Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2017-07-17T11:35:24Z No. of bitstreams: 2 Tese - Daniel Silva Goulart -2017.pdf: 3553497 bytes, checksum: 6ec13ae3cfbad63a4fdfdcf4e9b0dab1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-07-18T10:31:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Daniel Silva Goulart -2017.pdf: 3553497 bytes, checksum: 6ec13ae3cfbad63a4fdfdcf4e9b0dab1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-18T10:31:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Daniel Silva Goulart -2017.pdf: 3553497 bytes, checksum: 6ec13ae3cfbad63a4fdfdcf4e9b0dab1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-03-02 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The genus Brachiaria has provided important forage species to the countries located in tropical regions. However, this genus of grass is associated with photosensitization and poisoning in animal production. Thus, the aim of this study was to establish the standard for collection, processing, and conservation of Brachiaria brizantha for protodioscin quantification and spore count from Pithomyces chartarum and the evaluation of guinea pig (Cavia porcellus) as an experimental model of poisoning by diosgenin. For Brachiaria brizantha evaluation, samples were collected from eight pastures, which were subdivided into young leaves, mature leaves, old leaves, and whole plant. After that, the samples were submitted to nine different drying and conservation treatments. After separation and treatment of the samples, saponins were quantified and spores were counted. In most of treatments, the young leaves presented larger amounts of protodioscin than the old leaves and the whole plant. The treatments that maintained the highest amounts of protodioscin were room temperature, oven, and oven with forced air circulation. No fungal spores were found in the pasture samples. Thus, we concluded that the concentration of protodioscin varies with the maturation stage of the leaves; drying at room temperature, in an oven, or in an oven with forced air circulation are the best methods, and freezing plants for preservation of protodioscin is not recommended. In the guinea pigs evaluation, 14 guinea pigs were divided into two groups, the treatment group (TG) and the control group (CG). The TG received 480 mg/kg of diosgenin and the CG received only vegetable oil. Both groups received the treatment for 30 days. Blood samples were collected on day 0 (M0) and day 30 (M30) for blood cell count and biochemical analyzes. In clinical biochemistry, the analyzes were performed for alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, gamma glutamyl trasferase, alkaline phosphatase, urea, creatinine, glucose, cholesterol, HDL, triglycerides, lactate, cholinesterase, and calcium. Hematology and biochemistry did not present alterations, which could not be related to hepatic disease caused by saponins. In histology, only one animal had bile duct hyperplasia, the other alterations observed were generally nonspecific. Therefore, we concluded that the administration of 480 mg/kg of diosgenin to guinea pigs did not produce significant hepatic lesions or hematological and biochemical alterations related to liver disease. / O gênero Brachiaria possui importantes espécies de forrageiras utilizadas em países localizados em regiões tropicais. No entanto, esse gênero de gramíneas está associado à fotossensibilização e intoxicações em animais de produção. Deste modo, objetivou-se com este estudo estabelecer o padrão para colheita, processamento e conservação de amostras de Brachiaria brizantha para quantificação de protodioscina e contagem de esporos de Pithomyces chartarum e a avaliação da Cavia porcellus (cobaias) como modelo experimental na intoxicação por diosgenina. Para a avaliação da Brachiaria brizantha, amostras foram colhidas de oito pastagens as quais foram subdivididas em folhas jovens, folhas maduras, folhas velhas e planta inteira e submetidas a nove diferentes métodos de processamento. Após separação e tratamento das amostras foi realizada a quantificação de saponinas e a contagem de esporos. Observou-se que na maioria dos tratamentos as folhas jovens apresentaram quantidades maiores de protodioscina que as folhas velhas e a planta inteira. Os tratamentos que mantiveram as maiores quantidades de protodioscina foram temperatura ambiente, estufa e estufa com ventilação forçada. Nas amostras das pastagens não foram encontrados esporos do fungo. Desta forma, conclui-se que a concentração de protodioscina é maior nas folhas jovens; a secagem em temperatura ambiente, em estufa ou em estufa de ventilação forçada são os melhores métodos para preservação de protodioscina e o congelamento de plantas para a quantificação de protodioscina não é recomendado. Para a avaliação das cobaias como modelos experimentais na intoxicação por diosgenina foram utilizadas 14 cobaias, divididas em dois grupos, o grupo tratado (GT) e o grupo controle (GC). O GT recebeu 480 mg/kg de diosgenina diluída em óleo vegetal e o GC recebeu somente o óleo vegetal, ambos por 30 dias. Para avaliação do hemograma e análises bioquímicas foram colhidas amostras sanguíneas no dia 0 (M0) e no dia 30 (M30). Na bioquímica plasmática foram realizadas análises para ALT, AST, GGT, ALP, ureia, creatinina, glicose, colesterol, HDL, triglicerídeos, lactato, colinesterase e cálcio. A hematologia e a bioquímica não apresentaram alterações relacionadas à doença hepática causada por saponinas. Na histologia apenas um animal apresentou hiperplasia de ductos biliares, as outras alterações observadas foram de forma geral inespecíficas. Conclui-se que, na dose utilizada, a administração da diosgenina a cobaias não produz lesões hepáticas expressivas nem alterações hematológicas e bioquímicas relacionadas a hepatopatia.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2014-09-01T14:42:53Z No. of bitstreams: 2 Dissertacao Juliana Job Serodio.pdf: 2829653 bytes, checksum: 540f534b828bef881f374e638c97a102 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-01T14:42:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao Juliana Job Serodio.pdf: 2829653 bytes, checksum: 540f534b828bef881f374e638c97a102 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-08-29 / The study aimed to evaluate bovines from different brazilian breeds that were submitted to experimental intoxication to Palicourea marcgravii A. St. Hill. Six animals from Nelore (G1), Curraleiro Pé-Duro (G2) and Pantaneiro (G3) breeds were used in the groups. The animals were experimental intoxicated with sodium monofluoracetate acid receiving one single dose of the compound in a dosage of 0,5kg/mg that was administered orally. In order to evaluate the animals, several exams were proceeded such as clinical (rectal temperature, heart and pulmonary rate and ruminal motricity),laboratorial (glucose, alcaline phosphatase, gamma glutamyl transferase, aspartase aminitranferase, creatinine, kinase, creatine, urea, bilirubin, total protein, albumin, globulin) and also histopatological examination. The bovines from G1 showed the first clinical signs between 4h28min and 5h55min and the whole group died after. First clinical signs presented by the G2 animals were between 2h45min and 4h05min after the plant was administered culminating in death of all animals. The main clinical signs observed was inapetence, jugular was dilated, tachycardia, tachypnea, paddling movements, vocalization, hypertermia and low ruminal motricity. The hematology and ALP results showed normal parameters in their results. However, GGT, bilirubin, urea and albumin showed relevant alterations that confirmed azotemia in animals that belonged to G1 and G2. Histopatology results showed multifocal citoplasmtic macrovacuolization and nuclei presenting picnose in epithelial cells from the convoluted tubules. The lesions that were found in the bovines kidneys’ were able to prove the efficacy of the intoxication protocol. The lower indexes of death were identified in Curraleiro Pé Duro bovines showing the greater resistency when compared to Nelore and Pantaneiro breeds. The shortest time interval between the plant intake and death suggest that Pantaneiro breed is more sensitive than Nelore and Curraleiro Pé Duro breeds. / O presente estudo teve como objetivo avaliar a resistência entre bovinos de diferentes raças à intoxicação experimental por Palicourea marcgravii A. St Hil. Foram utilizados seis bovinos de cada raça: Nelore(G1), Curraleiro Pé-Duro (G2) e Pantaneiro (G3). Os bovinos foram intoxicados experimentalmente por via oral na dose única de 0,5mg/kg do ácido monofluoracetato de sódio. Exames clínicos (temperatura retal, frequência cardíaca e respiratória e motricidade ruminal) e laboratoriais (glicose, fosfatase alcalina, gama glutamiltransferase, aspartato aminotranferase, creatina quinase, creatinina, ureia, bilirrubinas, proteínas totais, albumina e globulina), além dos exames histopatológicos foram realizados. Os bovinos G1 manifestaram os primeiros sinais clínicos entre 4h28min e 5h55min e todos morreram. Os animais G2 apresentaram os primeiros sinais clínicos entre 3h35min e 8h50min, três indivíduos morreram. Os bovinos G3 manifestaram os primeiros sinais clínicos entre 2h45min e 4h05min após a administração da planta e todos morreram. Os principais sinais observados foram inapetência, jugular distendida, taquicardia, taquipneia, movimentos de pedalagem, mugidos, hipertermia e diminuição da motricidade ruminal. Os resultados hematológicos e a dosagem de ALP foram insignificantes. Alterações de GGT, bilirrubina direta, ureia e albumina sugeriram danos hepáticos somente nos bovinos G1. Elevações de AST e CK indicaram alteração muscular nos três grupos raciais. Aumento dos níveis de creatinina e ureia confirmaram azotemia nos bovinos G1 e G2. Na histopatologia exceto em um bovino do G1, observou-se macrovacuolização citoplasmática multifocal em células epiteliais dos túbulos contorcidos, com picnose nuclear marcada. As lesões identificadas nos rins dos bovinos comprovaram a eficácia do protocolo de intoxicação. O menor índice de morte dos bovinos da raça Curraleiro indica uma maior resistência em comparação aos bovinos Nelore e Pantaneiro. O menor intervalo de tempo entre o fornecimento da planta e morte sugere que os bovinos Pantaneiros são mais sensíveis que os Nelores e Curraleiro Pé-Duro.

Introdução: A fibrose pulmonar idiopática (FPI) é definida como um tipo de doença fibrosante intersticial crônica de etiologia desconhecida limitada aos pulmões e que apresenta padrão histológico de pneumonia intersticial usual. A prevalência de FPI é estimada em, aproximadamente, 20/100.000 em homens e em 13/100.000 em mulheres, sendo que a idade média do diagnóstico é 67 anos e a sobrevivência média é 2 a 5 anos. Estima-se que 5 milhões de pessoas sejam afetadas em todo o mundo. O tratamento clínico atual está associado com melhora parcial e transitória, com resultados duvidosos ou insatisfatórios. Na abordagem cirúrgica da FPI, tem destaque o transplante pulmonar, cuja realização é rara, devido à escassez de doadores e à limitação das equipes capazes de realizar tais procedimentos. A terapia celular é uma alternativa terapêutica com grande potencial de aplicabilidade na fibrose pulmonar. Objetivos: Utilizar um modelo de fibrose pulmonar induzida pela bleomicina em ratos para investigar os efeitos da terapia com células-tronco mesenquimais (CTM) e o meio condicionado no remodelamento pulmonar com objetivo de elucidar o mecanismo de ação das CTM e meio condicionado, na reversão da fibrose pulmonar. Para tanto, buscamos: 1) padronizar a cultura de células-tronco mesenquimais e meio de cultura; 2) caracterizar o modelo experimental de fibrose pulmonar induzida pela bleomicina por microscopia óptica antes e após o tratamento com CTM e meio de cultura; 3) avaliar a expressão de biomarcadores sorológicos (Fibrinogênio, Fator von Willebrand e PDGF); 4) quantificar a expressão de proteínas relacionadas ao estresse oxidativo (NOS), citocinas pró-inflamatórias e pró-fibróticas (IL-17 e TGF-beta) e pró-angiogênicas (VEGF e endotelina) por imuno-histoquímica; e 5) quantificar a deposição de fibras do colágeno I e V por imunofluorescência. Materiais e Métodos: Utilizou-se um total de 44 ratos Wistar machos albinos com peso médio de 250-300g e 8 semanas de idade. Quatro grupos experimentais foram compostos de 10 animais, que participaram do experimento divididos em três momentos: D0, D10 e eutanásia (D14 ou D21). Em D0, foi realizada a instilação orotraqueal de bleomicina na dose de 1,5 U/kg; em D10, foi realizada a infusão em veia caudal de células-tronco mesenquimais na dose de 106 CTM/Kg ou 200 ?l de meio condicionado. Para o preparo das CTM, foi obtido, em média, 1,2 g de tecido adiposo, procedida a dissociação com colagenase tipo I, sendo que a contagem média de células foi de 3,05 x 106 células linfomononucleares/g de tecido adiposo. Estas células foram cultivadas durante 21 dias em meio Knockout DMEM-F12 suplementado com 10% de soro fetal bovino. Os seguintes três critérios foram utilizados para comprovar o perfil das células-tronco mesenquimais: aderência plástica, expressão de CD90 por citometria de fluxo ( > 90%) e capacidade de diferenciação em três linhagens mesodérmicas. Em D10, um pool destas células alogênicas foi infundido intravenosamente, na veia caudal, a uma concentração de 1 x 106 células/ animal num volume de 200 ul de solução salina. Em D14 ou D21, os animais foram eutanasiados e analisados quanto ao peso e conforme análises microscópico-laboratoriais. As análises histológicas foram realizadas por dois especialistas diferentes em estudo duplo-cego. Os parâmetros de ganho de peso e recuperação microscópica do tecido pulmonar foram analisados em cada grupo. Resultados: Nossos dados mostram que as células-tronco mesenquimais oriundas do tecido adiposo abdominal de ratos Wistar tiveram seu perfil fenotípico, capacidade de adesão plástica e diferenciação em 3 linhagens mesodérmicas estabelecidas inequivocamente, conforme estabelecido internacionalmente pela ISSCR. As células-tronco mesenquimais e o meio condicionado induziram: a recuperação clínica após tratamento; a reversão da inflamação e de fibrose pulmonar induzida pela bleomicina; a reversão da arteriopatia no parênquima pulmonar distal; a redução das concentrações de fibrinogênio, fator von Willebrand e PDGF (marcadores sorológicos); a diminuição da expressão de enzimas oxidantes; a diminuição da expressão de endotelina e a modulação da expressão da proteína de remodelamento (IL-17), da ativação dos fibroblastos TGF-B e da síntese de colágeno. Conclusão: Neste estudo, comprovamos que as terapias com células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo e com o meio condicionado foram eficazes na modulação dos processos inflamatórios e fibrogênicos no modelo induzido por bleomicina, agindo na ativação miofibroblástica, e, também, na restauração tecidual e endotelial. Além disso, o meio condicionado se mostrou tão eficiente quanto as células-tronco propriamente ditas, no efetivo remodelamento pulmonar, devendo ser considerado como uma proposta terapêutica viável e inovadora / Introduction: Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is defined as a type of chronic interstitial fibrosing disease of unknown etiology limited to the lungs and presenting a histological pattern of usual interstitial pneumonia. The prevalence of IPF is estimated at approximately 20/100,000 in men and 13/100,000 in women, with the mean age of diagnosis being 67 years and the average survival is 2 to 5 years. It is estimated that 5 million people are affected worldwide. The current clinical treatment is associated with partial and transient improvement, with dubious or unsatisfactory results. In the surgical approach to IPF, pulmonary transplantation is a prominent feature, which is rare because of the scarcity of donors and the limitation of the teams capable of performing such procedures. Cell therapy is a therapeutic alternative with great potential for applicability in pulmonary fibrosis. Objectives: To use a model of bleomycin-induced lung fibrosis in rats to investigate the effects of mesenchymal stem cell (MSC) therapy and conditioned medium on lung remodeling in order to elucidate the mechanism of action of MSC and conditioned medium, in the reversion of pulmonary fibrosis. To do so, we aim to: 1) standardize the culture of mesenchymal stem cells and conditioned medium; 2) characterize the experimental model of lung fibrosis induced by bleomycin by optical microscopy before and after treatment with MSC and conditioned medium; 3) to evaluate the expression of serological biomarkers (Fibrinogen, Factor von Willebrand and PDGF); 4) to quantify the expression of proteins related to oxidative stress (NOS), pro-inflammatory and pro-fibrotic (IL-17 and TGF-beta) and pro-angiogenic cytokines (VEGF and endothelin) by immunohistochemistry; and 5) to quantify the deposition of collagen I and V fibers by immunofluorescence. Materials and methods: A total of 44 male albino Wistar rats weighing 250-300g and 8 weeks of age were used. Four experimental groups were composed of 10 animals, which participated in the experiment divided in three moments: D0, D10 and euthanasia (D14 or D21). In D0, orotracheal instillation of bleomycin at the dose of 1.5 U/ kg was performed; in D10 caudal vein infusion of mesenchymal stem cells at the dose of 106 MSC/ kg or 200 ul of conditioned medium was performed. To prepare the MSC, a mean of 1.2 g of adipose tissue was obtained, dissociated with type I collagenase and the mean cell count was 3.05 x 106 lymphomonuclear cells / g of adipose tissue. These cells were cultured for 21 days in DMEM-F12 Knockout medium supplemented with 10% fetal bovine serum. The following three criteria were used to prove the profile of mesenchymal stem cells: plastic adherence, expression of CD90 by flow cytometry ( > 90%) and differentiation capacity in three mesodermal lines. In D10, a pool of these allogeneic cells was infused intravenously into the caudal vein at a concentration of 1 x 106 cells / animal in a volume of 200 ul of saline. In D14 or D21 the animals were euthanized and analyzed for weight and microscopic-laboratory analyzes. Histological analyzes were performed by two different specialists in a double-blind study. The parameters of weight gain and microscopic recovery of lung tissue were analyzed in each group. Results: Our data show that the mesenchymal stem cells derived from the abdominal adipose tissue of Wistar rats had their phenotypic profile, plastic adhesion capacity and differentiation in 3 mesodermal lines established unequivocally, as established internationally by ISSCR. Mesenchymal stem cells and conditioned medium induced: clinical recovery after treatment; bleomycin-induced reversal of inflammation and pulmonary fibrosis; the reversal of arteriopathy in the distal pulmonary parenchyma; the reduction of fibrinogen, von Willebrand factor and PDGF concentrations (serologic markers); decreased expression of oxidizing enzymes; the reduction of endothelin expression and the modulation of the expression of the remodeling protein (IL-17), the activation of TGF-B fibroblasts and the synthesis of collagen. Conclusion: In this study we demonstrated that therapies with mesenchymal stem cells derived from adipose tissue and conditioned medium were effective in the modulation of inflammatory and fibrogenic processes in the bleomycin-induced model, acting to modulate myofibroblastic activation and also in tissue restoration and endothelial cells. In addition, the conditioned medium proved to be as efficient as the stem cells themselves, in effective pulmonary remodeling, and should be considered as a viable and innovative therapeutic proposal

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-10-04T23:54:46Z No. of bitstreams: 1 CarolinaAraujoSousa_DISSERT.pdf: 4069494 bytes, checksum: 9b768a46fbe08e2407ed147faed6bc74 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-10-16T20:38:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CarolinaAraujoSousa_DISSERT.pdf: 4069494 bytes, checksum: 9b768a46fbe08e2407ed147faed6bc74 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-16T20:38:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CarolinaAraujoSousa_DISSERT.pdf: 4069494 bytes, checksum: 9b768a46fbe08e2407ed147faed6bc74 (MD5) Previous issue date: 2017-08-31 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / A forma??o de circuitos neurais durante o desenvolvimento se d? atrav?s de uma complexa intera??o entre fatores gen?ticos e ambientais, que influenciam m?ltiplos eventos como a neurog?nese, a sinaptog?nese e a mieliniza??o. Em transtornos do desenvolvimento, como o transtorno do espectro autista (TEA), intercorr?ncias nesse processo levam ? m?-forma??o da circuitaria neural e, consequentemente, a d?ficits de intera??o social, interesses restritos e movimentos estereotipados, entre outros. Recentemente, realizamos em nosso laborat?rio a an?lise do transcriptoma do c?rtex frontal no modelo animal de autismo induzido por exposi??o a ?cido valpr?ico (VPA) in utero. Observamos que ratos com 15 dias de idade (P15) apresentam aumento da express?o de genes relacionados ? estabilidade sin?ptica e redu??o de genes relacionado ? mielina, sugerindo poss?veis mecanismos moleculares para as varia??es comportamentais previamente observadas nestes animais. Portanto, o objetivo desta disserta??o foi aprofundar este estudo investigando o padr?o de mieliniza??o no enc?falo de animais tratados com VPA em diferentes idades p?s-natais (infantil: P15 e adulta: P60). Para tanto, os grupos experimental e controle foram gerados, respectivamente, atrav?s da inje??o de VPA (500 mg/kg i.p.) ou salina em f?meas gr?vidas durante o dia embrion?rio 12.5 (E12.5). A an?lise da integridade da mielina foi realizada por duas abordagens: (1) an?lise da express?o de genes relacionados ? mielina (Mobp, Plp1, Mag e Klhl1), por PCR quantitativo, no c?rtex frontal de animais em P15; e (2) quantifica??o histol?gica da distribui??o de mielina em cinco sub-regi?es do c?rtex frontal e corpo caloso de animais P15 e P60. Dos quatro genes avaliados, observamos significativa diminui??o na express?o de Mobp e Mag em animais VPA em P15. A an?lise histol?gica de mielina mostrou redu??o significativa na intensidade de marca??o no c?rtex cingulado anterior em animais VPA em P60, por?m n?o detectou diferen?a na intensidade de marca??o em animais VPA em P15 quando comparados aos controles. Conclu?mos assim que animais VPA neonatos t?m reduzida express?o de genes relacionados a compacta??o da mielina, por?m sem altera??es no conte?do lip?dico da mielina nas ?reas analisadas. Animais adultos, por sua vez, apresentaram altera??es no conte?do lip?dico da mielina no c?rtex cingulado anterior. Em conjunto, estes resultados sugerem que dist?rbios na comunica??o entre circuitos frontais neste modelo de autismo podem ocorrer inicialmente devido altera??es na organiza??o da mielina, levando a redu??es de mielina no adulto. / The formation of brain circuits during neural development occurs through the interaction between timely regulated genetic and environmental signals, which influence multiple events such as neurogenesis, synaptogenesis, and myelination. In developmental disorders, such as autism spectrum disorders (ASD), deficits in these processes may lead to neural circuitry malformations and, in consequence, to social interaction deficits, restricted interests, and stereotyped movements, among others. Recently, we performed a transcriptome analysis of the frontal cortex of an animal model of autism induced by valproic acid (VPA) in utero in our lab. We observed that VPA animals at the postnatal age 15 (P15) show an increased expression of genes related to synaptic stability and a decrease in the expression of myelin-related genes, suggesting possible molecular mechanisms for the behavioral deficits previously observed in these animals. Therefore, the aim of this Master?s thesis was to further investigate the myelination pattern in the forebrain of VPA-treated rats at different postnatal ages (infant: P15 and adult: P60). For that, experimental and control groups were generated by injecting pregnant dams with 500 mg/Kg i.p. VPA or saline, respectively, on embryonic day 12.5 (E12.5). Analysis of myelin integrity was conducted by two different approaches: (1) gene expression analysis of myelin-related genes (Mobp, Plp1, Mag, and Klhl1) in dissected samples of the frontal cortex of P15 rats by quantitative real-time PCR; and (2) histological quantification of myelin distribution in five sub-regions of the frontal cortex and corpus callosum of P15 and P60 animals. Of all genes analyzed, we observed a significant decrease in Mobp and Mag expression in P15 VPA animals. Myelin analysis showed a significant reduction in myelin staining in the anterior cingulate cortex of VPA animals at P60, but no differences were observed at P15. In conclusion, infant VPA rats showed reduced expression of genes related to myelin assembly, without alterations in the lipid content of myelin in the areas analyzed. Adult animals, in contrast, showed a decrease in lipid content of myelin in the anterior cingulate cortex. Together, these results suggest that communication abnormalities in frontal circuits in this animal model of autism may occur initially due to alterations in myelin organization, leading to myelin reduction in adulthood.

A Síndrome do Desconforto Respiratório Agudo (SDRA) cursa com insuficiência respiratória e necessidade de ventilação mecânica invasiva (VMI). A mortalidade desta síndrome é elevada, mas pode ser reduzida com o uso de estratégias protetoras de ventilação mecânica que usam baixo de volume corrente (VC), geralmente 6ml/Kg ou menos, para minimizar a lesão causada pelo ventilador. Algumas destas estratégias de ventilação protetora utilizam valores elevados de PEEP que podem produzir instabilidade hemodinâmica. O objetivo deste estudo foi comparar, em um modelo experimental suíno de SDRA, os efeitos hemodinâmicos causados por duas estratégias de ventilação mecânica protetora: uma que utiliza PEEP ajustado pela Tomografia de Impedância Elétrica (OLA) e a outra, a mais comumente utilizada na prática clínica (ARDSNET), em que a PEEP é ajustada através de uma tabela. Foram utilizados 17 animais após randomização (8 no grupo OLA; 9 no grupo ARDSNET) que foram ventilados por 42 horas. As variáveis foram analisadas utilizando ANOVA de medidas repetidas. Antes da radomização, os grupos não apresentavam diferenças nos parâmetros hemodinâmicos e respiratórios. Considerando o período de 42 horas de estudo: 1) o grupo OLA utilizou valores maiores de PEEP, obteve uma melhor oxigenação, mas com valores de PaCO2 mais elevado; não houve diferença entre os grupos para o platô de pressão, mas o delta de pressão foi menor no grupo OLA o que pode minimizar o risco de lesão pulmonar induzida pelo ventilador; 2) o grupo OLA apresentou valores de índice cardíaco (IC) menores durante o estudo, mas não houve um comprometimento aos órgãos alvos conforme pode ser constatado pelos valores normais do lactato arterial e pelos valores de saturação do sangue venoso misto maiores do que no grupo ARDSNET; 3) pela análise de regressão múltipla pode se observar que o aumento da PEEP esteve associado com aumento da pressão média de artéria pulmonar (PMAP), mas redução do IC e da pressão arterial média, enquanto que o aumento da PaCO2 esteve associado com um aumento da PMAP e do IC. Concluímos que uma estratégia ventilatória protetora para SDRA cujo ajuste de PEEP é guiado por TIE, quando comparada com outra estratégia protetora comumente utilizada na prática clínica por um período de 42 horas, determina uso de valores maiores de PEEP, o que melhora a oxigenação e minimiza o delta de pressão, mas causa redução do IC que não resulta em isquemia tecidual. / The Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS) is associated with respiratory failure and need for invasive mechanical ventilation (IMV). The mortality of this syndrome is high, but can be reduced with the use of protective strategies of mechanical ventilation using low tidal volume (VT), usually 6ml/Kg or less, to minimize the damage caused by the ventilator. Some of these strategies of protective ventilation use high levels of PEEP that can produce hemodynamic instability. The aim of this study was to compare, in an experimental pig model of ARDS, the hemodynamic effects caused by two strategies of protective ventilation: one strategy adjusts PEEP values using Electrical Impedance Tomography (EIT-OLA) and the other, the most commonly used in clinical practice (ARDSNET), in which PEEP is adjusted through a table. Seventeen animals were randomized (8 in OLA group; 9 in ARDSNET group) that were ventilated for 42 hours. The variables were analyzed using repeated measures ANOVA. Before randomization, the groups had no difference in hemodynamic and respiratory parameters. Considering the period of 42 hours of study: 1) OLA group used higher values of PEEP, had a better oxygenation but with higher values of PaCO2; there was no difference between groups for the plateau pressure, but the delta pressure was lower in OLA group which can minimize the risk for ventilator-induced lung injury; 2) the OLA group showed lower values of cardiac index (CI) during the study, but there was no damage to target organs as showed by normal blood lactate values and values of mixed venous blood saturation greater than in ARDSNET; 3) multiple regression analysis revealed that, increasing PEEP was associated with increasing in mean pulmonary artery pressure (MPAP), but reduction CI and mean arterial pressure, while increasing in PaCO2 was associated with an increase in MPAP and CI. We conclude that a protective ventilatory strategy for ARDS whose setting of PEEP is guided by EIT, when compared with other protective strategy commonly used in clinical practice for a period of 42 hours requires the use of higher values of PEEP, which improves oxygenation and minimizes delta pressure, but causes reduction of CI that does not result in tissue ischemia.

Orientador: Lourenço Sbragia Neto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T11:31:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nassr_AzizeCristinaCapelli_D.pdf: 6642584 bytes, checksum: 60fb43046c34664559a19ebb364b282b (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A Hérnia Diafragmática Congênita (HDC) é um defeito da formação do músculo diafragma que incide em aproximadamente 1:2500 nascidos vivos e apresenta altos índices de mortalidade fetal e neonatal decorrentes da hipoplasia e da hipertensão pulmonares. Este defeito pode ser induzido experimentalmente em ratas grávidas administrando o herbicida nitrofen que causa HDC em 24% dos fetos. A análise microscópica do pulmão da HDC demonstra a presença de hipolasia pulmonar além de alveolização e vascularização alterada. Um dos fatores de crescimento envolvidos no desenvolvimento vascular é o VEGF (vascular endothelial growth factor) e seus receptores, no entanto ainda não se conhece como a expressão desta glicoproteína e de seus receptores varia ao longo do desenvolvimento pulmonar fetal nesta doença. Utilizando o modelo experimental de HDC induzido pelo nitrofen (2,4-dicloro-4'nitrodifenil éter) investigamos o grau de hipoplasia pulmonar e por meio de análise imunoistoquímica, comparamos a expressão dos receptores para o VEGF em três fases do desenvolvimento pulmonar, pseudoglandular, canalicular e sacular de fetos de ratos normais e com HDC. Dividimos o experimento em ratas da raça Sprague-Dawley em três grupos: controle externo (CE), exposto ao óleo de oliva (OO) e expostas ao nitrofen com e sem HDC. Estudamos quatro grupos de 20 fetos cada em cinco dias gestacionais (DG) diferentes 17,5, 18,5, 19,5, 20,5 e 21,5. As variáveis morfológicas estudadas foram: peso corporal (PC), peso pulmonar total (PPT), peso do pulmão esquerdo (PPE), relação PPT/PC, volume pulmonar total (VPT) e volume do pulmão esquerdo (VPE). As variáveis histométricas estudadas foram: parênquima pulmonar (Par), espaço aéreo (EA), densidade do parênquima (DAP) e volume do parênquima do pulmão esquerdo. A avaliação imumohistoquímica foi realizada por meio da contagem de pontos de receptor de VEGFR-1 e 2. Obtivemos 37 % (100/270) de HDC nas ratas expostas ao nitrofen, todas variáveis morfológicas e histométricas indicam diminuição dos resultados no grupo nitrofen com e sem HDC em relação aos demais, mas que se acentuam mais ainda no grupo HDC. Essas alterações são mais evidentes a partir dos DG 18,5 e 19,5. A imunomarcação para os receptores VEGFR-1 aumentou nos grupos nitrofen e foram progressivamente maiores no grupo nitrofen com HDC (p<0,005) que os fetos dos grupo CE e OO a partir do dia gestacional 17,5, fase pseudoglandular com pico máximo no dia gestacional 19,5. O mesmo ocorreu com os receptores de VEGFR-2 a partir do dia gestacional 17,5, fase pseudoglandular até o dia 21,5 fase sacular do desenvolvimento pulmonar. Concluímos que o modelo é valido e que os fetos expostos ao nitrofen com e sem HDC apresentam hipoplasia pulmonar primária sendo mais acentuada nos fetos portadores de HDC. O mesmo resultado ocorre com imunomarcação para os receptores de VEGFR-1 e 2 que foram maiores na HDC. / Abstract: The Congenital Diaphragmatic Hernia (CDH) is a defect in the embryogenesis of the diaphragm with an incidence of 1:2500 liveborns and high fetal and neonatal mortality due to pulmonary hypoplasia and hypertension. This defect can be experimentally induced in fetuses of pregnant rats by the administration of Nitrofen, an herbicide that causes CDH in 24% of the fetuses. The histology of lungs in CDH shows pulmonary hipoplasia and not only the alveolarization but also the vascularization are affected. These changes lead to a high neonatal mortality because of the thickening of the middle layer of the arterioles causing pulmonary hypertension. One of the factors involved in the growth of the arterioles is VEGF (vascular endothelial growth factor) and its receptors; however, it is not known how the expression of this glycoprotein and its receptors change during lung development in this disease. In Brazil, the experimental model has never been tested. So, we tested the model and verified the degree of pulmonary hipoplasia and, using imunohystochemistry, we compared the expression of the receptor of VEGF in three different stages of lung development, pseudoglandular, canalicular and saccular, of normal rat fetuses and fetuses with CDH. Female Sprague-Dawley rats were divided in three groups: external control (EC), exposed to olive oil (OO) and exposed to nitrofen (N). We studied four groups - EC, OO, N with CDH and N without CDH - with 20 fetuses in each five different gestational days (GD) 17,5, 18,5, 19,5, 20,5, 21,5. The morphologic variables studied were: body weight (BW), total lung weight (TLW), left lung weight (LLW), relationship TLW/BW, total lung volume (TLV) and left lung volume (LLV). The hystometric variables studied were: lung parenchyma (LP), air space (AS), left lung parenchyma density (PD) and left lung parenchyma volume (PV). The immunohystochemistry variables were: points positive and negative for the receptor for VEGF 1 and 2. We had 37% (100/270) of CDH frequency in the fetuses exposed to nitrofen. All the morphological and hystometrical variables show a reduction in the nitrofen group with and without CDH, which were more pronounced in the group of fetuses with CDH. These changes are more evident from the GD 18,5 and 19,5 on. The receptors VEGFR-1 e 2 are increased in the nitrofen groups with and without CDH, but this increase is higher in the fetuses with CDH. We conclude that the model is valid and that the fetuses exposed to nitrofen with and without CDH show primary pulmonary hypoplasia that is more pronounced in CDH, the same is also observed in the receptors of VEGFR-1 and 2. / Doutorado / Pesquisa Experimental / Doutor em Cirurgia

Os Galea spixii são roedores que tem despertado o interesse de pesquisadores devido ao seu peculiar dimorfismo sexual, uma vez que, as fêmeas possuem a genitália externa com características masculinizadas. O objetivo da presente pesquisa foi estabelecer os parâmetros morfológicos do desenvolvimento e diferenciação sexual de machos e fêmeas durante o período intrauterino e as possíveis fontes de produção de hormônios andrógenos e estrógenos durante a gestação. Foram utilizados conceptos provenientes de 30 fêmeas gestantes. Foi descrita a concentração hormonal das gestantes. Em seguida, os órgãos genitais dos conceptos foram analisados macroscopicamente e microscopicamente. E, para detectar possíveis fontes de andrógenos e estrógenos, as placentas, ovários e testículos foram submetidos a técnicas imunológicas de detecção de enzimas esteroidogênicas. Aos 25 dias de gestação (DG) se inicia o processo de diferenciação sexual das gônadas (para formar os ovários ou os testículos) e da genitália externa. O tubérculo genital sofre a canalização da uretra aos 30 DG para formar o pênis nos machos e aos 40 DG para formar o clitóris das fêmeas. Nos machos, a partir dos ductos mesonéfricos, se diferenciam os ductos epididimários e os ductos deferentes. Nas fêmeas, os ductos paramesonéfricos formam as tubas e cornos uterinos, o útero parcialmente duplo e a porção cranial da vagina. A porção caudal se origina do seio urogenital e a membrana de oclusão vaginal, da membrana urogenital. Também ficou demonstrado que, a concentração de testosterona sofre grande aumento, dos 25 DG até o final da gestação e que o mesmo não ocorre com o estradiol. Os resultados para detecção de enzimas esteroidogênicas sugerem que, a placenta pode ser o órgão que atua na produção de hormônios andrógenos e pode não realizar a conversão desses hormônios em estrógenos, devido à ausência da enzima responsável por este processo. Por fim, os testículos e ovários também podem contribuir com a produção dos principais andrógenos e o ovário também possui a enzima necessária para a produção de estrógenos. / Galea spixii are rodents that have aroused the interest of researchers because of their peculiar sexual dimorphism, since females have the external genitalia with masculinized characteristics. The aim of the present research was to establish the morphological parameters of the development and sexual differentiation of males and females during the intrauterine period and the possible sources of androgen and estrogen hormones production during pregnancy. Concepts from 30 pregnant females were used. The hormonal concentrations of pregnant were described. Then, the genital organs of the concepts were analyzed macroscopically and microscopically. And, to detect possible sources of androgens and estrogens, placentas, ovaries and testes were subjected to immunological techniques for the detection of steroidogenic enzymes. At 25 days of gestation (DG) the process of sexual differentiation of the gonads (to form the ovaries or testicles) and the external genitalia begins. The genital tubercle undergoes channeling of the urethra at 30 DG to form the penis in males and at 40 DG to form the clitoris of females. In males, the epididymal ducts and the vas deferens differentiate from the mesonephric ducts. In females, the paramesonephric ducts form the uterine tubes and horns, the partially double uterus and the cranial portion of the vagina. The caudal portion originates from the urogenital sinus and the vaginal closure membrane originates from the urogenital membrane. It has also been shown that the testosterone concentration is greatly increased from 25 DG until the end of gestation and that the same does not occur with estradiol. The results for the detection of steroidogenic enzymes suggest that the placenta may be the organ that acts in the production of androgen hormones and may not perform the conversion of these hormones into estrogens due to the absence of the enzyme responsible for this process. Finally, the testicles and ovaries can also contribute to the production of the main androgens and the ovary also has the enzyme necessary for the production of estrogens.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2018-06-06T15:30:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_debora_silva.pdf: 1913075 bytes, checksum: c12211dbca8293598c05c824e8e81e14 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-06-08T11:36:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tese_debora_silva.pdf: 1913075 bytes, checksum: c12211dbca8293598c05c824e8e81e14 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-08T11:36:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tese_debora_silva.pdf: 1913075 bytes, checksum: c12211dbca8293598c05c824e8e81e14 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-09-27 / O herpesvírus felino tipo 1 (FHV-1) afeta principalmente o trato respiratório superior, provocando rinite, ceratite ulcerativa e conjuntivite, mas é capaz de promover doença sistêmica, provocando pneumonia, necrose hepática, emaciação, abortos e dermatite. O tratamento é sintomático, pois não há um antiviral específico contra o FHV-1. Dessa forma, a pesquisa por compostos antivirais com atividade específica contra o FHV-1 é urgente e necessária. No entanto, pesquisas tendo o gato como modelo experimental são difíceis de serem conduzidas por envolverem questões éticas e humanitárias. O camundongo é um modelo experimental amplamente utilizado na medicina humana e veterinária, mas até o momento não há relatos sobre a infecção experimental de camundongos com o FHV-1. O presente estudo objetivou utilizar camundongos BALB/c como modelos experimentais para reproduzir a infecção pelo FHV-1 e avaliar a eficácia antiviral de diferentes compostos in vivo. Três grupos de 14 animais cada foram infectados e tratados com ganciclovir, lactoferrina e o peptídeo P34. Um grupo de 14 animais, grupo controle positivo, foi infectado com FHV-1 e não recebeu tratamento. Outro grupo de 14 animais não foi infectado nem recebeu tratamento (grupo controle negativo). Os animais foram pesados e avaliados diariamente para registrar o desenvolvimento ou não de sinais clínicos. Todos os tratamentos iniciaram 24 h pós-infecção, tiveram duração de 10 dias e foram administrados uma vez ao dia por meio de gavagem (lactoferrina e P34) e injeção intraperitoneal (ganciclovir). Após o término do tratamento foi realizada eutanásia e coleta dos órgãos (fígado, rim, baço e pulmão) para avaliação histopatológica e qPCR. Os resultados foram analisados pelo método analítico Kruskall-Wallis e não foram observadas diferenças estatisticamente significativas no ganho de peso entre os grupos de animais. Os animais infectados e não tratados desenvolveram sinais clínicos típicos de infecção pelo FHV-1, como blefarite, conjuntivite, blefaroespasmo, secreção ocular uni ou bilateral e fotofobia. Os resultados demonstraram que todos os animais foram capazes de se infectar com FHV-1, produzindo doença local e/ou sistêmica em diferentes graus de severidade. Lesões histopatológicas puderam ser observadas no pulmão (pneumonia intersticial, edema, congestão e corpúsculos de inclusão intranucleares), no fígado (congestão, vacuolização de hepatócitos, hepatite, necrose e corpúsculos de inclusão intranucleares), no baço (depleção linfoide) e no rim (nefrite intersticial e nefrose tubular). O órgão que teve maior detecção de DNA viral foi o pulmão, seguido de fígado, baço e rim. Os tratamentos utilizados neste trabalho, na dose, via e frequência de administração não foram capazes de reduzir a carga viral nos animais tratados. Por esta razão, novas pesquisas deverão ser conduzidas para avaliar essas mesmas drogas, na mesma espécie animal, porém com um diferente regime de tratamento. Os dados gerados neste trabalho sobre a patogênese do FHV-1 em camundongos são inéditos, visto que até o momento só há na literatura relatos de infecção experimental com o FHV-1 no próprio gato, o que torna o camundongo uma opção viável para estudos sobre a patogênese e avaliação de antivirais contra o FHV-1. / Feline herpesvirus type 1 (FHV-1) affects mainly the upper respiratory tract, causing rhinitis, ulcerative keratitis and conjunctivitis, but is able to induce systemic disease, causing pneumonia, hepatic necrosis, emaciation, abortion and dermatitis. Treatment is symptomatic, because there is no specific antiviral against FHV-1. This way, the search for antiviral compounds with activity particularly against FHV-1 is urgent and necessary. Notwithstanding, researches having the cat as the experimental model are difficult to be carried out because of ethical and humanitary concerns. The mouse is an experimental model used widely in human and veterinary medicine, but hitherto there are no reports about experimental infection of mice with FHV-1. The present study aimed to use BALB/c mice as experimental models to reproduce the infection with FHV-1 and evaluat the antiviral efficacy of different compounds in vivo. Three groups of 14 animals each were infected and treated with ganciclovir, lactoferrin and the peptide P34. A group of 14 animals, positive control group, was infected with FHV-1 and did not receive treatment.another group of 14 animals was not infecte dor treated (negative control group). Animals were weighed and evaluated daily to record the development of clinical signs or not. All the treatments started 24 h post-infection, had ten days of duration and were administered once a day by gavage (lactoferrin and P34) and intraperitoneal injection (ganciclovir). After the end of the treatment, euthanasia was performed and the organs (liver, kidney, spleen and lung) were collected for histopathology and qPCR. Results were analyzed by the Kruskall-Wallis analytical method and differences statistically significant wer not observed in body weight among the groups. The infected and not treated animals developed typical clinical signs of FHV-1 infection, like blepharitis, conjunctivitis, blepharoespasm, uni or bilateral ocular secretion and photophobia. The results demonstrated that all the animals were able to be infected with FHV-1, producing local and/or systemic disease in different degrees of severity. Histopathological lesions could be observed in lungs (interstitial pneumonia, edema, congestion and intranuclear inclusion bodies), in the liver (congestion, hepatocyte vacuolization, hepatitis, necrosis and e intranuclear inclusion bodies), in the spleen (lymphoid depletion) and in the kidneys (interstitial nephritis and tubular nephrose). The organ with higher viral DNA detection was the lung, followed by the liver, spleen and Kidney. The treatments used in this work, in the dose, via and frequence of administration were not able to reduce viral load in the treated animals. For that reason, new researches might be conducted to evaluate the same drugs, in the same species, however with a different regimen of treatment. Data generated in this experimental work about the pathogenesis of FHV-1 in mice are extraordinary, since until this moment there are in the literature just reports of experimental infection with FHV-1 using the cat itself, what makes the mouse a viable option to study the pathogenesis of FHV-1 and to evaluate the antiviral activity of drugs against the virus.

Aiming at to develop a model of experimental induction of patent ductus arterious by thoracotomy, to study a corrective technique for the experimental defect by video-assisted thoracic surgery (VATS) and to evaluate eventual adhesions by thoracoscopy, three experiments were done. For each experiment were used 14 adult mongrel dogs, weighting 10 to 20 kg. In the PDA induction experiment it was possible to implant the autologous graft in the same anatomical localization of the congenital PDA, the left subclavy artery can be used as a patent graft simulating PDA, and this model did not cause cardiac injuries (detectable by visualization and CK and CKMB dosages). In conclusion, this model can be used as a base for new researches for the treatment of PDA, for the training of surgical correction technics and for other studies in veterinary medicine cardiology. In the proposed correction technique, three work ports and the optics were enough and adequately located for the correction of the PDA; surgical materials for vascular surgery can be used for the accomplishment of this technique; the positioning of the surgical team, the patient, the equipments and the instruments were adequated; the knot of Roeder was effective; this correction technique was viable up to five days after the induction of the PDA. In conclusion, this technique is effective and can be used on clinical cases for the occlusion of the congenital PDA and in the training of video-endoscopic surgeons. In the adhesions evaluation study, it was observed that thoracotomy and VATS induced the adhesions formation; these adhesions were located along VATS and thoracotomy incisions, and their extension was smaller after VATS, due to smaller tissue damage extension; it was possible to lise the adhesions by thoracoscopy in up to five days of postoperative, being necessary two work ports; the increase of the CK seric levels was proportional to the tissue damage. In conclusion, thoracotomy and VATS induce the formation of adhesions. High incidence of adhesions post thoracotomy and post VATS may lead to serious surgical risks and requires special care in future surgical reinterventions. This scintific work was approved by the animal welfare committee (012/2005) of the Universidade Federal de Santa Maria and all the animals used in this work were adopted. / Objetivando-se desenvolver um modelo de indução experimental de ducto arterioso patente por toracotomia, estudar uma técnica corretiva do defeito experimental por cirurgia torácica vídeo-assistida (CTVA) e avaliar eventuais aderências por toracoscopia, realizaramse três experimentos. Foram utilizados, para cada experimento, 14 cães adultos sem raça definida, cujos pesos variaram de 10 a 20 kg. Quanto ao modelo de indução de DAP, foi possível implantar-se enxerto autólogo na mesma localização anatômica do DAP congênito, a artéria subclávia esquerda pode ser utilizada para enxerto autólogo simulando DAP, apresentando patência, e não houve lesões cardíacas resultantes do modelo experimental proposto (passíveis de detecção por visualização e por dosagem de CK e CKMB). Concluiuse que o modelo, experimentalmente induzido, de D.A.P. com enxerto autólogo da artéria subclávia esquerda é viável. O presente modelo pode servir de base para novas pesquisas no tratamento de DAP, no treinamento em técnicas de correção cirúrgica e, ainda, em outros estudos da cardiologia veterinária. Na técnica proposta para correção do defeito experimental, os três portais de trabalho e a ótica foram suficientes e se localizaram adequadamente para a correção do DAP; materiais de cirurgia vascular podem ser empregados para a realização desta técnica; o posicionamento da equipe cirúrgica, do paciente, dos equipamentos e dos instrumentais foi adequado; o nó de Roeder mostrou-se efetivo; o procedimento proposto é viável no período de até cinco dias de pós-operatório. Concluiu-se que a técnica de correção de DAP congênito por CTVA se mostrou efetiva, podendo ser empregada na rotina clínica, e, também para treinamento de cirurgiões vídeo-endoscópicos. No estudo das aderências, as cirurgias de toracotomia e de CTVA predispõem a formação de aderências, que abrangem os locais de incisão de toracotomia e de CTVA. Sua extensão é menor após CTVA, devido à menor extensão do dano tecidual. É possível desfazerem-se as aderências por toracoscopia, em até cinco dias de pós-operatório, sendo necessários dois portais. O aumento dos níveis séricos de CK é proporcional ao trauma tecidual. Nas condições em que este trabalho foi realizado, concluiu-se que as cirurgias de toracotomia e de CTVA (cirurgia torácica vídeo assistida) levam a formação de aderências. A alta incidência de aderências póstoracotomia e pós-CTVA predispõe a sérios riscos cirúrgicos e requer cuidados especiais em futuras reintervenções cirúrgicas. Este trabalho foi aprovado pela comissão de ética da UFSM sob número 012/2006. Todos os animais foram encaminhados para adoção.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The bovine mammillits caused by bovine herpesvirus type 2 (BoHV-2) is an important disease of dairy cattle yet very little is known about its pathogenesis. This study aimed at reproducting and characterizing the clinical-pathological aspects of bovine herpesvirus mammillits in experimentally infected sheep. In the first experiment, ten lambs were inoculated in the nasal mucosa and the virological, clinical and serological aspects of acute infection were monitorated. Virus sheeding was detected in nasal secretions of 7 lambs between days 2 and 8 post inoculation (pi) and lasted from one to three days. A serous nasal discharge, changing to mucous and mucopurulent, was observed in all animals between days 2 and 5 pi. Seven lambs developed vesicles, pustules and erosions in the nasal mucosa between days 4 and 8 pi. All inoculated animals seroconverted to BoHV-2. Dexamethasone administration at day 40 pi was not followed by virus shedding, clinical recrudescence or seroconversion. In the second experiment, eight milking ewes were inoculated in the skin of the teats and udder, and monitorated thereafter regarding to viral replication, clinical signs and histological changes. Infectious virus was isolated from lesion swabs of one ewe on days 7 and 8 pi. Five animals developed lesions in inoculation sites between days 4 and 6 pi. The clinical-pathological aspects of the lesions were similar to those of natural infections and were characterizated by erythema, edema, papules, vesicles, exsudation and scabs. By histological examination, the lesions displayed cellular edema and linfoplasmocitic multifocal infiltrate surrounding blood vessels in the dermis. Moreover, eosinophilic intranuclear inclusion bodies were observed in inflamatory cells and syncitia. Virus particles resembling herpesvirus were observed by eletronic transmission microscopy. These results indicate that sheep are susceptible to BoHV-2 infection, and can develop clinical signs similar to those observed in cattle in natural outbreaks of herpes mammillitis. Thus, this animal species may be used as a model to study pathogenesis, vaccine development and antiviral drugs. / A mamilite causada pelo herpesvírus bovino tipo 2 (BoHV-2) é uma importante enfermidade de gado leiteiro, porém pouco se sabe sobre a sua patogenia. O presente trabalho teve como objetivos reproduzir e caracterizar em ovinos as manifestações clínico-patológicas associadas com a infecção natural de bovinos pelo BoHV-2. Em um primeiro experimento, dez cordeiros foram inoculados na mucosa nasal e a infecção aguda foi monitorada nos aspectos clínicos, virológicos e sorológicos. Excreção viral em secreções nasais foi detectada em 7/10 animais entre os dias 2 e 8 pós-inoculação (pi), com duração que variou entre um e três dias. Todos animais apresentaram secreção nasal serosa, passando a mucosa e mucopurulenta, entre os dias 2 e 5 pi, e sete deles apresentaram também hiperemia e o desenvolvimento de vesículas, pústulas e erosões na mucosa nasal entre os dias 4 e 8 pi. Todos os animais soroconverteram ao BoHV-2. A administração de dexametasona aos 40 dias pi não foi seguida de excreção viral, soroconversão ou recrudescência clínica. Em um segundo experimento, oito ovelhas lactantes foram inoculadas na pele das tetas e do úbere, seguida da caracterização virológica, clínica e histopatológica da infecção aguda. O vírus foi isolado a partir de suabes coletados das lesões de uma ovelha nos dias 7 e 8 pi. Cinco (5/8) animais desenvolveram lesões nos locais de inoculação entre os dias 4 e 6 pi. As lesões apresentaram características clínicopatológicas semelhantes às observadas em infecções naturais, e se caracterizaram por hiperemia, edema, pápula, vesículas, exsudação e formação de crostas. Histologicamente, as lesões se caracterizaram por edema intracelular, presença de um infiltrado linfoplasmocitário multifocal e predominantemente perivascular na derme, além de corpúsculos de inclusão eosinofílicos intranucleares em células inflamatórias e células sinciciais. Partículas víricas com morfologia típica de herpesvírus foram observadas sob microscopia eletrônica de transmissão. Esses resultados indicam que ovinos são susceptíveis à infecção pelo BoHV-2 e desenvolvem lesões características de mamilite herpética quando inoculados experimentalmente, podendo ser utilizados para estudos de patogenia, desenvolvimento de vacinas e pesquisas de drogas antivirais.