Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2008. / Submitted by Luana Patrícia de Oliveira Porto (luana_porto_23@hotmail.com) on 2010-03-14T20:26:32Z No. of bitstreams: 1 2008_MiguelEmilioSarmientoGener.pdf: 1452142 bytes, checksum: b9634c99b4506c2d4fb9051cc4f97a31 (MD5) / Rejected by Carolina Campos(carolinacamposmaia@gmail.com), reason: Falta incluir o resumo em espanhol. on 2010-03-17T14:56:38Z (GMT) / Submitted by Luana Patrícia de Oliveira Porto (luana_porto_23@hotmail.com) on 2010-03-17T17:29:07Z No. of bitstreams: 1 2008_MiguelEmilioSarmientoGener.pdf: 1452142 bytes, checksum: b9634c99b4506c2d4fb9051cc4f97a31 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-04-26T16:40:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_MiguelEmilioSarmientoGener.pdf: 1452142 bytes, checksum: b9634c99b4506c2d4fb9051cc4f97a31 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-04-26T16:40:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_MiguelEmilioSarmientoGener.pdf: 1452142 bytes, checksum: b9634c99b4506c2d4fb9051cc4f97a31 (MD5) Previous issue date: 2008 / Definição do problema e justificativa: De 1996 a 2006, o Estado do Tocantins (TO) registrou, em média, 0,3% dos casos de malária da Região Amazônica, dos quais, 37% foram autóctones. O risco médio foi um caso por 1.000 hab. Apresenta ainda condições geográficas, climatológicas e ecológicas menos favoráveis à transmissão da malária, em relação a outros Estados Amazônicos. Desta forma, há perspectiva de interrupção da transmissão autóctone no estado. Para tanto, é necessário uma análise epidemiológica da ocorrência dos casos autóctones registrados e seu risco de adoecer nos últimos 9 anos. Objetivo: Descrever as características epidemiológicas dos casos autóctones de malária registrados no TO, de 1998 a 2006. Métodos: Tipo de estudo: Epidemiológico, ecológico e descritivo com base em levantamento de dados disponíveis. Série temporal do número de casos autóctones de malária humana notificados no TO. Fontes de dados: Sistema de Informação sobre Malária (Sismal), Sistema de Vigilância em Malária (Sivep-Malária), Relatórios Técnicos, Empresa Brasileira de Pesquisa Agro-pecuária (Embrapa), Secretaria de Planejamento e Meio Ambiente do TO (SEPLAN-TO) e Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística (IBGE). Resultados: De 1998 a 2006, foram registrados 11.960 casos de malária no TO em 103 municípios. Do total de casos, 6.415 (53,6%) foram autóctones em 90 municípios. Dos casos autóctones, 66% concentraram-se nos municípios de Araguatins (26,2%), Caseara (13,8%), Araguaína (7,6%), Araguacema (6,8%), Ananás (6,7%) e Xambioá (5%). De 2003 a 2006, 12 municípios, 8,6% (N=139) do TO e 24% (N=50) daqueles com autoctonia, registraram 88,9% (N=866) de casos autóctones. Destes, 54,6% concentraram-se em Caseara (26%), Araguacema (21,2%) e Marianópolis do Tocantins (18,1%). Houve redução sustentável do número de casos e dos municípios com autoctonia. O risco de adoecer mostrou redução sustentável e foi muito baixo. As principais características epidemiológicas dos casos autóctones foram: homens (68,5%) de 15 ou mais anos de idade (70,2%), de um a três anos de estudo (33,6%), atividade agropecuária nos últimos 15 dias (42,4%), sintomáticos (99%) e infectados por P.vivax (80%), notificados por busca passiva (70,8%) com tempo entre primeiros sintomas e o diagnóstico/tratamento de mais de 48 horas (variando de 63,6 a 70%) e sazonalidade de março até junho. De 1998 a 2006, as infecções por P.falciparum foram registradas em 67,4% (N=89) dos municípios com autóctonia, com a maior ocorrência em Araguatins, Araguaína, Caseara, Palmas, Xambioá, Ananás, Esperantina e Marianópolis. A proporção de P. falciparum foi 20,2% e aumentou a partir de 2004. Entre 1998 e 2006, aumentou em Araguatins, Guaraí, Itaguatins, Marianópolis e Caseara. De 2003 a 2006, dos municípios com autoctonia, 63,8% realizaram a busca ativa (BA), mas houve queda em 2006 (35,7%). A BA foi ascendente entre os casos autóctones (variando de 24,2% até 33,9%). Conclusão: A malária autóctone humana foi registrada em dois terços dos municípios tocantinenses durante o período de estudo, com tendência descendente e risco muito baixo de adoecer. A maioria dos casos autóctones de malária humana foi registrada nos municípios de Marianópolis, Caseara e Araguacema. _____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Background: From 1996 to 2006, Tocantins State (TO) registered, on average, 0.3% of area cases, of which, 37% were autochthonous. The annual medium risk (IPA) was a case per 1.000 hab. It has some geographical, weather and ecological conditions less favorable to malaria transmission than other Regional States. Hence, there is perspective of interrupting autochthonous transmission. So, it is necessary an epidemiological analysis about case occurrence and getting sick risk of autochthonous malaria during last nine years. Objective: To describe epidemiological characteristics of autochthonous malaria cases in TO, 1998 to 2006. Methods: Study: Epidemiological, ecological and descriptive based on available data. Time series of human autochthonous malaria cases reported by TO. Data sources: Information System about Malaria (SISMAL), Epidemiological Surveillance System about Malaria (SIVEP-Malaria), technical reports of malaria, Brazil´s Enterprise of Agricultural Researching (Embrapa), Tocantins´ Planning Secretary (SEPLAN-TO), Brazil´s Institute of Statistics and Geography (IBGE). Results: From 1998 to 2006, 11.960 malaria cases were reported in 103 municipalities. Autochthonous cases were 6.415 (53.6%) in 90 municipalities. From autochthonous cases, 66% were in the followings municipalities: Araguatins (26.2%), Caseara (13.8%), Araguaína (7.6%), Araguacema (6.8%), Ananás (6.7%) and Xambioá (5%). From 2003 to 2006, 12 municipalities, 8.6% (N=139) of TO and 24% (N=50) of those with autochthony, registered 88.9% (N=866) of municipal autochthonous cases. There was maintainable reduction of autochthonous cases and municipality number. The risk of getting sick showed maintainable reduction and was very low. Main epidemiological characteristics of autochthonous cases were: men (68.5%) of 15 or more years old (70.2%), from one to three years of study (33.6%) and agricultural activity during last 15 days (42.4%), symptomatic (99%) and infected by P.vivax (80%), notified by passive surveillance (70.8%) with time between first symptoms and the diagnosis/traitment of more than 48 hours (varying from 63.6 to 70%) and seasonal behavior from March to June. From 1998 to 2006, infections for P.falciparum were registered in 67.4% (N=89) of autochthonous municipalities with the largest occurrence in Araguatins, Araguaína, Caseara, Palmas, Xambioá, Ananás, Esperantina and Marianópolis. P. falciparum proportion was 20.2% and increased from 2004. Between 1998 and 2006, this proportion increased in Araguatins, Guaraí, Itaguatins, Marianópolis and Caseara. From 2003 to 2006, among autochthonous municipalities, 63.8% accomplished active surveillance (BA), but fall in 2006 (35.7%). BA was ascending among autochthonous cases (varying from 24.2% to 33.9%). Conclusion: Human autochthonous malaria was registered in two thirds of municipalities of TO, with descending trend and very low risk of getting sick. Most of autochthonous cases of human malaria was registered in Marianópolis, Caseara and Araguacema. ______________________________________________________________________ RESUMEN / Definición del problema y justificativa: De 1996 a 2006, el Estado de Tocantins (TO) registro, como promedio, 0,3% de los casos de Amazônia, de estos, 37% fueron autóctonos. El Riesgo médio fue 1 caso por 1.000 hab. Presenta además condiciones geográficas, climatológicas y ecológicas menos favorables a la transmisión de la malaria si comparado con el resto de la región. De esta forma, hay perspectiva de interrupción de la transmissión autóctona em TO. Para ello, es necessario un análisis epidemiológico de frecuencia de casos autóctonos registrados y su riesgo de enfermar en los últimos 9 anos. Objetivo: Describir lãs características epidemiológicas de los casos autóctonos de malaria registrados en TO, de 1998 a 2006. Métodos: Diseño: Epidemiológico, ecológico y descritivo con búsqueda de datos disponibles. Serie temporal del número de casos autóctonos de malaria humana notificados en TO. Fuentes de datos: Sistema de Infornación sobre Malaria (Sismal), Sistema de Vigilância de Malaria (Sivep-Malaria),Informes Técnicos, Empresa Brasileira de Investigación Agropecuarista (Embrapa), Secretaria de Planeamiento e Médio Ambiente de TO (SEPLAN-TO) e Instituto Brasileiro de Geografia e Estadística (IBGE).. Resultados: De 1998 a 2006, fueron registrados 11.960 casos de malaria en TO en 103 municipios. Del total de casos, 6.415 (53,6%) fueron autócnonos en 90 municipios. De los casos autóctonos, 66% se concentraron en los municípios de Araguatins (26,2%), Caseara (13,8%), Araguaína (7,6%), Araguacema (6,8%), Ananás (6,7%) y Xambioá (5%). De 2003 a 2006, 12 municipios, 8.6% (N=139) de TO y 24% (N=50) de aquellos con autoctonia, registraron 88,9% (N=866) de casos autóctonos municipales. Hubo reducción mentenida del número de casos y municípios com autóctonos. El riesgo de enfermar mostro reducción sustentable y fue muy bajo. Las principales características epidemiológicas de los casos autóctonos fueron: hombres (68,5%) de 15 ó más años de edad (70,2%), de uno a três años de estudio (33,6%) y actividad agropecuária em los últimos 15 días (42,4%), sintomáticos (99%) e infectados por P.vivax (80%), notificados por vigilancia pesiva (70,8%) con tiempo entre primeros sintomar y diagnóstico/tratamiento mayor de 48 horas (variando de 63,6 a 70%) y estacionalidad de Marzo a Junio. De 1998 a 2006, infecciones por P falciparum fueron registradas en 67,4% (N=89) de los municípios con autoctonia, con la mayor frecuencia em Araguatins, Araguaína, Caseara, Palmas, Xambioá, Ananás, Esperantina y Marianópolis. La proporción de P. falciparum fue 20,2% y aumento desde 2004. Entre 1998 y 2006, aumento em Araguatins, Guaraí, Itaguatins, Marianópolis y Caseara. De 2003 a 2006, de los minicipios com autoctonia, 63, 8% realizo vigilancia activa (BA), pero cayó em 2006 (35,7%). La BA fue ascendiente entre los casos autóctonos (cariando de 24,2% até 33,9%). Conclusión: Dos tercios de municipios de TO durante el estudio tuvieron tendência descendiente y riesgo muy bajo de enfermar. La mayoría de los casos autóctonos de malaria humana fue registrada em Marianópolis, Caseara y Araguacema.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Departamento de Engenharia Florestal, Programa de Pós-Graduação em Ciências Florestais, 2006. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-05-01T21:00:13Z No. of bitstreams: 1 2006_CamilaCristinaBSRaposoRamos.pdf: 9392162 bytes, checksum: 859495fe4704df2539475db6323e2b27 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-05-01T21:01:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_CamilaCristinaBSRaposoRamos.pdf: 9392162 bytes, checksum: 859495fe4704df2539475db6323e2b27 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-05-01T21:01:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_CamilaCristinaBSRaposoRamos.pdf: 9392162 bytes, checksum: 859495fe4704df2539475db6323e2b27 (MD5) / No trabalho de campo, foram estudados 140 pacientes, sendo 93% do gênero masculino. A idade dos pacientes variou de 12 meses a 70 anos de idade, com predomínio da idade adulta (73,2%). Apenas 7,8% dos casos foram importados de outros estados ou países. A maioria dos pacientes (69%) estava tendo malaria por mais de uma vez. A média de tempo decorrido entre o início dos sintomas e a realização do diagnóstico foi de três dias, tendo sido iniciado o tratamento com cloroquina e primaquina no mesmo dia do diagnóstico em todos os pacientes. A parasitemia em 36,9% dos casos variou entre 500 a 10000 parasitas/ mm3 (++V). Quanto ao quadro clínico, predominou a tríade clássica: febre (100%), calafrios (97,9%) e sudorese (86,4%). Foram observados também, manifestações de gravidade como: sonolência (1,4%), confusão mental (0,7%), convulsão (1,4%), perda de consciência (1,4%), hemorragia (6,4%) e dispnéia (2,9%). Entre os pacientes internados, foram incluídos 12 pacientes primoinfectados com manifestações clínicas e/ou laboratoriais de gravidade.. O tempo de diagnóstico variou de 6 a 29 dias, porém apenas um paciente apresentou parasitemia acima de 10.000 parasitas/mm3. Com relação à sintomatologia, 10 pacientes apresentaram icterícia, 5 confusão mental, 5 perda de consciência, 2 dispnéia, 1 hemorragia conjuntival e 1 hematúria e hemorragia digestiva alta. A complicação laboratorial mais frequentemente encontrada foi a trombocitopenia presente em 8 pacientes. Hemoglobina inferior a 10g% foi verificada em 4 pacientes. Insuficiência renal foi diagnosticada em 5 pacientes, dos quais apenas 1 necessitou de tratamento dialítico. Todos os pacientes evoluíram de forma favorável após instituição do tratamento específico com cloroquina e primaquina. A malária por P. vivax, embora mais raramente que na infecção pelo P. falciparum, pode evoluir de forma grave, mesmo em áreas endêmicas, onde a maioria das pessoas já tiveram vários episódios maláricos, e portanto, apresenta certo grau de imunidade. Está geralmente associada a retardo no diagnóstico e tratamento, porém costuma responder de forma satisfatória à instituição da terapêutica.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-05-29T12:59:46Z No. of bitstreams: 1 2013_RuiMoreiraBraz.pdf: 5317962 bytes, checksum: 8c0e12f2b80ff12242d1bb112d30e954 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-05-29T13:53:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_RuiMoreiraBraz.pdf: 5317962 bytes, checksum: 8c0e12f2b80ff12242d1bb112d30e954 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-29T13:53:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_RuiMoreiraBraz.pdf: 5317962 bytes, checksum: 8c0e12f2b80ff12242d1bb112d30e954 (MD5) / Introdução: A Amazônia Brasileira concentra 99% dos casos de malária notificados no país. Porém, ainda não se conhece os níveis de variação da incidência da doença nos municípios. Objetivo: Desenvolver e aplicar algoritmo para detecção da variação da incidência da malária nos municípios da região. Métodos: Desenvolveu-se um sistema de monitoramento automatizado, baseado no diagrama de controle por quartis para classificação dos municípios em 4 grupos, conforme a variação da incidência da malária: grupo 1) aqueles com incidência abaixo dos valores esperados; grupo 2) aqueles com incidência dentro dos valores esperados; grupo 3) aqueles com epidemias; grupo 4) aqueles com apenas um caso durante o ano. A associação entre presença de áreas especiais (assentamentos, garimpos, áreas indígenas e de fronteira) e a ocorrência de epidemias, foi verificada com o teste do ?, p ≤ 0,05. A dependência espacial das epidemias de malária nos municípios foi analisada por meio da variável proporção de meses epidêmicos , aplicando-se os índices de Moran global e local, com grau de significância de 95%. Resultados: Em 2010 foram observados 112 municípios (13,9% do total da região), no grupo 1; 331 municípios (41,0%) no grupo 2; 305 municípios (37,8%) no grupo 3 e; 59 municípios (7,3%) no grupo 4. Constatou-se associação entre a presença de áreas especiais e a ocorrência 2de epidemias de malária nos municípios (? = 39,34; p < 0,01). O índice de Moran Global foi 0,4892 em 2010 (p = 0,01), indicando a existência de dependência espacial (autocorrelação) das epidemias de malária nos municípios. O índice de Moran Local identificou autocorrelação espacial positiva direta, com significância estatística (p ≤ 0,05), em 88 municípios (10,9% do total da região) em 2010. Conclusão: O algoritmo tipo Descrição Narrativa possibilitou a automação do diagrama por quartis resultando no sistema de monitoramento da incidência da malária. A maioria dos municípios apresentou incidência da malária dentro dos limites esperados e, entre estes, quase totalidade não registrou transmissão. O número de municípios com redução da incidência foi inferior ao número de municípios com epidemias. As epidemias foram produzidas isoladamente por P. vivax e por P. falciparum e, simultaneamente por ambas as espécies de plasmódio. Os casos esporádicos de malária devem ser investigados quanto aos vínculos epidemiológico, espacial e temporal. Quanto mais áreas especiais presentes no município maior foi a probabilidade da ocorrência de epidemias. A dependência espacial favoreceu a ocorrência de conglomerados de municípios epidêmicos. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: The Brazilian Amazon concentrates 99% of the recorded malaria cases in the country. However, the variation levels of the disease inci- dence are not known yet. Objective: To develop and to apply an algorithm for detection of the malaria incidence variation in the region. Methods: An automatic malaria monitoring system was developed based on the control chart with quartiles method to classify the municipalities in 4 groups, according malaria incidence variation: group 1 - those with an incidence lower than expected; group 2 - those with an incidence within the expected range; group 3 - those with epidemics; group 4 - those with only a case during the year. The association between presence of the special areas (settlements, mines, indigenous and borders areas) and epidemics occurrence was examined by the ? test, p ≤ 0.05. The spatial dependence of the malaria epidemics among municipalities was analyzed by applying the global and local Moran index on the epidemic months proportion variable, with confidence grade of 95%. Results: In 2010, 112 municipalities (13.9% of the region) were recorded in the group 1; 331 municipalities (41.0%) in the group 2; 305 municipalities (37.8%) in the group 3 and; 59 municipalities (7.3%) in the group 4. Association was noted between presence of the special areas and malaria epidemics occurrence in the municipalities (? = 39.34; p < 0,01). In 2010, the global Moran index was 0.4892 (p = 0,01), noting the spatial dependence (autocorrelation) existence in the malaria epidemics among municipali- ties. The local Moran index identified 88 municipalities (10,9% of the region) with straight positive spatial autocorrelation (p ≤ 0,05). Conclusion: The Narrative Description algorithm made possible the quartile chart automation, resulting in malaria incidence monitoring system. The majority of municipalities presented malaria incidence within the expected range. Among these, almost totality did not record malaria transmission. The number of municipalities with malaria incidence reduction in group 1 was less than number of epidemic municipalities in group 3. There were epidemics caused by P. vivax and P. falciparum isolated, as well, by both Plasmodium species. The spo radic cases, in group 4, should be investigated with regard to epidemiological, spatial and temporal links. The more there are special areas types in the municipality, the more is the probability of the malaria epidemics incidence. The spatial dependence favored the epidemic municipalities clusters generation.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-graduação em Medicina Tropical, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-03-01T17:34:13Z No. of bitstreams: 1 2017_AndréiaCristinaGonçalvesCascaes.pdf: 3341412 bytes, checksum: 616b738fa70a7ad4f30ceb5bd61d102f (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-03-09T17:15:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_AndréiaCristinaGonçalvesCascaes.pdf: 3341412 bytes, checksum: 616b738fa70a7ad4f30ceb5bd61d102f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-09T17:15:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_AndréiaCristinaGonçalvesCascaes.pdf: 3341412 bytes, checksum: 616b738fa70a7ad4f30ceb5bd61d102f (MD5) Previous issue date: 2018-03-09 / No ano de 2015 a malária 214 milhões de pessoas e causou 438 mil mortes. No Brasil ocorreram 142.967 casos da doença, no mesmo ano. A doença pode apresentar-­se de forma assintomática, sintomática e pode evoluir para as formas graves. O Plasmodium falciparum pode causar malária cerebral, a forma mais seria da doença. Os eritrócitos parasitados são capazes de ligar-­se a outros eritrócitos e ao endotélio vascular resultando na hiperativação do sistema imunitário. Mesmo com os tratamentos atuais eficientes usados na pratica clinica, a doença pode desenvolver-­se para as formas graves, facilitada pela resistência do parasito às drogas disponíveis. Espécies vegetais tem sido testados como alternativas terapêuticas. O ácido anacárdico (AA) é extraído da castanha de caju e tem mostrado atividades microbicidas, imunomoduladoras e parasiticida. Esse trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do ácido anacárdico in vivo em modelos animais da malária e in vitro. Nos modelos susceptíveis a malária cerebral (CBA e C57BL/6) e não susceptíveis (BALB/c) infectados pelo P. berghei Anka tratados com 150, 100, 50 mg/kg/dia e 25 mg/kg/ duas doses. Foram analisados sobrevida, parasitemia, hematócrito e perda progressiva de peso. A citotoxicidade nas células J774 foi avaliada pelo teste de MTT usando utilizadas várias concentrações de ácido anacárdico. O efeito do ácido anacárdico na produção de óxido nítrico foi avaliado através da reação de Griess e a expressão de corpúsculos lipídicos foi realizadda pela coloração de Oil red O. O efeito de 50μM ácido anacárdico na produção de citocinas foi avaliado depois de estimulação in vitro das células J774 com eritrócitos parasitados ou não. A produção de citocinas foi avaliada com o estimulo de LPS e eritrócitos parasitados ou não com 50 μM de ácido anacárdico. Quando os animais CBA foram tratados com 150 e 100mg/Kg/dia de AA foi observado aumento da sobrevida dos animais após infecção com P.berghei ANKA. O AA não mostrou toxicidade para as células J774. O AA inibiu a produção do óxido nítrico quando associado com o LPS e eritrócitos parasitados. O aumento da expressão de corpúsculos lipídicos aumentou na presença de eritrócitos parasitados e LPS. O AA não mostrou efeito na produção de FNT-­a, porém aumentou a produção de IL-­10, e de IL-­6 e MCP-­1 quando associado ao LPS. Foi observado aumento da produção de MCP-­1 das células J774 tratadas com AA e estimuladas com eritrócitos parasitados obtidos de camundongos BALB/c infectados com P.berghei ANKA quando comparado com células estimuladas apenas com eritrócitos parasitados. As células J774 mostraram que o tratamento com AA e estimulo com eritrócitos parasitados obtidos de camundongos BALB/c infectados por P. berghei ANKA aumenta da produção de MCP-­1 em relação às células estimuladas apenas com eritrócitos parasitados. O AA aumentou a produção de IL-­10 nas células estimuladas com eritrócitos parasitados de BALB/c, porém diminuiu a produção nas células tratadas com eritrócitos de CBA. Concluímos que os diferentes efeitos do AA na malária experimental provavelmente ocorrem pelos diferentes tipos de desencadeamento das respostas inflamatórias dos modelos experimentais. / About 214 million cases of malaria occurred in 2015, leading to 438,000 deaths. In Brazil, 142,967 cases of malaria occurred in this same year. The disease can present as asymptomatic or asymptomatic form and severe disease can develop in some people. Plasmodium falciparum can cause cerebral malaria, the most serious form of the disease. Infected red blood cells can bind each other and to endothelial vascular cells, leading in hyperactivation of immune system. Even though the effective current treatments used in clinical practice, disease can evolve to severe forms due to the parasite ability to present drug resistance. Some vegetal species have been tested as alternative treatments. Anacardic acid (AA) is obtained from the cashew nut and has shown some activity against bacteria, parasites and it also has immunomodulatory activity. This work aimed to evaluate the in vivo activity in experimental animal models and in vitro activity of the anacardic acid as well as its. In cerebral malaria-­susceptible CBA and C57BL/6 and resistant BALB/c mice infected with Plasmodium berghei ANKA and treated with 150, 100, 50 mg/kg/day and 25 mg/kg/day twice by day anacardic acid were assessed the survival rates, parasitemia curves, hematocrit and weight evolution. Cytotoxicity to J774 cells was evaluated using several concentrations of anacardic acid by MTT test. Effect of anacardic acid on nitric oxide production by J774 cells was evaluated by Griess reaction and lipid bodies expression was tested with oil red O. Effect of 50μM anacardic acid on cytokine production was evaluated after in vitro stimulation with or without parasitized erythrocyte and LPS. When CBA mice were treated with 100 and 150 mg/kg/day of AA, it was observed an increased survival of the animals after infection with P. berghei ANKA. Anacardic acid showed no toxicity to J774 cells. Anacardic acid inhibited NO production when associated with LPS and parasitized erythrocytes. The increase expression of lipid bodies was enhanced in presence of parasitized erythrocytes and LPS. AA have no effect in tumor necrosis factor-­a production, it increased IL-­10 production and increased the IL-­6 and MCP-­1 production only when associated to LPS. There was an increased production of MCP-­1 by J774 cells treated with AA + parasitized erythrocytes that were obtained from BALB/c P. berghei-­infected mice when compared with to J774 cells incubated only with parasitized erythrocytes. AA increased IL-­10 production when J774 cells were stimulated with parasitized erythrocytes obtained from BALB/c mice;; however, it decreased IL-­10 production when J774 cells were stimulated with parasitized erythrocytes obtained from CBA mice. We conclude that the differing effects of AA in the different malaria experimental models could occur because these different strains of mice use different pathways of the inflammatory response.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2016. / Este trabalho foi elaborado em conjunto com a Université Pierre et Marie Curie. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2017-02-07T16:06:48Z No. of bitstreams: 1 2016_CarlosHenriqueSaraivaGarcia_Parcial.pdf: 4658600 bytes, checksum: a608388f9b6fa01da088371cfde06c09 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-02-27T20:54:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_CarlosHenriqueSaraivaGarcia_Parcial.pdf: 4658600 bytes, checksum: a608388f9b6fa01da088371cfde06c09 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-27T20:54:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_CarlosHenriqueSaraivaGarcia_Parcial.pdf: 4658600 bytes, checksum: a608388f9b6fa01da088371cfde06c09 (MD5) / Na história da medicina, a malária é uma das doenças parasitárias mais graves e distribuídas que afetam seres humanos. A doença é causada por parasitas do gênero Plasmodium. A malária de roedores é utilizada comumente como modelo por permitir a combinação de experimentos in vivo e in vitro, além de estudos por genética reversa. Embora a gametogênese dos estágios sexuais de Plasmodium seja um passo essencial da transmissão da malária, dados moleculares sobre a reorganização nuclear, montagem do flagelo e sua regulação na gametogênese estão incompletas. A ATPase cinesina-8 de P. berghei é uma proteína motora sugerida como um importante componente para a gametogênese macho. Os gametócitos com o gene kin8 interrompido (Δkin8) são semelhantes morfologicamente aos tipos selvagens (WT), enquanto que na gametogênese existe disfunção que tornam as células Δkin8 incompetentes para gametogênese completa e incapazes de exflagelar. Nos esforços para melhorar o conhecimento sobre a exflagelação de gametas, fizemos experimentos quantitativos de proteômica e fosfoproteômica com gametócitos WT e Δkin8. A amostra enriquecida de gametócitos do sangue murinho no tempo T0 foi induzida a exflagelação por ácido xanturênico e colhida no tempo T7 e T15 min. A quantificação relativa entre amostras foi realizada com uso de peptídeos marcados por iTRAQ na triplicata biológica independente e analisados por nanoLC/MS-MS Orbitrap Elite Mass Spectrometer após enriquecimento TiO2. Os dados foram processados através do softwares Patternlab for Proteomics e Blast2GO. Em parasitas WT, 443 proteínas e 206 fosfoproteínas foram identificados a partir de 2.617 peptídeos. Em parasitas Δkin8, 530 proteínas e 218 fosfoproteínas proteínas foram identificadas a partir de 3.198 peptídeos. A produção de gametas é regulada por fosforilações nas duas condições celulares. Entre os processos biológicos da Ontologia de Genes, aqueles relacionados a tradução de RNA, e biossíntese de DNA e proteínas foram as que mais se destacaram e mais regulados na gametogênese. Foi observado também que a glicólise e a resposta ao estresse ambiental foram mais notável principalmente no início da diferenciação celular. Para Δkin8, a desorganização de microtúbulos dos axonemas e fusos mitóticos é causa provável da supressão de proteínas motoras (cinesina -8, -13 e dineína) como também pela superexpressão de proteínas de organização do braço interno e braço radial. Observamos importante diminuição de unidades de nucleossomos e aumento de proteínas envolvidas com a desorganização da divisão nuclear. Quando comparado com o WT, no mutante houve maior expressão de proteínas envolvidas no complexo proteassoma dependente de ubiquitina e menor quantidade de algumas proteínas interferentes no metabolismo energético e egresso. A análise do Δkin8 traz novas informações sobre a exflagelação e mal funcionamento do microgameta mutante. Em conclusão, a gametogênese exige manifestamente a expressão de proteínas e sua regulação por fosforilações para a produção de energia na diferenciação dos gametas. A Cinesina 8 é essencial para a gametogênese masculina normal como também para a montagem de axonemas em P. berghei, e seu estudo fornece informações quanto a organização celular e biologia de Plasmodium. / Malaria is one of the most serious and widespread parasitic diseases that affected humans in medicine history. The disease is caused by parasites from Plasmodium genus. Rodent malaria parasites are commonly used as model since it permits the combination of in vivo and in vitro experiments and reverse genetic studies. Although Plasmodium sexual stages gametogenesis is an essential step to ensure the malaria transmission, molecular data on nuclear reorganization and intracytoplasmic flagellum assembly proteins and their regulating in gametogenesis is still missing. The P. berghei motor ATPase kinesin 8 is proposed as important component for male gametogenesis. Kin8-disrupted gametocytes (Δkin8) were morphologically similar to wild-type (WT) parasites, while male gametogenesis is not functional and able to exflagellate. In efforts to improve the knowledge on gamete exflagellation, we did quantitative proteomic and phosphoproteomic experiments with WT and Δkin8 gametocytes. Gametocytes-enriched sample from mice blood at time T0 were xanthurenic acid-induced to exflagellate and harvested at time T7 and T15 min. The relative quantitative comparisons overtime were performed through iTRAQ labelled peptides from independent biological triplicate sample analysed by nanoLC/MS-MS Orbitrap Elite Mass Spectrometer after TiO2 enrichment. Data was processed through Patternlab for Proteomics software and Blast2GO. In the WT parasites, 443 proteins and 206 phosphoproteins were identified from 2,617 peptides. In Δkin8 parasites, 530 proteins and 218 phosphoproteins were identified from 3,198 peptides. Gamete formation is highly regulated by phosphorylation in both cell conditions. Among GO biological processes, those related to RNA translation, DNA and protein biosynthesis were most prominent and strongly regulated throughout the gametogenesis, and phosphorylated proteins are mainly RNA, ATP or protein binding proteins. We observed that glycolysis and environmental stress response are predominant, mainly at the beginning of the differentiation. For Δkin8 parasites, axoneme and mitotic spindle microtubules disorganization is likely to be caused by motor proteins down-regulation (kinesin-8, -13, and dynein) as well as by up-regulated proteins from inner arm and radial spoke organization. We noticed important down-expression of nucleosome units, up-expression of proteins involved in the replication that could be related to the nuclear division disorganisation. A higher expression of proteins involved in the ubiquitin-dependant proteasome complex and stress response and folding, and lower expression of some proteins that interferes in energy metabolism and egress in the mutant compared to the WT. The Δkin8 proteomic approach brings new clues on the exflagellation and the mutant microgamete impairment observed. In conclusion, gametogenesis clearly requires a high protein expression and phosphorylation modulation to produce energy for gamete differentiation. Kinesin 8 is essential for male gametogenesis and normal axoneme assembly in P. berghei, providing new insights into Plasmodium flagellar organization and biology. / Dans l'histoire de la médecine, le paludisme est l'une des maladies parasitaires les plus graves et répandues. Elle est causée par des parasites du genre Plasmodium. Les parasites du paludisme de rongeurs sont couramment utilisés comme modèles pour étudier le paludisme humain permettant des études de génétique inverse in vivo. Bien que la gamétogenèse des stades sexués de Plasmodium soit une étape essentielle pour la transmission du paludisme, les données moléculaires sur la réorganisation nucléaire, l'assemblage du flagelle et de leurs régulations pendant la gamétogenèse, sont toujours incomplètes. La kinésine-8 de P. berghei est une protéine motrice qui jouerait un rôle important lors de la formation des gamètes mâles. Les gamétocytes avec le gène kin8 interrompu (Δkin8) sont morphologiquement semblables au type sauvage (WT) mais la gametogenèse mâle n’est pas fonctionnelle et les cellules mutantes sont incapables de produire des gamètes mâles. Afin d’avoir une meilleure connaissance des mécanismes moléculaires mis en oeuvre au cours de la gamétogenese, nous avons entrepris des études protéomiques et phosphoprotéomiques comparatives et quantitatives chez le parasite de type sauvage et chez le mutant Δkin8. Les gamétocytes enrichis à partir du sang de souris infectées ont été récoltés au temps 0, 7 et 15 min après induction de la gamétogenese par l'acide xanthurénique. Des comparaisons quantitatives relatives ont été effectuées par nanoLC/MS-MS du type Orbitrap Elite à partir des peptides et phosphopeptides préalablement enrichis par TiO2, marqués par iTRAQ, et de triplicats biologiques. Les données ont été traitées par les logiciels Patternlab for Proteomics et Blast2GO. Chez WT, 443 protéines et 206 phosphoprotéines ont été identifiées à partir de 2.617 peptides. Chez Δkin8, 530 protéines et 218 phosphoprotéines ont été identifiées à partir de 3.198 peptides. La formation de gamètes est fortement régulée par phosphorylation dans les deux conditions cellulaires. Parmi les processus biologiques (GO term), ceux liés à la traduction de l’ARN, la biosynthèse de l’ADN et de protéines sont les plus marquants et les plus régulés. La glycolyse et la réponse aux stress environnementaux sont également prédominantes, surtout au début de la différenciation des gamètes. Chez Δkin8, une forte sous-expression des protéines motrices kinésine-13 et dynéine, et une surexpression de protéines de l'organisation des bras intérieur et radiaire des axonèmes sont observées. La modulation de l’expression de ces protéines participe certainement, en plus de l’absence de la kinésine-8, au phénotype observé chez Δkin8: l’absence d’assemblage des axonèmes des gamètes mâles. Nous avons constaté également une sous-expression significative d’unités des nucléosomes et la surexpression de protéines impliquées dans la réplication. Ceci pourrait être relié à la perturbation de la division nucléaire observée chez Δkin8. Par rapport au WT, Δkin8 montre une expression élevée de protéines du complexe de protéasome dépendant de l’ubiquitine et de protéines impliquées dans la réponse au stress et le repliement des protéines, ainsi qu’une faible expression de certaines protéines qui interviennent dans le métabolisme énergétique et la sortie de l’hématie. Ces approches de protéomique et phosphoprotéomique comparatives permettent pour la première fois d’identifier les évènements moléculaires, leur dynamique et leur modulation, mis en jeux lors de la gamétogenèse de P. berghei.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Medicina Tropical, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2017-02-07T19:10:33Z No. of bitstreams: 1 2016_IsacdaSilvaFerreiraLima_Parcial.pdf: 225155 bytes, checksum: 7cec77e6be157b252d047d3a509c2d9f (MD5) / Approved for entry into archive by Ruthléa Nascimento(ruthleanascimento@bce.unb.br) on 2017-03-15T15:21:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_IsacdaSilvaFerreiraLima_Parcial.pdf: 225155 bytes, checksum: 7cec77e6be157b252d047d3a509c2d9f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-15T15:21:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_IsacdaSilvaFerreiraLima_Parcial.pdf: 225155 bytes, checksum: 7cec77e6be157b252d047d3a509c2d9f (MD5) / Introdução: A partir de 2006, observa-se uma clara tendência de redução no número de casos de malária e no índice parasitário anual (IPA) na Amazônia Brasileira. Apesar disso, a malária continua sendo um problema de saúde pública em determinadas áreas, evidenciando que ainda existe espaço para melhorias relacionadas ao controle da doença e ao diagnóstico e tratamento oportunos. Objetivo: 1) descrever alterações nas características demográficas, socioeconômicas e relativas à doença e identificar as diferentes tendências temporais do IPA na Amazônia Brasileira entre 2004 e 2013. 2) Analisar e identificar os fatores associados à oportunidade do tratamento da malária. 3) Avaliar o impacto da instalação de mosquiteiros impregnados de longa duração (MILD), no risco de infecção por malária em municípios endêmicos. Métodos: Para atender ao objetivo 1, foi realizado um estudo epidemiológico de séries temporais baseado nos casos notificados de malária e no IPA agregado por estado usando regressão Joinpoint para identificar mudanças significativa do IPA. Para o objetivo 2, foi realizado um estudo analítico transversal usando análise de regressão logística multivariada para identificar os fatores associados ao tratamento oportuno (em até 24 horas após o início dos sintomas) para malária. Para o objetivo 3, foi realizado um estudo analítico de avaliação de impacto, utilizando modelagem de série temporal, Equações de Estimação Generalizada (GEE), para investigar o impacto da instalação de MILD no IPA dos municípios ajustando por sazonalidade, tendência histórica e outros fatores relevantes. Resultados: 1) Estudo 1: o estado do Acre teve um aumento acentuado no IPA entre 2004 e 2006, chegando a 135 casos por 1.000 habitantes, seguido por dois períodos de tendência decrescente do indicador. Nos estados do Amapá, Amazonas, Rondônia e Roraima os IPA mostraram tendências estatisticamente significativas de redução ao longo do período. Estudo 2: aproximadamente 41,1% dos pacientes com malária iniciaram tratamento em tempo oportuno na população de estudo. Houve tendência de aumento desse indicador para os anos 2012 e 2013, para residentes nos estados de Rondônia, Acre ou Roraima, com idade variando entre 0-5 anos e 6-14 anos, indígenas, com baixo nível de escolaridade e para os diagnosticados por meio de busca ativa. Estudo 3: houve uma redução média no índice parasitário trimestral dos municípios nos períodos de “Intervenção (instalação dos MILD)” (- 4,05 casos por 1.000 habitantes) e “Pós” intervenção (-8,34 casos por 1.000 habitantes), comparados com o período “Pré intervenção”. Conclusão: O estudo identificou fatores associados ao tratamento oportuno, e indica a plausibilidade de impacto da estratégia de instalação de MILD em municípios endêmicos da região Amazônia brasileira. As políticas públicas devem ser orientadas para o alcance dos grupos mais vulneráveis, em especial para aqueles menos prováveis de terem tratamento oportuno da malária além de fomentar maior aprofundamento dos estudos de avaliação de controle vetorial, em particular de impacto dos MILD, a fim de avançar em direção ao controle e eliminação da malária. / Introduction: Since 2006, there is a clear downward trend in the number of malaria cases and the Annual Parasite Index (IPA) in the Brazilian Amazon. Nevertheless, malaria remains a public health issue in some areas, indicating that there is still room for improvement related to the control of the disease and diagnosis and timely treatment. Objective: 1) to describe changes in demographic, socioeconomic and disease related characteristics, as well as to identify the different temporal trends of the IPA in the Brazilian Amazon between 2004 and 2013. 2) to identify factors associated with the timely treatment of malaria. 3) to assess the impact of installing impregnated long-lasting mosquito nets (LLINs) on the risk of malaria infection in endemic municipalities. Methods: To meet the objective 1, it was carried out an epidemiological study of time series based on reported cases of malaria and using the Joinpoint regression to identify significant changes in the IPA. For objective 2, a cross-sectional analytical study using multivariate logistic regression analysis to identify factors associated with timely treatment for malaria was conducted (within 24 hours of symptoms onset). For objective 3, it was carried out an analytical study of impact, using time series modeling, Generalized Estimating Equations (GEE), to investigate the impact of MILD installation in the municipalities IPA, adjusting for seasonality and trends of malaria and other relevant factors. Results: 1) Study 1: the state of Acre had a sharp increase in the IPA between 2004 and 2006, reaching 135 cases per 1,000 inhabitants, followed by two periods of decreasing trend indicator. In the states of Amapá, Amazonas, Rondonia and Roraima presented a statistically significant IPA reduction trend over the period. Study 2: approximately 41.1% of malaria cases in the study population started treatment in a timely manner, with an upward trend in the years 2012 and 2013, those more likely to receive timely treatment were: residents in the states of Rondônia, Acre and Roraima, aged between 0-5 years and 6-14 years, indigenous, people with low level of education and being diagnosed through active search. Study 3: there was an average reduction in the risk of malaria infection in the municipalities in periods of "Intervention" (LLINs installation) (-4.05 cases per 1,000 inhabitants) and "Post" intervention (-8.34 cases per 1,000 inhabitants), compared to the period “Prior” installation. Conclusion: In conclusion, the findings identify the factors associated with timely treatment, and indicates the preliminary impact of MILD installation strategy in endemic municipalities of the Brazilian Amazon region. Public policies should be geared towards the achievement of vulnerable groups with lower chance to receive timely treatment for malaria and stimulate further studies of time to treatment and particularly regarding vector controlling such as the installation of LLINs, in order to move toward the control and elimination of malaria.

Orientador: Paulo Eduardo de Abreu Machado / Resumo: Com o objetivo de contribuir para o esclarecimento de alguns pontos ainda obscuros nas relações existentes entre o metabolismo da via das pentoses e a ação de drogas em doentes com malária causada pelo Plasmodium falciparum , foi proposta a padronização do método para pesquisa da atividade da via das pentoses, menos lesivo para os eritrócitos, menos dispendioso e que fosse tão eficiente quanto o do BREWER et alii. Estudou-se "in vitro", com o método padronizado, a ação da clindamicina em hemácias humanas normais. Procedeu-se, ainda, a inquérito com a finalidade de avaliar a prevalência da eficiência de G6PD em habitantes de área endêmica de malária... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Not available. / Mestre

Submitted by Allison Andrade (allisonandrade.13@hotmail.com) on 2016-03-21T15:05:46Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Allyson Guimarães da Costa.pdf: 5856281 bytes, checksum: 0f49f9274b69e90a05dc60b3e1aa9719 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-04-14T19:29:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Allyson Guimarães da Costa.pdf: 5856281 bytes, checksum: 0f49f9274b69e90a05dc60b3e1aa9719 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-04-14T19:33:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Allyson Guimarães da Costa.pdf: 5856281 bytes, checksum: 0f49f9274b69e90a05dc60b3e1aa9719 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-14T19:33:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Allyson Guimarães da Costa.pdf: 5856281 bytes, checksum: 0f49f9274b69e90a05dc60b3e1aa9719 (MD5) Previous issue date: 2013-04-26 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Introduction: Malaria is caused by protozoa, genus Plasmodium, with immunopathogenesis differentiated, related to biological factors to the parasite and the host. According to WHO, there are about 300 to 500 million new cases and one million deaths per year. The pathogenic process initiates by sporozoite inoculation by the vector in the subcutaneous tissues releases merozoites into the circulation forms. Several defense mechanisms are associated with the inflammatory process and the individual's resistance to the pathogen. Objectives: The aim of this study is to evaluate the cellular immune response and determine the frequency of allelic polymorphism of Toll-Like Receptor-4 in patients with malaria, the city of Coari-AM. Material and Methods: For this study, samples were collected from 77 patients infected with P. vivax and 58 samples from uninfected individuals. Immunophenotyping was performed by flow cytometry and levels of cytokines by ELISA and CBA. The determination of the allele frequencies of the polymorphisms of TLR-4 was obtained by PCR-RFLP. Statistical analyzes were performed with the GraphPad Prism 5.0. Results: The results revealed leukopenia and thrombocytopenia, significant increase in the percentage of monocytes, CD4 + T cells and T regulatory cells, and an increase in IL-5, IL-6, IL-8, IL-10 and IFN-y in malaria patients compared with controls. Regarding the Thr399Ile polymorphisms Asp299Gly and TLR-4 was observed in heterozygous frequency of 10% and 5% in malaria patients, respectively. Conclusion: Our data suggest that exist a exacerbation of immune response profile with proand anti-inflammatory cytokines acting without direct influence of polymorphisms in the immunopathogenesis of the disease. / Introdução: A malária é causada pelo protozoário do gênero Plasmodium, com imunopatogênese diferenciada, relacionado aos fatores biológicos do parasita e do hospedeiro. De acordo com a OMS, ocorrem cerca de 300 a 500 milhões de novos casos e um milhão de mortes por ano. O processo patogênico é iniciado com a inoculação dos esporozoítos pelo vetor nos tecidos subcutâneos e a liberação das formas merozoítas na circulação. Vários mecanismos de defesa são associados e resultam no processo inflamatório e de resistência do indivíduo ao patógeno. Objetivos: O presente estudo tem como objetivo avaliar a resposta imune celular e determinar a frequência alélica do polimorfismo dos receptores do tipo Toll-4 em indivíduos com malária, da cidade de Coari-AM. Material e Métodos: Para este estudo foram coletadas amostras de 77 pacientes infectados com P. vivax e 58 amostras de indivíduos não infectados. A imunofenotipagem foi realizada pela técnica de citometria de fluxo e as dosagens de citocinas por ELISA e CBA. A determinação das frequências alélicas dos polimorfismos do TLR-4 foi obtida por PCR-RFLP. As análises estatísticas foram realizadas com o programa GraphPad Prism 5.0. Resultados: Os resultados revelaram que os pacientes apresentaram quadros de leucopenia e trombocitopenia, aumento significativo no percentual de monócitos, linfócitos T CD4+ e células T regulatórias, além do aumento nas citocinas IL-5, IL-6, IL-8, IL-10 e IFN-y nos pacientes com malária em comparação com os controles. Em relação aos polimorfismos Asp299Gly e Thr399Ile do TLR-4, foi observada frequência em heterozigose de 10% e 5% nos pacientes com malária, respectivamente. Conclusão: Em conclusão, nossos dados sugerem processo de exacerbação da resposta imune, com perfil próe anti-inflamatório atuante, sem influência direta dos polimorfismos na imunopatogênese da doença.

Submitted by Inácio de Oliveira Lima Neto (inacio.neto@inpa.gov.br) on 2016-08-29T15:10:14Z No. of bitstreams: 2 Paulo Eduardo Guzzo Coutinho.pdf: 3322847 bytes, checksum: f2ff03200d3fa6f0256925535ff38cda (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Inácio de Oliveira Lima Neto (inacio.neto@inpa.gov.br) on 2016-08-31T12:52:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Paulo Eduardo Guzzo Coutinho.pdf: 3322847 bytes, checksum: f2ff03200d3fa6f0256925535ff38cda (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Inácio de Oliveira Lima Neto (inacio.neto@inpa.gov.br) on 2016-08-31T12:56:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Paulo Eduardo Guzzo Coutinho.pdf: 3322847 bytes, checksum: f2ff03200d3fa6f0256925535ff38cda (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-31T12:58:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Paulo Eduardo Guzzo Coutinho.pdf: 3322847 bytes, checksum: f2ff03200d3fa6f0256925535ff38cda (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-10-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Human malaria is an infectious disease caused by protozoa of the genus Plasmodium, which is transmitted by the bite of Anopheles mosquito females. The dynamic between the aquatic and terrestrial phases of the life cycle of Anopheles involves environmental variables that act on their populations, and so, on malaria transmission. Thus, the composition of the landscapes and environmental factors act indirectly on the transmission. In this dissertation we used data of autochthonous malaria cases obtained from SIVEP-malaria database in a monthly basis and from localities. Near localities groups comprised a region and three regions were selected along the Black River in the state of Amazonas. The three regions selected: one in the upper Negro River, at São Gabriel da Cachoeira town (SGC); one in the middle Negro River, at the town of Barcelos (BARC);and one in the lower Negro River, at Manaus. The later located at the Puraquequara Lake (PRQQ), a Ria formation lake. The independent variables (VI) were river level, air temperature and precipitation on a monthly bases from 2003 to 2013. We used the sub-regional (the 3 regions) and local scales (11 locations around the PRQQ and one around the Aleixo Lake, at the Puraquequara vicinity). At the sub-regional scale were analyzed seasonality of malaria and VIs through the application of mean, time series decomposition, cross-correlations and multiple regression models. At the upper Negro River, SGC region shows no statistics results but monthly means suggest that precipitation and air temperature positively affect malaria incidence. The first associated with breeding habitats disponibility due to abundant natural water springs and streams reinforced by strong increase on fish- farming activities and the second associated with vector and patogen development. At the middle and lower Negro River, respectively BARC and PRQQ regions, all variables were correlated with malaria incidence being river level positively correlated and temperature negatively correlated in both regions, in turn, precipitation was correlated negatively at BARC and positively at PRQQ. While river level favor breeding site formation, precipitation can favor or damage them. Temperature negative correlation was associated with post incidence annual peak when it reaches mean values above 28.5 o C and suggests a combined effect of variables over incidence, because temperatures are higher at the same time precipitation and river level are lower. Differences on correlation signal and lags indicated that local landscapes characteristics affected the way climatic variables influenced in vector and pathogen life-cycle, and so, on malaria incidence. At the local scale were analyzed mean and mixed models. On 3 points air temperature measurements were collected and the rise and fall of the waters of Lake were observed. On a fourth point, Lake level measurements were collected. Significant effect of the river level was observed in all 11 locations and the second major variable was precipitation that affects 6 localities, 4 of them on stream environments. Precipitation shows no statistic results when analyzed on a lake level but was significant on a locality level analysis. The coincidence between localities on the precipitation effect and on stream conformation suggests that precipitation takes effect in a even more localized scale because the rain has greater and faster impacts how closer it happens from the heads. Means analysis suggests that 12 locations have 3 forms of seasonality and that they are the effect of the distance from the locations to the River. In conclusion, hydrological and climatic factors act differently among regions in response to specific landscape characteristics and changes on spatial scales analyzed in the same place and time, reflect different environmental effects of malaria cases. / A malária humana é uma doença infecciosa causada por protozoários do gênero Plasmodium, transmitidos ao homem pela picada de fêmeas de mosquitos do gênero Anopheles. A dinâmica entre as fases aquática e terrestre do ciclo de vida dos anofelinos envolve variáveis ambientais que atuam sobre suas populações e assim sobre a transmissão da malária. Dessa forma, a composição das paisagens e fatores ambientais atuam indiretamente sobre a transmissão. Neste trabalho foram utilizados dados de casos de malária autóctone obtidos do banco de dados SIVEP-Malária a uma base mensal e a partir de localidades. Grupos próximos de localidades compreenderam uma região e assim foram selecionadas três regiões ao longo do rio Negro, no estado do Amazonas. No alto rio Negro uma região foi selecionada na cidade de São Gabriel da Cachoeira (SGC), no médio rio Negro uma região na cidade de Barcelos (BARC) e no baixo rio Negro, uma região na cidade de Manaus. Esta última no lago do Puraquequara (PRQQ), um lago sob efeito de barramento de Rio. As variáveis independentes (VI) foram cota, temperatura do ar e precipitação em valores mensais no período de 2003 a 2013. Foram usadas as escalas sub-regional (as 3 regiões) e local (11 localidades ao redor do PRQQ e uma ao redor do lago do Aleixo). Na escala sub-regional foram analisadas as sazonalidades da malária e das VIs por meio da aplicação de médias, decomposição de séries temporais, correlações cruzadas e modelos de regressão múltipla. No alto rio Negro, região SGC, não apresentou resultados estatísticos, mas as médias mensais surgerem que precipitação e temperatura do ar afetam positivamente a incidência da malária. O primeiro associado à disponibilidade de hábitats reprodutivos, devido à abundância natural de fontes de água e igarapés reforçada pelo forte aumento de atividades de piscicultura e o segundo associado ao desenvolvimento de vetores e patógenos. No alto e médio rio Negro, respectively regiões BARC e PRQQ, todas as variáveis foram correlacionadas com a incidência da malária, estando o nível do rio correlacionado positivamente e a temperatura correlacionada negativamente em ambas as regiões, enquanto a precipitação foi correlacionada negativamente em BARC e positivamente no PRQQ. Enquanto o nível do rio favorece a formação de sítios reprodutivos, a precipitação pode favorecer ou danificá-los. A correlação negativa da temperatura foi associada à incidência pós-pico anual, quando alcança médias mensais acima de 28.5 o C e sugere um efeito combinado de variáveis sobre a incidência, pois temperaturas mais altas ocorrem ao mesmo tempo em que valores de precipitação e nível do rio são os mais baixos. Diferenças de sinal e defasagem das correlações indicam que características locais das paisagens afetaram a forma como variáveis climáticas influenciaram nos cilcos de vida do vetor e do patógeno e, assim, na incidência da malária. Na escala local foram analisadas médias e utilizados modelos mistos. Em três pontos foram feitas medidas de temperatura do ar e observações da subida e descida das águas do Lago e em um quarto ponto foram feitas medidas da cota do Lago. Onze localidades sofreram efeito significativo da cota e a segunda VI mais significativa foi a precipitação, que afetou seis localidades; quatro delas em ambientes de igarapés. Para a variável precipitação, não houve resultado significativo quando analisado o Lago, mas sim quando analisada cada localidade. A coincidência entre localidades sob efeito de precipitação e as localidades formadas por igarapés sugere que a precipitação tenha efeito em escala ainda mais localizada, pois a chuva tem impacto maior e mais rápido quanto mais próximo estiver da cabeceira. A análise das médias sugere que as 12 localidades têm 3 formas de sazonalidade e que o tipo de sazonalidade é efeito da distância que a localidade está do Rio. Conclui-se que fatores hidrológicos e climáticos atuam de forma diferenciada entre regiões como resposta a características específicas da paisagem e que mudanças de escalas espaciais analisadas no mesmo local e tempo, refletem diferentes efeitos ambientais sobre os casos de malária.

A malária é uma das doenças infecciosas mais graves que afligem a espécie humana, sendo endêmica na maioria das regiões tropicais e subtropicais do mundo. Em humanos, essa doença é causada pelos protozoários Plasmodium falciparum, Plasmodium malariae, Plasmodium ovale, Plasmodium vivax e Plasmodium knowlesi, que são transmitidos ao hospedeiro pela picada dos mosquitos do gênero Anopheles. No Brasil, 87% dos casos de malária ocorrem pela infecção por P. vivax e as infecções por P. falciparum e infecções mistas representam o restante. As infecções por P. vivax foram tradicionalmente relacionadas com casos mais brandos de malária e pesquisas sobre essas infecções foram por muito tempo negligenciadas pela comunidade científica e indústrias farmacêuticas. Atualmente, casos severos e mortes por essas infecções são cada vez mais frequentes, tornando essa espécie de Plasmodium um importante alvo para os programas de controle e erradicação da malária. Apesar das evidências mostrarem que há variabilidade entre os indivíduos na suscetibilidade e resposta ao tratamento da malária, estudos relacionados com a influência genética da resposta imunológica na suscetibilidade ou resistência nas infecções por P. vivax são escassos, e pesquisas sobre a variabilidade genética da resposta ao tratamento com os fármacos utilizados no tratamento dessas infecções são inexistentes. No presente trabalho, foram investigados a influência de 33 polimorfismos nos genes IL1B, IL2, IL4, IL4R, IL6, IL8, IL10, IL12A, IL12B, IL12RB1, SP110, TNF, TNFRSF1A, IFNG, IFNGR1, VDR, PTPN22 e P2X7 na suscetibilidade à malária e na evolução clínica dessa doença. Também foram investigados 30 polimorfismos nos genes CYP1A2, CYP2C8, CYP2C9, CYP3A4, CYP3A5, SLCO1A2, SLCO1B1, SLCO1B3 e SLCO2B1 na resposta ao tratamento da malária. Entre os anos de 2002 e 2009, 216 pacientes naturais do estado do Pará diagnosticados com malária causada por P. vivax aceitaram participar do estudo. Todos os pacientes fizeram o tratamento padrão com cloroquina associada à primaquina. Desse grupo de pacientes, 167 foram avaliados clinicamente durante o período do tratamento e os níveis de parasitemia e gametocitemia foram estimados diariamente. Além dos genes em estudos, os pacientes também foram genotipados para a enzima G6PD. A ancestralidade genética desses pacientes foi estimada por um conjunto de 48 marcadores de ancestralidade. 10 O presente trabalho descreve a associação de polimorfismos nos genes IL1B, IL4R, IL12RB1 e TNF com a suscetibilidade à malária, e dos polimorfismos nos genes IL6, IL12B e VDR aos níveis de parasitemia e gametocitemia. Já as variantes nos genes IL6 e IL10 foram associadas à severidade dos sintomas nas infecções por P. vivax. Esse trabalho, também demonstra que alelos dos genes CYP2C8, ABCB1, SLCO1B1 e SLCO2B1 influenciam a resposta ao tratamento da malária. Variantes nesses genes estão associadas a uma resposta mais rápida à medicação fazendo com que seus portadores eliminem os parasitos e gametócitos em menor tempo. Esses resultados contribuem para a compreensão da malária e podem ajudar na obtenção de métodos de controle e esquemas terapêuticos mais eficientes para o controle dessa doença. / Malaria is a major infection disease that affects human species, and is spread in tropical and sub-tropical regions in different continents. This disease is caused by Plasmodium falciparum, Plasmodium malariae, Plasmodium ovale, Plasmodium vivax and Plasmodium knowlesi protozoan which are transmitted to humans by Anopheles mosquito bites. In Brazil, 87% of malaria infections result from P. vivax infections, P. falciparum and mixed infections represent all other cases. P. vivax infections were traditionally related to malaria milder symptoms therefore research in such infections was neglected by the scientific community and pharmaceutical industries. At present severe cases and deaths by these infections are more frequent and P. vivax become an important target for malaria control and elimination program. Despite evidences showing malaria susceptibility and treatment response variability, studies in immune system response related to P. vivax malaria susceptibility are scarce. In the present study 33 polymorphisms in IL1B, IL2, IL4, IL4R, IL6, IL8, IL10, IL12A, IL12B, IL12RB1, SP110, TNF, TNFRSF1A, IFNG, IFNGR1, VDR, PTPN22 and P2X7 genes were investigated for association with malaria susceptibility, and its clinical aspects. Thirty polymorphisms in CYP1A2, CYP2C8, CYP2C9, CYP3A4, CYP3A5, SLCO1A2, SLCO1B1, SLCO1B3 and SLCO2B1 genes were investigated in relation to malaria treatment outcomes. Two hundred and sixteen (216) patients diagnosed with P. vivax malaria recruited during the period 2002-2009, who were born in Pará state, Brazil were enrolled in the study. All patients received chloroquine and primaquine standard treatment regimens. From these group of patients, 167 were clinically evaluated during treatment and have parasitemia and gametocytemia levels estimated daily. Besides the investigated genes, the patients were genotyped for G6PD. Genetic ancestry was estimated by a set of 48 ancestry markers. The present work reports that IL1B, IL4R, IL12RB1 and TNF gene polymorphisms were associated with malaria susceptibility, whereas IL6, IL12B and VDR gene polymorphisms were associated with parasitemia and gametocytemia levels. IL6 and IL10 genetic variants were associated with malaria symptoms intensity in P. vivax infections. The present work also reports the influence of CYP2C8, ABCB1, SLCO1B1 and SLCO2B1 alleles on malaria treatment response. Genetic variants in these genes were associated with a faster drug response and patients with these variants present parasites and gametocytes clearance in a shorter time. These results have a great value for malaria understanding and could help to improve disease control and therapeutic regimen to more efficient methods to control this disease.