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A fam?lia como rede de apoio ao dependente qu?mico : desafios e possibilidades no ?mbito da sa?de p?blicaSchwerz, Cl?ucia Ivete 10 August 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-08-10 / A segunda etapa da pesquisa consistiu em rever os mesmos participantes a fim de verificar em que medida este modelo de tratamento lhes auxiliou no decorrer deste intervalo de tempo quanto ?s possibilidades de preven??o de reca?da, como o significado da interven??o com a fam?lia e ainda, avaliar a sua inser??o em um Servi?o de atendimento especializado ? sa?de mental, no ?mbito do SUS, a fim de verificar sua efetividade nesse espa?o. Os resultados da pesquisa referem a interven??o com a fam?lia como uma vantagem deste modelo de tratamento uma vez que propiciou esclarecimento da quest?o da depend?ncia qu?mica a todos, desmistificando julgamentos morais e auxiliando em situa??es de risco para a reca?da, bem como sentimentos de acolhida e compreens?o entre os membros da fam?lia. Mas apontam tamb?m alguns riscos, que s?o discutidos no decorrer do trabalho para os quais devemos estar atentos enquanto profissionais que dizem respeito, fundamentalmente, a n?o sobrecarregar a fam?lia enquanto cuidadora, perspectiva j? utilizada no ?mbito das pol?ticas p?blicas.
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Avalia??o in vitro do potencial de descontamina??o de canais radiculares infectados com enterococcus faecalis e da capacidade de dissolu??o tecidual atrav?s do uso da terapia fotodin?mica e do hipoclorito de s?dioSouza, Matheus Albino 25 January 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-01-25 / ARTIGO 1 : Introduction: Photodynamic therapy has been proposed to improve to root canal desinfection, but its role on certain bacterial species needs to be further ellucidated. Objective: to compare, in vitro, the action of photodynamic therapy and sodium hypochlorite in root canals infected with Enterococcus faecalis. Methods: The root canals of 45 single-rooted human extracted teeth were enlarged up to a file 60, autoclaved, inoculated with a suspension of Enterococcus faecalis and incubated for 60 days, with renewal of the culture medium every 48 hours. After that, samples were divided into five groups according to the protocol of decontamination: G1 (n = 5) positive control - no procedure; G2 (n = 10) negative control - distilled water; G3 (n = 10) - PAD, G4 (n = 10) NaOCl 2.5%; G5 (n = 10) - NaOCl 2.5% + PAD. Subsequently, samples were fixed on 25% glutaraldehyde, dehydrated, dried, metalized and subjected to scanning electron microscopy (SEM). The assessment was made of images taken at every root third at 5.000x magnification for the canal wall and 10.000x for the exposed tubule area, both in backscattering (BS), noting the effect of proposed treatments to the different thirds of the root canal. The presence of bacteria in the images was scored by position ranks from 1 to 45, where the higher the value, the cleanliness of the sample. Data were subjected to One-way ANOVA followed by post-hoc Tukey test (α = 0.05). Results: Group 5 had the highest mean position ranks for all thirds of the root canal, both in canal wall and in the exposed tubule area. Thus, it was the most effective in eliminating Enterococcus faecalis. Conclusion: the association NaOCl 2,5% + PAD is an efficient protocol for the elimination of Enterococcus faecalis present in the dentinal surface and deep into the dentinal tubules.
ARTIGO 2 : Purpose: Evaluate the bovine pulp tissue dissolution ability of photodynamic therapy. Methods: Twenty pieces of bovine pulp tissue were weighed and divided randomly into four groups (n = 5), according to the cleaning protocol: G1 - distilled water (negative control), G2 - sodium hypochlorite 1% (positive control), G3 - photodynamic therapy, G4 - sodium hypochlorite 1% + photodynamic therapy. The observation of the events of dissolution was performed by two observers blinded in relation to the test using 2x loupe magnification, recording time in minutes until complete tissue dissolution. The total observation time was 2 hours. The dissolution rate was calculated dividing the weight of the fragment pulp (mg) by the time of dissolution (mg / min). Results: only group 2 (NaOCl) was able to promote complete dissolution of pulp tissue. In the other groups there was no occurrence of complete dissolution of the samples. The mean dissolution time for samples from group 2 (NaOCl) was 1.26 mg / min. Conclusion: photodynamic therapy was not able to dissolve the fragments of bovine pulp tissue and was not able to accelerate the rate of dissolution. / ARTIGO 1 : O objetivo deste estudo foi comparar, in vitro, a a??o da terapia fotodin?mica com a a??o do hipoclorito de s?dio em canais radiculares infectados com Enterococcus faecalis. Os canais radiculares de 45 dentes humanos unirradiculares foram ampliados at? a lima 60, autoclavados, inoculados com uma suspens?o de Enterococcus faecalis e incubados por 60 dias, com renova??o do meio de cultura de 48 em 48 horas. Ap?s o per?odo de contamina??o, as amostras foram divididas aleatoriamente em cinco grupos, de acordo com o protocolo de descontamina??o: G1 (n=5) controle positivo nenhum procedimento; G2 (n=10) controle negativo ?gua destilada; G3 (n=10) PAD; G4 (n=10) NaOCl 2,5%; G5 (n=10) NaOCl 2,5% + PAD. Posteriormente, as amostras foram fixadas em glutaralde?do 25%, desidratadas, secas, metalizadas e submetidas ? microscopia eletr?nica de varredura (MEV). A avalia??o foi feita em imagens do MEV com o aumento de 5.000x para a luz do canal e de 10.000x para a interface dentin?ria, ambos em backscattering (BS), observando o efeito dos tratamentos propostos nos diferentes ter?os do canal radicular. A presen?a de bact?rias foi classificada por interm?dio de um rankeamento de posi??es de 1 a 45, onde quanto maior o valor, maior o grau de limpeza da amostra. Os dados de n?veis de contamina??o foram submetidos ao teste de ANOVA de uma via, seguido pelo post-hoc de Tukey (α=0,05). Os resultados mostraram que o grupo 5 apresentou os maiores valores na m?dia de rankeamento de posi??es nos tr?s ter?os do canal radicular, tanto na luz do canal quanto na interface dentin?ria. Com isso, foi o mais efetivo na elimina??o de Enterococcus faecalis. Diante do exposto, ? poss?vel concluir que a associa??o NaOCl 2,5% + PAD foi eficiente na elimina??o de Enterococcus faecalis presentes na parede dentin?ria e na profundidade de penetra??o dos t?bulos dentin?rios. ARTIGO 2 : O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade de dissolu??o do tecido pulpar bovino atrav?s da a??o da terapia fotodin?mica. Vinte fragmentos de tecido pulpar bovino foram pesados e divididos aleatoriamente dentro de quatro grupos (n=5), de acordo com o mecanismo de dissolu??o testado: G1 ?gua destilada (controle negativo); G2 hipoclorito de s?dio 1% (controle positivo); G3 terapia fotodin?mica; G4 hipoclorito de s?dio + terapia fotodin?mica. A observa??o dos eventos de dissolu??o foi realizada por dois observadores cegados em rela??o ao teste, com lupa de 2x de aumento, sendo anotado, em minutos, o tempo at? que ocorresse a completa dissolu??o do tecido. O per?odo total de observa??o foi de 2 horas. O tempo necess?rio para dissolu??o foi registrado em minutos (min) e a velocidade de dissolu??o foi calculada dividindo o peso do fragmento pulpar (mg) pelo tempo de dissolu??o (mg/min). Os resultados mostraram que somente o grupo 2 (NaOCl) foi capaz de promover a dissolu??o completa do tecido pulpar. Nos demais grupos n?o houve a ocorr?ncia da dissolu??o completa das amostras. A m?dia do tempo de dissolu??o para as amostras do grupo 2 (NaOCl) foi de 1.26 mg/min. Em conclus?o, somente o hipoclorito de s?dio foi capaz de dissolver os fragmentos de tecido pulpar bovino e a terapia fotodin?mica n?o apresentou capacidade de dissolu??o tecidual.
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An?lise morfol?gica das fissuras labiopalatinas pr?-forame incisivo unilaterais completas por meio de radiografias oclusal, panor?mica e tomografia computadorizada de feixe c?nicoIbrahim, Danilo 19 July 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-07-19 / A presente pesquisa avaliou as fissuras e as estruturas anat?micas adjacentes atrav?s das t?cnicas radiogr?ficas oclusal e panor?mica e da tomografia computadorizada de feixe c?nico (TCFC) por meio de uma an?lise descritiva e de mensura??es lineares e volum?trica. Participaram do estudo 12 pacientes portadores de fissuras pr?-forame incisivo unilaterais completas em tratamento no Hospital de Reabilita??o de Anomalias Craniofaciais da Universidade de S?o Paulo Bauru/SP. As imagens radiogr?ficas e tomogr?ficas foram manipuladas por softwares. As ?reas das fissuras foram calculadas nas tr?s modalidades diagn?sticas e o volume na TCFC; foram realizadas medidas axiais nas tomografias nas alturas de 3mm e 6mm acima da jun??o cemento-esmalte e ao n?vel dos ?pices dent?rios para an?lise das espessuras das cristas ?sseas adjacentes ?s fissuras; quatro medidas na vista panor?mica das TCFCs para medi??o do comprimento das ra?zes e das cristas alveolares adjacentes ?s fissuras. Os resultados mostraram a superioridade da TCFC em rela??o as radiografias oclusal e panor?mica na determina??o das ?reas das fissuras com valores m?dios de 803mm2, 40,36mm2, 50,84mm2, respectivamente, apresentando diferen?a estatisticamente significativa (teste t-student, p≤0,05), e 889,9mm3 para as medidas de volume. Os dentes mesiais e distais aos defeitos apresentaram m?dias do comprimento radicular de 9,91mm e 10,56mm e da cobertura ?ssea radicular de 73,73% e 86,38%, respectivamente. Concluiu-se que a TCFC revelou um defeito ?sseo significativamente maior que os observadas nas radiografias oclusal e panor?mica; possibilitou a mensura??o da extens?o das ra?zes dos dentes e suas respectivas cristas ?sseas adjacentes ?s fissuras; permitiu a mensura??o da espessura ?ssea ao redor das ra?zes dos dentes, possibilitando melhor planejamento da quantidade ?ssea a ser utilizada nas cirurgias de Enxerto ?sseo Alveolar Secund?rio; e reproduziu os detalhes da regi?o da fissura com maior nitidez sem sobreposi??o das estruturas anat?micas.
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Efeito do Agregado Tri?xido Mineral intracanal em um modelo de reimplante tardio em dentes de ratos : an?lise histol?gica e imunoistoqu?micaVogt, Beatriz Farias 22 July 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-07-22 / O reimplante ? o tratamento de escolha da avuls?o dent?ria. Deve ser realizado imediatamente, a fim de evitar que ocorra necrose pulpar e do ligamento periodontal e, consequentemente, o desenvolvimento de reabsor??o radicular. Por?m, quando a reabsor??o estiver instalada, a terapia com hidr?xido de c?lcio deve ser iniciada t?o logo quanto poss?vel. Pelo fato deste material ainda apresentar alguns inconvenientes, como a necessidade de trocas frequentes e o aumento da fragilidade da estrutura dent?ria quando utilizado por longos per?odos, outros materiais est?o sendo utilizados como substitutos do hidr?xido de c?lcio. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi de, atrav?s de uma revis?o da literatura, conhecer a aplicabilidade do agregado tri?xido mineral no tratamento de dentes traumatizados. Al?m disso, tamb?m foi realizado um estudo experimental para avaliar o efeito do MTA Branco (WMTA) (Angelus, Londrina, Brasil) e do MTA Fillapex (Angelus, Londrina Brasil) como medica??o intracanal na preven??o da reabsor??o radicular, em dentes de ratos, reimplantados tardiamente. Neste estudo foram utilizados 48 ratos machos (Wistar) que tiveram o incisivo central superior direito extra?do e mantido em meio seco por 30 minutos. Os animais foram divididos em quatro grupos: 1 WMTA; 2 MTA Fillapex; 3 Hidr?xido de c?lcio; 4 Controle negativo. Ap?s a remo??o qu?mica do ligamento periodontal, os canais radiculares foram secos, preenchidos com o material correspondente a cada grupo e reimplantados. Ap?s 10 e 60 dias, as pe?as operat?rias foram submetidas ao processamento para realiza??o de cortes histol?gicos no sentido longitudinal. As l?minas foram coradas com HE para an?lise histol?gica qualitativa e quantitativa. Os resultados foram analisados estatisticamente por meio de an?lise de vari?ncia (ANOVA), seguida pelo Teste de Tukey, com n?vel de signific?ncia de 5%. A avalia??o qualitativa demonstrou que os grupos do WMTA e MTA Fillapex apresentaram ?reas de reabsor??o inflamat?ria, reabsor??o por substitui??o e anquilose alv?olo-dent?ria, similares ?s observadas no grupo do hidr?xido de c?lcio, nos dois per?odos avaliados. Um processo inflamat?rio maior foi observado nos grupos WMTA e MTA Fillapex. Na an?lise quantitativa, a avalia??o do processo inflamat?rio mostrou diferen?a significativa entre o grupo do hidr?xido de c?lcio e o grupo controle, aos 10 dias (p<0.05). Aos 60 dias, ?reas de anquilose alv?olodent?ria foram significativamente maiores no grupo MTA Fillapex quando comparado ao grupo controle (p<0.05). Os resultados mostraram que nenhum dos materiais avaliados foi capaz de prevenir completamente o desenvolvimento da reabsor??o radicular, apesar de ambos os materiais ? base de MTA terem apresentado resultados compar?veis aos do hidr?xido de c?lcio. Sendo assim, os cimentos de MTA podem apresentar algumas vantagens; por?m, as consequ?ncias dos seus efeitos pro-inflamat?rios devem ser mais bem investigadas.
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Efeito da terapia fotodin?mica (PDT) sobre culturas de Candida sp. e de c?lulas epiteliais : estudo in vitroMarinho, Sandra Aparecida 12 December 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006-12-12 / O uso indiscriminado de antif?ngicos tem acarretado resist?ncia da Candida sp., o que requer novas alternativas de tratamento para a candidose oral. A aplica??o da terapia fotodin?mica (PDT) tem sido investigada na inativa??o de microrganismos patog?nicos ao hospedeiro humano. O presente estudo teve por objetivo avaliar, in vitro, a a??o da PDT sobre a viabilidade da Candida sp. e de c?lulas epiteliais. Culturas de Candida sp. obtidas a partir da coleta de amostras de 38 pacientes portadores de candidose oral e culturas de c?lulas HEp-2 foram submetidas ? PDT. Foi empregado o laser diodo fosfeto de ?ndio-g?lio-alum?nio (InGaAlP) nas dosimetrias de 100 J/cm2, 270 J/cm2 e 450 J/cm2 associado ao fotossensibilizador azul de metileno na concentra??o de 100 Rg/mL. Ap?s o tratamento, a viabilidade das unidades formadoras de col?nias (UFCs) e das c?lulas epiteliais foi quantificada. As tr?s dosimetrias empregadas determinaram inativa??o significativa da Candida sp. (p<0,05). A dosimetria de 450 J/cm2 foi a mais eficaz, inativando 72,42% das UFCs de Candida sp., seguida pelas dosimetrias de 270 J/cm2 e 100 J/cm2 com inativa??o m?dia de 45,84% e 22,83% respectivamente. A Candida albicans foi significativamente mais sens?vel ao tratamento, com inativa??o m?dia de 50,44% das UFCs, enquanto as outras esp?cies de Candida apresentaram inativa??o m?dia de 41,18% (p<0,05). Depois de submetidas ? PDT, as c?lulas HEp-2 exibiram viabilidade semelhante nas diferentes dosimetrias (p>0,05). A viabilidade m?dia das c?lulas HEp-2, avaliada imediatamente ap?s a PDT, independentemente da dosimetria aplicada, foi de 70,81%, sendo esta significativamente menor do que a do grupo-controle, que foi de 86,21% (p<0,05). A PDT com azul de metileno e laser nas dosimetrias de 100 J/cm2, 270 J/cm2 e 450 J/cm2 determinou inativa??o significativa da Candida sp., sendo a C. albicans mais sens?vel que as outras esp?cies. As c?lulas epiteliais HEp-2 foram menos sens?veis ? PDT do que a Candida sp., apresentando m?dia de inativa??o fotodin?mica 2,24 vezes menor que a das c?lulas f?ngicas, fato que indica a exist?ncia de uma margem de seguran?a para aplica??o in vivo. S?o necess?rios novos estudos in vitro e em modelos animais para melhor fundamentarem-se os resultados obtidos
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Avalia??o da resist?ncia ? fratura de coroas CAD-CAM sobre pilares s?lidosStona, Deborah 25 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-25 / The aim of the study was to evaluate the fracture resistance of ceramic crowns using Cerec CAD-CAM system on solid pillars. Sixty replica synocta implant and RN solid abutment were embedded in acrylic resin, being randomly assigned (n=20 per group). Three types of ceramics were used: Mark II (feldspar), IPS Empress CAD (leucite) and IPS e.max CAD (lithium disilicate). The crowns were fabricated by CAD-CAM system using the Cerec software version 4.1. After receiving glaze and were cemented with RelyX U200 cement under load of 1 Kg Half of the specimens of each ceramic was subjected to endurance EMIC DL-2000 test fracture in a universal testing machine with a speed of 1 mm / minute and the other half after 1,000,000 cycles of mechanical stress with a load of 100 N. According to two-way ANOVA, the interaction between the material and mechanical cycling was significant (p = 0.0001). According to Tukey test (α = 5%) the fracture toughness without mechanical cycling and mechanical cycling, respectively, of Mark II (405N/454N) was statistically lower than ceramic IPS Empress CAD (1169N/1240N) and IPS e.max CAD (1378N/1025N) (p < 0.05). The ceramic IPS Empress CAD and IPS e.max CAD not differ statistically (p > 0.05). There was no statistical difference in the resistance to cyclic loading with and without fracture to the Mark II and IPS Empress CAD (p > 0.05, Student's t test) ceramics. For ceramic IPS e.max CAD, the fracture resistance without mechanical cycling was statistically superior to that obtained with cycling (p < 0.05). The ceramic IPS Empress CAD and IPS e.max CAD showed higher fracture resistance compared to ceramic Mark II. The cyclic loading negatively influenced only IPS e.max CAD. / O objetivo do estudo foi avaliar a resist?ncia ? fratura de coroas cer?micas utilizando o sistema CAD-CAM Cerec sobre pilares s?lidos. Sessenta r?plicas de implante synocta RN e pilar s?lido foram inclu?dos em resina acr?lica autopolimeriz?vel, sendo divididas aleatoriamente (n=20 por grupo). Tr?s tipos de cer?micas foram utilizadas: Mark II (feldsp?tica), IPS Empress CAD (leucita) e IPS e.max CAD (dissilicato de l?tio). As coroas foram confeccionadas atrav?s do sistema CAD-CAM utilizando o software Cerec vers?o 4.1. Ap?s receberam glaze e foram cimentadas com RelyX U200 sob carga de cimenta??o de 1 Kg. Metade dos corpos de prova de cada cer?mica foi submetida ao teste de resist?ncia ? fratura em m?quina de ensaio universal EMIC-DL 2000 com velocidade de 1 mm/minuto e, a outra metade, ap?s 1.000.000 de ciclos de fadiga mec?nica com carga de 100 N. Segundo ANOVA de duas vias, a intera??o entre material e ciclagem mec?nica foi significativa (p=0,0001). De acordo com o teste de Tukey (α=5%) a resist?ncia ? fratura, sem ciclagem mec?nica e com ciclagem mec?nica respectivamente, da cer?mica Mark II (405N/454N) foi estatisticamente menor que as cer?micas IPS Empress CAD (1169N/1240N) e IPS e.max CAD (1378N/1025N) (p<0,05). As cer?micas IPS Empress CAD e IPS e.max CAD n?o diferiram estatisticamente entre si (p>0,05). N?o houve diferen?a estat?stica na resist?ncia ? fratura sem e com ciclagem mec?nica para as cer?micas Mark II e IPS Empress CAD (p>0,05, teste t-student). Para a cer?mica IPS e.max CAD, a resist?ncia ? fratura sem ciclagem mec?nica foi estatisticamente superior ? obtida com ciclagem (p<0,05). As cer?micas IPS Empress CAD e IPS e.max CAD apresentaram maior resist?ncia ? fratura quando comparadas com a cer?mica Mark II. A ciclagem mec?nica influenciou negativamente apenas a cer?mica IPS e.max CAD.
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Estudo imunoistoqu?mico da express?o do fator tecidual e da densidade microvascular em esp?cimes de ressec??o endosc?pica de carcinoma urotelial de bexigaDornelles Neto, Eurico Jaques 28 March 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-03-28 / A express?o do fator tecidual (FT) tem sido associada ? maior densidade microvascular e a um pior progn?stico nos tumores de pr?stata, mama, pulm?o, c?lon e reto. Nos c?nceres de bexiga, maior densidade microvascular tem se correlacionado com tumores de maior grau, est?gio e mau progn?stico, mas a express?o do FT foi pouco estudada. No presente estudo, analisamos a express?o imunoistoqu?mica do FT e a densidade microvascular em esp?cimes de 67 pacientes submetidos ? ressec??o transuretral de carcinomas uroteliais de bexiga, correlacionando-os a est?gio, grau e sobrevida geral. A densidade microvascular n?o se correlacionou com est?gio, grau ou sobrevida em nossa amostragem. Cinq?enta e um pacientes (76,01%) apresentaram tumores com >25% das c?lulas tumorais corando-se intensamente para FT. N?o houve associa??o entre express?o do FT, est?gio e grau. No entanto, identificou-se correla??o estatisticamente significativa entre a intensidade de express?o do FT e a densidade microvascular. Al?m disso, houve diferen?a estat?stica quanto ? sobrevida geral entre o grupo com baixa express?o ( 25% das c?lulas corando-se intensamente) e os grupos com alta express?o (>25% das c?lulas corando-se intensamente) de FT. Sumarizando, maior express?o do FT correlacionou-se ? maior angiog?nese tumoral e ? menor sobrevida geral em nossa casu?stica.
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Do carcinoma cervical in situ ao invasor : o papel da express?o da P16INK4a na progress?o e na recorr?nciaAnschau, Fernando 18 August 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-08-18 / A fim de investigar a express?o da p16INK4a no carcinoma cervical e sua rela??o com a transforma??o de carcinoma in situ em invasor, al?m de seu papel na recorr?ncia das les?es cervicais, uma s?rie de 90 pacientes com carcinoma cervical (49 com les?o in situ e 41 com les?o invasora) foi selecionada, entre julho de 2001 e setembro de 2002. Os grupos com les?o in situ e invasora foram pareados para uma s?rie de vari?veis de risco do c?ncer cervical e as pacientes mantidas em acompanhamento por 60 meses. As visitas de acompanhamento ocorreram a cada 6 meses nos primeiros tr?s anos e anualmente at? o quinto ano. 87,9% das pacientes com les?o invasora apresentavam super express?o da p16INK4a, em compara??o com 37,6% daquelas com les?o in situ (X2:13,68; 2GL; p=0,0002; OR:12,08), demonstrando ser a super express?o da p16INK4a um risco de invas?o da membrana basal por c?lulas displ?sicas. Tamb?m observamos associa??o entre super express?o da p16INK4a e estadiamento do c?ncer (X2:18,38; 6GL; p=0,0003). A an?lise prospectiva, quando controlada a intera??o com os grupos de les?o cervical (c?lculo de regress?o de Cox), demonstra risco de 4,83 atribu?do ? super express?o da p16INK4a para recorr?ncia, mas sem signific?ncia estat?stica (p=0,14).
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A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogasRosado, Leonardo Astolfi 23 February 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-02-23 / A tuberculose prevalece como uma das principais causas de morte no mundo ocasionadas por um ?nico agente infeccioso, o Mycobacterium tuberculosis. A enzima Chiquimato Quinase (MtSK) codificada pelo gene aroK de M. tuberculosis, quinta enzima da via do chiquimato. catalisa a transfer?ncia de um grupo fosfato do ATP para o carbono 3 do grupo hidroxila do chiquimato, formando chiquimato-3-fosfato e ADP. A interrup??o do gene aroK demonstrou que a enzima MfSK ? essencial para a viabilidade do M. tuberculosis. Neste trabalho, apresentamos a purifica??o da enzima MtSK at? a homogeneidade, an?lise por espectrometria de massa, sequenciamento de amino?cidos da por??o N-Terminal, determina??o do estado oligom?rico da enzima em solu??o, cin?tica em estado estacion?rio, espectroscopia de fluoresc?ncia e calorimetria de titula??o isot?rmica. Os resultados encontrados sugerem que a rea??o catalisada pela enzima monom?rica MtSK segue um mecanismo em equil?brio-r?pido aleat?rio para a adi??o dos substratos e uma libera??o ordenada dos produtos, onde a libera??o do chiquimato-3-fosfato ? seguida pela libera??o do ADP, resultando na enzima na sua forma livre. Os resultados de calorimetria demonstraram uma grande diferen?a de calor gerada na associa??o da enzima livre aos seus ligantes, revelando assinaturas termodin?micas de intera??es n?o-covalentes para cada processo de liga??o. Estes resultados ajudaram a compreender melhor o modo de a??o da enzima MtSK e podem subsequentemente serem ?teis para guiar o desenho racional de inibidores relacionados a esta enzima e que possam ser avaliados posteriormente como anti-TB.
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Estudos bioqu?micos da enzima GMP sintase (EC 6.3.5.2) de Mycobacterium Tuberculosis H37RV como primeiro passo para a obten??o de amostras atenuadasFranco, Tathyana Mar Amorim 24 August 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-08-24 / Aproximadamente 1/3 da popula??o mundial est? infectada com o Mycobacterium tuberculosis, agente etiol?gico da tuberculose humana (TB). A incid?ncia global e o constante aumento da resist?ncia ?s drogas tornam evidente a urgente necessidade do desenvolvimento de novas drogas, para o tratamento, e vacinas, para a preven??o desta doen?a. As enzimas das vias metab?licas fundamentais s?o vistas como atrativos alvos moleculares definidos. A enzima guanosina monofosfato sintase (GMPS), uma amidotransferase do tipo G, catalisa a amina??o da xantosina monofosfato (XMP) ? guanosina monofosfato (GMP), em uma rea??o que ocorre em dois dom?nios, o glutamina amidotrasferase e o adenosina trifosfato (ATP) pirofosfatase, onde ocorre o ataque do intermedi?rio altamente reativo adenil-XMP, levando a forma??o de GMP. O gene guaA (Rv3396c), o qual codifica a enzima GMPS, foi identificado por homologia de sequ?ncia no genoma de M. tuberculosis H37Rv. N?s evidenciamos que a forma??o do adenil-XMP causa uma inibi??o da enzima pelo aumento dos n?veis de ATP e XMP. Al?m disso, a GMPS de M. tuberculosis (MtGMPS), apresentou um comportamento alost?rico na varia??o dos n?veis de XMP, demonstrando cooperatividade positiva e diferentes aspectos cin?ticos dos j? reportados para as enzimas de humanos e Escherichia coli. O mecanismo ping-pong foi proposto com base nos resultados evidenciados pela libera??o de pirofosfato (PPi) depois da liga??o da am?nia, corroborando com os dados previamente publicados para outras GMPSs. Nossos resultados podem ser ?teis por revelar o papel desta enzima no metabolismo de purinas do M. tuberculosis, fornecendo conhecimento para o desenvolvimento de novas drogas e vacinas para o tratamento e preven??o, respectivamente
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