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Estudio descriptivo de la condición sanitaria microbiológica de productos pesqueros chilenos de exportación entre los años 1998 - 2002Alvarez Sandoval, Jorge Luis January 2005 (has links)
Memoria para optar al Título
Profesional de Médico Veterinario / El presente trabajo, entrega los resultados de análisis de parámetros
microbiológicos de la gran mayoría de los productos pesqueros que hoy se
exportan desde Chile al mundo entero.
La estimación del número de bacterias en los alimentos se utiliza con
frecuencia como evaluación retrospectiva de la calidad microbiológica, o para
evaluar la presunta inocuidad alimentaria. Este procedimiento requiere que se
tomen muestras del alimento, se realicen ensayos o análisis microbiológicos y se
evalúen los resultados, por comparación con criterios microbiológicos ya
establecidos.
En el estudio, se evaluaron los resultados obtenidos de análisis de
alrededor de 1.500 muestras de lotes de productos pesqueros, y se encontró que
solo un 0,5% de ellas tuvo problemas de no aceptabilidad según sus resultados
microbiológicos. Por esta razón, se puede afirmar que la condición sanitaria de los
productos pesqueros de exportación a todo nivel cumple las más rigurosas normas
de aceptabilidad y pueden ser comercializadas a todo el mundo sin mayor
dificultad.
Estudios microbiológicos de productos pesqueros de exportación de este
tipo no se han publicado, razón por la cual, se espera que este sea de gran
utilidad para futuras investigaciones y poder afinar técnicas diagnósticas que
garanticen los productos inocuos tanto a nivel nacional como internacional.
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Determinación de los períodos de carencia de diferentes formulaciones de flumequina administradas en pollos broilerPizarro Aránguiz, Nicolás Javier January 2009 (has links)
Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Las quinolonas y fluoroquinolonas son antimicrobianos ampliamente usados en producción animal para el tratamiento de enfermedades bacterianas. Sin embargo, su uso puede ser riesgoso para los consumidores si no se respetan los períodos de carencia, ya que pueden quedar residuos de estos fármacos en los alimentos de origen animal destinados al consumo humano. El método analítico utilizado para la determinación de flumequina, fue previamente validado de acuerdo a las recomendaciones de la Decisión 2002/657/CE de la Comunidad Europea. Para la detección y cuantificación de la droga en los tejidos en estudio, se utilizó Cromatografía Líquida asociada a Espectrometría de Masa Masa. El límite de detección de la técnica fue de 1,5 μg/kg, la capacidad de detección fue de 2 μg /kg y la recuperación fue mayor al 90% en promedio. Para determinar el período de carencia de flumequina en músculos e hígados de pollos Broiler, a tres grupos de aves se les administró una formulación comercial de flumequina al 10%, 20% y 80%, respectivamente. Los pollos Broiler fueron tratados con una dosis de flumequina de 24 mg/kg/pv vía oral, por 5 días consecutivos. Las concentraciones de flumequina fueron monitoreadas durante los siguientes días post tratamiento. Los niveles de antimicrobianos tanto en músculos como hígados, en el primer día postratamiento, fueron elevados en los 3 grupos experimentales descendiendo rápidamente en los próximos días. Considerando los LMRs de la Comunidad Europea, Japón y Chile se estimaron los períodos de carencia en pollos Broiler para 3 presentaciones comerciales. Considerando como tejido blanco los músculos de pollo Broiler, en el caso de flumequina al 10% y 20 %, tomando en cuenta los LMRs de 400 o 500 μg /kg. el período de carencia estimado es de 2 días. En el caso de flumequina 80 % el período de carencia estimado es de 1 día. En el caso de los hígados como tejido blanco, se consideraron los LMR 500, 800 y 1000 μg/kg Los períodos de carencia estimados para flumequina al 10 % corresponden a 3 días para un LMR de 500 μg/kg y de 2 días para los LMR de 800 y 1000 μg/kg.
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En el caso de flumequina al 20 %, los períodos de carencia estimados corresponden a 2 días para los LMR de 500 y 800 μg/kg y de 1 día para el LMR 1000 μg/kg. Para flumequina 80% los períodos de carencia estimados corresponden a 2 días para los LMR de 500 y 800 μg/kg y de 1 día para el LMR 1000 μg/kg. En conclusión el período de carencia estimado por el SAG, de 10 días para las 3 presentaciones comerciales de flumequina presentes a nivel nacional, debe ser revisado según los resultados obtenidos en esta memoria de titulo, ya que se encontró diferencias en los períodos de carencia estimados en las diferentes presentaciones comerciales de flumequina usadas en avicultura a nivel nacional.
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Levaduras con potencial de remediación de 2,4,6 -trinitrotolueno (TNT) y evaluación de su capacidad degradativaPeceros Melchor, Mesalina Violeta January 2019 (has links)
Plantea evaluar levaduras, aisladas de ambientes mineros, con posible uso potencial en la degradación del TNT. Para ello, un total de 29 cepas de levaduras fueron seleccionadas para la evaluación de tolerancia frente a TNT; de las cuales 5 cepas no manifestaron cambios en el crecimiento celular en concentraciones altas de TNT de hasta en 1500 mg/L, más si un cambio en el patrón morfológico (levadura-hifa-pseudohifa). Luego, las levaduras seleccionadas fueron caracterizadas molecularmente, mediante la amplificación y secuenciación de la región D1/D2 del gen LSU 28S rDNA. A partir del análisis bioinformático y filogenético confirmamos la identidad de las cepas 8TS-500Z, MD3-S1, MD10-A1 y MD10-A3 como Candida orthopsilosis, Candida maltosa, Candida maltosa y Debaryomyces hansenii, respectivamente. Posteriormente, se realizó la evaluación de cada cepa de levadura en la degradación de TNT, como única fuente de nitrógeno, monitoreando la degradación de TNT, el crecimiento celular y la liberación de nitrito. Las cepas Debaryomyces hansenii MD10-A3 y Candida maltosa MD3-S1 lograron valores superiores en el porcentaje de remoción, 71.1±0.5 % y 67.7±2.6 %, respectivamente. Mientras que, las cepas Candida maltosa MD10-A1, Yarrowia lipolytica 9TS-500-1 y Candida orthopsilosis 8TS-500Z presentaron porcentajes de 57±4.1 %, 52.6±1.2 % y 47.4±3.1 %, a correspondencia, durante 84 h de incubación. El análisis de las constantes de velocidad de reacción (k) mediante modelos cinéticos de primer y segundo orden, la tasa específica de crecimiento (μ) y concentración de nitrito liberado durante la remoción de TNT a las 84 h de incubación, identificaron a la cepa Debaryomyces hansenii MD10-A3 como la mejor en eliminación máxima de TNT; debido a una mayor constante de velocidad de reacción k1=0.0159 ± 0.0012 h-1 (r2=0.9735) y crecimiento μ = 0.0136 ± 0.0025 h-1 (r2=0.8724); además de presentar la concentración más alta de nitrito de 2.5 ± 0.18 mg/L a las 84 h de incubación. Después, se utilizó un diseño factorial fraccionado 25-1, para evaluar qué factores influyen en la eficiencia de degradación de TNT por la cepa Debaryomyces hansenii MD10-A3 Los factores seleccionados fueron: glucosa (2.52 - 7.56 g/L), NH4Cl (0 - 0.2 g/L), tween 80 (0.1 - 0.5 %), inóculo inicial (0.3 - 0.7 DO) y pH (4.5 - 7.5). Los análisis ANOVA mostraron como los factores más influyentes, en el porcentaje de remoción de TNT, a glucosa, NH4Cl y pH con valores-P < 0.05. Además, se encontró que el efecto de estos factores en la remoción de TNT puede expresarse adecuadamente mediante un modelo polinómico de primer orden (r2 = 0.998). Finalmente, se validó el modelo determinado en condiciones óptimas, logrando un incremento en la eficiencia de remoción de hasta un 140 % a las 24 horas; además de incrementar su constante de velocidad de remoción en un 132.5 % (k1 = 0.0379). / Tesis
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Caracterización de bacteriófagos líticos de Salmonella enterica aislados de muestras de pollosFlores Escobar, Gloria Isabel January 2017 (has links)
Aisla el bacteriófago denominado S6 a partir de una muestra de intestinos de pollo. Se evalúa la estabilidad del bacteriófago sometiéndolo a diferentes temperaturas y pH, también se determina la sensibilidad al cloroformo y las características biológicas como multiplicidad de infección, tasa de adsorción y curva de un paso del bacteriófago aislado. Los resultados indican que el bacteriófago S6 es estable a pH entre 6 - 8 y temperaturas de 80°C hasta 60°C. Además, presenta características líticas solo para serovares de Salmonella como Typhimurium, Bispebjerg, Enteritidis mediante la microscopía electrónica de transmisión se determinó que pertenece al orden Caudovirales y a la familia Siphoviridae. / Tesis
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Evaluación del proceso inflamatorio de la toxoplasmosis aguda, crónica y reactivada en modelo murino por métodos inmunohistoquímicosCordova Gonzales, Eleonora January 2019 (has links)
Toxoplasma gondii es un parásito zoonótico de amplia distribución geográfica, y es causante de cuadros clínicos severos en humanos. Es importante conocer la patología cerebral en la toxoplasmosis, en particular la inflamación producida debido a las graves secuelas observadas en personas inmunosuprimidas y a los potenciales efectos neurológicos en personas con infección aguda o crónica. El objetivo del presente trabajo fue evaluar las diferencias de los procesos inflamatorios de la toxoplasmosis aguda, crónica y reactivada utilizando un modelo murino con toxoplasmosis cerebral. Se infectaron ratones Swiss-Webster con la cepa Me49 de T. gondii por vía oral, por un tiempo de 18 días (fase aguda), 120 días (fase crónica) y 165 días con un tratamiento inmunosupresor utilizando ciclofosfamida para inducir la reactivación de la infección. Para evaluar la eficacia del esquema de inmunosupresión, se evaluó su efecto en la competencia inmunológica, donde se evidenció una disminución significativa del número total de leucocitos (p=0.043) y un descenso en la producción de anticuerpos anti-T. gondii en los ratones inmunosuprimidos. Por otro lado, el análisis histológico reveló que tanto los ratones en fase aguda como los de fase crónica presentaron una mayor frecuencia de lesiones inflamatorias y un mayor ratio de microglia activada, a diferencia de los ratones inmunosuprimidos que mostraron resultados opuestos. Los resultados sugieren que la carga parasitaria varía de acuerdo al tiempo de infección y estado inmune del hospedero, siendo este último un factor importante para el desarrollo de una fuerte respuesta inflamatoria con una alta participación microglial. / Tesis
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Expresión de anticuerpos recombinantes de un solo dominio de llama (Lama glama) y análisis de su capacidad neutralizante de la actividad hemorrágica de una fracción del veneno de la serpiente Bothrops atroxLeiva Duran, Walter Jhon January 2019 (has links)
Expresa y purifica anticuerpos recombinantes de un solo dominio de llama (Lama glama) en Escherichia coli y evaluar su capacidad para neutralizar la actividad hemorrágica de una fracción pesada del veneno de la serpiente peruana Bothrops atrox, en ratones de laboratorio. Se analizaron 18 Nb expresados y purificados en E. coli para determinar su capacidad neutralizante de la actividad hemorrágica empleando ratones de laboratorio. Para esto se realizó un fraccionamiento del veneno de serpiente Bothrops atrox por cromatografía de exclusión molecular sobre resina Sephadex G-100 y se seleccionó una fracción de alto peso molecular con actividad hemorrágica. Se evaluó la dosis hemorrágica mínima (DHM) en el veneno crudo (0.810
μg) y en la fracción (0.433 μg) la cual representó 1.87 veces superior a la del veneno crudo; luego se evaluó la dosis eficaz 50% (DE 50) para cada Nb usando como dosis reto 4 DHM. Se encontró que 6 Nb tienen capacidad neutralizante además uno de ellos tiene una dosis eficaz 50% contra el efecto hemorrágico muy efectivo de 2247 μL de antiveneno/mg de veneno. También se evaluó la neutralización de la citotoxicidad de algunos Nb. Se concluye que algunos de los anticuerpos recombinantes de un solo dominio de llama (Lama glama) obtenidos en este estudio, son capaces de neutralizar la actividad hemorrágica de una fracción del veneno de la serpiente peruana B. atrox. Hay Nb que pueden ser usados para la formulación de un antídoto recombinante efectivo y económico. / Tesis
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Diagnóstico de parasitosis intestinal infantil con la Técnica de Concentración – Sistema ATParedes Torres, Jenny Esmeralda January 2018 (has links)
Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Describe las parasitosis más frecuentes en los niños de edad preescolar menores de 5 años de la I.E. “Cuna Jardín Municipal” del distrito de San Isidro, Lima, Perú, durante el año 2009. El Objetivo es implementar la Técnica de Concentración de Ritchie - Sistema AT., para el diagnóstico de parasitosis intestinal infantil, el cual es un método simple, de bajo costo y de alta sensibilidad. Se realiza un despistaje coproparasitológico en heces frescas fijadas en formol al 10 %, previa homogenización, a un total de 101 niños; empleando el examen convencional por microscopía en directo por tinción con lugol - solución fisiológica, y por la Técnica de Concentración de Ritchie - Sistema A.T. / Tesis
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Exopolisacárido Pel y formación de biopelículas en la bacteria acidófila Acidithiobacillus thiooxidansDíaz Fuenzalida, Mauricio Javier 03 1900 (has links)
Doctorado en Ciencias mención Microbiología. / Acidithiobacillus thiooxidans es una bacteria que obtiene energía metabólica y
poder reductor a partir de la oxidación de compuestos reducidos de azufre. En estado
natural, esta bacteria se encuentra junto con otros microorganismos participantes del
consorcio de biolixiviación de sulfuros metálicos formando estructuras multicelulares
llamadas biopelículas sobre la superficie de sulfuros minerales. Las células están
embebidas en una matriz de sustancias poliméricas extracelulares (EPS) las cuales se
componen principalmente de exopolisacáridos, proteínas y lípidos.
Se ha descrito que la solubilización de los minerales sulfurados metálicos está
mediada por estos EPS. Sin embargo, la composición de los EPS y su rol exacto en la
solubilización de sulfuros metálicos ha sido caracterizado solamente en la bacteria
oxidadora de hierro y azufre Acidithiobacillus ferrooxidans, aunque las demás especies
de Acidithiobacillus que son capaces de oxidar solamente compuestos reducidos del
azufre son fundamentales en estos procesos de lixiviación.
En base a estos antecedentes, nos propusimos caracterizar alguno de los EPS y los
mecanismos moleculares involucrados en la formación de biopelículas en la especie
modelo At. thiooxidans. En un trabajo previo, se identificó un gen putativo que codifica
para una proteína de unión a c-di-GMP PelD, la cual está caracterizada en Pseudomonas
aeruginosa formando parte de un complejo multiproteico de membrana involucrado en
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la biosíntesis del exopolisacárido Pel. Al analizar el contexto genético del gen pelD, se
identificó un putativo operón con una estructura similar al operón canónico identificado
en P. aeruginosa. El análisis comparativo entre los genomas disponibles de las bacterias
acidófilas que están presentes en los entornos minerales ácidos reveló que este operón
sólo está presente en los genomas de At. thiooxidans y At. caldus.
Ante este resultado, este trabajo se enfocó en comprender cuál sería la importancia
de este exopolisacárido en la formación de biopelículas de At. thiooxidans sobre la
superficie de azufre elemental. La medición de los niveles de transcrito mediante qPCR
mostró que los genes pelA, pelD y wcaG del putativo operón presentan un mayor de
expresión en células adheridas que en células planctónicas. El análisis de azúcares de
superficie mediante el uso de lectinas identificó la presencia de N-acetil-galactosamina y
N-acetil-glucosamina. Tratando de dilucidar algunas de las señales que regulan la
producción de Pel, se descubrió que la adición exógena de la molécula de Quorum
Sensing (QS) 3-oxo-C8 AHL incrementa la transcripción de los genes pelA y pelD.
Finalmente, se procedió a obtener una cepa mutante nula en el gen pelD mediante
recombinación homóloga. Luego de analizar el DNA de esta cepa, se realizaron análisis
de adherencia y formación de biopelículas sobre la superficie de azufre elemental
mediante microscopía electrónica y de epifluorescencia. La mutación ΔpelD afectó la
estructura de la biopelícula al reducir la presencia de N-acetil-galactosamina y N-acetilglucosamina
en la superficie, pero adicionalmente provocó un incremento en la
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producción de estructuras filamentosas que rodean a las células. Para resolver la
incógnita sobre la naturaleza de estas fibras, se realizaron análisis comparativos
preliminares de la expresión de proteínas extracelulares. El análisis del sobrenadante de
los cultivos y de las proteínas del EPS reveló un cambio en producción de proteínas
secretadas al medio.
En base a estos resultados es posible concluir que el exopolisacárido Pel producido
por la bacteria biominera At. thiooxidans juega un rol estructural en la formación de
biopelículas sobre la superficie de azufre elemental y que la regulación de su síntesis
involucra a las vías del QS y del c-di-GMP. / Acidithiobacillus thiooxidans is a bacterium that obtains metabolic energy and
reducing power from the oxidation of reduced sulfur compounds. In the natural state,
this bacterium is found along with other microorganisms that are members of the metal
sulfides bioleaching consortium forming multicellular structures called biofilms on the
surface of mineral sulfides. The cells are embedded in a matrix of extracellular
polymeric substances (EPS) which are composed mainly of exopolysaccharides, proteins
and lipids.
It has been described that the solubilization of the metal sulfide minerals is
mediated by these EPS. However, the composition of the EPS and their exact role in the
solubilization of metal sulfides has been characterized only in the iron and sulfur
oxidizer bacterium Acidithiobacillus ferrooxidans, although the other Acidithiobacillus
species that are only capable of oxidizing reduced sulfur compounds are important in
these leaching processes.
Based on this background, we set out to characterize some of the EPS and the
molecular mechanisms involved in biofilm formation in the model species At.
thiooxidans. In a previous work it was identified a putative gene encoding a c-di-GMP
binding PelD protein, which is characterized as part of a multiprotein membrane
complex involved in Pel exopolysaccharide biosynthesis in Pseudomonas aeruginosa.
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When we were analyzing the genetic context of the pelD gene, a putative operon with a
structure similar to the canonical operon identified in P. aeruginosa was identified.
Comparative analysis between available genomes of acidophilic bacteria that are present
in acidic mineral environments revealed that this operon is only present in the genomes
of At. thiooxidans and At. caldus.
Given this result, this work focused on understanding the importance of this
exopolisaccharide in biofilm formation of At. thiooxidans on the surface of elemental
sulfur. Measurement of transcript levels by qPCR showed that pelA, pelD and wcaG
genes of the putative operon exhibit a greater expression in attached cells than in
planktonic cells. The analysis of surface sugars by the use of lectins identified the
presence of N-acetyl-galactosamine and N-acetyl-glucosamine. Trying to elucidate some
of the signals that regulates the production of Pel, it was discovered that the exogenous
addition of Quorum Sensing (QS) molecule of 3-oxo-C8 AHL increases the transcription
of pelA and pelD genes.
Finally, a pelD gene null mutant strain was obtained by homologous
recombination. After analyzing the DNA of this strain, adherence and biofilm formation
analysis were performed on the elemental sulfur surface by electronic and
epifluorescence microscopy. The ΔpelD mutation affected the structure of the biofilm by
reducing the presence of N-acetyl-galactosamine and N-acetyl glucosamine on the
surface, but additionally caused an increase in the production of fibrillar structures
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surrounding the cells. To solve the unknown about the nature of these fibers, preliminary
comparative analysis of extracelluar protein expression were performed. Analysis of the
culture supernatant and proteins from EPS revealed a change in production of secreted
proteins to the medium.
Based on these results it is possible to conclude that the Pel exopolisaccharide
produced by the biomining bacterium At. thiooxidans plays a structural role at biofilm
formation on the surface of elemental sulfur and that the regulation of its synthesis
involves QS and c-di-GMP pathways. / Proyectos regulares Fondecyt 1120295 y 1160702 y beca Conicyt
21120064 por aportar el financiamiento durante el desarrollo de la tesis.
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Identificación y caracterización de componentes celulares implicados en transducción de señales en Synechococcus sp. PCC 7942Burillo Sanz, Sergio 17 February 2006 (has links)
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Caracterización de la microbiota asociada a la ascidia Cystodytes dellechiajei productora de compuestos con actividad antitumoralMartinez-Garcia, Manuel 02 December 2005 (has links)
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