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Atividade nematicida do fungo Pleurotus ostreatus e de suas proteases / Nematicidal activity of the fungus Pleurotus ostreatus and its proteases

Genier, Hugo Leonardo André 08 June 2015 (has links)
Submitted by Patricia Barros (patricia.barros@ufes.br) on 2016-07-12T13:14:28Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertação versão biblioteca final pos publicada Hugo Genier.pdf: 671423 bytes, checksum: 3d49ee23a16cc7bfb324104dc12607fd (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barros (patricia.barros@ufes.br) on 2016-07-12T13:14:45Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertação versão biblioteca final pos publicada Hugo Genier.pdf: 671423 bytes, checksum: 3d49ee23a16cc7bfb324104dc12607fd (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-12T13:14:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertação versão biblioteca final pos publicada Hugo Genier.pdf: 671423 bytes, checksum: 3d49ee23a16cc7bfb324104dc12607fd (MD5) / Dentre as possíveis aplicações biotecnológicas de fungos e suas proteases, o controle biológico tem mostrado ser eficiente. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade nematicida do fungo Pleurotus ostreatus e suas proteases sobre larvas de Panagrellus sp. A atividade proteolítica de Pleurotus ostreatus (PLO 06) foi medida e caracterizada com pHs e temperaturas diferentes e na presença de um inibidor (PMSF). O tempo de produção máxima da enzima foi determinado coletando-se amostras a cada 24h durante 7 dias. O perfil das proteases foi observado através de zimograma. A atividade predatória do fungo Pleurotus ostreatus (PLO 06) foi avaliada sobre larvas de Panagrellus sp. (ensaio A), bem como a atividade nematicida de proteases de PLO 06 sobre as mesmas larvas (ensaio B). A atividade das proteases foi máxima em pH 9 e temperatura de 60 °C. Na presença de inibidor, não houve nenhuma atividade proteolítica. A maior atividade enzimática de P. ostreatus foi obtida com seis dias de incubação (71,6 U/mL). Os valores de redução das larvas (Ensaio A) foram: dia 1 (65,6%); dia 2 (77,4%); dia 3 (95,2%). A redução das larvas (Ensaio B) foi de 42%. P. ostreatus (PLO 06) e suas proteases mostraram eficácia contra larvas de Panagrellus sp., demonstrando ter potencial para aplicação no controle biológico integrado. / Among the possible biotechnological applications of fungi and their proteases biological control has proved to be efficient. The objective of this study was to evaluate the nematicidal activity of the fungus Pleurotus ostreatus and its proteases on Panagrellus sp. larvae. Proteolytic activity of P. ostreatus (PLO 06) was measured and characterized at different pHs, temperatures and in the presence of a inhibitor (PMSF). The time of maximum production of the enzyme was determined collecting samples every 24 hours for 7 days. A zymogram showed the profile of several proteases. Predatory activity of the fungus P. ostreatus (PLO 06) was evaluated on Panagrellus sp. larvae (assay A) as well as the nematicidal activity of PLO 06 proteases on the same larvae (assay B). At pH 9 and 60°C, the activity of the proteases reached the maximum. In the presence of inhibitor, there was no proteolytic activity. A sample collected on the sixth day of incubation showed the highest enzyme activity (71, 6 U/mL). The values of the reduction of the larvae (Assay A) were: day 1 (65.6%); day 2 (77.4%); day 3 (95.2%). The reduction of the larvae (Assay B) was 42%. P. ostreatus (PLO 06) and its proteases were very effective against Panagrellus sp. larvae, demonstrating great potential for use in integrated biological control.
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Geometridae (Lepidoptera) e Hymenoptera parasitoides em área de Mata Estacional Semidecídua na Estação Ecológica de Jataí, Luiz Antônio - SP

Geraldo, Mariana 07 June 2017 (has links)
Submitted by Bruna Rodrigues (bruna92rodrigues@yahoo.com.br) on 2017-10-03T14:00:37Z No. of bitstreams: 1 TeseMG.pdf: 10653928 bytes, checksum: c96fdb4c007cd69e404ce32a399ea97c (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (bco.producao.intelectual@gmail.com) on 2018-01-25T18:04:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseMG.pdf: 10653928 bytes, checksum: c96fdb4c007cd69e404ce32a399ea97c (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (bco.producao.intelectual@gmail.com) on 2018-01-25T18:04:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseMG.pdf: 10653928 bytes, checksum: c96fdb4c007cd69e404ce32a399ea97c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-25T18:09:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseMG.pdf: 10653928 bytes, checksum: c96fdb4c007cd69e404ce32a399ea97c (MD5) Previous issue date: 2017-06-07 / Não recebi financiamento / Larvae of Geometridae (Lepidoptera) were obtained with an entomological umbrella, from October 2013 to September 2015, in two areas of semi-deciduous forest (Mata/Cerradão and Mata) at Estação Ecológica de Jataí, Luiz Antônio, São Paulo state. The larvae of Geometridae were kept in the laboratory until the adult or parasitoid emergence. Especimens of the families Braconidae and Ichneumonidae were obtained, from January 2014 to February 2015, with two Malaise traps located in the same local of collection of Geometridae larvae. The material obtained in the Malaise traps was sorted, the individuals of the families Braconidae and Ichneumonidae were identified in subfamily level and the Microgastrinae, Cheloninae and Rogadinae, Campopleginae and Mesochorinae subfamilies were identified at the genus level. A total of 416 larvae of Geometridae weas collected, 190 in the Mata/Cerradão stretch and 226 in the Mata stretch, of which, 52 and 39, respectively, were parasitized. Among the Geometridae, the subfamily Ennominae was represented by individuals of 14 genera (Argyrotome, Glena, Hymenomima, Iridopsis, Ischnopteris, Lomographa, Macaria, Nepheloleuca, Patalene, Phrygionis, Physocleora, Prochoerodes, Rhomboptila and Trotopera), the subfamily Larentiinae by four (Eubaphe, Eupithecia, Euphyia and Pterocypha) and the subfamily Sterrhinae by two (Cyclophora and Idaea). A total of 91 larvae of Geometridae, from 11 genera, were obtained parasitized by 198 parasitoids. The parasitoids obtained belong to the families Braconidae, Ichneumonidae, Eulophidae and Diptera. The Malaise traps provided 2720 individuals of the Ichneumonoidea superfamily, of these 1210 are Braconidae and 1510 are Ichneumonidae, in the Mata/Cerradão stretch, and 702 in the Mata stretch, of which 214 individuals of the Braconidae family and 488 individuals of the Ichneumonidae family. Among the Braconidae, the subfamily Microgastrinae was the most abundant, with 44.5% of individuals in the Mata/Cerradão stretch and 31.8% in the Mata stretch. Eighteen genera of Microgastrinae were recorded (Alphomelon, Apanteles, Choeras, Cotesia, Diolcogaster, Distatrix, Glyptapanteles, Hypomicrogaster, Iconella, Microplitis, Papanteles, Parapanteles, Pholetesor, Prasmodon, Promicrogaster, Protapanteles, Pseudapanteles and Rasivalva), five of Rogadinae (Aleiodes, Choreborogas, Rogas, Stiropius and Yelicones) and four of Cheloninae (Ascogaster, Chelonus, Microchelonus and Phanerotoma). Between the Ichneumonidae collected, 161 individuals were obtained from the subfamily Campopleginae in the Mata/Cerradão stretch and 35 in the Mata stretch. The genera of Campopleginae obtained were Campoletis, Campoplex, Casinaria, Charops, Cryptophion, Cymodusa, Diadegma, Dusona, Hyposoter, Microcharops and Venturia. / Larvas de Geometridae (Lepidoptera) foram obtidas por meio de guarda-chuva entomólogico, no período de outubro de 2013 a setembro de 2015, em duas áreas de mata estacional semidecídua (transecto Mata/Cerradão e transecto Mata) na Estação Ecológica de Jataí, Luiz Antônio, São Paulo. As larvas de Geometridae foram mantidas em laboratório até a emergência do adulto ou do parasitoide. Exemplares das famílias Braconidae e Ichneumonidae foram obtidos, no período de janeiro de 2014 a fevereiro de 2015, por meio de duas armadilhas Malaise localizadas nos mesmos transectos de coleta das larvas de Geometridae. O material obtido nas armadilhas Malaise foi triado, os indivíduos das famílias Braconidae e Ichneumonidae foram identificados em nível de subfamília e as subfamílias Microgastrinae, Cheloninae e Rogadinae, Campopleginae e Mesochorinae foram identificados em nível de gênero. Foram coletadas 416 larvas de Geometridae, 190 no transecto Mata/Cerradão e 226 no transecto Mata, das quais, 52 e 39, respectivamente, estavam parasitadas. Entre os Geometridae, a subfamília Ennominae foi representada por indivíduos de 15 gêneros (Argyrotome, Cimicodes, Glena, Hymenomima, Iridopsis, Ischnopteris, Lomographa, Macaria, Nepheloleuca, Patalene, Phrygionis, Physocleora, Prochoerodes, Rhomboptila e Trotopera), a subfamília Larentiinae por quatro (Eubaphe, Eupithecia, Euphyia e Pterocypha) e a subfamília Sterrhinae por dois (Cyclophora e Idaea). Foram obtidas 91 larvas de Geometridae, de 11 gêneros, parasitadas por 198 parasitoides. Os parasitoides obtidos pertencem às famílias Braconidae, Ichneumonidae, Eulophidae e Diptera. As armadilhas Malaise forneceram 2720 indivíduos da superfamília Ichneumonoidea, destes 1210 Braconidae e 1510 Ichneumonidae, no transecto Mata/Cerradão e 702 no transecto Mata, dos quais 214 indivíduos da família Braconidae e 488 indivíduos da família Ichneumonidae. Entre os Braconidae, a subfamília Microgastrinae foi a mais abundante, com 44,5% de indivíduos no transecto Mata/Cerradão e 31,8% no transecto Mata. Foram registrados 18 gêneros de Microgastrinae (Alphomelon, Apanteles, Choeras, Cotesia, Diolcogaster, Distatrix, Glyptapanteles, Hypomicrogaster, Iconella, Microplitis, Papanteles, Parapanteles, Pholetesor, Prasmodon, Promicrogaster, Protapanteles, Pseudapanteles e Rasivalva), cinco de Rogadinae (Aleiodes, Choreborogas, Rogas, Stiropius e Yelicones) e quatro de Cheloninae (Ascogaster, Chelonus, Microchelonus e Phanerotoma). Entre os Ichneumonidae coletados, foram obtidos 161 indivíduos da subfamília Campopleginae no transecto Mata/Cerradão e 35 no transecto Mata. Os gêneros de Campopleginae obtidos foram Campoletis, Campoplex, Casinaria, Charops, Cryptophion, Cymodusa, Diadegma, Dusona, Hyposoter, Microcharops e Venturia.
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Estudo da distribuição espaço-temporal da comunidade de larvas de Trichoptera Kirby, 1813 (Insecta) em um tributário de primeira ordem do rio Paquequer, Teresópolis, RJ

Huamantinco Araujo , Ana Asunción 22 October 1998 (has links)
Submitted by Alberto Vieira (martins_vieira@ibest.com.br) on 2018-02-07T23:42:03Z No. of bitstreams: 1 273309.pdf: 8936740 bytes, checksum: 814d51b6916275a138d704c16873cba8 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-07T23:42:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 273309.pdf: 8936740 bytes, checksum: 814d51b6916275a138d704c16873cba8 (MD5) Previous issue date: 1998-10-22 / CAPES / Na seção de primeira ordem do rio Paquequer Teresópolis, RJ, foram tomadas amostras de 4 tipos de substrato: folhiço depositado em zonas de remanso, folhiço retido em zonas de correnteza, pedra e areia. De cada tipo foram coligidas 5 amostras em cada estação do ano, do fevereiro de 1991 até fevereiro de 1992. Foram coligidas 2582 larvas de Trichoptera com um peso total de 10,4 g distribuídas em 9 famílias e 20 gêneros. O substrato mais habitado foi o folhiço depositado em zonas de remanso ( 60% dos indivíduos) e as estações com maior frequência foram o verão de 1992 e o inverno. Com base na análise de correspondência aplicada à matriz de frequência dos táxons encontrou-se que a correnteza e a qualidade do detrito determinaram as distribuições espacial e temporal da comunidade na seção estudada. Através de dados de frequência e biomassa de cada gênero, inferiu-se alguns aspetos da historia de vida. Com base nestes dados foram separados três grupos estratégicos. O maior deles reflete o perfil geral da comunidade, no qual grande parte das larvas atinge seu maior tamanho na primavera, período onde deve ocorrer a emergência e oviposição, o que traz como consequência que na seguinte estação, predominem as larvas jovens. Do exame das categorias trôficas pode-se pressupor que existe uma forte relação com o substrato, dado que cada categoria apresenta sua maior frequência e biomassa em um substrato particular. / Study of the spatial and temporal distribution of the Trichoptera (Insecta) larvae community in a first order tributary of the Paquequer river, Teresópolis, RJ. The Trichoptera fauna was sampled in a first order tributary of rio Paquequer, in the district of Teresópolis, Rio de Janeiro State. Quantitative samples of litter from pools, litter from riffles, sand and stones were taken on each season, from February 1991 to February 1992. An amount of 2582 larvae were found, totalizing 10.4 g weight. Nine families and twenty genera were identified. Litter from pools supported the highest frequency of larvae per substrate whereas summer 1992 and winter presented the highest frequencies of larvae among seasons. The results of correspondence analysis showed that discharge and detritus quality influence primarily the spatial distribution of Trichoptera community. The life cycles of common genera were categorized into three group of biological strategies. The largest group represented the general type of the community, where latest instar were predominant in spring and the earliest in summer. Probably, emergency and oviposition occur in spring. The trophic functional categories of Trichoptera beared a close relationship to substrate type: the maximum values of frequency and biomass were highest for shredders on litter from pools, collectors on litter from riffles, predators on sand and scrapers on stones.
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Composição e distribuição espaço-temporal do ictioplâncton das lagoas Imboassica, Cabiúnas e Comprida, Macaé, RJ / Composition and distribution spatio-temporal of the ichthyoplankton of the lagoons Imboassica, Cabiúnas and Comprida, Macaé, RJ

Soares , Cláudio Lopes 19 November 1998 (has links)
Submitted by Alberto Vieira (martins_vieira@ibest.com.br) on 2018-02-07T23:51:02Z No. of bitstreams: 1 273661.pdf: 16267280 bytes, checksum: bfc3b31cc8f4d66832952ea5626ab612 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-07T23:51:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 273661.pdf: 16267280 bytes, checksum: bfc3b31cc8f4d66832952ea5626ab612 (MD5) Previous issue date: 1998-11-19 / #REVISAR# PETROBRÁS/BIO-RIO / CAPES / As lagoas Imboassica, Cabiúnas e Comprida localizam-se em Macaé, RJ e são diferenciadas através da frequência de aberturas naturais ou artificiais do cordão arenoso que as separa do mar. Aualmente, a lagoa lmboassica sofre aberturas artificiais frequentes; a lagoa Cabiúnas sofre aberturas naturais ou artificiais esporádicas e a lagoa Comprida não sofre aberturas de barra. Estudos anteriores demonstraram que as aberturas da barra alteram a composição da ictiofauna. Este estudo procurou determinar as variações na composição quali-quantitativa do ictioplâncton das três lagoas, evidenciando sua distribuição espacial e temporal durante um ano, relacionando tais mudanças com a salinidade, temperatura e aberturas de barra. As coletas foram realizadas em áreas pré-determinadas através de arrastas superficiais com rede de plâncton. Foram realizadas coletas extras com arrasto manual de margem e "peneirão", objetivando propor técnicas alternativas para a coleta do ictioplâncton em lagoas costeiras... / Imboassica, Cabiúnas and Comprida lagoons are located in Macaé county, Southeastern Brazil which are differenciated through the frequency of the natural or artificial openings of the sand bar that separates them from the sea. Actually, Imboassica lagoon have frequent artificial openings; Cabiúnas lagoon have natural openings or scarrce artificial openings and Comprida lagoon don't have sand bar openings. Previous studies have shown that these openings changes the ichthyofauna composition This research tried to determine the variations on the quali-quantitative ichthyoplankton composition of the three lagoons, focusing on its spatial and temporal distribution during a one year period, relating those changes with salinity, temperature and sand bar openings. The collectings were done in pre-detenninate areas using superficial haulings with a plankton net. Extra collectings were done with manual and marginal haulings and a "big bolter", with the purpose of suggesting alternative techniques for ichthyoplankton collecting in coastal lagoons...
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Ictoplâncton do complexo estuarino de Itapessoca norte de Pernambuco - PE.

Souza, Rosana Coimbra 13 October 2003 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T19:29:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseRCS.pdf: 4176226 bytes, checksum: f8bc9f741bcd78955d78089239351ba9 (MD5) Previous issue date: 2003-10-13 / Universidade Federal de Sao Carlos / The present study was carried out in the estuarine complex of Itapessoca, located on the north coast of Pernambuco (PE) Brazil, at latitudes 07º 37 - 07º 41 S and the longitudes 034º 50 - 34º 55 W, from April 2001 to April 2002. The purpose was to characterize the environment and the ictioplanktonic community, attempting to recognize the distributional trends of these organisms, in order to evaluate the estuary s role as a site for the fish initial development phases. The water temperature, salinity and transparency were measured and the collected samples of the water where analyzed in order to estimate the levels of nitrite, nitrate and dissolved phosphate, ammonia, alkalinity and chlorophyll-a. The ictioplankton was collected through horizontal hauls with plankton net with 500 µm mesh. The hauls had a standard duration of 10 minutes, with the approximate speed of two knots. It was calculated the specific diversity of the fish larvae and the biotic and abiotic data were statistically related. A total of 87,758 eggs and 6,677 larvae were sampled corresponding to a total density of 39,445.34 eggs.100m-3 and 3,001.17 larvae.100m-3. The eggs and the larvae were present in all months and sampling stations. In relation to the fish larvae a total of 8 orders and 19 families were identified. The Engraulidae family was the most abundant (69,53%), followed by Eleotridae (7,73%) and Gobiidae (6,53%). Despite of the considerable integrity state of the Itapessoca estuary, the values of the diversity family indexes were low, in comparing to other estuarine areas. These low values can be explained by the dominance of the Engraulidae family, in all months and sampling stations. It was verified that the environment is rich in phosphate, with high levels of alkalinity; the levels of chlorophyll-a were in accordance with productive environments, but the low values of nitrite, nitrate and ammonia can indicate that nitrogen is a limiting factor of the local productivity, reflecting in the low occurrence levels of ictioplanktonic organisms at the estuarine complex of Itapessoca. / O presente trabalho foi desenvolvido no complexo estuarino de Itapessoca, litoral norte de Pernambuco (PE), entre as latitudes 07º 37 - 07º 41 S e longitudes 034º 50 - 34º 55 W, no período de abril de 2001 a abril de 2002, sendo estabelecidas em sete estações de coleta na expectativa de garantir a máxima representatividade da área de estudo. Com o objetivo de caracterizar o ambiente e a comunidade ictioplanctônica, procurou-se reconhecer as tendências de distribuição desses organismos e avaliar o papel do estuário como ambiente propício ao desenvolvimento das fases iniciais do ictiofauna local. Para tanto foram feitas medições da temperatura, salinidade e transparência da água, e coletadas amostras de água da superfície, do meio e do fundo para análise de nitrito, nitrato, fosfato dissolvido, amônia, alcalinidade e clorofila-a. As amostras do ictioplâncton foram coletadas em arrastos horizontais com auxilio de rede de plâncton cônico-cilíndrica com malha de 500 µm. Os arrastos tiveram uma duração padronizada de 10 minutos, com velocidade aproximada de dois nós. Foi calculada a diversidade específica para as larvas de peixes e os dados bióticos e abióticos foram inter-relacionados estatisticamente. Após os 13 meses de amostragem foram coletados 87.758 ovos e 6.677 larvas, correspondendo a uma densidade total de 39.445,34 ovos.100m-3 e 3.001,17 larvas.100m-3. Os ovos e as larvas estiveram presentes em todos os meses de amostragem e em todas as estações de coleta . Das larvas de peixes coletadas foram identificadas 8 ordens e 19 famílias. A família Engraulidae foi a mais abundante (69,53%), seguida de Eleotridae (7,73%) e de Gobiidae (6,53%). Apesar de o estuário de Itapessoca estar em um estado de considerável integridade, os valores estimados do índice de diversidade estimados foram baixos, quando comparados aos de outras regiões. Esta relativa baixa diversidade pode ser explicada pela dominância marcante da família Engraulidae, em todos os meses e estações de coleta. Constatou-se que o ambiente, no período estudado, caracterizou-se como sendo rico em fosfato e com altos valores de alcalinidade que podem demonstrar tendência à pH alcalino. As concentrações de clorofila-a foram condizentes com as de ambientes considerados produtivos, mas os baixos teores de nitrito, nitrato e amônia detectados podem estar indicando o nitrogênio como fator limitante da produtividade local, refletindo-se nas baixas freqüências de ocorrência de organismos ictioplanctônicos no complexo estuarino de Itapessoca.
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Avaliação dos efeitos de princípios fitoterápicos e homeopáticos no controle de Rhipicephalus (Boophilus) microplus e comparação de técnicas para estimativa de eclosão de larvas in vitro / Evaluation of the effects of phytotherapy and homeopathic principles in the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus and comparison of techniques to estimate larvae hatching in vitro

Figueiredo, Amanda [UNESP] 24 February 2017 (has links)
Submitted by AMANDA FIGUEIREDO null (ffigueiredo.amanda@gmail.com) on 2017-04-10T14:46:21Z No. of bitstreams: 1 AMANDA FIGUEIREDO_DissertaçãoMestrado1004.pdf: 2196239 bytes, checksum: 95b634a045041887f91f2979d0896cb5 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-17T17:30:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 figueiredo_a_me_jabo.pdf: 2196239 bytes, checksum: 95b634a045041887f91f2979d0896cb5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-17T17:30:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 figueiredo_a_me_jabo.pdf: 2196239 bytes, checksum: 95b634a045041887f91f2979d0896cb5 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O parasitismo por Rhipicephalus (Boophilus) microplus ocasiona grandes perdas econômicas nos rebanhos bovinos, e seu controle por meio de carrapaticidas sintéticos enfrenta problemas de resistência, além do risco de resíduos nos alimentos e ambiente. Com o objetivo de contribuir com informações relevantes para o controle desse parasita, o presente estudo teve três objetivos: 1) avaliar in vitro o efeito do óleo essencial de Ocotea elegans “canela-sassafrás” sobre larvas e fêmeas ingurgitadas de R. (B.) microplus; 2) avaliar medicamento homeopático no controle de infestações naturais; 3) comparar as técnicas de estimativa visual e de quantificação por amostragem de larvas eclodidas no teste de imersão de fêmeas adultas, visto a importância dessas no levantamento de substâncias com ação carrapaticida. No primeiro experimento “Efeito acaricida e repelente in vitro do óleo essencial de Ocotea elegans (canela-sassafrás) sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus”, foram adotados os testes: contato de larvas em papel impregnado (LPI), teste de repelência larvar (TR) e imersão de fêmeas adultas (AIT). A fim de verificar a eficácia, O. elegans foi avaliada nas concentrações de 0,78 mg/mL a 100 mg/mL. No AIT, a partir da concentração de 25 mg/mL, a eficácia foi superior a 90%. Os LPI (48h) a 100 mg/mL resultaram em taxas de mortalidade acima de 70%. Já o TR obteve repelência superior a 80% a partir da menor concentração avaliada. Em relação às concentrações letais (CL), a menor CL50 obtida no LPI foi de 25,59 mg/mL 48h pós tratamento. As CL50 e CL90 no AIT foram de 4,96 e 17,37 mg/mL e no TR de 0,04 e 1,24 mg/mL, respectivamente. Foi possível concluir que O. elegans demonstrou efeito significativo sobre fêmeas ingurgitadas e de repelência das larvas, e possivelmente pode ser um adjuvante no controle do carrapato bovino, devendo-se priorizar testes in vivo. No segundo experimento, “Estudo da homeopatia no controle de infestações naturais por R. (B.) microplus em bovinos de leite”, 24 fêmeas da raça Holandesa e Jersey x Holandesa foram divididas nos grupos controle (placebo) (n=12) e tratado (bioterápico 30 CH + Sulphur 30 CH) (n=12), administrado no concentrado (2kg/animal/dia) por 12 meses. De cada grupo coletou-se fêmeas ingurgitadas, a fim de comparar os parâmetros reprodutivos, e semi-ingurgitadas para avaliações morfo-histológicas dos ovários. Mensurou-se o peso vivo (PV), volume globular (VG) e realizou-se contagens de fêmeas ingurgitadas no corpo dos animais. Os resultados médios de PV, VG e n° de carrapatos não foram diferentes estatisticamente para os grupos controle e homeopatia: 616,5 kg e 618,6 kg, 27,9% e 27,3%, 12,19 e 13,58 carrapatos, respectivamente. Nas análises in vitro, as médias do peso das fêmeas (0,18 e 0,17 g), peso dos ovos (0,07 e 0,06 g), % de eclosão de larvas (70,1 e 76,6%) e índice de eficiência reprodutiva (54,3 e 60,6%), para os grupos controle e homeopatia, respectivamente, também não tiveram diferença estatística. Além disso, nenhuma alteração nos ovários foi observada nos estudos em foto-microscopia. Portanto, o medicamento homeopático avaliado não foi eficaz no controle de R. (B.) microplus e não interferiu nos parâmetros reprodutivos das fêmeas ingurgitadas. Finalmente, no estudo “Alternative methods for egg hatch evaluation of Rhipicephalus (Boophilus) microplus” em que comparou-se duas técnicas de estimativa de eclosão de ovos, fêmeas ingurgitadas coletadas de bovinos foram submetidas ao AIT com extratos vegetais e mantidas em incubadora para realizar a oviposição. Os ovos foram transferidos para seringas e incubados por 15 dias. A eclosão dos ovos foi avaliada em 210 seringas por estimativa visual (%) e também contadas até 100, em três repetições. Foram encontradas diferenças significativas entre os dois testes. Na estimativa visual (56,8%) a porcentagem de eclosão média foi maior do que na quantificação por amostragem (48,0%). Na quantificação por amostragem, não foram observadas diferenças estatísticas nas contagens das três amostras (48,1, 47,8 e 48,1%) e a correlação entre as repetições foi de 0,96, sugerindo que a contagem de uma amostra é suficiente e o resultado independente do avaliador. O presente estudo contribuiu com informações inéditas sobre o potencial acaricida e repelente de O. elegans. Discutiu-se que apesar do medicamento homeopático não ter tido efeito, tal conclusão não pode ser estendida a outras formulações homeopáticas, vias de aplicação e condições de manejo adversas às do presente estudo. Por fim, os resultados do estudo comparativo contribuem para o aperfeiçoamento do AIT e podem estimular os pesquisadores a optar por técnicas mais confiáveis na avaliação da eclosão de ovos. / The parasitism by Rhipicephalus (Boophilus) microplus causes large economic loss in cattle herds and its control through chemical acaricides faces problems of resistance and residues in food and in the environment. Aiming to contribute with relevant information for the control of this parasite, the present study had three objectives: 1) evaluate the effect in vitro of Ocotea elegans essential oil on larvae and engorged females of R. (B.) microplus, 2) evaluate homeopathic medicine to control R. (B.) microplus natural infestations, and 3) compare visual estimation and quantification by sampling techniques of larvae hatching in the engorged females immersion test, due to the importance of this technique in the screening of substances with antiparasitic action. In the first experiment, "In vitro acaricidal and repellent effect of Ocotea elegans essential oil on R. (B.) microplus", were adopted the tests: larval packet test (LPT), the larval repellency test (RT) and the adult immersion test (AIT). In order to verify efficacy, O. elegans was evaluated at concentrations of 0.78 mg/mL to 100 mg/mL. In the AIT, from the concentration of 25 mg/ml, the efficacies were higher than 90%. LPT (48h) at 100 mg/mL resulted in mortality rates higher than 70%. The RT obtained repellency higher than 80% sice the lowest concentration evaluated. In relation to the lethal concentrations, the lowest LC50 obtained in the LPT was 25.59 mg/mL, 48 hours post treatment. The LC50 and LC90 in the AIT were 4.96 and 17.37 mg/mL and in TR were 0.04 and 1.24 mg/mL, respectively. It was possible to conclude that O. elegans had significant effect in engorged females and larvae repellency and may be in the future an adjuvant for tick control, prioritizing in vivo tests. In the second experiment, “Study of homeopathy in the control of natural infestation of R. (B.) microplus in dairy cattle”, 24 females of the Dutch and Jersey x Dutch breed were divided in the control group (placebo) and treated (biotherapic 30 CH + Sulphur 30 CH) (n=12), administered in the concentrate at 2 kg/animal/day for 12 months. It was collected in each group engorged females to compare the reproductive parameters, and semi-engorged females for the ovaries histologic evaluation. The live weight (LW), packed cell volume (PCV) and counts of engorged females in the animals’ body were held. The average results of LW, PCV and ticks were not statistically different in the control and homeopathic groups: 616.5 kg and 618.6 kg, 27.9% and 27.3%, 12.19 and 13.58 ticks, respectively. In the in vitro analyzes, the average weight of females (0.18 and 0.17 g), egg weight (0.07 and 0.06 g), larvae hatching % (70.1 and 76.6%) and reproductive efficiency index (54.3 and 60.6%), to control and homeopatic groups, respectively, had no statistical difference as well. In addition, no changes in the ovaries were observed in microscopy. Therefore, the homeopathic medicine assessed didn’t present efficacy in the R. (B.) microplus control, and didn’t interfere in the reproductive parameters of engorged females. Finally, in the study "Alternative methods for egg hatch evaluation of Rhipicephalus (Boophilus) microplus" in which two techniques of egg hatching estimation were compared, engorged females collected from cattle were subject to the AIT with plant extracts and kept in an incubator to perform oviposition. Eggs were transferred to syringes and incubated for 15 days. Egg hatching was evaluated in 210 syringes by visual estimation (%) and also counted until 100 in three repetitions. Significant differences were found between the two tests. In the visual estimation (56.8%) the hatching percentage average was higher than in the quantification by sampling (48.0%). In quantification by sampling, no statistical differences were observed in the pairwise counts between the three samples (48.1, 47.8 and 48.1%) and, the correlation of repetitions was 0.96, suggesting that the count of one sample is sufficient and the result should not differ much, regardless of the evaluator. The present study contributed with unreleased information about the acaricide and repellent effect of O. elegans. It was discussed that despite the homeopathic medicine had not effect, such conclusion cannot be extended to other homeopathic formulations, process of application and management conditions adverse to the present study. Finally, the results of the comparative study contribute for the improvement of the AIT and may encourage researchers to choose more reliable techniques in the assessment of the egg hatching. / CNPq: 134124/2015-4
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Produção e caracterização de microparticulas obtidas por spray drying e coacervação complexa e seu uso para alimentação de larvas de peixes / Production and characterization of microparticles by spray drying and complex coacervation and its use for feeding of larvae fish

Alvim, Izabela Dutra 14 December 2005 (has links)
Orientador: Carlos Raimundo Ferreira Grosso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-05T13:49:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alvim_IzabelaDutra_D.pdf: 8886794 bytes, checksum: 16da2e8dd31802c6ce217aae14d9e70f (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A microencapsulação é uma técnica para recobrimento de substâncias para a proteção e/ou liberação controlada das mesmas. As microcápsulas podem ser uma alternativa para obtenção de uma dieta para alimentação das larvas de peixe na piscicultura intensiva. Dois métodos de microencapsulação foram empregados para produção de micropartículas, potenciais na substituição do alimento vivo (rotíferos e artêmias) oferecido às larvas de peixe nos primeiros estágios de desenvolvimento. O primeiro baseou-se na secagem em spray dryer de uma dieta líquida. Essa dieta desidratada sofreu aglomeração e recobrimento para manipulação do diâmetro médio das partículas e solubilidade. Os diâmetros médios dos aglomerados foram significativamente maiores que da dieta desidratada sem aglomeração. As solubilidades em sólidos solúveis e em proteínas solúveis da dieta sem recobrimento foram altas para 120 minutos de permanência em água. A adição de óleo à dieta desidratada e o recobrimento polimérico reduziu esses valores de solubilidade. O aspecto apresentado pela dieta desidratada sem recobrimento foi característico de produtos desidratados por spray dryer. Os aglomerados apresentaram camada de recobrimento com falhas, o que justificou as baixas diminuições de solubilidades observadas. O segundo processo de microencapsulação foi a coacervação complexa entre gelatina e goma arábica, e como recheios foram utilizados uma mistura de oleoresina de páprica e óleo de soja e dois compostos hidrofílicos (glicose ou isolado protéico de soro de leite) retidos em matrizes lipídicas sólidas. Por microscopias diversas (confocal, ótica e eletrônica de varredura) as micropartículas coacervadas se apresentaram esféricas e multinucleadas. As micropartículas coacervadas contendo oleoresina de páprica e óleo de soja foram reticuladas com glutaraldeído ou com transglutaminase, e submetidas à secagem por estufa com circulação de ar, liofilizador e spray dryer. A secagem em estufa não permitiu a obtenção de um material com micropartículas individualizadas enquanto a liofilização permitiu a manutenção da estrutura esférica para todas as amostras inclusive a sem reticulação. A secagem em spray dryer apresentou baixíssimo rendimento, e só foi possível para micropartículas reticuladas, com integridade das estruturas associada ao tipo/concentração de reticulante. A liberação da oleoresina foi avaliada em etanol absoluto por 120 minutos, para as micropartículas coacervadas úmidas com e sem reticulação e suas respectivas amostras desidratadas. A liberação do recheio foi alta (acima de 95%) para todas as amostras úmidas, exceto para a amostra reticulada com 1,0mM/g.ptn de glutaraldeído. As amostras desidratadas por liofilização tiveram liberação de seu conteúdo reduzida, não ultrapassando 35,4% após 120 minutos para todos os tratamentos. A liberação do recheio das micropartículas desidratadas por spray dryer foi baixa e proporcional a manutenção da integridade das partículas. Para veiculação dos compostos hidrofílicos nos coacervados, foram produzidas micropartículas lipídicas (spray chilling). Essas micropartículas lipídicas foram incorporadas com sucesso nos coacervados. A liberação dos compostos solúveis do interior dos coacervados foi maior para glicose que para a proteína, para 20 horas de permanência em água. A aceitação das micropartículas produzidas foi avaliada em um ensaio biológico in vivo com larvas de pacu. Foram testadas uma dieta aglomerada e quatro coacervados produzidos utilizando gelatina bovina ou gelatina de peixe na parede e óleo de soja ou gordura de peixe como recheio. O nível de aceitação das dietas foi de maiores valores para os coacervados produzidos com gelatina bovina/gordura de peixe e gelatina bovina/óleo de soja, seguidos pelo coacervado produzido com gelatina de peixe/óleo de soja, pelo aglomerado e por último o coacervado produzido com gelatina de peixe/gordura de peixe. Os coacervados produzidos com gelatina bovina contendo óleo de soja ou gordura de peixe apresentaram-se promissores como dietas necessitando ainda de ajustes nutricionais para atenderem as exigências das larvas em crescimento / Abstract: The microencapsulation is one technique for covering or evolving substances with the aim to provide protection and/or controlled release of the same ones. The microcapsules can be an alternative for attainment of a diet for feeding of the larvae of fish in the intensive aquaculture. Two methods of microencapsulation had been used for production of microparticles in the substitution of the alive food (rotifers and artemias) offered to the larvae of fish in the first periods of growing. The first one was based on the spray drying of one nutritionally and balanced liquid formulation. The dehydrated diet was agglomerated adjust the average size and solubility of the particles. The size of the agglomerated particles was increased efficiently. The solubilities in total soluble solids and soluble proteins of the diet without covering had been high with values (above 50%) for 120 minutes of permanence in water. The addition of oil to the dehydrated diet (OD) and the agglomation with pectate and calcium reduced the values of solubility. The aspect presented for the diet dehydrated without covering was characteristic of products dehydrated by spray dryer. The surface of the agglomerated particles presented some imperfections, which justified the low reductions of solubilities. The second process used was the complex coacervation between gelatin and acacia gum and as a core materials, a mixture of paprika oleoresin and vegetable soy oil and two hydrophilic composites (glucose or whey protein isolate). After, the lipidic microparticles were used as core material for microparticles obtained using complex coacervation. Using different types of microscopies (confocal, optical and scanning electronic microscopy) it was possible to characterize the coacervated microparticles that showed spherical geometry and multinuclear distribution of the core material. The microparticles containing paprika oleoresin of paprika and vegetable soy oil as core material had been crosslinked with glutaraldehyde or transglutaminase, and were dried using one oven with air circulation, spray dryer and freeze drying processes. The drying using oven did not allowed the attainment of a dry material presenting free flowing. The freeze drying, on the other side, allowed the attainment of microparticulated material showing spherical structure and free flowing for all samples including samples without cross-linking. The yield of the spray drying process was very low. This process did not work when non crosslinked samples were dried. The high level of cross-linking using 1.0mM/g of ptn showed the best results compared with transglutaminase or glutaraldehyde at 0.1mM/g of protein (reaction time of 18 hour for both) showing the maintenance of the moist microparticles structure. The release of the oleoresin was evaluated for the moist and dehydrated samples with and without crosslinking using ethanol as the release medium during 120 minutes. The core release observed was above 95% for moist coacervated without crosslinking, crosslinked using transglutaminase and for samples crosslinked with the low level of glutaraldehyde. The release level decreased when concentration of glutaraldehyde was increased. Dryed samples using freeze drying showed a great decrease on the release amount, not exceeding 35.4% after 120 minutes for all the treatments. The release of the core from the dehydrated microparticles using spray dryer was proportional to the maintenance of the integrity of particles. Again, cross-linking using high concentration of glutaraldehyde/g.ptn produced the best results.Lipídic microparticles had been incorporated successfully in the coacervated microparticles. The amount of released soluble composites using water solution was high to glucose and relative low for the protein after 20 hours of experiment. The acceptance of the microparticles was evaluated in a live biological assay using larvae of pacu. A diet agglomerated with calcium pectate and four coacervated microparticles using bovine gelatin or fish gelatin as the wall materials and vegetable soy oil or fat fish as core materials had been tested. Ranking of acceptance of the diets showed bigger values for the coacervated microparticles produced with gelatin/fat fish or gelatin/soy oil, followed by the microparticles produced with fish gelatin/soy oil, agglomerated particles and finally coacervate particles using fish gelatin/fat fish. The coacervation process showed interesting results but improvement on the nutritional balance needs to be done / Doutorado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Doutor em Alimentos e Nutrição
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Investigações morfológicas e metabólicas ao longo da ontogenia das larvas da garoupa verdadeira Epinephelus marginatus (Teleostei: Serranidae) / Morphological and metabolic investigations during the ontogeny of dusky grouper Epinephelus marginatus (Teleostei: Serranidae) larvae

Paulo Henrique de Mello 26 October 2015 (has links)
O presente projeto analisou o perfil dos ácidos graxos, embriogênese e ontogenia do sistema digestório das larvas da garoupa verdadeira Epinephelus marginatus durante os primeiros dias de desenvolvimento. Além disso, descrevemos como os embriões se dividem, eclodem e desenvolvem suas principais características, e como se desenvolve seu sistema digestório ao longo dos primeiros dias de desenvolvimento, e como utilizam os AG durante os primeiros 8 dias de desenvolvimento. Observamos que as larvas da garoupa apresentam desenvolvimento de suas estruturas digestórias relativamente lento, no entanto, estas são capazes de capturar, ingerir e digerir presas já a partir do 4º DAE. Os ovos da garoupa verdadeira são compostos por elevados percentuais de PUFA nos fosfolipídios e para o processo de eclosão utilizam preferencialmente os SFA dos fosfolipídios. Além disso, os PUFA da série n3 sobrepõe-se aos da série n6, principalmente o DHA, que apresentaram valores elevados em comparação com outras espécies marinhas tanto nos fosfolipídios quanto nos triglicérides nos três primeiros dias de desenvolvimento. As larvas apresentam uma elevada necessidade dos HUFAs DHA/EPA, e durante essa fase é importante a utilização de alimento vivo de tamanho reduzido (copépodes ou “SS strain” Brachionus rotundiformes) enriquecidos com valores da relação entre DHA/EPA acima de 2,0. Com isso, todo o conhecimento gerado durante esses dias de desenvolvimento já permitem a aplicação deste conhecimento no processo de embriogênese e larvicultura da garoupa verdadeira contribuindo para alavancar sua domesticação e produção em cativeiro e elaborar futuramente um programa de repovoamento desta espécie contribuindo para sua conservação. / This project analyzed the fatty acids profile, embryogenesis and ontogeny of the digestive system of dusky grouper Epinephelus marginatus larvae during the first days of development. Furthermore, we described how the embryos are divided, hatch and develop its main features, and how develops its digestive system during the first days of development, and how they use the FA during the first 8 days of development. We observed that the grouper larvae present relative slow development of their digestive structures, however, the larvae are able to capture, ingest and digest preys already from 4º DAE. The dusky grouper eggs are composed by high percentages of PUFA in phospholipids and for the hatching process it uses preferably the SFA of phospholipids. Additionally, the n3 series PUFAs overlaps the n6 series, especially DHA, which exhibited high values compared to other marine species both on phospholipids as in the triglycerides during the first three days of development. The larvae exhibit a high requirement of HUFAs DHA/EPA, and during this phase is important to use live food of small size (copepods or “SS strain” Brachionus rotundiformes) enriched with the ratio of DHA/EPA levels above 2.0. Thus, all the knowledge generated during these days of development allow us the application of this knowledge in the embryogenesis and hatchery process of the dusky grouper contributing to leverage its domestication and production in captivity and eventually draw up a restocking program of this species contributing to their conservation.
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Limiar de detecção de larvas de Toxocara canis em leite bovino experimentalmente contaminado / Limit of detection of Toxocara canis larvae in experimentally contaminated bovine milk

Pereira, Edlayne Larissa Gretter Machado 27 March 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Edlayne Larissa Gretter Machado Periera.pdf: 352357 bytes, checksum: a92ace5bfa90617b05e3cdaa7e4de894 (MD5) Previous issue date: 2015-03-27 / This study aimed to evaluate the limit of detection of Toxocara canis larvae in experimentally contaminated commercial bovine milk, based on a centrifuge-sedimentation technique. Firstly, bovine milk (integral and skim) samples were contaminated with 50 T. canis larvae, in order to evaluate the interference of milk fat on the recovery of the larvae. The second step of the study was to verify the influence of formalin 10% (100 µL), ether (100 µL) and combination of both solutions. The third step consisted of studying the limit of detection of larvae, using the best solution (step 2) for degreasing the milk. Samples were contaminated with aliquots of 1; 5; 10; 25 and 50 larvae. For each milk sample (1.0 mL), 15 repetitions were analyzed. It was observed that the recovery of the larvae from the skim milk was higher (p= 0.0031) than those from the integral milk. There was no significant difference (p= 0.5681) regarding the percentage of recovered larvae in comparing the degreasing solutions. Nevertheless, the formalin-ether combination was more efficient to recover the larvae (73.1%) in comparison to the ether (71.9%), the pure integral milk (70.0%) as well as the formalin (67.6%). Concerned to the limit of detection (using formalin-ether), all the samples contaminated with 5; 10; 25 and 50 larvae were positive (minimum: 62.7%). The samples contaminated with a single larva, 66.7% were positive. The technique may be useful for recovering Toxocara spp. larvae in milk samples of a wide range of animal species, either naturally or experimentally contaminated. / O objetivo do estudo foi avaliar o limiar de detecção de larvas de Toxocara canis em leite bovino comercial contaminado experimentalmente, a partir de uma técnica de centrifugo-sedimentação. Primeiramente, amostras de leite bovino comercial (integral e desnatado) foram contaminadas com 50 larvas de T. canis, para avaliação da interferência da gordura sobre a recuperação das larvas. Em uma segunda etapa, foi avaliada a ação de formalina 10% (100 µL), éter (100 µL) e combinação das soluções. A terceira etapa consistiu da verificação do limite de detecção de larvas, com uso da melhor solução desengordurante (etapa 2), em amostras de leite (1,0 mL) contendo 1; 5; 10; 25 e 50 larvas. Para cada análise de detecção do leite (1,0 mL), foram realizadas 15 repetições. Foi observado que o percentual de recuperação de larvas no leite desnatado foi significativamente maior (p= 0,0031) que o observado no leite integral. Na comparação das soluções, não houve diferença significativa (p= 0,5681) no percentual de larvas recuperadas. Entretanto, houve uma maior recuperação quando do emprego da combinação de formol-éter (73,1%) em relação ao éter (71,9%), leite integral puro (70,0%) e ao formol (67,6%). Em relação ao limite de detecção, com uso de formalina-éter, todas as alíquotas apresentaram resultado positivo (mínimo de 62,7% de larvas recuperadas), para as amostras com 5, 10, 25 e 50 larvas. Nas amostras contaminadas com uma larva, 66,7% das alíquotas foram positivas. A técnica apresentada poderá servir para recuperação de larvas de Toxocara spp. em amostras de leite de várias espécies animais, contaminados naturalmente ou experimentalmente.
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Limiar de detecção de larvas de Toxocara canis em leite bovino experimentalmente contaminado / Limit of detection of Toxocara canis larvae in experimentally contaminated bovine milk

Pereira, Edlayne Larissa Gretter Machado 27 March 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Edlayne Larissa Gretter Machado Periera.pdf: 352357 bytes, checksum: a92ace5bfa90617b05e3cdaa7e4de894 (MD5) Previous issue date: 2015-03-27 / This study aimed to evaluate the limit of detection of Toxocara canis larvae in experimentally contaminated commercial bovine milk, based on a centrifuge-sedimentation technique. Firstly, bovine milk (integral and skim) samples were contaminated with 50 T. canis larvae, in order to evaluate the interference of milk fat on the recovery of the larvae. The second step of the study was to verify the influence of formalin 10% (100 µL), ether (100 µL) and combination of both solutions. The third step consisted of studying the limit of detection of larvae, using the best solution (step 2) for degreasing the milk. Samples were contaminated with aliquots of 1; 5; 10; 25 and 50 larvae. For each milk sample (1.0 mL), 15 repetitions were analyzed. It was observed that the recovery of the larvae from the skim milk was higher (p= 0.0031) than those from the integral milk. There was no significant difference (p= 0.5681) regarding the percentage of recovered larvae in comparing the degreasing solutions. Nevertheless, the formalin-ether combination was more efficient to recover the larvae (73.1%) in comparison to the ether (71.9%), the pure integral milk (70.0%) as well as the formalin (67.6%). Concerned to the limit of detection (using formalin-ether), all the samples contaminated with 5; 10; 25 and 50 larvae were positive (minimum: 62.7%). The samples contaminated with a single larva, 66.7% were positive. The technique may be useful for recovering Toxocara spp. larvae in milk samples of a wide range of animal species, either naturally or experimentally contaminated. / O objetivo do estudo foi avaliar o limiar de detecção de larvas de Toxocara canis em leite bovino comercial contaminado experimentalmente, a partir de uma técnica de centrifugo-sedimentação. Primeiramente, amostras de leite bovino comercial (integral e desnatado) foram contaminadas com 50 larvas de T. canis, para avaliação da interferência da gordura sobre a recuperação das larvas. Em uma segunda etapa, foi avaliada a ação de formalina 10% (100 µL), éter (100 µL) e combinação das soluções. A terceira etapa consistiu da verificação do limite de detecção de larvas, com uso da melhor solução desengordurante (etapa 2), em amostras de leite (1,0 mL) contendo 1; 5; 10; 25 e 50 larvas. Para cada análise de detecção do leite (1,0 mL), foram realizadas 15 repetições. Foi observado que o percentual de recuperação de larvas no leite desnatado foi significativamente maior (p= 0,0031) que o observado no leite integral. Na comparação das soluções, não houve diferença significativa (p= 0,5681) no percentual de larvas recuperadas. Entretanto, houve uma maior recuperação quando do emprego da combinação de formol-éter (73,1%) em relação ao éter (71,9%), leite integral puro (70,0%) e ao formol (67,6%). Em relação ao limite de detecção, com uso de formalina-éter, todas as alíquotas apresentaram resultado positivo (mínimo de 62,7% de larvas recuperadas), para as amostras com 5, 10, 25 e 50 larvas. Nas amostras contaminadas com uma larva, 66,7% das alíquotas foram positivas. A técnica apresentada poderá servir para recuperação de larvas de Toxocara spp. em amostras de leite de várias espécies animais, contaminados naturalmente ou experimentalmente.

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