melacanthus na cultura do milho. Em ambos foram avaliadas aos 21 dias após a emergência (DAE) o número de plantas com sintomas de ataque de percevejos (PA) e realizada a medição da estatura das plantas. Na colheita foi medida a estatura de plantas e determinada a massa seca de parte aérea (MSPA), o número de espigas por parcela (NE), o número de fileiras por espiga (NF) e número de grãos por fileira (NG), a massa de mil grãos (MMG) e a produção de grãos. Um dos trabalhos em vasos objetivou estudar o efeito do tratamento de sementes com o inseticida Tiametoxam sobre os danos de D. melacanthus em plantas jovens de milho. Outro trabalho estudou comparativamente o potencial de danos de ninfas e adultos desses percevejos. Em ambos os experimentos foi avaliada a estatura e acúmulo massa seca de raízes e parte aérea. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e análise de regressão ou comparação de médias além de serem estimados os coeficientes de correlação de Pearson. Os danos de percevejos na fase inicial foram refletidos no final do ciclo da cultura na maioria dos caracteres avaliados. Os prejuízos foram maiores quando o período de convivência ocorreu logo após a emergência da cultura, aumentando com o acréscimo no período de convivência e na densidade populacional de percevejos. Foi constatada elevada correlação da estatura aos 21 DAE com MSPA, produção de grãos e componentes de rendimento da cultura (NE, NF e NG). O número de espigas por parcela foi o caracter produtivo mais afetado pelo ataque de percevejos. O nível de dano econômico de D. melacanthus na cultura do milho obtido foi de 0,50 percevejos m-2. O tratamento de sementes com Tiametoxam reduziu os danos causados pelos percevejos e proporcionou desenvolvimento normal das plantas mesmo quando submetidas ao maior nível populacional de percevejos testados. Quatro ninfas de D. melacanthus causam injúrias a plantas jovens de milho em intensidade semelhante às causadas por um adulto.

Made available in DSpace on 2016-02-26T14:53:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SoniaOliveiraSilvaSanches.pdf: 463782 bytes, checksum: a3bfcc82e0fdf99765bd05dba8ecc8a6 (MD5) Previous issue date: 2008-03-19 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Fruit flies (Diptera: Tephritoidea) in a mixed orchard at the brazilian Mid-Western: diversity, population dynamics, host relationship and environmental factors. The knowledge about species composition of fruit fly in the Mid-Western Region of Brazil is scarce. The aim of this paper is to evaluate the population dynamics of fruit fly species in a mixed orchard with 21 fruit tree species (22º 13 16 S e 54º 48 20 W) in the campus at Federal University of Grande Dourados (UFGD), Dourados-MS. The survey was carried out during two consecutive years of sampling (May 2005 to June 2007). A total of 14 McPhail traps, baited with the Bio Anastrepha® food attractant, were hung up in the branches of 14 fruit tree species. Some 11,775 fruit flies adults were caught belonging to eight genera: Anastrepha Schiner (1868), Ceratitis MacLeay (1868), Hexachaeta Loew (1873), Tomoplagia Coquillett (1910) and Blepharoneura Loew (1873) (Tephritidae); Dasiops Rondani (1856), Lonchaea Fallén (1820) and Neosilba McAlpine (1962) (Lonchaeidae). The result shows that the hosts with higherinfestations by fruit flies in the orchard, were: starfruit (Averrhoa carambola L.) and guava (Psidium guajava L.), with the infestation indexes (larvae/kg) of 101.60 and 41.12, respectively. A. obliqua was the predominant species, in both, traps and fruits / Na região Centro-Oeste do Brasil são escassos os trabalhos de pesquisa sobre a composição de espécies de moscas-das-frutas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a dinâmica populacional das espécies de moscas-das-frutas em um pomar no Centro-Oeste brasileiro (Universidade Federal da Grande Dourados - UFGD, Dourados-MS). Em quatorze armadilhas McPhail (iscadas com a atrativo alimentar Bio Anastrepha®) foram capturados 11.775 indivíduos em dois anos de coletas (maio de 2005 a junho de 2007). As espécies identificadas pertencem a oito gêneros: Anastrepha Schiner (1868), Ceratitis MacLeay (1868), Hexachaeta Loew (1873), Tomoplagia Coquillett (1910) e Blepharoneura Loew (1873) (Tephritidae) e Dasiops Rondani (1856), Lonchaea Fallén (1820) e Neosilba McAlpine (1962) (Lonchaeidae). Os resultados obtidos indicam que os hospedeiros mais infestados por moscas-das-frutas no pomar da UFGD, foram: carambola (Averrhoa carambola L.) e goiaba (Psidium guajava L.), com índices de infestação (larvas/kg) de 101,60 e 41,12, respectivamente. A. obliqua foi a espécie predominante, tanto nas armadilhas quanto nos frutos

Resumo: O presente trabalho teve por objetivos buscar alternativas às tradicionais sacolas de papel manteiga, buscando proteção segura aos ataques de insetos-praga e pássaros, maior facilidade no momento da colheita de pêssegos, e verificando também o custo e a praticidade das embalagens. O trabalho foi realizado no Sítio Santa Maria, no município de São Luis do Paraitinga, SP, durante o período de agosto a novembro de 2006, em um pomar comercial de pêssego do cultivar Aurora 2 , de três anos de idade, conduzido em sistema de vaso moderno e espaçamento de 6 x 4 m. O delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados, onde cada planta foi considerada um bloco, utilizando-se 15 tratamentos, 8 repetições (blocos) e 10 frutos por tratamento. Os tratamentos foram os seguintes: T1 - Sacolas de TNT branco de 45 Gramaturas por m2 (45G/m2) fechado, T2 - Sacolas de TNT branco de 45 Gramaturas por m2 (45G/m2) aberto, T3 - Sacolas de TNT branco de 20 Gramaturas por m2 (20G/m2) fechado; T4 - Sacolas de TNT branco de 20 Gramaturas por m2 (20G/m2) aberto; T5 - Sacolas de polipropileno microperfurado transparente (furos de 1mm) fechado; T6 - Sacolas de polipropileno microperfurado transparente (furos de 1mm) aberto; T7 - Sacolas de polipropileno microperfurado 2 transparente (furos de 2mm) fechado; T8 - Sacolas de polipropileno microperfurado transparente (furos de 2mm) aberto; T9 - Sacolas de polietileno microperfurado leitoso (furos de 1mm) fechado; T10 - Sacolas de polietileno microperfurado leitoso (furos de 1mm) aberto; T11 - Sacolas de polietileno microperfurado leitoso (furos de 2mm) fechado; T12 - Sacolas de polietileno microperfurado leitoso (furos de 2mm) aberto; T13 - Sacolas de papel impermeável fechado; T14 - Sacolas de papel impermeável aberto; T15 - Testemunha (sem ensacamento). Os resultados mostraram que o ensacamento não influenciou... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This research aimed to look for alternative bags that could offer protection against fruit-flies and oriental moth attack, offer easy procedure at the harvesting time of peach crops and verify two aspects referred to the bags: the practicability and the cost. The work was conducted at Santa Maria Farm in São Luis do Paraitinga County (São Paulo State), from August to November of 2006, in a tree-year-old peach crop. The cultivar Aurora 2 was conducted in modern vase system with 6m between rows and 4 m between plants. The experimental design followed randomized block, where each plant was considered one block. There were 15 treatments, 8 replications (blocks) and 10 fruits per treatment. The treatments were: T1 - white and closed TNT (tissue non-tissue) bag (45g/m2), T2 - white and opened TNT bag (45g/m2), T3 - white and closed TNT bag (20g/m2), T4 - white and opened TNT bag (20g/m2), T5 - transparent polypropelene microperfurated and closed bag (1mm of diameter), T6 - transparent polypropelene microperfurated and opened bag (1mm of diameter), T7 - transparent polypropelene microperfurated and closed bags (2mm of diameter), T8 - transparent polypropelene microperfurated and opened bag (2mm of diameter), T9 - milky microperfurated polyetilene and closed bag (1mm of diameter), T10 - milky microperfurated polyetilene and opened bag (1mm of diameter), T11 - milky microperfurated polyetilene and closed bag (2mm of diameter), T12 - milky microperfurated polyetilene and opened bags (2mm of diameter), T13 - closed and waterproof paper bag, T14 opened and waterproof paper bag, T15 - check treatment (unbagging fruits). The results showed that bagging did not influenced chemical fruits characteristics, such as, pH, soluble solid contents (SS), titratable acidity (TA), SS/TA ratio, however, produced reasonable bigger and havier fruits. The fruit epiderm color was influenced by baging... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Sarita Leonel / Coorientador: Wilson Badiali Crocomo / Banca: Regina Marta Evangelista / Banca: Adriana Mascarette Labinas / Mestre

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:30:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 526506 bytes, checksum: 599838531677d80fdf541112b66fb2cd (MD5) Previous issue date: 2007-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The objectives of the present study were to evaluate the ozone toxicity to populations of Tribolium castaneum, Rhyzopertha dominica and Oryzaephilus surimanensis, to determine if there is cross resistance between ozone and phosphine; to verify if there is relationship between the ozone toxicity and respiratory metabolism of the insects; to determine the reproductive standards of the populations in the absence of selective pressure and provide evidence of adaptive costs associated with phosphine resistance. Sixteen Brazilian populations of T. castaneum, 11 of R. dominica and nine of O. surinamensis were collected from the states of Goiás, Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, Minas Gerais, Paraná and São Paulo. In the toxicity bioassays, the concentration of the ozone was fixed in 150 ppm (2 L min-1 flow). The lethal exposure time for 50 or 95% of mortality (TL50 and TL95) of each insect population was estimated through time-response bioassays and used to calculate respective resistance ratios (RRs). The respiratory and instantaneous growth rates (ri) of each population of three species were evaluated. In addition, the development and population growth rate of two phosphine resistant and two susceptible populations of each specie were evaluated. None of the tested populations showed ozone resistance. The resistance ratios at TL50 of the populations of T. castaneum, R. dominica and O. surinamensis ranged, respectively, from 1.00 to 1.76, 1.03 to 1.32, and 1.0 to 1.58- fold. In contrast, some of these populations showed high resistance to phosphine, indicating that there was no cross resistance between ozone and phosphine. Different respiratory standards were observed among the populations of each species, suggesting that ozone toxicity was not influenced by the respiratory metabolism of insects. Different reproductive standards were found in the development and populational growth rates, where some phosphine resistant populations showed adaptative costs in the absence of the insecticide. Since these populations did not show ozone resistance, independent of the resistance or susceptibility to phosphine, ozone can be one of the major eco-friendly alternative to phosphine for use in managing resistant pest populations. / Este trabalho teve por objetivos avaliar a toxicidade do ozônio a populações de Tribolium castaneum, Rhyzopertha dominica e Oryzaephilus surimanensis; determinar se existe resistência cruzada entre o ozônio e a fosfina; averiguar se há relação entre a toxicidade do ozônio e o metabolismo respiratório dos insetos; determinar os padrões reprodutivos das populações na ausência de pressão seletiva e prover evidências de custos adaptativos associados à resistência à fosfina. Foram utilizadas 16 populações brasileiras de T. castaneum, 11 de R. dominica e nove de O. surinamensis coletadas nos estados de Goiás, Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, Minas Gerais, Paraná e São Paulo. Nos bioensaios de toxicidade, fixou-se a concentração do ozônio em 150 ppm, em fluxo contínuo de 2 L min-1. Os tempos letais para causar 50 e 95% de mortalidade (TL50 e TL95) de cada população foram estimados por meio de bioensaios de tempo-resposta e usados para calcular as respectivas razões de resistência (RRs). Os padrões da taxa respiratória e do crescimento instantâneo (ri) de cada população das três espécies foram avaliados. Adicionalmente, foram avaliadas as taxas de desenvolvimento e de crescimento populacional de duas populações resistentes à fosfina e duas susceptíveis de cada espécie. Nenhuma das populações estudadas mostrou resistência ao ozônio. A razão de resistência para os TL50 das populações de T. castaneum, R. dominica e O. surinamensis variou, respectivamente, de 1,00 a 1,76; 1,03 a 1,32; e 1,0 a 1,58 vezes da população de maior para a de menor susceptibilidade. Por outro lado, algumas destas populações apresentam elevada resistência à fosfina, indicando que não há resistência cruzada entre o ozônio e a fosfina. Foram observados diferentes padrões respiratórios entre as populações de cada espécie, indicando que a toxicidade do ozônio não teve relação com o metabolismo respiratório dos insetos. Diferentes padrões reprodutivos foram verificados nas taxas de desenvolvimento e de crescimento populacional, onde algumas populações resistentes à fosfina apresentaram custo adaptativo na ausência do inseticida. Como essas populações não mostraram resistência ao ozônio, independentemente de serem resistentes ou susceptíveis à fosfina, é possível que o ozônio venha a se tornar uma alternativa ao uso da fosfina nos programas de manejo de resistência a esse fumigante.

LIMA, G. P. G. Purificação, caracterização bioquímica e atividade biológica in vitro contra insetos praga de um novo inibidor de tripsina isolado de sementes de Sapindus saponaria L. (Sapindaceae). 2012. 122 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2015-03-12T15:00:00Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_gpglima.pdf: 2370771 bytes, checksum: 509ae0531057d53f967b325467f88d5c (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-03-29T17:18:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_gpglima.pdf: 2370771 bytes, checksum: 509ae0531057d53f967b325467f88d5c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-29T17:18:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_gpglima.pdf: 2370771 bytes, checksum: 509ae0531057d53f967b325467f88d5c (MD5) Previous issue date: 2012 / Environmental toxicity, low biodegradability and increased resistance in agricultural pest insects and in insect vectors of diseases to insecticides traditionally used for their control have encouraged the development of chemical alternatives with greater specificity and biodegradability especially from plants. In this way, the present study aimed the purification, characterization and evaluation of activity towards pest insect digestive enzymes of a new trypsin inhibitor obtained from Sapindus saponaria seeds. This new trypsin inhibitor obtained from S. saponaria seeds (SSTI2) belongs to Potato I inhibitor family and was purified by protein precipitation with trichloroacetic acid, affinity chromatography and reverse phase chromatography using UFLC system. The native inhibitor and its fragments generated by enzymatic treatment with trypsin and pepsin were analyzed and sequenced by MALDI-TOF and ESI-TOF mass spectrometry, determining its accurate molecular mass (MM = 7571, 976 Da) and primary structure (64 of 69 amino acids). The SSTI2 showed an IC50 of 8.3 x 10-2 μmol.L-1 against bovine trypsin, and a much lower inhibitory activity on the enzymes chymotrypsin (13.24 ± 0.28%) and papain (5.28 ± 0 , 42%), but was unable to inhibit proteolysis promoted by bromelain. In spite to show moderate inhibition of total digestive enzymes (4.74 ± 0.45% to 56.06 ± 1.41%), the inhibitor was very effective upon trypsin-like enzymes present in Aedes aegypti (92.44 ± 0.99%), Anthonomus grandis (77.93 ± 0.12%), Anticarsia gemmatalis ( 32.21 ± 0.57%) and Spodoptera frugiperda (71.44 ± 1.23%) guts. This strong inhibitory effect of SSTI2 on the catalytic activity of trypsin-like peptidases of insect’s midguts suggests a possible suppressive effect on development and survival of insects fed with diets containing the inhibitor. Thus, future in vivo assays and evaluation of other biochemical properties will be important to establish the potential biotechnological application of SSTI2, especially for the combat of Ae. aegypti, A. grandis and An. gemmatalis. Furthermore, the sequence of SSTI2 elucidated in this study allows the chemical synthesis, cloning of coding gene sequence and heterologous expression of this potential new biotechnological tool. / A toxicidade ao meio ambiente, a baixa biodegrabilidade e a crescente resistência de insetos praga da agricultura e de insetos vetores de doenças aos inseticidas tradicionalmente utilizados tem estimulado o desenvolvimento de alternativas com maior biodegradabilidade e especificidade, especialmente de origem vegetal. Nesse sentido, o presente estudo consistiu na purificação, caracterização e avaliação do efeito biológico in vitro de um novo inibidor de tripsina obtido das sementes de Sapindus saponaria sobre as enzimas digestivas de insetos. Através de precipitação com ácido tricloroacético (TCA), cromatografia de afinidade à tripsina e cromatografia de fase reversa em sistema UFLC, foi purificado um novo inibidor de tripsina (SSTI2) pertencente ao grupo de inibidores do tipo Batata I, uma categoria de inibidores de peptidases serínicas com reconhecido efeito tóxico sobre insetos. O inibidor nativo e fragmentos desse gerados por tratamento enzimático com tripsina e pepsina foram analisados e sequenciados por espectrometria de massa do tipo MALDI-TOF e ESI-TOF, determinando assim a sua massa molecular acurada (MM = 7571, 976 Da) e elucidando a sua estrutura primária (64/69 aminoácidos). O inibidor apresentou uma IC50 de 8,3 x 10-2 μmol.L-1 contra a tripsina bovina, mas apresentou baixa atividade inibitória sobre as enzimas quimotripsina (13,24 ± 0,28%) e papaína (5,28 ± 0,42%), e não foi capaz de inibir a proteólise promovida pela bromelaína. O SSTI2 inibiu moderadamente a atividade catalítica das enzimas digestivas totais dos insetos, com percentual de inibição variando entre 4,74 ± 0,45% a 56,06 ± 1,41%. No entanto, o inibidor foi eficaz em atuar sobre as enzimas digestivas do tipo tripsina presentes nos intestinos dos insetos Aedes aegypti (92,44 ± 0,99%), Anthonomus grandis (77,93 ± 0,12%), Anticarsia gemmatalis (32,21 ± 0,57%) e Spodoptera frugiperda (71,44 ± 1,23%). Esse expressivo efeito inibitório do SSTI2 sobre a atividade catalítica das peptidases do tipo tripsina provenientes do intestino médio dos insetos sugere um possível efeito supressor no desenvolvimento e sobrevivência de insetos alimentados com dietas contendo o inibidor. Assim, futuros estudos in vivo e avaliações de outras propriedades bioquímicas do inibidor serão importantes para determinar a potencial aplicação biotecnológica do SSTI2, especialmente para o combate de A. aegypti, A. grandis e A. gemmatalis. Além disso, a sequência do SSTI2 elucidada nesse estudo possibilita a síntese, clonagem do gene codificante e expressão heteróloga dessa potencial ferramenta biotecnológica.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of this study was to evaluate the population fluctuation and the distribution of the soybean root weevils (Coleoptera: Curculionidae), and the population fluctuation was determined in a soybean area in the period December, 2006 to November, 2007, in the Restinga Seca county, RS. Distribution in space and time was evaluated in a soybean experimental area in 2006-2007 at UFSM. Twenty trenches with a dimension of 0.25 m2/unit were made every two weeks for evaluation of larvae and pupae population fluctuation and 105 trenches with the same dimension were made to determine larvae distribution. To evaluate population of adults, ten emergency cages of 2.00 m2/unit were used. Adults distribution was evaluated weekly with four cloth stroke in each of the 105 sampling points of the soybean area. Larvae were found almost during the 12 months period of evaluation. They were scarce from October to November, 2007, however, predominate medium and large sizes (3rd and 5th instars, respectively). 74 % of the larvae population found concentrated in the first 0. 10 m of depth in the soil. A population peak was observed in February 2007, with a population of 16 larvae/m2 including mainly 1st and 2nd instars. Only naupactini belonging to the species Naupactus purpureoviolasceus were collected in the cages for adults. A typical aggregated distribution for a soil insect was observed in this study. Pupae phase was observed as temperature raise in early spring and last about four weeks. Adults emerged in spring and summer, with higher populations from October to January. Adults of soybean root weevils were initially located at the edge of the soybean field, but they had an aggregated distribution from the first point of occurrence. The genera Naupactus e Pantomorus were predominant in the soybean area of Santa Maria, with six species being identified in this study. Adults sampling is recommended as a tool to predict the occurrence of larvae in the coming soybean season. / O objetivo do trabalho foi estudar os aspectos biológicos dos curculionídeos-das-raízes e identificar as espécies ocorrentes na cultura da soja, sendo que o estudo da flutuação populacional dos curculionídeos-das-raízes (Coleoptera: Curculionidae) foi realizado no município de Restinga Seca, RS, em área de cultivo de soja, no período de 12/2006 a 11/2007. Para a avaliação da distribuição espaço-temporal o trabalho foi realizado em Santa Maria, RS, em área experimental da UFSM em 2006-2007. Para avaliar a flutuação populacional de larvas e pupas foram realizadas trincheiras, (20 quinzenais) com a dimensão de 0,25 m2/unidade. Para avaliar a distribuição de larvas, foram realizadas 105 trincheiras, com a mesma dimensão. Para o levantamento de adultos, utilizaram-se 10 gaiolas de emergência com dimensão de 2m2/unidade, enquanto para avaliar a distribuição destes foram realizadas quatro batidas de pano por ponto de amostragem (105 pontos), avaliados semanalmente. Entre 10 e 11/2007, o número de larvas encontradas na área foi reduzido, porém predominaram larvas médias e grandes (3°e 5° instares). A população de larvas camada de zero a 0,10 m, totalizou 74%. O pico populacional ocorreu em fevereiro, com a população de 16 larvas/m2 com predominância de larvas de 1° e 2° ínstares. Foram encontradas larvas dos curculionídeos-das-raízes em praticamente os 12 meses de avaliação. Nas gaiolas, foram coletados somente naupactini pertencentes à espécie Naupactus purpureoviolasceus. Em relação distribuição destes insetos-praga observou-se que ocorrem de maneira agregada, que é comportamento típico de praga de solo. A fase de pupa ocorreu no início da primavera, quando as temperaturas tornaram-se mais elevadas, com duração aproximada de quatro semanas. Os adultos dos curculionídeos-das-raízes emergiram no verão e final da primavera, com picos populacionais entre outubro e janeiro. A população de adultos dos curculionídeos-das-raízes se distribuiu de forma agregada desde o primeiro foco de ocorrência, e inicialmente se concentraram nas bordas da lavoura. Os gêneros Naupactus e Pantomorus predominam em área de soja em Santa Maria, e foram identificadas seis espécies destes gêneros. Desse modo, a amostragem de adultos é recomendada para que o produtor possa prevenir-se de ocorrência de larvas na safra posterior.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV11MA077.pdf: 8728650 bytes, checksum: 67de9ee79430f3f94f1b5c3369535d74 (MD5) Previous issue date: 2011-08-29 / Apple orchards in southern Brazil are attacked by a great diversity of organisms throughout the crop cycle and special attention should be given to insect pests. The damage caused by "big caterpillars" has caused concern in the productive sector, and research on alternative methods of control for these insects is still incipient. The study was conducted at the Estação Experimental de Fruticultura de Clima Temperado (EFCT) da Embrapa Uva e Vinho, em Vacaria-RS. Its objective was to identify the species of Lepidoptera occurring in apple orchards; establish and determine the floating population indices during the crop; check harm reduction "big caterpillars" to obtain the spatial distribution of damage in apple orchards and study the effect of different diets on the development of natural Physocleora dimidiaria (Guenée, 1852) (Geometridae), a species belonging to the group of "big caterpillars." Light traps were installed three of the adapted model "Luiz de Queiroz", October 2010 and March 2011, Fuji orchard. The removal of insects occurred twice a week, the collected material was stored in labeled plastic bags and taken to the laboratory for screening. The moths were identified by comparison, based on specimens in the entomological collection of existing EFCT and the unidentified specimens were sent to specialists. We determined the species richness, diversity indexes, constancy and dominance. We evaluated the incidence and spatial distribution of damage "big caterpillars" in the periods of fruit thinning, pre-harvest and harvest. We calculated the mean (x), variance (s2) for each occasion of sampling and dispersion indexes I, Morisita, negative binomial and Poisson. We recorded 40 species belonging to the families of Lepidoptera: Arctiidae, Geometridae and Noctuidae. Damage to the "big caterpillars" presented dispersion pattern defined by aggregation in the thinning and pre-harvest and regular harvesting. The light traps can be used to survey and monitor species diversity, however, were not effective to control the damage of "big caterpillars" in apple orchard. Was evaluated in the laboratory the effect of different diets on the natural development of P. dimidiaria. Seventy larvae were observed until the F1 generation in BOD incubator at each natural diet: Trifolium repens L. (white clover), Rumex obtusifolius (tonguein- cow), Malus domestica (apple leaves) fruit and apple cultivar Gala. Data in the table of life and fertility obtained for P. dimidiaria indicate that a generation time was 49.09 days in T. repens; of 60.04 days (apple leaves) and 50.17 days in R. obtusifolius. The net reproductive rate was higher in caterpillars fed on R. obtusifolius times corresponding to 183.60, with each generation / Pomares de macieira do Sul do Brasil são atacados por uma grande diversidade de organismos ao longo do ciclo da cultura e atenção especial deve ser dada aos insetos-praga. Os danos causados por grandes lagartas vêm causando preocupação no setor produtivo, e a pesquisa com métodos alternativos de controle para tais insetos ainda é incipiente. O estudo foi realizado na Estação Experimental de Fruticultura de Clima Temperado (EFCT) da Embrapa Uva e Vinho, em Vacaria-RS. Teve por objetivos identificar as espécies de lepidópteros ocorrentes em pomar de macieira; estabelecer a flutuação e determinar índices populacionais ao longo da safra; verificar a redução de danos de grandes lagartas ; obter a distribuição espacial do dano em pomar de macieira e estudar o efeito de diferentes dietas naturais sobre o desenvolvimento de Physocleora dimidiaria (Guenée, 1852) (Geometridae), uma espécie pertencente ao grupo das grandes lagartas . Foram instaladas três armadilhas luminosas adaptadas do modelo Luiz de Queiroz , de outubro de 2010 e março de 2011, em pomar da cultivar Fuji. A retirada dos insetos ocorreu duas vezes por semana, o material coletado foi armazenado em sacos plásticos etiquetados e levado até o laboratório para triagem. As mariposas foram identificadas por comparação, com base em exemplares existentes na coleção entomológica da EFCT. Os exemplares não identificados foram enviados a especialistas. Foi determinada a riqueza de espécies, os índices de diversidade, constância e dominância. Avaliou-se a incidência e a distribuição espacial do dano de grandes lagartas em frutos nos períodos de raleio, pré-colheita e colheita. Calculou-se a média (x), a variância (s2) para cada ocasião de amostragem e os índices de dispersão I, Morisita, binomial negativa e Poisson. Foram registradas 40 espécies de lepidópteros pertencentes às famílias: Arctiidae, Geometridae e Noctuidae. Os danos de grandes lagartas apresentaram padrão de dispersão definido pela agregação no raleio e pré-colheita e regular na colheita. As armadilhas luminosas podem ser utilizadas para levantamento de diversidade de espécies e monitoramento, porém, não foram eficientes para controlar os danos de grandes lagartas em pomar de macieira. Foi avaliado em laboratório o efeito de diferentes dietas naturais sobre o desenvolvimento de P. dimidiaria. Setenta lagartas foram acompanhadas até a geração F1 em estufa incubadora BOD, em cada dieta natural: Trifolium repens L. (trevo-branco), Rumex obtusifolius (língua-de-vaca), folhas de Malus domestica (macieira) e frutos de macieira cultivar gala. Os dados da tabela de vida e de fertilidade obtidos para a P. dimidiaria indicaram que o tempo de uma geração foi de 49,09 dias em T. repens; de 60,04 dias (folhas de macieira) e de 50,17 dias em R. obtusifolius. A taxa líquida de reprodução foi maior em lagartas alimentadas com R. obtusifolius correspondendo a 183,60 vezes, a cada geração

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AnaCBC.pdf: 1320381 bytes, checksum: 881b82ecb0df2b87414957a1e02761bb (MD5) Previous issue date: 2008-10-20 / One Kunitz-type trypsin inhibitors (PmTI) was purified from Piptadenia moniliformis seeds, a tree of the sub-family Mimosoideae, by TCA precipitation, affinity chromatography on immobilized trypsin-Sepharose, DEAE cellulose (ion exchange) and Superose 12 (molecular exclusion) column FPLC/AKTA. The inhibitor has Mr of 25 kDa by SDS-PAGE and chromatography molecular exclusion. The N-terminal sequence of this inhibitor showed high homology with other family Kunitz inhibitors. This also stable variations in temperature and pH and showed a small decrease in its activity when incubated with DDT in the concentration of 100mM for 120 minutes. The inhibition of trypsin by PmTI was competitive, with Ki of 1.57 x10-11 M. The activity of trypsin was effectively inhibited by percentage of inhibition of 100%, among enzymes tested, was not detected inhibition for the bromelain, was weak inhibitor of pancreatic elastase (3.17% of inhibition) and inhibited by 76.42% elastase of neutrophils, and inhibited in a moderate, chymotrypsin and papain with percentage of inhibition of 42.96% and 23.10% respectively. In vitro assays against digestive proteinases from Lepidoptera, Diptera and Coleoptera pests were carried out. Several degrees of inhibition were found. For Anthonomus grandis and Ceratitis capitata the inhibition was 89.93% and 70.52%, respectively, and the enzymes of Zabrotes subfasciatus and Callosobruchus maculatus were inhibited by 5.96% and 9.41%, respectively, and the enzymes of Plodia. interpunctella and Castnia licus were inhibited by 59.94% and 23.67, respectively. In vivo assays, was observed reduction in the development of larvae in 4rd instar of C. capitata, when PmTI was added to the artificial diet, getting WD50 and LD50 of 0.30% and 0.33%, respectively. These results suggest that this inhibitor could be a strong candidate to plant management programs cross transgenic / Um inibidor de tripsina da fam?lia Kunitz (PmTI) foi purificado de sementes de Piptadenia moniliformis, uma ?rvore da sub-fam?lia Mimosoideae, atrav?s da precipita??o com ?cido tricloroac?tico (TCA), cromatografia de afinidade com tripsina acoplada em sepharose, coluna DEAE- celulose(troca i?nica) e Superose 12 (exclus?o molecular) em sistema FPLC/AKTA. O inibidor possui massa molecular de 25 kDa como confirmado atrav?s de SDS-PAGE e cromatografia de exclus?o molecular. A seq??ncia do N-terminal deste inibidor mostrou alta homologia com outros inibidores da fam?lia Kunitz. Este tamb?m ? est?vel as varia??es de temperatura e pH, e apresentou um pequeno decr?scimo na sua atividade quando incubado com DTT na concentra??o de 100 mM por 120 minutos. A inibi??o da tripsina foi do tipo competitiva com Ki de 1,57x10-11 mM. A atividade da tripsina foi inibida efetivamente com percentual de inibi??o de 100%, entre as outras enzimas testadas n?o foi detectada inibi??o para a bromela?na, foi fracamente inibidor da elastase pancre?tica (3,17% de inibi??o), inibiu em 76,42% elastase de neutr?filos, inibiu de forma moderada quimotripsina e papa?na com percentual de inibi??o de 42,96% e 23,10%, respectivamente. Ensaios in vitro foram realizados com as proteinases digestivas de Lepid?ptera, Cole?ptera e D?ptera. V?rios graus de inibi??o foram encontrados. Para Anthonomus grandis e Ceratitis capitata a inibi??o foi de 89,93% e 70,52%, respectivamente, e as enzimas de Zabrotes subfasciatus e Callosobruchus maculatus foram inibidas com percentuais de 5,96% e 9,41% respectivamente, e as enzimas de Plodia interpunctella e Castnia licus foram inibidas com percentuais de 59,94% e 23,67%, respectivamente. No ensaio in vivo, foi observada redu??o no desenvolvimento de larvas em 4? ?nstar de C. capitata, quando PmTI foi adicionado ? dieta artificial, obtendo WD50 de 0,30% e LD50 0,33% . Estes resultados sugerem que este inibidor possa ser um forte candidato para programas de melhoramentos de plantas via transgenia

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A toxicidade ao meio ambiente, a baixa biodegrabilidade e a crescente resistÃncia de insetos praga da agricultura e de insetos vetores de doenÃas aos inseticidas tradicionalmente utilizados tem estimulado o desenvolvimento de alternativas com maior biodegradabilidade e especificidade, especialmente de origem vegetal. Nesse sentido, o presente estudo consistiu na purificaÃÃo, caracterizaÃÃo e avaliaÃÃo do efeito biolÃgico in vitro de um novo inibidor de tripsina obtido das sementes de Sapindus saponaria sobre as enzimas digestivas de insetos. AtravÃs de precipitaÃÃo com Ãcido tricloroacÃtico (TCA), cromatografia de afinidade à tripsina e cromatografia de fase reversa em sistema UFLC, foi purificado um novo inibidor de tripsina (SSTI2) pertencente ao grupo de inibidores do tipo Batata I, uma categoria de inibidores de peptidases serÃnicas com reconhecido efeito tÃxico sobre insetos. O inibidor nativo e fragmentos desse gerados por tratamento enzimÃtico com tripsina e pepsina foram analisados e sequenciados por espectrometria de massa do tipo MALDI-TOF e ESI-TOF, determinando assim a sua massa molecular acurada (MM = 7571, 976 Da) e elucidando a sua estrutura primÃria (64/69 aminoÃcidos). O inibidor apresentou uma IC50 de 8,3 x 10-2 μmol.L-1 contra a tripsina bovina, mas apresentou baixa atividade inibitÃria sobre as enzimas quimotripsina (13,24  0,28%) e papaÃna (5,28  0,42%), e nÃo foi capaz de inibir a proteÃlise promovida pela bromelaÃna. O SSTI2 inibiu moderadamente a atividade catalÃtica das enzimas digestivas totais dos insetos, com percentual de inibiÃÃo variando entre 4,74  0,45% a 56,06  1,41%. No entanto, o inibidor foi eficaz em atuar sobre as enzimas digestivas do tipo tripsina presentes nos intestinos dos insetos Aedes aegypti (92,44  0,99%), Anthonomus grandis (77,93  0,12%), Anticarsia gemmatalis (32,21  0,57%) e Spodoptera frugiperda (71,44  1,23%). Esse expressivo efeito inibitÃrio do SSTI2 sobre a atividade catalÃtica das peptidases do tipo tripsina provenientes do intestino mÃdio dos insetos sugere um possÃvel efeito supressor no desenvolvimento e sobrevivÃncia de insetos alimentados com dietas contendo o inibidor. Assim, futuros estudos in vivo e avaliaÃÃes de outras propriedades bioquÃmicas do inibidor serÃo importantes para determinar a potencial aplicaÃÃo biotecnolÃgica do SSTI2, especialmente para o combate de A. aegypti, A. grandis e A. gemmatalis. AlÃm disso, a sequÃncia do SSTI2 elucidada nesse estudo possibilita a sÃntese, clonagem do gene codificante e expressÃo heterÃloga dessa potencial ferramenta biotecnolÃgica. / Environmental toxicity, low biodegradability and increased resistance in agricultural pest insects and in insect vectors of diseases to insecticides traditionally used for their control have encouraged the development of chemical alternatives with greater specificity and biodegradability especially from plants. In this way, the present study aimed the purification, characterization and evaluation of activity towards pest insect digestive enzymes of a new trypsin inhibitor obtained from Sapindus saponaria seeds. This new trypsin inhibitor obtained from S. saponaria seeds (SSTI2) belongs to Potato I inhibitor family and was purified by protein precipitation with trichloroacetic acid, affinity chromatography and reverse phase chromatography using UFLC system. The native inhibitor and its fragments generated by enzymatic treatment with trypsin and pepsin were analyzed and sequenced by MALDI-TOF and ESI-TOF mass spectrometry, determining its accurate molecular mass (MM = 7571, 976 Da) and primary structure (64 of 69 amino acids). The SSTI2 showed an IC50 of 8.3 x 10-2 μmol.L-1 against bovine trypsin, and a much lower inhibitory activity on the enzymes chymotrypsin (13.24  0.28%) and papain (5.28  0 , 42%), but was unable to inhibit proteolysis promoted by bromelain. In spite to show moderate inhibition of total digestive enzymes (4.74  0.45% to 56.06  1.41%), the inhibitor was very effective upon trypsin-like enzymes present in Aedes aegypti (92.44  0.99%), Anthonomus grandis (77.93  0.12%), Anticarsia gemmatalis ( 32.21  0.57%) and Spodoptera frugiperda (71.44  1.23%) guts. This strong inhibitory effect of SSTI2 on the catalytic activity of trypsin-like peptidases of insectâs midguts suggests a possible suppressive effect on development and survival of insects fed with diets containing the inhibitor. Thus, future in vivo assays and evaluation of other biochemical properties will be important to establish the potential biotechnological application of SSTI2, especially for the combat of Ae. aegypti, A. grandis and An. gemmatalis. Furthermore, the sequence of SSTI2 elucidated in this study allows the chemical synthesis, cloning of coding gene sequence and heterologous expression of this potential new biotechnological tool.