Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2014-10-20T17:43:26Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Priscilla Carolinne Bagano Vilas Boas.pdf: 1837183 bytes, checksum: 784433b804bcd85b98b7c4fdf2b6a40f (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-20T17:43:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Priscilla Carolinne Bagano Vilas Boas.pdf: 1837183 bytes, checksum: 784433b804bcd85b98b7c4fdf2b6a40f (MD5) / FAPESB / Corynebacterium pseudotuberculosis é o agente etiológico de diversas doenças crônicas infecto-contagiosas em diferentes espécies de mamíferos, sendo a linfadenite caseosa a mais importante delas, encontrada em caprinos e ovinos. Esta patologia leva à formação de granulomas nos linfonodos superficiais e internos, e em alguns órgãos como os pulmões, fígado e baço, acarretando em diversas perdas econômicas para a caprino-ovinocultura. Neste trabalho, camundongos BALB/c foram imunizados com proteínas de um antígeno somático hidrofóbico extraído de uma linhagem virulenta de C. pseudotuberculosis. Os esplenócitos obtidos foram fusionados com células mielomatosas da linhagem SP2/0 e os hibridomas produzidos através desta fusão foram submetidos a testes de ELISA para identificação dos clones produtores de anticorpos específicos para o antígeno somático hidrofóbico. Foram selecionados quatro clones, posteriormente injetados intraperitonialmente em camundongos BALB/c, para produção de líquido ascítico. Os líquidos ascíticos foram testados por western blotting, usando o antígeno somático hidrofóbico submetido à eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) a 12,5 e 15%. Em SDS-PAGE a 12,5% todos os líquidos obtidos reconheceram duas bandas, com pesos moleculares estimados em 31 e 34 kDa e o clone 3-12C CL9A, também reconheceu uma banda com peso molecular de 19 kDa. Em SDS-PAGE a 15%, o clone 1-6G CL10 manteve o reconhecimento de apenas duas bandas de 31 e 34 kDa. Os demais apresentaram reconhecimento de outras bandas, além destas duas. Bandas proteicas com pesos moleculares similares aos aqui encontrados, já foram descritas na literatura em estudos realizados com soro de caprinos e ovinos infectados por C. pseudotuberculosis. Os anticorpos produzidos neste trabalho possuem potencial para utilização em imunoensaios, visando o aprofundamento de estudos sobre a relação micro-organismo hospedeiro, assim como a possibilidade de produção de um kit para o diagnóstico da infecção

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-15. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:10Z : No. of bitstreams: 1 000870617.pdf: 699760 bytes, checksum: d53af1d75b85732b5ff9277249a531f1 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Recent years have seen a growing interest in sheep for meat production, mainly in São Paulo Northwest. In order to achieve greater productivity, greater food security and decreased expenditures and stemmed losses of diseases it is essential to recognize these problems, so that we can trace combat strategies of these, in addition to establishing preventive measures, so that you can reduce economic losses, maximize profits and provide a safe food. Through detailed analysis of questionnaires, direct observation in properties and sampling was done to characterize the sheep flock of micro-Araçatuba-SP, which is composed of seven municipalities. The animals were submitted to clinical and general examination by history, inspection and palpation, appropriate notes being made for the conditions of health, reproductive and nutritional management of these animals in their properties. During the visits to the properties they were made fecal collection of the rectum for monitoring by counting eggs per gram. Also punctures were performed nodules, when detected palpation for microbial culture. RESULTS: A lymphadenitis 50% history of properties, but was found in only 8.3% of these. Got an association between lymphadenitis history and mortality (p = 0.0693). It was found a history of foot problems in 91.6% of the properties was observed in 50% of them. It was found that foot problems and conducting foot baths are related (p = 0.0455). A mastitis history was obtained in 41.6% of properties, which was observed in 25% of them. About contagious ecthyma, it was reported by 25% of the properties, however, was not observed during the physical examination. The properties in its entirety declared conduct immunization against clostridial diseases. 25% had other types of vaccines. In 91.6% of the properties animals were observed with symptoms of worms. The Fisher exact test showed association between mortality...(complete abstract, electronic access below) / FAPESP: 2013/144336

Orientador: Jane Megid / Banca: Adriana Cortez / Banca: Júlio Cesar de Freitas / Resumo: A carne suína é a fonte de proteína de origem animal mais consumida no mundo, tendo o Brasil como o quarto maior produtor e exportador. A brucelose é uma das mais importantes e amplamente distribuidas zoonoses mundial. A prevenção da brucelose humana depende do controle da doença nos animais. O diagnóstico definitivo é o isolamento da bactéria, porém técnicas de biologia molecular permitem a detecção do agente e diferenciação em espécies e biótipos reduzindo o tempo necessário para o diagnóstico final. Os programas de controle e erradicação utilizam os testes sorológicos para o diagnóstico da doença existindo, no entanto, variação quanto ao tipo de teste utilizado de acordo com diferentes países e pesquisadores. No Brasil relatos de soropositividade para brucelose em suínos variam de zero a 100% de acordo com a região, amostragem e metodologia utilizada, porém estudos da enfermidade em suideos com lesões de linfadenite não são encontrados. Este trabalho pretende descrever a situação epidemiológica da brucelose em suínos no Brasil, avaliar os meios de cultura ágar Brucella, CITA e Farrell para isolamento desta bactéria e detectar a presença do agente em linfonodos de suínos e javalis, com linfadenite, abatidos em frigoríficos no estado de São Paulo, e destinados ao consumo humano / Abstract: Pork is the most consumed source of animal protein in worldwide. Brucellosis is one of the most important and worldwide distributed zoonosis. The prevention of human brucellosis depends on controlling the disease in animals. The bacteria isolation is the standard technique but new molecular methods allow the detection and differentiation the agent in species and biotypes reducing the time required for the final diagnosis. The control and eradication programs are based in serological tests for the diagnosis, however, variation in these tests according to different countries and researchers are common. In Brazil reports for seropositivity in swine range from zero to 100% depending on region, sampling and methodology, but studies of the disease in suidae with lymphadenitis are not found. This study aims to describe the epidemiological situation of brucellosis in pigs in Brazil and evaluate Brucella agar, CITA and Farrell culture media for isolation of the bacteria and to detect the presence of the agent in lymph nodes of pigs and boars with lymphadenitis slaughtered in the state of São Paulo and sent for human consumption / Mestre

Resumo:Nos últimos anos houve um crescente interesse na criação de ovinos para a produção de carne, principalmente na região Noroeste do Estado de São Paulo. A fim de se obter maior produtividade, maior segurança alimentar e diminuição de gastos e perdas provindos de enfermidades torna-se imprescindível o reconhecimento de tais problemas, para que se possa traçar estratégias de combate e prevenção destes. Por meio de análise detalhada de questionários, observação direta em doze propriedades e coleta de amostras de 633 animais, foi feita a caracterização do rebanho ovino da microrregião de Araçatuba-SP, que é composta por sete municípios. Os animais foram submetidos ao exame clínico-geral, por meio da anamnese, inspeção e palpação, sendo feitas as devidas anotações quanto às condições de manejo sanitário, reprodutivo e nutricional desses animais em suas respectivas propriedades. Durante as visitas às propriedades foram feitas as coletas de fezes da ampola retal para acompanhamento por contagem de ovos por grama. Também foram realizadas punções de nódulos, quando detectados a palpação, para cultura microbiana. Constatou-se um histórico de linfadenite em 50% das propriedades, porém houve identificação da doença em apenas 8,3% destas. Constatou-se um histórico de afecções podais em 91,6% das propriedades, observou-se em 50% delas. Um histórico de mastite foi obtido em 41,6% das propriedades, a qual foi observada em 25% delas. Sobre ectima contagioso, foi relatado por 25% das propriedades, porém, não foi observado durante os exames físicos. As propriedades em sua totalidade declararam realizar vacinação contra clostridioses. 25% realizavam outros tipos de vacinas. Em 91,6% das propriedades foram observados animais com sintomatologia de verminose. Práticas de higienização das instalações e ambientes e técnicas de manejo sanitário eram adotadas em...(resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract:Recent years have seen a growing interest in sheep for meat production, mainly in São Paulo Northwest. In order to achieve greater productivity, greater food security and decreased expenditures and stemmed losses of diseases it is essential to recognize these problems, so that we can trace combat strategies of these, in addition to establishing preventive measures, so that you can reduce economic losses, maximize profits and provide a safe food. Through detailed analysis of questionnaires, direct observation in properties and sampling was done to characterize the sheep flock of micro-Araçatuba-SP, which is composed of seven municipalities. The animals were submitted to clinical and general examination by history, inspection and palpation, appropriate notes being made for the conditions of health, reproductive and nutritional management of these animals in their properties. During the visits to the properties they were made fecal collection of the rectum for monitoring by counting eggs per gram. Also punctures were performed nodules, when detected palpation for microbial culture. RESULTS: A lymphadenitis 50% history of properties, but was found in only 8.3% of these. Got an association between lymphadenitis history and mortality (p = 0.0693). It was found a history of foot problems in 91.6% of the properties was observed in 50% of them. It was found that foot problems and conducting foot baths are related (p = 0.0455). A mastitis history was obtained in 41.6% of properties, which was observed in 25% of them. About contagious ecthyma, it was reported by 25% of the properties, however, was not observed during the physical examination. The properties in its entirety declared conduct immunization against clostridial diseases. 25% had other types of vaccines. In 91.6% of the properties animals were observed with symptoms of worms. The Fisher exact test showed association between mortality...(complete abstract, electronic access below) / Orientador:Luiz Cláudio Nogueira Mendes / Banca:Vera Cláudia Lorenzetti Magalhães Curci / Banca:Luzia Helena Queiroz / Mestre

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-03T15:31:11Z No. of bitstreams: 1 Silvio Romero de Oliveira Abreu.pdf: 293479 bytes, checksum: 1d92e8e4a790a3674cda0778689b8d8c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-03T15:31:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silvio Romero de Oliveira Abreu.pdf: 293479 bytes, checksum: 1d92e8e4a790a3674cda0778689b8d8c (MD5) Previous issue date: 2007-02-05 / The main purpose of this study was to compare genotypically samples of Corynebacterium pseudotuberculosis obtained from the abscesses of sheep and goats diagnosed with caseous lymphadenitis proceeding from the semi-arid region of Pernambuco, Brazil. The RFLP-PCR technique was used to fingerprint the genes rpoB and pld, with the restriction enzymes Hpy-Ch4 and MspI; and PstI and MspI applied, respectively. The banding pattern observed through eletrophoreses was similar in all samples for both genes studied, independently of the restriction enzyme utilized. The in vitro sensitivity profile was also analyzed by testing the samples with 14 different antimicrobials. Initially, the contents of the abscesses were cultivated in blood-agar and the isolated colonies obtained were identified using the API-Coryne biochemical identification kit (Bio-Merieux, France), and selecting Gram-positive and nitrate-negative samples, which were classified as Corynebacterium pseudotuberculosis. The disk diffusion technique was used to perform antibiogramsand the results showed that 96.8% of the samples were sensitive to chloramphenicol and ciprofloxacin; 93.5% were sensitive to norfloxacin and cefazolin; 90.3% to amoxicillin and tetracycline; 87.1% to sulfa-trimethoprim; 83.9% to orbifloxacin; 77.4% to ampicillin, lincomycin and penicillin; 32% to gentamicin; 12.9% to novobiocin and 9.7% to neomycin. It was also noted that 87.1% of the samples were resistant to novobiocin; 80.6% to neomycin; 41.9% to gentamicin; 19.3% to lincomycin; 16.1% to ampicillin, orbifloxacin and penicillin; 12.9% to sulfatrimethoprim; 6.4% to cefazolin, norfloxacin and amoxicillin, and 3.2% to ciprofloxacin, chloramphenicol and tetracycline. For all samples, with the exception of one, was found some degree of multiple resistances with 16% of them being multiresistant to approximately 50% of the antimicrobial drugs tested. Based on those results, it is possible to conclude that there is a phenotypic variation among the samples analyzed, which could be associated to one or more resistance genes. Thegenotypic results did not demonstrate any difference on the band fragmentation pattern among the samples when analyzing the genes pld and rpoB, regardless of the host species origin or geographic area, indicating a homogeneous genotypic profile of the infection in the region of study. / Objetivou-se com este estudo comparar genotipicamente amostras de Corynebacterium pseudotuberculosis recuperadas do conteúdo de abscessos de caprinos e ovinos com linfadenite caseosa procedentes do Sertão de Pernambuco, Brasil. Utilizou-se a técnica de fingerprint RFLP-PCR aplicadas aos genes rpoB e Pld. Os genes foram tratados com Hpy-Ch 4 e Msp I e Pst I e Msp I, respectivamente.Os perfis de restrição observados foram semelhantes entre todas as amostras para os dois genes estudados. Avaliou-se o perfil de sensibilidade in vitro frente a 14 antimicrobianos. Inicialmente o conteúdo dos abscessos foi cultivado em ágar-sangue e as colônias isoladas foram identificadas pelo kit de identificação bioquímico API-Coryne (Bio-Merieux – França), sendo selecionadas as amostras Gram-positivas e nitrato-negativas, classificadas como C. pseudotuberculosis. Para a realização dos antibiogramas, utilizou-se a técnica de difusão em discos. A sensibilidade aos antimicrobianos demonstram que 96,8% das amostras foramsensíveis ao cloranfenicol e ciprofloxacina; 93,5% a norfloxacina e cefazolina; 90,3% a amoxicilina e tetraciclina; 87,1% a sulfa-trimetoprim; 83,9% a orbifloxacina; 77,4% a ampicilina, lincomicina e penicilina; 32% a gentamicina; 12,9% a novobiocina e 9,7% a neomicina. Quanto à resistência, 87,1% das amostras foram resistentes à novobiocina; 80,6% a neomicina; 41,9% a gentamicina; 19,3% a lincomicina; 16,1% a ampicilina, orbifloxacina e penicilina; 12,9% a sulfa-trimetoprim; 6,4% a cefazolina, norfloxacina e amoxicilina e 3,2% a ciprofloxacina, cloranfenicol e tetraciclina. Com exceção de uma amostra todas as demais apresentaram algum grau de resistência múltipla, sendo que 16% delas foram multirresistentes a aproximadamente 50% dos antimicrobianos testados. Concluiu-se que apesar de existir uma variação fenotípica entre as amostras analisadas que pode estar associada a um ou mais genes de resistência, os resultados da genotipagem demonstram não haver qualquer diferença nos padrões de fragmentos de bandas entre as amostras para os genes pld e rpoB, independente da origem da espéciehospedeira ou da área geográfica, indicando um padrão genotípico homogêneo de infecção na região estudada.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_andrea_silva_rezende.pdf: 962700 bytes, checksum: df4059413746b2684f76e1ecfa28b49b (MD5) Previous issue date: 2013-08-23 / The caseous lymphadenitis (CLA) is a disease that affects mainly small ruminants and is caused by the bacteria Corynebacterium pseudotuberculosis. In Brazil the clinical prevalence CLA is 30%. The control measures are vaccination and diagnosis of infected animals. Currently, commercial vaccines are not completely effective, the same occur with the methods of diagnosis, because the medical signs are not immediately detectable. By sequencing and additional proteomic analysis, several targets were identified, including cp1002_0369 gene, which codifies a secreted protein which is probably described as a potentially antigenic phosphoesterase, that can subsequently be used in the development of recombinant vaccines and development of diagnostic tests. This protein was used as recombinant and it was tested as subunit vaccine and as a DNA vaccine and also to develop a diagnostic test based on ELISA. For this, the cp1002_0369 gene was cloned in the eukaryotic expression vector pTARGET and in a vector of expression in prokaryotes pAE. The recombinant protein CP0369 was purified and evaluated as a recombinant vaccine associated with both of the adjuvants xanthan and aluminum hydroxide and then measured in an indirect ELISA with sheep serum. The immunoprotective potential was assessed in a murine model by challenge with 104 CFU of strain Mic-6 of C. pseudotuberculosis in 9 vaccinal groups. The vaccine formulation that increased the survival rate of animals after challenge was the group containing the recombinant protein (rCP0369 + aluminum hydroxide). The ELISA for diagnostic of CL was evaluated by ROC analysis of 182 sera and showed a sensitivity and specificity of 90% and 75.6%, respectively. The format of ELISA assay (ELISA-rCP0369) can be used in the diagnosis of LC sheep herds with a good sensitivity index. However, new vaccine strategies employing the CP0369 protein will be evaluated to improve the effectiveness of the vaccine. / A linfadenite Caseosa (LC) é uma doença que acomete principalmente pequenos ruminantes sendo causada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis. No Brasil a prevalência clínica da LC é de 30%. As medidas de controle são a vacinação e o diagnóstico dos animais infectados. As vacinas disponíveis comercialmente não são totalmente eficazes, o mesmo ocorre com os métodos de diagnóstico, pois os sinais clínicos não são perceptíveis de imediato. Através de sequenciamento e da análise proteômica complementar foram identificados vários alvos, dentre eles o gene cp1002_0369, que codifica para uma proteína secretada sendo esta descrita provavelmente como uma fosfoesterase, potencialmente antigênica, a qual pode vir a ser utilizada no desenvolvimento de vacinas recombinantes e no desenvolvimento de testes de diagnóstico. Esta proteína foi utilizada na forma recombinante como vacina de subunidade e como vacina de DNA e também para o desenvolvimento de um teste de diagnóstico baseado em ELISA. Para isso o gene cp1002_0369 foi clonado no vetor de expressão em eucariotos pTARGET e de expressão em procariotos pAE. A proteína CP0369 recombinante foi purificada e avaliada como vacina recombinante associada aos adjuvantes xantana e hidróxido de alumínio e em um ELISA indireto com soros de ovinos. O potencial imunoprotetor foi avaliado em modelo murino através de desafio com a 104 UFC da cepa Mic6 de C. pseudotuberculosis em 9 grupos vacinais. A formulação vacinal que aumentou a taxa de sobrevida dos animais após o desafio foi o grupo contendo a proteína recombinante (rCP0369 + hidróxido de alumínio). O ELISA para diagnóstico de LC foi avaliado através da análise ROC em um total de 182 soros revelou uma sensibilidade e a especificidade de 90% e 75,6%, respectivamente. O formato de ELISA (ELISA-rCP0369) pode ser utilizado no diagnóstico de LC em rebanhos ovinos com bom índice de sensibilidade. No entanto, novas estratégias vacinas empregando a proteína CP0369 serão avaliadas para melhorar a eficácia da vacina.

Submitted by LIEGE ABDALLAH KAWAI null (liegekawai@gmail.com) on 2017-12-13T13:56:50Z No. of bitstreams: 1 liege kawai - tese final.pdf: 5173025 bytes, checksum: 74d38826e72cc45ba04c0050ac6a409b (MD5) / Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2017-12-13T14:57:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 kawai_la_dr_sjrp.pdf: 5173025 bytes, checksum: 74d38826e72cc45ba04c0050ac6a409b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-13T14:57:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 kawai_la_dr_sjrp.pdf: 5173025 bytes, checksum: 74d38826e72cc45ba04c0050ac6a409b (MD5) Previous issue date: 2017-11-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Corynebacterium pseudotuberculosis (C. pseudotuberculosis), é uma bactéria gram positiva anaeróbia facultativa, pleomórfica, que não esporula, não forma cápsula, e que apresenta 2 biotipos ou biovares, sendo o biovar equi capaz de infectar preferencialmente equinos, enquanto o biótipo denominado ovis acomete pequenos ruminantes. Esta bactéria faz parte do grupo CMNR (Corynebacterium, Mycobacterium, Nocardia e Rhodococcus), que demonstra grande importância veterinária e médica, uma vez que estes micro-organismos comumente infectam animais, podendo infectar o homem, causando perdas econômicas pela ineficácia ou alto custo de terapias existentes. Um exemplo seria a linfadenite caseosa (LC) causada por C. pseudotuberculosis, que afeta particularmente a pecuária de caprinos e ovinos, com a condenação da carcaça e redução da produção de lã e de carne. A transmissão da doença e contágio dos animais é direta, muitas vezes através da alimentação e ingestão de água em local contaminado por animais doentes. Essa doença possui incidência na pecuária mundial, principalmente de caprinos e ovinos, havendo registros de ocorrência no Brasil, Europa, Oriente Médio, Austrália, Nova Zelândia, África do Sul, Canadá e Estados Unidos e mesmo com todos os avanços tecnológicos, ainda não há métodos de prevenção totalmente eficazes, como vacinas e medicamentos, tampouco para o tratamento de animais infectados, que geralmente são de custo elevado, por longos períodos e sem a garantia de cura ou de isenção de reincidência da LC. Deste modo, técnicas mais rápidas e fáceis para detecção e diagnóstico da doença, bem como para seu tratamento, se tornam imprescindíveis, evitando não só a disseminação da doença, mas também suas consequentes perdas econômicas. Atualmente, devido ao uso indiscriminado de antibióticos para o tratamento de infecções de origem bacteriana, bem como à constante exposição destes micro-organismos a essas drogas em ambientes hospitalares, observa-se o desenvolvimento de micro-organismos resistentes às terapias disponíveis, sendo um desafio mundial a descoberta e elaboração de tratamentos eficazes para a prevenção, controle e eliminação destes patógenos, como alternativa aos já existentes. Visando terapias alternativas e direcionadas para infecção por C. pseudotuberculosis, as proteínas tioredoxina, tioredoxina redutase e diphtheria toxin repressor foram estudadas no presente trabalho, a fim de melhor compreender este micro-organismo. / Corynebacterium pseudotuberculosis (C. pseudotuberculosis), is a gram-positive, facultative anaerobe, pleomorphic, non-sporulating bacterium with two biotopes or biovars, being the biovar equi capable of infecting horses, whereas the biotype called ovis infects small ruminants. It is part of the CMNR group (Corynebacterium, Mycobacterium, Nocardia and Rhodococcus), which demonstrates great veterinary and medical importance, since these common microorganisms infect animals and can infect humans, causing economic losses due to the inefficiency or high cost of existing therapies. An example is a caseous lymphadenitis (LC) caused by C. pseudotuberculosis, which particularly affects the goats and sheep livestock, with carcass condemnation and reduction of wool and meat production. The transmission of disease and the contagion of animals is direct, often through feeding and drinking water in places contaminated by sick animals. This disease has an incidence in the world livestock, mainly of goats and sheep, with occurrence records in Brazil, Europe, the Middle East, Australia, New Zealand, South Africa, Canada and the United States and even with all technological advances, still there are no totally effective prevention methods, such as vaccines and medications, nor for the treatment of infected animals, which are usually of a high cost, for long periods and without guarantee of cure or exemption from recurrence of LC. In this way, faster and easier techniques for the detection of the diagnosis of this disease as well as for its treatment become essential, avoiding not only a spread of the disease, but also its consequent economic losses. Currently, the use of indiscriminate antibiotics for the treatment of infections of bacterial origin, as well as the constant exposure of these microorganisms to these drugs in hospital environments, shows the development of microorganisms resistant to the available therapies, being one world-wide challenge the elaboration of effective treatments for the prevention, control and elimination of these pathogens, as an alternative to the existing ones. Aiming alternative therapies for infection by C. pseudotuberculosis, proteins such as thioredoxin, thioredoxin reductase, diphtheria toxin repressor, were studied in the present work, for a better comprehension of this microorganism.

Para avaliar a fagocitose de células da série monócitos-macrófagos de cabras naturalmente infectadas pelo vírus da artrite encefalite caprina a vírus (VAEC), 30 cabras da raça Saanen foram utilizadas e alocadas em dois grupos distintos, sendo um grupo formado por 15 animais soropositivos à imunodifusão em gel de ágar para detecção de anticorpos séricos antivírus da AEC e o outro formado por 15 animais soronegativos ao teste. Células mononucleares de sangue periférico foram isoladas por gradiente de concentração e plaqueadas em placas de poliestireno para isolamento de células da série monócito-macrófago. Após adesão das mesmas, adicionou-se a bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis como desafio antigênico. Dois tipos de fagocitose foram observados em relação ao número de bactérias internalizadas nos vacúolos citoplasmáticos dos macrófagos, isto é, verificou-se a presença de células fagocitando em média 12 bactérias e outro grupo fagocitando um número incontável de bactérias. Dessa forma, classificou-se a fagocitose em fagocitose + (até 12 bactérias) e fagocitose ++ (mais de 12 bactérias). Em relação à fagocitose total (fagocitose + e fagocitose ++) não foram verificadas diferenças estatística significativas entre os grupos experimentais (p < 0,41). Todavia, ao discriminar a fagocitose conforme a quantificação de bactérias fagocitadas, encontrou-se diferença estatística entre os grupos, sendo que o grupo positivo apresentou maior porcentagem de fagocitose ++ (p < 0,001). O grupo negativo apresentou maior porcentagem de fagocitose + (p < 0,012). Correlação positiva entre monócitos fagocitando e fagocitose ++ foi observada no grupo de animais soropositivos (p < 0,006), porém, não foi observada nenhuma correlação no grupo negativo (p < 0,49). Esses resultados demonstram uma possível alteração na intensidade da fagocitose de macrófagos de animais infectados com o VAEC, sugerindo que os animais com artrite encefalite caprina estejam mais susceptíveis à linfadenite caseosa. / To evaluate the phagocytosis from monocyte-macrophage line cells 30 naturally infected Saanen goats with caprine arthritis-encephalitis vírus (VCAE) were used, and divided uniformly in different groups according to agar gel immunodiffusion test (AGID). Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) was isolated by density gradient centrifugation. The monocyte-macrophage cells were separated from PBMC by their adherence properties. Afterwards, the phagocytosis function was assessed by phagocytosis assay using Corynebacterium psudotuberculosis as a source of antigen. Therefore, two distinct types of phagocytosis were observed and were set according to the number of bacteria within the cytoplasmatic vacuoles. Thus, the phagocytosis rates were also divided in two groups, on the first was observed up to 12 bacteria in the vacuoles; on the other hand in the second group an uncountable number of bacteria were usually seen. Consequently, the phagocytosis rates were also divided in phagocytosis + (up to 12 bacteria) and phagocytosis ++ (more than 12 bacteria). The results from the phagocytosis rates show any difference, however when the phagocytosis rates were separated in the order of the number of Corynebacterium pseudotuberculosis phagocyted, the phagocytosis ++ from positive animals in the sera test were higher than the negative one (p < 0.001). Nevertheless, the negative group presents higher pahgocytosis + (p < 0.012). Furthermore a positive and significant correlation between phagocytosis ++ and monocyte phagocytosis (p < 0.006) were also encountered in the positive animals, however the same were not observed in the negative group (p < 0.49). In face of, the results from the present trial point out to higher susceptibility to caseous linphadenitis in goats infected with VCAE due to the alteration on the phagocytosis strength in these animals.

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LeiseGF_DISSERT.pdf: 911224 bytes, checksum: 2b33fb730a32f99a89b61b150f1d1b49 (MD5) Previous issue date: 2011-08-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of this study was to describe characteristics of systems creations of goats and sheep farming exhibitions of participants, and to study the occurrence of Brucella ovis infections in sheep and lentivirus, and leptospirosis caseous lymphadenitis in goats and sheep and their risk factors. Carried out 64 questionnaires, examined 327 sera from 246 goats and sheep. The worms, foot pad dermatitis and lymphadenitis were more health problems reported by producers. The sanitary practices adopted, in general, are little used in the properties of goats and sheep. The semi-intensive system (67.7%) is the most used and 71% of producers buy animals from other places. The frequency of seropositive sheep B. ovis was 28% accounting for 71.9% of farms with sheep positive for B. ovis in the study. 25% of farms surveyed had one or more seropositive goats and sheep lentiviruses. Of the 138 animals tested positive for leptospirosis serovar Autumnalis was the most frequent, being found in 76.19% 38.88% in goats and sheep. In the study of case-control analysis of risk factors, herd size and purchase of animals showed a strong association. The caseous lymphadenitis has a high incidence in herds serological (92.2%). It can be concluded that the animals are seropositive for exposure to infectious diseases and inadequate management observed in most producers can spread the disease spread and put other animals at risk. / O objetivo deste trabalho foi caracterizar os sistemas de criações de caprinos e ovinos participantes das exposições agropecuárias, assim como estudar a ocorrência das infecções por Brucella ovis em ovinos e lentivírus, linfadenite caseosa e leptospirose em caprinos e ovinos e seus fatores de risco. Foram realizados 64 questionários, sendo examinados 327 e 246 soros de caprinos e ovinos, respectivamente. A verminose, linfadenite e pododermatite foram os problemas sanitários mais relatados pelos produtores. As práticas sanitárias adotadas, de maneira geral, são pouco utilizadas nas propriedades de caprinos e ovinos. O sistema semi-intensivo (67,7%) é o mais utilizado e 71% dos produtores compram animais de outros lugares. A frequência de ovinos soropositivos para B. ovis foi 28% representado em 71,9% das propriedades com criação de ovinos. 25% das propriedades investigadas apresentaram um ou mais caprinos e ovinos soropositivos para os lentivírus. Dos 138 animais soropositivos para leptospirose, o sorovar Autumnalis foi o mais frequente, sendo encontrado em 76,19% dos caprinos e 38,88% dos ovinos. No estudo de caso-controle para análise de fatores de risco, tamanho do rebanho e compra de animais apresentaram associação. A linfadenite caseosa possui uma elevada soropositividade nos rebanhos (92,2%). Pode concluir que os animais de exposição estão soropositivos para algumas doenças infecciosas e o manejo inadequado observado na maioria dos produtores, pode disseminar a propagação de doenças e colocar outros animais em risco.

Para avaliar a fagocitose de células da série monócitos-macrófagos de cabras naturalmente infectadas pelo vírus da artrite encefalite caprina a vírus (VAEC), 30 cabras da raça Saanen foram utilizadas e alocadas em dois grupos distintos, sendo um grupo formado por 15 animais soropositivos à imunodifusão em gel de ágar para detecção de anticorpos séricos antivírus da AEC e o outro formado por 15 animais soronegativos ao teste. Células mononucleares de sangue periférico foram isoladas por gradiente de concentração e plaqueadas em placas de poliestireno para isolamento de células da série monócito-macrófago. Após adesão das mesmas, adicionou-se a bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis como desafio antigênico. Dois tipos de fagocitose foram observados em relação ao número de bactérias internalizadas nos vacúolos citoplasmáticos dos macrófagos, isto é, verificou-se a presença de células fagocitando em média 12 bactérias e outro grupo fagocitando um número incontável de bactérias. Dessa forma, classificou-se a fagocitose em fagocitose + (até 12 bactérias) e fagocitose ++ (mais de 12 bactérias). Em relação à fagocitose total (fagocitose + e fagocitose ++) não foram verificadas diferenças estatística significativas entre os grupos experimentais (p < 0,41). Todavia, ao discriminar a fagocitose conforme a quantificação de bactérias fagocitadas, encontrou-se diferença estatística entre os grupos, sendo que o grupo positivo apresentou maior porcentagem de fagocitose ++ (p < 0,001). O grupo negativo apresentou maior porcentagem de fagocitose + (p < 0,012). Correlação positiva entre monócitos fagocitando e fagocitose ++ foi observada no grupo de animais soropositivos (p < 0,006), porém, não foi observada nenhuma correlação no grupo negativo (p < 0,49). Esses resultados demonstram uma possível alteração na intensidade da fagocitose de macrófagos de animais infectados com o VAEC, sugerindo que os animais com artrite encefalite caprina estejam mais susceptíveis à linfadenite caseosa. / To evaluate the phagocytosis from monocyte-macrophage line cells 30 naturally infected Saanen goats with caprine arthritis-encephalitis vírus (VCAE) were used, and divided uniformly in different groups according to agar gel immunodiffusion test (AGID). Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) was isolated by density gradient centrifugation. The monocyte-macrophage cells were separated from PBMC by their adherence properties. Afterwards, the phagocytosis function was assessed by phagocytosis assay using Corynebacterium psudotuberculosis as a source of antigen. Therefore, two distinct types of phagocytosis were observed and were set according to the number of bacteria within the cytoplasmatic vacuoles. Thus, the phagocytosis rates were also divided in two groups, on the first was observed up to 12 bacteria in the vacuoles; on the other hand in the second group an uncountable number of bacteria were usually seen. Consequently, the phagocytosis rates were also divided in phagocytosis + (up to 12 bacteria) and phagocytosis ++ (more than 12 bacteria). The results from the phagocytosis rates show any difference, however when the phagocytosis rates were separated in the order of the number of Corynebacterium pseudotuberculosis phagocyted, the phagocytosis ++ from positive animals in the sera test were higher than the negative one (p < 0.001). Nevertheless, the negative group presents higher pahgocytosis + (p < 0.012). Furthermore a positive and significant correlation between phagocytosis ++ and monocyte phagocytosis (p < 0.006) were also encountered in the positive animals, however the same were not observed in the negative group (p < 0.49). In face of, the results from the present trial point out to higher susceptibility to caseous linphadenitis in goats infected with VCAE due to the alteration on the phagocytosis strength in these animals.