Os linfomas constituem um grupo de neoplasias que têm origem nas células linforreticulares e acomete tecidos linfóides primários, secundários como o baço e linfonodos e demais tecidos onde há presença de linfócitos circulantes, comumente descritos em cães, gatos e humanos. As síndromes paraneoplásicas são definidas como alterações sistêmicas não relacionadas com lesões metastáticas de forma direta ou indireta no hospedeiro. Dentre as alterações descritas como síndrome paraneoplásica, as alterações hematológicas constituem as mais freqüentes, apresentando destaque para os processos anêmicos. A anemia presente pode ser decorrente de alterações do metabolismo do ferro, perda sanguínea, distúrbios hemolíticos, infiltrado medular e hiperesplenismo. Atualmente tem se associado a redução da vida média das hemácias frente a presença do estresse oxidativo, que gera um desequilíbrio entre a excessiva produção de espécies reativas ao oxigênio e/ou a diminuição dos mecanismos de defesa antioxidante das hemácias. Esse processo pode ocasionar a peroxidação de lipídios da membrana eritrocitária, gerando hemólise e assim resultando em anemia e/ou exacerbando a mesma. Com o objetivo de avaliar a existência do estresse oxidativo e a presença de anemia assim como, a sua correlação com o estado redox, foram avaliadas as concentrações eritrocitárias de glutationa reduzida, glutationa redutase, glutationa peroxidase e superóxido redutase em 23 gatos sadios e 17 felinos com linfoma. Também foram determinadas as concentrações plasmáticas de malonaldeído como indicador da presença de peroxidação lipídica em ambos os grupos. Para avaliar o estado redox foi mensurada a concentração plasmática do estado antioxidante total para o grupo experimental e grupo controle. Não foram observadas diferenças significantes para as enzimas eritrocitárias glutationa redutase, glutationa peroxidade e superóxido dismutase, assim como para a mensuração plasmática de malonaldeído. Entretanto, foram observados valores significativamente menores (p=0,018) de glutationa reduzida nos felinos com linfoma quando comparados ao grupo controle. O mesmo pôde ser observado em relação à mensuração do estado antioxidante total (p=0,003). Os resultados obtidos indicam a presença de estresse oxidativo em felinos com linfoma, porém, não houve evidencias da relação entre a presença de estresse oxidativo e a presença de anemia. / Lymphomas are a group of cancers that originate in cells and lymphoreticular affects lymphoid tissues in primary, secondary as the spleen and lymph nodes and other tissues where there is presence of circulating lymphocytes, commonly described in dogs, cats and humans. Paraneoplastic syndromes are defined as systemic changes unrelated metastatic lesions either directly or indirectly in the host. Among the changes described as a paraneoplastic syndrome, hematological changes are the most frequent, with emphasis on the processes anemic. This anemia may be due to changes in iron metabolism, blood loss, hemolytic disorders, bone marrow infiltration and hypersplenism. Today has been associated with reduced average life span of red cells before the presence of oxidative stress, which creates an imbalance between excessive production of reactive oxygen species and / or decreased antioxidant defense mechanisms of red blood cells. This process can lead to lipid peroxidation of the membrane, causing hemolysis and thus resulting in anemia and / or exacerbating it. Aiming to evaluate the existence of oxidative stress and anemia as well as its correlation with redox state, were evaluated erythrocyte concentrations of reduced glutathione, glutathione reductase, glutathione peroxidase and superoxide reductase in 23 healthy cats and 17 cats with lymphoma. We also determined plasma concentrations of malondialdehyde as an indicator of the presence of lipid peroxidation in both groups. To assess the redox state was measured plasma concentration of total antioxidant status for the experimental group and control group. No significant differences were observed for enzymes erythrocyte glutathione reductase, glutathione peroxidase and superoxide dismutase, as well as for measurement of plasma malondialdehyde. However, observed values were significantly lower (p = 0.018) reduced glutathione in cats with lymphoma when compared to the control group. The same could be observed in relation to the measurement of total antioxidant status (p=0,003). The results indicate the presence of oxidative stress in cats with lymphoma, however, no evidence of the relationship between oxidative stress and anemia.

Butirato sódico (NaB), um potente inibidor da desacetilação de histonas, inibe o crescimento celular e induz apoptose em células neoplásicas. Investigou-se, in vitro, os efeitos na proliferação celular do tratamento combinado de NaB e fármacos comumente empregados no tratamento de leucemias. A linhagem de células T linfoblásticas, Jurkat, foi cultivada em meio RPMI suplementado com 10% de FBS. As células foram tratadas com bleomicina, citarabina, doxorubicina, etoposideo, metotrexato, vincristina e NaB. A proliferação e viabilidade celular foram avaliadas 48h após os tratamentos. Nossos resultados mostraram que NaB aumenta os efeitos citotóxicos de citarabina e etoposideo, mas não de bleomicina, doxorubicina, metotrexato ou vincristina. Estes dados sugerem que NaB é um promissor agente terapêutico adjuvante para o tratamento de leucemias linfoblásticas, e proporcionam uma base para futuras investigações neste campo.

O linfoma alimentar é a forma anatômica mais frequente nos felinos e é o tipo de neoplasia que mais acomete o intestino delgado nessa espécie. É caracterizado pela infiltração de células linfóides neoplásicas em órgãos do trato gastrointestinal, com ou sem comprometimento de linfonodos mesentéricos. Seu diagnóstico pode ser considerado desafiador em muitos casos, devido às manifestações clínicas muitas vezes inespecíficas e às limitações da citologia e histopatologia. A imunoistoquímica, embora ainda pouco difundida, pode ser utilizada para confirmar o diagnóstico de linfoma alimentar, bem como determinar o tipo celular predominante. Objetivando-se caracterizar o linfoma alimentar felino, foi realizado estudo utilizando-se 40 casos de gatos com diagnóstico de linfoma alimentar (grupo 1), confirmados por meio da imunoistoquímica, no qual se avaliou os aspectos epidemiológicos, clínicos, citológicos, histológicos e imunoistoquímicos. Também foram avaliados 20 casos de felinos com doença inflamatória intestinal (grupo 2), confirmados segundo exame imunoistoquímico, quanto aos aspectos epidemiológicos e clínicos. E com o intuito de verificar a acurácia diagnóstica relativa dos exames de citologia, histologia e imunoistoquímica, foram utilizados os resultados dessas análises de ambos os grupos. Foi observado entre os felinos com linfoma alimentar estudados uma média de idade de 10,8 anos e as manifestações clínicas de maior ocorrência foram emagrecimento (55%), êmese (40%) e alterações nas fezes (40%). Entre as alterações ultrassonográficas observadas, as mais prevalentes foram linfonodomegalia mesentérica (86,11%) e espessamento de alças intestinais (80,55%). A maioria dos felinos estudados apresentou sorologia negativa tanto para FIV quanto para FeLV e apenas 14,28% e 8,57% foram positivos para FIV e FeLV, respectivamente. A correlação entre citologia e imunoistoquímica apontou sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e negativo e razão de verossimilhança positiva e negativa de 93,3%, 65%, 66,6%, 92,85%, 2,65 e 0,10, respectivamente. O coeficiente de concordância Kappa de Cohen e a acurácia diagnóstica relativa foram de 0,55 e 77,14%, respectivamente. A correlação entre histopatologia e imunoistoquímica revelou sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e negativo e razão de verossimilhança positiva e negativa de 89,74%, 60%, 81,39%, 75%, 2,22 e 0,18, respectivamente. O coeficiente de concordância Kappa de Cohen e a acurácia diagnóstica relativa foram de 0,52 e 79,66%, respectivamente. A associação entre sorologia para FIV e FeLV e tipo celular do linfoma alimentar não pode ser observada. O presente estudo permitiu concluir que a combinação de citologia, histopatologia e imunoistoquímica é necessária para o correto diagnóstico de linfoma alimentar, e o tipo celular de maior ocorrência foi o de células T. / Alimentary lymphoma is the most common anatomical form of feline lymphoma and is the neoplasm which more affects small intestine of this specie. It is characterized by infiltration of the gastrointestinal tract with neoplastic lymphocytes, with or without mesenteric lymph nodes involvement. The diagnosis of this illness can be challenger in several cases because of unspecific clinical signs and cytological and histopathological limitations. Immunohistochemistry is required where these evaluations were not definitive in addition to establish the cell phenotype T or B lymphocyte. The aim of this study was to characterize feline alimentary lymphoma. For these purpose, 40 cats with a diagnosis of alimentary lymphoma (Group 1) by immunohistochemistry were evaluated clinical, epidemiological, cytological and histologically, in addition to immunophenotype of the neoplasm tissues. Relative accuracy was performed using the results of cytology, histopathology and immunohistochemistry evaluation of 20 cats with inflammatory bowel disease diagnosis. The average age of the cats with alimentary lymphoma was 10.8 years and weight loss (55%), vomiting (40%) and fecal alteration (40%) were the most common clinical signs. The most prevalent ultrasonography abnormalities were mesenteric lymph nodes enlargement (86.11%) and intestinal wall thickening (80.55%). The majority of alimentary lymphoma cats were FIV and FeLV negative and 14.28% and 8.57% were FIV and FeLV positives, respectively. The cytology and immunohistochemistry correlation presents sensitivity, specificity, positive and negative predictive values, positive and negative likelihood ratio tests of 93.3%, 65%, 66.6%, 92.85%, 2.65 and 0.10, respectively. The Cohen´s kappa test and the relative accuracy were 0.55 and 77.14%, respectively. The histopathology and immunohistochemistry correlation presents sensitivity, specificity, positive and negative predictive values, positive and negative likelihood ratio tests of 89.74%, 60%, 81.39%, 75%, 2.22 and 0.18, respectively. The Cohen´s kappa test and the relative accuracy were 0.52 and 79.66%, respectively. Association of FIV and FeLV result tests and alimentary lymphoma phenotype was not observed. In conclusion, the results of the present study suggest that cytology, histology and immunohistochemistry combination is necessary for a correct diagnosis, and T cell alimentary lymphoma is the most common phenotype.

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / O Linfoma de Hodgkin à uma hemopatia linfÃide pode ocorrer em qualquer faixa etÃria; no entanto, à mais comum na idade adulta jovem, dos 15 aos 40 anos. O TP53 à um gene de 20kb de comprimento que possui 11 Ãxons situado no cromossomo 17 e codifica a proteÃna p53, uma proteÃna cuja principal funÃÃo està relacionada à preservaÃÃo da integridade do cÃdigo genÃtico, e, durante o ciclo celular faz verificaÃÃo quanto à eventual ocorrÃncia de uma mutaÃÃo na seqÃÃncia do cÃdigo genÃtico. Na presenÃa dessas mutaÃÃes, impede que esta cÃlula entre em processo de mitose e complete a divisÃo celular. A maioria dos cÃnceres apresenta mutaÃÃes pontuais na seqÃÃncia do TP53. A anÃlise dos padrÃes dessas mutaÃÃes à de grande valia uma vez que o conhecimento dessas mutaÃÃes leva a um melhor entendimento das funÃÃes dos vÃrios domÃnios da proteÃna p53 e seu envolvimento com o mecanismo de supressÃo tumoral, alÃm de permitir que essas mutaÃÃes sejam utilizadas como biomarcadores para desvendar a oncogÃnese humana. Na literatura vigente, poucos trabalhos abordam a identificaÃÃo dessas mutaÃÃes em relaÃÃo ao linfoma de Hodgkin â forma clÃssica. Dessa forma, este trabalho se propÃe a investigar quantitativa e qualitativamente os padrÃes de polimorfismos existentes nesta forma do linfoma de Hodgkin. A primeira etapa do nosso experimento constou da seleÃÃo de 42 casos de linfonodos diagnosticados como linfoma de Hodgkin entre os anos de 2000 e 2006, arquivados em blocos de parafina. Os casos foram selecionados de pacientes com diagnÃstico de linfoma de Hodgkin, sem predileÃÃo por idade, sexo ou raÃa. Em seguida, o DNA foi extraÃdo das amostras selecionadas para reaÃÃo de PCR, realizada para isolar e amplificar, o fragmento de 137pb correspondente ao Ãxon 8 do gene TP53, atravÃs de primers exclusivos desenhados para o experimento: PFw8 e PRv8. ApÃs a reaÃÃo, os produtos de PCR foram purificados para reaÃÃo de SeqÃenciamento de DNA, utilizando o seqÃenciador automÃtico de DNA da marca ABI Prism 3100 de 16 capilares (Applied Biosystems). A Ãltima etapa aconteceu em laboratÃrio de bioinformÃtica â dry lab, onde as seqÃÃncias de DNA obtidas foram analisadas qualitativa- e quantitativamente. Os processos de extraÃÃo do DNA genÃmico, amplificaÃÃo do Ãxon 8, purificaÃÃo do produto de PCR foram realizadas com sucesso em todas as amostras obtidas de material parafinizado. No seqÃenciamento do DNA parafinizado foi possÃvel determinar, com seguranÃa e confiabilidades previstas em parÃmetros convencionais, a seqÃÃncia de pelo menos 32 amostras; contudo, nÃo se obteve distinÃÃo suficiente dos picos de eletroferogramas para a determinaÃÃo de eventuais polimorfismos na regiÃo analisada. NÃo foi possÃvel portanto, verificar com margem de seguranÃa razoÃvel, a presenÃa ou ausÃncia de SNPs nas amostras seqÃenciadas. Houve, contudo, uma qualificaÃÃo e competÃncia laboratorial instalada localmente (em Fortaleza), a partir da experiÃncia desenvolvida com o esforÃo deste trabalho, para continuar a investigaÃÃo molecular em prol da determinaÃÃo, em futuro breve, da ocorrÃncia ou nÃo de SNPs no exon 8 do TP53 em linfoma de Hodgkin. / Hodgkin lymphoma is a hematololgic B neoplasm occurring at patients within any age, however more likely to affect those from 15 to 40 years-old. The TP53 gene is 20kb length gene with 11 exons that encodes the p53 protein, which main function is related to the conservation and integrity of the genetic code. Most cancers show point mutations in the TP53 sequence. The analysis of these mutations allows a better understanding of the function of the diverse domains of the protein and its relationship to tumor suppression. There is only a few data about TP53 polymorphisms and Hodgkin lymphoma. In this manner, in our study we try to detect polymorphisms within the codons 272, 273, 278, 282, 306 of the exon 8 of the TP53 gene in Hodgkin lymphoma. In our survey we analyzed 42 paraffin-embedded tissues from 2000 to 2006. These samples were prepared for DNA extraction and PCR isolation and amplification of the 137bp fragment of the exon 8 of the TP53 gene, using exclusive primers specially designed to our experiment: PFw8 e PRv8. After PCR amplification, the products of the reaction were purified to the Sequencing reaction. The last part of the experiment encoded the bioinformatics analysis of sequences. DNA extraction and PCR amplification were successfully obtained in our study in all the samples. However, the DNA sequencing was only obtained in 32 samples, but there was no characteristic electropherogram of the analyzed region of the gene. Therefore, it was not possible to determine the presence or absence of SNPs in the TP53 exon 8.

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:04:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6195_1.pdf: 1143920 bytes, checksum: 0d0ca55cd7599cecc0ad08a953f1ec9b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / O câncer apresenta-se como uma das grandes causa mortis na vida contemporânea, principalmente o de adulto que tem aumentado em função do aumento da expectativa de vida, mudança de hábitos alimentares e modo de vida. O câncer pediátrico está mais claramente relacionado a fatores genéticos herdados ou ligado a embriogênese. Os tipos mais prevalentes são as leucemias, os tumores do sistema nervoso e os linfomas. Os linfomas apresentam-se divididos em: doença de Hodgkin (HD) e linfomas não-Hodgkin (NHL), sendo o segundo responsável por mais da metade dos casos. Os NHL se destacam por várias características morfológicas, fenotípicas e por eventos moleculares que alteram a configuração cromossômica e a expressão de diversos genes, eventos moleculares estes que têm sido relacionados a vírus, porém de uma forma não muito clara e sem um modelo definitivo. No presente trabalho a relação entre a infecção por EBV, a transcrição de RNA do referido vírus e a superexpressão do proto-oncogene c-myc em amostras de linfoma foram estudadas. Analisamos biopsias de tumor de 49 pacientes, dos quais 34 (69,4%) eram do sexo masculino e 15 (31,6%) eram do sexo feminino. Os linfomas não-Hodgkin estudados eram de localização principalmente abdominal e em 63,4% o EBV foi detectado, com transcrição ativa do RNA viral em 29,3%. Já os linfomas de Hodgkin somaram apenas sete e em dois deles foi encontrada infecção por EBV. Nossos estudos indicam forte relação do EBV com o NHL, principalmente de localização abdominal, sendo necessários mais estudos da relação do vírus com a expressão elevada do proto-oncogene c-myc

Orientador: Jose Vassallo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T10:59:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cotta_AnaCristinadaSilva_D.pdf: 741571 bytes, checksum: 3587b25cef0824942ecc681152c99878 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Micose fungóide (MF) é a forma mais comum de linfoma cutâneo de células T. Nos estágios iniciais, pode mimetizar dermatites crônicas. MF é, geralmente, CD3+ e CD4+. CD7 é expresso em cerca de 90% dos linfócitos T CD4+ e está, freqüentemente, ausente nas células T malignas. O objetivo deste estudo foi avaliar a utilidade da detecção imuno-histoquímica de CD3 e CD7 (clone CBC.37) no diagnóstico diferencial de MF e dermatites benignas. Todos os casos foram submetidos a um painel imuno-histoquímico constituído pelos anticorpos CD3, CD7, CD20, CD4, CD8 e CD30. Foram selecionados 42 pacientes. Correlação clínico-patológica havia estabelecido o diagnóstico de MF em 31 e, infiltrações linfocitárias cutâneas benignas, em 11. Foi realizada avaliação semi-quantitativa da porcentagem de células coradas às reações imuno-histoquímicas para todos os anticorpos avaliados, tanto em visão panorâmica de menor aumento, quanto em 10 campos consecutivos em maior aumento. Para análise estatística, foi utilizado o teste t de Student. As médias das porcentagens de células CD3 positivas foram similares em pacientes com MF e dermatites benignas, respectivamente, 86 (+/-9)% versus 79 (+/-26)% (p=0,807). Já a média das porcentagens de células CD7 positivas foi de 54 (+/-32)% nos pacientes com MF e de 74 (+/-22)% nas dermatites benignas (p=0,048). A avaliação semi-quantitativa revelou perda considerável do CD7 em relação ao CD3 nos pacientes com MF. A média de células coradas na MF foi de 86 (+/-9)% para CD3 e 54 (+/-32)% para CD7 (p<0,001), e, nas dermatites benignas, 79 (+/-26)% para CD3 e 74 (+/-22)% para CD7 (p=0,669). Concluímos que o estudo do CD7 pode ser ferramenta valiosa para a distinção entre inflamação e neoplasia, nas desordens linfoproliferativas da pele / Abstract: Mycosis fungoides (MF) is the most common form of primary cutaneous T-cell lymphoma. In early stage, it may mimic benign dermatoses both, on clinical and histological basis. MF usually expresses CD3 and CD4 (T-cell) markers. CD7 is expressed on about 90% of CD4+ T cells and is often deficient on malignant T cells. Thus, CD7 is of potential aid in the evaluation of the nature of dermal lymphoid infiltrates. The aim of this study was to evaluate the usefulness of immunohistochemical detection of T-cell markers on paraffin-embedded sections, CD3 and CD7 (clone CBC.37) in the differential diagnosis of MF and benign dermatoses. All cases were submitted to CD3, CD7, CD20, CD4, CD8, and CD30 panel of antibodies. Forty-two patients with diffuse dermal T-lymphocytic infiltrates were selected. Previous clinicopathologic correlation and follow-up had established the diagnosis of MF in 31 patients and benign dermatoses in 11. A semiquantitative evaluation for the percentage of stained cells on immunohistochemistry was performed for all antibodies in low power and 10 consecutive high power fields. Student t test was used for statistical analysis. The mean percentage of CD3 stained cells was similar in MF and benign dermatoses patients, respectively 86 (+/-9)% versus 79 (+/-26)% (p=0.807). On the other hand, the mean percentage of CD7 stained cells was 54 (+/-32)% in patients with MF, and 74 (+/-22)% in patients with benign dermatoses (p=0.048). A semiquantitative evaluation revealed a considerable loss of CD7 immunolabeling in comparison with CD3 in patients with MF. Mean value of stained cells in MF was 86 (+/-9)% for CD3 and 54 (+/-32)% for CD7 (p< 0.001) while in benign dermatoses it was 79 (+/-26)% for CD3 and 74 (+/-22)% for CD7 (p= 0.669). We concluded that CD7 study may represent a valuable tool in the distinction between inflammation and neoplasia in T lymphoproliferative skin disorders / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Carmino Antonio de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-20T11:39:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castro_MariadeLourdesRiosBarjasde_M.pdf: 3057293 bytes, checksum: 731f3b2dc9a23a327eca9d790f525f23 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Estudou-se 77 pacientes adultos portadores de linfoma não Hodgkin (LNH) ao diagnóstico, atendidos no Hospital das Clínicas da Universidade Estadual de Campinas. Classificou-se os LNH histologicamente segundo Kiel. Clinicamente avaliou-se os pacientes através da história e do exame fisico e laboratorialmente pela análise do sangue periférico (hemo grama e contagem de reticulócitos), dosagem de bilirrubinas, urobilinogênio urinário e demais exames necessários ao estadiamento clínico. Estadiou-se os linfomas de acordo com os critérios propostos em Ann Arbor e as leucemias linfocíticas crônicas segundo Rai. Estudou-se os perfis imunohematológicos dos pacientes através dos seguintes testes: determinação de grupo sanguíneo ABO/Rh, teste direto da antiglobulina com soros poliespecífico (anti-IgG, anti-C3b e allti-C3d) e monoespecíficos (anti-IgG, anti-IgM, anti-C3, anti-C3d e anti-C4), pesquisa e identificação de anticorpos séricos pelas técnicas em tubo com polietilenoglicol, meio de baixa força iônica (LISS) e hemácias pré tratadas com enzimas e pela técnica de gel-centrifugação. Os resultados da avaliação imunohematológica dos pacientes portadores de LNH foram: 1. A freqüência de autoanticorpos anti-eritrocitários foi de 29,9% (provável auto anti-I e auto-IgG sem especificidade definida); 2. O quadro de hemólise clínica e laboratorial ocorreu em 1,3% dos pacientes; 3. Houve uma tendência dos linfomas de baixo grau de malignidade serem assocíados à presença de autoanticorpos anti-eritrocitários; 4. Não houve associação entre o tipo imunológico dos LNH (B e T) e do estadiamento clínico dos linfomas com a presença dos autoanticorpos. Conclui-se que a alta incidência de autoanticorpos anti-eritrocitários encontrada em nossa casuística provavelmente esteja relacionada com as alterações imunes próprias dos LNH / Abstract: Seventy-seven adult patients with non Hodgkin's lymphoma (NHL) were studied at the time of diagnosis at University Hospital of State University of Campinas from March 1992 to November 1993. Histological subgrouping of NHL was performed according to the Kiel criteria. All patients were characterized by clinical and laboratorial examination, which included cytology of peripheral blood, reticulocyte count, bilirubin, urinary urobilinogen, haptoglobin, exams for staging of lymphoma and immunohematologic evaluation. The patients were staged according to the principIes of the Ann Arbor classification and the cases of chronic lymphocytic leukemia according to Ray clinical staging system. Immunohematology investigation screenings were: determination of blood groups ABO/Rh, direct antiglobulin reaction with polyspecific antiglobulin reagents (anti-IgG, anti-Cb anti-C3d) and monospecific reagents (anti-IgG, anti-IgM, anti-C3, anti-C3d, anti-C4), detection ofblood groups antibodies in serum by indirect antiglobulin test (polyethylene glycol, low ionic strength solution and enzyme-treated ceUs). Whenever an antibody was found on screening, its specificity was determined using a suitable panel of red cells. 1. Our results of the immunohematological evaluation of the patients with NHL showed that: 1-There were 29.87% of the patients 'with autoantibodies against erythrocytes (IgM with probable specificity of auto anti-I and IgG with specificity serologically indlstinguishable), without clinical disorders; 2. The hemolytic anemia occurred in 1.29% of the patients. This value is compatible with the literature; 3. A weak correlation existed between the low grade lymphomas and erythrocyte autoantibodies; 4. No correlation existed between the type immunologic of lymphoma (B e T) and staging of NHL with erythrocyte auto antibodies. We have concluded that probably the high incidence of autoantibodies against erythrocytes would be related to the autoimmune derangements caused by non Hodgkin's lymphoma / Mestrado / Mestre em Clinica Medica

bgbrady@hotmail.com / The primary intestinal follicular lymphoma is a rare disease described in the last classification of lymphomas from WHO. It is a localized disease with excellent prognosis. We describe in this article ,a 64 year-old Peruvian female with abdominal pain and delayed vomiting for the last two years, has undergone a partial intestinal resection due to bowel obstruction. There was a well-circumscribed annular tumor. A diagnosis of non-polypoid primary intestinal follicular lymphoma was made. We report the case and review the literature in this article. / El linfoma folicular primario intestinal es un desorden raro descrito en la última clasificación de linfomas de la WHO. Es una entidad localizada con excelente pronóstico. En el presente artículo, reportamos una mujer peruana de 64 años de edad diagnosticada con linfoma folicular primario intestinal. Ella tuvo dos años con dolor abdominal y vómitos tardíos. Ella desarrolló una obstrucción intestinal y tuvo una resección completa del tumor. Se describe el caso y se realiza una revisión de la literatura de esta entidad.

O linfoma de células do manto é associado à translocação t(11;14)(q13;q32) e à hiperexpressão da ciclina D1. Os pacientes com linfoma de células do manto apresentam-se com doença avançada ao diagnóstico e a fase leucêmica da doença é observada em cerca de um terço dos casos. Os linfócitos B virgens pré-centro germinativo, que ocupam a zona do manto dos folículos linfóides secundários, constituem a origem celular do linfoma de células do manto. A hiperexpressão da ciclina D1, por si só, não é suficiente para a patogênese da neoplasia, e a elucidação das alterações moleculares adicionais poderá fundamentar novas estratégias terapêuticas. Nesse contexto, os métodos de estudo do perfil de expressão gênica em larga escala têm potencial para auxiliar na descoberta dessas alterações moleculares adicionais. Todavia, nos estudos que empregaram esses métodos até o momento, o material genético foi obtido de amostras de gânglios acometidos pelo tumor, que contêm uma proporção variável de células normais do estroma do tecido linfóide. Por isso, ainda não se sabe quais dos genes identificados como alterados no linfoma de células do manto são específicos das células linfomatosas, e quais são dependentes das células normais que perfazem o estroma do gânglio. Com o objetivo de elucidar as alterações moleculares do linfoma de células do manto em nível celular, realizamos um estudo comparativo entre o perfil de expressão gênica de células linfomatosas purificadas e de linfócitos B virgens, utilizando microarrays de oligonucleotídeos. Células linfomatosas e linfócitos B virgens (IgD+CD38±CD27-) foram purificados em colunas magnéticas a partir do sangue periférico de pacientes com linfoma de células do manto em fase leucêmica e de amígdalas de indivíduos normais, respectivamente (pureza > 95%). Três indivíduos foram selecionados em cada grupo e os experimentos foram realizados em duplicatas usando microarrays comerciais modelo CodeLink Human UniSet I, com 10.000 genes. Foram identificados 106 genes com variação de expressão maior do que três vezes, 63 deles induzidos e 43 reprimidos no linfoma de células do manto em relação aos linfócitos B virgens. Dez genes (seis induzidos e quatro reprimidos) foram selecionados para quantificação, por RT-PCR em tempo real, em amostras de sangue periférico de 21 pacientes com linfoma de células do manto em fase leucêmica, além de 14 pacientes com outras doenças linfoproliferativas crônicas e de sete indivíduos sem doenças neoplásicas. Os resultados dos experimentos com microarrays foram confirmados pela quantificação por RT-PCR em tempo real em todos os 10 genes selecionados e os valores de expressão do gene TLR1 obtidos por esse método demonstraram correlação significativa com a sobrevida dos pacientes com linfoma de células do manto. Além de identificar vários genes modulados no linfoma de células do manto em nível celular, este estudo também revelou a expressão aberrante de diversos genes relacionados à apoptose e às vias de sinalização PI3K/AKT, WNT e TGF&#946;. Esses resultados adicionam informações originais à patogênese molecular do linfoma de células do manto e apontam para vias específicas de sinalização molecular como potenciais alvos para novas abordagens terapêuticas. / Mantle cell lymphoma is associated with the translocation t(11;14)(q13;32) and overexpression of cyclin D1. Mantle cell lymphoma is predominantly disseminated at diagnosis and a frank leukemic phase is detected in one third of patients. The pre-germinal-center naive B-cells, which populate the mantle zone of the secondary lymphoid follicles, are the cells of origin of mantle cell lymphoma. Overexpression of cyclin D1 is not sufficient by itself to cause lymphoma, and a better understanding of the additional molecular lesions may provide insights toward new therapeutic approaches. In this context, large scale gene expression studies may be useful in the investigation of such additional molecular lesions. However, the great majority of mantle cell lymphoma cases studied by these methods to date had the genetic material harvested from lymph nodes, which have a variable proportion of normal cells from the lymphoid stroma. It is therefore not known how many genes identified as differentially expressed in mantle cell lymphoma by tumor versus normal experiments are cell-autonomous rather than dependent on the tumor microenvironment. To address this issue, we compared the gene expression profile of mantle cell lymphoma cells and normal naive B-cells using oligonucleotide microarrays. Lymphoma cells and naive B-cells (IgD+CD38±CD27-) were highly purified, by magnetic activated cell sorting, from the peripheral blood of patients with mantle cell lymphoma in the leukemic phase and from tonsils of normal individuals, respectively (purity > 95% in all samples). Three individuals were selected for each group and experiments were performed in replicates using the Amersham CodeLink Human UniSet I Bioarrays, with 10,000 genes. We identified 106 genes differentially expressed with a fold change of at least three-fold, 63 induced and 43 repressed in mantle cell lymphoma in comparison with naive B-cells. Ten genes were selected (six induced and four repressed in lymphoma cells) for quantification by real-time RT-PCR in non-purified peripheral blood samples from 21 patients with mantle cell lymphoma in the leukemic phase, as well as in 14 patients with other chronic lymphoproliferative diseases and seven normal individuals. Microarray results were confirmed by real-time RT-PCR for all selected genes and expression values of the TLR1 gene as quantified by this method showed significant correlation with patient survival in mantle cell lymphoma. In addition to the identification of several modulated genes in mantle cell lymphoma at cellular level, this study revealed that some genes functionally connected through apoptosis or the PI3K/AKT, WNT and TGF&#946; signaling pathways are aberrantly expressed in mantle cell lymphoma. These results add original data to the molecular pathogenesis of mantle cell lymphoma and point to specific molecular signaling pathways related to inhibition of apoptosis as potential targets for new therapeutic approaches.

O linfoma de células do manto é associado à translocação t(11;14)(q13;q32) e à hiperexpressão da ciclina D1. Os pacientes com linfoma de células do manto apresentam-se com doença avançada ao diagnóstico e a fase leucêmica da doença é observada em cerca de um terço dos casos. Os linfócitos B virgens pré-centro germinativo, que ocupam a zona do manto dos folículos linfóides secundários, constituem a origem celular do linfoma de células do manto. A hiperexpressão da ciclina D1, por si só, não é suficiente para a patogênese da neoplasia, e a elucidação das alterações moleculares adicionais poderá fundamentar novas estratégias terapêuticas. Nesse contexto, os métodos de estudo do perfil de expressão gênica em larga escala têm potencial para auxiliar na descoberta dessas alterações moleculares adicionais. Todavia, nos estudos que empregaram esses métodos até o momento, o material genético foi obtido de amostras de gânglios acometidos pelo tumor, que contêm uma proporção variável de células normais do estroma do tecido linfóide. Por isso, ainda não se sabe quais dos genes identificados como alterados no linfoma de células do manto são específicos das células linfomatosas, e quais são dependentes das células normais que perfazem o estroma do gânglio. Com o objetivo de elucidar as alterações moleculares do linfoma de células do manto em nível celular, realizamos um estudo comparativo entre o perfil de expressão gênica de células linfomatosas purificadas e de linfócitos B virgens, utilizando microarrays de oligonucleotídeos. Células linfomatosas e linfócitos B virgens (IgD+CD38±CD27-) foram purificados em colunas magnéticas a partir do sangue periférico de pacientes com linfoma de células do manto em fase leucêmica e de amígdalas de indivíduos normais, respectivamente (pureza > 95%). Três indivíduos foram selecionados em cada grupo e os experimentos foram realizados em duplicatas usando microarrays comerciais modelo CodeLink Human UniSet I, com 10.000 genes. Foram identificados 106 genes com variação de expressão maior do que três vezes, 63 deles induzidos e 43 reprimidos no linfoma de células do manto em relação aos linfócitos B virgens. Dez genes (seis induzidos e quatro reprimidos) foram selecionados para quantificação, por RT-PCR em tempo real, em amostras de sangue periférico de 21 pacientes com linfoma de células do manto em fase leucêmica, além de 14 pacientes com outras doenças linfoproliferativas crônicas e de sete indivíduos sem doenças neoplásicas. Os resultados dos experimentos com microarrays foram confirmados pela quantificação por RT-PCR em tempo real em todos os 10 genes selecionados e os valores de expressão do gene TLR1 obtidos por esse método demonstraram correlação significativa com a sobrevida dos pacientes com linfoma de células do manto. Além de identificar vários genes modulados no linfoma de células do manto em nível celular, este estudo também revelou a expressão aberrante de diversos genes relacionados à apoptose e às vias de sinalização PI3K/AKT, WNT e TGF&#946;. Esses resultados adicionam informações originais à patogênese molecular do linfoma de células do manto e apontam para vias específicas de sinalização molecular como potenciais alvos para novas abordagens terapêuticas. / Mantle cell lymphoma is associated with the translocation t(11;14)(q13;32) and overexpression of cyclin D1. Mantle cell lymphoma is predominantly disseminated at diagnosis and a frank leukemic phase is detected in one third of patients. The pre-germinal-center naive B-cells, which populate the mantle zone of the secondary lymphoid follicles, are the cells of origin of mantle cell lymphoma. Overexpression of cyclin D1 is not sufficient by itself to cause lymphoma, and a better understanding of the additional molecular lesions may provide insights toward new therapeutic approaches. In this context, large scale gene expression studies may be useful in the investigation of such additional molecular lesions. However, the great majority of mantle cell lymphoma cases studied by these methods to date had the genetic material harvested from lymph nodes, which have a variable proportion of normal cells from the lymphoid stroma. It is therefore not known how many genes identified as differentially expressed in mantle cell lymphoma by tumor versus normal experiments are cell-autonomous rather than dependent on the tumor microenvironment. To address this issue, we compared the gene expression profile of mantle cell lymphoma cells and normal naive B-cells using oligonucleotide microarrays. Lymphoma cells and naive B-cells (IgD+CD38±CD27-) were highly purified, by magnetic activated cell sorting, from the peripheral blood of patients with mantle cell lymphoma in the leukemic phase and from tonsils of normal individuals, respectively (purity > 95% in all samples). Three individuals were selected for each group and experiments were performed in replicates using the Amersham CodeLink Human UniSet I Bioarrays, with 10,000 genes. We identified 106 genes differentially expressed with a fold change of at least three-fold, 63 induced and 43 repressed in mantle cell lymphoma in comparison with naive B-cells. Ten genes were selected (six induced and four repressed in lymphoma cells) for quantification by real-time RT-PCR in non-purified peripheral blood samples from 21 patients with mantle cell lymphoma in the leukemic phase, as well as in 14 patients with other chronic lymphoproliferative diseases and seven normal individuals. Microarray results were confirmed by real-time RT-PCR for all selected genes and expression values of the TLR1 gene as quantified by this method showed significant correlation with patient survival in mantle cell lymphoma. In addition to the identification of several modulated genes in mantle cell lymphoma at cellular level, this study revealed that some genes functionally connected through apoptosis or the PI3K/AKT, WNT and TGF&#946; signaling pathways are aberrantly expressed in mantle cell lymphoma. These results add original data to the molecular pathogenesis of mantle cell lymphoma and point to specific molecular signaling pathways related to inhibition of apoptosis as potential targets for new therapeutic approaches.