Orientador: Jose Alfredo Usberti Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T00:41:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Casale_ChristianeMariaOmetto_M.pdf: 5729096 bytes, checksum: 9e6ad1ed69ca8c0db55069663857de24 (MD5) Previous issue date: 1996 / Mestrado / Genetica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientação: Aureo Tatsumi Yamada / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T01:18:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fonseca_PriscilaMeirelles_M.pdf: 16438409 bytes, checksum: 1276810b9fc2617332f439ef171bc3ce (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: As células natural killer uterinas (NKu) estão presentes no útero de roedores durante a gestação, período em que surgem e se diferenciam, desaparecendo por completo ao final deste. Os fatores envolvidos nos mecanismos de diferenciação e ativação destas células, bem como as funções por estas desempenhadas são pouco conhecidas. A dificuldade na compreensão plena das funções das NK do ambiente uterino é atribuída à complexidade e dinamismo do ambiente uterino durante a gestação. Os estudos realizados in vitro são igualmente inconclusivos devido à falta do estabelecimento de uma condição padrão nos ensaios realizados. O presente trabalho teve o intuito de padronizar uma condição de obtenção e manutenção de células NKu viáveis para ensaios in vitro, a partir do cultivo primário da glândula metrial. Foram utilizados fragmentos (explantes) da glândula metrial obtidos de camundongos prenhes no 8° dia de gestação (ddg). Estes explantes foram cultivados por 24 e 48 horas, em meios de cultivo MEM e RPMI, com ou sem a adição de MCE (meio condicionado esplênico). Os explantes em O hora (controle) e após 24 ou 48 horas de cultivo, assim como as células derivadas destes explantes (aderidas e em suspensão) no cultivo, foram processados para as análises histoquímicas de PAS e lectina DBA (Dolichos biflorus aglutinin) e para análises ultra-estruturais em MET. Os resultados demonstraram que tanto as formas aderidas quanto em suspensão apresentaram positividade à reação histoquímica de PAS e lectina DBA, sendo identificadas como sendo células NKu. O explante residual mostrou sinais de degeneração acentuada após 24 horas, independentemente das condições de cultivo empregadas. Pela MET, o maior índice de células NKu com boa preservação ultra-estrutural foi observada nas células NKu aderidas obtidas após 24 horas de cultivo em meio RPMI padrão, sem suplementação do meio condicionado esplênico (MCE). Estas condições de cultivo foram estabeleci das como padrão para a obtenção de células NKu morfologicamente bem preservadas, sendo utilizadas nos ensaios ín vítro, para avaliar a viabilidade destas células. Sob o efeito da lectina DBA, as células NKu demonstraram variações nos padrões morfológicos e de marcação pela lectina DBA, dependentes da concentração e tempo de ação, constatadas pelas microscopias de tluorescência e eletrônica de varredura (M EV). Pelos resultados obtidos, estabeleceram-se as condições de cultivo para obtenção de células NKu preservadas a partir do cultivo de explantes da glândula metrial, sendo estas células passíveis de serem utilizadas em ensaios in vítro. Pelo padrão de resposta das células NKu em conseqüência da ação da lectina DBA utilizada para avaliar a viabilidade destas células ín vítro, sugere-se que o substrato presente na superfície das células NKu poderia ser um potencial receptor de membrana envolvido no mecanismo de resposta celular / Abstract: During the pregnancy, uterine natural killer (uNK) cells appear in the rodent uterus, differentiate and disappear at the end of this period. H oweve r, which factors are involved in the differentiation[activation mechanisms of uNK cells, as well as in their functions, remain to be solved. The advancing on knowledge about these cells has been due to the complexity and dynamism of the uterine environment during pregnancy. Even the in vitro studies are inconclusive since no standard condition has been established. The present work proposed to establish a standard condition of culture to obtain and maintain uNK cells and further evaluate their viability for in vitro assays. Metrial gland fragments (explants) were obtained from the uterus of mice on 8th days of pregnancy and used as explants of culture The explants were cultured during 24 and 48 hours, in MEM and RPMI media, added or not with spleen-conditioned medi um (SCM). The O hour explants and after 24 or 48 hours of incubation, as well as explants derived cells (adherents and notadherents), were processed for PAS and DBA (Dolichos biflorus agglutinin) histochemistry analyses and for ultrastructural analyses in TEM. The results showed positive reaction to PAS and DBA histochemistries both for adherent and not-adherent cell forms in the culture. The residual explant showed degenerative signals after 24 hours, in despite of the culture conditions. The highest index of well-preserved uNK cells evaluated at ultrastructural levei was found to adherent uNK form, after 24 hours in standard RPMI, without the supplementation with SCM. This procedure was established as standard culture conditions to obtain morphologically well preserved uNK cell that was used to in vitro assays for evaluation of cellular viability. Under the effect of DBA lectin, uNK cells showed changes in morphology and labelling patterns, upon dependence of concentration and time lapsed effect, as noticed by fluorescence and scanning electron microscopes (SEM). Altogether, our findings allowed to establish the conditions to obtain wel / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Selma Candelaria Genari / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-27T13:27:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moreira_PatriciadaLuz_M.pdf: 3271080 bytes, checksum: d643afabc75067c1fb09b793ca29e709 (MD5) Previous issue date: 2001 / Mestrado

Orientador: Eliana Aparecida de Rezende Duek / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecanica / Made available in DSpace on 2018-07-31T15:10:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barbantini_SamuelHilsdorf_M.pdf: 6943017 bytes, checksum: 2a40914a0c808cd4402a491e9b061ac5 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A utilização de polímeros bioreabsorvíveis como suporte para cultura de células tem se destacado como alternativa para tratamento de lesões e perda de tecidos. O objetivo deste trabalho foi obter, caracterizar e avaliar a degradação in vitro de estruturas densas e porosas de poli(L-ácido lático) (PLLA) e poli(D,L-ácido lático-co-ácido glicólico) (PLGA)(50:50), preparadas pelo método da evaporação do solvente. Posteriormente os materiais foram utilizados como suporte para cultura de osteoblastos. Pelos resultados obtidos, as amostras de PLGA apresentaram degradação mais acentuada em relação às de PLLA. A comparação entre as estruturas densas e porosas confIrmam o efeito autocatalítico dos poli(a-hidróxi ácidos), no qual a degradação é mais acentuada nas estruturas densas devido à concentração dos produtos ácidos no interior do material. A morfologia das amostras de PLLA mostraram-se sem alterações em função do tempo de 8 semanas de degradação, sugerindo que podem ser utilizadas como suporte estrutural durante o período estudado. As amostras de PLGA alteraram signifIcativamente sua morfologia interna e de superfície, sendo as estruturas densas e porosas, morfologicamente semelhantes após 8 semanas de degradação in vitro. Os dados da cultura de células osteoblásticas mostrou baixa adesão celular para as amostras de PLLA e alta para as amostras de PLGA. O estudo da morfologia celular sobre a superfície dos materiais mostrou densidade e morfologia superior em membranas densas de PLLA. A seleção dos materiais para a Engenharia de Tecidos é dependente da aplicação, assim, como as estruturas de PLGA degradam rapidamente e permitem a adesão celular, podem ser indicadas para aplicações onde as lesões de tecido ósseo são pequenas, enquanto as estruturas de PLLA poderiam ser indicadas nos casos em que a lesão exigisse um material que degrade em um tempo longo, e servindo como suporte físico para as células e mecânico para o tecido / Abstract: The use of bioresorbable polymers as a support for the culture of cells in polymers has received special attention as an alternative for the treatment of lesions and the loss of tissue. The aim of this work was to obtain, to characterize and to evaluate the degradation in vitro of dense and porous structures of lactic poli(L-acid) (PLLA) and poli(D,L-acid lactic-co-acid glicólico) (PLGA)(50:50), prepared by casting process, for the later use as a support for the osteoblasts culture. The results showed that samples of PLGA presented a more accentuated degradation in relation to the one of PLLA. Comparing dense and porous structures, it was verified the auto catalytic effects of poly(a-hydroxy acids), in which the degradation is more accentuated in the dense structures due to the concentration of the acid products inside the material. The morphology of the samples of PLLA did not show any changes in function of the degradation time of 8 weeks, suggesting that the structures can be used as structural support during the studied period. On the other hand, samples of PLGA changed significantly its internal and surface morphology, being morphologically similar afier 8 weeks of in vitro degradation. Data of osteoblasts culture showed low cellular adhesion for the samples of PLLA and high for the samples of PLGA. The study of the morphology on the surface of the materiaIs showed high density and morphology in PLLA dense membranes. The selection of the materiaIs for the Tissue Engineering is dependent of the application. Due to a faster degradation of the PLGA structures as compared to PLLA, allowing the cellular adhesion, it can be indicated for applications where the lesions of bone tissue is small. While the structures of PLLA could be suitable in the cases where the lesion demanded a material to degrade in a long time serving as physical support for the cells and mechanical support for the tissue / Mestrado / Materiais e Processos de Fabricação / Mestre em Engenharia Mecânica

Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-23T00:05:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Basso_FernandaGoncalves_D.pdf: 8499661 bytes, checksum: 9dfc3430a1139624dd55e0ba12f9fe40 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Estudos recentes têm demonstrado que a etiopatogenia da osteonecrose induzida por bisfosfonatos parece estar associada, pelo menos em parte, à citotoxicidade destes medicamentos às células ósseas e dos tecidos adjacentes. O tratamento da osteonecrose com antibióticos sistêmicos e tópicos, bem como com o tratamento cirúrgico, têm sido os mais indicados, sendo que alguns trabalhos clínicos apresentaram a laserterapia de baixa intensidade (LBI) como tratamento coadjuvante para esta alteração. Porém, os efeitos da LBI sobre as células envolvidas na etiopatogenia da osteonecrose ainda não foram demonstrados. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito in vitro de um bisfosfonato nitrogenado de alta potência - Ácido Zoledrônico (AZ) - sobre células dos tecidos ósseo, conjuntivo e epitelial, e avaliar o efeito da LBI sobre estas células pré-expostas ao AZ. Foram utilizadas três linhagens celulares humanas: células epiteliais (HaCaT), fibroblastos de gengiva (HGF) e osteoblastos (SaOs-2). As células foram cultivadas em meio de cultura (DMEM) contendo 10% de soro fetal bovino (SFB), por 48 horas. A seguir, este DMEM foi substituído por meio sem SFB por 24 horas, seguido da aplicação de AZ, na concentração de 5 ?M, por 48 horas. Após este período, o DMEM contendo AZ foi aspirado e um novo meio de cultura completo (10% SFB) foi adicionado. As células foram então submetidas à irradiação com LBI, utilizando o protótipo LaserTABLE (InGaAsP - 780 nm +-3 nm, 25 mW), nas doses de 0,5; 1,5; 3; 5 e 7 J/cm2. Foram realizadas 3 irradiações a cada 24 horas. Decorrido 24 horas da última irradiação, procedeu-se a avaliação da viabilidade celular, produção de proteína total, atividade de fosfatase alcalina, formação de nódulos de mineralização, expressão gênica de colágeno tipo I (Col-I), fator de crescimento fibroblástico tipo 2 (FGF2), fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e fosfatase alcalina (ALP), além da análise da morfologia celular em MEV. Os dados foram submetidos à avaliação de normalidade, e analisados estatisticamente, utilizando os testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney, considerando o nível de significância de 5%. O AZ causou redução significativa da viabilidade celular, produção de proteína total e expressão de Col-I e VEGF para todas as linhagens celulares avaliadas (p<0,05), assim como alterações morfológicas significativas. A expressão e atividade de ALP e a formação de nódulos de mineralização pelos osteoblastos também foi negativamente afetada (p<0,05). A LBI produziu efeitos diversos, de acordo com cada linhagem celular. Considerando as linhagens celulares isoladamente, as melhores doses foram de 5 e 7 J/cm2; 3 J/cm2, e 0,5 J/cm2, para as células epiteliais, fibroblastos e osteoblastos, respectivamente. Associada ao AZ, para as células epiteliais, a dose de 5 J/cm2 promoveu os melhores efeitos, enquanto para os fibroblastos de gengiva e osteoblastos, as melhores doses foram de 3 J/cm2 e 0,5 J/cm2, respectivamente. Estes resultados demonstram que a LBI pode promover estimulação das células da mucosa oral e tecido ósseo tratadas com AZ, assim como das células presentes em áreas adjacentes, o que poderia promover um aumento da capacidade de reparo destes tecidos / Abstract: Recent studies have demonstrated that the etiopathogenesis of bisphosphonates-induced osteonecrosis may be related, at least in part, to the cytotoxicity of these drugs on bone and oral mucosa cells. Systemic and topic antibiotic administration as well as surgical procedures have been used to treat osteonecrosis. Additionally, many clinical studies have proposed low-level laser therapy (LLLT) as an adjuvante treatment for this pathological condition. However, the effects of LLLT on bisphosphonate-treated cells have not been elucidated. Therefore, this study aimed to evaluate the effect of a potent nitrogen-containing bisphosphonate - Zoledronic Acid (ZA) - on cultured bone, fibroblast and epithelial cells, as well as to assess the effects of LLLT applied on these cells previously exposed to ZA. Three human cell lines were used: epitelial cells (HaCaT), gingival fibroblastos (HGF) and osteoblasts (SaOs-2). Cells were seeded in culture medium (DMEM) containing 10% of fetal bovine sérum (FBS) for 48 hours. After that, the culture medium was replaced by FBS-free DMEM, followed by addition of ZA at 5 ?M, for additional 48 hours. After this period, a new DMEM was added (10% FBS). The cells were subjected to LLLT using a laser diode prototype LaserTABLE (InGaAsP - 780 nm +-3 nm, 25 mW), at 0.5; 1.5; 3; 5 and 7 J/cm2. Cells were irradiated for 3 times, every 24 hours. Twentyfour hours after the last irradiation, cell viability, total protein production, alcaline phophatase activity, mineral nodule formation, gene expression of collagen type I (Col-I), fibroblastic growth factor type 2 (FGF2), vascular endotelial growth factor (VEGF) and alcaline phosphatase (ALP), and also cell morphology (SEM) were evaluated. Data were subjected to normality evaluation and statisticaly analyzed using Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests at 5% of significance level. ZA caused a significant decrease on cell viability, total protein production, gene expression of Col-I and VEGF for all cell lines (p<0.05), as well as intense cell morphological changes. Gene expression and activity and mineral nodule formation by osteoblasts were also negatively affected by ZA (p<0.05). LLLT promoted diverse effects, according to cell type. Considering cell lines in an isolated way, 5 and 7 J/cm2; 3 J/cm2; and 0.5 J/cm2 promoted the best results for epitelial cells, gingival fibroblastos and osteoblasts, respectively. Regarding the LLLT applied to epitelial cells pre-treated with ZA, 5 J/cm2 promoted the most significant effects. For gingival fibroblasts and osteoblasts, the most relevant results were obtained at 3 J/cm2 and 0.5 J/cm2, respectively. These data show that LLLT can promote biostimulation on bone ZA-treated cells as well as on fibroblasts and epithelial adjacent cells, what could improve local tissue repair / Doutorado / Patologia / Doutora em Estomatopatologia

Orientador: Celso Paulino da Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-24T18:33:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sell_AnaMaria_D.pdf: 4573369 bytes, checksum: eff56f0e1c1edf4f93c78fc69d3c4acc (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: A reparação é caracterizada por diversos eventos celulares e humorais que ocorrem de forma integrada. As lectinas são glicoproteínas com diversas atividades biológicas, tais como a ativação de células inflamatórias e a secreção de citocinas ''I' que ativam fibroblastos, as quais podem influenciar o reparo. Este trabalho teve como objetivo avaliar a influência das lectinas PHA, WGA e jacalina na reparação tecidual. As respostas inflamatórias in vivo e a influência das lectinas sobre a proliferação de fibroblastos in vitro, também foram avaliadas. Para avaliar a reparação, 300 J.1g1mL de cada lectina foram aplicados sobre as feridas provocadas no dorso de ratos Wistar, com punch de biópsia de 8 milímetros. A retração das feridas foi medida diariamente, após a aplicação. Nos dias 3, 7, 11 e 15 foram realizadas as análises histológicas, em cortes corados com hematoxilina eosina e impregnados pela prata. Os efeitos inflamatórios foram avaliados após injeção intradérmica das lectinas. A proliferação de fibroblastos, na presença das lectinas, foi avaliada por técnica colorimétrica. PHA acelerou a reparação. Aumentou o depósito e a maturação das fibras de colágeno e antecipou a reepitelização. As análises histológicas revelaram reação inflamatória, com predominância de células mononucleares. Quando adicionado ao meio de cultura, PHA inibiu a proliferação dos fibroblastos nas concentrações acima de 20 J.1g1mL. WGA retardou a reparação, o que foi evidenciado pelo atraso no desenvolvimento do tecido de granulação e na formação do epitélio. Induziu fraca reação inflamatória no local de aplicação e, acima de 20 J.1g1mL, inibiu a proliferação dos fibroblastos. A jacalina não influenciou o reparo tecidual ou a proliferação dos fibroblastos. Entretanto, induziu reação inflamatória local com predominância de células mononucleares. Possivelmente, a agregação de células inflamatórias pela ação de PHA foi benéfica. Linfócitos e macrófagos ativados secretam citocinas e fatores de crescimento importantes na reparação. Ao interagir com os receptores para a fibronectina e outras proteínas, WGA impediria a interação das células com a matriz, retardando a reparação. Apesar da jacalina exercer ação mitogênica sobre os linfócitos T, estimular a secreção de INFye produzir reação inflamatória local, esta lectina não influenciou a reparação / Abstract: Wound healing is a complex and dynamic process, characterized by the integrated actions of different cells. Lectins are glycoproteins which can present several biological activities. Many of lectin activities may contribute to repair including increased production of cytokines, and activation of inflammatory cells and fibroblasts. The purpose of this work was to evaluate in vivo effects of PHA (Phaseolus vulgaris phytohemaglutinin), WGA (Triticum vulgare lectin) and jacalin (Artocarpus integrifolia lectin) on wound healing in vivo. Male rats were anesthetized and excisions of 8 mm in diameter were performed in their dorsal skin. The lectins (300uglmL) were then placed Qn the wound. Changes in the surface area were recorded everyday as compared to the initial wound size. The rats were then killed at the 3rd, 7th, 11th, or 15th day. The specimens were harvested for histological examination, and stained with hematoxylin-eosin or silver impregnation. The inflammatory reaction was histologically evaluated around the area of lectin injection. The direct fibroblast proliferation induced by theses lectins were analyzed. PHA accelerated tis sue repair and enhanced the rate of wound contraction when applied to wound sites. Furthermore, PHA increased the reepithelization, collagen deposition and also promoted inflammatory reaction. PHA decreased fibroblast proliferation in vitro. WGA delayed wound repair when applied locally on the wound. WGA promoted weak inflammatory reaction and reduced the granulation tissue maturation. Significant decreased fibroblast proliferation were observed. Jacalin did not have a significant effect on repair and fibroblast proliferation. Jacalin promoted inflammatory Feaction when applied locally. PHA may induce wound healing due to the activation of inflammatory cells. Activated leukocytes release growth factors, such as ILs, INFy and F AFs, which have an important role in the repair processo WGA interact with different glycoproteins, such as plasma fibronectin receptor, and modify the cell and extracellular matrix interaction. Although jacalrn induced the proliferation of human lymphocytes and production of lymphokines, itt did not influence the cicatrization processo / Doutorado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Doutor em Ciências

Orientador: Daria Repka / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T20:54:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gavino_VandaAparecida_M.pdf: 1213422 bytes, checksum: 63e55917673ac05dcca108dd6f25622c (MD5) Previous issue date: 1985 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Cecilia Amelia de Carvalho Zavaglia / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia mecanica / Made available in DSpace on 2018-08-04T05:13:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_ClaudioRobertoCutrim_M.pdf: 4282761 bytes, checksum: ab691d570344037977f1501d694b7a37 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Litografia macia tem sido usado recentemente para criar micro e nano estruturas bi e tridimensionais para cultura de células e engenharia de tecidos usando PDMS (poli dimetil-siloxano). PDMS é um elastômero biocompatíveí, opticamente transparente, não tóxica, e barato que pode ser moldado com alta fidelidade. Fabricou-se um arranjo de estruturas quadradas com espaçamento regular e secção transversal variando 100µmx100 µm, 150µmx 150µm, 200µmx200µm, 50µmx250µm com 50 µm de altura e uma linha separando cada uma dessas estruturas de 30µm. A proposta deste arranjo foi implementar a técnica de litografia macia para construção de dispositivos para aplicação em engenharia de tecidos, tais como: estudar o comportamento celular, adesão e espalhamento celular. Fabricaram-se também membranas porosas com diâmetro de 100 µm com altura de 35µm e espaçamento entre os poros de 35um e alguns canais microfluídicos. Estes arcabouços tridimensionais fornecerão o suporte físico para a fixação celular e reconstrução tecidual / Abstract: Soft lithography and microtransfer techniques have been used to create two and three dimensional micro and nanostructures for cells culture and tissue engineering, using PDMS (polydimethylsiloxane). PDMS is a biocompatible elastomer, optically transparent, non-toxic and inexpensive that can be molded with high fidelity. We fabricated three dimensional PDMS structures with regular spaced square arrays with l00µm, 150µm, 200µm and 250µm a side and 30µm line width and 50µ hight. The purpose of these structures is implematation of lithography soft for biomedical research such: study the behavior, adhesion and spreading of the cells.We also fabricated PDMS porous membrane with diameter of 100µm, 30µm height, spaced by 35µm and some microfluidic channels. These three dimensional scaffolds will provide the physical support to cells attachment and tissue reconstruction / Mestrado / Materiais e Processos de Fabricação / Mestre em Engenharia Mecânica

Orientador: Maro Ran-Ir Sondahl / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T09:23:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martins_IoneSalgado_M.pdf: 19420709 bytes, checksum: a5495190bd87c539fc1cbc22b4ec608b (MD5) Previous issue date: 1982 / Resumo: Tecidos de 36 cultivares de Phaseolus vulgatis L. foram cultivados in vitro, visando desenvolvimento metodológico para o controle da diferenciação, a fim de permitir a aplicação das técnicas de cultura de célula de tecidos no melhoramento destas espécies. A cultua in vitro de tecidos de Phaseolus vulgaris cv. Moruna foi estabelecida na presença dos sais inorgânicos cv. MS cuplementados com KIN e 2,4-D (1 ¿ 50 'mu¿M) A especificidade de resposta à indução de calos e raízes variou conforme a origem de explante (hipocólito, cotilédone embrião, folha primária ou trifoliolada). Nesta interação, a difernciação de raízes foi inibida em concentrações superiores a 5 'mu¿M de 2,4 ¿ D. Explantes foliares forma os mais favoráveis à indução de calos. Folhas primárias de 'Moruna¿ serviram como fonte de explante par testar diferentes interações de citocinina (KIN, 6 ¿ BA e 2ip = 0 ¿ 75 'mu¿M) e auxina (2,4 ¿D = 0 ¿ 50¿mu¿M; NAA = 0 ¿ 75¿mu¿M; IAA = 0 ¿ 100¿mu¿M)). A interação KIN/2,4 ¿D foi a mais efetiva para a proliferação de calos. Nesta interação não ocorreu diferenciação de raízes e obteve-se calos de cor creme e friáveis. O crescimento comparativo de calos de quatro cultivares de P. vulgaris permitiu uma caracterização genotípica . Calos de folhas trifolioladas, na interação de KIN/2,4 ¿ D, apresentaram melhor especificidade de crescimento em comparação com a utilização de folhas primárias na interação 6-BA/2,4-D ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Tissues of 36 cultivars of Phaseolus vulgaris L. wee established in vitro aiming toward the development of a protocol for plant differentiation from bean tissues in order to apply the in vitro techniques for the improvement of this species. Callus cultures of Phaseolus vulgaris cv. Moruna were established in the presence of MS medium supplemented with KIN and 2,4-D (1-50 uM). Callus prolifaration differed according with the source of explant (hypocotil, comtyledone, embryo, primary leaf or trifoliolate leaf). Root differentiatiosn was inhibited at levels of 2,4 ¿ D 5¿mu¿M or higher, in the presence of KIN. Leaf cultures were more favorable to callus induction that other sources of explants. Primary leaves of ¿Moruna¿ were inoculated to test different interaction of cytokinin (KIN, 6 ¿ BA and 2ip = 0 ¿ 75¿mu¿M) versus auxin (2,4 ¿ D = 0 ¿ 50¿mu¿M; NAA = 0 ¿ 75¿mu¿M; IAA = 0 ¿ 100 'mu¿M). The interaction of KIN/2,4 ¿ D was the most effective for callus proliferation. In the presence of these growt regulators creamish friable callus developed with the absence of roots. A genotypic characterization among four ¿ cultivars of P. vulgaris were obtained based on callus induction from trifoliolate in the pesence of KIN/2,4 ¿ D. These conditions were superior to discriminate in contrast to callus induction from primary leaves in the presence of 6 ¿ BA /2,4 ¿ D ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Jose Alfredo Usberti Filho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T11:30:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Segeren_MoniqueInes_D.pdf: 6984963 bytes, checksum: 7fb5387d1090cd568087489828686a6e (MD5) Previous issue date: 1993 / Doutorado / Genetica Vegetal / Doutor em Biologia Vegetal