S. stercoralis is a helminthic parasite which is common in tropical and subtropical regions. It causes a persistent but often inapparent infection in humans. In the state of a protracted immunosuppression this parasite can cause a life-threatening hyperinfection syndrome. Most often the hyperinfection syndrome was found after prolonged high dose corticosteroid treatment. In HIV-infected individuals high dose corticosteroids are used for the treatment of the immune reconstitution inflammatory syndrome (IRIS) or as adjunct treatment in the treatment of meningeal or pericardial tuberculosis. Case reports from Tanzania demonstrate that Strongyloidiasis is prevalent not only in coastal regions but also in the Lake province of Tanzania. However, data on the local prevalence of S. stercoralis infection based on sensitive techniques are scanty, especially in HIV-infected individuals. The main objective of this study is to provide data on the prevalence of S. stercoralis infections in the adult HIV-infected population attending the Bugando Medical Centre for medical care. Specific objectives of the study are the comparison of the sensitivities and specificities of five different methods in detecting S. stercoralis. Four methods to detect S. stercoralis larvae used stool samples; one method to detect S. stercoralis antibodies required blood samples. The study used the Agar-plate-culture-technique and a modified Harada-Mori-culture-technique for the direct detection of helminthic larvae in the collected faecal samples. In addition, a recently described PCR-assay from faecal specimens and an ELISA for S. stercoralis antibodies have been applied. The Faecal Parasite Concentrator (FPC) stool concentration technique was used for the differential diagnosis of other intestinal helminthic parasites. The results of the study may influence the current treatment guidelines for HIV-infected patients in case that a relevant prevalence of S. stercoralis infection is found. Then, prior to a prolonged iatrogenic immunosuppression -like the high dose corticosteroid treatment for IRIS- a prophylactic anthelminthic treatment capable to eradicate a S. stercoralis infection could be recommendable. The prevalence of a current S. stercoralis infection using the PCR as a gold standard was 5.4%. The Agar plate method showed positive results in 19 out of 278 cases (6.1%), the modified Harada Mori technique in 13 of 278 (4.7%) cases. With PCR as gold standard the sensitivity of the agar plate method was 60%, the positive predictive value 47.4%, the specificity 96.2% and the negative predictive value 97.7 %. The sensitivity of the Harada Mori technique was 36.4%, the positive predictive value 30.7% with a specificity of 96.4% and negative predictive value 97.1%. The modified Harada Mori technique allowed in principal the morphological identification of nematode larvae. Microscopic analysis showed a specificity of 100% and a sensitivity of 46.7%. Antibodies were detected in 45 of 278 cases 16.2% by ELISA, with a sensitivity of 92.9% and a specificity of 87.8%. The findings of this study show that none of the diagnostic tests can be implemented as a routine diagnostic procedure to diagnose a current infection. This leads to the conclusion that it is high time to consider the provision of a prophylactic treatment within patients who are either HIV positive patients who could develop an IRIS after receiving ART, patients with a HTLV-1 infection and the growing number of patients under iatrogenic immunosuppression for various reasons. / S. stercoralis ist ein helmintischer Parasit der Endemisch in den Tropen und Subtropen, vor allem im warmen und feuchtem Milieu vorkommt. Eine Infektion mit S. stercoralis verläuft häufig asymptomatisch, kann aber über Jahre im menschlichen Körper persistieren. Bei immungeschwächten Patienten kann es zu einen Hyperinfektionssyndrom mit hoher Mortalität kommen Häufig kommt es zu einen Hyperinfektionssyndrom nach Einnahme von hoch Dosis Kortikosteroiden. Ca 20% der HIV positiven Patienten, die eine antiretrovirale Therapie beginnen entwickeln ein Immunrekonstitutionssyndrom. Die Therapie der Wahl ist dann u.a. hoch Dosis Kortikosteroide. Laut WHO sind 30-100 Millionen Menschen mit S. stercoralis infiziert. Diese Ungenauigkeit wiederspiegelt den erschwerten Nachweis einer Infektion. Bisher gibt es eine geringe Kenntnis über die Prävalenz von. S. stercoralis Infektionen in Tansania und kaum Daten vom bevölkerungsreichen Westen Tansanias. Die Region Mwanza am Lake Victoria zeigt sich als ein perfektes Milieu für das Vorkommen von S. stercoralis. Bisherige Ergebnisse der durchgeführten diagnostischen Tests weisen nur fragliche Sensitivitäten auf und es existieren keine Daten zur Prävalenz unter HIV positiven Patienten. Zudem wurden noch keine diagnostischen Methoden zur Prävalenzermittlung bei HIV positiven Patienten erprobt. Ziel der Studie ist die Verbesserung der Kenntnisse über Prävalenz von S.stercoralis Infektionen im bevölkerungsreichen Westen Tansanias. Die Analyse von Faktoren die Prävalenz von S. stercoralis beeinflussen, sowie Analyse der Prävalenz unter HIV Patienten mit fünf diagnostischen Testverfahren und Empfehlungen für den Umgang mit HIV Patienten in tropischen Milieu mit S. stercoralis Infektionswahrscheinlichkeit. Mit 278 Serum und Stuhlproben von HIV positiven Patienten wurden folgende Verfahren angewandt. Mit den Stuhlproben, die Modifizierte Harada Mori Methode und Agar Platten Methode am Bugando Medical Center, ein Realtime PCR und die FPC Methode und Mikroskopieren im Missionsärztlichen Institut, Würzburg. Mit den Serumproben erfolgte ein In House ELISA am Bernhard Nocht Institut, Hamburg. Die Prävalenz einer S.stercoralis Infektion in der PCR Methode war 5.4%. Die Agar Platten Methode zeigte positive Ergebnisse in 19 von 278 Fällen (6.1%). Die modifizierte Harada Mori Methode in 13 von 278 Fällen (4.7%). Unter der Annahme der PCR Methode als Goldstandard wies die Agar Platten Methode eine Sensitivität von 60% und Spezifität von 96.2% auf. Die Sensitivität der Harada Mori Methode war 36.4% und Spezifität von 96.4.%.Die FPC Methode zeigte eine Spezifität von 100%, jedoch nur Sensitivität von 46.7%.Das in House ELISA zeigte positive Ergebnisse bei 45 von 278 Patienten (16.2%) mit einer Sensitivität von 92.9%, jedoch nur Spezifität von 87.8%.Diese ungenauen Ergebnisse wiederspiegeln die Schwierigkeit eine S.stercoralis Infektion zu diagnostizieren. Die Ergebnisse zeigen, dass kein Verfahren als Standardverfahren, um eine Infektion zu diagnostizieren, in Nordtansania, implementiert werden kann. Somit kann man zusammenfassend sagen, dass alle Patienten die eine ART beginnen prophylaktisch gegen S. stercoralis behandelt werden sollten. Zumindest die, die eine TBC Koinfektion haben und auf die das Risikoprofil zutrifft.

Paratuberculosis (PTB) is a contagious and chronic enteric disease of ruminants and many non-ruminants caused by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP), and is characterised by diarrhoea and progressive emaciation with consequent serious economic losses due to death, early culling, and reduced productivity. In addition, indirect economic losses may arise from trade restrictions. Besides being a production limiting disease, PTB is a potential zoonosis; MAP has been isolated from Crohn’s disease patients and was associated with other human diseases, such as rheumatoid arthritis, Hashimoto’s thyroiditis, Type 1 diabetes, and multiple sclerosis. Paratuberculosis in sheep and goats may be globally distributed though information on the prevalence and economic impact in many developing countries seem to be scanty. Goats are more susceptible to infection than sheep and both species are likely to develop the clinical disease. Ingestion of feed and water contaminated with faeces of MAP-positive animals is the common route of infection, which then spreads horizontally and vertically. In African countries, PTB has been described as a “neglected disease”, and in small ruminants, which support the livelihood of people in rural areas and poor communities, the disease was rarely reported. Prevention and control of small ruminants’ PTB is difficult because diagnostic assays demonstrate poor sensitivity early in the disease process, in addition to the difficulties in identifying subclinically infected animals. Further studies are needed to provide more insight on molecular epidemiology, transmission, and impact on other animals or humans, socio-economic aspects, prevention and control of small ruminant PTB.

A presente investigação constitui um estudo de caso sobre a tripanossomíase americana, conhecida como doença de Chagas, em seus aspectos epistemológicos e sociais, articulados através da análise de diferentes valores envolvidos nas pesquisas sobre essa enfermidade. Na elaboração de uma biografia procuramos enfatizar dois aspectos dessa patologia. Por um lado, que a tripanossomíase americana pode ser interpretada como um agente histórico, na medida em que a identidade dessa entidade nosológica não pode ser dissociada de sua caracterização científica e social, tampouco reduzida a apenas uma dessas dimensões. Por outro lado, colocar a doença como protagonista dessa história nos permite evidenciar de que modo o predomínio da narrativa das instituições médicas e científicas legitimou a invisibilização da perspectiva das pessoas afetadas por essa patologia. A primeira parte da tese está centrada sobre a faceta científica e médica da doença, a qual permitiu que a nova patologia humana fosse estabelecida como um fato. Com relação aos aspectos sociais da doença, estes são focalizados na segunda parte da tese, onde examinamos as ideias envolvidas nas representações dos trópicos e das populações rurais como sinônimos de atraso. / The present investigation is a case study of American trypanosomiasis, known as Chagas disease, in its epistemological and social aspects, articulated through an analysis of the different values involved in research on this disease. In the elaboration of a biography, we aim to emphasize two aspects of this pathology. On the one hand, American trypanosomiasis can be interpreted as a historical agent, to the extent that the identity of this nosological entity cannot be dissociated from its scientific and social characterization, nor can it be reduced to just one of these dimensions. On the other hand, to put the disease as the protagonist of this history allows us to show the ways in which the predominance of medical and scientific institutions narrative has legitimated the invisibility of the perspectives of the ones affected by this pathology. The first part of this thesis is centered on the scientific and medical facet of the disease, which allowed the new human pathology to be established as a fact. The social aspects of the disease will be focalized in the second part of the thesis, where we examine the ideas involved in representations of the tropics and of rural populations as synonyms of backwardness.

A presente investigação constitui um estudo de caso sobre a tripanossomíase americana, conhecida como doença de Chagas, em seus aspectos epistemológicos e sociais, articulados através da análise de diferentes valores envolvidos nas pesquisas sobre essa enfermidade. Na elaboração de uma biografia procuramos enfatizar dois aspectos dessa patologia. Por um lado, que a tripanossomíase americana pode ser interpretada como um agente histórico, na medida em que a identidade dessa entidade nosológica não pode ser dissociada de sua caracterização científica e social, tampouco reduzida a apenas uma dessas dimensões. Por outro lado, colocar a doença como protagonista dessa história nos permite evidenciar de que modo o predomínio da narrativa das instituições médicas e científicas legitimou a invisibilização da perspectiva das pessoas afetadas por essa patologia. A primeira parte da tese está centrada sobre a faceta científica e médica da doença, a qual permitiu que a nova patologia humana fosse estabelecida como um fato. Com relação aos aspectos sociais da doença, estes são focalizados na segunda parte da tese, onde examinamos as ideias envolvidas nas representações dos trópicos e das populações rurais como sinônimos de atraso. / The present investigation is a case study of American trypanosomiasis, known as Chagas disease, in its epistemological and social aspects, articulated through an analysis of the different values involved in research on this disease. In the elaboration of a biography, we aim to emphasize two aspects of this pathology. On the one hand, American trypanosomiasis can be interpreted as a historical agent, to the extent that the identity of this nosological entity cannot be dissociated from its scientific and social characterization, nor can it be reduced to just one of these dimensions. On the other hand, to put the disease as the protagonist of this history allows us to show the ways in which the predominance of medical and scientific institutions narrative has legitimated the invisibility of the perspectives of the ones affected by this pathology. The first part of this thesis is centered on the scientific and medical facet of the disease, which allowed the new human pathology to be established as a fact. The social aspects of the disease will be focalized in the second part of the thesis, where we examine the ideas involved in representations of the tropics and of rural populations as synonyms of backwardness.

A hanseníase é geralmente agravada pelo aparecimento de reações, que são quadros inflamatórios de difícil tratamento e a principal causa de seqüelas. Nossa hipótese é de que deficiência e/ou perda da função das células T reguladoras (Tregs) podem estar envolvidas no desenvolvimento das reações. Além da avaliação da frequência das Tregs circulantes em pacientes com reação tipo 1 (R1) e reação tipo 2 (R2), também foi avaliada a frequência in situ de FoxP3, IL-17, IL-6 e TGFbeta. Pacientes com R2 apresentaram expressiva diminuição na frequência das Tregs circulantes e in situ em comparação com pacientes com R1 e com os controles. Paralelamente a diminuição das Tregs nas R2 foi observado aumento da expressão de IL-17 in situ e diminuição da expressão de TGFbeta. Biópsias obtidas de pacientes com R1 e R2 antes do episódio reacional mostraram números de células FoxP3+ e IL-17+ similares entre os dois grupos. Entretanto, nas biópsias obtidas durante a reação foi observado diminuição de Tregs e aumento de células IL-17+ em pacientes com R2, enquanto que pacientes com R1 apresentaram o oposto: aumento de Tregs e diminuição de células IL-17+. Além disso, foi observada diminuição da expansão das Tregs frente ao estímulo in vitro com Mycobacterium leprae e uma tendência a baixa expressão de FoxP3 e da molécula imunossupressora CTLA-4 em Tregs de pacientes com R2. Nossos resultados sugerem que nas R2, a diminuição na frequência de Tregs possa estar favorecendo o desenvolvimento de uma resposta Th17, a qual é característica deste tipo de reação. Adicionalmente, com a finalidade de obter um número suficiente de Tregs para realização de ensaios funcionais com estas células, uma vez que se trata de uma subpopulação com baixa freqüência no sangue periférico ( < 10%), foram estabelecidos e avaliados três protocolos distintos para expansão in vitro de Tregs: protocolo Rapamicina, protocolo TGFbeta e protocolo Vitamina D3. Todos os protocolos foram capazes de induzir expansão de Tregs viáveis nos grupos estudados (paucibacilares e multibacilares sem reação, R1 e R2). Em todos os grupos estudados as Tregs expandidas apresentaram capacidade de suprimir a proliferação de linfócitos TCD4+ e TCD8+. Apesar dos três protocolos testados apresentarem capacidade de expandir Tregs in vitro, selecionamos para ensaios futuros os protocolos Rapamicina e TGFbeta por apresentarem melhor custo-benefício. A expansão in vitro será utilizada para estudos funcionais das Tregs buscando melhor entendimento do envolvimento desta subpopulação na patogenia das reações hansênicas / Leprosy is frequently complicated by the appearance of reactions that are difficult to treat and are the main cause of sequelae. We speculated that disturbances in regulatory T-cells (Tregs) could play a role in leprosy reactions. We determined the frequency of circulating Tregs in patients with type 1 reaction (T1R) and type 2 reaction (T2R). The in situ frequency of FoxP3 and interleukin (IL)-17, IL-6, and transforming growth factor beta (TGF)-beta expressing cells was also determined. T2R patients showed markedly lower number of circulating and in situ Tregs than T1R patients and controls. This decrease was paralleled by increased in situ IL-17 expression but decreased TGF-beta expression. Biopsies from T1R and T2R patients before the reaction episodes showed similar number of forkhead box protein P3 + (FoxP3+) and IL-17+ cells. However, in biopsies taken during the reaction, T2R patients showed a decrease in Tregs and increase in IL-17+ cells, whereas T1R patients showed the opposite: Tregs increased but IL17+ cells decreased. We also found decreased expansion of Tregs upon in vitro stimulation with Mycobacterium leprae and a trend for lower expression of FoxP3 and the immunosuppressive molecule CTLA-4 in T2R Tregs. Our results provide some evidence to the hypothesis that, in T2R, downmodulation of Tregs may favor the development of T-helper-17 responses that characterize this reaction. In addition, aiming to provide sufficient number of Tregs to perform functional assays with these cells, as they correspond to a subtle subpopulation among the peripheral blood mononuclear cells ( < 10%), we established and analyzed three different protocols for in vitro Tregs: a Rapamycin protocol, a TGFbeta protocol and a Vitamina D3 protocol. All three protocols were able to induce the expansion of viable in the four types of patients of the study (paucibacillary and multibacillary patients without reaction, and R1 and R2 patients). In these four groups the tregs were able to suppress the proliferative response of TCD4+ e TCD8+ lymphocytes. Although the three protocols resulted in expansion of Tregs, we selected two of them, Rapamycin and TGFbeta for further assays since they showed better cost-benefit. The in vitro expansion will be used to perform functional assays of the Tregs aiming at a better understanding of the involvement of this subpopulation in the pathogenesis of the leprosy reaction episodes

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-10-13T20:20:58Z No. of bitstreams: 2 Tese - Maria de Fátima Furtado Lima - 2013.pdf: 2458993 bytes, checksum: 832ae92041abab4a21dde4d3d4e17918 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-10-13T20:48:06Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Maria de Fátima Furtado Lima - 2013.pdf: 2458993 bytes, checksum: 832ae92041abab4a21dde4d3d4e17918 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-13T20:48:06Z (GMT). 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How socioenvironmental context proceeded to the rescue of knowledge about TB, its introduction in Brazil and the historical evolution of the treatment, the current international situation and the recommendations of international organizations especially the World Health Organization (WHO) for countries with a high burden of disease, such as Brasil. The text that results from research on TB in JF uses theoretical sources from different areas of knowledge, empirical research, document and database of the Ministry of Health, in consultation with the reporting forms / TB research model SINANand statistical analyzes of the type control case, calculating the "odds ratio" as a measure of strength of association between the correlated parameters. The results revealed multifactorial causation. The TB concentrates in the neediest regions in that the Environmental Quality Index (IQA) is low revealed by unhealthy housing, lack of sanitation, low education and income. The profile of these ACS integrated into to the healthcare teams at the level the AB confirms frailties in their knowledge, insufficient number for demand and low involvement in disease control. The sociodemographic and clinical epidemiological profile of TB patients related to treatment dropout reveal prevalence of self-administered treatment to the detriment the supervised treatment as determined the National Programme Tuberculosis Control (PNCT) and the predominance of the more socioeconomically disadvantaged groups. It can be concluded that TB disease is in fact associated with poverty and somewhat neglected by the national public policy. Recommendations are done to resolve the causes found, as the need for awareness among the local health authorities and investment in trainings for family healthcare teams, addition to initiatives in health education for the community in general, mainly as to the benefits arising from the early diagnosis and supervised treatment. At the same time is recommended improve infrastructure conditions in the regions where the IQA is low. / Juiz de Fora (JF) apresentou elevada prevalência da tuberculose (TB) no conjunto de municípios do estado de Minas Gerais (MG) e do Brasil, cujas causas não são conhecidas. Buscar conhecê-las e analisar as inter-relações envolvendo a qualidade ambiental dos bairros e regiões do município de JF (MG) com maior incidência da TB pulmonar, a política pública de saúde da Atenção Básica (AB) no controle da doença, com foco no perfil dos Agentes Comunitários de Saúde (ACS) e dos portadores da doença, sobretudo daqueles que abandonam o tratamento, constituíram-se no escopo principal desta tese. Como contexto socioambiental procedeu-se ao resgate de conhecimentos acerca da TB, sua introdução no Brasil e a evolução histórica do tratamento, a situação internacional atual e as recomendações dos organismos internacionais especialmente da Organização Mundial de Saúde (OMS) para os países com alta carga da doença, como é o caso do Brasil. O texto que resulta da investigação sobre a TB em JF utiliza fontes teóricas de diversas áreas do conhecimento, da pesquisa empírica, de documentos e banco de dados do Ministério da Saúde, de consulta às fichas de notificação/investigação da TB modelo SINAN e análises estatísticas do tipo caso controle, com cálculo do “Odds Ratio” como medida de força de associação entre os parâmetros correlacionados. Os resultados obtidos revelaram causalidade multifatorial. A TB concentra-se nas regiões mais carentes e pobres em que o Índice de Qualidade Ambiental (IQA) é baixo, revelado por moradias insalubres, insuficiência de saneamento básico, renda e escolaridade baixos. O perfil dos ACS integrados às equipes de saúde no nível da AB confirmam fragilidades no seu conhecimento, número insuficiente para a demanda e baixo envolvimento no controle da doença. O perfil e os aspectos sociodemográficos e clínicos epidemiológicos dos portadores de TB ligados ao abandono do tratamento, revelam prevalência do tratamento autoadministrado em detrimento ao tratamento supervisionado como determina o Programa Nacional de Controle da Tuberculose (PNCT) e o predomínio dos grupos socioeconomicamente mais carentes. Conclui-se a TB é de fato doença associada à pobreza e de certo modo negligenciada pela política pública nacional. Recomendações são feitas para resolver as causas encontradas, como necessidade de conscientização das autoridades de saúde locais e investimento em treinamentos para as equipes de saúde da família, além de iniciativas de educação em saúde para a comunidade em geral, sobretudo quanto aos benefícios advindos do diagnóstico precoce e tratamento supervisionado. Paralelamente recomenda-se melhorar as condições de infraestrutura nas regiões onde o IQA é baixo.

A hanseníase é geralmente agravada pelo aparecimento de reações, que são quadros inflamatórios de difícil tratamento e a principal causa de seqüelas. Nossa hipótese é de que deficiência e/ou perda da função das células T reguladoras (Tregs) podem estar envolvidas no desenvolvimento das reações. Além da avaliação da frequência das Tregs circulantes em pacientes com reação tipo 1 (R1) e reação tipo 2 (R2), também foi avaliada a frequência in situ de FoxP3, IL-17, IL-6 e TGFbeta. Pacientes com R2 apresentaram expressiva diminuição na frequência das Tregs circulantes e in situ em comparação com pacientes com R1 e com os controles. Paralelamente a diminuição das Tregs nas R2 foi observado aumento da expressão de IL-17 in situ e diminuição da expressão de TGFbeta. Biópsias obtidas de pacientes com R1 e R2 antes do episódio reacional mostraram números de células FoxP3+ e IL-17+ similares entre os dois grupos. Entretanto, nas biópsias obtidas durante a reação foi observado diminuição de Tregs e aumento de células IL-17+ em pacientes com R2, enquanto que pacientes com R1 apresentaram o oposto: aumento de Tregs e diminuição de células IL-17+. Além disso, foi observada diminuição da expansão das Tregs frente ao estímulo in vitro com Mycobacterium leprae e uma tendência a baixa expressão de FoxP3 e da molécula imunossupressora CTLA-4 em Tregs de pacientes com R2. Nossos resultados sugerem que nas R2, a diminuição na frequência de Tregs possa estar favorecendo o desenvolvimento de uma resposta Th17, a qual é característica deste tipo de reação. Adicionalmente, com a finalidade de obter um número suficiente de Tregs para realização de ensaios funcionais com estas células, uma vez que se trata de uma subpopulação com baixa freqüência no sangue periférico ( < 10%), foram estabelecidos e avaliados três protocolos distintos para expansão in vitro de Tregs: protocolo Rapamicina, protocolo TGFbeta e protocolo Vitamina D3. Todos os protocolos foram capazes de induzir expansão de Tregs viáveis nos grupos estudados (paucibacilares e multibacilares sem reação, R1 e R2). Em todos os grupos estudados as Tregs expandidas apresentaram capacidade de suprimir a proliferação de linfócitos TCD4+ e TCD8+. Apesar dos três protocolos testados apresentarem capacidade de expandir Tregs in vitro, selecionamos para ensaios futuros os protocolos Rapamicina e TGFbeta por apresentarem melhor custo-benefício. A expansão in vitro será utilizada para estudos funcionais das Tregs buscando melhor entendimento do envolvimento desta subpopulação na patogenia das reações hansênicas / Leprosy is frequently complicated by the appearance of reactions that are difficult to treat and are the main cause of sequelae. We speculated that disturbances in regulatory T-cells (Tregs) could play a role in leprosy reactions. We determined the frequency of circulating Tregs in patients with type 1 reaction (T1R) and type 2 reaction (T2R). The in situ frequency of FoxP3 and interleukin (IL)-17, IL-6, and transforming growth factor beta (TGF)-beta expressing cells was also determined. T2R patients showed markedly lower number of circulating and in situ Tregs than T1R patients and controls. This decrease was paralleled by increased in situ IL-17 expression but decreased TGF-beta expression. Biopsies from T1R and T2R patients before the reaction episodes showed similar number of forkhead box protein P3 + (FoxP3+) and IL-17+ cells. However, in biopsies taken during the reaction, T2R patients showed a decrease in Tregs and increase in IL-17+ cells, whereas T1R patients showed the opposite: Tregs increased but IL17+ cells decreased. We also found decreased expansion of Tregs upon in vitro stimulation with Mycobacterium leprae and a trend for lower expression of FoxP3 and the immunosuppressive molecule CTLA-4 in T2R Tregs. Our results provide some evidence to the hypothesis that, in T2R, downmodulation of Tregs may favor the development of T-helper-17 responses that characterize this reaction. In addition, aiming to provide sufficient number of Tregs to perform functional assays with these cells, as they correspond to a subtle subpopulation among the peripheral blood mononuclear cells ( < 10%), we established and analyzed three different protocols for in vitro Tregs: a Rapamycin protocol, a TGFbeta protocol and a Vitamina D3 protocol. All three protocols were able to induce the expansion of viable in the four types of patients of the study (paucibacillary and multibacillary patients without reaction, and R1 and R2 patients). In these four groups the tregs were able to suppress the proliferative response of TCD4+ e TCD8+ lymphocytes. Although the three protocols resulted in expansion of Tregs, we selected two of them, Rapamycin and TGFbeta for further assays since they showed better cost-benefit. The in vitro expansion will be used to perform functional assays of the Tregs aiming at a better understanding of the involvement of this subpopulation in the pathogenesis of the leprosy reaction episodes

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-04-27T19:41:04Z No. of bitstreams: 1 gustavosenragoncalvesdecarvalho.pdf: 7312351 bytes, checksum: 619ab5b1846a289b3dd2a2d56e459c0c (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-05-13T13:06:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 gustavosenragoncalvesdecarvalho.pdf: 7312351 bytes, checksum: 619ab5b1846a289b3dd2a2d56e459c0c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-13T13:06:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 gustavosenragoncalvesdecarvalho.pdf: 7312351 bytes, checksum: 619ab5b1846a289b3dd2a2d56e459c0c (MD5) Previous issue date: 2011-07-16 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Este trabalho tratou da pesquisa para a descoberta de potenciais fármacos contra doenças negligenciadas e foi divido em três partes. A primeira parte apresenta uma nova metodologia para síntese de ciclo-nucleosídeos, a partir de carboidratos (D-glicose e D-xilose), mais especificamente análogos N3,2’-ciclo-nucleosídeos até então inéditos na literatura. Essa metodologia desenvolvida foi aplicada na obtenção de um análogo da 5’-metil-tioadenosina (MTA), um importante regulador metabólito, controlador da 5’-metil-tioadenosina/S-adenosilhomocisteína (MTA/SAH) nucleosidase. A segunda parte deste trabalho trata, da síntese de bioisósteros do resveratrol, um importante metabólito encontrado em plantas superiores. Desde a descoberta de seus efeitos como cardioprotetor e antioxidantes, várias pesquisas associam este composto a novas potencialidades medicinais. Desta forma utilizando-se da ferramenta do isosterismo clássico, onde a ligação C=C entre os anéis foi substituída por uma ligação C=N, sintetizou-se uma série de análogos do resveratrol. O terceiro e último assunto tratado neste trabalho foi a preparação e avaliação biológica de compostos heterocíclicos contendo o nitrogênio como heteroátomo. Realizou-se a síntese de três séries distintas de heterociclos nitrogenados, mais especificamente imidazolidinas, hexahidropirimidinas e benzimidazóis que foram obtidos através de sínteses rápidas e eficientes. Os compostos obtidos foram caracterizados por diferentes técnicas espectroscópicas, a saber, infravermelho, RMN 1D e 2D, espectrometria de massas de alta resolução e análise elementar e foram submetidos a ensaios biológicos com o intuito de se testar seus potenciais como leishmanicida, antibacteriano, antitubercular, antioxidante, antimalárico e antichagásico. / This work deals with the research for discovery of potential drugs against neglected diseases and has been divided into three parts. The first part presents a new methodology for synthesis of cyclo-nucleosides from carbohydrate (D-glucose and D-xylose) analogues specifically N3, 2'-cyclo-nucleosides until then unpublished in literature. This methodology was applied to obtain an analogue of 5'-methyl-tioadenosina (MTA), an important metabolite regulator, controller of 5'-methyl-tioadenosine/Sadenosylhomocysteine (MTA / SAH) nucleosidase. The second part of this work concerns the synthesis of resveratrol bioisosters, a major metabolite found in higher plants. Since the discovery of its cardioprotective and antioxidants effects and several research associates this compound for new potential medicines. Thus, using the tool of classical isosteric, where C=C bond between the rings is replaced by a C=N bond, summed up a series of analogues of resveratrol. The third and final issues addressed in this work were the preparation and biological evaluation of heterocyclic compounds containing nitrogen as heteroatom. We carried out the synthesis of three distinct series of nitrogen heterocycles, specifically imidazolidines, hexahydropyrimidines and benzimidazole were obtained through rapid and efficient syntheses. The compounds were characterized by different spectroscopic techniques, namely infrared, 1D and 2D NMR, high resolution mass spectrometry and elemental analysis and were bioassayed in order to test their potential as antileishmanial, antibacterial, antitubercular, antioxidant, antimalarial and anti-Chagas agents.