Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-05-12T13:54:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) versão digital tese jose 2015.pdf: 8580297 bytes, checksum: 1e0e729cc7e941d9baed6b48fa7e55b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-12T13:54:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) versão digital tese jose 2015.pdf: 8580297 bytes, checksum: 1e0e729cc7e941d9baed6b48fa7e55b7 (MD5) Previous issue date: 2015-11-12 / CAPEs / CNPq / FACEPE / Investigamos se alterações simpático-respiratórias e de quimiossensibilidade poderiam estar envolvidas no desenvolvimento de hipertensão arterial (HA) em ratos expostos à restrição proteica durante a gestação e lactação. Pesquisamos também o perfil de expressão de genes no músculo e fígado envolvidos com metabolismo de glicose e ácidos graxos. Ratas Wistar foram alimentadas com dieta normoproteica (grupo controle) ou com dieta hipoproteica (grupo experimental) durante a gestação e lactação. Após o desmame, a prole de ratos machos (grupo NP provenientes de mães controle e grupo HP provenientes de mães experimentais) foram alimentados com dieta padrão e os estudos funcionais realizados ao 30º e 90º dia de vida. A pressão arterial (PA) foi aferida de forma direta pelo implante de cânula na artéria femoral e a ventilação foi mensurada por pletismografia. O registro da atividade do nervo simpático torácico e frênico foi realizado na preparação coração tronco cerebral isolados. Quimiorreceptores periféricos (QRP) foram ativados por KCN (0.04 μg/Kg, 100uL/rato). QRP foram removidos para investigar o seu papel na gênese da hipertensão arterial. Músculo esquelético, fígado e tronco encefálico foram coletados. Ensaios de expressão gênica foram realizados por PCR-RT e proteica por Western Blotting. No tronco encefálico os níveis de peroxidação lipídica (avaliado pelos níveis de malondialdeído-MDA) e atividade das enzimas antioxidantes SOD e catalase foram avaliados. Os resultados mostraram que aos 30 dias de vida, ratos HP apresentaram PA semelhante ao grupo NP. Contudo, o grupo HP exibiu, nesta idade, aumento na atividade simpático-respiratória associada com maior sensibilidade de quimiorreceptores periféricos. Aos 90 dias, ratos HP apresentaram HA, associado, em parte, com um aumento de peroxidação lipídica e redução na atividade de SOD e catalase na área ventral do tronco encefálico. A remoção dos QRP atenuou a PA e a atividade simpática em ratos HP. Aos 30 dias de vida, observamos uma redução na expressão gênica da PDK4, βHAD no músculo sóleo e de HK2, PFK, CS e PGC1a no músculo EDL de ratos HP. A expressão gênica de G6Pase, βHAD e CS foi aumentada no fígado de ratos HP. Verificamos também, um aumento na expressão proteica de HK2 e uma redução na expressão proteica de PDK4 e βHAD no músculo sóleo de ratos HP. Analisando o músculo EDL, o grupo HP exibiu uma redução na expressão proteica de HK2 e PFK, mas sem alteração na expressão de βHAD e CS. Aos 90 dias de vida, ratos HP exibiram redução na expressão gênica de PDK4 no músculo sóleo e EDL. Em nível hepático, o grupo HP apresentou maior expressão gênica de FAS e baixa expressão gênica de PGC1a associado com redução na expressão proteica de βHAD. Os resultados indicam a) hiperatividade simpática e respiratória associada com maior sensibilidade de quimiorreceptores periféricos no início da vida; b) remoção de QRP atenua HA em ratos HP; c) HA na vida adulta de ratos HP está associada a um desequilíbrio oxidativo; d) a expressão de genes metabólicos envolvidos no metabolismo da glicose e dos ácidos graxos está alterada no fígado e músculo de ratos HP. / In the present study, we investigated whether the sympatho-respiratory and chemosensory alterations can be involved in the development of arterial hypertension in protein-restricted offspring rats during gestation and lactation. In addition, we researched in these animals, the profile of gene expression in the muscle and liver involved with glucose and fatty acids metabolism. Females Wistar rats received normoproteic diet (17% of protein, control group, NP) or low protein diet (8% of protein, experimental group, LP) during gestation and lactation. After the weaning, the male offspring received standard diet and the functional studies were performed at 30 and 90-d-old. The straight register of arterial blood pressure was measured by femoral artery catheter and the ventilation was recorded by pletismography. The recording of thoracic sympathetic and phrenic nerve was realized by isolated brainstem-heart preparation (WHBP). The peripheral chemoreceptors were activated by KCN (0.04%, 100 μL/rat). In addition, it was realized removal of the peripheral chemoreceptors to investigate its role in the genesis of arterial hypertension. Gene expression for Hk2, PFK, PDK4, CPT1b, bHAD, CS, PGC1a, PEPCK, G6Pase, FAS, SOD1 and 2, CAT, GPX, Grin1, Gria1, e Grm1 were performed by the RT-PCR. In addition, protein expression was performed by Western blotting assay. In the brainstem were investigated the lipid peroxidation levels (by malondialdehyde-MDA assay) and enzymatic activity for superoxide dismutase and catalase. At 30 d-old Lp rats presented similar arterial pressure in comparison to Np rats. Although, Lp group exhibited, in this age, increase in the sympathetic-respiratory activity linked to higher peripheral chemosensitivity. At 90d-old, Lp rats presented hypertension, which in part, was linked to enhanced lipid peroxidation and decreased anti-oxidant enzymatic activity into ventral medulla. The carotid body removal attenuated arterial pressure and sympathetic actitiy in protein-restricted rats during pregnancy and lactation. At 30 d-old, the studies performed in skeletal muscle and liver, demonstrated a reduced mRNA expression for PDK4, βHAD in soleus muscle and the HK2, PFK, CS and PGC1a in EDL muscle of Lp group. In addition, we noted that mRNA expression for G6Pase, βHAS and Cs were enhanced in the Lp liver. We found that protein expression of HK2 was increased in Lp soleus and PDK and βHAD reduced in comparison to Np group. In EDL, protein expression for HK2 and PFJ were reduced in Lp rats. At 90 d-old, mRNA for PDK4 was dow-expressed in soleus and EDL from Lp rats. In the liver, mRNA for FAS was up-expressed in Lp rats and mRNA PGC1a and β down-regulated. The results indicates that: i) sympathetic and respiratory hiperactivity linked to with higher peripheral chemosensitivity in early life can contribute to development of arterial hypertension in adult life from Lp rats. ii) Carotid body removal attenuates the hypertension in rats submitted the perinatal protein restricted. iii) Arterial hypertension in Lp adult life is associated with oxidative disbalance. iv) metabolic genes expression involved in glucose and fatty acids metabolism are altered, at short and long-term, in liver and muscle of rats submitted the perinatal protein restricted.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-08T13:18:26Z No. of bitstreams: 1 Artur Cezar de Carvalho Fernandes.pdf: 2601296 bytes, checksum: 9369d2b707f3c7c3e02817a3cad61064 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-08T13:18:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Artur Cezar de Carvalho Fernandes.pdf: 2601296 bytes, checksum: 9369d2b707f3c7c3e02817a3cad61064 (MD5) Previous issue date: 2016-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The aim of the study was to evaluate the effects of the inflammatory response over endometrial gene expression and energy metabolism in heifers and cows. Initially, a protocol to induce a systemic pro-inflammatory profile was established based on multiple LPS infusions. Subsequently, 22 heifers were synchronized, inseminated (D0) and divided into control group (Saline sol.) and LPS, infusions started on D2. LPS group received intravenous infusions (IV) with saline solution + LPS (0.1; 0.25; 0.5; 0.75; 1.0; 1.25 mg / kg). Were analyzed the rectal temperature, plasma concentrations of TNF-α, haptoglobin (Hp), progesterone, AGNE and BHB, beside leucometrics analysis. On D15, the endometrial biopsies were performed, and subsequent analysis by qRT-PCR of genes related to cell adhesion, immune system and embryonic development. LPS infusions established a pro-inflammatory profile characterized by increase of temperature (P<0.05), TNF-α (P=0.05) and Hp (P<0.01), and effects on the differential leukocyte count. There was no change in metabolic parameters. The LPS group showed lower expression of IDO (P=0.04; fold=0.48) and PTX3 (P=0.01; fold=0.38), and high expression of MX1 (P=0.02; fold=2.85). Was concluded that the induced pro-inflammatory profile showed a strong but limited effect on gene expression related to immune system, suggesting a possible explanation for sub-fertility related pathophysiological changes in dairy cows. In the second study, to evaluate the influence of the inflammatory response on the energy metabolism of dairy cows, 20 cows were divided into control group (10 mL saline sol.) and LPS (25 ug LPS/10ml saline sol.). Was evaluated the somatic cell count, milk production, reticular temperature, as well the serum levels of Hp, TNF-α, AGNE and BHB. In LPS group was observed increased SCC (P<0.0001), decrease of production (P<0.05), and increased reticular temperature (P<0.005), as well an increase of Hp concentration (P<0,0001). Was observed increase on AGNE on day nine and BHB on day nine (P<0.005) and ten (P=0,05). Was concluded that the induced pro-inflammatory profile showed a strong but limited effect on gene expression related to immune system, suggesting a possible explanation for sub-fertility related pathophysiological changes in dairy cows. Aditonally, considering the inflammatory response induced by LPS intramammary infusions, were observed evidences of the relationship of the inflammatory response with the energy metabolism of dairy cows, and reaffirmed the participation of inflammatory mediators in the pathogenesis of metabolic diseases in dairy cows. / Objetivou-se avaliar os efeitos da resposta inflamatória na expressão gênica endometrial e no metabolismo energético em novilhas e vacas. Inicialmente, foi estabelecido um protocolo para indução de um perfil pró-inflamatório sistêmico, com base em múltiplas infusões de LPS. Posteriormente, 22 novilhas foram sincronizadas, inseminadas (D0) e divididas em grupo controle (sol. salina) e LPS, iniciando as infusões no D2. O grupo LPS recebeu infusões intravenosas (IV) de solução salina + LPS (0,1; 0,25; 0,5; 0,75; 1,0; 1,25 mg/Kg). Além da avaliação da temperatura retal, foram analisadas as concentrações plasmáticas de TNF-α, haptoglobina (Hp), progesterona, AGNE, e BHB, além das avaliações leucométricas. No D15, foram realizadas as biópsias endometriais, e posterior análise por qRT-PCR de genes relacionados ao adesão celular, sistema imunológico e desenvolvimento embrionário. As infusões de LPS estabeleceram um perfil próinflamatório caracterizado pelo aumento da temperatura (P<0,05), dos níveis de TNF-α (P=0,05) e de Hp (P<0,01), além de alteração na contagem diferencial de leucócitos. Não foi observada alteração nos parâmetros metabólicos. Em relação ao grupo controle, o grupo LPS apresentou menor expressão de IDO (P=0,04; fold=0,48) e PTX3 (P=0,01; fold=0,38), e uma expressão elevada de MX1 (P=0,02; fold=2,85). Em um segundo trabalho, para avaliar a influência da resposta inflamatória sobre o metabolismo energético de vacas em lactação, 20 vacas foram divididas em grupos controle (10 mL sol. Salina) e LPS (25 μg LPS/10 mL sol. salina). Foi avaliada a contagem de células somáticas (CCS), a produção leiteira, temperatura reticular, além dos níveis sorológicos de Hp, TNF-α, AGNE e BHB. No grupo LPS foi observado o aumento da CCS (P<0,0001), queda da produção (P<0,05), além do aumento da temperatura reticular (P<0,005) e aumento da concentração da Hp (P<0,0001). Verificou-se aumento de AGNE no dia nove e de BHB nos dias nove (P<0,005) e 10 (P=0,05). Com a realização dos presentes trabalhaos conclui-se inicialmente o protocolo utilizado no primeiro trabalho induziu um marcante perfil próinflamatório, porém, com limitado efeito na expressão do gene relacionados ao sistema imunitário, o que sugere uma possível explicação para a sub-fertilidade relacionadas a alterações fisiopatológicas em vacas leiteiras. Adicionalemnte, considerando a resposta inflamatória induzida pelo LPS intramamário, foi possível observar evidências da relação da resposta inflamatória com o metabolismo energético de vacas em lactação, e reafirmar a participação de mediadores inflamatórios na fisiopatogenia de enfermidades metabólicas em vacas de leite.

Orientadores: Anibal Eugenio Vercesi, Helena Coutinho Franco Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T02:32:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alberici_LucianeCarla_D.pdf: 5846392 bytes, checksum: a41c4e31bbe1d1fa3a670c7a9956806e (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Alterações no metabolismo energético mitocondrial promovidas por proteínas desacopladoras (UCPs) são frequentemente encontradas em desordens metabólicas. Recentemente demonstramos que camundongos hipertrigliceridêmicos (HTG) apresentam uma respiração mitocondrial de repouso elevada, não relacionada a UCPs. Neste trabalho, nós elucidamos o mecanismo responsável por esta elevação da respiração de repouso e demonstramos algumas conseqüências dessa resposta mitocondrial à hiperlipidemia no fígado e no metabolismo corporal total. Resultados: Mitocôndrias isoladas de fígados e de células mononucleares de baço de camundongos HTG apresentaram velocidades respiratórias elevadas comparadas aos camundongos controles. Mudanças no consumo de oxigênio em mitocôndrias de fígados de camundongos HTG foram sensíveis a ATP, diazóxido e ácido 5-hidroxidecanóico (5-HD) indicando que o consumo pode ser atribuído à atividade dos canais de K+ sensíveis a ATP (mitoKATP). Do mesmo modo, as mitocôndrias HTG apresentaram um maior inchamento na presença de íons K+, sensível aos agonistas e antagonistas do mitoKATP. Além disso, a ligação de glibenclamida marcada às mitocôndrias indica que os camundongos HTG expressaram maiores quantidades de receptores de sulfoniluréias, um componente os mitoKATP. Aumento da velocidade de metabolismo foi evidenciado por um aumento no consumo de oxigênio no fígado (sensível ao tratamento agudo in vivo pela administração de 5-HD), elevada temperatura retal e maior produção corporal de CO2 nesses camundongos. De acordo com a velocidade metabólica elevada, a ingestão alimentar foi significantemente maior em camundongos HTG, sem concomitante aumento de peso. Assim como verificado em camundongos HTG, mitocôndrias de fígados de animais submetidos à dietas ricas em substratos energéticos apresentaram também elevação da respiração mitocondrial de repouso. Conclusões: Esses resultados demonstram que a hiperlipidemia primária leva ao aumento da atividade dos mitoKATP em fígados, o que pode representar uma adaptação regulada para oxidar o excesso de ácidos graxos em camundongos HTG. Além disso, nossos resultados indicam que os mitoKATP, além das UCPs, podem estar envolvidos no controle do metabolismo energético e do peso corporal / Abstract: Changes in mitochondrial energy metabolism promoted by uncoupling proteins (UCPs) are often found in metabolic disorders. We have recently shown that hypertriglyceridemic (HTG) mice present higher mitochondrial resting respiration unrelated to UCPs. Here, we disclose the underlying mechanism and consequences, in tissue and whole body metabolism, of this mitochondrial response to hyperlipidemia. Results: As observed in HTG mice, liver mitochondria from animals submitted to the rich energy diets presented high resting respiration. Mitochondria isolated from the livers and spleen mononuclear cells of HTG mice presented enhanced respiratory rates compared to those from wild-type mice. Changes in oxygen consumption of liver mitochondria from HTG mice were sensitive to ATP, diazoxide and 5-hydroxydecanoate (5-HD), indicating they can be attributable to mitochondrial ATP-sensitive K+ channel (mitoKATP) activity. Indeed, mitochondria from HTG mice presented enhanced swelling in the presence of K+ ions, sensitive to mitoKATP agonists and antagonists. Furthermore, mitochondrial binding to fluorescent glibenclamide indicates that HTG mice expressed higher quantities of sulfonylurea receptors, a component of mitoKATP. An overall faster metabolic state was evidenced by increased liver oxygen consumption (sensitive to acute in vivo 5-HD administration), higher body CO2 release and temperature in these mice. In agreement with higher metabolic rates, food ingestion was significantly larger in HTG mice, without enhanced weight gain. Liver mitochondria isolated from rats fed glucose rich diet or from mice fed fat rich diet also presented higher resting respiration rates. Conclusions: These results demonstrate that primary hyperlipidemia leads to an elevation in liver mitoKATP activity, which may represent a regulated adaptation to oxidize excess fatty acids in HTG mice. Furthermore, our data indicate that mitoKATP, in addition to UCPs, may be involved in the control of energy metabolism and body weight / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Francesco Langone / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-14T15:12:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Facchini_Gustavo_M.pdf: 1152252 bytes, checksum: 2aeaf5af11625ea4d656804e4b4ab4b3 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A melatonina (MLT) é um neurohormônio presente em humanos e outros vertebrados, sendo a glândula pineal principal fonte produtora. Além de sua conhecida ação cronobiológica, a MLT tem papel regulador sobre o metabolismo energético e sobre a massa corporal de mamíferos. A presença de receptores para MLT nos núcleos hipotalâmicos dorso-medial, supraquiasmático, paraventricular do hipotálamo desde a fase embrionária, corrobora a mediação da MLT no controle neural do metabolismo. Dentro deste contexto o presente trabalho avaliou os efeitos da administração de MLT sobre a evolução ponderal e os níveis plasmáticos de glicose, triglicérides, colesterol, ácido graxo livre e insulina. Também foram investigados os efeitos da MLT sobre a fosforilação da AKT e ERK1/2 no hipotálamo de ratos neonatos. Neste estudo foram utilizados ratos neonatos com dois dias de vida (P2) que receberam doses diárias de MLT (1, 10, 50 e 100 mg/kg, s.c.; n=10) e/ou luzindole, antagonista não seletivo da MLT (1 mg/kg, s.c.; n=10). Os animais foram tratados por seis dias e sacrificados 24 horas após a última dose (P8). Três grupos adicionais foram utilizados, dois deles receberam apenas os veículos de diluição da melatonia (n=10) ou luzindole (n=10). O terceiro foi formado por animais não tratados (n=10). Imediatamente após o sacrifício foi coletado sangue para as dosagens plasmáticas, sendo realizada também a dissecação do hipotálamo. Os hipotálamos foram processados para análise por Western Blot (WB) das formas fosforiladas e não fosforiladas das proteínas AKT e ERK1/2. A evolução ponderal dos animais tratados com veículo de diluição foi semelhante ao dos animais sem tratamento. Contrariamente, todos os grupos tratados com MLT e com MLT+LZD apresentaram redução da evolução ponderal ao longo do tempo. A análise da fosforilação de proteínas no hipotálamo mostrou que todos os grupos tratados com MLT exibiram aumento da fosforilação da AKT. Por sua vez, a administração conjunta de MLT e LZD fez com que o valor de pAKT se assemelhasse os grupos controles. Os animais que receberam 10 mg/kg de MLT apresentaram aumento significativo da pERK1/2 quando comparado aos grupos controles. Entretanto, a administração de MLT+LZD tornou os valores de pERK1/2 similares aos valores dos animais controles. As dosagens plasmáticas mostraram que a MLT não alterou valores de colesterol, mas modificou as concentrações de glicose, triglicérides, ácido graxo livre e insulina. Por outro lado, os grupos tratados com o veículo de diluição do LZD apresentaram aumento dos valores de colesterol e diminuição de triglicérides e ácido graxo livre. Nossos dados mostram pela primeira vez que doses farmacológicas de melatonina produzem alterações metabólicas em ratos neonatos e que tais efeitos podem ser conseqüência de sua ação periférica e central. / Abstract: Melatonin (MLT) is a neurohormone present in human and other vertebrates, the pineal gland being its main source. In addition to its known chronobiological action, MLT has a regulatory role on energy metabolism and body mass of mammals. The presence of receptors for MLT in dorsomedial, supraquiasmaic and paraventricular hypothalamic nuclei since embryonic stage, speaks in favor of MLT as a mediator of neural control of metabolism. In this study we used newborn rats with two days of life (P2) who received daily doses of MLT (1, 10, 50 and 100 mg/kg, sc, n = 10) and / or luzindol (LZD; non-selective antagonist of MLT, 1 mg/kg, sc, n = 10). Animals were treated for six days and sacrificed 24 hours after the last dose (P8). Two additional groups received only the vehicle of dilution of melatonin (n = 10) or luzindol (n = 10). Another group was composed of animals not treated pharmacologically (n = 10). Body weight was recorded daily. At the end of treatment rats were killed by decapitation and blood was collected for plasma glucose (GLI), total cholesterol (COL), free triglycerides (TG), free fatty acid (FFA) and insulin (INS) determination. The hypothalamus was also dissected and processed for analysis by Western Blot (WB) of phosphorylated AKT and ERK1/2. The body weight of animals treated with vehicle was similar to that of untreated animals. Conversely, all groups treated with MLT and MLT + LZD showed reduced body weight over time. Analysis of protein phosphorylation in the hypothalamus showed that all groups treated with MLT had increased AKT phosphorylation. Rats that received MLT and LZD had pAKT levels similar to control rats. Animals that received 10 mg / kg of MLT showed significant increase in pERK1/2 compared to control groups. However, rats that received MLT + LZD had pERK1/2 levels similar to control rats. MLT did not alter plasmatic COL, but modified the GLI, TG, AGL and INS plasmatic levels. Moreover, groups treated with vehicle for dilution of LZD showed increase in COL and decrease of TG and FFA. Our data show for the first time that pharmacological doses of melatonin produces metabolic changes in newborn rats and that this effect may be a consequence of its peripheral and central actions. / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

O hormônio tireoideano (T3) desempenha papel importante no desenvolvimento, no crescimento e no metabolismo celular. Um dos seus principais efeitos é a ativação do metabolismo basal, contribuindo de forma importante com a regulação do peso corporal, enquanto diminui os níveis plasmáticos de triglicérides e colesterol. A ativação seletiva do receptor <font face=\"Symbol\">&#946 para o hormônio tireoideano (TR) por meio de agonistas seletivos reduziu níveis séricos de colesterol além de aumentar o metabolismo sem causar efeitos indesejáveis sobre o coração, osso ou músculo esquelético. Estes dados sugerem que estes agonistas poderiam ser úteis no tratamento das manifestações da síndrome metabólica tais como obesidade, hipercolesterolemia e resistência à insulina. Dessa forma, estudamos os efeitos da ativação do TR usando um agonista também da série GC, o GC-24, em ratos machos Wistar tratados com dieta rica em gordura e submetidos a injeções diárias de T3 correspondente a 10x a dose fisiológica (30g/g P.C./dia) ou GC-24 em dose equimolar (17g/g P.C./dia). Nosso estudo mostrou que o GC-24 preveniu algumas alterações metabólicas típicas da síndrome metabólica, tais como o aumento da massa gorda, intolerância à glicose e hipertrigliceridemia e corrigiu parcialmente outras como a hipercolesterolemia, o aumento do conteúdo de colesterol hepático e IL-6. Estes achados sugerem um papel importante do TR na mediação dos efeitos do T3 e devem ter repercussão importante na utilização potencial de agonistas seletivos ao TR<font face=\"Symbol\">&#946 como agentes hipocolesterolemiantes / Thyroid hormone (T3) plays an important role in the development, growth and cell metabolism. One of its main effects is to activate the basal metabolic rate significantly contributing to the regulation of body weight, while decreasing serum triglycerides and cholesterol levels. Thyroid hormone receptor selective activation through selective agonists reduced serum cholesterol levels besides increasing metabolic rate without causing undesirable side effects on the heart, bone or skeletal muscle. These data suggest that these agonists could be useful in the treatment of metabolic syndrome manifestations such as obesity, hypercholesterolemia and insulin resistance. Thus, we studied the effects of TR activation also using an agonist from the GC series, the GC-24 in male Wistar rats treated with high fat diet and submitted to daily T3 injections, corresponding to 10x physiological dose (30g/g B.W. /day) or equimolar doses of GC-24 (17g/g P.C. /day). Our study has shown that GC-24 prevented some of the metabolic abnormalities typical of metabolic syndrome such as increase in fat mass, glucose intolerance and hypertriglyceridemia and partially corrected other ones like hypercholesterolemia, the increase in hepatic cholesterol and IL-6 levels. These findings suggest that TR has an important role in the mediating of T3 effects and should have important repercussions in the potential use of selective agonists to TR as cholesterol lowering agents.

Para avaliar o efeito da suplementação parenteral com vitamina D sobre a sensibilidade à insulina, metabolismo oxidativo e energético, foram utilizados 29 cordeiros recém-nascidos, mestiços (Santa Inês x Dorper) e hígidos. Estes animais foram distribuídos em quatro grupos, DD- cordeiros filhos de ovelhas suplementadas com 70.000 UI/kg de vitamina D, pela via IM, no 108o dia da gestação e que também receberam suplementação com 24 horas de vida; DC cordeiros filhos de ovelhas suplementadas com a mesma dose e no mesmo dia de gestação e que não receberam vitamina D; CD- cordeiros filhos de ovelhas que não receberam vitamina, mas receberam vitamina D, pela via IM, na dose de 70.000 UI/kg no primeiro dia de vida; e CC- cordeiros filhos de ovelhas que não receberam vitamina D e que também não receberam suplementação vitamínica. Foram realizadas coletas de sangue aos dois (T0) e aos 28 (T1) dias de vida dos cordeiros para a determinação dos teores de ureia, creatinina, proteína total, albumina, colesterol, triglicérides, ácido úrico, cálcio total, cálcio iônico, AGNEs, BHB, glicose, cortisol, insulina, das vitaminas D e E e das atividades das enzimas CK, AST, GGT. Foram determinados os valores de RQUICK e RQUICK BHB. Do metabolismo oxidativo foram avaliados SOD, GSH-Px, HRFP, TBARS, TAS. Foi realizado também, teste de tolerância à glicose nos cordeiros com 30 dias de vida, e foram determinadas as áreas abaixo da curva para a glicose, BHB, AGNEs e insulina. Semanalmente os cordeiros foram pesados e o escore de condição corporal foi avaliado. A administração de vitamina D em cordeiros saudáveis foi eficiente em aumentar as concentrações plasmáticas da 25 hidroxivitamina D, porém não influenciou nas concentrações de ureia, creatinina, proteína total, AST, GGT, ácido úrico, cálcio total e cálcio iônico, colesterol, triglicérides, cortisol, insulina, AGNEs e BHB que que tiveram influência apenas do fator etário. Não influenciou o ganho de peso semanal nem o ECC dos cordeiros. O uso parenteral da vitamina D na ovelha, independente do seu uso no cordeiro aumentou a concentração plasmática de vitamina E e diminuiu a atividade da CK, no cordeiro. O uso parenteral de vitamina D no cordeiro, independente do uso na ovelha, reduziu a glicemia e aumentou a albumina sérica dos cordeiros; e agiu diminuindo a sensibilidade à insulina em cordeiros filhos de ovelhas que receberam suplementação vitamínica durante a gestação, independente da suplementação diretamente no cordeiro, quando avaliada pelo teste RQUICK BHB. O teste RQUICK não se mostrou efetivo em mensurar a sensibilidade a insulina nesse experimento. Quando desafiados pelo teste de tolerância à glicose, a suplementação de cordeiros com a vitamina D, sem haver suplementação prévia da ovelha, reduziu a sensibilidade insulínica destes indivíduos. / To evaluate the effect of parenteral supplementation with vitamin D on insulin sensitivity, oxidative and energetic metabolism, we used 29 newborns, crossbreed (Santa Inês x Dorper) and healthy lambs. These animals were divided into four groups, DD- lambs of sheep supplemented with 70,000 IU /kg of vitamin D, IM, on the 108th day of gestation and also received supplementation with 24 hours of life; DC - lambs of sheep supplemented with the same dose and on the same day of gestation and who did not receive vitamin D; CD- lambs from sheep that did not receive vitamin D but received vitamin D, by IM, at a dose of 70,000 IU / kg on the first day of life; and CC- lambs born to ewes who did not receive vitamin D and who also did not receive vitamin supplementation. Blood samples were collected at two (T0) and 28 (T1) days of life for determination of urea, creatinine, total protein, albumin, cholesterol, triglycerides, uric acid, total calcium, ionic calcium, AGNEs , BHB, glucose, cortisol, insulin, vitamins D and E and the activities of enzymes CK, AST, GGT. The values of RQUICK and RQUICK BHB were determined. From the oxidative metabolism were evaluated SOD, GSH-Px, HRFP, TBARS, TAS. Glucose tolerance test was also performed in lambs with 30 days of age, and the areas under the curve were determined for glucose, BHB, AGNEs and insulin. The lambs were weighed weekly and the body condition score was evaluated. The administration of vitamin D in healthy lambs was efficient in increasing the plasma concentrations of 25-hydroxyvitamin D, but did not influence the concentrations of urea, creatinine, total protein, AST, GGT, uric acid, total calcium and ionic calcium, cholesterol, triglycerides , cortisol, insulin, AGNEs and BHB that had influence only of the age. It did not influence the weekly weight gain or ECC of the lambs. The parenteral use of vitamin D in sheep, regardless of its use in lamb increased the plasma concentration of vitamin E and decreased CK activity in the lamb. The use of parenteral vitamin D in lamb, regardless of use in sheep, reduced glycemia and increased serum albumin in lambs; and decreasing insulin sensitivity in lambs of sheep that received vitamin supplementation during gestation, independent of supplementation directly in the lamb, when evaluated by the RQUICK BHB test. The RQUICK test was not effective in measuring insulin sensitivity in this experiment. When challenged by the glucose tolerance test, supplementation of lambs with vitamin D, without previous supplementation of the sheep, reduced the insulin sensitivity of these subjects

Tratamos ratos por 7 dias com injeções subcutâneas de óleos de soja (S) ou de girassol (G). Verificamos o desenvolvimento de resistência insulínica, com diminuição de GLUT4 e de sua translocação no tecido adiposo de ratos tratados com estes óleos, apesar de aumento no RNAm de GLUT4 no músculo e no tecido adiposo. O tratamento com girassol diminuiu RNAm de GLUT1 no adiposo, onde também diminuiu a quantidade de RNAm de NF-<font face=\"symbol\">kB. (outros fatores transcricionais não apresentaram alteração: PPAR<font face=\"symbol\">g, MEF2A e MF2D). Dosamos ácidos graxos no plasma, fígado (sem alterações), músculo (palmitoléico aumentou no grupo G; linolênico diminuiu no S e G e araquidônico aumentou no S) e adiposo (palmítico e esteárico aumentaram e linoleico diminuiu nos grupos S e G, além de aumentar a proporção saturados/ insaturados). / We treated rats for 7 days with subcutaneous soybean (SB) oil or sunflower (SF)oil injections. Insulin resistance was developed, with a decrease in GLUT4 quantity and translocation in adipose tissue in the rats treated with those oils, despite GLUT4 mRNA increase in muscle and adipose tissue. Sunflower treatment led to decrease in GLUT1mRNA in adipose tissue, where NF- <font face=\"symbol\">kB mRNA was also decreased (other transcriptional factors did not change: PPAR<font face=\"symbol\">g, MEF2A e MF2D). Fatty acids were measured in the plasma, the liver (no changes), muscle (palmitoleic increased in SF, linolenic decreased in SB and SF and arachidonic increased in SB) and adipose tissue (palmitic and stearic increased and linoleico decreased in SB and SF, besides increasing in saturated/ unsaturated ratio.

Os ritmos biológicos circadianos garantem a relação temporal entre os seres e o ambiente. A regulação metabólica se relaciona à ritmicidade dos ciclos de claro-escuro, com importância das ações da melatonina e dos glicocorticoides no fígado. Investigamos a participação dos glicocorticoides no ajuste metabólico mediado pela secreção rítmica de melatonina e no contexto inflamatório hepático. Ratos Wistar machos pinealectomizados tratados ou não com RU 486 tiveram o padrão circadiano circulante de corticosterona, insulina e glicose aferido ao longo de 8ZTs e no ZT10. Neste ponto, analisou-se a expressão de RNAm e protéica envolvidas em ações metabólicas e inflamatórias. Testes in vivo de tolerância à glicose e ao piruvato e a fosforilação da Akt hepática no ZT10 em resposta à insulina, em conjunto às alterações de peso e composição corpórea, conteúdo de glicogênio e histologia do fígado, apontam maior influência da corticosterona na gliconeogênese e correlação de ambos os hormônios nas alterações energéticas e na instalação de um quadro pró-inflamatório hepático. / Circadian biological rhythms guarantee the temporal relationship between living beings and the environment. Metabolic regulation relates to the rhythm to the light-dark cycle, with importance of the actions of melatonin and glucocorticoids in the liver. We investigated the participation of glucocorticoids in the metabolic adjustment mediated by rhythmic secretion of melatonin on the liver inflammatory context. Male Wistar rats pinealectomized treated or not with RU 486 had the circadian levels of circulating corticosterone, insulin and glucose measured along 8ZTs and on ZT10. At this point, we analyzed mRNA and protein expression related to metabolic and inflammatory actions. In vivo tests to glucose and pyruvate tolerance and rating the phosphorylation of Akt in response to insulin in liver at ZT10, with the changes in weight and body composition, glycogen content and liver histology, indicate influence of corticosterone in gluconeogenesis and correlation of both hormones in energy alterations and on the installation of a hepatic pro-inflammatory process.

Orientador: Patrícia de Oliveira Prada / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T14:40:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Penteado_Erica_M.pdf: 2591549 bytes, checksum: 18851851d9a1a75cb2bd1ef2c4f7cb86 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O topiramato (TPM) é utilizado atualmente no tratamento da epilepsia e da enxaqueca por ser antagonista do receptor AMPA/KA e por aumentar o receptor de GABA, desencadeando a estabilização dos canais de sódio e cálcio. O efeito colateral mais conhecido dessa droga é a perda de peso, o aumento do gasto energético e da termogênese. Os hormônios anorexigênicos insulina e leptina regulam a atividade de populações distintas de neurônios que controlam o balanço energético via ativação da via IR/PI3K/Akt e OBR/JAK2/STAT3 respectivamente. Entretanto, desconhece-se se o efeito do TPM na perda de peso é decorrente de alterações da ação insulínica ou de leptina no hipotálamo. Assim, o objetivo do estudo é investigar se o tratamento com essa droga altera a sinalização da insulina e da leptina em hipotálamo de camundongos alimentados com dieta hiperlipídica (DH) ou ração padrão. Camundongos Swiss obesos ou com dieta padrão foram submetidos à cirurgia estereotáxica para inserção de cânula no ventrículo lateral. Após uma semana de recuperação, as cânulas foram testadas, e os animais foram tratados com 110mg/kg/dia de TPM, via gavagem, por sete dias, tendo sua ingestão alimentar e peso corpóreo monitorados diariamente. Observou-se que os animais em DH, tratados com TPM, possuem um menor ganho de peso e de ingestão alimentar do que seus controles, tratados com veículo. Não houve, porém, diferença quanto ao ganho de peso e ingestão alimentar dos animais tratados com a droga não obesos. Observou-se um aumento da termogênese nos animais obesos tratados com TPM pelo aumento da expressão da proteína UCP1, proteína desacopladora mitocondrial do tecido adiposo marrom, e também pelo aumento do consumo de O2 e produção de CO2, marcadores de termogênese. A nível molecular, os animais obesos apresentaram redução da fosforilação do receptor de insulina, IRS-1 e Akt induzidos por insulina e redução da fosforilação de OBR/JAK2/STAT3 induzida por leptina em hipotálamo. Entretanto, o tratamento com TPM reverteu este efeito, sugerindo que o tratamento com a droga induz uma melhora da ação/sinalização insulínica e de leptina no hipotálamo de camundongos obesos. Dessa maneira, sugere-se que o tratamento com TPM, pelo menos a curto prazo, melhora da ação e sinalização da insulina e leptina em hipotálamo, podendo ser um dos mecanismos pelos quais ocorre redução da ingestão alimentar e aumento do gasto energético nesses animais. Essa alteração de ingestão e de termogênese pode contribuir para a redução da adiposidade de camundongos obesos tratados com topiramato. Assim, essa droga parece ter um potencial terapêutico no tratamento da obesidade e da resistência à insulina / Abstract: Topiramate (TPM) is an anticonvulsant drug used for the treatment of epilepsy and prophylaxis of migraine. Weight loss is a frequently side effect reported in patients and animal models treated with TPM. In animal models topiramate may increase levels of hypothalamic corticotropic-releasing hormone (CRH), which is an anorexigenic neuropeptide and may decrease food intake. Some studies showed that topiramate may decrease energy storage, and thus increase energy expenditure and thermogenesis. However, the mechanisms by which TPM reduces body weight are not completely known so far. The hypothalamus is acknowledged as an important regulator of whole-body energy homeostasis by integrating nutrient and hormones signals from central and peripheral inputs. Anorexigenic hormones such as insulin and leptin regulate the activity of distinct neuron populations that control energy balance via IR/PI3K/Akt/Foxo1 pathway or OBR/JAK2/STAT3 pathway respectively. However, if topiramate alters hypothalamic insulin or leptin sensitivity is not known. Thus, in the present study, we asked whether topiramate treatment alters energy balance by altering insulin and leptin action/signaling in the hypothalamus from control and diet-induced obesity (DIO) mice. Our data provide evidence that short treatment with topiramate improves hypothalamic insulin and leptin signaling and action in obese mice. The improvement of hypothalamic insulin and leptin may reduce food ingestion and increase energy expenditure by increases in CRH and TRH mRNA expression. The lower food intake and higher energy expenditure induced by topiramate treatment may reduce obesity in mice on high fat feeding and may be an alternative therapy for obese treatment / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-06-15T17:12:25Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 511531 bytes, checksum: b92097162df7a6f7f99906a4ea0bf44a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-15T17:12:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 511531 bytes, checksum: b92097162df7a6f7f99906a4ea0bf44a (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O desempenho de novilhas Holandesas a pasto em condições tropicais sob diferentes regimes de suplementação ainda não é largamente estudado. Deste modo, avaliou-se o consumo, desempenho e digestibilidade de novilhas Holandesas a pasto recebendo três diferentes tipos de suplementação no período das águas e de transição águas-seca. Dezoito novilhas Holandesas com idade e peso inicial de 12.57 ± 2.54 meses e 218.76 ±47.6 kg respectivamente, foram submetidas a um delineamento em blocos casualisados, com 6 repetições em sistema de pastejo rotacionado de Panicum maximum cv. Mombaça. Os suplementos avaliados foram: controle (CON; sal mineral ad libitum); suplementação energética (ENE; fubá de milho como suplemento); e suplementação proteica (PRO; Mistura de fubá de milho e farelo de soja, 25% de proteína bruta (PB). O experimento durou 120 dias, subdividido em 3 períodos. Dióxido de titânio e fibra em detergente neutro indigestível (FDNi) foram utilizados para estimar o consumo e digestibilidade dos nutrientes. As mensurações relativas ao peso corporal, altura de cernelha, circunferência torácica, comprimento corporal e as medidas de ultrassom da área do olho de lombo e da espessura da gordura do lombo foram tomadas a cada período. Os escores de condição corporal (ECC) foram avaliados duas vezes durante o período experimental. Os dados foram avaliados em procedimento MISTO no SAS incluindo período como medidas repetidas no tempo e a significância foi declarada em P ≤ 0,05. Os consumos de: matéria seca (MS), proteína bruta (PB) e de energia digestível (CED) foram maiores para o suplemento PRO (P <0,05) comparados com CON e ENE. A suplementação afetou o consumo de MS de pasto (% BW, P = 0,049) e a interação suplementação x período no consumo de FDN (% PC), possivelmente ocorreu devido a um consumo de forragem maior (%PC) no período 3 do CON. O PRO proporcionou maior digestibilidade da MS do pasto (P =0,04) em comparação com CON. O aporte de energia via suplemento ENE possibilitou menor digestibilidade da PB comparado com os suplementos PRO e CON (P<0.01). O ganho diário médio (GMD) e o ganho de circunferência torácica foram maiores (P <0,05) quando se forneceu suplementação proteica aos animais (PRO). O ECC foi maior (P=0,02) para os animais suplementados com proteína (PRO -3,43) comparados com os animais que receberam apenas suplementação minera (CON -3,24) e energética (ENE -3,03). Para suplementação de Novilhas Holandesas em sistema de pastejo rotacionado de Capim Mombaça no período das águas e de transição águas-seca, recomenda-se o fornecimento de suplementos proteicos (25% PB) (0,5% PC) para obtenção de melhor desempenho produtivo dos animais. / Literature lacks studies investigating performance of grazing Holstein heifers on tropical conditions, under different supplementation regime. Thus, we aimed to evaluate intake, performance and digestibility of grazing Holstein heifers under 3 supplementation strategies during the rainy and rainy-dry transition seasons. Eighteen Holstein heifers with average age and initial live weight of 12.57 ±2.54 mo and 218.76 ±47.6 kg, respectively were submitted to a randomized block design, with 6 replicates on a rotational grazing system of Panicum maximum cv. Mombaça pasture. Treatments were: control (CON; mineral salt ad libitum); energy supplement (ENE; corn meal as supplement); and protein supplement PRO (corn and soybean meal, 25% crude protein (CP)). Supplements were fed at 0.5% BW. The experiment lasted 120 days subdivided into 3 periods. Titanium dioxide and indigestible neutral detergent fiber (iNDF) were used to estimate intakes and digestibility of the nutrients. Body weight, withers height, thoracic circumference, body length, and ultrasound of ribeye area, and ribeye fat thickness measurements were taken every period. Body condition scores (BCS) was taken twice. MIXED procedure of SAS including period as repeated measurements was used and significance was declared at P ≤ 0.05. DM intake, CP intake (CPI) and DE intake were greater in PRO (P<0.05) compared to CON and ENE. Supplementation strategy affected forage DM intake (%BW, P = 0.049), and a supplementation strategy × period interaction was observed for NDF intake (%BW), mainly due to a greater NDFI/BW in the period 3 to CON. The PRO had greater (P<0.05) grass DM digestibility compared to CON. ENE had lower CP digestibility compared to PRO and CON (P<0.01). Average daily gain (ADG) and thoracic circumference gain were the greatest (P<0.05) in PRO. BCS was greater (P = 0.02) on PRO (3.43) than CON (3.24) and ENE (3.03). PRO animals had the best performance, consequently they better expressed the associative effects of forage and supplement. Its recommended that Holstein heifers in rotational grazing system with Mombaça grass should be protein supplemented during the rainy and rainy-dry transition seasons to maximize performance. vi