Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Global climate changes are responsible for the increased frequency of episodes of drought and high concentrations of tropospheric ozone, which can occur simultaneously reducing plant growth, limiting agricultural production and affecting the food supply for an increasing world population. These environmental stresses can lead to the overproduction of reactive oxygen species, promoting oxidative stress and causing metabolic imbalance. Cell membranes are the primary targets of damage induced by stresses and the preservation of cell integrity through remodeling of membrane lipids is essential for plant survival under adverse conditions. The objective of this study was to investigate the effects of drought, ozone and the combined stresses in two cowpea cultivars with different degrees of drought tolerance: EPACE-1 (tolerant) and IT83-D (susceptible) through physiological responses and a study focused on the content and composition of membrane lipids, as well as on the expression of genes related to the biosynthesis and degradation of these lipids. Drought and ozone (120 ppb), isolated or in combination, were applied on three-week-old seedlings during two weeks. After 7 and 14 days of treatments, physiological parameters were determined. Lipids extracted from leaves were analyzed by gas chromatography/mass spectrometry. Transcript accumulation (VuMGD1, VuMGD2, VuDGD1, VuDGD2, VuCLS, VuFAD7, VuFAD8, VuPLD1 and VuPAT1) was detected in leaves by real time PCR. In both cultivars, drought inhibited the plant growth and photosynthesis through stomatal closure, which appeared to involve the gene expression of phospholipase D (VuPLD1). Ozone caused foliar injury and degradation of galactolipids, mainly in IT83-D. In this cultivar, the damage resulted in an increase in DGDG:MGDG ratio and in VuDGD2 expression. Furthermore, a partial decrease in the phospholipids content in response to ozone was associated with an increase in VuPLD1 expression, suggesting a replacement of phospholipids by DGDG. Differently, EPACE-1 cultivar in the presence of ozone, concomitantly with the degradation of galactolipids, showed an increase in storage lipids and DPG (cardiolipin) contents. The two stresses in combination led to results similar to those observed in response to the drought treatment alone, in both cultivars, which likely reflected the severe restriction of ozone uptake resulting from drought-induced stomatal closure. In conclusion, the present results highlight the prominent role of membrane lipids in the metabolic adjustments that occur for the plant tolerance to drought and ozone. / As mudanÃas climÃticas globais sÃo responsÃveis pelo aumento da frequÃncia de episÃdios de seca e de elevadas concentraÃÃes de ozÃnio troposfÃrico, que podem ocorrer simultaneamente, reduzindo o crescimento das plantas, limitando a produÃÃo agrÃcola e afetando o suprimento de alimentos para a crescente populaÃÃo mundial. Esses estresses ambientais podem levar à superproduÃÃo de espÃcies reativas de oxigÃnio, promovendo o estresse oxidativo e causando desequilÃbrio metabÃlico. As membranas celulares sÃo os primeiros alvos de danos induzidos por estresses e a preservaÃÃo da integridade celular atravÃs da remodelaÃÃo dos lipÃdios de membrana à essencial para a sobrevivÃncia da planta sob condiÃÃes adversas. O objetivo deste trabalho foi investigar os efeitos da seca, do ozÃnio e dos estresses combinados em dois cultivares de feijÃo-de-corda dotados de diferentes graus de tolerÃncia à seca: EPACE-1 (tolerante) e IT83-D (sensÃvel) atravÃs de respostas fisiolÃgicas e de um estudo focado no teor e na composiÃÃo de lipÃdios de membrana, assim como na expressÃo de genes relacionados à biossÃntese e à degradaÃÃo desses lipÃdios. A seca e o ozÃnio (120 ppb), isolados ou combinados, foram aplicados nas plantas apÃs trÃs semanas de germinaÃÃo, durante duas semanas. ApÃs 7 e 14 dias de tratamentos, parÃmetros fisiolÃgicos foram determinados. Os lipÃdios extraÃdos de folhas foram analisados por cromatografia gasosa/espectrometria de massa. O acÃmulo de transcritos (VuMGD1, VuMGD2, VuDGD1, VuDGD2, VuCLS, VuFAD7, VuFAD8, VuPLD1 e VuPAT1) foi detectado em folhas por PCR em tempo real. Em ambos os cultivares, a seca inibiu o crescimento e a fotossÃntese atravÃs do fechamento estomÃtico, o que pareceu envolver a expressÃo gÃnica da fosfolipase D (VuPLD1). O ozÃnio causou injÃria foliar e degradaÃÃo de galactolipÃdios, principalmente em IT83-D. Neste cultivar, os danos implicaram no aumento da relaÃÃo DGDG:MGDG e da expressÃo de VuDGD2. AlÃm disso, uma diminuiÃÃo parcial no teor de fosfolipÃdios em resposta ao ozÃnio foi associada ao aumento da expressÃo de VuPLD1, sugerindo-se uma substituiÃÃo de fosfolipÃdios por DGDG. Diferentemente, o cultivar EPACE-1 em presenÃa de ozÃnio, concomitantemente com a degradaÃÃo de galactolipÃdios, mostrou um aumento nos teores de lipÃdios de reserva e de DPG (cardiolipina). A combinaÃÃo dos estresses levou a resultados semelhantes aos encontrados com a seca aplicada isoladamente, em ambos os cultivares, o que provavelmente reflete a forte restriÃÃo da absorÃÃo de ozÃnio devido ao fechamento dos estÃmatos induzido pela seca. Em conclusÃo, os presentes resultados ressaltam o proeminente papel dos lipÃdios de membrana nos processos de ajustamento metabÃlico que ocorrem para regular a tolerÃncia das plantas à seca e ao ozÃnio.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / O presente estudo objetivou avaliar o crescimento do robalo - peva Centropomus parallelus em resposta ao teor de lipÃdios totais e energia bruta das dietas. Foram fabricadas cinco dietas experimentais isoproteicas contendo 480 g/kg de proteÃna bruta, variando o teor de lipÃdios em 100, 120, 140, 160 e 180 g/kg e a energia bruta em 4.056, 4.157 , 4.322, 4.499 e 4.696 kcal/kg, respectivamente . Para o experimento , 300 juvenis provenientes de larvicultura comercial com peso mÃdio inicial de 6,5  2,4 g foram estocados em tanques cilindro - cÃnicos de 1.000 l na densidade de 10 peixes/m . Os robalos fo ram alimentados à saciedade trÃs vezes ao dia durante 96 dias. Foram feitas seis repetiÃÃes para cada tratamento. Os peixes foram pesados e medidos individualmente a cada 24 dias de cultivo. O oxigÃnio dissolvido manteve - se acima de 90% da saturaÃÃo. Os va lores mÃdios de salinidade, pH e temperatura atingiram 35  2 ppt, 8,6  0,2 e 30,7  0,7 ÂC, respectivamente. Os valores mÃdios de amÃnia total, nitrito e nitrato se elevaram significativamente ao longo do experimento, variando de 0,27 a 0,42, de 0,020 a 0,103 e de 0,88 a 1,58 mg/l, respectivamente. NÃo foram encontradas diferenÃas estatÃsticas sign ificativas entre os tratamentos ( P > 0,05 , ANOVA). A sobrevivÃncia final dos peixes em todos os tratamentos foi 100%. Os indivÃduos cultivados atingiram peso corporal final de 38, 2  12,5 g e produtividade de 317  40 g/mÂ, alcanÃando um ganho de peso diÃrio de 0,34  0,04 g/dia/peixe e taxa de crescimento especÃfico de 1,92  0,12%/dia. O fator de conversÃo alimentar final atingiu 1,77  0,25 com um fator de e ficiÃncia protÃica de 1,19  0,17. Houve aumento significativo ( P < 0,05, Tukey HSD) dos Ãndices vÃscerossomÃticos (IVS) e de gordura visceral (IGV) com o aumento do teor de lipÃdios das dietas, sem diferenÃas significativas entre os Ãndices hepatossomÃtic os, indicando que o maior acÃmulo de gordura na cavidade visceral foi devido ao maior aporte lipÃdico das raÃÃes. AtravÃs da anÃlise das curvas de regressÃo, a exigÃncia de lipÃdios e energia do robalo - peva foi estimada em 122 g/kg e 4.216 kcal/kg , respectivamente. Os juvenis de robalo - peva cultivados neste trabalho nÃo apresentaram altas demandas lipÃdicas e energÃticas em suas dietas, alÃm de demonstrarem rusticidade ao confinamento , resistÃncia a enfermidades e fÃcil manejo. / The present work aimed at evaluating the growth response of the fat snook, C. parallelus to the total lipid and gross energy content of the diet . Five isonitrogenous slow - sinking diets with 480 g/kg of crude protein were lab - extruded. L ipid content of the diets varied at 100, 120, 140, 160 and 180 g/kg with a corresponding gross energy level of 4,056, 4,157, 4,322, 4,499 and 4,696 kcal /kg. To star t the study, hatchery - reared juveniles of 6. 5  2.4 g were stocked in 1,000 l round outdoor tanks under 10 fish/m 3 . Six replicate tanks were assigned for each tested diet. Snooks were fed three times daily to satiation by hand - broadcasting and reared for 9 6 days. Fish wet body weight was checked individually every 24 days of rearing. Over the rearing period, dissolved oxygen was kept above 90% saturation, while water salinity, pH and temperature reached 35  2 ppt, 8.6  0.2 and 30.7  0.7 ÂC, respectively. Ammonia, nitrite and nitrate nitrogen concentration increased significantly along the experiment, varying from 0.27 to 0.42, 0.020 to 0.103 and from 0.88 to 1.58 mg/l, respectively. At harvest, there was no statistical difference in fish performance among the different feeding treatments ( P > 0 . 05, ANOVA). Fish reached 38. 2  12. 5 g in body weight and gained 317  40 g/m 3 in biomass. Fish attained a specific grow rate of 1.92  0.12 % or 0.34  0.04 g/day. No fish mortality was observed along the culture period . M ean final food conversion ratio reach ed 1.77  0.25 with a protein retention rat io of 1.19  0.17. There was a significant increase ( P > 0 . 05, Tukey HSD) of the viscerosomatic (VSI) and visceral fat (VFI) indexes with an increas e in the lipid content of the diets . No significant differences among feeding treatments in the hepatosomatic indexes . This indicated the highest fat accumulation in the visceral cavity of fish was due to a high fat input in the diets . By the broken - line regression analysis, the quantitative lipid and energy requirements of the fat snook was estimated at 1 22 g/kg and 4,216 kcal/kg, respectively. Results from the present work indicated that high lipid - content diets are not required in th e rearing of juvenil e fat snook, which displayed tolerance to confinement , disease resistance and ease to manage .

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Foram realizados dois ensaios para determinar a composiÃÃo quÃmica e a energia metabolizÃvel do sebo bovino e para avaliar este ingrediente como fonte lipÃdica alternativa em raÃÃes para suÃnos nas fases de crescimento e terminaÃÃo com ou sem a adiÃÃo de emulsificante, sobre o desempenho, digestibilidade dos nutrientes das raÃÃes, triacilglicerÃis sÃricos, caracterÃsticas de carcaÃa e avaliaÃÃo econÃmica. Para o ensaio de metabolismo foram utilizados 15 suÃnos machos castrados de peso inicial de 22,03Â0,62 kg que foram distribuÃdos em delineamento inteiramente ao acaso, pelo mÃtodo de coleta total de fezes e urina. Os tratamentos foram: RR â raÃÃo referÃncia, formulada a base de milho e farelo de soja; RT1 â raÃÃo teste composta por 95% da raÃÃo referÃncia e 5% de sebo bovino e RT2 â raÃÃo teste composta de 90% de raÃÃo referÃncia e 10% de sebo bovino. O sebo bovino apresentou 99,94% de matÃria seca e 7130,97 kcal de energia metabolizÃvel (EM)/kg. Para o ensaio de desempenho foram utilizados 30 suÃnos machos castrados com peso inicial de 24,85Â1,18 kg, distribuÃdos no delineamento em blocos ao acaso, com cinco tratamentos e seis repetiÃÃes de um animal. Os tratamentos diferiram quanto à fonte lipÃdica incluÃda, nÃvel de EM e adiÃÃo do emulsificante, sendo: T1 â dieta com inclusÃo de Ãleo de soja e 3230 kcal de EM/kg; T2 â dieta com inclusÃo de sebo bovino e 3230 kcal de EM/kg; T3 â dieta com inclusÃo de sebo bovino e 3080 kcal de EM/kg; T4 â dieta com inclusÃo de sebo bovino, 3080 kcal de EM/kg e adiÃÃo de 0,1% emulsificante; T5 â dieta com inclusÃo de sebo bovino, 2930 kcal de EM/kg e adiÃÃo de 0,1% de emulsificante. NÃo houve efeito dos tratamentos sobre as variÃveis de consumo de raÃÃo e ganho diÃrio de peso em todas as fases avaliadas. Entretanto, observou-se que houve diferenÃa significativa para a conversÃo alimentar no crescimento II e na terminaÃÃo, onde os animais alimentados com a raÃÃo contendo sebo bovino e reduÃÃo na energia para 3080 kcal/kg (T3) e para 2930 kcal/kg com adiÃÃo de emulsificante (T5) apresentaram pior conversÃo alimentar. NÃo houve diferenÃa significativa (P>0,05) para os nÃveis de triacilglicerÃis no sangue e para as caracterÃsticas de carcaÃas (peso, rendimento e comprimento de carcaÃa, quantidade e percentual de carne magra, espessura de toicinho, profundidades de lombo e de gordura, Ãreas do olho de lombo e da gordura e relaÃÃo gordura carne). Dependendo do valor energÃtico, o sebo bovino pode substituir o Ãleo de soja como fonte lipÃdica em raÃÃes para suÃnos nas fases de crescimento e terminaÃÃo. A reduÃÃo em 150 kcal de EM/kg da raÃÃo com uso de sebo bovino pode ser compensada com a adiÃÃo de emulsificante. / This study aimed to determine the chemical and metabolizable energy of beef tallow and evaluate this feedstuff as an alternative lipid source in diets for growing and finishing pigs with or without emulsifier addition, on performance, digestibility of the nutrients, serum triacylglycerols, carcass characteristics and economic evaluation. For the metabolism assay a total of 15 barrows were used with an initial weight of 22.03  0.62 kg and distributed in a completely randomized design, using the total of feces and urine method. The treatments were: RR - basal diet, formulated based on corn and soybean meal; RT1 - ration test comprised 95% of basal diet and 5% beef tallow and RT2 - test diet composed of 90% of basal diet and 10% beef tallow. The beef tallow showed 99.94% of dry matter and 7130.97 kcal of metabolizable energy (ME)/kg. To test the performance, a total of 30 barrows with an initial weight of 24.85  1.18 kg were distributed in a randomized block design with five treatments and six repetitions of an animal. The treatments differed in fat source included, level of ME and addition of emulsifier, as much: T1 - diet with soybean oil and 3230 kcal ME/kg; T2 - diet with beef tallow and 3230 kcal ME/kg; T3 - diet with beef tallow and 3080 kcal ME/kg; T4 - diet with beef tallow, 3080 kcal ME/kg and addition of 0.1% of emulsifier; T5 - diet with beef tallow, 2930 kcal ME/kg and addition of 0.1% of emulsifier. It was not observed effects on variables of feed intake and average daily gain in all phases. However, it was observed that there was a significant difference in feed conversion in growing II and finishing phase; animals fed the diet containing beef tallow and reduction in energy to 3080 kcal ME/kg (T3) and 2930 kcal ME/kg with emulsifier (T5) presented worse feed conversion. There was no significant difference (P>0.05) among levels of triglycerides in the blood and carcass characteristics (weight, yield and carcass length, amount and percentage of lean meat, backfat thickness, loin depth and fat depth, loin eye area and fat area and meat/fat ratio). Depending on the energy level, beef tallow can replace soybean oil as a lipid source in diets for pigs during the growing and finishing phases. The reduction of metabolizable energy at 150 kcal/kg with the use of beef tallow can to be compensated with the addition of emulsifier.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Este trabalho objetivou obter informaÃÃes bÃsicas sobre a germinaÃÃo e o estabelecimento da plÃntula de cajueiro (Anacardium occidentale L.) anÃo-precoce em condiÃÃes de salinidade e a relaÃÃo entre salinidade e mobilizaÃÃo de reservas durante esses processos. As castanhas do clone BRS 189 foram semeadas em bandejas de plÃstico contendo vermiculita umedecida com Ãgua destilada (tratamento controle) ou soluÃÃes de NaCl com condutividades elÃtricas de 6,0, 12,0 e 18,0 dS.m-1 (tratamentos salinos), as quais foram mantidas em casa de vegetaÃÃo. No decorrer do experimento, foram coletadas cinco plÃntulas por bandeja, à medida que estas alcanÃavam os estÃdios de desenvolvimento (ED) 2 (emersÃo da radÃcula), 4 (emergÃncia do solo) e 8 (plÃntula estabelecida), as quais foram divididas nas suas partes constituintes (cotilÃdones e eixo embrionÃrio), tendo-se o ED 0 (castanha quiescente) como referÃncia. Avaliaram-se os efeitos da salinidade sobre as plÃntulas de cajueiro anÃo-precoce atravÃs de medidas da massa seca dos cotilÃdones e eixo embrionÃrio e da quantificaÃÃo dos teores de lipÃdios, proteÃnas totais e amido nos cotilÃdones e de carboidratos solÃveis (redutores e nÃo-redutores), aminoÃcidos livres e dos Ãons Na+, K+ e Cl- nos cotilÃdones e eixo embrionÃrio. AlÃm disso, avaliou-se a atividade das principais enzimas envolvidas na mobilizaÃÃo de reservas lipÃdicas (lipase, liase do isocitrato e sintase do malato) e amilÃceas (sintase do amido, &#945;+&#946;-amilase e fosforilase do amido) nos cotilÃdones de plÃntulas crescidas em condiÃÃes controle e em 18,0 dS.m-1. A maior taxa de depleÃÃo dos cotilÃdones ocorreu entre o ED 4 e o ED 8, simultaneamente à fase mais intensa de crescimento do eixo embrionÃrio. Todavia, esses processos foram inibidos pela salinidade, principalmente nas plÃntulas crescidas a 18,0 dS.m-1. A mobilizaÃÃo das reservas lipÃdicas e protÃicas dos cotilÃdones tornou-se evidente apÃs a emersÃo da radÃcula (ED 2), sendo mais pronunciada entre o ED 4 e o ED 8, porÃm, nessas plÃntulas, esse processo foi severamente inibido, na proporÃÃo em que a concentraÃÃo de sais do meio aumentou. Nas plÃntulas do controle, houve um aumento nos teores de aminoÃcidos livres dos cotilÃdones entre o ED 0 e o ED 2, seguido por um decrÃscimo entre o ED 2 e o ED 8, mas o mesmo nÃo aconteceu nas plÃntulas submetidas a 12,0 e 18,0 dS.m-1, em que ocorreu inibiÃÃo do transporte dos aminoÃcidos para o eixo embrionÃrio. Houve um acÃmulo transiente de amido nos cotilÃdones durante o estabelecimento da plÃntula de cajueiro anÃo-precoce, que foi severamente inibido pela salinidade, especialmente nas plÃntulas crescidas a 18,0 dS.m-1. Os teores de carboidratos solÃveis nos cotilÃdones foram ditados pela sua utilizaÃÃo (fraÃÃo nÃo-redutora) na etapa de germinaÃÃo (entre o ED 0 a ED 2), pela sua produÃÃo a partir da mobilizaÃÃo lipÃdica (fraÃÃo nÃo-redutora) e amilÃcea (fraÃÃo redutora) e pelo seu transporte para o eixo embrionÃrio (fraÃÃo nÃo-redutora). Entretanto, a salinidade afetou esses processos, causando reduÃÃo nos teores de carboidratos redutores nas plÃntulas no ED 8 e inibindo o transporte dos carboidratos nÃo-redutores para o eixo embrionÃrio. Adicionalmente, os teores de aminoÃcidos livres e carboidratos solÃveis do eixo embrionÃrio tambÃm aumentaram ao longo do estabelecimento da plÃntula, mas este aumento foi severamente inibido pela salinidade, principalmente nas plÃntulas submetidas a 18,0 dS.m-1. Os teores dos Ãons tÃxicos (Na+ e Cl-) nos cotilÃdones e no eixo embrionÃrio aumentaram consideravelmente com a salinidade, enquanto os de K+ foram reduzidos. Os maiores valores da atividade lipÃsica, assim como das enzimas liase do isocitrato, sintase do malato e (&#945;+&#946;)-amilase foram encontrados nos cotilÃdones das plÃntulas no ED 8, que correspondeu ao ED em que a mobilizaÃÃo lipÃdica e amilÃcea foi mais pronunciada, mas, dentre estas, apenas as atividades lipÃsica e amilÃsica foram inibidas pela salinidade. A sintase do amido, por sua vez, esteve mais ativa no ED 4, em concomitÃncia à etapa de acÃmulo do amido nos cotilÃdones, sendo fortemente inibida pela salinidade nesse mesmo ED. Jà a atividade da fosforilase do amido decresceu progressivamente entre o ED 0 e o ED 4, mas aumentou entre o ED 4 e o ED 8. A anÃlise em conjunto destes resultados permite concluir que a etapa de estabelecimento da plÃntula (entre o ED 2 e o ED 4) à mais sensÃvel à salinidade do que a de germinaÃÃo (entre o ED 0 e o ED 2). AlÃm do mais, os efeitos iÃnicos da salinidade pareceram mediar a inibiÃÃo da mobilizaÃÃo das reservas cotiledonares e a reduÃÃo do dreno exercido pelo eixo embrionÃrio sobre os cotilÃdones, resultando na reduÃÃo do crescimento da plÃntula de cajueiro anÃo-precoce / This study aimed to obtain basic information on seed germination and seedling establishment of dwarf-precocious cashew (Anacardium occidentale L.) under saline conditions and the relationship between salinity and reserve mobilization during these processes. BRS 189 seeds (cashew nuts) were sown in plastic trays containing vermiculite moistened with distilled water (control) or NaCl solutions with electrical conductivities of 6.0, 12.0 and 18.0 dS m-1 (saline treatments), which were kept in a greenhouse. During the experiment, were harvested five seedlings (cotyledons and embryonic axis) per tray, when they reached the followed developmental stages (DS): quiescent seed (0 DS), radicle protrusion (2 DS), seedling emergence (4 DS) and seedling established (8 DS). Salinity effects on the dwarf-precocious cashew seedlings were evaluated by cotyledons and embryonic axis dry mass, determination of lipids, protein and starch contents in cotyledons and determination of soluble carbohydrates (reducing and non-reducing), free amino acids, Na+, K+ and Cl- contents in cotyledons and embryonic axis. We also evaluated the enzymes involved in the lipid (lipase, isocitrate lyase and malate synthase) and starch (starch synthase, &#945;+&#946;-amylase and starch phosphorylase) mobilization in cotyledons of seedlings grown under control and 18.0 dS m-1 conditions. In cotyledons, the highest depletion rate occurred between 4 and 8 DS, which corresponded the most intense growth phase of the embryonic axis. However, these processes were inhibited by salinity, especially in the seedlings grown at 18.0 dS m-1. In cotyledons, lipid and protein mobilization became evident after the radicle protrusion (2 DS), being more pronounced between 4 and 8 DS. On the other hand, for these seedlings, this process was strongly inhibited, with the salt concentration increase. In control seedlings, there was an increase in free amino acids contents of cotyledons between 0 and 2 DS, followed by a decrease between 2 and 8 DS. It has not been observed in seedlings subjected to 12.0 and 18.0 dS m-1, in which there was an inhibition of amino acids transport to the embryonic axis. In addition, a starch transient accumulation occurred in the cotyledons, during the dwarf-precocious cashew seedling establishment, which was strongly inhibited by salinity, especially in the seedlings grown at 18.0 dS m-1. The soluble carbohydrates contents in cotyledons were influenced by their use (fraction of non-reductive) in the germination (between DS 0 and DS 2), their production from lipid (non-reducing fraction) and starch (reducing fraction) mobilization and their transport to the embryonic axis (non-reducing fraction). However, these processes were affected by salinity, causing a reduction in reducing carbohydrates contents in 8 DS seedlings and inhibiting the non-reducing carbohydrates transport to embryonic axis. Additionally, the free amino acids and soluble carbohydrates contents also increased in embryonic axis during the seedling establishment, but this increase was strongly inhibited by salinity, especially in the seedlings subjected to 18.0 dS m-1. The toxic ions (Na+ and Cl-) concentration in cotyledons and embryonic axis increased significantly with salinity, whereas K+ content was reduced. The highest lipase, isocitrate lyase, malate synthase and (&#945;+&#946;)-amylase activities were observed in cotyledons 8 DS seedlings, which corresponded to the DS with more intense lipid and starch mobilization, among these enzymes, only the lipase and amylase were inhibited by salinity. The starch synthase activity was most intense at 4 DS, simultaneously to the starch accumulation in the cotyledons, being strongly inhibited by salinity in this period. The starch phosphorylase activity decreased progressively between 0 DS and 4 DS, but increased between 4 DS and 8 DS. These results show that seedling establishment (between 2 DS and 4 DS) is more sensitive to salinity than seed germination (between DS 0 and DS 2). Moreover, the salinity ionic effect seems to mediate the cotyledonary reserve mobilization inhibition and it reduced embryonic axis sink on the cotyledons, which negatively affect dwarf-precocious cashew seedlings growth

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / O presente trabalho teve por objetivo estudar as respostas fisiolÃgicas e bioquÃmicas de clones de cajueiro anÃo-precoce (Anacardium occidentale L.) ao estresse salino. Os experimentos foram conduzidos em casa de vegetaÃÃo, sendo as plÃntulas cultivadas em vasos plÃsticos contendo vermiculita. No primeiro experimento, cinco clones de cajueiro anÃo-precoce foram submetidos aos tratamentos com NaCl a 0 (controle), 8 e 16 dS.m-1 de condutividade elÃtrica e objetivou selecionar clones com tolerÃncias diferenciadas ao estresse salino. Para isso, foram estudados os efeitos da salinidade no crescimento, nas trocas gasosas, no teor de Ãgua, na suculÃncia foliar, no potencial osmÃtico, nas concentraÃÃes de prolina, N-aminossolÃveis e carboidratos solÃveis e nos teores dos Ãons inorgÃnicos (Na+, Cl- e K+). A salinidade reduziu o crescimento das plÃntulas de todos os clones estudados. Os efeitos inibitÃrios do NaCl foram mais conspÃcuos na parte aÃrea do que nas raÃzes. O clone CCP 06 foi aquele que apresentou maior reduÃÃo no crescimento foliar, enquanto os clones BRS 189 e CCP 09 foram os que apresentaram as menores reduÃÃes. A salinidade inibiu a mobilizaÃÃo das reservas cotiledonÃrias, principalmente, na dose mais elevada de sal. A reduÃÃo no crescimento, pela salinidade, correlacionou-se com a reduÃÃo na taxa de fotossÃntese lÃquida. Os clones CCP 06 e BRS 189 apresentaram, respectivamente, a maior e a menor reduÃÃo na taxa fotossintÃtica a 8 dS.m-1. Embora a salinidade tenha reduzido a condutÃncia estomÃtica dos clones de cajueiro anÃo-precoce, essa reduÃÃo nÃo foi acompanhada por mudanÃas nas concentraÃÃes internas de CO2. Os clones estudados nÃo apresentaram alteraÃÃes, em funÃÃo da salinidade, no estado hÃdrico das folhas e raÃzes, porÃm, apresentaram reduÃÃes no potencial osmÃtico, favorecendo o ajustamento osmÃtico e, consequentemente, a manutenÃÃo da turgescÃncia dos tecidos. Sob condiÃÃes de estresse salino, os clones BRS 189 e CCP 09 foram os mais eficientes na regulaÃÃo do transporte do Ãon Na+ para a parte aÃrea da plÃntula, acumulando-o nas raÃzes. Em relaÃÃo ao Cl-, o clone CCP 09 mostrou-se o mais eficiente no controle do transporte desse Ãon. PorÃm, CCP 06 foi o clone que mais acumulou ambos os Ãons tÃxicos na parte aÃrea da planta. Com o aumento da salinidade, os teores de potÃssio dos clones estudados tiveram seus valores reduzidos apenas nas raÃzes. Na dose de 8 dS.m-1, o BRS 189 foi o clone que mais aumento suas concentraÃÃes de N-aminosolÃveis e prolina no suco radicular. Nesse mesmo nÃvel de sal, a salinidade aumentou a concentraÃÃo de carboidratos apenas nos clones CCP 06 e BRS 189. De posse destes resultados, o segundo experimento foi realizado com os clones CCP 06 e BRS 189 que foram os que se mostraram, respectivamente, o menos e o mais tolerante à salinidade. Esse experimento teve por objetivo estudar os efeitos da salinidade (NaCl a 8 dS.m-1) na atividade da H+-ATPase e na composiÃÃo e peroxidaÃÃo dos lipÃdios de membrana plasmÃtica isoladas de raÃzes das plÃntulas dos dois clones contrastantes. A salinidade estimulou a atividade da H+-ATPase apenas no clone tolerante, o BRS 189, sendo esse clone o que apresentou maior conteÃdo de esterÃis totais e menor relaÃÃo fosfolipÃdios totais (PLt)/ esterÃis totais (Et), tanto em condiÃÃes controle como de estresse. Esses resultados foram concordantes com o fato de ter sido o BRS 189 o clone que melhor excluiu o Na+ da parte aÃrea. Nesse clone nÃo foram observadas alteraÃÃes nos teores de malondialdeÃdo, diferentemente do que ocorreu com o CCP 06, cujos teores aumentaram com o estresse salino. A maior proteÃÃo da membrana plasmÃtica do clone BRS 189 ao dano oxidativo està de acordo com os maiores acÃmulos de prolina e N-aminossolÃveis observados nesse clone. Os principais fosfolipÃdios da membrana plasmÃtica isolada de raÃzes do clone BRS 189 foram fosfatilglicerol (PG), fosfatidiletalonamina (PE) e fosfatilserina (PS). A salinidade provocou alteraÃÃes nas proporÃÃes relativas dos fosfolipÃdios, sendo PE e fosfatidilinositol (PI) os que apresentaram maiores aumentos em relaÃÃo ao total, enquanto que fosfatidilglicerol (PG) e Ãcido fosfatÃdico (PA) foram os que apresentaram maiores reduÃÃes. A percentagem de PS, em relaÃÃo ao total, nÃo foi afetada pela salinidade. No entanto, a relaÃÃo entre essas mudanÃas na composiÃÃo lipÃdica do BRS 189 pela salinidade e o aumento na atividade da H+-ATPase necessita ser melhor investigada. / Early-dwarf cashew seedlings (Anacardium occidentale L.) were used in order to investigate the physiological and biochemical changes induced by salt stress. The seeds (nuts) were sown in plastics pots containing vermiculite moistened with either distilled water (control treatment) or NaCl solutions at 8 and 16 dS.m-1 of electrical conductivity (saline treatment), and kept in greenhouse throughout the experimental period. Uniform 28-day-old seedlings were used for the analyses. The first experiment aimed to select, among five clones (CCP 06, CCP 09, CCP 76, Embrapa 51 and BRS 189), the ones showing contrasting salt-tolerance. The effect of salinity on the growth, gas exchange, water content, leaf succulence, osmotic potential and inorganic (Na+, Cl-, K+) and organic (proline, soluble carbohydrates, quaternary ammonium compounds) solute concentration for both salt-sensitive and salt-tolerant clones was studied. Salinity inhibited the growth of all clones studied, being the inhibitory effect on shoot growth more conspicuous than in root growth. Clone CCP 06 leaf area was the most inhibited by salt stress, while clones BRS 189 and CCP 09 leaf areas were the least affected by salinity. Salt stress caused a great decrease in the cotyledon reserve mobilization especially at 16 dS.m-1. Growth reduction was correlated to the reduction in net photosynthetic rate. CCP 06 and BRS 189 showed the greatest and the lowest reduction in photosynthetic rate at 8 dS.m-1, respectively. Although, salinity reduced stomatal conductance, this reduction was not followed by changes in CO2 internal concentration. The water status, expressed as water content in relation to dry mass, was not changed by salt-stress. Salinity induced the lowering of osmotic potential both in leaves and roots of all clones studied. This osmotic adjustment might have lead to turgor maintenance of those tissues. The concentrations of Cl- and Na+ increased with increasing salt stress. Clones BRS 189 and CCP 09 accumulated more Na+ in the roots, and this could explain their efficiency in maintaining a lower ion concentration in shoots, i.e. they regulated more efficiently the transport of Na+ from roots to shoots. The regulation of Cl- transport to shoots was more efficient in clone CCP 09 than in the others. Salinity did not induce significant changes in leaves and stems K+ concentration, but it induced a reduction of K+ concentration in roots. Salinity also induced increases of quaternary ammonium compounds and proline concentration in BRS 189 root at 8 dS.m-1. In addition, this level of salinity increased soluble carbohydrates in the root sap especially in clones BRS 189 and CCP 06. During the second experiment, the effect of salt stress (NaCl at 8 dS.m-1) on the activity of H+-ATPase, lipid composition and peroxidation of root plasma membrane of both salt-tolerant (BRS 189) and salt- sensitive (CCP 06) clones were studied. The vanadate-sensitive H+-ATPase activity was studied in plasma membrane-enriched vesicles isolated by discontinuous sucrose gradient centrifugation from roots. ATP hidrolizing activity in this fraction was mostly inhibited by vanadate and scarcely, by azide and molybdate, indicating that it was essentially enriched in plasma membrane vesicles. Salinity induced a 1.3-fold increase in the H+-ATPase specific activity in roots of BRS 189 seedlings. Salinity had no appreciable effect on the hydrolytic activity of this enzyme during the growth of CCP 06 seedlings. Likewise, clone BRS 189 roots plasma membrane showed higher sterol content and lower phospholipids/total sterol ratio than clone CCP 06. Both properties could contribute to the decrease in Na+ influx or increase in Na+ efflux or âexclusionâ from roots. This could result in less Na+ being transported to the shoot, and thus explaining the higher salt-tolerance of clone BRS 189. The higher degree of root plasma membrane lipid peroxidation of clone, and the lower proline and ammonium quaternary compounds contents of CCP 06 when compared to BRS 189 could also explain the differences in salt-tolerance between the two clones. These organic solutes could protect and stabilize plasma membrane against oxidative stress. Phosphatidylglycerol (PG), phosphatidylethanolamine (PE) and phosphatidylserine (PS) were the major phospholipids in the plasma membrane from BRS 189 roots. Salinity induced increases in the relative proportions of PE and phosphatidylinositol (PI), while PG and PA were reduced. No changes were detected in PS in relation to control plant. The importance of lipid composition changes on H+-ATPase activity must be more studied.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O pinhÃo-manso (Jatropha curcas L.) à uma planta oleaginosa, pertencente à famÃlia Euphorbiaceae, cujas sementes sÃo reconhecidas como matÃria-prima com potencial para a produÃÃo de Ãleo. Essa planta tambÃm à considerada tolerante a condiÃÃes adversas, tais como dÃficit hÃdrico e deficiÃncia nutricional do solo, o que favorece o seu cultivo em regiÃes Ãridas e semiÃridas. Objetivou-se avaliar os efeitos do estresse salino sobre a germinaÃÃo e a mobilizaÃÃo das reservas de sementes e plÃntulas de pinhÃo-manso, por meio de anÃlises bioquÃmicas, fisiolÃgicas e ultraestruturais. Os parÃmetros germinativos foram negativamente afetados pelo estresse salino, observando-se reduÃÃes significativas principalmente no percentual de germinaÃÃo e no Ãndice de velocidade de germinaÃÃo. Similarmente, a matÃria seca, avaliada no eixo embrionÃrio e no endosperma, foi reduzida pela salinidade. Com relaÃÃo aos compostos de reserva, os lipÃdios foram os mais abundantes, correspondendo a 64,0% da matÃria seca do endosperma da semente quiescente. Estes compostos apresentaram forte retardo em sua mobilizaÃÃo em condiÃÃo de estresse salino. As proteÃnas, a segunda reserva mais abundante (21,3%), tambÃm tiveram sua mobilizaÃÃo severamente afetada pelo tratamento salino. O amido foi detectado em pequena quantidade (5,5%), porÃm, verificou-se o aumento transiente de seu teor aos 5 dias apÃs a semeadura (DAS), que coincidiu com a intensa mobilizaÃÃo de lipÃdios, em condiÃÃes controle. Entretanto, em condiÃÃes de estresse salino, o amido foi pouco mobilizado. Os produtos da mobilizaÃÃo das reservas, em condiÃÃes controle, principalmente os aÃÃcares nÃo-redutores e aminoÃcidos livres aumentaram no endosperma, enquanto que, sob condiÃÃes de salinidade, eles foram pouco alterados. AlÃm disso, as anÃlises citoquÃmicas e ultraestruturais confirmaram a abundante quantidade de lipÃdios e proteÃnas, sendo detectados inÃmeros corpos proteicos e lipÃdicos no citoplasma das cÃlulas endospÃrmicas dessas sementes. A salinidade tambÃm promoveu alteraÃÃes morfolÃgicas e ultraestruturais nas cÃlulas endospÃrmicas durante a germinaÃÃo e desenvolvimento de plÃntulas. O presente estudo tambÃm avaliou o metabolismo lipÃdico atravÃs da anÃlise da composiÃÃo dos Ãcidos graxos do endosperma e da anÃlise da atividade enzimÃtica e da expressÃo gÃnica das enzimas lipase, liase do isocitrato e sintase do malato. Os Ãcidos graxos insaturados foram os mais abundantes, destacando-se o oleico e o linoleico-linolÃnico, que apresentaram incrementos em seus teores, em condiÃÃes controle, ao longo do perÃodo avaliado, porÃm, sob estresse salino foram pouco alterados. A lipase apresentou incremento na sua atividade ao longo da germinaÃÃo, que coincidiu com a intensa mobilizaÃÃo de lipÃdios observada no controle. Similarmente, a reduÃÃo dessa atividade foi correspondente ao retardo na mobilizaÃÃo dos lipÃdios em condiÃÃo de estresse salino. A atividade enzimÃtica da liase do isocitrato nÃo apresentou diferenÃas significativas entre os tratamentos atà Ãs 96 horas apÃs a semeadura (HAS), porÃm apÃs esse perÃodo, verificaram-se as maiores reduÃÃes na condiÃÃo de estresse salino, quando comparado ao controle. Jà a atividade da sintase do malato foi significativamente maior em condiÃÃes controle atà Ãs 144 HAS, entretanto, a partir desse perÃodo, essa atividade se mostrou superior em condiÃÃes salinas. Verificaram-se reduÃÃes na atividade dessas enzimas em decorrÃncia do estresse, o que teve correlaÃÃo com as mudanÃas na expressÃo dos genes da lipase e liase do isocitrato. Portanto, pode-se concluir que a salinidade contribuiu para o retardo na mobilizaÃÃo dos lipÃdios, a principal reserva encontrada nas sementes de J. curcas, o que foi correlacionado a reduÃÃo na atividade das enzimas envolvidas no seu metabolismo. / Jatropha curcas L. is an oilseed species belonged to Euphorbiaceae family, whose seeds are recognized as promising source for biodiesel production. Its ability to survive in adverse conditions, such as water stress and poor nutritional soil, is noteworthy, which favors its cultivation in arid and semiarid regions. Here we evaluate the negative effects promoted by NaCl salt stress on seed germination, reserve mobilization of J. curcas through biochemical, physiological and ultrastructural analysis. The seed germination parameters were significantly affected by salt stress, being observed that the main parameters affected were germination percentage and germination speed index. Similarly, the embryo and endosperm dry mass were reduced by Na+ and Cl- increase in the medium. Considering the reserve compounds, the most abundant reserve of these seeds were the lipids, which corresponded to 64.0% of endosperm seed quiescent dry mass. They showed a stronger delay in reserve mobilization under saline conditions. Proteins were the second most important reserve (21.3%), being severally affected by salinity. The starch was detected in little amount (5.5% of quiescent seed dry mass), however there was a transient increase in this contents at 5 DAI (days after imbibition), which was correlated to the intense lipid mobilization, in control conditions. On the other hand, in salinity, it was observed that starch mobilization was reduced. The seed reserve products (mainly non-reducing sugars and free amino acids) were increased in endosperm in control in relation to quiescent seed, during germination, whereas for salt conditions, these products were few changed. Additionally, cytochemical and ultrastructural analyses confirmed the large amount of protein and lipid bodies in endosperm cells, reaching the identification of a huge amount of protein and lipid bodies. Salt stress promoted morphological and ultrastructural changes in endospermic cells, during germination and seedling development confirming the biochemical analyses. The present study also evaluated the lipid metabolism, using the fatty acid composition analysis and enzymatic and expression genic analyses for lipase, isocitrate liase, malate sintase. The unsaturated fatty acids were the most abundant, highlighting oleic (C18:1) and linoleic-linolenic (C18:2; C18:3), showing increase in their contents, in control conditions, during the evaluated period. However, the fatty acids practically were not changed in salinity conditions. Lipase showed increase in their activity during germination, which corresponded to intense mobilization in lipids in control. In similar way, the reduction of this activity happened in salinity, correlating to lipid delay mobilization. The evident delay of protein and oil body mobilization could strongly affect initial seedling development. The liase isocitrate activity did not show significant differences between treatments until 96 hours after imbibition (HAI), however, following this period, it was verified the strongest reduction in salt stress condition. The activity of malate synthase was not significantly higher in control conditions until 144 HAI, however, following this period, this activity was higher in salinity. It were verified reductions in enzymatic activity due to salt stress, which were correlated to gene expression changes of lipase and isocitrate lyase. Therefore, salinity contributed negatively to lipid mobilization, the main reserve of J. curcas seeds, which was correlated to reduction in activity of the enzymes involved in lipid metabolism.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O efeito antibacteriano de Ãleos essenciais extraÃdos de folhas das espÃcies de Lippia aff. gracilis e Lippia gracilis frente a cepa de Staphylococcus aureus isolada de Ãlcera de paciente com pà diabÃtico foi avaliado mediante experimentaÃÃo in vitro e in vivo, utilizando-se o modelo experimental de ratos diabÃticos aloxano induzidos. Cento e doze ratos machos Wistar diabÃticos com peso mÃdio de 180g foram distribuÃdos ao acaso em dois experimentos. Cada experimento foi dividido em dois procedimentos que avaliaram a atividade antibacteriana de soluÃÃes dos Ãleos essenciais a 5%, em dois diferentes procedimentos: um no ato da administraÃÃo do inÃculo bacteriano e outro apÃs vinte e quatro horas de administraÃÃo. A administraÃÃo tanto do inÃculo 108ufc/ml quanto da suspensÃo dos Ãleos foi por via subcutÃnea no membro pÃlvico dos ratos diabÃticos. CinqÃenta e seis ratos Wistar foram utilizados para cada experimento, no qual os mesmos foram distribuÃdos ao acaso em 8 (oito) diferentes grupos: 4 grupos por experimento, apresentando 7 ratos por grupo (G1-Branco; G2-Controle negativo; G3-Controle positivo; G4-Teste). Foi verificado que no procedimento 1(S.aureus sem Lippia aff gracilis 108  698 versus S.aureus com Lippia aff gracilis 293,1  79,07; S.aureus sem Lippia gracilis 108  873 versus S.aureus com Lippia gracilis 302  57,2) e no procedimento 2 (S.aureus sem Lippia aff gracilis 108  313 versus S.aureus com Lippia aff gracilis 13,28  4,03; S.aureus sem Lippia gracilis 108  818 versus S.aureus com Lippia gracilis 13,14  4,27); houve reduÃÃo na contagem bacteriana tanto para Lippia aff. gracilis quanto para Lippia gracilis. Quando comparados os grupos G4 com G3, observou-se que esta suspensÃo a 5% nÃo apresentou efeito prÃ-inflamatÃrio. Para a validaÃÃo destes resultados, foram utilizados os testes Mann-Whitney e Bartletts &Newman-Keuls (MÃdia  - E.P.M) com nÃvel de significÃncia de (p<0,05). Ainda neste estudo foi avaliado a aÃÃo antioxidante e imunomoduladora da L-glutamina em modelos de ratos Wistar diabÃticos quando administrada por gavagem a uma concentraÃÃo de 0,7g/kg em um perÃodo de 30 dias. Quarenta ratos Wistar machos foram distribuÃdos ao acaso em 5 grupos (GI-nÃo diabÃtico; GII-diabÃtico; GIII-diabÃtico com salina; GIV-diabÃtico com L-glutamina; GV-diabÃtico com ProteÃna do Soro do Leite). Passado este perÃodo, foram determinadas as concentraÃÃes de substÃncias reativas ao Ãcido tiobarbitÃrico (TBARS) e glutationa reduzida (GSH) no soro e nos tecidos hepÃticos, pancreÃticos, mÃsculo esquelÃtico, rins e tecido adiposo. Para as comparaÃÃes entre o grupo tratado com L-glutamina com os demais, utilizou-se a anÃlise de variÃncia (ANOVA-teste Tukey). As comparaÃÃes entre grupos foram feitas utilizando-se o teste t de Student. Valores de p<0,05 foram considerados significantes. A suplementaÃÃo com L-glutamina induziu ao aumento nas concentraÃÃes de GSH (MÃdia  E.P.M) e reduÃÃo significante nas concentraÃÃes de TBARS (MÃdia  E.P.M), quando comparadas com o grupo controle, nos espÃcimes analisados. A aÃÃo imunomoduladora foi avaliada atravÃs da quantificaÃÃo de linfÃcitos CD4+ e CD8+ em sangue total. Vinte e quatro ratos Wistar machos diabÃticos foram distribuÃdos igualmente em 3 grupos (G1-diabÃtico com salina; G2-diabÃtico com L-glutamina; G3- diabÃtico com ProteÃna do Soro do Leite). Observou-se um aumento significante nas populaÃÃes de linfÃcitos CD4+ (MÃdia  E.P.M) com reduÃÃo nas populaÃÃes de linfÃcitos CD8+ (MÃdia  -E.P.M) do grupo G2 quando comparado com o grupo controle, ressaltando a importÃncia da L-glutamina como imunonutriente / The antibacterial effect of essential oils extracted from leaves of the species of Lippia aff. gracilis and Lippia gracilis against strains of Staphylococcus aureus isolated from patients with diabetic foot ulcers were evaluated in vitro and in vivo experimetation utilizing an experimental model of alloxan-induced diabetic rats. One hundred and twelve male diabetic Wistar rats with mean weight of 180g were distributed by chance into two experiments. Each experiment was divided in two procedures with evaluation of antibacterial activity of essential oils at 5% solutions; one procedure in the act of administration of bacterial inoculums and the other one 24 hours later. 108 CFU (Colony Forming Unit) /mL, as well as oils suspension inoculated in the subcutaneous tissue of the pelvic member of diabetic rats. Lower than 5% concentration of administered solution presented antibacterial effect in the in vitro experiment. Fifty-six Wistar rats were utilized in each experiment, randomly distributed in 08 different groups: 04 groups per experiment, each group with 07 rats (G1-White; G2-Negative Control; G3- Positive control; G4-Test). There was decrease in CFU/mL in procedure 1 (S.aureus without Lippia aff gracilis 108  698 versus S.aureus with Lippia aff gracilis 293,1  9,07; S.aureus without Lippia gracilis 108  873 versus S.aureus with Lippia gracilis 302Â57,2), which evaluated antibacterial effect of oils concomitantly with the administration of inocula as well as in procedure 2 (S.aureus without Lippia aff gracilis 108  313 versus S.aureus with Lippia aff gracilis 13,28  4,03; S.aureus without Lippia gracilis 108  818 versus S.aureus with Lippia gracilis 13,14  4,27) , which evaluated antibacterial effect of oils 24 hours after the administration of the inoculum . When comparing group G4 with G3, it was observed that 5% solution presented no pro-inflammatory effect, for analysis of these results, the tests of Mann-Whitney and Bartletts & Newman-Keuls (X  S.E.M) with level of significance (p<0,05) were used. Part of this study evaluated the antioxidant and immunomodulating effect of L-glutamine in models of Wistar diabetic rats when administered by gavages at a 0,7g/kg during 30 days. Fourty Wistar male rats were randomly distributed in 5 groups (GI- non diabetic; GII-diabetic; GIII-diabetic with saline; GIV- diabetic with L-glutamine; GV- diabetic with Whey Protein). After 30 days concentrations of TBARS and GSH in serum and in hepatic, pancreatic, skeletal muscles, kidneys and fat tissues were determined. For comparisons between the group treated with L-glutamine with the others, the ANOVA â Tukey test was utilized and the comparisons between groups were done using Studentâs t test. Values of p<0.05 were considered significant. The supplementation with L-glutamine induced an increase in the concentrations of GSH (Mean&#61617;S.E.M) and significant reduction in the TBARS (mean  S.E.M) concentrations, when compared to the control group, in the analyzed specimens. The immunomodulating effect was evaluated by quantification of CD4+ and CD8+ lymphocytes in total blood. Twenty-four Wistar male diabetic rats were distributed equally in 3 groups (G1-diabetic with saline; G2-diabetic with L-glutamine; G3- diabetic with Whey Protein). It was seen a significant increase of CD4+ (mean  S.E.M) lymphocytes with reduction of CD8+ (mean  S.E.M) lymphocytes in group G2 when compared to the control group, showing the importance of L-glutamine as an immunonutrient