A tuberculose resistente a múltiplos fármacos (TB MDR) é definida como uma forma de tuberculose (TB) causada por Mycobacterium tuberculosis resistente a pelo menos isoniazida e rifampicina. A TB MDR é um problema mundial crescente resultante da não adesão dos pacientes ao tratamento e pelo gerenciamento ineficaz da doença pelos sistemas de saúde. Este estudo foi realizado com o objetivo de identificar os fatores de risco e os padrões de transmissão da TB MDR no Estado do Rio Grande do Sul, comparando os resultados obtidos com aqueles casos de TB suscetíveis aos fármacos. Durante os anos de 1999 e 2000 foram identificados 60 isolados MDR no Laboratório Central do RS (LACEN) e 202 isolados suscetíveis aos fármacos anti-TB. Estes isolados foram analisados utilizando a técnica de Polimorfismo do Tamanho dos Fragmentos de Restrição (RFLP) baseado no IS6110. Os dados clínicos e demográficos dos pacientes portadores destas linhagens também foram analisados. Nos isolados que apresentaram seis ou menos cópias de IS6110 foi realizada uma segunda técnica de genotipagem, o Spoligotyping. Os pacientes portadores de linhagens de M. tuberculosis com padrões idênticos foram considerados clusters. Foi observado que entre os 262 isolados, 94 (36%) pertenciam a 20 distintos clusters, e após a análise por Spoligotyping, 89 destes isolados (34%) permaneceram em cluster. Os isolados MDR não diferiram estatisticamente dos isolados suscetíveis na proporção de formação de cluster. Foi observada associação significante entre a ocorrência de TB MDR e tratamento prévio (p < 0,001) e falência no tratamento (p < 0,001). No entanto, os pacientes HIV positivos foram associados com TB suscetível (p = 0,024). Também foi identificado que pacientes não casados desenvolveram mais TB devida à transmissão recente (p < 0,005). A introdução da terapia supervisionada de curta duração (DOTS) no RS será importante, pois auxiliará na diminuição das taxas de falência e abandono de tratamento, evitando o desenvolvimento de novas linhagens MDR. / Multidrug-resistant tuberculosis (MDR-TB) is defined as a form of tuberculosis (TB) caused by Mycobacterium tuberculosis resistant at least to isoniazida and rifampicina, the two most powerful anti-TB drugs. MDR-TB is an increasing global problem arising from a patient non-compliance and bad management of the disease by health care systems. This study was conducted to identify risk factors and transmission patterns of MDR-TB in Rio Grande do Sul State, comparing results with data obtained for susceptible TB cases. Sixty isolates of M. tuberculosis identified as MDR at a reference laboratory in Rio Grande do Sul State during years 1999 and 2000 were analyzed using IS6110-restriction fragment length polymorphism (RFLP) technique. The RFLP patterns of 202 susceptible strains were also analysed and genotyping results compared, as well as the clinical and demographic data. Spoligotyping analysis was performed for isolates presenting low IS6110 copy number. Patients with identical DNA pattern strains were considered clustered. From 262 isolates, ninety-four (36%) belonged to 20 distinct RFLP clusters, and after spoligotyping analysis, 89 of the isolates (34%) remained in cluster. MDR isolates did not differ statistically in clustering proportion from susceptible strains. A significant association between the occurrence of MDR and previous TB treatment was observed (p < 0.001), as well as failure on TB treatment (p < 0.001). HIV positive patients were associated to susceptible tuberculosis (p = 0.024). We also identified that unmarried patients were more likely to develop TB due to recent transmission than married patients (p < 0.005). The introduction of directly observed short-course therapy strategy (DOTS) will be important to decrease default and failure rates, avoiding the development of new MDR strains.

Base teórica: A prevalência da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) em 2007 foi de 32 milhões de pacientes infectados. Das infecções oportunistas as micobactérias estão entre as principais causas de febre em pacientes com síndrome da imunodeficiência adquirida (SIDA), apesar de que o uso da terapia anti-retroviral de alta potência (HAART) tenha diminuído a incidência de infecções oportunistas em pacientes com HIV. Em 2007, cerca de 700.000 pacientes apresentavam a co-infecção HIV e tuberculose (TB). Em países desenvolvidos as infecções pelo Mycobacterium avium complex (MAC) são a principal causa de infecção bacteriana em pacientes com SIDA. A apresentação clínica, laboratorial e radiológica das infecções por micobactéria é inespecífica. Alguns estudos têm identificado as características que podem sugerir a infecção por TB ou MOTT (Mycobacteria Other Than Tuberculosis). Ainda, o diagnóstico definitivo é demorado, pois depende do crescimento em cultura de um microorganismo de crescimento lento. O prognóstico destas infecções mesmo que tratadas adequadamente, é ruim. O tratamento é difícil e a mortalidade alta. Apesar da diminuição das infecções oportunistas em pacientes com SIDA, estas continuam a ocorrer, principalmente em países em que os pacientes não têm acesso ao HAART. Justificativa: estudos comparando a apresentação clínica de infecções por TB e MAC incluíram um número pequeno de pacientes e as conclusões foram diversas. A mortalidade das infecções por TB e MOTT em pacientes com SIDA é elevada. Para pacientes com TB disseminada fatores preditores de mortalidade não foram determinados. Objetivos: Determinar e comparar os aspectos clínicos, laboratoriais e radiológicos em pacientes com infecção disseminada por TB e pelo MOTT, e a mortalidade hospitalar relacionada a essas infecções, identificando preditores clínicos de mortalidade. Métodos: Através de um estudo retrospectivo de coorte revisaram-se os prontuários de todos pacientes com SIDA e micobacteriose disseminada (TB e MOTT) que internaram no HCPA entre 1996 e 2008. Resultados: na linha de base desta coorte foram incluídos 96 pacientes para a comparação entre a apresentação clínica dos pacientes com TB (N=65) e MOTT (N=31). Pacientes com MOTT apresentavam contagem de CD4 inferiores (mediana de 12 células/mm3 vs 42 células/mm3 para TB; P=0,002). Os pacientes com TB apresentavam mais baciloscopia positiva (48,0% vs 13,6%, P=0,01). Não houve diferença estatisticamente significativa na apresentação clínica entre as duas doenças. Os pacientes com TB apresentaram níveis medianos de lactato desidrogenase - LDH - (725,0 UI/l vs 569,0 UI/l, P=0,03) e aspartato aminotransferase - AST- (69,0 UI/l vs 45,0 UI/l, P=0,02) mais elevados que os pacientes com MOTT. Com relação à apresentação radiológica, infiltrado miliar ao Raio-X de tórax foi visto somente em pacientes com TB (28,1% vs 0,0%. P=0,01); derrame pleural foi mais comum em pacientes com TB (45,6% vs 13,0%; P=0,003). Adenopatia abdominal (73,1% vs 33,3%; P=0,003) e hipodensidades esplênicas (38,5% vs 0,0%; P=0,002) ocorreram com mais freqüência em pacientes com TB. A mortalidade foi estudada em 118 pacientes, 82 com TB e 35 com MOTT. A mortalidade hospitalar foi de 37,4%. Na análise multivariada os fatores associados à mortalidade hospitalar e TB foram: baixos níveis de albumina (P=0,01) e internação em unidade de terapia intensiva (P=0,04). Para os pacientes com MOTT, a não utilização de terapia específica foi associada com maior mortalidade hospitalar (P=0,03). Conclusão: Níveis mais elevados de AST e LDH, infiltrado miliar e derrame pleural ao Raio-X de tórax, adenomegalias abdominais e hipodensidades esplênicas associaram-se com o diagnóstico de TB. A infecção disseminada por micobactérias está associada com uma alta mortalidade hospitalar. A não utilização de terapia especifica para pacientes com MOTT e a hipoalbuminemia em pacientes com TB foram fatores preditores de maior mortalidade. / Background: The prevalence of infection with human immunodeficiency virus (HIV), in 2007, was 32 million of people infected. Mycobacterial infections are the main causes of fever of unknown origin in patients with AIDS. In the era of highly active antiretroviral therapy (HAART) the incidence of opportunistic infections had a dramatic decline. In 2007, 700,000 people were co-infected with HIV and tuberculosis (TB). In developed countries Mycobacterium avium complex (MAC) infection is the leading cause of bacterial infections in patients with AIDS. The clinical, laboratory and radiological presentation of mycobacteria infections are nonspecific, because of that, the diagnosis is sometimes neglected. Treatment of these infections requires the use of drugs for long periods of time and despite of that, mortality is high. Studies comparing the clinical presentation of TB and MAC infections included a small number of patients and conclusions were diverse. The mortality rate for TB infections and MAC in patients with AIDS is high. For patients with disseminated TB, predictors of in-hospital death were not determined. Objectives: Determine and compare clinical, laboratory and radiological features of patients with disseminated TB and MOTT (Mycobacteria Other Than Tuberculosis). Determine in-hospital mortality rate related to these infections, and identify predictors of death. Methods: A retrospective cohort study was conducted. From 1996 to 2008 all patients with the diagnosis of HIV infection and disseminated mycobacterial disease were included. Results: Ninety six patients were included for clinical comparison between TB (N = 65) and MOTT (N = 31). Patients with NTM had lower CD4 T cells counts (median 13.0 cells/mm3 vs 42.0 cells/mm3, P=0.002). Patients with TB had: significantly more positive acid-fast smears (48.0% vs 13.6%, P=0.01); greater median levels of aspartate aminotranspherase – AST - (69.0 vs 45.0, P=0.02) and lactate dehydrogenase – LDH - (725.0 vs 569.0, P=0.03). On chest X-ray, miliary infiltrate was only seen in patients with TB (28.1% vs 0.0%, P=0.01). Pleural effusion was more common in patients with TB (45.6% vs 13.0%, P=0.01). Abdominal adenopathy (73.1% vs 33.3%, P=0.003) and splenic hypoechoic nodules (38.5% vs 0.0%, P=0.002) were more common in patients with TB. Mortality was studied in 118 patients (82 with TB and 35 with MOTT). The overall mortality rate was 37.4%. In multivariate analysis the factors associated with mortality and TB were: low levels of albumin (P=0.01) and hospitalization in intensive care unit (P=0.04). For patients with MOTT, the lack of specific therapy was associated with in-hospital death (P = 0.03). Conclusion: Levels of AST and LDH, miliary infiltrate and pleural effusion in chest X-ray, abdominal adenopathy and splenic hypoechoic nodules were associated with the diagnosis of TB. Lack of specific therapy for patients with MOTT and hypoalbuminemia in patients with TB were identified as predictors of death.

A tuberculose, doença infecto-contagiosa causada pelo Mycobacterium tuberculosis (Mtb), constitui, em escala mundial, um sério problema de saúde pública, com altos índices de morbidade e mortalidade. Alguns grupos são mais suscetíveis à doença, como é o caso das populações indígenas brasileiras. Estudos prévios indicam um risco dez vezes maior de contrair a tuberculose, e morrer devido a ela, nessas populações do que na população brasileira como um todo. Exemplos disso são as altas incidências de tuberculose em indivíduos da etnia Xavante. Evidências sugerem um forte componente genético na suscetibilidade à tuberculose e aos fenótipos relacionados à doença. Um desses fenótipos é a anergia ao PPD, isto é, a ausência de reatividade ao teste que utiliza derivados de proteína purificada da bactéria para verificar resposta imune celular e diagnosticar infecção pelo Mtb. Vários são os genes associados à suscetibilidade à tuberculose ou à infecção pelo bacilo em diferentes populações. Com o objetivo de investigar essa suscetibilidade genética em ameríndios brasileiros, neste estudo foram analisados 19 polimorfismos em 15 genes envolvidos com a resposta imune já identificados com resistência/suscetibilidade à tuberculose (SLC11A1, VDR, SP110, P2X7, PTPN22, IL1B, IL12RB1, IFNGR1, TNFR1, IFNG, IL2, IL10, IL6, IL4 e IL4R). A amostra foi composta por 492 indivíduos de uma população da etnia Xavante, da aldeia Etéñitépa, localizada no Estado de Mato Grosso, região central do Brasil. Os seguintes resultados foram obtidos: a) redução ou ausência de variabilidade em seis variantes (SP110 éxon 11 C>T e íntron 6 C>T, PTPN22 1858 C>T, IL12RB1 641 A>G e 1094 T>C e IL6 -174 G>C); b) associação entre os polimorfismos IFNG +874 A>T e IL4 -590 T>C e reatividade ao PPD (P=0,018 e 0,009, respectivamente). Após ajustes na regressão de Poisson com variância robusta, os genótipos IFNG +874 T/A e IL4 -590 C/C foram duas vezes mais prevalentes do que seus genótipos complementares (1,9; CI: 1,1-3,1 e 2,0; CI: 1,2-3,3, respectivamente); c) o polimorfismo IL10 -1082 A>G foi associado com anergia ao PPD (P<0,001); o risco de anergia foi de 1,5 (CI: 1,2-1,7) em indivíduos homozigotos para o alelo G, comparados com portadores do alelo A; d) em relação à reatividade ao PPD, nenhum dos outros polimorfismos mostrou alguma associação; e) não foram observadas associações significativas entre os genes estudados e tuberculose. Os resultados obtidos sugerem que o componente genético tem uma grande influência nos mecanismos imunes relacionados à anergia ao PPD e, conseqüentemente, à infecção pelo Mtb nos Xavante.Apesar da ausência de associações em relação à tuberculose, há uma complexidade dos fatores genéticos nas doenças infecciosas e o envolvimento de muitos genes na etiologia da doença. Portanto, a replicação deste estudo em outros grupos indígenas e a pesquisa de outros genes, que poderiam estar envolvidos com a suscetibilidade à tuberculose e aos fenótipos a ela relacionados, são essenciais para se ter um melhor entendimento do sistema imune humano e seus complexos mecanismos de resposta, podendo fornecer, futuramente, novos alvos para tratamentos preventivos e profiláticos diferenciados para grupos étnicos específicos. / Tuberculosis is an infectious disease which is caused by Mycobacterium tuberculosis (Mtb). It constitutes a serious problem in public health, causing high standards of morbidity and mortality all over the world. Some groups are more susceptible to the disease such as, for example, the Brazilian indigenous populations. According to previous studies, the risk of getting this disease and consequently die from it is ten times higher for indigenous populations than for the Brazilian population in general. As an example of this phenomenon, there is the Xavante group. These individuals suffer from a high incidence of tuberculosis among them. Evidences suggest a strong genetic component related to this susceptibility to tuberculosis, and to the phenotypes related to the disease as well. One of these phenotypes is anergy to PPD, i.e., the absence of reactivity to the test in which derivatives of the purified protein from the bacteria are employed, in order to check an immune cellular response and to diagnose infection by Mtb. There are many genes associated with the susceptibility to tuberculosis or to the infection through the bacillus in different populations. The aim of this study was to investigate TB genetic susceptibility in Brazilian Amerindians, considering 19 polymorphisms in 15 genes involved in the immune response, previously identified with resistance/susceptibility to tuberculosis (SLC11A1, VDR, SP110, P2X7, PTPN22, IL1B, IL12RB1, IFNGR1, TNFR1, IFNG, IL2, IL10, IL6, IL4, and IL4R). The sample was composed by 492 individuals from a Xavante population, at the Etéñitépa village, Mato Grosso State, Central Brazil. The following results were obtained: a) reduction or absence of variability in six variants (SP110 exon 11 C>T and intron 6 C>T, PTPN22 1858 C>T, IL12RB1 641 A>G and 1094 T>C and IL6 -174 G>C); b) association between the polymorphisms IFNG +874 A>T and IL4 -590 T>C and reactivity to PPD (P=0.018 and 0.009, respectively); after adjustments by Poisson regression with robust variance the IFNG +874 T/A and IL4 -590 C/C genotypes were two times more prevalent than their complementary genotypes (1.9; CI: 1.1-3.1 e 2.0; CI: 1.2- 3.3, respectively); c) IL10 -1082 A>G polymorphism was associated with anergy to PDD (P<0.001); the risk of anergy was 1.5 (CI: 1.2-1.7) in G/G homozygous individuals when compared with carriers for the A allele; d) in relation to reactivity to PPD, no associations were observed for the other polymorphisms; e) no associations were observed between the genes studied and tuberculosis. The results suggest that the genetic component has a important influence in immune mechanisms related to PPD anergy, and therefore to the infection by Mtb in the Xavante group. In spite of the absence of association related to tuberculosis, there is also a great complexity of genetic factors in infectious diseases, and the involvement of many genes in the disease etiology. Consequently, the replication of this study in other indigenous groups and also the investigation of other genes that could be involved with susceptibility to tuberculosis and to phenotypes related to it as well are essential. In this way, we would have a better understanding of the human immune system and its complex mechanisms of response. This research could provide, in the future, new targets for preventive and prophylactic treatments that would be different, according to specific ethnic groups.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4560_1.pdf: 2458717 bytes, checksum: 858cc2a51da4970f6d0139a6ebb0f940 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho avalia a caracterização físico-química e a atividade antimicobacteriana in vitro do ácido úsnico (AU) encapsulado em nanocápsulas (NC-AU) de copolímero de ácido D,L-(láctico-glicólico) (PLGA) (50:50). O espectro de infravermelho da NC-AU mostrou uma banda de absorção em 1750 cm-1 atribuído aos grupos ésteres do PLGA. As bandas de absorção nas faixas de 1635 e 1190 cm-1 foram referentes ao grupo aromático da cetona e ao grupo fenil do ácido úsnico, respectivamente. A análise de calorimetria diferencial de varredura (DSC) da NC-AU revelou a presença de um pico endotérmico em 45,5 °C com variação da entalpia de 23,8 J/g. Enquanto que o AU apresentou um único pico endotérmico em 201,7 ºC referente ao seu ponto de fusão, com variação da entalpia de 85,2 J/g. A encapsulação do ácido úsnico ocorreu sem interação molecular com o polímero. A análise termogravimétrica da NC-AU e da nanocápsula vazia (NC) mostrou duas fases de degradação, enquanto que o AU apresentou uma única fase de decomposição. Nenhuma perda de peso da NC-AU e da NC foi observada até 50 °C, sugerindo que as amostras foram estáveis até essa temperatura. A susceptibilidade do M. tuberculosis ao AU e NC-AU foi de 7,98 e 3,83 &#956;g/mL, respectivamente. A análise da atividade intracelular revelou um aumento de 30% na atividade antimicobacteriana do AU quando encapsulado nas nanocápsulas de PLGA. Dessa maneira, conclui-se que a encapsulação em nanocápsulas de PLGA potencializa a atividade antimicobacteriana in vitro do AU

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-07T12:29:19Z No. of bitstreams: 1 Renata Gomes Revoredo.pdf: 1561355 bytes, checksum: 4aee3bbcbec49d64292b65d441e7c880 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-07T12:29:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Renata Gomes Revoredo.pdf: 1561355 bytes, checksum: 4aee3bbcbec49d64292b65d441e7c880 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / The Mycobacterium bovis belongs to the Mycobacterium tuberculosis Complex and is responsible for tuberculosis in bovines and buffaloes, as well as in humans. This study aimed to carry out biomolecular assays using PCR for investigate M. bovis in serum samples of bovine subjected to the tuberculin test. A hundred samples, from seemingly healthy bovines and previously submitted to the tuberculin test, raised in six properties from different cities of the State of Pernambuco, were examined for Genomic identification of M. bovis. The samples were chosen at random by non-probability convenience and distributed in six groups. From the samples subjected to PCR, 5% (100/05) resulted positive for M. Bovis. The tuberculin test showed a positive reaction on 19% (19/100) of the animals. Was possible to conclude that the real time PCR, when applied directly in blood serum, showed low sensitivity to be used as a tool in routine diagnosis of tuberculosis in bovine. / O Mycobacterium bovis integra o Complexo Mycobacterium tuberculosis e é responsável pela tuberculose nos bovinos e bubalinos (TB), entre outras espécies, inclusive a humana. Objetivou-se com este estudo realizar ensaios biomoleculares investigativos usando PCR para pesquisa de Mycobacteruim bovis em amostras séricas de bovinos previamente submetidos ao teste da tuberculina. Foram examinadas 100 amostras séricas para identificação genômica do M. bovis, escolhidas ao acaso por conveniência não probabilística e distribuídas em seis grupos experimentais, provenientes de bovinos aparentemente hígidos e previamente submetidos ao Teste da Tuberculina, criados em seis propriedades de diferentes municípios do estado de Pernambuco. Das 100 amostras de soro sanguíneo submetidas à PCR, 5% (05/100) apresentaram positividade ao M. Bovis. Quanto ao Teste da Tuberculina, 19% (19/100) dos animais apresentaram reação positiva. Concluiu-se que a PCR em tempo real, quando aplicada diretamente em amostras de soro sanguineo, demonstrou baixa sensibilidade para ser empregada como ferramenta na rotina diagnóstica da tuberculose em bovinos.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-02-15T13:08:10Z No. of bitstreams: 1 gabrielsantoscruzrodrigues.pdf: 1333283 bytes, checksum: 46d4dabb8192501d9b5b879ecdd9a3e4 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-02-26T12:23:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 gabrielsantoscruzrodrigues.pdf: 1333283 bytes, checksum: 46d4dabb8192501d9b5b879ecdd9a3e4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-26T12:23:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 gabrielsantoscruzrodrigues.pdf: 1333283 bytes, checksum: 46d4dabb8192501d9b5b879ecdd9a3e4 (MD5) Previous issue date: 2014-04-03 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A obesidade é um grande problema de saúde mundial e com os hábitos e estilos de vidas atuais a sua importância social só tende a crescer. Hoje associa-se a obesidade com o mau prognóstico de diversas doenças, como câncer, diabetes e doenças auto-imune brandas, além disso, ela também está associada a uma resposta imune deficitária frente a infecções por diversos patógenos, como alguns vírus e bactérias. A tuberculose é uma doença infecto-contagiosa, mais comumente pulmonar, causada pelo Mycobacterium tuberculosis (ou bacilo de Koch) e outros membros do complexo Mycobacterium tuberculosis. Esta doença causa cerca de 1,4 milhões de morte ao ano, sendo constatados cerca de 8 milhões de novos casos ao ano , estando apenas atrás da AIDS na taxa de mortalidade por doenças infecciosas e seu sucesso se deve em parte à capacidade de viver de meses à décadas no hospedeiro, em estado assintomático. Neste trabalho, avaliamos a relação entre a obesidade e o desenvolvimento da tuberculose, através do modelo de infecção experimental por Mycobacterium bovis BCG em camundongos C57/BL6 controles e tratados com dieta hiperglicídica. Os resultados demonstraram que os animais obesos apresentaram um menor recrutamento leucocitário, dentre estes, menor influxo de neutrófilos e eosinófilos. Além disso, animais obesos apresentaram menor formação de corpúsculos lipídicos, menor produção de PGE2, maior produção de mediadores anti-inflamatórios, como IL-10 e adiponectina, e menor produção de mediadores pró-inflamatórios, como leptina, em comparação aos animais controles. De maneira geral, nossos resultados apontam que a obesidade induz um perfil mais anti-inflamatório, inibindo a expressão de fatores de favorecimento do patógeno, como a formação de corpúsculos lipídicos, PGE2 e eosinofilia, sugerindo que a obesidade, nos estágios iniciais de infecção, pode modular negativamente a resposta inflamatória induzida pela infecção micobacteriana. / Obesity is a huge world health problem and with the habits and lifestyles of these days, it’s important only tend to grown. Today obesity is associated with a bad prognosis of a large number of diseases , like cancer, diabetes and light self-immune diseases, and besides that, its also associated with an uncompleted response to several pathogens, like some virus and bacteria. The tuberculosis is an infect-contagious disease, commonly pulmonary, caused by Mycobacterium tuberculosis (or, Koch bacillus), and other members of the Mycobacterium tuberculosis complex. This illness cause about 1,4 million deaths per year, being registered 8 million new cases per year, being only behind AIDS on the mortality ratio by infectious diseases in the world and ur success can be related to your capacity to live from months to decades on the host , in a asymptomatic state. In this work, we evaluated the relationship between the obesity and the development of tuberculosis, by using the experimental infection model by Mycobacterium bovis BCG. C57/BL6 mice, male, with about 4 to 6 weeks of life, had being fed with standard ration (control group) or hiperglicidic ration (obese group), for 0, 2 or 3 months. The body weight was monitored during this period, and the fat gain and glucose tolerance was measured at the end, so the state of obesity could be characterized. At the end of these periods, this animals received a intraperitoneal inoculation of 100 mL of saline solution (infection control) or 100 mL of BCG solution (infected group) and characteristic processes of this infection were observed, like leukocitary recruitment , lipid bodies formation on these cells, the production of pro and anti-inflammatory cytokines, eicosanoids (PGE2) and adipokines. Was observed then, that the obese animals, presented a lower leukocitary recruitment , among then, less influx of neutrophils and eosinophils, lower formation of lipid bodies and production of PGE2 , higher production of anti-inflammatory mediators (IL-10 and adipokine) and lower production of pro-inflammatory mediators (leptin) . Overall , our data points to a more anti-inflammatory profile on the obese animals , occurring in a minor expression of factors that are important to the pathogen survival , like the formation of lipid bodies and eosinophilia , indicating that, the obesity, on the early stages of the infection, may be representing a disadvantaging factor to the disease.

Submitted by Lúcia Brandão (lucia.elaine@live.com) on 2015-12-09T17:42:46Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cláudia Maria de Melo Silva.pdf: 2215806 bytes, checksum: c9afeecd5c357af061e1b38a8a31df56 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T19:16:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cláudia Maria de Melo Silva.pdf: 2215806 bytes, checksum: c9afeecd5c357af061e1b38a8a31df56 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T19:17:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cláudia Maria de Melo Silva.pdf: 2215806 bytes, checksum: c9afeecd5c357af061e1b38a8a31df56 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-19T19:17:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cláudia Maria de Melo Silva.pdf: 2215806 bytes, checksum: c9afeecd5c357af061e1b38a8a31df56 (MD5) Previous issue date: 2014-04-28 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Tuberculosis (TB) is a chronic infection caused by Mycobacterium tuberculosis complex and remains a major worldwide public health problem, leading to almost 1.45 million deaths annually. The state of Amazonas has a high rate incidence of TB, about 68.3/100,000 inhabitants in 2012. Only 5 to 10% of infected individuals develop active TB. It has been suggested that host factors determine the immune response to pathogen. Thus, many immunogenetic researches have demonstrated TB associated genes, but in the north region, research in this field is still rare. This fact motivated the investigation of polymorphisms for IFNG, IL12B, CD80 and CD86 genes, which codify proteins for cellular immune response. Furthermore, IFN- concentration and its relation with genotypes found have been verified. A total of 177 patients and 224 controls (159 contacts and 65 non-contacts) were included in this study and DNA sequencing was performed for genes IFNG (SNP +874A/T and microsatellite +875), IL12B (SNPs +1030C/T, +1188A/C and +1254T/G), CD80 (SNPs -454 C/A, -387 T/C, -232 G/A, -79 C/G, -7T/C, +5C/A and an indel polymorphism -557_-561insCATGA) and CD86 (SNPs +1057G/A and +1079G/A). The IFN-y concentration was determined by enzyme-linked immunoassay. At IFNG, the presence of the allele +874A and the allele with 15 CA repeats were associated with susceptibility to pulmonary TB, while the allele +874T and the allele with 12 CA repeats were associated with protection from pulmonary TB. In addition, an association between genotype CC (SNP +1188A/C at IL12B) and increased risk of pulmonary TB was found. Furthermore, a significant difference between IFN- concentration and genotypes of SNP +1188A/C at IL12B and microsatellite at IFNG was observed, with decrease of IFN-at genotype CC and 15 CA repeats respectively. These outcomes lead to a better understanding of the immune response regulation for TB and help to determine the genetic profile of the Amazon population. Future researches are still needed for a better understanding of the role of other genes involved in the immune response to M. tuberculosis and their influence at the production of citokines like IFN-. / A Tuberculose (TB) é uma infecção crônica causada pelo complexo Mycobacterium tuberculosis sendo um importante problema de saúde pública mundial, levando a aproximadamente 1,45 milhões de mortes a cada ano. O estado do Amazonas possui uma alta incidência desta doença, atingindo 68,3 casos por 100 mil habitantes em 2012. Dos indivíduos infectados pelo bacilo, cerca de 5 a 10% desenvolvem a Tuberculose ativa, sugerindo que há fatores associados ao hospedeiro que determinam o destino da resposta imune ao patógeno. Neste contexto, diversos estudos em imunogenética têm demonstrado genes associados à TB, mas na região norte ainda são raras as pesquisas nesta área, fato que motivou a investigação da frequência dos polimorfismos nos genes IFNG, IL12B, CD80 e CD86, que codificam para proteínas fundamentais na resposta imune celular. Além disso, foi verificado se a concentração de IFN- está relacionada com o genótipo encontrado. Foram incluídas amostras de 177 pacientes e 224 controles (159 contatos e 65 não contatos) e realizado sequenciamento de DNA para os genes IFNG (SNP +874A/T e microssatélite +875), IL12B (SNPs +1030C/T, +1188A/C e +1254T/G), CD80 (SNPs -454 C/A, -387 T/C, -232 G/A, -79 C/G, -7T/C e +5C/A e um polimorfismo indel -557_-561insCATGA) e CD86 (SNPs +1057G/A e +1079G/A). A determinação das concentrações de IFN-foi realizada através de ensaio imunoenzimático. Foi verificada uma associação do gene IFNG, entre a presença do alelo +874A e 15 repetições CA, como fator de risco para TB pulmonar assim como a presença do alelo +874T e 12 repetições CA como fatores de proteção contra TB pulmonar. Também foi encontrada uma associação do genótipo CC, do SNP +1188A/C no gene IL12B, como fator de risco ao desenvolvimento da TB pulmonar. Houve diferença significativa na concentração de IFN-entre os genótipos do SNP +1188A/C no gene IL12B e o microssatélite no gene IFNG, com menor produção no genótipo CC e 15 repetições CA respectivamente. Estes resultados contribuem para o melhor entendimento da regulação na resposta imune à TB e auxilia na determinação do perfil genético da população da região Amazônica. Estudos futuros são necessários para uma melhor compreensão do papel de outros genes envolvidos na resposta imunológica a M. tuberculosis e influência nos níveis de produção de citocinas como IFN-.

A Pirazinamida (Z), droga de primeira linha usada no tratamento da tuberculose, necessita ser hidrolisada pela enzima bacteriana pirazinamidase (PZase) para que o seu metabólito ativo, o ácido pirazinóico (POA), possa agir. O principal mecanismo molecular de resistência a esta droga envolve mutações no gene pncA, que codifica a PZase. Com base nestas informações e tendo em vista a ausência de estudos acerca de resistência à Z em isolados clínicos de M. tuberculosis em nosso país, o presente trabalho propôs caracterizar as mutações envolvendo o gene pncA, bem como relacioná-las com os resultados do teste de atividade da enzima PZase e da concentração inibitória mínima (CIM) de Z. A caracterização molecular dos isolados foi realizada por \"Spoligotyping\", sendo que, todos os isolados testados foram confirmados como pertencentes à espécie M. tuberculosis. A CIM foi realizada por três metodologias: técnica em microplaca utilizando o Alamar Azul como revelador (MABA), método de microdiluição em caldo (BMM), e método das proporções em Lowenstein-Jensen. Os resultados obtidos dão conta de uma boa associação entre as metodologias, e a determinação da CIM pelo método MABA mostrou-se uma nova e segura opção a ser utilizada para Z. A maioria dos isolados clínicos de M. tuberculosis resistentes à Z (88%), apresentaram também atividade de PZase negativa, bem como mutações no gene pncA. Algumas exceções foram encontradas, já que 12% dos isolados clínicos resistentes não apresentaram mutações no gene pncA e tiveram atividade da PZase positiva, sugerindo a existência de outro mecanismo envolvido com resistência à Z. Das 22 mutações encontradas no gene pncA, 9 estão sendo descritas apenas neste estudo. Registrou-se também a presença de 5 isolados clínicos apresentando fenótipo de monorresistência à Z. / Pyrazinamide (Z), a first-line antituberculous drug, is a prodrug that must be activated by bacterial pyrazinamidase (PZase) to the active form pyrazinoic acid, which kills M. tuberculosis. Many studies have shown that mutation in the gene encoding PZase (pncA) is the major mechanism of Z-resistance in M. tuberculosis. Based on this information and taking into consideration the absence of studies concerning Z-resistance in Brazilian M. tuberculosis strains, this study was aimed at characterizing pncA mutations and investigating its correlation with Z-resistance and PZase activity. The molecular characterization carried out by Spoligotyping revealed that all tested strains belong to M. tuberculosis species. The minimal inhibitory concentration (MIC) of Z was determined by three methods: microplate Alamar Blue assay (MABA), broth microdilution method (BMM) and method of proportions on Lowenstein-Jensen medium. The results showed a good association between the 3 methods, and MABA for MIC determination signalized a new and safe option to be used for Z. Most of Z-resistant strains (88%) presented pncA mutations as well as loss of PZase activity. Some exceptions were found since 12% of Z-resistant strains presented neither pncA mutations nor loss of PZase activity, what suggests the existence of another Z-resistance mechanism. Nine of 22 mutations found in pncA gene were described only in this study. During the course of this investigation were identified 5 Z-monoresistant M. tuberculosis strains.

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In this thesis, we explore the benefits of microencapsulating isoniazid and pyrazinamide within sporopollenin exine capsules derived from Lycopodium clavatum. Sporopollenin is a natural biopolymer, which is extracted from the outer shell of pollen grains. These hollow microcapsules can encapsulate and release drug actives in a controlled manner and possess many other advantages such as homogeneity in morphology and size, resilience to both strong acids and bases, they have antioxidant properties as well as UV protection to protect the material inside the microcapsule. Compared to artificial microcapsules, sporopollenin’s muco-adhesion to intestinal tissues contributes greatly to the extended contact of the sporopollenin with the intestines leading to an increased efficiency of delivery of drugs. The hollow microcapsules can be easily filled with a solution of the active or active in a liquid form by simply mixing both together. The drug actives are released in the human body depending on pH factors. Active release can otherwise have controlled by adding a coating on the shell, or co-encapsulation with the active inside the shell so that high drug concentrations are delivered to the site of infection. Encapsulation of the drug active will possibly improve therapeutic abilities of the drugs; simplify the treatment of TB-HIV coinfections by eliminating troublesome drug-drug interactions and drastically reduce or eliminates side effects. The SECs were loaded using a passive filling method. The drug active (0.1 g) was dissolved in a solvent and mixed with the SECs (0.1 g) for 10 minutes. After mixing for 10 minutes, the solvent was removed by a rotary evaporator and dried to a constant mass. The surface of the sporopollenin exines were analysed on a FTIR to observe if there are any drug deposits on the surface of the SECs. The loading efficiency and drug release percentage was determined by using calibrations curves and analysed on a UV-vis spectrophotometer. Further work has been proposed in which to characterize the SECs further and producing coated tablets from loaded SECs.