O trabalho foi conduzido na EEA/UFRGS em 2003. O objetivo foi avaliar a eficiência do disco medidor de forragem, do bastão graduado e do medidor de capacitância em predizer a massa de forragem de azevém bem como o de avaliar as diferenças nas variáveis morfogênicas (taxa de elongação de folhas, taxa de surgimento de folhas, tempo de vida da folha) e estruturais da pastagem (numero de folhas verdes, comprimento de folhas e densidade de perfilhos) pela técnica de perfilhos marcados em função dos tratamentos adotados (intensidades e métodos de pastejo). Para determinar a eficiência dos instrumentos foram realizados dois experimentos: o experimento 1 avaliandose a eficiência do disco, bastão e medidor de capacitância em predizer a massa de forragem da pastagem na fase de estabelecimento num delineamento completamente casualizado com 32 repetições e três tratamentos e o experimento 2 avaliando-se a eficiência do disco medidor e do bastão graduado como preditores da massa de forragem sob lotação rotacionada em duas intensidades de pastejo (baixa e moderada) definidas por ofertas de forragem representando, respectivamente, 2,5 ou 5,0 vezes o potencial de consumo dos cordeiros num delineamento em blocos casualizados em arranjo fatorial com quatro repetições. Para determinar as variáveis morfogênicas, estruturais e o fluxo de tecidos os tratamentos foram duas intensidades (baixa e moderada) e dois métodos de pastejo (pastejo com lotação contínua e rotacionada). No experimento 1 o bastão graduado apresentou a melhor correlação com a massa de forragem (r2=0,65). No 2 as melhores correlações foram obtidas quando avaliadas as faixas de pós-pastejo para o disco medidor (r2=0,47) e as de pré-pastejo para o bastão graduado (r2=0,36). Para as variáveis morfogênicas e estruturais as intensidades de pastejo foram responsáveis por diferenças na taxa de elongação de folhas (intensidade baixa resultou em maior taxa de elongação) e nas características estruturais (intensidade baixa resultou em menor densidade de perfilhos, maior comprimento e número de folhas vivas). Os métodos de pastejo influenciaram as características morfogênicas (lotação contínua resultou em maior taxa de elongação de folhas, maior taxa de surgimento e tempo de vida das folhas no ciclo de observação I) e estruturais (lotação contínua resultou em maior densidade de perfilhos); bem como foi obtida interação com as intensidades e com os ciclos de avaliação. O fluxo de crescimento (favorecido por lotação rotacionada a baixa intensidade) e de senescência (favorecido por lotação contínua a baixa intensidade) foram afetados pelos tratamentos, enquanto que o fluxo de consumo não foi alterado pelos tratamentos.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:06:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4859_1.pdf: 6280297 bytes, checksum: f08f789578fab08d0d9e549ba52dcf99 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A ecologia e a ecofisiologia de briófitas ainda são pouco conhecidas quando comparadas com as de espermatófitas. No Neotrópico essa lacuna é ainda maior e mais preocupante. É importante entender as relações desses vegetais, como a ciclagem de nutrientes, retenção hídrica, interações com fungos, invertebrados e outras plantas. Desta forma, o presente estudo investigou alguns aspectos da ecofisiologia das briófitas na Floresta Atlântica do Nordeste brasileiro. Foram avaliadas a morfogênese protonemática e as estratégias reprodutivas de seis espécies de musgos e duas espécies de hepáticas, e foram estudados a germinação de esporos e o crescimento inicial do musgo Thamniopsis incurva sob diferentes condições de luz e disponibilidade hídrica. Cápsulas maduras foram desinfestadas e os esporos distribuídos em meio Knop (líquido e solidificado com ágar 0,4%). Dois padrões gerais foram identificados para musgos/hepáticas: germinação exospórica/endospórica, protonema filamentoso/ uniestratificado ou globoso e formação do gametófito folhoso lenta/rápida. Em geral, as espécies apresentaram estratégias que provavelmente auxiliam a colonização em campo. Nos musgos, verificou-se rápida ramificação do protonema e larga produção de gametóforos e gemas protonemáticas, enquanto em hepáticas constatou-se rápida germinação e curta duração do protonema, produzindo diretamente o gametófito jovem. Os esporos de Thamniopsis incurva perderam rapidamente a viabilidade (aprox. 30 dias). A germinação foi observada sob fotoperíodo de 12 h e escuro contínuo. Diferentes intensidades e qualidades de luz não inibiram o crescimento protonemático e a formação de botões gametofíticos, o que indica uma alta capacidade para colonizar diversos micro-habitats. Por outro lado, a germinação dos esporos, o crescimento protonemático e o estabelecimento de gametófitos foram reduzidos sob potenciais a partir de 0,06 MPa. A partir dos dados ecofisiológicos da espécie é sugerido que estratégias para manutenção e estabelecimento envolvam germinação e crescimento protonemático rápidos, desde que restritos a micro-habitats submetidos à alta umidade

As glândulas salivares são estruturas essenciais para a manutenção da homeostase da cavidade oral pela síntese e secreção do fluido salivar. A disfunção ou perda permanente das glândulas salivares causadas por radioterapia, doenças inflamatórias ou desordens congênitas elevam principalmente o risco de infecções da mucosa oral e de estruturas dentárias, além de potencialmente prejudicar funções fisiológicas como fala, mastigação e paladar, diretamente interferindo na qualidade de vida dos indivíduos afetados. Os tratamentos atualmente disponíveis são apenas paliativos, ressaltando a necessidade de se compreender melhor os processos embriogênicos a fim de desenvolver novas estratégias terapêuticas capazes de regenerar as glândulas salivares. O princípio da formação das glândulas salivares baseia-se na coordenação de diversos processos morfogenéticos, e este trabalho foca particularmente em investigar a formação do espaço luminal do sistema de ductos, uma vez que a adequada abertura dos lumens é um processo essencial para a secreção salivar. Relata-se que a remoção das células centrais dos cordões sólidos epiteliais por morte celular apoptótica é o principal mecanismo de abertura do espaço luminal dos futuros ductos glandulares em camundongos. Porém, pouco se sabe sobre o controle temporal da apoptose durante o desenvolvimento glandular e sobre seu comportamento em glândulas salivares humanas. Neste trabalho, o perfil de expressão de diversas proteínas envolvidas na cascata apoptótica em glândulas salivares fetais humanas foi analisado de acordo com cada estágio morfogenético por imunoistoquímica (Bax, Bak, Bad, Bid, Bcl-2, Bcl-x, Bcl-xL, caspase-3 clivada, caspases-6, -7 e -9, apaf-1, survivina e citocromo c). As análises semi-qualitativas resultaram em negatividade apenas para as proteínas Bcl-2, Bad, Bid e caspase-3 clivada em todas as fases de desenvolvimento. A expressão nuclear de Bax e Bak foi identificada em presumidos espaços luminais em estágios precoces, enquanto Bcl-xL foi o fator antiapoptótico da família Bcl-2 que exibiu expressão nuclear mais importante. Caspases-6, -7 e -9 foram positivas em todas as fases, e a ausência de caspase-3 clivada sugere caspase-7 como principal caspase efetora da apoptose em desenvolvimento de glândulas salivares humanas. Ambos os componentes do complexo apoptossomo foram positivos durante o desenvolvimento glandular, e o inibidor survivina demonstrou mais positividade nuclear em estágios mais avançados. Ao observar a expressão de reguladores apoptóticos durante o desenvolvimento glandular humano, foram realizados experimentos funcionais com culturas de tecido glandular de camundongos para avaliar o papel das caspases durante a formação desta estrutura. Inicialmente detectou-se a atividade apoptótica em glândulas salivares de camundongos albinos no centro dos cordões epiteliais primários a partir de estágios precoces de desenvolvimento através de TUNEL e caspase-3 clivada. A partir disso, foi realizada a inibição apoptótica funcional in vitro durante o mesmo período, que resultou em ductos significativamente mais amplos e em defeitos morfológicos importantes nas estruturas luminal e acinar. Este trabalho evidenciou portanto atividade apoptótica durante a formação de glândulas salivares humanas e de camundongo, expressando-se em fases mais precoces do que reportadas anteriormente. Além disso, a ausência de Bad e Bid indica que a via intrínseca está mais ativa que a extrínseca, e distintos perfis de expressão da maioria das moléculas sugere adicionais funções não-apoptóticas durante a morfogênese glandular. / Salivary glands are essential structures for the maintenance of homeostasis of the oral cavity by synthesizing and secreting saliva. Permanent dysfunction or loss of salivary glands caused by radiotherapies, inflammatory diseases or congenital disorders increase mainly the risk of infections of the oral mucosa and tooth surface, also impairing physiological functions as speech, mastication and taste, directly interfering in quality of life. Current treatments are only palliative-based, which highlights the need of having a better understanding of embryonic processes to develop therefore new therapeutic strategies able to regenerate salivary glands. The development of glandular secretory units and ductal system involves the coordination of several morphogenetic processes, and this study particularly focuses in investigating the formation of the lumenal space of the ductal system, as the proper lumen opening is an essential step for the salivary secretion. The clearance of the central cells of developing solid epithelial stalks by apoptotic cell death is the main mechanism of lumen space opening within presumptive ducts in mouse salivary glands. However little is known about its temporal regulation and its function in human salivary glands. Here we analysed the profile expression of several apoptosis-related proteins during human salivary gland development in correlation to each morphogenetic stage by immunohistochemistry (Bax, Bak, Bad, Bid, Bcl-2, Bclx, Bcl-xL, cleaved caspase-3, caspases-6, -7 e -9, apaf-1, survivin e citocromo c). Immunohistochemical results were analysed semi-qualitatively, and proteins Bcl-2, Bad, Bid and cleaved caspase-3 were considered completely negative at all stages of development. The nuclear expression of Bax and Bak were observed within the presumptive luminal spaces at early stages, while Bcl-xL was the antiapoptotic factor of Bcl-2 family that showed more prominent nuclear expression. Caspases-6, -7 and -9 were positive at all stages, and the absence of cleaved caspase-3 suggests caspase-7 as the main effector caspase during human salivary gland development. Both components of the apoptosome complex were also positive through all development, and the inhibitor of apoptosis survivin has shown more nuclear positivity at later stages. As the expression of apoptotic regulators was observed during human salivary gland development, functional experiments were then performed in mouse salivary gland cultures to determine the apoptotic activity of during the glandular formation. Initially, the apoptotic activity was detected in mouse salivary glands within the centre of primary epithelial stalks from early stages of development by TUNEL and cleaved caspase-3. Thus the in vitro apoptotic inhibition was performed at the same stages, which resulted in significant wider ducts and important morphological defects within luminal and acinar structures. This work has therefore evidenced the existence of apoptotic role in salivary gland lumen formation of both human and mouse models, having an earlier start point as reported before. Moreover, the absence of Bad and Bid indicates that the intrinsic pathway is more active than the extrinsic during human development, and the distinct subcellular expression of most molecules suggests additional non-apoptotic functions.

Butia odorata (Barb. Rodr.) Noblick, é nativa da região Sul do Brasil e Sudeste do Uruguai. As áreas de butiazais do Rio Grande do Sul, formadas por B. odorata, vêm sofrendo redução devido à expansão agrícola e urbana. Além disso, a espécie apresenta dificuldades para germinar causando entraves na produção de mudas e assim a produção se torna extrativista, o que reduz a renovação dos butiazais. A embriogênese somática (ES) é uma alternativa para multiplicação in vitro de B. odorata. Análises anatômicas e o uso de marcadores moleculares podem contribuir para a determinação do processo da ES. O presente trabalho teve por objetivo principal propor uma metodologia para obtenção de embriões somáticos in vitro da espécie a partir de diferentes explantes. Para isso foram avaliados os efeitos das auxinas 2,4-D e picloram e a influência dos meios de cultura MS e Y3 sobre embriões zigóticos maduros. A técnica Thin Cell Layer (TCL) foi testada como fonte alternativa de explante para indução da ES em B. odorata. Para uma melhor compreensão das mudanças morfológicas e celulares foi realizado um estudo histo-anatômico mais detalhado das fases durante a ES. Para verificar a expressão do gene SERK foi isolado, clonado e sequenciado um gene candidato a partir de calos embriogênicos de B. odorata. 9Continua) Os resultados apresentaram uma resposta heterogênea produzindo calos embriogênicos e embriões somáticos em ambos os meios combinados com diferentes concentrações das auxinas. Dentre os resultados obtidos para TCL destacam-se o meio de cultura Y3 com a auxina picloram, nas concentrações de 452,49; 542,99 e 633,48 μM/L, induzindo a formação de calos embriogênicos e embriões somáticos. A análise histo-anatômica permitiu verificar os principais eventos celulares ocorridos durante a ES, como a presença de centros meristemáticos, proembriões, embriões globulares e grãos de amido como fonte de reserva em embriões somáticos. A obtenção de uma sequência parcial do gene SERK em butiá, além de confirmar a indução da ES, pode ser usada, juntamente com as análises anatômicas, como marcador molecular específico para ES. A metodologia proposta apresenta resultados promissores até a fase de diferenciação dos embriões somáticos globulares e alguns mais desenvolvidos, contudo a conversão desses em plântulas não foi completa. / Butia odorata (Barb. Rodr.) Noblick, is native to Southern Brazil and Southeastern Uruguay. Butiazais areas of Rio Grande do Sul, formed by B. odorata, have been reduced due to the agricultural and urban expansion. In addition, the species presents difficulties to germinate causing obstacles in seedlings production and thus the production becomes extractive, what reduces the renewal of butiazais. Somatic embryogenesis (ES) is an alternative to in vitro multiplication of B. odorata. Anatomical analysis and the use of molecular markers may contribute to the determination of the ES process. The present work had as main objective to propose a methodology for obtaining of somatic embryos in vitro of the different explants from species. The effects of 2,4-D auxins and picloram and the influence of MS and Y3 culture media on mature zygotic embryos were evaluated. The Thin Cell Layer (TCL) technique was tested as an alternative explant source for ES induction in B. odorata. For a better understanding of the morphological and cellular changes, a more detailed histo-anatomical study of the phases during ES was performed. To verify the expression of the SERK gene, a candidate gene was isolated, cloned and sequenced from B. odorata embryogenic calli. The results showed a heterogeneous response producing embryogenic calli and somatic embryos in both media combined with different concentrations of auxin. Among the results obtained for TCL include Y3 culture medium with auxin picloram, in concentrations of 452,49; 542,99 and 633,48 μM/L, inducing the formation of embryogenic calli and somatic embryos. Histo-anatomical analysis has shown the main cellular events that occurred during ES, as the presence of meristematic centers, proembryos, globular embryos and starch grains as a reserve source in somatic embryos. Obtaining a partial sequence of the SERK gene in pindo palm, in addition to confirm ES induction, it can be used, along with the anatomical analysis, such as molecular marker specific for ES. The proposed methodology presents promising results until the differentiation phase of the globular somatic embryos and some more developed, however the conversion of these in seedlings was not complete.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-05-10T13:08:15Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 734479 bytes, checksum: dcd87645d1e8d78a8a5ad22880dd5630 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T13:08:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 734479 bytes, checksum: dcd87645d1e8d78a8a5ad22880dd5630 (MD5) Previous issue date: 2002-06-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Há muito tempo que as características relacionadas à coloração do fruto e sua qualidade nutricional têm sido consideradas desejáveis para manipulação em citros. Entretanto, a produção de novas cultivares dessas plantas tem sido limitada pelos vários obstáculos que impedem o seu melhoramento genético. A biotecnologia, por meio das técnicas de cultura de tecidos e transformação genética de plantas, surge como uma opção viável para contornar esse problema. Os objetivos do presente estudo foram isolar e caracterizar alguns genes envolvidos na rota biossintética de carotenóides de Citrus paradisi (Macf.) e desenvolver metodologias de regeneração in vitro e transformação genética para manipulação dessa rota biossintética em citros, visando alterar o conteúdo de provitamina A, a coloração do fruto e o porte das plantas. Utilizando-se a técnica de RT-PCR, as seqüências de cDNAs dos genes da sintase do fitoeno (AF152892), desaturase do fitoeno (AF364515), desaturase do ζ-caroteno (AF372617), ciclase-β do licopeno (AF152246) e ciclase-ε do licopeno (AF486650) foram isoladas de C. paradisi. Em geral, essas seqüências apresentaram elevada homologia aos genes correspondentes em tomate, com identidade de 72-83% em nível de aminoácidos. Dois ou mais transcritos diferentes foram identificados para três dos cinco genes caracterizados nesse estudo. Em cada caso, um ou mais transcritos foram considerados aberrantes, em que a produção de polipeptídeos não-funcionais foi predita. Estudos de expressão gênica revelaram que a maioria dos genes isolados é transcricionalmente regulada durante o desenvolvimento do fruto. No entanto, a diferenciação da coloração do fruto entre as cultivares de C. paradisi pode ser causada por mutações na seqüência aberta de leitura e não por regulação transcricional diferencial, sendo a desaturase do fitoeno e/ou ciclase-ε do licopeno os genes candidatos pelas diferenças observadas. Na avaliação da morfogênese in vitro de tecidos derivados de epicótilos de limão ‘Cravo’ (C. limonia Osb.), pomelo ‘Foster’ (C. paradisi Macf.) e laranja ‘Pêra’ [C. sinensis (L.) Osb.], verificou-se diferentes respostas às condições de cultivo in vitro em função da cultivar, da região do epicótilo utilizada como fonte de explantes, da composição do meio de cultura e das condições de incubação. Um sistema eficiente de transformação genética via Agrobacterium tumefaciens foi desenvolvido para C. paradisi, examinando-se os efeitos de seis fatores na eficiência de transformação. A pré- cultura dos explantes e a composição do meio de co-cultivo foram os fatores que mais influenciaram a eficiência de transformação. O protocolo otimizado foi empregado na produção de plantas transgênicas contendo os genes da sintase do fitoeno, desaturase do fitoeno ou ciclase-β do licopeno sob expressão constitutiva. / Fruit color and its nutritional value have been considered desirable for manipulation in citrus for a long time. However, citrus breeding has been limited due to several factors that hinder its genetic improvement. Plant biotechnology appears to be a viable option for the improvement of citrus species by means of the plant tissue culture and genetic transformation techniques. The objectives of this study were to isolate and characterize some genes involved in the carotenoid biosynthetic pathway of Citrus paradisi (Macf.) and to develop protocols of in vitro regeneration and genetic transformation for manipulation of this pathway in citrus, aiming to change the provitamin A content, fruit color, and plant height. By using the RT-PCR technique, the cDNA sequences of the genes phytoene synthase (AF152892), phytoene desaturase (AF364515), ζ-carotene desaturase (AF372617), lycopene β-cyclase (AF152246), and lycopene ε-cyclase (AF486650) were isolated from C. paradisi. In general, they were highly homologous to the corresponding tomato genes at the amino acid level, with identity ranging from 72-83%. Two or more different transcripts were identifyed for three of the five genes characterized in this study. In each case, one or more of the transcripts were aberrant, so that the production of a nonfunctional protein would be predicted. The expression analysis of the isolated carotenoid biosynthetic genes indicated complex expression patterns during fruit development. However, the fruit color differentiation between the grapefruit cultivars may be caused by frame-shift mutation and not by differential transcriptional regulation, with phytoene desaturase and/or lycopene ε-cyclase being the candidate genes for fruit color differences. The in vitro responses of epicotyl explants from ‘Cravo’ rangpur lime (Citrus limonia Osb.), ‘Foster’ grapefruit (C. paradisi Macf.), and ‘Pêra’ sweet-orange [C. sinensis (L.) Osb.] varyed according to cultivar, region of the epicotyl used as source of explant, culture medium composition, and incubation conditions. An improved protocol for Agrobacterium-mediated transformation of epicotyl explants from ‘Duncan’ grapefruit was developed by examining the effects of six different factors on the efficiency of transformation and combining the best treatments for each factor. The preculturing of the explants and the composition of the cocultivation medium were the factors that most influenced transformation efficiency. The optimized protocol was successfully employed in the production of transgenic grapefruit plants containing the carotenoid biosynthetic genes phytoene synthase, phytoene desaturase, or lycopene β-cyclase under constitutive expression. / Tese importada do Alexandria

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2017. / Texto parcialmente liberado pelo autor.Conteúdo liberado: Introdução geral,resumos e referências. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-05-22T20:41:00Z No. of bitstreams: 1 2017_RaphaelFerreiraAlmeida.pdf: 4925764 bytes, checksum: 3191eb7b6050ba8790cc9ecea687f852 (MD5) / Rejected by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br), reason: Boa tarde, Trata-se de uma publicação parcial. Por favor, seguir as normas da publicação. Atenciosamente, on 2017-06-06T21:17:21Z (GMT) / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-07-06T17:55:33Z No. of bitstreams: 1 2017_RaphaelFerreiraAlmeida_PARCIAL.pdf: 704720 bytes, checksum: 78fed5d092c3e4b2ba69f0d7e9591c9d (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-10-05T17:28:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_RaphaelFerreiraAlmeida_PARCIAL.pdf: 704720 bytes, checksum: 78fed5d092c3e4b2ba69f0d7e9591c9d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-05T17:28:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_RaphaelFerreiraAlmeida_PARCIAL.pdf: 704720 bytes, checksum: 78fed5d092c3e4b2ba69f0d7e9591c9d (MD5) Previous issue date: 2017-10-05 / O presente trabalho objetiou avaliar respostas de genitores Pisifera de dendezeiros (Elaeis guineensis Jacq.) quanto à capacidade de regeneração de plantas por embriogênese somática (ES), além de identificar proteínas envolvidas durante o processo de aquisição de competência embriogênica em híbridos Tenera contrastantes para a embriogênese somática. Num primeiro experimento, explantes foliares de quatro genótipos adultos de dendezeiro da variedade Pisifera (A251424, A251427, A251512 e A251513) foram submetidos à indução de ES utilizando-se o meio de indução (MI), composto pelos sais e vitaminas de Murashige e Skoog (MS), suplementado com 30 g.L-1 de sacarose, 0,5 g.L-1 de glutamina, 0,5 g.L-1 de caseína hidrolisada, 2,5 g.L-1 de carvão ativado, 450 µM de Picloram e gelificado com 2,5 g.L-1 de phytagel. O material permaneceu nesta condição por 360 dias, com subcultivos a cada 150 dias. Posteriormente, o material foi transferido para o meio de multiplicação de calos (MM), composto por 40 µM de Picloram, 10 µM de 2-isopenteniladenina (2iP) e 2,5 g.L-1 de phytagel, onde permaneceu por mais 90 dias. Em seguida, os calos foram colocados em meio de diferenciação (MD) formado por 12,3 µM de 2iP, 0,54 µM de ácido naftalenoacético (ANA) e de 2,5 g.L-1 de phytagel. Depois de diferenciados, os embriões somáticos foram transferidos para o meio de regeneração, desprovido de reguladores de crescimento e acrescido de 2,5 g.L-1 de phytagel e carvão ativado. Durante todo o processo, o material foi avaliado morfo e histoquimicamente para melhor caracterizar as etapas. Num segundo experimento, a proteômica diferencial de dois híbridos Tenera var. B351733 (responsivo à ES) e var. B352933 (não-responsivo à ES) foi avaliada durante o processo inicial (14 dias) e tardio (150 dias) da aquisição de competência embriogênica em dendezeiro, etapas caracterizadas pelo início de formação de calo primário e calo embriogênico, respectivamente. As proteínas extraídas foram quantificadas por Bradford e analisadas por eletroforese bidimensional (2-DE). Proteínas consideradas diferenciais pelo programa de análise de imagem Image Master Platinum foram identificadas por espectrometria de massa. A sequência foi obtida no banco NCBI por meio do GI (Gene Identifier) de cada proteína identificada nestes tempos. Com as sequências, adicionalmente foi realizada a anotação funcional destas proteínas nas plataformas AgBase e Revigo, sendo o gene onthology (GO) de cada proteína obtido. A partir dos dados também foram gerados gráficos dos processos biológicos em cada tempo. Verificou-se que o genótipo Pisifera A251424 foi o mais responsivo ao processo de ES quando comparado aos demais, com maior formação de calos ao longo do tempo (45%). Na etapa MM, calos com até 10,6 mg de massa fresca foram os que apresentaram maior incremento de biomassa em relação aos calos de maior peso inicial. Com 90 dias em meio MD, calos embriogênicos se diferenciaram em embriões somáticos e até 130 dias após, clusteres de embriões somáticos surgiram nesta condição. Nas análises morfo-anatômicas e histoquímicas, quatro tipos de calos foram observados na etapa MI, sendo o nodular amarelado, com maior adensamento de amido nesta etapa, o único a progredir até a formação de embriões somáticos. Na análise proteômica das variedades Tenera, 52 proteínas diferencialmente abundantes no tempo 14 dias foram reveladas, incluindo 17 proteínas aumentadas e 14 diminuídas no genótipo responsivo, em relação ao genótipo não-responsivo. Já aos 150 dias de indução, 74 proteínas reguladas foram detectadas, incluindo 19 aumentadas e 13 diminuídas no genótipo responsivo em relação ao não-responsivo. Um total de 40 proteínas exclusivas foram observadas no genótipo responsivo aos 150 dias de indução, enquanto que o genótipo não-responsivo apresentou somente duas. A anotação funcional evidenciou uma menor diversidade dos processos biológicos aos 14 dias para o genótipo responsivo, e aos 150 dias estes processos apresentaram maior diversidade, quando comparados ao não-responsivo. A análise 2-DE e ontologia gênica permitiram a identificação de dez proteínas importantes relacionadas com a aquisição de competência embriogênica, entre elas a isoenzima catalase 2 (spot 254), mono-dehidro-ascorbato-redutase isoforma cloroplástica X2 (spot 150), subunidade beta da pirofosfatofrutose-6-fosfato-1- fosfotransferase (spot 338). De modo geral, os resultados obtidos envolvendo a ES, morfoanatomia, histoquímica e a análise proteômica, aliada à bioinformática (anotação funcional), permitiram compreender melhor a propagação in vitro em dendezeiro, dando novos subsídios para pesquisas futuras rumo a um melhor entendimento sobre os processos de propagação clonal da espécie por embriogênese somática. / The objective of this work was to evaluate the responses of the Pisifera genus of oil palm (Elaeis guineensis Jacq.) regarding the acquisition of embryogenic competence and plant regeneration by somatic embryogenesis (SE) and to identify proteins involved in the process of acquisition of embryogenic competence in Tenera hybrids contrasting as to the embryogenic capacity. In a first experiment, leaf explants of four adult genotypes of oil palm of the Pisifera variety (A251424, A251427, A251512 and A251513) were used for SE induction using the induction medium (IM) composed of salts and vitamins of Murashige e Skoog (MS) and supplemented with 30 gL-1 of sucrose, 0.5 gL-1 of glutamine, 0.5 gL-1 of hydrolyzed casein, 2.5 gL-1 of activated charcoal, 450 μM of Picloram and solidified with 2.5 gL-1 of phytagel. The material remained in this condition for 360 days, being subcultured every 150 days. Subsequently, the material was transferred to calluses multiplication medium (MM) containing 40 μM of Picloram, 10 μM of 2-isopentenyladenine (2iP) and 2.5 gL -1 of phytagel, where it remained for 90 days. Then, calluses were transferred to differentiation medium (DM), composed of 12.3 μM 2iP, 0.54 μM of naphthaleneacetic acid (ANA) and 2.5 gL-1 of phytagel. After differentiation, the somatic embryos were transferred to regeneration medium, without growth regulators and supplemented with 2.5 g.L-1 of phytagel and activated charcoal. Throughout the process, the material was evaluated morphologically and histochemically to better characterize the steps. In a second experiment, differential proteomics of two hybrids of the Tenera variety, B351733 (responsive to SE) and B352933 (non-responsive to SE) were evaluated during the initial (14 days) and late (150 days) process of the acquisition of embryogenic competence in oil palm, steps characterized by the beginning of formation of primary and embryogenic callus, respectively. Proteins extracted were quantified by Bradford assay and analyzed by two-dimensional electrophoresis (2-DE). Differential proteins detected by the Image Master Platinum software were identified by mass spectrometry. The sequence was obtained from NCBI bank by means of the GI (Gene Identifier) of each protein identified at these times. With the sequences, it was performed the functional annotation of these proteins on the AgBase and Revigo platforms, and the gene onthology (GO) of each protein was obtained. The graphics for biological process ES were generated for both genotypes at each time. It was verified that the Pisifera genotype A251424 was the most responsive to the SE process when compared to the others, because it presented greater calluses formation over time (45%). In stage MM, calluses with lower initial weight (up to 10.6 mg) presented a greater increase of fresh biomass in relation to the calluses of greater initial weight. After 90 days on MD medium, embryogenic calluses differentiated into somatic embryos and after 130 days, clusters of somatic embryos appeared on this condition. In the morpho-anatomical and histochemical analyzes, four types of calluses were observed in stage MI, being nodular yellowish with greater starch deposition in this step and proceeded in the stages until formation of somatic embryos. At the proteomic analysis of the Tenera varieties, 52 differentially abundant proteins on time 14 days were revealed, including 17 proteins increased and 14 decreased in the responsive genotype with respect to the non-responsive genotype. Already at 150 days of induction, 74 regulated proteins were detected, including 19 increased and 13 decreased also in the responsive genotype with respect to non-responsive genotype. A total of 40 unique proteins were observed in the responsive genotype at 150 days of induction, while the non-responsive genotype showed only two. The 2-DE analysis and gene ontology allowed the identification of ten important proteins related to the acquisition of embryogenic competence, among them Catalase isozyme 2 (spot 254), Monodehydro ascorbate reductase chloroplastic isoform X2 (spot 150), Pyrophosphatefructose-6-phosphate-1-phosphotransferase subunit beta like (spot 338). In general, the results obtained involving SE, morphology, histochemistry and proteomic analysis, together with bioinformatics (functional annotation), allowed a better understanding of the in vitro propagation of oil palm, giving new subsidies for future research towards a better understanding about the processes of clonal propagation of the species by somatic embryogenesis.

As glândulas salivares são estruturas essenciais para a manutenção da homeostase da cavidade oral pela síntese e secreção do fluido salivar. A disfunção ou perda permanente das glândulas salivares causadas por radioterapia, doenças inflamatórias ou desordens congênitas elevam principalmente o risco de infecções da mucosa oral e de estruturas dentárias, além de potencialmente prejudicar funções fisiológicas como fala, mastigação e paladar, diretamente interferindo na qualidade de vida dos indivíduos afetados. Os tratamentos atualmente disponíveis são apenas paliativos, ressaltando a necessidade de se compreender melhor os processos embriogênicos a fim de desenvolver novas estratégias terapêuticas capazes de regenerar as glândulas salivares. O princípio da formação das glândulas salivares baseia-se na coordenação de diversos processos morfogenéticos, e este trabalho foca particularmente em investigar a formação do espaço luminal do sistema de ductos, uma vez que a adequada abertura dos lumens é um processo essencial para a secreção salivar. Relata-se que a remoção das células centrais dos cordões sólidos epiteliais por morte celular apoptótica é o principal mecanismo de abertura do espaço luminal dos futuros ductos glandulares em camundongos. Porém, pouco se sabe sobre o controle temporal da apoptose durante o desenvolvimento glandular e sobre seu comportamento em glândulas salivares humanas. Neste trabalho, o perfil de expressão de diversas proteínas envolvidas na cascata apoptótica em glândulas salivares fetais humanas foi analisado de acordo com cada estágio morfogenético por imunoistoquímica (Bax, Bak, Bad, Bid, Bcl-2, Bcl-x, Bcl-xL, caspase-3 clivada, caspases-6, -7 e -9, apaf-1, survivina e citocromo c). As análises semi-qualitativas resultaram em negatividade apenas para as proteínas Bcl-2, Bad, Bid e caspase-3 clivada em todas as fases de desenvolvimento. A expressão nuclear de Bax e Bak foi identificada em presumidos espaços luminais em estágios precoces, enquanto Bcl-xL foi o fator antiapoptótico da família Bcl-2 que exibiu expressão nuclear mais importante. Caspases-6, -7 e -9 foram positivas em todas as fases, e a ausência de caspase-3 clivada sugere caspase-7 como principal caspase efetora da apoptose em desenvolvimento de glândulas salivares humanas. Ambos os componentes do complexo apoptossomo foram positivos durante o desenvolvimento glandular, e o inibidor survivina demonstrou mais positividade nuclear em estágios mais avançados. Ao observar a expressão de reguladores apoptóticos durante o desenvolvimento glandular humano, foram realizados experimentos funcionais com culturas de tecido glandular de camundongos para avaliar o papel das caspases durante a formação desta estrutura. Inicialmente detectou-se a atividade apoptótica em glândulas salivares de camundongos albinos no centro dos cordões epiteliais primários a partir de estágios precoces de desenvolvimento através de TUNEL e caspase-3 clivada. A partir disso, foi realizada a inibição apoptótica funcional in vitro durante o mesmo período, que resultou em ductos significativamente mais amplos e em defeitos morfológicos importantes nas estruturas luminal e acinar. Este trabalho evidenciou portanto atividade apoptótica durante a formação de glândulas salivares humanas e de camundongo, expressando-se em fases mais precoces do que reportadas anteriormente. Além disso, a ausência de Bad e Bid indica que a via intrínseca está mais ativa que a extrínseca, e distintos perfis de expressão da maioria das moléculas sugere adicionais funções não-apoptóticas durante a morfogênese glandular. / Salivary glands are essential structures for the maintenance of homeostasis of the oral cavity by synthesizing and secreting saliva. Permanent dysfunction or loss of salivary glands caused by radiotherapies, inflammatory diseases or congenital disorders increase mainly the risk of infections of the oral mucosa and tooth surface, also impairing physiological functions as speech, mastication and taste, directly interfering in quality of life. Current treatments are only palliative-based, which highlights the need of having a better understanding of embryonic processes to develop therefore new therapeutic strategies able to regenerate salivary glands. The development of glandular secretory units and ductal system involves the coordination of several morphogenetic processes, and this study particularly focuses in investigating the formation of the lumenal space of the ductal system, as the proper lumen opening is an essential step for the salivary secretion. The clearance of the central cells of developing solid epithelial stalks by apoptotic cell death is the main mechanism of lumen space opening within presumptive ducts in mouse salivary glands. However little is known about its temporal regulation and its function in human salivary glands. Here we analysed the profile expression of several apoptosis-related proteins during human salivary gland development in correlation to each morphogenetic stage by immunohistochemistry (Bax, Bak, Bad, Bid, Bcl-2, Bclx, Bcl-xL, cleaved caspase-3, caspases-6, -7 e -9, apaf-1, survivin e citocromo c). Immunohistochemical results were analysed semi-qualitatively, and proteins Bcl-2, Bad, Bid and cleaved caspase-3 were considered completely negative at all stages of development. The nuclear expression of Bax and Bak were observed within the presumptive luminal spaces at early stages, while Bcl-xL was the antiapoptotic factor of Bcl-2 family that showed more prominent nuclear expression. Caspases-6, -7 and -9 were positive at all stages, and the absence of cleaved caspase-3 suggests caspase-7 as the main effector caspase during human salivary gland development. Both components of the apoptosome complex were also positive through all development, and the inhibitor of apoptosis survivin has shown more nuclear positivity at later stages. As the expression of apoptotic regulators was observed during human salivary gland development, functional experiments were then performed in mouse salivary gland cultures to determine the apoptotic activity of during the glandular formation. Initially, the apoptotic activity was detected in mouse salivary glands within the centre of primary epithelial stalks from early stages of development by TUNEL and cleaved caspase-3. Thus the in vitro apoptotic inhibition was performed at the same stages, which resulted in significant wider ducts and important morphological defects within luminal and acinar structures. This work has therefore evidenced the existence of apoptotic role in salivary gland lumen formation of both human and mouse models, having an earlier start point as reported before. Moreover, the absence of Bad and Bid indicates that the intrinsic pathway is more active than the extrinsic during human development, and the distinct subcellular expression of most molecules suggests additional non-apoptotic functions.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:47:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carolina_Aleteia_Mecabo.pdf: 1439256 bytes, checksum: c24dcfc3f28c7c0959b8b9303316bd0d (MD5) Previous issue date: 2014-02-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The study was conducted at Embrapa Beef Cattle, Campo Grande, Mato Grosso do Sul State, with the objective of evaluating the growth and nutritive value of grass in Piata agrosilvopastoral system with two densities of eucalyptus: 22 and14 meters between rows of eucalyptus. The experimental design was a randomized block design in a split plot design with four replications during winter. The plots treatments were the Integration Cattle Farming Forest at systems 1 and 2, which consisted of Brachiaria brizantha piatã planted after soybean harvest in the cropping system in consortium with eucalyptus (Eucalyptus urograndis) with 2m spacing between trees and between rows of 22 and 14 m, and the subplot treatments, points A, B, C, D and E, which were arranged between the rows of trees. The forage growth was evaluated, performing sampling 50 days after emergence, and every 15 days at each point (A, B, C, D and E) within each plot. During this period, also proceeded to analyze the morphogenesis of grass for 60 days with weekly reviews 5 tillers were marked within each section (A, B, C, D and E) within each portion. The variables analyzed were canopy height, canopy cover, plant density, leaf area index, leaf/stem ratio, dry matter production, Spad index, percentage of shade and morphogenesis (final leaf length, leaf appearance rate, rate of leaf elongation, stem elongation rate, lifespan of leaves and phyllochron number of live leaves per tiller). After the establishment of forage, which occurred at 110 days, the first court was held, where the entire sample was collected from each sub plot for the evaluation of the total production of forage and morphological components of nutritional assessment. There was a significant density of Eucalyptus for phyllochron variable. For the lifespan of leaves and plant density did not affect variable and this is not a variable influenced by shading. The dry matter content of the forage was the only variable that was higher in the near trees, where the highest percentage of shading points were found. The other morphogenetic and structural variables evaluated had a strong negative influence of shading, with lower values at the closest points to the trees. Treatment with 22 meters of distance between rows of trees, with a density of 227 eucalyptus trees/ha showed the best results of nutritional composition / O estudo foi desenvolvido na Embrapa Gado de Corte, em Campo Grande, no Estado do Mato Grosso do Sul, com o objetivo de avaliar o crescimento e o valor nutritivo do capim-piatã em sistema agrossilvipastoril com duas densidades de eucalipto: 22 e 14 metros entre fileiras de eucalipto. O delineamento experimental foi o de blocos casualizados em esquema de parcelas subdivididas, com quatro repetições, durante o inverno. Os tratamentos das parcelas foram os sistemas Integração Lavoura Pecuária Floresta 1 e 2, que consistiram no capim Brachiaria brizantha cv. Piatã, plantado após a colheita da soja, no sistema de cultivo em consórcio com o eucalipto (Eucalyptus urograndis), com espaçamento entre árvores de 2 m, e entre fileiras de 22 e 14 m, e os tratamentos das subparcelas, os pontos A, B, C, D e E, que eram marcados entre as fileiras das árvores. Avaliou-se o crescimento da forrageira, realizando-se amostragens 50 dias após a emergência, e a cada 15 dias, em cada ponto (A, B, C, D e E) dentro de cada parcela. Durante esse período, procedeu-se também a análise da morfogênese do capim, durante 60 dias, com avaliações semanais. Foram marcados 5 perfilhos dentro de cada ponto (A, B, C, D e E), dentro de cada parcela. As variáveis analisadas foram altura do dossel, cobertura do dossel, densidade de plantas, índice de área foliar, relação folha/colmo, produção de matéria seca, índice Spad, porcentagem de sombra e morfogênese (comprimento final de folha, taxa de aparecimento de folhas, taxa de alongamento de folhas, taxa de alongamento de colmo, duração de vida das folhas, filocrono e número de folhas vivas por perfilho). Após o estabelecimento da forragem, que se deu em 110 dias, foi realizado o primeiro corte, onde foi coletada toda a amostra de cada subparcela, para a avaliação da produção total, de componentes morfológicos da forragem e avaliação nutricional. Houve efeito significativo da densidade de eucalipto para a variável filocrono. Para a variável duração de vida das folhas e densidade de plantas não houve efeito significativo, não sendo esta uma variável influenciada pelo sombreamento. O teor de matéria seca da forragem foi a única variável que foi maior nos pontos mais próximos às arvores, ou seja, onde foram encontradas as maiores porcentagens de sombreamento. As demais variáveis morfogênicas e estruturais avaliadas tiveram forte influência negativa do sombreamento, sendo seus valores menores nos pontos mais próximos às árvores. No tratamento com 22 metros de distância entre fileiras de árvores, com densidade de eucalipto com 227 árvores/ha apresentou os melhores resultados de composição nutricional

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:01:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340551.pdf: 2534346 bytes, checksum: bee632d7e3b4d8a516ae521bdc5d0c02 (MD5) Previous issue date: 2016 / As orquídeas compreendem espécies frequentes do bioma Mata Atlântica, as quais têm sofrido ameaça continua devido à destruição e fragmentação dos seus habitats naturais. Devido às características ornamentais e paisagísticas, elas têm sido extraídas desordenadamente de seus habitats e comercializadas em todo o país. Técnicas de cultura de tecidos abrangem ferramentas que podem ser aplicadas à propagação massal e a conservação de orquídeas em extinção. Durante o estabelecimento in vitro, um padrão de resposta morfogênico definido como estruturas semelhantes à protocormos (ESPs) tem sido proposto para várias espécies de orquídeas como a espécie em estudo. Neste contexto, o objetivo desse trabalho foi avaliar o padrão de desenvolvimento de ESPs em Cattleya tigrina, visando o avanço no conhecimento desta rota da morfogênese e dos fatores que modulam, bem como, suas aplicações para a conservação e propagação de germoplasma. Explantes foliares, obtidos de plantas jovens, micropropagadas in vitro foram inoculados em meio de cultura MS/2 suplementado com 9µM de TDZ, para a indução e desenvolvimento das ESPs. As culturas foram coletadas aos zero, dois, sete, 14, 30, 60 e 100 dias de cultivo para posteriores análises. Realizou-se análises proteômicas mediante a combinação de géis bidimensionais e espectrometria de massas. Adicionalmente, foram realizadas avaliações do padrão de carboidratos solúveis totais e amido, qualificação dos açúcares e quantificação do hormônio AIA (ácido indol-3-acético) durante a indução e desenvolvimento das ESPs. Através dos resultados foi possível verificar uma reprogramação gênica durante a indução e desenvolvimento dessas estruturas, acompanhada de alterações anatômicas, bioquímicas e metabólicas. Na indução das ESPs foi possível verificar um número significativo de proteínas expressas ao zero dia de cultivo, quando comparado aos demais tempos de cultivo. Proteínas relacionadas ao metabolismo energético e carboidratos; defesa e resposta ao estresse e síntese de proteínas apresentaram significativas alterações na sua expressão durante a indução das ESPs. Durante o desenvolvimento das ESPs alterações na expressão de proteínas associadas aos processos metabólicos; metabolismo energético e carboidratos; ciclo celular e metabolismo secundário e fitohormônios, contribuíram no elevado potencial regenerativo dessas estruturas. Aos 100 dias de cultivo houve maior expressão de proteínas em relação aos demais tempos, o que pode estar relacionado com a ativação do metabolismo em relação ao desenvolvimento das ESPs. Em relação as avalições bioquímicas, foi possível observar que a indução e o desenvolvimento das ESPs foram claramente acompanhados por um aumento nos teores de AIA e diminuição nos teores de açúcares, sendo que este sinal parece ter sido importante para que as células se diferenciassem e adquirissem a necessária competência. Os resultados aqui obtidos ampliam a base científica para aprofundar a compreensão dos fatores que modulam o processo de indução e desenvolvimento das ESPs em C. tigrina.<br> / Abstract : Orchids are species of the Atlantic Forest biome, which are under continuing threat due to the destruction and fragmentation of their natural habitats. Because of its ornamental features, they have been inordinately taken from their habitats and marketed throughout the country. Tissue culture techniques include tools that can be applied to mass propagation and conservation of endangered orchids. During establishment of in vitro cultures of this species, a pattern of morphogenic response defined as protocorm-like bodies (PLBs) have been proposed for various orchid species as the species under study. In this context, the aim of this study was to evaluate the PLBs development pattern in C. tigrina for the advancement in knowledge of this morphogenetic route (pathways) and the factors that modulate, and their applications in the conservation and propagation of germplasm. Leaf explants obtained from young plants, in vitro micropropagated were inoculated into culture medium MS/2 supplemented with 9µM TDZ for the induction and development of PLBs. The cultures were collected after zero, two, seven, 14, 30, 60 and 100 days of cultivation, for further analysis. Proteomic analysis were performed by combining two-dimensional gels and mass spectrometry. Additionally, we performed standard evaluations of total soluble carbohydrates and starch, sugars qualification and quantification of the IAA (Indole-3-acetic acid) hormone during induction and development of PLBs .Through the results it was possible to check a reprogramming of gene during induction and development of these structures, accompanied by anatomical, biochemical and metabolic changes.The induction of PLBs observed a significant number of proteins expressed to zero days of culture, when compared to other cultivation times. Proteins related to energy and carbohydrate metabolism; defense and response to stress and in protein synthesis showed significant changes in expression during induction of PLBs. During the development of PLBs changes in expression of proteins associated with metabolic processes; energy and carbohydrate metabolism; cell cycle and secondary metabolism and phytohormones, contributed to the high regenerative potential of these structures. After 100 days of cultivation there was greater expression of proteins compared to the other times, which may be related to metabolic activation in relation to the development of PLBs. Regarding the biochemical evaluations, it was observed that the induction and development of PLBs was clearly accompanied by an increase in IAA level and a decrease in sugar content, and this signal appears to be important for cells to differentiate and acquire the necessary competence. The results obtained broaden the scientific basis for a deeper understanding of the factors that modulate the process of induction and development of PLBs in C. tigrina.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-13T12:24:03Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 384402 bytes, checksum: db0469438be4dcd05e89eab5e5eebeee (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-13T12:24:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 384402 bytes, checksum: db0469438be4dcd05e89eab5e5eebeee (MD5) Previous issue date: 2004-07-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Objetivou-se com este trabalho avaliar as características morfogênicas e estruturais do Panicum maximum x Panicum infestum cv. Massai e Brachiaria brizantha cv. Xaraés submetidos à combinação de quatro doses de nitrogênio (0, 40, 80 e 120 mg/dm 3 ) e três freqüências de corte (três, quatro e cinco folhas completamente expandidas para o capim- massai e duas, quatro e cinco folhas completamente expandidas para o capim-xaraés), em um esquema fatorial 4 x 3. Os experimentos foram desenvolvidos em casa de vegetação, ambos no delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições, totalizando 48 unidades experimentais por experimento. A semeadura foi feita em substrato agrícola comercial e após a emergência cinco plantas foram transplantadas para os vasos com 5,8 dm 3 de solo, deixando-se após o desbaste, três plantas/vaso. Trinta dias antes do transplantio aplicou-se 300 mg/dm 3 de P em todos os vasos. A adubação nitrogenada, via solução aquosa, de acordo com os tratamentos experimentais foi parcelada em quatro vezes, assim como a adubação potássica. Quando as plantas apresentavam o número de folhas expandidas indicador da freqüência de corte foram colhidas a 5 cm do solo iniciando-se as avaliações. Encerradas as avaliações as plantas foram colhidas e submetidas à secagem para determinação de MS. De acordo com os resultados observa-se que o nitrogênio teve efeito positivo sobre as características morfogênicas e estruturais de capim-massai, bem como sobre a produção de MS. A TAlF aumentou linearmente até 65 % com a dose de 120 mg/dm 3 de N. Os valores para filocrono foram de 7,87 e 12,29 dias, respectivamente para a dose de 120 mg/dm3 e para dose controle, ambos colhidas com três folhas completamente expandidas. A produção de MS da parte aérea de capim-massai, bem como a relação lâmina:colmo aumentaram linearmente com as doses de N e com a redução do número de folhas expandidas antes do corte. O número de folhas expandidas antes corte (freqüência de corte) influenciou positivamente a taxa de aparecimento foliar (folha/dia) que variou de 0,075 a 0,09 folhas/dia para três e cinco folhas, respectivamente. A duração de vida das folhas variou de 34 a 39 dias. Quanto ao capim-xaraés, observou-se que as características morfogênicas e estruturais, bem como a produção de MS, com exceção da MS radicular também responderam às doses de nitrogênio aplicadas. A TAlF (cm/dia) aumentou linearmente até 37 % na dose de 120 mg/dm3. A freqüência de corte influenciou a TAlF (cm/dia e cm/GD), filocrono (dias e GD), CFL, NFV, TSe (cm/dia) e MS da parte aérea e raiz. Concluiu-se que plantas de capim-massai e capim-xaráes são responsivas a adubação nitrogenada e que a freqüência de corte também exerce influência sobre algumas características morfogênicas, estruturais e produtivas dessas gramíneas forrageiras. / It objectified with this work to evaluate the morphogenetic and structural characteristics of Panicum maximum x Panicum infestum cv. Massai and Brachiaria brizantha cv. Xaraés submitted to the combination of four nitrogen doses (0, 40, 80 and 120 mg/dm3) and three cut frequencies (three, four and five leaves completely expanded for the massai grass and two, four and five leaves completely expanded for the xaraés grass), in a factorial outline 4 x 3. The experiments were developed at greenhouse both in the randomized design, with four repetitions, totalizing 48 experimental units per experiment. The sowing was made in commercial agricultural substratum and after the emerging five plants were transplanted for the vases with 5,8 dm3 of soil, leaving after the paring, three plant/pot. The phosphate fertilization was berformed according to fertility analysis of the soil. The nitrogen fertilization, through aqueous solution, according to the experimental treatments was divided in four turns, as well as the potash fertlization. After the plants presented the number of expanded leaves, indicating the cut frequency, they were harvested to 5 cm of the soil initiating the evaluations. After finishing the evaluations, the plants were harvested and submitted to the drying for determination of DM. According to the results, it was observed that the nitrogen had positive effect about on morphogenetics and structural characteristic of Massai grass, as well as on DM production. TAlF increased xlineally up to 65% with the dose of 120 mg/dm3 of N. The values found for filocron were from of 7,87 to 12,29 days, respectively for the dose of 120 mg/dm3 and for control doses both cut with three completely expanded leaves. The DM Production of massai shoot of, as well as the ratio lamina:stem increased linearlly with the doses of N and with the reduction of the number of leaves expanded before the cut. The number of leaves expanded before cuts influenced positively the foliate appearance rate. Life duration of the leaves varied from 34 to 39 days. In relation the xaraés grass the morphogenetic and structural characteristics, as well as DM production, except for DM root also responded to the doses of applied nitrogen. TAlF (cm/day) increased linearlly up to 37% in the dose of 120 mg/dm3. The cut frequency influenced TAlF (cm/day and cm/GD), filocron (days and GD), CFL, NFV, TSe (cm/day) and DM of the shoot and root. It follows that massai grass and xaeaés grass are responsives the nitrogen fertlization and that the cut frequency also influences some morphogenetic, structural and productive characteristics of these forage grass.