Orientador: Mary L. S. Queiroz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:31:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Miglinski_Debora_M.pdf: 5300105 bytes, checksum: 1b7205ddbf0c8568448b9cbfb1cce059 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Neste trabalho avaliamos o efeito imunomoduIador do extrato seco do Agaricus blazei Murill (ABM) sobre o crescimento e diferenciação dos precursores hematopoéticos de granulócrtos-macrófagos (CFU-GM) na medula óssea e no baço de camundongos BALB/c infectados com Listeria monocytogenes. Além disso a atividade estimuladora de colônias do soro, as alterações no peso do baço e a resistência dos animais frente à infecção também foram avaliados. Para a realização deste estudo, camundongos BALB/c foram tratados previamente à infecção com três diferentes doses de ABM nas concentrações de 500, 1000 e 1500mg/Kg, administradas por gavagem, por sete dias consecutivos. Posteriormente, os animais foram infectados intraperitoneaImente com uma dose subletal (1x 10 3 bactérias/animal) de Listeria monocytogenes para avaliação dos parâmetros hematopoéticos e com uma dose letal (6x 10 4 bactérias/animal) para avaliação da resistência dos animais frente à infecção, através da realização de uma curva de sobrevida. Nossos resultados demonstraram um decréscimo significativo no número de precursores hematopoéticos da medula óssea um aumento significativo na hematopoese extramedular e conseqüente esplenomegalia e um aumento na produção de fatores estimuIadores de colônias, em animais apenas infectados com Listeria monocytogenes. No entanto, quando os animais foram tratados profilaticamente com o ABM, nas doses de 1000 e 1500mg/kg, observamos uma reversão significativa da mielossupressão induzida pela infecção, resultando em níveis normais de CFU-GM. A inibição do desenvolvimento da esplenomegalia e da hematopoese extramedular, nos grupos de animais infectados e pré-tratados nas três doses estudadas também foram observados. Além disso, um aumento significativo na atividade estimuladora do soro, nos animais infectados e prétratados nas três doses estudadas, foram demonstrados em nossos experimentos, sendo que, com as doses de 1000 e 1500mg/K. um aumento adicional no período de 48h após a infecção foi observado. O tratamento com ABM aumentou a resistência dos animais frente à listeriose, sendo que, a probabilidade de sobrevida para as doses de 1000 e 1500mg/Kg foram de 50% e 80%, respectivamente. Nossos resultados sugerem que o ABM possui uma potente atividade imunomoduladora, capaz de aumentar a sobrevida dos animais infectados com uma dose letal de Lisleria monocylogenes, possivelmente devida a capacidade desse extrato de restabelecer a hematopoese medular e esplênica / Abstract: This work anaIyzed tbe immunomodulating effect of Agaricus blazei Murrill (ABM) dried extract on growth and differentiation of hematopoietic precursors of granulocyte-macrophage (CFU-GM) in the bone marrow and spIeen of BALB/c mice infected witb Lisleria monocylogenes. We aIso evaluated the colony stimulating activity of the serum, changes in spleen weigh, and the animals resistance to infection. To conduct the research, BALB/c mice were treated prior to the infection with three difeerent doses of ABM (500, 1000 and 1500mg/Kg), via gavage during seven consecutive days. After that the animals were infected intraperitoneally with a subletha1 dose (1x10 3 bacterial animaI) of Listeria monocytogenes to evaIuate tbe hematopoietic parameters. The animaIs were likely infected with a lethal dose (6x ] 04bacteria/animaI) 10 evaIuate their resistance 10 infection in a survivaI curve. The results showed a significant decrease in the hematopoietc precursors of the bone marrow, a significant increase in extramedular hematopoiesis and consequent spleenmegaly, and an increase in the production of colony stimulating factors in the non-treates infected animaIs. When the animaIs were previously treated with 1000 and 1500mg1Kg of ABM we observed a significant reversion of infection-induced mielosupression, to normal levels, spleenmegaly inhibition and extramedular hematopoiesis in the infected and pretreated groups with all the doses. A significant increase in the serum stimulating activity was also observed in the pretreated infected animais with na adicional increase in a period of 48hs after the infection with 1000 and 1500mg/Kg of the extract. The treatment with ABM increased animal resistance to listeriosis, and the probability of survival for the 1000 and 1500mg/Kg doses was 50% and 80% respectively. These results suggested that ABM is a powerful immunomodulator capable of increasing the survival of animals mfected with a lethal dose of Listeria monocytogenes, possibly due to this extract capacity of restoring marrow and splenic hematopoesis / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientadores: Francesco Langone, Staffan Cullheim / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T16:28:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_AlexandreLeiteRodriguesde_D.pdf: 10644282 bytes, checksum: 1271a03a451e8d25e794f7df95d5c1fb (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A transecção de um nervo periférico em ratos recém nascidos leva à extensa morte dos neurônios axotomizados. Neste estudo, demonstramos que a transecção do nervo ciático em ratos neonatos induz a TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labelling) marcação de motoneurônios e de neurônios sensitivos dos gânglios dorsais, indicando que mecanismos apoptóticos estão envolvidos. Tais resultados foram comprovados pelas observações à microscopia eletrônica. Interessantemente, observamos também um grande aumento da TUNEL marcação nos interneurônios localizados nas lâminas mais profundas da coluna dorsal. Esta localização sugere que para a sobrevivência dos interneurônios, tanto a integridade das aferências sensitivas como dos motoneurônios, suas prováveis células alvo, é essencial. No intuito de melhor compreender a importância relativa da perda do alvo (motoneurônios) e da aferência (neurônios sensitivos) sobre a indução da apoptose em interneurônios, foram comparados os padrões temporais e espaciais do aparecimento das células apoptóticas na medula e nos gânglios espinhais após a transecção do nervo ciático em ratos recém nascidos (P2). Os padrões temporais da TUNEL marcação dos motoneurônios e interneurônios induzidos pela lesão foram semelhantes (pico entre 8-48 horas após a lesão), enquanto que a marcação dos neurônios sensitivos ocorreu mais tardiamente (24-72 horas). Por outro lado, sabe-se que a morte dos motoneurônios e neurônios sensitivos, resultante da axotomia, pode dever-se à ausência de fatores neurotróficos devido à perda do contato com as células alvo. Assim, estudamos também, os efeitos do tratamento do coto proximal do nervo lesado com CNTF e NGF, utilizados para impedir a morte dos motoneurônios e neurônios sensitivos respectivamente. Tanto o NGF quanto o CNTF promoveram uma diminuição na TlJNEL marcação dos interneurônios. Contudo, o CNTF resgatou preferencialmente interneurônios nas lâminas mais profundas das colunas dorsais e nas ventrais, enquanto que o NGF foi mais eficaz nas lâminas superficiais. Os resultados obtidos dão suporte à hipótese de que os interneurônios medulares, no neonato, são dependentes tanto do alvo quanto da aferência para sua sobrevivência / Abstract: Transection of a peripheral nerve in neonatal rats induces an extensive death of axotomized neurons. We demonstrate here that spinal motoneurons and sensory dorsal root ganglia neurons become TUNEL-labeled (tenninal deoxynuc1eotidyl transferase dUTP nick end labelling) afier sciatic nerve transection in neonatal rats, thus indicating that apoptotic mechanisms are involved in the death processo Interestingly, there is also a profound increase of TUNEL-labeled intemeurons in the deep dorsal hom. This location suggests that an intact afferent input andJor contact with target organs are essential for intemeuronal survival. Death of motoneurons and sensory neurons could be a result of the injury per se and/or the deprivation of neurotrophic substances, secondary to the loss of contact with target cells. In order to defrne the relative importance of the loss of a potential target (motoneuron) and a potential afferent input (dorsal root ganglion cell) for the induction of apoptosis in intemeurons in this situation, we have compared the distributions and time courses for TUNEL labeling in the L5 segment ofthe spinal cord and the L5 dorsal root ganglion afier sciatic nerve transection in the neonatal (P2) rat. ln additional experiments were studied the effects on TUNEL labeling of intemeurons afier treatment of the cut sciatic nerve with either ciliary neurotrophic factor (CNTF), in order to rescue motoneurons, or nerve growth factor (NGF) to rescue dorsal root ganglion cells. The time courses of the TUNEL labeling in motoneurons and intemeurons induced by the lesion show large similarities (peak at 8-48h postoperatively), while the labeling in dorsal root ganglion cells occurs later (24-72h). Both CNTF and NGF decrease the number of TUNEL labeled intemeurons, but there is a regional difference, in that CNTF preferentially saves intemeurons in deep dorsal and ventral parts of the spinal cord, while rescuing effects of NGF are mainly seen in the superficial dorsal hom. The results are interpreted as signs of a trophic dependence on both the target and the afferent input for the survival of intemeurons neonatally / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Carmino Antonio de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-14T01:29:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Augusto_LiaGiraldodaSilva_M.pdf: 3420107 bytes, checksum: 39b9e12827703f943f7fe1fb0565142c (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: O autor fez um estudo de seguimento de 61 pacientes, no período de 1985 a 1990, e analisou a morfologia de 57 medulas ósseas, desses casos. Todos os pacientes eram portadores de neutropenia no sangue periférico, secundária a exposição ocupacional ao benzeno, oriundos do parque industrial de Cubatão, e do sexo masculino, com idade variando de 20 a 60 anos e idade media de 35 anos. O estudo das características ocupacionais desses pacientes: 80% , eram do ramo da construção civil, de empreiteiras de manutenção e montagem industrial em área de siderurgia, com tempo médio de exposição de 65 meses. O estudo da evolução do sangue através de tábua de vida, pela técnica atuarial, revelou que a probabilidade estimada, do quadro hematológico periférico se recuperar foi de 52,0% ., ao final do quinto ano de afastamento do risco (intervalo de confiança de 0,52 = 0,06). O estudo da correlação da evolução do sangue periférico com o tempo de exposição, e também com a intensidade das alterações quantitativas no tecido hematopolético, através do logrank test, mostrou não ser estatisticamente significante. A análise histológica e citológica de 57 medulas ósseas, dos pacientes estudados, mostrou alteração em 98,6%. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The author carried out o follow up of 81 neutropenic by cronic benzenic occupational exposilion. They was from the industrial park of Cubatão-SP, and the study was performed during 1985 to 1990. AlI pacients were male with age ranged from 20 to 60 years old. The study of characteristic occupational showed that 80.0% of the workers were,in the maintenance and : construction steel factory. The mean time of exposition was 65 mounths. On the follow up study by life-time method the estimated probability to normalize the peripheral blood count was 52.0% after 5 years of removal the patients from the environmental work risk (aproximate 95%, confidance limits for 5 years was 0.52. ± 0.06 ). The comparisons of the estimated probabilities of the groups with < 24 and >/24 mounths of cronic benzene exposition and with the quantitative disturbances on the bone marrow, by the logrank test, were not statistical significant. The histologic and citologic study of bone marrow showed disease on 98.6% : global hypocellular morrow was found in 89.4%; granulocytes precursors were reduced in 93.0%; erytroblasts ln 24.5%, anà megakarioblasts ln 43.8% On 60.0%, of the pacients the bone marrow showed hipocellurarity with moderate to intensive alterations. Only one case had global hiperplasia / Mestrado / Medicina Interna / Mestre em Medicina

Orientador: Isac Germano Karniol / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-14T19:15:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MacielJunior_JaymeAntunes_D.pdf: 16862814 bytes, checksum: 29ba5a08d492dd1bdc86d3a1f3bd9531 (MD5) Previous issue date: 1984 / Resumo: Através da elaboração de um protocolo funcional estudou-se o sistema nervoso autônomo em 3 doentes com síndrome de Shy-Drager. Dentre as diversas disautonomias a síndrome de Shy-Drager foi escolhida por representar o exemplo típico de afecção que acomete as estruturas autonômicas centrais. Essa doença degenerativa é constituída por sintomas e sinais disautonômicos associados a distúrbios motores (piramidal, extra-piramidal e cerebelar ). Este trabalho é constituído de duas partes. A primeira é formada pela revisão da literatura sobre a fisiologia e a patologia do sistema nervoso autônomo, a fisiologia da pressão arterial e a fisiopatologia da hipotensão ortostática. Discute-se os critérios clínicos e anatomo-patológicos da síndrome de Shy-Drager e suas fronteiras nosológicas com a síndrome de hipotensão ortostática idiopática e a síndrome de deficiência autonômica "parkinsoniana". A segunda parte representa a contribuição ao tema. Procede-se a descrição clinica de 3 doentes observados na Clinica Neurológica do Hospital Civil de Estrasburgo, Faculdade de Medicina da Universidade Louis Pasteur de Estrasburgo, França, no período de 1975 a 1978. Os doentes foram examinados através do protocolo seguinte: a- provas hemodinâmicas e farmacológicas; b- estudo eletrencefalográfico quando das variações posturais; c- provas laboratoriais (dosagem das variações posturais da atividade renina plasmática,da dopamina-'BETA¿-hidroxilase sérica e da excreção urinária da adrenalina e noradrenalina); d- estudo do metabolismo central da dopamina e da serotonina no LCR através do teste do probenecide; e- estudo dos mecanismos de controle postural da ventilação pulmonar e durante o sono, completados pelo teste do CO2 e teste de pressão de oclusão; f- estudo eletrencefalográfico da organização do sono noturno, e g- estudo eletroneuromiográfico dos esfincteres estriados anal e uretral e da velocidade de condução motora periférica. Cada prova é descrita de forma isolada. Isso tem por objetivo facilitar a compreensão e discutir as limitações de cada teste no que tange o diagn6stico topográfico da lesão do arco reflexo cardiovascular. Em função dos resultados obtidos pode-se concluir que: 1o : todos os doentes estudados apresentam um acometimento misto, simpático e paras simpático. Isto pode ser explicado pela localização central da lesão no arco reflexo cardiovascular. Esta hipótese é corroborada pela constatação de distúrbios posturais dos mecanismos de controle da respiração e a síndrome de apnéia do sono; 2o : a redução do "turn-over" central da dopamina e da serotonina está relacionada ao acometimento das formações estriato-nigricas e autonômicas responsáveis pelo quadro clinico dos doentes; 3o : a hiperreatividade às drogas vaso-ativas pode ser explicada pela deficiência do sistema nervoso central para tamponar as variações da pressão arterial induzidas na árvore circulatória; 4o : a diminuição ou ausência de sono rápido e a síndrome de apnéia observada nos doentes pode ser explicada pelas lesões degenerativas bulbo-pontinas (nucleares ou supra-nucleares) cujo substrato Bioquímico pode ser a redução do metabolismo central da dopamina e sobretudo da serotonina; 5o: a síndrome de Shy-Drager é provavelmente secundária a hipofunção dos sistemas aminérgicos: do sistema nervoso central; 6o: os distúrbios do sistema nervoso periférico fazem parte da desorganização motora da síndrome de Shy-Drager / Abstract:This study was motivated by the desire to better understand the autonomic functions in subjects clinically diagnosed as Shy-Drager syndrome. This syndrome was selected because it presents a disorder in the central autonomic structures of CNS. This degenerative disease represents a multiple disorders of CNS which include dysautonomia associated with pyramidal, extra-pyramidal and cerebellar symptoms. The objectives of this investigation were twofold: 1st: To develop a protocol to aid iri the localization of therlesion of the cardiovascular reflex arc responsible for orthostatic hypotension in neurologic diseases; 2nd: To develop a clinical protocol to evaluate the autonomic nervous system regarding the clinical diagnosis of the Shy-Drager, syndrome. This research can by divided into two parts. The first part is composed by a large review of the literature on physiology and pathology of the autonomic nervous system. Physiological aspects of blood pressure in supine and upright positions were discussed as well as the physiopathology of postural hypotension. Clinical and anatomical criteria for Shy-Drager syndrome were-described and nosological boundaries were established in relation to idiopathic orthostatic hypotension and "parkinsonian" autonomic failure. The second part is constituted by a clinical description of 3 cases of Shy-Drager syndrome observed in the Neurological Clinics, Civils Hospital, af The Louis Pasteur University of Strasbourg, France, from 1975 to 1978. The patients were investigated from the autonomic nervous System standpoint which included: a- hemodynarnical and pharmacological trials; b- EEG during tilting; c- laboratory tests ( renine and dopamine-B-hydroxilase activity and urine adrenalin and noradrenalin during postural changes ); d- central metabolism of dopamin and serotonin by probenecid test; e- pulmonary ventilation control during tilting and sleeping and CO2 and occlusion pressure test; f- EEG study of sleep organization, and g- EMG study of anal and urethral sphincters functioning and motor conduction velocity. Each of these tests was considered in separate as well as its own contribution to the topographic diagnosis of lesion in the Cardiovascular reflex arc. Taking into account the results it may be concluded that: 1st: There is a sympathetic and parasympathetic dysfunctions in alI cases. This is secondary to central dysfunction of cardiovlscular reflex arco This hypothesis was substantiated by pulmonary ventilation dysfunction during tilting and sleeping; 2nd: The decrease of central doparnin and serotonin turn-over was correlated with lesions in nigrostriatal and autonornic tracts of CNS and respansible for the clinical picture of the patients; 3rd: The vascular supersensitivity for vasoactive drugs is due to a failure of the CNS to buffer blood pressure fluctuations; 4th: The decrease or absence REM sleep in all cases was correlated with central doparnin and serotonin rnetabolisrn dysfunction detected by the probenecid testi 5th: The Shy-Drager syndrorne is probably due to hypofunction of central arninergic systerns of CNS; 6th: The abnorrnalities of peripheral motor neuron, clinical and/or EMG displayed, constituted a motor systern desorganization in the Shy-Drager syndrorne / Doutorado / Doutor em Ciências Médicas

Orientador : Helena Zerlotti Wolf Grotto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T19:05:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Noronha_JoseFernandodeAlmeida_M.pdf: 21963250 bytes, checksum: a96068d0dd466ef3dd89fe108f2b493f (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Introdução: A contagem de reticulócitos e a determinação de sua fração de imaturidade têm mostrado ser satisfatórios na avaliação da eritropoiese após o transplante de medula óssea (TMO). O propósito deste estudo foi avaliar os parâmetros reticulocitários através da contagem de reticulócitos pela citometria de fluxo, em um grupo de pacientes que foram submetidos à TMO autólogo e alogênico. Foram estudados, o modelo de resposta do reticulócito e o valor preditivo da contagem absoluta de neutrófilos (ANC), contagem de plaquetas, número de células CD34+ infundidas e a fonte de enxerto em relação à resposta do reticulócito. Material e Métodos: Foram comparadas a contagem absoluta do reticulócito (RetAbs), o índice médio de fluorescência (MFI) e a razão entre o volume corpuscular médio do reticulócitol volume corpuscular médio do eritrócito maduro (VCMrNCM) com os critérios convencionais (ANC e contagem de plaquetas) em 22 pacientes submetidos à TMO alogênico e 20 pacientes submetidos à TMO autólogo. Resultados: Um aumento abrupto da razão VCMrNCM ou uma elevação no valor do MFI foram os primeiros sinais da recuperação eritropoiética no transplante alogênico (63,8% e 22,8% dos casos, respectivamente). Em 13,6% dos casos, ambos parâmetros reticulocitários apareceram simultaneamente. Dos 20 pacientes submetidos à transplante autólogo, dezessete mostraram a recuperação da eritropoiese, representada pelos parâmetros reticulocitários, mais precoce do que quando indicada pela elevação da ANC. A recuperação de granulócitos e o enxerto de células progenitoras periféricas (CPP) foram variáveis preditivas para resposta de RetAbs no transplante alogênico. No grupo de autólogos, o alto número de células CD34+infundidas, e a recuperação de plaquetas foram variáveis preditivas da resposta de RetAbs. Conclusão: Uma elevação na população de reticulócitos imaturos é o primeiro sinal da recuperação hematopoiética pós -TMO e pode ser útil como um preditor adicional do enxerto medular / Abstract: Introduction: Reticulocyte counts and immature reticulocyte fraction have shown to be adequate in the evaluation of erythropoiesis after bone marrow transplantation (BMT). The purpose of this study was to evaluate reticulocyte parameters by means of flow cytometric reticulocyte counting in a group of patients who had undergone autologous and allogeneic BMT. Pattem of reticulocyte response and predictive value of absolute neutrophil count (ANC), platelet count, number of CD34+cell infused and graft source for reticulocyte response have been studied. Material and Methods: We compared absolute reticulocyte count (RetAbs), Mean fluorescence index (MFI) and Mean reticulocyte volume/ Mean corpuscular volume ratio (MRV/MCV) with conventional criteria (ANC and platelet count) in 22 allogeneic and 20 autologous BMT patients. Results: An abrupt increase of MRV/MCV ratio or a rise in:MFI value were the earliest sign of erythropoietic recovery in allogeneic transplantation (63.6% and 22.8% of cases, respectively). In 13.6% of cases both parameters presented simultaneously. AlI, but 3 autologous transplants showed reticulocyte parameters earlier than ANC recovery. Granulocyte recovery and peripheral blood progenitor cells (PBPC) graft were predictive variables for RetAbs response in allogenic transplantoIn autologous group high number of CD 34+ infused cells and platelet recovery were predictive variables for RetAbs response. Conclusion: A rise in the immature reticulocyte population is the earliest sign of haematopoietic recovery post BMT and may be useful as an additional predictor of engraftment / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Maria José Hitomi Nagata / Banca: Valdir Gouveia Garcia / Banca: Leandro Araújo Fernandes / Resumo: O propósito deste estudo foi avaliar, histologicamente e histometricamente, o processo de cicatrização óssea em defeitos de tamanho crítico (DTC), criados cirurgicamente em calvárias de ratos e tratados com aspirado de medula óssea (AMO), laser em baixa intensidade (LLLT) ou a associação de ambas as terapias. 40 ratos foram divididos em 4 grupos: C (controle), AMO, LLLT e AMO/LLLT. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido com coágulo sangüíneo somente. No Grupo AMO, o defeito foi preenchido com AMO. Nos grupos LLLT e AMO/LLLT, o defeito recebeu aplicação da LLLT (InGaAlP laser), foi preenchido com coágulo sanguíneo e AMO, respectivamente, e recebeu novamente a aplicação da LLLT. Todos os animais foram submetidos à eutanásia aos 30 dias pós-operatórios. Análises histomorfométrica, usando software de análise de imagem, e histológica foram realizadas. A Área de Osso Neoformado (AON) foi calculada como uma porcentagem da área total do defeito original. Os dados foram analisados estatisticamente (ANOVA, Tukey, p<0,05). O Grupo AMO/LLLT (38,92 ± 7,12%) apresentou AON significativamente maior que os grupos C (13,75 ± 4,32%), AMO (28,71 ± 10,42%) e LLLT (18,40 ± 7,41%). O Grupo AMO apresentou AON significativamente maior que o controle. Não foram observadas diferenças significativas na AON dos grupos LLLT e C. Dentro dos limites desse estudo, pode-se concluir que a associação AMO/LLLT produziu formação óssea significativamente maior em DTC cirurgicamente criados em calvárias de ratos quando comparada ao controle ou a cada tratamento isoladamente / Abstract: The purpose of this study was to analyze, histologically and histometrically, the influence of bone marrow aspirate (BMA), low-level laser therapy (LLLT) or their combination on bone healing in surgically created critical-size defects (CSD) in rat calvaria. 40 rats were divided into 4 groups: C (control), BMA, LLLT and BMA/LLLT. A 5 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the defect was filled by blood clot only. In Group BMA, the defect was filled with bone marrow aspirate. In groups LLLT and BMA/LLLT, the defect received laser irradiation (InGaAlP laser), was filled with blood clot or BMA respectively, and then irradiated again. All animals were euthanized at 30 days postoperatively. Histometric, using image analysis software, and histologic analyses were performed. Amount of newly formed bone (NFB) was calculated as a percentage of the total area of the original defect. Data were statistically analyzed (ANOVA, Tukey p<0.05). Group BMA/LLLT (38.92 ± 7.12%) had significantly greater NFB than groups C (13.75 ± 4.32%), BMA (28.71 ± 10.42%) and LLLT (18.40 ± 7.41%). Group BMA presented significantly greater NFB than control, while group LLLT did not. Within the limits of this study, it can be concluded that the combination of BMA/LLLT yielded significantly greater bone formation in surgically created CSD in rat calvaria when compared to control, or either treatment alone / Mestre

Submitted by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2015-04-24T16:24:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_SobrevivenciaDispersaoCelulas.pdf: 912810 bytes, checksum: af6e1d7ada611563e2cdf04c1999d261 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2015-04-27T14:45:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_SobrevivenciaDispersaoCelulas.pdf: 912810 bytes, checksum: af6e1d7ada611563e2cdf04c1999d261 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-27T14:45:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_SobrevivenciaDispersaoCelulas.pdf: 912810 bytes, checksum: af6e1d7ada611563e2cdf04c1999d261 (MD5) Previous issue date: 2015 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Estudos experimentais evidenciam o potencial promissor das células da fração mononuclear da medula óssea (CMN-MO) no tratamento de modelos de isquemia cerebral. Sabe-se que as CMN-MOs são sensíveis à modificações microambientais, tal qual aquelas induzidas por uma isquemia, como eventos associados à inflamação. Contudo, pouco se conhece a respeito da biodistribuição e sobrevida dessas células no tecido nervoso pós-lesão. Objetiva-se investigar se a sobrevivência e a disseminação das CMN-MOs são influenciadas pela resposta inflamatória após isquemia estriatal. Parecer CEPAE, protocolo nº 073/12. Transplante heterólogo (5x105 de CMN-MOs) no estriado de ratos Wistar, agrupados entre controles não-tratados (IST) e falso-operado (FO) e tratados (ITCM), perfundidos em 1, 3, 7 e 28 dias. CMN-MO foram impregnadas com Nanocristais Qdot para posterior identificação por microscopia de fluorescência no tecido do receptor. Coloração, por violeta de cresila, e imunoistoquímica básica (IBA1 e ED1) foram aplicadas para análise histopatológica do tecido em microscopia de luz. Testes neurocomportamentais (teste de remoção do adesivo e teste do cilindro) foram realizados para aferir a resposta dos grupos às intervenções. Os achados histopatológicos evidenciam a eficiência do modelo experimental de indução isquêmica em reproduzir a lesão no estriado dorsolateral. O infiltrado celular no grupo IST marca a resposta inflamatória, posteriormente confirmada por imunoistoquímica para ED1 e IBA1; o infiltrado celular no grupo ITCM, evidencia a permanência das CMN-MO em todas as sobrevidas estudadas. O perfil de perda por morte das CMN-MO transplantadas no sítio de lesão é semelhante entre os grupos ITCM e FO, contudo, evidencia que resposta inflamatória do receptor causa maior decaimento do montante celular no grupo ITCM. Procedimentos de infusão celular mais refinados ou automatizados podem melhorar a sensibilidade dos testes comportamentais para discriminar a evolução entre os grupos estudados. Conclui-se que a alteração do microambiente pós-isquemia cria condições que determina a dispersão e a sobrevivência das CMN-MO. Outras análises de imunoistoquímicas podem apontar resultados quanto ao perfil microglial presentes nas sobrevidas estudadas e o grau de imunomodulação pelo estudo da dinâmica das citocinas inflamatórias produzidas. / The studies show the promising potential of bone marrow mononuclear cells (BMMC) for the treatment of stroke models. It is known that the BMMC are sensitive to environmental changes, like those induced by ischemia, such as events associated with inflammation. However, little is known about the biodistribution and survival of these cells in the post-injury nerve tissue. Aims to investigate whether the survival and spread of BMMC are influenced by the inflammatory response after striatum stroke. Heterologous transplantation (5x105 BMMC) in the striatum of rats clustered among untreated controls (CNT) and sham (SHM) and treated (STBC) perfused at 1, 3, 7 and 28 days. BMMC were impregnated with Qdot nanocrystals for identification by fluorescence microscopy in the host tissue. Staining for cresyl violet, and basic immunohistochemistry (IBA1 and ED1) were applied for histopathological analysis of tissue by light microscopy. Neurobehavioral tests (adhesive removal test and cylinder test) were performed to assess the response of groups for interventions. The results show the effectiveness of the experimental model of ischemic induction to reproduce the injury in the dorsolateral striatum. The cell infiltrate in the CNT group shows the inflammatory response, later confirmed by immunohistochemistry for ED1 and IBA1; the cellular infiltrate in STBM group, shows the BMMC of stay in all studied survival. The loss profile for death of BMMC transplanted into the injury site is similar between STBM and SHM groups, however, shows that inflammatory response of the receptor causes more decay of cell amount in STBM group. More refined or automated cell infusion procedures can improve the sensitivity of behavioral tests to discriminate the evolution between groups. To summarize the change of post-ischemic microenvironment creates conditions that determine the distribution and survival of BMMC. Other immunohistochemical procedures may point to the results presented as microglial profile and the degree of the immunomodulation study of the dynamics of inflammatory cytokines produced.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-11Bitstream added on 2014-08-13T18:00:42Z : No. of bitstreams: 1 000755550_20151031.pdf: 220836 bytes, checksum: 87b354d7a24b15fa538662e0ef64bad7 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-11-03T14:39:17Z: 000755550_20151031.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-11-03T14:40:19Z : No. of bitstreams: 1 000755550.pdf: 553044 bytes, checksum: 424382ed9bb35c0860f257d171e5ed77 (MD5) / O trabalho teve por objetivo avaliar clínica e laboratorialmente a viabilidade e a segurança do transplante intratecal de células-tronco mesenquimais autólogas e alogênicas provenientes da medula óssea (CTM-MO) de cães. Foram utilizados 15 cães, sem raça definida, adultos, de ambos os sexos, clinicamente saudáveis, excetuando dois que apresentavam trauma medular crônico. Foram divididos em três grupos, contendo cinco animais cada. As CTM-MO foram obtidas pela punção da medula óssea, isoladas e cultivadas. O grupo A foi transplantado com CTM-MO autólogas por via intratecal através da cisterna magna, enquanto que o grupo B recebeu as CTM-MO alogênicas e o grupo C (controle) foi aplicado solução tampão fosfato-salina (PBS). O líquido cefalorraquidiano (LCR) foi obtido imediatamente antes do transplante das CTM-MO (momento 1) e no quinto dia após (momento 2), para avaliação físico-química, citológica e da concentração de metaloproteinases (MMP-2 e MMP-9). Todos os animais foram acompanhados por exame físico neurológico pré e pós-transplante. Pelas avaliações clínicas e laboratoriais, não se observaram alterações significativas após o transplante das CTM-MO autólogas e alogênicas por via intratecal, demonstrando ser uma via segura e viável para a utilização de terapia celular em cães / The study aimed to evaluate clinical and laboratory viability and safety of intrathecal transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSC) autologous and allogeneic of dogs. A total of 15 dogs, mixed breed, adults of both sexes, clinically healthy, except two who had chronic spinal trauma. They were divided into three groups with five animals each. BM-MSC were obtained by puncture of the bone marrow, isolated and cultured. Group A was transplanted with autologous BM-MSC intrathecally via the cisterna magna, while group B received allogenic BM-MSC and group C (control) was administered phosphate buffered saline (PBS). Cerebrospinal fluid (CSF) was obtained immediately before transplantation of BM-MSC (moment 1) and the fifth day after (moment 2) for physico-chemical, cytological and the concentration of matrix metalloproteinases (MMP-2 and MMP-9 .) All Animals were monitored by neurological examination before and after transplantation. By clinical and laboratory evaluations, no significant changes were observed after transplantation of BM-MSC autologous and allogeneic intrathecal, proving to be a safe and viable for the use of cell therapy in dogs

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2010 / Bibliografia: f. 126-134 / O treino locomotor com suporte de peso (TLSP) é um método de reabilitação aplicado na lesão medular para estimular a recuperação da capacidade muscular, evitar a atrofia e restabelecer a capacidade de sustentar um percentual do peso corporal. O treino con / The body weight support training (BWST) is a method for rehabilitation of spinal cord injury which aims at stimulating muscle capacity recovery and preventing atrophy. Moreover, it might restore the capacity of supporting body weight partially. The method

Orientadora : Profª Drª Valéria Maria Munhoz Sperandio Roxo / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Genética. Defesa: Curitiba, 18/03/2011 / Inclui bibliografia / Resumo: O HLA-E é um gene do complexo principal de histocompatibilidade (MHC) de classe I não clássico, o qual apresenta limitado polimorfismo e baixos níveis de expressão tecidual. Atualmente estão descritos na literatura nove alelos, sendo que somente três produtos protéicos com diferentes sequências de aminoácidos são codificados. Suas variantes polimórficas estão frequentemente associadas a vários eventos, como por exemplo, defesa do organismo contra infecções virais e bacterianas, abortamento recorrente, transplantes de células tronco-hematopoiéticas e órgãos sólidos. As moléculas de HLA-E podem interagir tanto com os receptores da imunidade inata quanto adaptativa, promovendo assim a inibição das células NK através de seus receptores CD94/NKG2A ou a ativação das células TCD8+. No presente estudo foram investigados pela técnica de sequenciamento de DNA os polimorfismos do gene HLA-E, bem como suas frequências alélicas, genotípicas, haplotípicas e desequilíbrio de ligação, em uma amostra composta de 152 (cento e cinquenta e dois) indivíduos afroparanaenses. Observou-se que o alelo com maior frequência na amostra analisada foi o E*01:01 (59.21%). Por sua vez o alelo E*01:04 apresentou frequência igual a zero. Sendo assim, não foi possível confirmar sua existência, corroborando a hipótese que este alelo possa ser um artefato de 34 sequenciamento e sua presença na lista de alelos conhecidos terá que ser questionado. As frequências genotípicas e alélicas estão em equilíbrio de Hardy-Weinberg e foram achados cinco haplótipos mais frequentes na população. Foram realizadas comparações da amostra analisada com diferentes populações mundiais. / Abstract: HLA-E is a gene of major histocompatibility complex (MHC) class I nonclassical, which has limited polymorphism and low levels of tissue expression. Currently are described in the literature nine alleles, only three products with different protein sequences of amino acids are codified. Its variants polymorphic are frequently associated with several disorders, such as for example, defense against viral and bacterial infections, miscarrying applicant, stem cell transplantation-hematopoietic and solid organ transplants. The molecules of HLA-E can interact with both receptors innate immunity as adaptive, thus promoting the inhibition of NK cells through its receptors CD94/NKG2A or the activation of cells TCD8+. In this study was investigated by the technique of DNA sequencing, the polymorphism of HLA-E gene, as well as their allelic frequencies, genotypic, haplotypes and imbalance of connection, a composite sample of individuals negroids paranaenses. Observed the allele with greater frequency in the sample analyzed E*01:01 (59.21 %). In turn the allele E*01:04 presented frequency equal to zero. Thus, it was not possible to confirm its existence, suggesting that this allele may be an artifact of sequencing and its predominance in the list of alleles known will have to be questioned. The genotypic frequencies are in Hardy-Weinberg and five haplostypes were found more likely in the population. Checke will the importance of this study from the data generated, which will give a better basis for the elucidation of the effect ov the polimorphism ov Hla-E in clinical practice.