OLIVEIRA, F. F. B. Mecanismos envolvidos na síndrome da dor aguda induzida por paclitaxel em camundongos: participação de mastócitos e células satélites gliais. 2017. 166 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Farmacologia Pós-Graduação (posgfarmacologia@gmail.com) on 2017-08-10T15:06:27Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_ffboliveira.pdf: 5786745 bytes, checksum: a99e6b2e181fb5242758de5ab1334d5e (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-08-10T15:36:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_ffboliveira.pdf: 5786745 bytes, checksum: a99e6b2e181fb5242758de5ab1334d5e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-10T15:36:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_ffboliveira.pdf: 5786745 bytes, checksum: a99e6b2e181fb5242758de5ab1334d5e (MD5) Previous issue date: 2017-08-08 / Paclitaxel is an antineoplastic drug used as a first line in the treatment of several solid tumors, particularly in breast, ovarian, lung, head and neck carcinomas. However, patients receiving paclitaxel treatment often develop a painful condition that occurs immediately after the treatment with this drug, known as acute pain syndrome associated with paclitaxel. Nevertheless, the mechanisms by which paclitaxel induces this painful condition is not yet known. The aim of this study was to investigate the involvement of mast cells and satellite glial cells in the acute pain syndrome induced by paclitaxel. Adult male wild-type mice (C57BL/6), SH mutant mice and TNFR1/R2, TLR4, IL-1R, IL-6 and CCR2 knockout mice were used. Acute pain syndrome was induced by intravenous paclitaxel (4 mg / kg, single dose). After administration of paclitaxel, mechanical and thermal sensitivity (cold) were assessed. The mechanical sensitivity was evaluated using von Frey filaments, measuring pressure in grams. The sensitivity to cold was evaluated with a stimulus of 10 °C (acetone) applied to the right hind paw, leading to agitation and paw elevation behaviors, as well as licking, measured in seconds. The heat sensitivity was assessed by the Hargreaves test, where an infrared light source is positioned under the animal's hind paw for 20s or until the animal exhibits a positive response (flinch or paw withdrawal), then the light source stop automatically. In addition, mast cell line culture and satellite glial cells (dorsal root ganglia primary culture) were stimulated with paclitaxel. Samples (plasma, sciatic nerve, dorsal root ganglia and spinal cord) were collected for determination of gene expression and cytokine levels (IL-1β, TNF-α, IL-6, MCP-1 and KC / CXCL1). Immunofluorescence (c-Fos, IL-6 and tryptase) was also performed. The concentration of cytokines/chemokines (IL-1β, TNF-α e IL-6, MCP-1 e KC/CXCL1) was also evaluated in the supernatant of mast cells and satellite glial cells. The results demonstrated that intravenous injection of paclitaxel significantly reduced (p < 0.05) the nociceptive threshold, inducing mechanical and thermal hyperalgesic responses following administration of paclitaxel. However, when assessing the thermal response to heat, it was found that paw withdrawal latency was not altered with paclitaxel treatment when compared to the control group. Immunofluorescence reaction for c-Fos in the dorsal root and spinal cord ganglia, demonstrated cell activation evidenced by an increased immunoexpression was observed in the groups treated with paclitaxel. Administration of paclitaxel caused a significant (p<0.05) increase in IL-1β, TNF-α, IL-6, MCP-1 and KC / CXCL1 levels. Mechanical and thermal cold hyperalgesia were significantly reduced (p <0.05) in SH animals (no mast cells) when compared to wild animals, and treatment with sodium cromoglycate (mast cell membrane stabilizer) was effective (p <0.05) in inhibiting mechanical and thermal hyperalgesia after the chemotherapic treatment. Pretreatment with sodium cromoglycate significantly (p<0.05) prevented the increase of cytokines and chemokines in mice treated with paclitaxel. In the SH mice treated with paclitaxel, no significant increase (p<0.05) of cytokines was observed. Paclitaxel stimulation resulted in a significant (p<0.05) increase in cytokines (TNF-α, IL-6) and chemokines (MCP-1) concentration in mast cell culture. In addition, immunofluorescence of the dorsal root ganglion demonstrated increased immunoexpression of tryptase and IL-6 after administration of paclitaxel. The results also showed that the TLR4 receptor was involved in the development of paclitaxel-induced hyperalgesia, since knockout animals to TLR4 receptor treated with this chemotherapic did not develop mechanical and thermal hyperalgesia. The results also demonstrated that, in the TLR4 knockout mice treated with paclitaxel, there was no significant increase (p <0.05) in cytokines and chemokines; and when compared to the group of WT mice, a significant reduction (p <0.05) in cytokine and chemokine levels was observed. In addition, paclitaxel caused a significant (p <0.05) increase of cytokines (TNF-α and IL-6) and chemokines (MCP-1 and KC/CXCL) in satellite glial cell culture and the deletion of the TLR4 receptor gene was able to prevent this increase in cytokine/chemokine levels. The study showed for the first time that mast cells and satellite glial cells are involved in the development of acute pain induced by paclitaxel in mice. In addition, the study revealed that the activation of mast cells and satellite glial cells is possibly due to the binding of paclitaxel to TLR4, inducing the release of cytokines/chemokines that contribute to the development of acute pain induced by paclitaxel. / Paclitaxel é um antineoplásico utilizado como primeira linha no tratamento de diversos tumores sólidos, particularmente em carcinomas de mama, ovário, pulmão, cabeça e pescoço. Entretanto, os pacientes que recebem tratamento com paclitaxel frequentemente desenvolvem dor que ocorre imediatamente após o tratamento com este fármaco, conhecida como síndrome da dor aguda associada ao paclitaxel. No entanto, os mecanismos pelos quais o paclitaxel induz essa condição dolorosa, ainda não são conhecidos. Neste estudo objetivou-se investigar o envolvimento de mastócitos e de células satélites gliais na síndrome de dor aguda induzida pelo paclitaxel. Para isso foram utilizados camundongos C57BL/6 (selvagens), camundongos que não expressam mastócitos (SH) e camundongos knockout TNFR1/R2; TLR4; IL-1R; IL-6 e CCR2 machos (20-25g). O modelo consiste na administração de paclitaxel por via intravenosa (4 mg/kg, dose única). Após a administração de Paclitaxel a sensibilidade mecânica foi avaliada utilizando filamentos de von Frey, mensurado em gramas de pressão. A sensibilidade ao frio foi avaliada com um estímulo 10 ºC (acetona) aplicado na pata traseira direita, observando-se comportamentos de agitação e elevação da pata, além de lambidas, mensurados em segundos. E a sensibilidade ao calor foi avaliada através do teste de hargreaves, onde uma fonte de luz infravermelha é posicionada sob a pata traseira do animal durante 20s ou até que o animal exiba resposta positiva (flinch ou retirada da pata), então a fonte de luz e para automaticamente. Além disso, foi realizada cultura de linhagem de mastócitos e de células satélites gliais (cultura primária de gânglio da raiz dorsal) que foram estimuladas com paclitaxel. Foram coletadas amostras (plasma, nervo isquiático, gânglios da raiz doral e medula espinal) para determinação da expressão gênica e dosagem dos níveis de citocinas/qumiocinas (IL-1β, TNF-α e IL-6, MCP-1 e KC/CXCL1). Também foi realizado imunofluorescência (c-Fos, IL-6 e triptase). A concentração de citocinas/quimiocinas (IL-1β, TNF-α e IL-6, MCP-1 e KC/CXCL1) também foi avaliada no sobrenadante das culturas de mástocitos e de células satélites gliais. Os resultados demonstraram que a injeção intravenosa de paclitaxel reduziu significativamente (p<0,05) o limiar nociceptivo, induzindo respostas hiperalgesicas mecânica e térmica ao frio após a administração de paclitaxel. No entanto, quando se avaliou a resposta térmica ao calor, verificou-se que a latência de retirada da pata não foi alterada com o tratamento com paclitaxel, quando comparadas ao grupo controle. A imunofluorescência para c-Fos nos gânglios da raiz dorsal e medula espinal demostrou ativação de celular evidenciado por aumento da imunoexpressão nos grupos tratado com paclitaxel. A administração de paclitaxel aumentou significativamente (p<0,05) as citocinas IL-1β, TNF-α e IL-6, MCP-1 e KC/CXCL1. A hiperalgesia mecânica e térmica ao frio foram reduzidas significativamente (p<0,05) em animais SH (não possuem mastócitos), quando comparado aos animais selvagens, bem como o tratamento com cromoglicato de sódio (estabilizador de membrana de mastócitos) foi eficaz em inibir significativamente (p<0,05) a hiperalgesia mecânica e térmica ao frio após o tratamento com o quimioterápico. O pré-tratamento com cromoglicato de sódio preveniu significativamente (p<0,05) o aumento de citocinas e quimiocinas em camundongos tratados com paclitaxel. Nos camundongos SH tratados com paclitaxel não foi observado aumento significativo (p<0,05) de citocinas. A estimulação com paclitaxel provocou aumento significativo (p<0,05) de citocinas e quimiocinas (TNF-α, IL-6 e MCP-1) em cultura de mastócitos. Além disso, a imunofluorescência, no gânglio da raiz dorsal, demonstrou um aumento da imunoexpressão de triptase (marcador de mastócito) e IL-6 após a administração de paclitaxel. Os resultados mostraram também que o receptor TLR4 está envolvido no desenvolvimento de hiperalgesia induzida por paclitaxel, pois o tratamento de animais knockout para o receptor TLR4 com este quimioterápico não foi capaz de desenvolver hiperalgesia mecânica e térmica nesses animais. Os resultados demonstram ainda, que nos camundongos knockout TLR4 tratados com paclitaxel não houve aumento significativo (p<0,05) de citocinas e quimiocinas. E quando comparados ao grupo de camundongos selvagens, observou-se significativa redução (p<0,05) dos níveis de citocina e quimiocina. Além disso, o paclitaxel causou aumento significativo (p<0,05) de citocinas (TNF-α e IL-6) e quimiocinas (MCP-1 e KC/CXCL1) em cultura de células satélites gliais e a deleção gênica para o receptor TLR4 foi capaz de impedir o aumento dos níveis de citocinas/quimiocinas. O estudo mostra, pela primeira vez, que mastócitos e células satélites gliais estão envolvidos no desenvolvimento de dor aguda induzida pelo paclitaxel em camundongos. Adicionalmente, o estudo revelou que a ativação de mastócitos e de células satélites gliais, possivelmente se dá pela ligação do paclitaxel ao TLR4, induzindo a liberação de citocinas/quimiocinas que, contribuem para o desenvolvimento de dor aguda induzida pelo paclitaxel.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-11-19T18:40:25Z No. of bitstreams: 1 Renata Oliveira de Souza. Densidade de mastócitos....pdf: 1443667 bytes, checksum: 311f03148753ad500460aac2c50afa49 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-19T18:40:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Renata Oliveira de Souza. Densidade de mastócitos....pdf: 1443667 bytes, checksum: 311f03148753ad500460aac2c50afa49 (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Os tumores malignos orais representam 5% de todos os cânceres humanos e o carcinoma escamocelular oral (CECO) corresponde a 90% destes casos. Sabe-se que as pessoas acometidas por displasia epitelial oral (DEO) apresentam um maior risco de desenvolver CECO. A angiogênese está associada à iniciação e progressão neoplásica, sendo o início da neovascularização em DEOs um pré-requisito para a formação do tumor. Na angiogênese, destacam-se os mastócitos, responsáveis por estimular e manter a formação da rede vascular em determinadas doenças, inclusive displasias e neoplasias. Estas células liberam fatores que estimulam a angiogênese, como o VEGF. Assim, este estudo se propôs a avaliar o papel dos mastócitos na angiogênese de DEO e CECO, considerando parâmetros clínicos e morfológicos, comparando-os entre si. Metodologia: Quatorze DEOs e 56 CECOs, dispostos em lâminas convencionais e de tissue microarray (TMA), respectivamente, provenientes do Hospital AC Camargo, foram imunomarcardas para os anticorpos anti-CD34, anti-VEGF-A e anti-Mast cell tryptase, os três primeiros através do sistema EnVision Advance™ (Dako Corporation, Carpinteria, USA) e o último através do sistema Histofine (Nichirei Biosciences Inc., Tokyo, Japan). A microdensidade vascular (MDV - vasos/mm2) foi estabelecida através da determinação do número de vasos marcados para CD34 em cinco áreas de hot spot; a expressão de VEGF-A foi determinada pelo escore imuno-histoquímico (EI) estabelecido por Sinicrope et al. (1995); finalmente, a densidade da mastócitos (DM – células/ mm2) foi determinada através do número de células contadas em cinco áreas de hot spot. Resultados/Conclusões: A DM não apresentou relação com parâmetros clínicos e morfológicos em DEOs e CECOs, não existindo diferença na atividade exercida por Ms granulados e degranulados (p=0,18 e p= 0,1439, respectivamente; Teste de Mann-Whitney). A DM foi significativamente maior entre os casos de DEO quando comparadas aos carcinomas (p=0,01; Teste de Mann-Whitney), o que parece envolver a ação das células neoplásicas infiltrantes na regulação negativa do número de Ms nestes tumores. A MDV, nos casos de DEO e CECOs, não esteve associada aos parâmetros clínicos e morfológicos das mesmas, possivelmente sugerindo que a densidade de vasos não contribui de maneira independente para a progressão e comportamento biológico destas lesões. Os casos de DEO apresentaram MDV significativamente maior em relação aos CECOs (p= 0,0003, Teste de Mann-Whitney), sugerindo-se como possível causa uma subanálise dos vasos nas lâminas de TMA. A expressão de VEGF, no epitélio e lâmina própria, não esteve relacionada aos parâmetros clínicos e histológicos em DEOs e CECOs, tampouco à progressão de DEO para CECO, uma vez que os maiores EI foram encontrados em CECO bem diferenciado, seguido de DEO moderada, CECO moderadamente diferenciado e DEO discreta. A DM (granulados e degranulados) não estava correlacionada à MDV, o que provavelmente aponta para a atuação destas células, de maneira mais expressiva, em outros cânceres. Também não existiu correlação significante entre a DM, granulado e degranulado, e expressão de VEGF nestas duas lesões, o que provavelmente demonstra que não há participação expressiva dos Ms na produção desta citocina. Por fim, existiu associação entre a expressão de VEGF por células tumorais e MDV (r= 0,39, p= 0,0299, Teste de Spearman), o que parece demonstrar uma maior propensão das células tumorais infiltrantes para exercerem atividade sobre o desenvolvimento da MDV em CECOs. / Malignant tumors located in oral cavity represent 5% of all human cancers and oral squamous cell carcinomas (OSCC) correspond to 90% of these cases. One knows that people suffering from oral epithelial dysplasia (OED) have an increased risk to develop OSCC. Angiogenesis is associated with neoplastic initiation and progression, and neovascularization in dysplasic lesions is a pre-requisite to tumor formation. The mast cells (Ms) are well know for stimulating and maintaining the vascular network formation in certain diseases, including dysplasias and neoplasms. These cells release factors that stimulate angiogenesis such as VEGF. Thus, this study objective was to evaluate the role of mast cell in OED and OSCC angiogenesis, taking into account clinical and morphological parameters, and compared with each other. Methods: After approval by the REC (229/10), 14 OED and 56 OSCC, from the AC Carmargo Hospital, were immunostaining for anti-CD34, anti-VEGF-A and anti-mast cell tryptase, the first three using ENVISION ADVANCETM SYSTEM (Dako Corporation, Carpinteria, USA) and last one through thae Histofine system (Nichirei Biosciences Inc., Tokyo, Japan). The vascular microdensity (VMD – vessel/mm2) was established by determining the number of vessels stained for anti-CD34 score in five hot spots areas; the expression of anti-VEGF-A was found according to the established by Sinicrope et al. (1995), immunohistochemical score (IS); and finally the mast cells density (MD – cell/mm2) was determined by counting the number of cells in five hot spot areas. Results/Conclusions: The MD was not associated with clinical and morphological parameters in OED e OSCC, with no difference in the activity carried on by granulated and degranulated Ms (p= 0.18 and p= 0.1439, respectively, Mann-Whitney test). The MD was significantly higher among cases of OED (p= 0.01, Mann-whitney test), which seems to involve the action of the infiltrating neoplastic cells in regulating the number of Ms in these tumors.VMD was not associated with clinical and morphological parameters of OED and OSCC, showing that blood vessels density does not contribute independently to the progression and biological behavior of this lesions. The cases of OED had VMD higher compared to the OSCC (p= 0.0003, Mann-Whitney test), which may be associated with a subanalysis of vessels in the TMA slides. The expression of VEGF, in the epithelium and lamina propria, was not related to clinical and histological parameters in OED e OSCC, nor the progress of OED to OSCC, since the highest immunohistochemical score (IE) were found in well-differentiated OSCC, followed by moderate OED, moderately differentiated OSCC and discrete OED. The MD (granulated and degranulated) was not correlated with DMV, which shows the presence of these cells being more important in other cancers. Also, there was no significant correlation between MD, granulated and degranulated, and VEGF expression in these two lesions, which probably shows that there is no significant participation of Ms in the production this cytokine. Finally, there were association between expression of VEGF by tumoral cells and VMD in OSCC (r= 0.39, p=0.0299, Spearman test), which seems to show a greater propensity of infiltrative tumor cells to exert its activity on the development of MDV in OSCC.

Submitted by Programa de Pós-Graduação em Odontologia Saúde (mestrodo@ufba.br) on 2016-11-29T13:36:09Z No. of bitstreams: 1 VERSÃO FINAL corrigida pos defesadegradação2.pdf: 1637639 bytes, checksum: c79583d0ed5c59974d9be7eb278fb6c9 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2016-12-19T15:01:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 VERSÃO FINAL corrigida pos defesadegradação2.pdf: 1637639 bytes, checksum: c79583d0ed5c59974d9be7eb278fb6c9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-19T15:01:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VERSÃO FINAL corrigida pos defesadegradação2.pdf: 1637639 bytes, checksum: c79583d0ed5c59974d9be7eb278fb6c9 (MD5) / CAPES / Objetivo: Avaliar a relação entre a distribuição e degranulação de mastócitos (MCs) em tecidos periodontais em casos de periodontite, com a degradação do colágeno e com parâmetros clínicos de profundidade de sondagem, nível clínico de inserção e distância da junção cemento-esmalte à margem gengival. Materiais e métodos: Trinta e quatro amostras foram selecionadas, sendo 16 de periodontite (grupo caso) e 18 de saúde ou gengivite (grupo controle). Imunohistoquímica foi feita para identificação de MCs e coloração de Picrosirius para avaliar as fibras colágenas. O número de MCs foi determinado por mm2 no epitélio oral, epitélio juncional e na lâmina própria em microscopia de luz convencional e a avaliação da degranulação de MCs e do colágeno foram feitas no tecido conjuntivo. Teste t e qui-quadrado (p<0,05) foram feitos para comparar os dois grupos e a correlação de Pearson foi feita para analisar a relação dos MCs e os parâmetros clínicos periodontais. Resultados: A quantidade de mastócitos foi significantemente maior (p=0,04) no grupo caso (339,01±188,94 MCs/mm2) comparada ao grupo controle (211,14±131,13 MCs/mm2) no tecido conjuntivo com infiltrado inflamatório. Não houve relação entre a degradação do colágeno entre os grupos, nem da degranulação e o diagnóstico periodontal e nem entre a degranulação e degradação das fibras colágenas (p ≥ 0,30). No grupo controle houve relação entre maior número de MCs no tecido conjuntivo sem infiltrado inflamatório e a degradação de colágeno (p=0,001). Houve correlação significante entre o número de MCs e a profundidade de sondagem (p=0,04). Conclusão: Os mastócitos estão envolvidos na patogênese das doenças periodontais, independente do estágio da doença e podem estar associados à degradação das fibras colágenas do tecido conjuntivo gengival na saúde periodontal e nos estágios iniciais das doenças periodontais. / Aim: To evaluate the relationship between the distribution and degranulation of mast cells (MCs) in periodontal tissues in cases of periodontitis, with the degradation of collagen and clinical parameters of probing depth, clinical attachment level and distance from the cemento-enamel junction to gingival margin. Methods: Thirty-four cases were selected, 16 of periodontitis (case group) and 18 health or gingivitis (control group). Immunohistochemistry was performed to identify MCs and picrosirius staining to assess the collagen fibers. The number of MCs was determined by mm2 in oral epithelium, junctional epithelium and lamina propria in conventional light microscopy and evaluation of degranulation of MCs were made in collagen connective tissue. Chi-square test and t test (p<0.05) were made to compare the two groups and Pearson correlation was made to examine the relationship of MCs and periodontal clinical parameters. Results: The number of mast cells was significantly higher (p=0.04) in the case group (339.01±188.94 MCs/mm2) compared to the control group (211.14±131.13 MCs/mm2) in the connective tissue with inflammatory infiltrate. There was no significant relationship between collagen degradation and groups, or degranulation and periodontal diagnosis or between degranulation and collagen fibers degradation (p≥0.30). In the control group there was a relationship between more MCs in connective tissue without inflammatory infiltrate and collagen degradation (p=0.001). There was a significant correlation between the number of MCs and probing depth (p=0.04). Conclusion: Mast cells are involved in the pathogenesis of periodontal diseases, regardless of the stage of the disease and can be associated to the collegen degradation in health periodontal tissue and in early stages of periodontal diseases.

Submitted by Programa de Pós-Graduação em Odontologia Saúde (mestrodo@ufba.br) on 2017-04-03T14:12:58Z No. of bitstreams: 1 PDF Final.pdf: 4765427 bytes, checksum: ae3f93ce46ff32b7ce466869740090de (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-06-29T14:28:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF Final.pdf: 4765427 bytes, checksum: ae3f93ce46ff32b7ce466869740090de (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-29T14:28:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF Final.pdf: 4765427 bytes, checksum: ae3f93ce46ff32b7ce466869740090de (MD5) / FAPESB / O presente trabalho teve como objetivo estudar, por meio da imunohistoquímica, a participação de componentes celulares estromais a exemplo dos mastócitos (mast cell triptase), miofibroblastos (alfa-SMA) e macrófagos (CD163) e componentes vasculares (CD34 e D2-40) em uma série de tumores odontogênicos queratocísticos (TOQ), na tentativa de fornecer subsídios para compreender a interação entre esses componentes e o comportamento biológico distinto desta lesão. Para fins comparativos, cistos radiculares (CRs) e folículos pericoronários (FPs) também foram incluídos. A amostra foi composta por 30 TOQs, 15 CRs e 07 FPs. Para a avaliação dos mastócitos, miofibroblastos e macrófagos, foram quantificadas as células imunorreativas aos marcadores mast cell triptase, alfa-SMA e CD163, respectivamente, em 10 campos (400x). Os índices angiogênico e linfangiogênico foram avaliados por meio da densidade microvascular (MVD) e densidade microvascular linfática (MVDL) dos microvasos marcados, respectivamente, pelos marcadores CD34 e D2- 40. Foi utilizado o teste ANOVA com pós-teste de correção de Tukey, para análise estatística entre os marcadores segundo o tipo de lesão. Para a análise da correlação entre os marcadores dentro da mesma lesão, utilizamos a correlação de Pearson. Para a associação, no TOQ, entre os marcadores e a presença de inflamação, utilizamos o Teste T de Student. A análise da expressão do marcador mast cell triptase revelou existir diferenças significativas (p<0,05) entre a densidade de células mastocitárias presentes nos CRs (22,7) em relação aos FPs (1,23) e TOQs (7,39), e entre a densidade de mastócitos presentes no TOQs e FPs. Houve também diferença significativa (P<0,05) entre a densidade de miofibroblastos em TOQs (29,25) em relação aos CRs (4,66) e os FPs (1,50). A diferença da densidade de miofibroblastos entre os CRs e FPs não foi significativa (p>0,05). A respeito dos macrófagos, não houve diferenças significativas (p= 0,084) entre as densidades de macrófagos presentes nos TOQs (2,31), CRs (1,42) e FPs (0,14). Na avaliação do índice angiogênico, não houve diferenças significativas da MVD entre as três lesões estudadas. No entanto, para o índice linfangiogênico, houve diferença significativa (p<0,05) entre a MVDL presentes nos TOQs (11,64) em relação aos CRs (4,19) e aos FPs (0,167). A diferença entre a MVDL dos CRs em relação aos FPs não foi estatisticamente significante (p>0,05). Não foi encontrada associação significativa (p>0,05) entre os marcadores estudados com a presença de inflamação no TOQ. No presente trabalho, encontramos uma correlação positiva e moderada entre os marcadores mast cell triptase e o CD34 nos TOQ (p = 0,025). Já nos CRs encontramos uma correlação inversa e moderada entre os marcadores SMA x CD34 (p = 0,017). Nos FPs também encontramos uma correlação inversa entre os mesmos marcadores anteriores, porém forte (p=0,049). Embora os componentes celulares estromais e microvasculares aqui representados por mastócitos, miofibroblastos, macrófagos CD163 positivos e vasos CD34 e D240, respectivamente, sejam importantes para manutenção do arcabouço estrutural do TOQ e CR, existiu uma interação significante entre mast cell triptase e CD34 no TOQ e entre CD34 e o alfa –SMA no CR. / The present study aimed to investigate, by immunohistochemistry, the participation of stromal cell components such mast cell (mast cell tryptase), myofibroblasts (alpha- SMA) and macrophages (CD163) and vascular components (CD34 and D2-40) in a series of keratocysts odontogenic tumors (OKT) in an attempt to provide information to understand the interaction between these components and the biological behavior of this lesion. For comparative purposes, radicular cysts (RCs) and pericoronal follicles (PFs) were also included. The sample comprised 30 OKTs, 15 RCs and 07 PFs. For the evaluation of mast cells, myofibroblasts and macrophages, the cells immunoreactive with biomarkers mast cell tryptase, alpha- SMA and CD163 were quantified, respectively, in 10 fields (400x). The angiogenic and lymphangiogenic index were assessed by microvessel density (MVD) and lymphatic microvessel density (MVDL) of microvessels marked respectively by for CD34 and D2-40. ANOVA with post-test Tukey correction for statistical analysis between markers was used according to the type of injury. To analyze the correlation between markers within the same lesion, we used the Pearson correlation. For the association, the OKT between markers and the presence of inflammation, we used the Student's t test. The analysis of expression of mast cell tryptase shows any significant differences (p < 0.05) between the density of mast cells present in RCs (22.7) than FPs (1.23) and TOQs (7.39) and the density of mast cells present in TOQs and FPs. There was also a significant difference (P < 0.05) between the density of myofibroblasts in TOQs (29.25) compared to CRs (4.66) and FPs (1.50). The difference in density between the RCs of myofibroblasts and PFs was not significant (p> 0.05). With respect to macrophages, no significant differences (p = 0.084) between the densities of macrophages present in TOQs (2.31), CR (1.42) and FPs (0.14). With respect to the angiogenic index, there were no significant differences in MVD between the three lesions studied. However, for the lymphangiogenic index, a significant difference (p < 0.05) between MVDL present in TOQs (11.64) compared to CRs (4.19) and FPs (0.167). The difference between MVDL of CRs compared to FPs was not statistically significant (p > 0.05). No significant association (p > 0.05) between the biomarkers studied in the presence of inflammation in the OKT was found. In the present study, we found a moderate positive correlation between mast cell tryptase and CD34 markers in OKT (p = 0.025). Have the CR and found an inverse correlation between moderate SMA x CD34 (p = 0.017). In PFs also found an inverse correlation between the SMA x CD34, but strong (p = 0.049). Although stromal microvascular and cellular components represented here by mast cells, myofibroblasts, and CD163 positive macrophages and vessels CD34 and D240 are important for maintaining the structural framework of the OKT and RC, a significant interaction between mast cell tryptase x CD34 existed in OKT and between CD34 x alpha- SMA in RC.

TEÓFILO, Carolina Rodrigues. Expressão de CD31, CD34 e triptase em lesões potencialmente malignas e nos carcinomas de células escamosas orais. 2012. 70 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-02-15T12:47:08Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_crteófilo.pdf: 1174506 bytes, checksum: d60d3493847571cc157661dbe68ebee6 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-02-18T15:46:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_crteófilo.pdf: 1174506 bytes, checksum: d60d3493847571cc157661dbe68ebee6 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-02-18T15:46:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_crteófilo.pdf: 1174506 bytes, checksum: d60d3493847571cc157661dbe68ebee6 (MD5) Previous issue date: 2012 / Angiogenesis is the development of new blood vessels from pre-existing capillaries, being an essential step in tumor growth for supplying nutrition and oxygen to cells in proliferation. A cell that may be involved in this process is the mast cell (MC), since besides the defense function, acts in the blood vessels regulation. The MC participation in the induction of angiogenesis has been suggested in various malignant tumors. The purposes of this study was to evaluate angiogenesis and mast cell density in oral epithelial dysplasia and squamous cell carcinoma (SCC). This is an observational, retrospective and quantitative study using the sample selection from the archives of the Department of Legal Medicine and Pathology and Laboratory of Oral Pathology, both from the Federal University of Ceará. For MC evaluation , the sample was consisted of 73 paraffin blocks, distributed between SCC (n=30), epithelial dysplasia (n=23) and hyperplasias fibroepithelial (HFE) (n = 20), as control, and for angiogenesis the sample was 65 blocks, consisted of 24 SCC, 19 epithelial dysplasias and 22 HFE. Immunohistochemistry was performed using the MC-tryptase, CD31 and CD34 antibodies. For quantification, digital images were captured and then counting was performed using Image J software. The antibody staining percentage was determined using SAMM software. With regard to mast cells, there was a lower density in malignant lesions in relation to HFE and dysplasia (p = 0.0092). Evaluating angiogenesis, CD31 expression showed differences between epithelial dysplasia and SCC and between SCC and HFE, with a greater percentage of vessels in SCC (p <0.0001). However, CD34 expression did not differ between groups. The CD31 antibody was shown to be a better angiogenesis marker in oral mucosa than CD34. Increased vascularity in oral squamous cell carcinoma suggests that angiogenesis is necessary for tumor growth, increasing when the malignant transformation starts. However, no correlation was found between mast cells and angiogenesis. / Angiogênese é o surgimento de um novo vaso sanguíneo a partir de capilares pré-existentes, sendo um passo essencial no crescimento tumoral por fornecer nutrição e oxigênio às células em proliferação. Uma célula que pode estar envolvida nesse processo é o mastócito, pois, além da função de defesa, atua na regulação de vasos sanguíneos. Sua participação na indução da angiogênese tem sido sugerida em vários tumores malignos. Os objetivos deste trabalho foram avaliar a angiogênese e a densidade de mastócitos em displasias epiteliais e no carcinoma espinocelular (CEC) de boca. Trata-se de um estudo observacional, retrospectivo e quantitativo, realizado através da seleção de amostra proveniente dos arquivos do Departamento de Patologia e Medicina Legal e do laboratório de Patologia Bucal do curso de Odontologia, ambos da Universidade Federal do Ceará. Para a avaliação dos mastócitos, a amostra foi constituída por 73 blocos parafinados, distribuídos entre CEC (n=30), displasias epiteliais (n=23) e hiperplasias fibroepiteliais (HFE) (n=20), como controle, e para a angiogênese a amostra foi de 65 blocos, sendo 24 de CEC, 19 de displasias epiteliais e 22 de HFE. Foi realizada imunohistoquímica utilizando-se os anticorpos anti-triptase, para mastócitos e anti-CD31 e anti-CD34, para vasos sanguíneos. Para quantificação, foram capturadas imagens digitais e, em seguida, utilizados softwares para auxiliar na contagem dos mastócitos (Image J) e para determinação do percentual de marcação do anticorpo (SAMM). Com relação aos mastócitos, houve menor densidade destes nas lesões malignas em relação às HFE e displasias (p=0,0092). Avaliando angiogênese, a expressão de CD31 mostrou diferença entre os grupos CEC e displasia epitelial e entre CEC e HFE, havendo um maior percentual de vasos nos CEC (p<0,0001). Contudo, o CD34, não mostrou diferença entre os grupos. O anticorpo CD31 mostrou-se melhor marcador de angiogênese em mucosa oral do que CD34. O aumento da vascularização em CEC oral sugere que a angiogênese é necessária ao crescimento tumoral, aumentando à medida que inicia o processo de malignização. Não foi encontrada correlação entre mastócitos e angiogênese.

Made available in DSpace on 2016-03-07T19:20:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-09-30. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T19:24:51Z : No. of bitstreams: 1 000858004.pdf: 1989014 bytes, checksum: 48779343a2d8732bc458afeae78c1a5d (MD5) / O cão Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) é o melhor modelo natural da distrofia muscular de Duchenne (DMD) com manifestações genotípicas e fenotípicas semelhantes à doença humana. Como nos afetados pela DMD, a proliferação progressiva de tecido conectivo no endomísio das fibras musculares ocorre em paralelo ao curso clínico da doença nos animais GRMD. Estudos indicam a relação dos mastócitos com a deposição de tecido fibroso devido a liberação de seus mediadores que ativam os fibroblastos. O objetivo desse trabalho foi o de avaliar a expressão dos mastócitos e sua possível relação com as lesões musculares e fibrose em cães GRMD de diferentes idades. Foram utilizados fragmentos de quatro grupos musculares esqueléticos (masseter, diafragma, tríceps braquial e bíceps femoral) de dez cães entre dois a oito meses de idade sendo seis afetados e quatro controles. As amostras foram processadas por técnicas usuais de histologia, coradas com hematoxilina e eosina, azul de toluidina para verificar a expressão dos mastócitos e tricrômio de Azan para a evidenciação e quantificação da fibrose. Em todos os grupos musculares dos cães GRMD o infiltrado de mastócitos apresentou aumento significativo comparado ao grupo controle. O número médio de mastócitos diminuiu com a idade dos cães GRMD. Todos os grupos musculares apresentaram aumento significativo na quantidade de tecido colagenoso em relação ao grupo controle. A deposição de tecido fibroso diminuiu de acordo com a idade dos animais. Dos resultados afere-se que o aumento da degranulação dos mastócitos ocorreu em cães GRMD mais jovens (2 meses) fato que potencializou o aumento na deposição de tecido fibroso nas fibras musculares que foi diminuindo gradativamente com o tempo e a idade dos animais. Outros estudos são necessários para esclarecer o papel dos mastócitos na patogênese da fibrose, a fim de contribuir no desenvolvimento de novas... / Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) is the best natural model of Duchenne muscular dystrophy (DMD) with genotypic and phenotypic manifestations similar the human disease. As in to DMD patients, the progressive proliferation of connective tissue in the endomysium of the muscle fibers is parallel to the clinical course of disease in GRMD animals. Studies indicate the relationship of mast cells with the deposition of fibrous tissue due to the release of mediators that activate fibroblasts. The aim of this study was to evaluate the expression of mast cells and its possible relation with muscle injury and fibrosis in GRMD dogs at different ages. It was used fragments of four skeletal muscle groups (masseter, diaphragm, triceps brachial and biceps femoris) of ten dogs between two and eight months age, six affected and four controls. Samples were processed by usual techniques of histology, stained with hematoxylin-eosin and toluidine blue, to verify the expression of mast cells, and Azan trichrome for evaluation and quantification of fibrous. In all muscle groups of dogs GRMD the infiltration of mast cells increased significantly compared to control group. The average number of mast cells decreased with the age of GRMD dogs. All muscle groups showed a significant increase in the amount of collagenous tissue in the control group. The deposition of fibrous tissue decreased with the age of the animals. Possibly, the increase of mast cell degranulation and mediator release would occur in younger GRMD dogs (2 months), fact that potentiated the increase deposition of fibrous tissue in muscle fibers which was gradually decreasing over time and age of the animals. Other studies are needed to clarify the role of mast cells in the pathogenesis of fibrosis in order to contribute to the development of new therapeutic approaches and improve the life expectancy of humans and dogs affected by muscular dystrophy

Made available in DSpace on 2016-03-07T19:21:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-09-25. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T19:25:22Z : No. of bitstreams: 1 000857980.pdf: 1023163 bytes, checksum: b6d1310d3d96a124f457573d5faac3f0 (MD5) / O mastocitoma caracteriza-se por transformações neoplásicas de mastócitos e consiste em uma das neoplasias malignas que acometem com maior frequência a espécie canina. Os sinais clínicos dos mastocitomas decorrem da liberação dos grânulos citoplasmáticos dos mastócitos, que quando sensibilizados, culminam na produção e liberação de vários mediadores presentes nestes grânulos, tais como histamina, heparina, proteases e outros. No mastócito neoplásico, estas substâncias podem estar aumentadas 25 a 50 vezes em relação a um mastócito normal. A heparina forma um complexo ternário com a antitrombina III e inibe a formação de trombina, que pode levar a um aumento no tempo de coagulação. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a hemostasia primária e secundária dos animais com mastocitoma e correlacionar estes resultados com o grau histopatológico do tumor, utilizando a classificação de Kiupel e colaboradores, mais utilizada atualmente. Para isso, foram avaliados 50 cães, dentre eles 20 cães hígidos (grupo controle - GC) e 30 cães com mastocitoma cutâneo (grupo doente - GD) - estes diagnosticados por meio de avaliação citológica e histopatológica do tecido acometido. Entre os cães do GD, consideramos dois subgrupos da classificação de Kiupel et al.: grupo SK1 (12 animais com mastocitoma de alto grau) e grupo SK2 (18 animais com mastocitoma de baixo grau). Para avaliação da hemostasia primária, foram feitas contagens de plaquetas em contador automático imediatamente após a obtenção da amostra de sangue. Para avaliação da hemostasia secundária, a partir do sangue venoso coletado, foram determinados os valores de fibrinogênio, tempo de protrombina (TP) e tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) em coagulômetro. Com base no grau de malignidade do tumor, comparamos os resultados dos seus respectivos painéis de coagulação e submetemos suas correspondências à análise... / Mast cell tumor is characterized by neoplastic transformation of mast cells. This tumor is one of the malignancies that most often affect dogs. The clinical signs result from the release of granules contained in the cytoplasm of mast cells. When these granules are sensitized, it causes the production and release of several mediators from these beads (such as histamine, heparin, proteases and others). In neoplastic mast cells, these substances may be increased 25 to 50 times compared to a typical mast cell. Heparin forms a ternary complex with antithrombin III and inhibits the formation of thrombin, which may lead to an increase in clotting time. In this context, the aim of this study was to evaluate primary and secondary hemostasis of animals with mast cell tumor and correlate these findings with the tumor histological grade, using the Kiupel et al. (2011) classification for mast cell tumors. For this, were used 50 dogs, including 20 healthy animals (Control Group - GC) and 30 dogs with cutaneous mast cell tumors (Disease Group - GD) - those diagnosed by cytological and histopathological evaluation of the affected tissue. Among the GD dogs, was considered two subgroups of Kiupel classification: SK1 group, composed of 12 animals with high-grade mast cell tumor; SK2 group, consisting of 18 animals with low-grade mast cell tumor. To evaluate primary hemostasis, platelets were counted with an automatic counter immediately after collection of the blood sample. To evaluate secondary hemostasis, collected venous blood was used to determined fibrinogen values, prothrombin time (PT) and activated partial thromboplastin time (APTT) in coagulometer. Based on tumor grade, it was compared to the results of their respective clotting panels and then its correspondences were submitted to multivariate analysis. It was found that among the evaluated parameters, the APTT values were significantly higher in affected animals, particularly in high-grade ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-03-23Bitstream added on 2014-06-13T18:08:57Z : No. of bitstreams: 1 baptistasaidemberg_nb_me_rcla.pdf: 816123 bytes, checksum: 16394528574d49791508070d14ff8e82 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Os venenos de Vespidae são importantes ferramentas para a defesa dos ninhos. Acidentes com ferroadas de vespas sociais são muito comuns e podem causar diversos sintomas nas vitimas. Esses venenos são ricos em peptídeos policatiônicos, geralmente envolvidos em processos inflamatórios. Os peptídeos mais abundantes encontrados nos venenos das vespas são os peptídeos quimiotáticos e mastoparanos, porém dentre os diversos componentes encontrados no veneno da vespa social A. p. pallipes ainda existem algumas toxinas pouco caracterizadas farmacologicamente. Entre elas encontrou-se os peptídeos Protonectina e Protonectina (1-6) com massas moleculares de 1209 Da (I-L-G-T-I-L-G-L-L-K-G-L-NH2) e 628 Da (I-L-G-T-I-L-NH2), respectivamente. Ao nível molecular, esses peptídeos interagem entre si, resultando na potenciação das atividades funcionais da Protonectina. Considerando-se a importância deste tipo de interação molecular para a indução de processos inflamatórios, os objetivos deste estudo foram: caracterizar a estrutura secundária desses peptídeos individualmente e também a estrutura supramolecular resultante de suas interações, observando os efeitos da mesma sobre as ações de degranulação de mastócitos, quimiotaxia e hemólise. Ambos os peptídeos foram sintetizados manualmente em fase sólida por química Fmoc. A Protonectina é um peptídeo anfifílico, enquanto que a Protonectina (1-6) é muito pequena para assumir estrutura secundária anfifílica. Análises de Dicroísmo Circular, revelaram que na presença de TFE, a Protonectina e Protonectina (1-6) tendem a apresentar estrutura secundária constituída de 36.7% e 17.6% na forma de hélicea, respectivamente. Entretanto, a mistura de ambos peptídeos na proporção de 1:1 resultou em uma estrutura supramolecular que apresentou 48.3% de hélice-a sugerindo, assim, uma possível interação entre esses dois peptídeos...

Orientador: Márcia Ferreira da Rosa Sobreira / Coorientador: Annelise Carla Camplesi dos Santos / Banca: Rosemeire de Oliveira Vasconcelos / Banca: Érika Maria Terra / Resumo: O mastocitoma caracteriza-se por transformações neoplásicas de mastócitos e consiste em uma das neoplasias malignas que acometem com maior frequência a espécie canina. Os sinais clínicos dos mastocitomas decorrem da liberação dos grânulos citoplasmáticos dos mastócitos, que quando sensibilizados, culminam na produção e liberação de vários mediadores presentes nestes grânulos, tais como histamina, heparina, proteases e outros. No mastócito neoplásico, estas substâncias podem estar aumentadas 25 a 50 vezes em relação a um mastócito normal. A heparina forma um complexo ternário com a antitrombina III e inibe a formação de trombina, que pode levar a um aumento no tempo de coagulação. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a hemostasia primária e secundária dos animais com mastocitoma e correlacionar estes resultados com o grau histopatológico do tumor, utilizando a classificação de Kiupel e colaboradores, mais utilizada atualmente. Para isso, foram avaliados 50 cães, dentre eles 20 cães hígidos (grupo controle - GC) e 30 cães com mastocitoma cutâneo (grupo doente - GD) - estes diagnosticados por meio de avaliação citológica e histopatológica do tecido acometido. Entre os cães do GD, consideramos dois subgrupos da classificação de Kiupel et al.: grupo SK1 (12 animais com mastocitoma de alto grau) e grupo SK2 (18 animais com mastocitoma de baixo grau). Para avaliação da hemostasia primária, foram feitas contagens de plaquetas em contador automático imediatamente após a obtenção da amostra de sangue. Para avaliação da hemostasia secundária, a partir do sangue venoso coletado, foram determinados os valores de fibrinogênio, tempo de protrombina (TP) e tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) em coagulômetro. Com base no grau de malignidade do tumor, comparamos os resultados dos seus respectivos painéis de coagulação e submetemos suas correspondências à análise... / Abstract: Mast cell tumor is characterized by neoplastic transformation of mast cells. This tumor is one of the malignancies that most often affect dogs. The clinical signs result from the release of granules contained in the cytoplasm of mast cells. When these granules are sensitized, it causes the production and release of several mediators from these beads (such as histamine, heparin, proteases and others). In neoplastic mast cells, these substances may be increased 25 to 50 times compared to a typical mast cell. Heparin forms a ternary complex with antithrombin III and inhibits the formation of thrombin, which may lead to an increase in clotting time. In this context, the aim of this study was to evaluate primary and secondary hemostasis of animals with mast cell tumor and correlate these findings with the tumor histological grade, using the Kiupel et al. (2011) classification for mast cell tumors. For this, were used 50 dogs, including 20 healthy animals (Control Group - GC) and 30 dogs with cutaneous mast cell tumors (Disease Group - GD) - those diagnosed by cytological and histopathological evaluation of the affected tissue. Among the GD dogs, was considered two subgroups of Kiupel classification: SK1 group, composed of 12 animals with high-grade mast cell tumor; SK2 group, consisting of 18 animals with low-grade mast cell tumor. To evaluate primary hemostasis, platelets were counted with an automatic counter immediately after collection of the blood sample. To evaluate secondary hemostasis, collected venous blood was used to determined fibrinogen values, prothrombin time (PT) and activated partial thromboplastin time (APTT) in coagulometer. Based on tumor grade, it was compared to the results of their respective clotting panels and then its correspondences were submitted to multivariate analysis. It was found that among the evaluated parameters, the APTT values were significantly higher in affected animals, particularly in high-grade ... / Mestre

Orientador: Julieta Rodini Engrácia de Moraes / Banca: Harumi de Castro Sasahara / Banca: Paula Fratini / Resumo: O cão Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) é o melhor modelo natural da distrofia muscular de Duchenne (DMD) com manifestações genotípicas e fenotípicas semelhantes à doença humana. Como nos afetados pela DMD, a proliferação progressiva de tecido conectivo no endomísio das fibras musculares ocorre em paralelo ao curso clínico da doença nos animais GRMD. Estudos indicam a relação dos mastócitos com a deposição de tecido fibroso devido a liberação de seus mediadores que ativam os fibroblastos. O objetivo desse trabalho foi o de avaliar a expressão dos mastócitos e sua possível relação com as lesões musculares e fibrose em cães GRMD de diferentes idades. Foram utilizados fragmentos de quatro grupos musculares esqueléticos (masseter, diafragma, tríceps braquial e bíceps femoral) de dez cães entre dois a oito meses de idade sendo seis afetados e quatro controles. As amostras foram processadas por técnicas usuais de histologia, coradas com hematoxilina e eosina, azul de toluidina para verificar a expressão dos mastócitos e tricrômio de Azan para a evidenciação e quantificação da fibrose. Em todos os grupos musculares dos cães GRMD o infiltrado de mastócitos apresentou aumento significativo comparado ao grupo controle. O número médio de mastócitos diminuiu com a idade dos cães GRMD. Todos os grupos musculares apresentaram aumento significativo na quantidade de tecido colagenoso em relação ao grupo controle. A deposição de tecido fibroso diminuiu de acordo com a idade dos animais. Dos resultados afere-se que o aumento da degranulação dos mastócitos ocorreu em cães GRMD mais jovens (2 meses) fato que potencializou o aumento na deposição de tecido fibroso nas fibras musculares que foi diminuindo gradativamente com o tempo e a idade dos animais. Outros estudos são necessários para esclarecer o papel dos mastócitos na patogênese da fibrose, a fim de contribuir no desenvolvimento de novas... / Abstract: Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) is the best natural model of Duchenne muscular dystrophy (DMD) with genotypic and phenotypic manifestations similar the human disease. As in to DMD patients, the progressive proliferation of connective tissue in the endomysium of the muscle fibers is parallel to the clinical course of disease in GRMD animals. Studies indicate the relationship of mast cells with the deposition of fibrous tissue due to the release of mediators that activate fibroblasts. The aim of this study was to evaluate the expression of mast cells and its possible relation with muscle injury and fibrosis in GRMD dogs at different ages. It was used fragments of four skeletal muscle groups (masseter, diaphragm, triceps brachial and biceps femoris) of ten dogs between two and eight months age, six affected and four controls. Samples were processed by usual techniques of histology, stained with hematoxylin-eosin and toluidine blue, to verify the expression of mast cells, and Azan trichrome for evaluation and quantification of fibrous. In all muscle groups of dogs GRMD the infiltration of mast cells increased significantly compared to control group. The average number of mast cells decreased with the age of GRMD dogs. All muscle groups showed a significant increase in the amount of collagenous tissue in the control group. The deposition of fibrous tissue decreased with the age of the animals. Possibly, the increase of mast cell degranulation and mediator release would occur in younger GRMD dogs (2 months), fact that potentiated the increase deposition of fibrous tissue in muscle fibers which was gradually decreasing over time and age of the animals. Other studies are needed to clarify the role of mast cells in the pathogenesis of fibrosis in order to contribute to the development of new therapeutic approaches and improve the life expectancy of humans and dogs affected by muscular dystrophy / Mestre