Das Ziel der vorliegenden Arbeit war es, die Wirksamkeit der beiden biologischen Präparate NeemAzal MD5 und TRF 002 MD auf das Entwicklungspotential der Larven der großen Stubenfliege (Musca domestica) und der Güllefliege (Hydrotaea aenescens) zu untersuchen. Bei den Präparaten handelte es sich um den Extrakt aus den Samen des tropischen Niembaumes (Azadirachta indica) mit dem Hauptwirkbestandteil Azadirachtin A in einer Konzentration von 5 % und um den Extrakt aus dem Bitterholz (Quassia amara) mit dem Hauptwirkstoff Quassin in einer Konzentration von 0,61 %. Die Larvenstadien 1 und 3 jeder Fliegenart wurden dem jeweiligen Präparat, das in verschiedenen Konzentrationen entweder eingemischt im Brutsubstrat (orale Aufnahme) oder in einem Tauchbad (topische Applikation) getestet wurde, ausgesetzt. Der Einfluss der Wirkstoffe auf die Parameter Verpuppungsrate, Schlupfrate, Entwicklungsdauer, Fliegengröße und Vorkommen von Asymmetrien wurde dabei ermittelt. NeemAzal MD5 in 5 % Lösung verhinderte, eingemischt ins Brutsubstrat, vollständig den Schlupf der Fliegen unabhängig vom Alter der verwendeten Larven. Das jüngste Larvenstadium wies dabei noch eine deutlich höhere Empfindlichkeit gegenüber dem Wirkstoff auf, hier reichte bereits eine 1 % Lösung aus, um die Entwicklung von Fliegen zu unterdrücken. Unterschiede in der Wirksamkeit auf die beiden verwendeten Fliegenarten waren gering. Hydrotaea aenescens erwies sich hierbei als etwas empfindlicher gegenüber NeemAzal MD5 als die Larven von Musca domestica. Die topische Applikation des Präparates auf das Larvenstadium 3 führte in den verwendeten hohen Konzentrationen (5 %, 10 %) nur zu einer Reduktion der Fliegenanzahl. Für eine vollständige Verhinderung der Fliegenentwicklung ist eine möglichst frühzeitige orale Aufnahme des Wirkstoffes durch die Larven notwendig. Es kommt dabei neben der Fraßhemmung zu einer Beeinflussung der Wachstums- und Häutungshormone, was die Metamorphose der Insekten unterdrückt. Die unter Laborbedingungen bewiesene insektizide Wirksamkeit von NeemAzal MD5 und seine Umweltverträglichkeit prädisponieren das Präparat für Feldversuche gegen Fliegenplagen in der ökologischen Tierhaltung. TRF 002 MD bewirkte auch in der höchsten verwendeten Konzentration (10 %), eingemischt in das Brutsubstrat der Larvenstadien 1 und 3 der beiden Fliegenarten, nur eine Reduktion der Schlupfrate um bis zu 30 % gegenüber den Kontrollgruppen. Die topische Anwendung dieser Substanz erwies sich in den durchgeführten Versuchen als nahezu wirkungslos auf die untersuchten Parameter. Damit war das Präparat nicht geeignet, das Schlüpfen von Fliegen vollständig zu verhindern.

This research was aimed to evaluate in vivo effects of citronella oil on cattle ectoparasites. Two experiments with different levels of citronella oil (I) and the relationships with phytotherapic and the synthetic acaricide (II) were evaluated. In experiment I, twenty Holstein cows were allocated in four groups of five animals. The treatments were: negative control, amitraz at 0.025% and citronella oil at 3 and 4%. Engorged ticks and flies (horn fly, stably fly and domestic fly) were evaluated on animals before (mean of days -3, -2, -1) and at 3; 7 and 14 days after treatment. The efficacy of control ticks was 89.2; 36.5 and 35.8% for amitraz and citronella oil at 3 end 4% respectively, on 14th day post-treatment. Lower control of flies was observed for phytotherapic treatments. In experiment II, fifteen Holstein cows were allocated in three groups of five animals. The treatments were: negative control, amitraz at 0.025% and citronella oil at 4%. Engorged ticks and flies were evaluated on animals before (mean of days -3, -2, -1) and at 7; 14; 21 and 28 days after treatment. In 28 days there was need to reapply the amitraz to control engorged ticks. The relationship among the number of application was the 1:2.5 for amitraz and citronella oil, respectively. The efficacy in control ticks were 71.8 and 30.9% for amitraz and citronella oil at 4% respectively. Lower control of flies was observed for phytotherapic treatment. / O objetivo desta pesquisa foi avaliar in vivo diferentes níveis de óleo de citronela em ectoparasitas de bovinos. Foram conduzidos dois experimentos com diferentes níveis de óleo de citronela (I) e a relação de banho entre o produto fitoterápico e um acaricida sintético (II). No experimento I, foram utilizadas 20 vacas da raça Holandês, distribuídas em quatro grupos de cinco animais cada um. Os tratamentos foram constituídos pelo controle negativo, amitraz a 0,025%, óleo de citronela a 3 e 4%. Para avaliação foram contadas fêmeas ingurgitadas de carrapato e moscas (mosca-dos-chifres, mosca-dos-estábulos e mosca doméstica) antes (média dos dias -3, -2, -1) e após a aplicação dos produtos nos dias 3; 7 e 14. A eficácia no controle do carrapato foi de 89,2; 36,5 e 35,8% para o amitraz e óleo de citronela a 3 e 4%, respectivamente. Verificou-se baixo controle de moscas nos tratamentos constituídos pelo fitoterápico. No experimento II, foram utilizadas 15 vacas da raça Holandês, distribuídas em três grupos de cinco animais cada um. Os tratamentos foram constituídos pelo controle negativo, amitraz a 0,025% e óleo de citronela a 4%. Para avaliação foram contadas fêmeas ingurgitadas de carrapato e moscas antes (média dos dias -3, -2, -1) e após a aplicação dos produtos nos dias 7; 14; 21 e 28. Aos 28 dias, houve necessidade de se reaplicar o amitraz para controlar a infestação com carrapato. A relação entre o número de aplicações foi de 1:2,5 para amitraz e citronela, respectivamente. A eficácia no controle do carrapato foi de 71,8 e 30,9% para o amitraz e óleo de citronela a 4%, respectivamente na média pós-tratamento. Verificou-se baixo controle de moscas no tratamento constituído pelo fitoterápico.

Sixteen lactating Holstein cows were used to evaluate the effect of suply of garlic in the feed on the alteration of load of tick, horn fly and stably fly and domestic fly. The treatments were garlic at 100g (A100) and 200g cow-1 (A200) for three days, Amitraz at 0.025% (Am) and negative control group. Engorged ticks were evaluated with lengh superior to 4.0 mm and flys before and at 1st, 2nd, 3rd, 4th, 5th, 6th, 7th, and 14thday after treatment. In the 1st, 2nd, 3rd days after treatments, milk samples were taken for flavor evaluation on raw milk and soft cheese Minas-Frescal. The efficacy of treatments were 27.34; 12.31; e 97.05% for (A100), (A200) e (Am), respectively. Commercial ectoparasiticide was more efficacious in the control of ticks. Garlic show low efficacy on control tick and inefficacious in control of flies. In these treatments, no residual garlic flavor or taste was detected on milk and cheese. / Dezesseis vacas de raça Holandesa em lactação foram utilizadas para avaliar o efeito da administração de alho na alimentação sobre a alteração da carga de carrapato, mosca-doschifres, mosca dos estábulos e mosca doméstica. Os tratamentos foram constituídos por alho a 100g (A100) e 200g vaca-1 (A200), por três dias, o amitraz a 0,025% (Am) e pelo grupo controle negativo. Para avaliação foram contadas as fêmeas ingurgitadas de carrapato com comprimento superior a 4 mm e as moscas antes da aplicação e no 1o, 2o, 3o, 4o, 5o, 6o, 7o e 14o dia após a aplicação de cada tratamento. No 1o, 2o e 3o dia pós-tratamento foram coletadas amostras de leite para avaliação das propriedades organolépticas do leite cru e do queijo Minas-Frescal. A eficácia dos tratamentos foi de: 27,34; 12,31; e 97,05% para (A100), (A200) e (Am), respectivamente. O antiparasitário comercial (Am) foi o mais eficaz no controle de carrapatos. O alho apresentou baixa eficácia no controle do carrapato e ineficácia no controle das moscas. Nestes tratamentos, não foi detectado odor ou sabor de alho no leite e no queijo.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_sabrina_freitas.pdf: 1992341 bytes, checksum: e2903ed40e8e2476de47f5ebd7b9fc26 (MD5) Previous issue date: 2008-04-23 / The extracts of vegetal origin have been largely studied with the aim of obtaining an efficient and ecologically viable alternative to the control of plagues.The study of substances with selective deterrent bioactivity that affects insect s behavior, development and reproductive output is extremely important to avoid the problems caused by non selective chemical insecticides.Based in the importance of Musca domestica L.(Diptera,Muscidae)due to its high potential of carrying pathogens,its occurrence in high populations and in the lack of studies about the effects of vegetal extracts over insects,the present study was carried out with the objective of evaluating the deterrent bioactivity of aqueous extracts of Eucalyptus sp. L'Hér. (Myrtaceae)and Melia azedarach L.(Meliaceae)over larvae of M. domestica and the influence of the aqueous extract of M. azedarach on the oviposition behavior of this insect.To evaluate the influence of the aqueous extracts of Eucalyptus sp.and M. azedarach on larvae of M. domestica... / Os extratos de origem vegetal têm sido amplamente estudados visando se obter uma alternativa eficaz e ecologicamente viável para o controle de pragas.O estudo de substâncias com bioatividade deterrente seletiva,que atuem sobre o comportamento,desenvolvimento e performance reprodutiva dos insetos,é de extrema importância,a fim de se evitar os problemas causados pelo uso de inseticidas químicos não seletivos.Baseado na importância de Musca domestica L. (Diptera,Muscidae)devido ao alto potencial de veiculação de patógenos e ocorrência em altas populações,e na carência de estudos sobre os efeitos de extratos vegetais sobre os insetos,realizou se o presente estudo,com o objetivo de avaliar a bioatividade deterrente de extratos aquosos de Eucalyptus sp. L'Hér. (Myrtaceae)e Melia azedarach L.(Meliaceae)sobre larvas de M. domestica e a influência do extrato aquoso de M. azedarach sobre o comportamento de oviposição desse inseto.ara avaliar a influência dos extratos aquosos de Eucalyptus sp.e M. azedarach sobre larvas de M. domestica foram utilizadas as concentrações de 5 e 10%,sendo estabelecidas três réplicas para cada tratamento,além do grupo controle.Foram utilizadas 50 larvas de primeiro estádio de M. domestica para cada réplica,sendo os extratos aquosos oferecidos junto ao substrato de alimentação das larvas,utilizando se água para o grupo controle.As larvas foram acompanhadas até atingirem o estágio de pupa e emergência dos adultos,sendo estimado o período larval;mortalidade larval;período pupal;peso das pupas;mortalidade pupal;razão sexual;peso das fêmeas;número de ovos;investimento reprodutivo;morfometria da asa e tamanho da tíbia e mortalidade total.Com exceção das variáveis,período larval e pupal,que tiveram uma redução significativa no tratamento com extrato aquoso a 10%,o fitoextrato de Eucalyptus sp.não influenciou significativamente nas variáveis analisadas,não interferindo no desenvolvimento de M. domestica or outro lado,o extrato aquoso de M. azedarach em ambas as concentrações, provocou aumento do período larval,redução de peso das pupas e das fêmeas, redução de tamanho das fêmeas,diminuição do número de ovos e investimento reprodutivo,maior mortalidade,além de redução do período pupal na concentração de 5%,exercendo bioatividade negativa sobre características biométricas e morfométricas,promovendo a redução da performance reprodutiva.A influência do extrato aquoso de M. azedarach a 10%no comportamento de oviposição de M. domestica foi estimada através da oferta simultânea e independente do fitoextrato em sítios de oviposição,sendo estabelecidas três réplicas para cada tratamento.Os resultados revelaram que tanto na oferta isolada como na oferta simultânea,houve redução significativa do número de ovos,aumento do período de pré oviposição,do tempo letal médio e da longevidade das fêmeas,na tentativa de cumprir a performance reprodutiva,demonstrando a bioatividade deterrente dessa planta.

Das Ziel der vorliegenden Arbeit war es, die Wirksamkeit der beiden biologischen Präparate NeemAzal MD5 und TRF 002 MD auf das Entwicklungspotential der Larven der großen Stubenfliege (Musca domestica) und der Güllefliege (Hydrotaea aenescens) zu untersuchen. Bei den Präparaten handelte es sich um den Extrakt aus den Samen des tropischen Niembaumes (Azadirachta indica) mit dem Hauptwirkbestandteil Azadirachtin A in einer Konzentration von 5 % und um den Extrakt aus dem Bitterholz (Quassia amara) mit dem Hauptwirkstoff Quassin in einer Konzentration von 0,61 %. Die Larvenstadien 1 und 3 jeder Fliegenart wurden dem jeweiligen Präparat, das in verschiedenen Konzentrationen entweder eingemischt im Brutsubstrat (orale Aufnahme) oder in einem Tauchbad (topische Applikation) getestet wurde, ausgesetzt. Der Einfluss der Wirkstoffe auf die Parameter Verpuppungsrate, Schlupfrate, Entwicklungsdauer, Fliegengröße und Vorkommen von Asymmetrien wurde dabei ermittelt. NeemAzal MD5 in 5 % Lösung verhinderte, eingemischt ins Brutsubstrat, vollständig den Schlupf der Fliegen unabhängig vom Alter der verwendeten Larven. Das jüngste Larvenstadium wies dabei noch eine deutlich höhere Empfindlichkeit gegenüber dem Wirkstoff auf, hier reichte bereits eine 1 % Lösung aus, um die Entwicklung von Fliegen zu unterdrücken. Unterschiede in der Wirksamkeit auf die beiden verwendeten Fliegenarten waren gering. Hydrotaea aenescens erwies sich hierbei als etwas empfindlicher gegenüber NeemAzal MD5 als die Larven von Musca domestica. Die topische Applikation des Präparates auf das Larvenstadium 3 führte in den verwendeten hohen Konzentrationen (5 %, 10 %) nur zu einer Reduktion der Fliegenanzahl. Für eine vollständige Verhinderung der Fliegenentwicklung ist eine möglichst frühzeitige orale Aufnahme des Wirkstoffes durch die Larven notwendig. Es kommt dabei neben der Fraßhemmung zu einer Beeinflussung der Wachstums- und Häutungshormone, was die Metamorphose der Insekten unterdrückt. Die unter Laborbedingungen bewiesene insektizide Wirksamkeit von NeemAzal MD5 und seine Umweltverträglichkeit prädisponieren das Präparat für Feldversuche gegen Fliegenplagen in der ökologischen Tierhaltung. TRF 002 MD bewirkte auch in der höchsten verwendeten Konzentration (10 %), eingemischt in das Brutsubstrat der Larvenstadien 1 und 3 der beiden Fliegenarten, nur eine Reduktion der Schlupfrate um bis zu 30 % gegenüber den Kontrollgruppen. Die topische Anwendung dieser Substanz erwies sich in den durchgeführten Versuchen als nahezu wirkungslos auf die untersuchten Parameter. Damit war das Präparat nicht geeignet, das Schlüpfen von Fliegen vollständig zu verhindern.

Made available in DSpace on 2015-03-05T16:20:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 29 / Banco Santander / Banespa / Musca domestica é um inseto cosmopolita e conhecido pelo seu comportamento sinantrópico e endofílico. Estas características representam um grande risco para as indústrias de alimentos, uma vez que moscas são vetores mecânicos de diversas doenças gastrointestinais causadas por microrganismos patogênicos que são carregados por estas. A fim de verificar como os fatores ambientais (umidade relativa do ar, temperatura e índice pluviométrico) e fatores antrópicos (processos de higienização, gerenciamento de resíduos e controle químico de pragas) influenciam na ocorrência e proliferação de moscas, foram realizadas coletas de M. domestica em dois frigoríficos de abate de aves, localizados nas cidades de Montenegro e Passo Fundo, no Rio Grande do Sul. Nesses experimentos, foram utilizadas armadilhas luminosas para atrair as moscas, que foram capturadas em placas adesivas e contabilizadas quinzenalmente. As armadilhas foram instaladas em diversos setores do frigorífico, classificados em duas categorias: A – setores com / Musca domestica is a cosmopolitan insect and very known about its synanthropic and inner behavior. These characters represent a might risk to food industries, despite the fact that house flies are mechanical vectors of many microrganisms that cause intestinal diseases. Surveys were made to check how environmental factors (humidity, temperature and rainfall) and anthropic factors (hygienic process, waste management and chemical pest control) influence the remaining and occurrence of house flies in two chicken slaughter houses, in Montenegro and Passo Fundo, in Rio Grande do Sul. In this research, light traps were used to attract house flies which were captured on sticky board and summed fortnightly. The light traps were installed in many sectors of the slaughter houses, separated in two categories: A – sectors with solid and liquid organic waste and B – sectors without organic waste. Kruskal-Wallis 5% of probability showed that the difference between two categories is statistically significant, with three time

Efficient disposal methods are needed to manage manure produced by industrial animal production. Saprophagous fly larvae could potentially convert manure into fertilizer and produce protein; however, the process is not well studied. Musca domestica, Hydrotaea aenescens, and Coproica hirtula were investigated to determine the most suitable species and conditions that facilitate efficient poultry manure conversion. The objectives were to (1) develop laboratory protocols and timelines for fly production; (2) identify environmental conditions that affect conversion; and (3) determine the ideal manure moisture content, depth, and fly egg-to-manure ratio for manure conversion and protein production. Mass-production was possible for every species and timelines were established for all species except C. hirtula. The most promising species for use in a conversion system was M. domestica and the presence of C. hirtula facilitated complete conversion. When using these species simultaneously the ideal initial conditions were: 77.5% moisture, 2.9cm deep and 0.82g eggs/kg manure. / OMAFRA/ University of Guelph partnership

Orientador: João Alexandre Ribeiro Gonçalves Barbosa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T20:09:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Valerio_AmandaAbdalla_D.pdf: 3553304 bytes, checksum: 97ba97062f1c23d4b29447c0b9a7316d (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Glicosídeo hidrolases (EC 3.2.1.-) são enzimas que hidrolisam ligações glicosídicas. Neste trabalho realizamos estudos funcionais e estruturais de duas glicosídeo hidrolases: a celulase XF0810 de Xylella fastidiosa e a lisozima digestiva 1 de Musca domestica (MdL1). A celulase XF0810 está anotada no genoma da X. fastidiosa como membro da família 5 das glicosídeo hidrolases (EC 3.2.1.4). Após a amplificação, clonagem, expressão e purificação da mesma; prosseguimos com os experimentos de filtração em gel analítica, dicroísmo circular, DLS, ensaio enzimático e cristalização desta proteína. Foi feito um estudo de modelagem onde ficou evidenciado que a XF0810 não pertenceria à família 5 pois quatro dos sete resíduos conservados que caracterizam esta família foram substituídos, incluindo os dois resíduos catalíticos de glutamato essenciais para o mecanismo de clivagem de retenção. Isto foi comprovado através da ausência de atividade nos ensaios feitos com a proteína purificada. A MdL1 pertence à família 22 das glicosídeo hidrolases (EC 3.2.1.17) e foi cristalizada com o ligante Nacetilquitotetraosídeo para a difração de raios X. A resolução da estrutura (2H5Z no PDB) foi realizada por meio do método de substituição molecular tendo como modelo a estrutura nativa. A análise comparativa da MdL1 com outras lisozimas de quatro classes diferentes de animais mostrou grande semelhança e pequenas diferenças apenas na região das voltas. Estas diferenças foram utilizadas para explicar as características especiais de uma lisozima com função digestiva. A volta na região definida pelos resíduos 98-100 apresenta uma deleção na MdL1, tornado-a menos exposta ao solvente, podendo justificar a resistência à proteólise. O resíduo Gln100 participa de uma interação com o ligante. Os resíduos Thr107 e Asn46 são apontados como responsáveis pelo decréscimo dos pKa dos grupos carboxilas dos resíduos catalíticos Glu32 e Asp50, respectivamente. A diminuição dos pKa explica o pH ótimo mais ácido característico de lisozimas digestivas / Abstract: Glycoside hydrolases (EC 3.2.1.-) are enzymes that hydrolyze glycoside bonds. In this work we studied functional and structural features of two glycoside hydrolases: the cellulase XF0810 of Xylella fastidiosa and the digestive lysozyme 1 of Musca domestica (MdL1). The cellulase XF0810 is annotated in the genome of X. fastidiosa as member of family 5 of glycoside hydrolases (EC 3.2.1.4). After the amplification, cloning, expression and purification of XF0810; we continued with the experiments of analytical gel filtration, circular dichroism, DLS, enzymatic assay and crystallization of this protein. A homology model was built which showed that XF0810 did not belong to family 5 because four of seven conserved residues that characterize the family were substituted, including the two catalytic residues of glutamate that are essential for the retention hydrolysis mechanism. This was further confirmed by the absence of activity in the assays (exocellulase with PNPc) performed with the purified protein. The MdL1 belongs to the family 22 of glycoside hydrolases (EC 3.2.1.17) and was crystallized with the ligand N-acetilchitotetraose for X-ray diffraction. The resolution of the structure (2H5Z in PDB) was accomplished by molecular replacement with the native structure as the searching model. The comparative analysis of MdL1 with other lysozymes of four different classes of animals showed a high similarity and few differences appeared only in the loops¿ regions. These differences were used to explain the special characteristics of the lysozyme with a digestive function. The loop in the region defined by residues 98-100 presents one deletion in the MdL1, becoming less exposed to the solvent, this might justify the proteolysis resistance. The residue Gln100 participates directly in an interaction with the ligand. The residues Thr107 and Asn46 are pointed out as responsible for a reduction in the pKa of the carboxyl groups of catalytic residues Glu32 e Asp50, respectively. The reduction in pKa explains the more acidic pH optimum that characterizes the digestive lysozymes / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2017-08-24T18:58:04Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcos Daniel Filgueiras Gomes - 2017.pdf: 1627510 bytes, checksum: 4f9bbc1cf7e9457ee3eb0b398bfffc42 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Rejected by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com), reason: subtituir PDF on 2017-09-01T17:18:15Z (GMT) / Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2017-09-05T14:58:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcos Daniel Filgueiras Gomes - 2017.pdf: 1627510 bytes, checksum: 4f9bbc1cf7e9457ee3eb0b398bfffc42 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Rejected by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com), reason: on 2017-09-05T17:01:40Z (GMT) / Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2017-09-05T17:03:46Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcos Daniel Filgueiras Gomes - 2017.pdf: 1628086 bytes, checksum: 7ab87fcdc18cfc95d88131b8b9272ecc (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-09-15T15:11:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcos Daniel Filgueiras Gomes - 2017.pdf: 1628086 bytes, checksum: 7ab87fcdc18cfc95d88131b8b9272ecc (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-15T15:11:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcos Daniel Filgueiras Gomes - 2017.pdf: 1628086 bytes, checksum: 7ab87fcdc18cfc95d88131b8b9272ecc (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-03-09 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The current study investigated the virulence of Metarhizium spp., Beauveria bassiana and Isaria javanica against Musca domestica larva; it also compared the virulence of different propagules, and evaluated the efficacy of matrine, a plant alkaloid, and the association of matrine and entomopathogenic fungi against larvae of Musca domestica. In addition, the study reports the conidial viability and radial growth of different fungal isolates in culture medium supplemented or not with matrine. Conidia produced on BDAL medium were suspended in Tween 80 0.01% and adjusted to 1 × 108 conidia / mL, and spread on filter paper for indirect treatment of third-instar larvae of M. domestica. The efficacy of treatment ranged from 77,44% (IP 119) to 87,35% (IP 146) among Metarhizium spp. isolates. The efficacy of treatment ranged from 39,37% (ARSEF 9588) to 70,60% (IP 361) among the isolates of B.bassiana; variations between 26,75% (CG 1316) and 53,28% (CG 1283) was reported in groups treated with isolates of I. javanica. Conidia and blastospores of fungi were produced on Adamek medium, and suspensions were prepared and adjusted to 1 × 108 propagules/mL. Aliquots were used in indirect treatments by spreading the suspension to sterile filter paper or to comminuted ration to evaluate virulence in third or second instar larvae, respectively. Only the treatment with IP 146 blastospores in ration was effective against M. domestica larva. Larvae were immersed on matrine solutions (direct treatment) or exposed to sterile-filter paper treated with matrine (indirect treatment) in different concentrations (1, 5, 10 and 20 mg/mL). Ten larvae were assayed in each treatment and control group. Matrine concentrations higher than 1 mg/mL were effective against M. domestica larva in both treatments. Germination of conidia of Metarhizium spp., B. bassiana and I. javanica isolates was assessed at 24 and 48 honto BDAL medium plus chloramphenicol and benomyl, supplemented or not (control) with matrine. All isolates had germination around 100%, in both incubation times evaluated. In addition, the radial growth of isolates was evaluated on BDAL medium supplemented or not (control) with matrine. The isolates of Metarhizium spp. and B. bassiana, with the exception of CG 138, had a reduced radial growth on medium containing matrine. Isolates of I. javanica did not reduce their growth when exposed to matrine. The association of entomopathogenic fungi [IP 119 (Metarhizium anisopliae s.s.), CG 307 (Beauveria bassiana) or CG 1285 (Isaria javanica)] with matrine (1; 0,5; 0,1; 0,05; 0,01 mg/mL), was investigated against larva of M. domestica in indirect tests on sterile filter paper. The association of fungal conidia and matrine was more efficient against M. domestica larva than conidia, and the association was more efficient than matrine alone. All experiments were incubated at 27 ± 1 oC and RH ≥ 80%. In conclusion, Metarhizium sp. is indicated as a promising microbial agent to control larva of M. domestica; also, IP 146 blastospores applied to ration were effective in the control of second instar larvae. In addition, the alkaloid matrine was effective to control M. domestica larva; it did not affect the viability of the conidia of the fungi investigated in this study, but it slowed down the growth of most of the Metarhizium and Beauveria isolates tested. Radial growth of isolates of Isaria sp. was not affected by supplementation of medium with matrine. No increased efficiency against M. domestica larva was detected when fungi was associated with matrine. / O presente estudo investigou a virulência de Metarhizium spp., Beauveria bassiana e Isaria javanica contra larvas de Musca domestica; comparou também a virulência de diferentes propágulos fúngicos, e avaliou a eficácia de matrine, um alcaloide vegetal, e sua associação com fungos entomopatogênicos contra larvas de M. domestica. Além disso, o estudo relata a viabilidade conidial e o crescimento radial de diferentes isolados fúngicos em meio de cultura suplementado ou não com matrine. Nesse sentido, conídios produzidos em meio BDAL foram suspensos em Tween 80 a 0,01% e ajustados a 1 × 108 conídios/mL e espalhados em papel filtro para o tratamento indireto de larvas de terceiro ínstar de M. domestica. A eficácia do tratamento dos isolados de Metarhizium spp. variou entre 77,44% (IP 119) e 87,35% (IP 146). A eficácia do tratamento variou de 39,37%(ARSEF 9588) e 70,60% (IP 361) entre os isolados de B.bassiana, e variações entre 26,75% (CG 1316) e 53,28% (CG 1283) foram observadas em grupos tratados com isolados de I. javanica. Conídios e blastosporos de IP 146 (Metarhizium robertsii) e IP 361(Beauveria bassiana) foram produzidos em meio Ádamek, em seguida foram preparadas suspensões e estas ajustadas para 1 × 108 propágulos/mL. Tratamentos indiretos foram conduzidos espalhando-se a suspensão em papel filtro estéril ou em rações para avaliar a virulência em larvas de terceiro ou segundo ínstar de M. domestica, respectivamente. Apenas o tratamento com blastosporos IP 146 em ração foi eficaz contra larva de M. domestica. Larvas de M. domestica também foram imersas em soluções contendo matrine (tratamento direto) ou expostas a papel filtro estéril tratado com matrine (tratamento indireto) em diferentes concentrações (1, 5, 10 e 20 mg / mL); dez larvas foram utilizadas em cada tratamento e grupo de controle. Para ambos tratamentos concentrações de matrine superiores a 1 mg/mL foram eficazes contra larvas de M. domestica. A germinação de conídios dos isolados de Metarhizium spp., B. bassiana e I. javanica foi avaliada em 24 e 48 horas sobre meio BDAL acrescido de cloranfenicol e benomil, e suplementado ou não (controle) com matrine (2%). Todos os isolados tiveram germinação em torno de 100%, em ambos os tempos de incubação avaliados. O crescimento radial de isolados também foi avaliado em meio BDAL suplementado ou não (controle) com matrine. Nesse estudo, os isolados de Metarhizium spp. e B. bassiana, com exceção de CG 138, tiveram crescimento radial reduzido em meio contendo matrine. Os isolados de I. javanica, no entanto, não reduziram seu crescimento quando expostos à matrine em meio de cultura. Foi investigada a associação de fungos entomopatogênicos [IP 119 (Metarhizium anisopliae s.s.), CG 307 (Beauveria bassiana) ou CG 1285 (Isaria javanica)] com matrine (1; 0,5; 0,1; 0,05; 0,01 mg/mL) contra larvas de M. domestica. Em testes indiretos em papel filtro estéril, a associação de conídios fúngicos e matrine foi mais eficaz contra larva de M. domestica do que conídios apenas, e a associação foi mais eficiente do que matrine sozinho. Todos os experimentos foram incubados a 27 ± 1 oC e UR ≥ 80%. Concluindo, Metarhizium sp. é indicado como um agente microbiano promissor para controlar larvas de M. domestica; também, blastosporos do isolado IP 146 aplicados à ração foram eficazes no controle de larvas de segundo instar. Além disso, o alcaloide matrine foi eficaz para controlar larvas de M. domestica; não afetou a viabilidade dos conídios dos fungos investigados neste estudo, mas retardou o crescimento da maioria dos isolados de Metarhizium e Beauveria testados. O crescimento radial de isolados de Isaria sp. não foi afetado pela suplementação de meio com matrine. Não houve aumento da eficácia contra larva de M. domestica quando fungos foram associados ao matrine.

El previsible aumento de la población mundial, estimado para el año 2050 en 9.500-10.000 millones de personas, supondrá uno de los principales retos a los que se enfrente el siglo XXI. Además de los recursos e insumos necesarios (espacio, agua, residuos etc.), la seguridad alimentaria del planeta conllevará una elevada demanda de proteínas tanto para la alimentación animal como para la nutrición humana. Nuestras principales fuentes de proteína provienen de la agricultura, la ganadería (incluyendo la acuicultura) y la pesca. Es por ello por lo que la producción y rendimiento de las plantas y animales domesticados, ha aumentado exponencialmente a lo largo de las últimas décadas, estando en la actualidad muy cerca de sus límites biológicos. Sin embargo, esta elevada eficiencia esta inversamente relacionada con la sostenibilidad ambiental de estos sistemas de producción. Entre las consecuencias, la producción de piensos compuestos altamente nutritivos también ha aumentado. Para su elaboración son necesarias grandes cantidades de harina y aceite de pescado, así como de soja, entre otros componentes. El cultivo intensivo de soja conlleva graves problemas medioambientales. Por otro lado, el medio marino está cada vez más deteriorado como consecuencia de la contaminación derivada de la actividad humana y la sobreexplotación pesquera. Todo ello ha provocado una inestabilidad económica a largo plazo y un aumento continuado de los precios de estas materias primas. Pero ¿es técnicamente posible maximizar la sostenibilidad de estos sistemas de producción, optimizando simultáneamente la imprescindible eficiencia económica? Con este objetivo, se hace necesaria la búsqueda de nuevas fuentes de proteínas que puedan utilizarse como ingredientes en la elaboración de piensos compuestos destinados a la alimentación animal e indirectamente a la nutrición humana. Una de las más prometedoras, es la obtención de proteína animal a partir de la biomasa de ciertas especies de insectos domesticados. En particular, la utilización de proteínas y grasas de insectos a escala industrial, mejorará significativamente la sostenibilidad y eficiencia de la ganadería terrestre y la acuicultura. Indirectamente, permitirá mantener los niveles de pesca a unos niveles racionales y los subproductos derivados tienen un gran valor agronómico como fertilizantes de origen natural. Entre los candidatos más plausibles, los dípteros (Insecta: Diptera) presentan características biológicas y nutricionales que los hacen buenos candidatos para su producción a escala industrial. Una de las especies más prometedoras es la mosca soldado negra Hermetia illucens (Linnaeus, 1758) que junto con el coleóptero Tenebrio molitor Linnaeus, 1758 constituyen actualmente los principales integrantes de este nuevo sector de producción. La Unión Europea, también ha aprobado el uso de otras cinco especies de insectos como ingredientes de la alimentación animal, destacando entre estas la mosca común Musca domestica Linnaeus, 1758. Otras especies de dípteros no están todavía aprobadas con este fin, pero también resultan muy interesantes por su gran potencial para la cría artificial, como las especies de Calliphoridae Lucilia sericata (Meigen, 1826) o Chrysomya megacephala (Fabricius, 1794). Entre los componentes que forman parte de los piensos compuestos en la alimentación animal, los minerales suponen un importante grupo limitante desde un punto de vista nutritivo. Mediante un aporte óptimo de minerales, se puede aumentar considerablemente el rendimiento de la producción ganadera a un bajo coste. No obstante, los niveles de estos compuestos deben mantenerse dentro de unos niveles determinados por la legislación para evitar problemas nutricionales o provocar efectos nocivos en la salud animal y humana. En este sentido, existen muy pocos estudios sobre los perfiles minerales de la biomasa de insecto en general y en particular de la mosca soldado negro y otras especies de dípteros. Son especialmente escasos los datos sobre la influencia que pueda ejercer la composición del sustrato de desarrollo de las larvas, así como su importancia en las diferentes etapas de desarrollo del ciclo de vida. Por otro lado, existe la posibilidad de que se produzca bioacumulación de metales pesados en la biomasa del insecto a través de la ingesta. Así, debido a su alta toxicidad, existen diversos trabajos sobre las concentraciones de Cd y Pb en larvas maduras de mosca soldado negra, pero hay muy poca información sobre bioacumulación en el resto de etapas y estadios de desarrollo, así como de la posible influencia del medio de cría larvario. En este proyecto de tesis se analiza la posible influencia del sustrato de cría en las concentraciones de distintos minerales y metales pesados a lo largo de las etapas del ciclo de vida de Hermetia illucens y otras especies de dípteros. Para ello se usaron tres sustratos larvarios con diferentes orígenes: a) pienso comercial de gallina ponedora, b) bagazo derivado de la producción de cerveza y c) una mezcla de carne de origen porcino. En el caso de H. illucens se tomaron muestras de larvas prepupales, pupas, puparios, exuvias prepupales y adultos desarrollados en los tres medios de desarrollo. En todos los casos, tras su secado y digestión en horno microondas, se analizaron mediante espectrometría de emisión óptica de plasma acoplado por inducción (ICP-OES) para obtener las concentraciones de Ca, Cr, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Na, Ni y Zn, y en espectrometría de masas con fuente de ionización de plasma (ICP-MS) para obtener las concentraciones de Ti, Co, Sr, Mo, Cd, Sn y Pb. Pocos insectos tienen la capacidad para desarrollarse en medios de tan diferente composición orgánica, por ello a modo comparativo se utilizó M. domestica con pienso comercial de gallina y el bagazo de cerveza, mientras que Lucilia sericata y Chrysomya megacephala se desarrollaron exclusivamente en el medio de origen cárnico. De esta manera no solamente se pudieron comparar diferentes tipos de medio procesados por diferentes tipos de insectos sino que también pudieron compararse los resultados obtenidos por diferentes especies de mosca con el mismo tipo de medio. En cuanto a relaciones entre patrones de acumulación (Factor de Bioacumulación) y concentraciones de los minerales, con la especie de díptero y el sustrato utilizado, en larvas prepupales y adultos no se observa ninguna relación entre resultados y la especie o el sustrato, en cambio, los resultados en pupas y puparios sí están influenciadas por la especie de estudio y el sustrato de alimentación usado. Por otro lado, Ca y Na se comportan de manera distinta en las especies estudiadas en esta investigación. La mosca soldado negra presenta un buen perfil mineral para su uso en alimentación animal, comparable con los de harina de pescado y soja. Los resultados con mosca doméstica son también comparables a las harinas de pescado y soja, en los dos medios estudiados. Los dos califóridos presentan un perfil mineral de menor calidad, pero comparable a la harina de soja y también aptos para su uso en la elaboración de piensos.