Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-25T14:54:46Z No. of bitstreams: 1 Pomy de Cassia Peixoto Kim.pdf: 814738 bytes, checksum: 72cba2259655a15d705436f3ef306d7c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-25T14:54:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pomy de Cassia Peixoto Kim.pdf: 814738 bytes, checksum: 72cba2259655a15d705436f3ef306d7c (MD5) Previous issue date: 2014-02-25 / In the present study it was standardized two Multiplex PCR reactions to detect DNA of Brucella sp., Leptospira sp., Actinobacillus seminis, Brucella ovis, Toxoplasma gondii and Neospora caninum. When used positive controls at a concentrations of less than 100ng/ml of genomic DNA it was clearly seen simultaneous amplification of all agents used on both of the reactions. Thereafter these reactions can now be implemented on our laboratory, that way we are going to be able to obtain faster, safer and less expensive diagnosis on those infectious agents. / Para otimizar o diagnóstico na detecção de agentes patogênicos no sêmen ovino comercializado, com risco potencial de transmissão venérea, objetivou-se neste estudo padronizar duas reações de PCR Multiplex, utilizando pares iniciadores sensíveis e específicos, uma reação para detectar o DNA dos gêneros Brucella sp. e Leptospira sp. e outra para detectar o DNA de Actinobacillus seminis, Brucella ovis, Toxoplasma gondii e Neospora caninum de forma simultânea em uma única reação. Foram utilizadas concentrações variáveis de DNA de cepas de referência para análise do limite de detecção das reações. Em ambas reações de mPCR, quando utilizados controles positivos em concentrações de DNA genômico igual ou inferior a 100ng/mL para cada espécie observou-se a amplificação simultânea de todos os agentes pesquisados, podendo assim, ser reproduzida na rotina laboratorial para obtenção de um diagnóstico mais rápido, seguro e menos dispendioso quando comparada a outros métodos de diagnóstico.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-25T15:39:54Z No. of bitstreams: 1 Valdir Morais de Almeida.pdf: 1173733 bytes, checksum: 8f3536403d730fefb261f209b8f6dd39 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-25T15:39:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Valdir Morais de Almeida.pdf: 1173733 bytes, checksum: 8f3536403d730fefb261f209b8f6dd39 (MD5) Previous issue date: 2013-04-29 / The unpredictability of results in addition with a variable efficiency on embryo transfer (ET) in sheep can be related to the absence of timing definition on artificial insemination (AI) in ET programs by an asynchrony between ovulations and AI procedures in superovulted animals. The aim of this work, was to identify by laparoscopy the ovarian dynamics of ewes subjected to multiple ovulation embryo transfer program (MOET) and, based upon this knowledge, evaluate two ideal moments of laparoscopic AI, with cooled and frozen semen. In experiment 1, ten females, sheep were used, synchronized with intravaginal progesterone device (CIDR ®) (D0) and Superovulation induction by FSH-p (Folltropin ®), in eight decreasing administration doses every twelve hours, starting at D12. In D15 intravaginal devices have been removed and administered 200IU of equine chorionic gonadrotophin - eCG (Novormon ®, Intervet). The next day, 4μg of buserelin acetate – GnRH - was administered (Conceptal ®, Intervet). After estrous detection, observations of ovarian status laparoscopically were performed at 36, 40, 48, 52 and 56 hours after CIDR removal or until ovulations occurred. In experiment 2, twenty sheep females were used, synchronized and induced with identical protocol of experiment 1 and, after estrous detection, they were divided into four treatments defined as at the time of the Laparoscopic AI based upon removal of intravaginal device and on the type of semen used: T1-36 h/cooled semen; T2-48 h/cooled semen; T3-36 h/frozen semen and; T4-48 h/frozen semen. Five days after laparoscopic AI, collection of the embryos was performed by laparotomy and the recovered structures were evaluated and classified according to IETS (International Embryo Transfer Society) and transferred to recipients that had synchronized estrus by applying intravaginal device impregnated with 60 mg medroxiprogeterona-MAP (Progespon ®), for a period of 15 days, when the device was removed and 400UI of eCG (Folligon ®) was administered subcutaneously and embryos were transferred by semi-laparoscopy. Pregnancy diagnosis was performed by ultrasonography days after ET. There was a higher concentration (90%) of the time of ovulation at 48 hours after the device removal. At Fifty-two hours after device removal, all females from the experiment had ovulated. In the second experiment, no differences were seen in number of structures recovered among treatments with a mean of 11.15 ± 6.35. The number of viable embryos differed statistically between the T2 (8.4 ± 5.5) and T3 (4.0 ± 4.4), showing that cryopreserved sperm cell was not able to accomplishing fertilization when the laparoscopic AI was held at 36 h. It was concluded that females subjected to MOET show a fast follicular growth and ovulations occurred mostly 48 hours after Progesterone device removal. It is possible to suggest a single laparoscopic AI in commercial MOET programs in sheep. It was showed also a numerical superiority, when using cooled semen. / Os resultados pouco previsíveis e a eficiência variável da transferência de embriões (TE) em ovinos podem estar relacionados à ausência da definição do melhor momento da IA em programas de TE por assincronia entre as ovulações e os procedimentos da inseminação artificial (IA) em animais superovulados. Desta feita, buscou-se identificar o momento da ovulação, por meio da laparoscopia, de fêmeas ovinas submetidas a programa de múltipla ovulação e transferência de embriões-MOTE e, a partir destes conhecimentos, avaliar dois momentos da IA laparoscópica, com uso de sêmen resfriado e criopreservado. No experimento 1, dez fêmeas ovinas foram utilizadas, sincronizadas com uso de dispositivo vaginal de Progesterona (CIDR®) (D0) e indução da superovulação por administrações de FSH-p (Folltropin®), em oito doses decrescentes a cada doze horas, iniciando-se no D12. No D15 foram removidos os dispositivos intravaginais e administradas 200UI de gonadrotofina coriônica eqüina - eCG (Novormon®, Intervet). No dia seguinte, administrou-se 4μg de acetato de buserelina - GnRH (Conceptal®, Intervet). Após detecção do cio e jejum de 12 horas, foram realizadas as observações do status ovariano via laparoscópica, nos momentos 36, 40, 48, 52 e 56 horas pós-remoção do CIDR® ou até observação das ovulações. No experimento 2, vinte fêmeas ovinas foram utilizadas, sincronizadas e induzidas com protocolo idêntico ao do experimento 1 e, após detecção do cio e jejum de 12 horas, foram divididas em quatro tratamentos definidos quanto ao horário da IAL com base na remoção do dispositivo intravaginal e quanto ao tipo de sêmen utilizados: T1 – 36 h / sêmen resfriado; T2 – 48 h / sêmen resfriado; T3 – 36 h / sêmen criopreservado e; T4 – 48 h / sêmen criopreservado. Passados cinco dias da IAL, foi realizada a colheita dos embriões pela técnica de laparotomia e, as estruturas recuperadas foram avaliadas e classificadas segundo normas preconizadas pela IETS (International Embryo Transfer Society) e, transferidos para receptoras que tiveram estro sincronizado por meio da aplicação de dispositivo intravaginal impregnado com 60 mg de medroxiprogeterona – MAP (Progespon®), por um período de 15 dias, quando se deu a sua retirada e aplicação de 400UI de eCG (Folligon®) por via intramuscular e, receberam embriões pela técnica de semi-laparoscópia. O diagnóstico gestacional foi realizado por meio de ultrassonografia aos 35 dias após a TE. Observou-se maior concentração (90%) do momento das ovulações às 48 horas pós-retirada do dispositivo intravaginal. Cinquenta e duas horas pós-remoção do dispositivo intravaginal, todas as fêmeas do programa haviam ovulado. No segundo experimento, O número de estruturas viáveis, do T1 e T2, não variou significativamente, entretanto, aumento significativo (P 0,05), foi observado no percentual de confirmações de prenhezes entre os tratamentos, T3 = 9,1 ± 13,3 % e T4 = 49,2 ± 30,1 %, demonstrando que o uso da IAL com sêmen criopreservado, na condição de préovulação (36 h), não foi eficaz na fertilização das estruturas oócitarias. Observou-se que uma única IAL, foi suficiente para produção embrionária, com exceção do T3, alcançando-se melhores índices no T4, com fertilização de 62,5 ± 39,3 %, e confirmação ultrassonográfica de 49,2 ± 30,1 %, das estruturas produzidas. Conclui-se que fêmeas submetidas a programa de múltipla ovulação e transferência de embriões apresentam rápido crescimento folicular e maior concentração de ovulação às 48 horas pós-remoção dos dispositivos intravaginais, sendo possível indicar a utilização de uma única IAL com uso sêmen resfriado e, criopreservado em programas comerciais de MOTE em ovinos, evidenciando considerável ganho tecnológico e econômico.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-28T12:55:08Z No. of bitstreams: 1 Ana Claudia Campos.pdf: 1040308 bytes, checksum: b0653bfe634b8d58d0d6d1c3c04816e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-28T12:55:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Claudia Campos.pdf: 1040308 bytes, checksum: b0653bfe634b8d58d0d6d1c3c04816e9 (MD5) Previous issue date: 2012-02-29 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Mycoplasma agalactiae is the main causative organism of contagious agalactia (CA), a disease characterized by mastitis followed by agalactia, polyarthritis, and keratoconjunctivitis. In 2001, M. agalactiae was isolated and identified in Brazil, causing great economic losses. Considering the need for characterization of Brazilian strains of M. agalactiae and implementation of effective control, this work was performed in three steps. The first article describes the biochemical and protein profile of isolates of M. agalactiae in small ruminants through the culture in modified Hayflick medium, biochemical tests, polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and immunogenicity of these proteins by Western blot (WB). The samples had similar protein in the profile bands ranging from 30-135 kDa in SDS-PAGE, in addition the presence of a protein of 48 kDa immunodominant WB was shown. To continue identifying the agent involved in the AC in Brazil, the second article describes the analysis of ten sequences of M. agalactiae isolated from goats and sheeps. A DNA fragment of 360 bp of the 16S rRNA gene was amplified by PCR and sequenced. The analysis revealed a high degree of similarity among all the sequences. The study revealed greater than 99% similarity with the reference samples of M. agalactiae. In the third article, efficacy of three inactivated vaccines prepared with a local of M. agalactiae sample and adsorbed with three adjuvants was evaluated in goats and sheep. The antibody response in vaccinated animals was analyzed using an indirect ELISA. The three vaccines induced antibody production, and can be an alternative to reduce economic losses and prevent contagious agalactia. These results confirms the presence and spread of M. agalactiae in the country and enhances the possibility of controlling the disease through the adoption of livestock vaccination. / Mycoplasma agalactiae é o principal microrganismo causador da agalaxia contagiosa (AC), doença caracterizada por mastite seguida de agalaxia, poliartrite e ceratoconjuntivite. Em 2001, M. agalactiae foi isolado e identificado no Brasil, determinando grandes prejuízos econômicos. Considerando a necessidade de caracterização de amostras brasileiras de M. agalactiae e da implantação de medidas eficazes de controle, esse trabalho foi realizado em três etapas. O primeiro artigo descreve o perfil bioquímico e protéico de isolados de M. agalactiae de pequenos ruminantes através do cultivo em meio Hayflick modificado, testes bioquímicos e eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e a imunogenicidade destas proteínas por Western Blot (WB). As amostras apresentaram similaridade no perfil protéico com bandas variando de 30 a 135 kDa no SDS-PAGE, além da presença de uma proteína imunodominante de 48 kDa no WB. Para dar continuidade a identificação do agente envolvido na AC no Brasil, o segundo artigo descreve a análise de dez sequências de M. agalactiae isolados de caprinos e ovinos. Um fragmento de DNA de 360 bp do gene 16S rRNA amplificado por PCR foi sequenciado. A análise revelou alto grau de similaridade, entre as dez sequências e uma similaridade maior que 99% com amostras de referência de M. agalactiae. No terceiro artigo, a eficiência de três vacinas inativadas, preparadas com amostra local de M. agalactiae e adsorvidas com três adjuvantes, foi avaliada em caprinos e ovinos. A resposta sorológica dos animais vacinados foi analisada através de um ELISA indireto. As três vacinas induziram produção de anticorpos, podendo ser utilizadas como uma alternativa para reduzir as perdas econômicas e prevenir a agalaxia contagiosa. Estes resultados confirmam a presença e disseminação do M. agalactiae no país e fortalece a possibilidade de controle da doença pela adoção da vacinação dos rebanhos.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-28T15:02:53Z No. of bitstreams: 1 Aerlen Cynnara Silva Vieira.pdf: 1049059 bytes, checksum: fecedcd3f07c710acd263f6e5d9f968c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-28T15:02:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aerlen Cynnara Silva Vieira.pdf: 1049059 bytes, checksum: fecedcd3f07c710acd263f6e5d9f968c (MD5) Previous issue date: 2007-02-05 / It was pretended with this research to establish standards of normality for ruminal fluid characteristics, such as color, odor, consistency, sedimentation and flotation time (SFT), pH, bacterial activity by means of the methylene blue reduction test (MBRT), chloride, total acidity (TA) and microscopical evaluation of protozoa and bacteria, in rainy (winter) and dry (summer) seasons in Garanhuns city, Pernambuco state. Fifty Santa Inês sheep had been used, with age varying between one and four years, created in extensive regimen of pasture composed by Brachiaria decumbens, and still receiving Pennisetum purpureum as alimentary complement and water and mineral salt ad libitum. The predominant colors had been chestnut tones in summer and oliva green in winter. The aromatic odor was observed in all the samples, being stronger in winter. The slight viscous consistency predominated in both seasons, with greater proportion in the winter. The SFT was 6,73 ± 1,63min in winter and 3,15 ± 0,72min in summer, with statistic significant difference (P<0,05) between experimental periods. In the biochemical tests the average values found in winter and summer, respectively, were: pH: 6,76 ± 0,21 and 6,59 ± 0,14; MBRT: 3,20 ± 0,76min and 7,76 ± 3,00min; chloride: 28,14 ± 4,16mEq/L and 24,97 ± 5,65mEq/L; TA: 21,90 ± 4,38UC and 13,68 ± 2,97UC; having statistic significant differences (P<0,05) between seasons for all variable. Abundant density of the infusorians in winter and moderate in the summer was observed, with statistic significant differences (P<0,05) between the stations. The motility was very active and there were approximately 90% of live protozoa, having no significant statistic difference (P>0,05) between the experimental periods for these variable. Protozoa numbers were higher in winter with 425 373 ± 217 258/mL and 155 375 ± 83 113/mL in the summer, having significant statistic difference (P<0,05). There was a mixed population of bacteria with predominance of Gram-negative forms in both seasons. It could be evidenced from these results: The station of the year influences ruminal fluid characteristics, since it provides feed of better quality in the winter (rainy period) when compared with summer (dry period) having difference between all the variable during the experimental periods, pointing out the importance of determine them for each locality, type of handling and animal species, in sight to one better aid in the diagnosis and treatment of the diseases who gets digestive system of sheep. / O presente trabalho teve como objetivo estabelecer padrões de normalidade para as características do fluido ruminal, como a cor, odor, consistência, tempo de sedimentação e flotação (TSF), pH, prova de redução do azul de metileno (PRAM), teor de cloretos (TC), acidez total titulável (ATT) e avaliação da microbiota, nas estações chuvosa (inverno) e seca (verão) na cidade de Garanhuns, Agreste Meridional de Pernambuco. Foram usados 50 ovinos da raça Santa Inês, com idade variando entre um e quatro anos, criados em regime extensivo de pastagem formada por braquiária (Brachiaria decumbens), tifton (Cynodum sp), recebendo ainda capim elefante (Pennisetum purpureum) como complementação alimentar, água e sal mineral ad libitum. As colorações predominantes do fluído ruminal foram os tons de castanha no verão e verde oliva no inverno. O odor aromático foi observado em todas as amostras, estando mais pronunciado no inverno. A consistência levemente viscosa predominou em ambas as estações, com maior proporção no inverno. O TSF foi 6,73 ± 1,63 min no inverno e 3,15 ± 0,72min no verão, com diferença estatística significativa (P<0,05) entre os períodos experimentais. Nas provas bioquímicas os valores encontrados no inverno e verão, foram: pH: 6,76 ± 0,21 e 6,59 ± 0,14; PRAM: 3,20 ± 0,76min e 7,76 ± 3,00min; teor de cloretos: 28,14 ± 4,16mEq/L e 24,97 ± 5,65mEq/L; ATT: 21,90 ± 4,38UC e 13,68 ± 2,97UC, respectivamente; havendo diferença estatística significativa (P<0,05) entre as estações para todas as variáveis. A densidade foi considerada abundante para os infusórios no inverno e moderada no verão, com diferença estatística significativa (P<0,05) entre as estações. A motilidade se mostrou bastante ativa e aproximadamente 90% dos protozoários estavam vivos, não havendo diferença estatística significativa (P>0,05) entre os períodos experimentais para estas variáveis. A contagem dos protozoários no inverno foi de 425 373 ± 217 258/mL e 155 375 ± 83 113/mL no verão, havendo diferença estatística significativa (P<0,05). As bactérias Gram-negativas predominaram em ambas as estações. Pôde-se constatar a partir destes resultados que e estação do ano interfere nas características do fluído ruminal, visto que o aporte alimentar de melhor qualidade no inverno (período chuvoso) quando comparado ao verão (período seco) influenciou as diferenças entre as variáveis analisadas. Com as informações obtidas no trabalho reitera-se a importância da sua aplicabilidade na rotina clínica, em vista a um melhor auxílio no diagnóstico e tratamento das enfermidades que acometem o sistema digestivo de ovinos.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-28T15:22:34Z No. of bitstreams: 1 Alba Maria Soares Barbosa.pdf: 700846 bytes, checksum: f86a8e1e3bf4b04ccf6f9f2e1bc5db91 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-28T15:22:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alba Maria Soares Barbosa.pdf: 700846 bytes, checksum: f86a8e1e3bf4b04ccf6f9f2e1bc5db91 (MD5) Previous issue date: 2011-07-27 / The aim of this research was to identify the gastrointestinal parasites and evaluate the infection with strongyles in dairy goats and sheep in the Metropolitan Region of Recife - PE, through parasitologic fecal exams, Famacha tests and proteinogram. Animals were used from four farms, and two with concomitant goats breeding and sheep farm identified as 1 (G1) and farm 2 (G2), a only goats breeding (G3) and one only sheep breeding (G4).The research was conducted from September 2009 until July 2010. Flocks G1, G3 and G4 were studied for 10 months and Flock G2 for 8 months. The animals were examined by Famacha technique, packed cell volume and total protein plasma concentration. It was performed egg count (EPG), oocyst count (OoPG) and larvae count (LPG) per gram of feces, e animals were classified according a prior established convention to evaluating parameters values, using reference data for OPG, Hematocrit, and Famacha test to resistant, resilient and sick animals. Parasitism was observed in all study period in goats and sheep, identifying type Strongyloidea eggs, Strongyloides sp., Trichuris sp., Moniezia spp. and oocysts of Eimeria spp. The sheep had a better response to parasitism at studied region, ranking mostly of them as resistant and resilient, while most of the goats were framed as sick. / Objetivou-se, com este trabalho, identificar o parasitismo gastrintestinal e avaliar a resposta à infecção por estrongilídeos em rebanhos caprinos e ovinos da Região Metropolitana de Recife – PE, por meio de exames coproparasitológicos, do método famacha e proteinograma . Foram utilizados animais pertencentes a quatro propriedades, sendo duas com criação concomitante de caprinos e ovinos, identificadas como granja 1 (G1) e granja 2 (G2), uma com criação apenas de caprinos (G3) e outra com criação apenas de ovinos (G4). A pesquisa foi desenvolvida entre os meses de setembro de 2009 e julho de 2010. Os rebanhos G1, G3 e G4 foram acompanhados por 10 meses e o rebanho G2 por 8 meses. Os animais foram examinados pela técnica Famacha, determinação do volume globular e da concentração plasmática de proteína total. Foi realizada a contagem de ovos (OPG), contagem de oocistos (OoPG) e larvas (LPG) por grama de fezes, e os animais caracterizados de acordo com classificação convencionada para os valores dos parâmetros avaliados, utilizando-se os dados de referência para OPG, Hematócrito e Famacha em resistentes, resilientes e doentes. O parasitismo foi constatado em todo período de estudo em caprinos e ovinos, identificando-se ovos tipo Strongyloidea, Strongyloides sp., Trichuris sp., Moniezia spp. e oocistos de Eimeria spp. Os ovinos apresentaram melhor resposta ao parasitismo na região estudada, classificando-se em sua maioria como resistentes e resilientes, enquanto a maior parte dos caprinos foi classificada como doentes.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-01T16:15:27Z No. of bitstreams: 1 Anny Kaline Gomes Andrade Amorim.pdf: 1952052 bytes, checksum: 10023cd9df1426aca187a1cf4d10b2da (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-01T16:15:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Anny Kaline Gomes Andrade Amorim.pdf: 1952052 bytes, checksum: 10023cd9df1426aca187a1cf4d10b2da (MD5) Previous issue date: 2010-02-25 / Aiming to evaluate the ultrasonographic appearance of testis and epididymis of sheep in pubertal and peripubertal age in order to establish normal parameters for this stage of reproductive development, 38 animals clinically healthy were used, twenty Santa Inês breed and 18 crossbred (Dorper x Santa Inês). In Santa Ines lambs, periodic evaluations of the development of weight, measurements of biometric characteristics of the testes and ultrasound examinations of the testes and epididymis were performed from 84 to 280 days of age, at intervals of 28 days. In crossbreed lambs, the same evaluations were performed from 140 to 280 days. Was used Falco 100 (Pie Medical) ultrasound scanner and linear transducer of 8.0 MHz. Scans were performed in the sagittal, transverse, frontal and oblique planes on the testis and tails of right and left epididymis of each animal, evaluating the echotexture of the testicular parenchyma, mediastinum and epididymis cauda, and measuring the thickness mediastinum and testis width. The testicular parenchyma showed homogeneous echogenicity, ranging from low to moderate, which increased in direct proportion to the age, being higher in pubertal lambs when compared to pre-pubertal. The echogenicity and thickness of the mediastinum increased with age, being classified as diffuse, moderately and highly echogenic. The tail of the epididymis showed hypoechoic appearance in relation to the testicular parenchyma. It was observed mild calcification in the testis parenchyma of five crossbreed lambs as multifocal hyperechoic images. Results of this study showed that ultrasound imaging can be used as an additional resource in the selection and evaluation morphophisiological of breeding sheep in pubertal and peripubertal age , helping to identify and monitoring changes progressive occurring in the testes and epididymis at this stage of reproductive development. / Objetivando-se avaliar o aspecto ultrassonográfico de testículos e epidídimos de ovinos em idade peri-puberal e puberal, visando o estabelecimento de parâmetros de normalidade para esta fase do desenvolvimento reprodutivo, foram utilizados 38 animais clinicamente sadios, dos quais 20 eram da raça Santa Inês e 18 mestiços (Dorper x Santa Inês). Nos cordeiros Santa Inês, avaliações periódicas do desenvolvimento ponderal, mensurações das características biométricas testiculares e exames ultrassonográficos dos testículos e epidídimos foram realizados dos 84 (desmame) aos 280 dias de idade, em intervalos de 28 dias. Nos mestiços, as mesmas avaliações foram realizadas dos 140 aos 280 dias. Foi utilizado aparelho de ultrassom Falco 100 (Pie Medical) e transdutor linear de 8,0 MHz. As varreduras foram realizadas nos planos sagital, transversal, frontal e oblíquo dos testículos e caudas dos epidídimos direito e esquerdo de cada animal, avaliando-se a ecotextura do parênquima testicular, mediastino e cauda do epidídimo, e aferindo-se a espessura do mediastino e a largura testicular. O parênquima testicular apresentou ecogenicidade homogênea, variando de baixa a moderada, que aumentou em proporção direta com a idade, sendo maior nos cordeiros púberes quando comparados aos pré-púberes. A ecogenicidade e espessura do mediastino também aumentaram com a idade, sendo classificado em difuso, moderadamente e altamente ecogênico. A cauda do epidídimo apresentou aspecto hipoecóico em relação ao parênquima testicular. Observaram-se calcificações de grau leve no parênquima testicular de cinco dos cordeiros mestiços avaliados, as quais foram visibilizadas como imagens multifocais hiperecóicas. Concluiu-se que a ultrassonografia por imagem pode ser utilizada como recurso complementar na seleção e avaliação morfofisiológica de reprodutores ovinos em idade puberal e peri-puberal, contribuindo na identificação e monitoramento das mudanças progressivas que ocorrem nos testículos e estruturas relacionadas nesta fase do desenvolvimento reprodutivo.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-08-04T12:35:02Z No. of bitstreams: 1 Jose Ulisses Peixoto Filho.pdf: 442359 bytes, checksum: b4dbd0e8a2d64df6669c0f26d2a4a4ad (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-04T12:35:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jose Ulisses Peixoto Filho.pdf: 442359 bytes, checksum: b4dbd0e8a2d64df6669c0f26d2a4a4ad (MD5) Previous issue date: 2006-04-26 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / A field experiment was conducted in the Agrotécnica Federal de Crato School in an Oxissol to establish the dosage of chicken, cow and sheep manure that would supply the best yield of a lettuce crop. Single samples were collected in the depths of 0 – 20 cm, making a compound sample to characterize the soil. As organic fertilizers chicken, cow and sheep manure were used at the rates of 25%, 50%, 100%, 150% and 200% of the recommended dosage , in an experimental design using randomized blocks in a factorial arrangement of the order [(3 x 5) + 2], with three sources of organic matter at five levels, with two additional treatments, the first one with chemical fertilizer and the second one as an absolute control in four blocks, with one replicate per block totalizing 68 plots . After the preparation of the plots an application of the organic manures was made at the tested levels, 10 days before the transplant of the seedlings. The seedlings were planted in the spacing of 0,25m x 0,25m with the plots measuring 1,875m2 and with a useful area of 1,00m x 0,75m, with twelve plants per plot. Weeding was done when necessary and irrigation was done daily according to the crop needs. At 30 days after the beginning of the experiment the plants were harvested including the roots, when the second crop was planted , with 30 more days the third and 30 more , the fourth and 30 more the fifth crop were established . A soil sampling was made in each plot at the transplanting moment (zero time) and at 30 days of growth on the bed of each crop. In those samples the following analyses were run: organic carbon, total nitrogen, and available phosphorus and potassium. At harvest the plants fresh mass was measured by plot, and one plant was chosen for drying in an oven at 65 degrees Celsius and the dried matter by plant determined. The variables evaluated were subjected to analysis of variance, comparing the averages of the treatments by the Tukey test at the five percent probability level , and regression models were tested between the dependent variables an the levels of manure utilized. The chicken manure provided higher yields of lettuce in the first crop, being surpassed by the cow and sheep manures beginning with the second crop. In general, starting with the 100% recommendation the results are similar, with no justification of using higher dosages. In the third crop, the quality of the product was affected even at the highest dosages. / Foi conduzido um experimento na Escola Agrotécnica Federal de Crato em um latossolo vermelho-amarelo para estabelecer as doses de esterco de ave, bovino e ovino que proporcionam melhores rendimentos na cultura da alface. Foram coletadas amostras simples, na profundidade de 0 a 20cm, formando uma amostra composta para caracterização do solo. Como fertilização orgânica foram usados os estercos de ave, bovino e ovino nas proporções de 25%, 50%, 100%, 150% e 200% da dose recomendada, em um delineamento experimental em blocos casualizados com arranjo fatorial [(3 x 5 ) + 2], sendo três fontes de matéria orgânica e cinco níveis, com dois tratamentos adicionais, um com fertilizante químico e uma testemunha absoluta, em quatro blocos, com uma repetição por bloco, totalizando 68 parcelas. Após o preparo das parcelas foi realizada a aplicação dos fertilizantes orgânicos, 10 dias antes do transplantio das mudas. As mudas foram plantadas num espaçamento de 0,25m x 0,25m, com parcelas medindo 1,875m² e com uma área util de 1,00m x 0,75m, com doze plantas. Foram feitas capinas quando necessárias e a irrigação foi feita diariamente. Aos 30 dias do início do experimento foi realizada a colheita das plantas com raízes, plantando-se então o segundo cultivo da cultura, com mais 30 dias o terceiro e mais 30, o quarto e mais 30 o quinto. Foi realizada uma amostragem de solo em cada parcela no momento do transplantio (tempo zero) e aos 30 dias de cultivo no canteiro de cada cultivo. Nessas amostras foram analisados: carbono orgânico, nitrogênio total, fósforo e potássio disponível. No momento da colheita, foi medida a massa fresca das plantas por parcela, retirando-se uma planta para secagem em estufa a 65ºC e determinação da matéria seca por planta. As variáveis avaliadas foram submetidas à análise de variância comparando-se as médias dos tratamentos pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade,sendo também testados modelos de regressão entre as variáveis dependentes e os níveis de adubos utilizados. O esterco de ave proporcionou maiores produtividades de alface no primeiro cultivo, sendo superado pelos estercos bovino e ovino, a partir do segundo cultivo. Geralmente a partir de 100% da recomendação os resultados são semelhantes, não se justificando o uso de doses superiores a esta. No terceiro cultivo a qualidade do produto foi afetada mesmo nas maiores doses.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-11T11:55:17Z No. of bitstreams: 1 Arthur Nascimento.pdf: 397417 bytes, checksum: 40f7d9ee2e954be3d6ecb575b4fe1359 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-11T11:55:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arthur Nascimento.pdf: 397417 bytes, checksum: 40f7d9ee2e954be3d6ecb575b4fe1359 (MD5) Previous issue date: 2008-02-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In order to achieve the identification of sex in fetal sheep, were subjected to the technique of Polymerase Chain Reaction (PCR), 45 samples of DNA extracted from amniotic fluid of pregnant uterus, 24 samples of males and 21 females. The amniotic fluid was obtained by amniocentesis guided by ultrasound for greater accuracy in aspiration and also for subsequent application of the technique in vivo, as simulation. Gestational age was laid on the measurement of fetuses with caliper, which showed variation of 3.3 to 46.5 cm. The samples were divided into three groups based in Kadu and Kaikini (1987): Group 1 (zero to 8.6 cm) from conception to the 60th day of gestation, group 2 (8.7 to 26 cm) among 61th and 105th day, and Group 3 (26,1 cm on) 106th day until the birth. The DNA was extracted using the method phenol-chloroform, obtaining a quantity of less than 50 ng per μL, quantified by comparing through - lambda and visualized in 1% agarose gel. For amplification of genetic material, were used "primers" to the SRY gene (116pb), found in the Y chromosome present only in males, and Aml-X (300pb), autosomal, present in both sexes. In all samples was possible to sex the fetuses and the primers used shown to be quite effective. The sex was confirmed by morphological analysis of fetuses, aside from the concept who genital tubercle still had not moved, proving the effectiveness of the PCR molecular tool for this examination. / Com o objetivo de realizar a identificação do sexo fetal em ovinos, foram submetidas à técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), 45 amostras de DNA extraídas do líquido amniótico de úteros prenhes, sendo 24 amostras de machos e 21, fêmeas. O fluido amniótico foi obtido por amniocentese guiada por ultra-sonografia para maior precisão na aspiração, como também para posterior aplicação in vivo da técnica, com efeito de simulação. A idade gestacional foi estipulada a partir da medição dos fetos com paquímetro, a qual apresentou variação de 3,3 a 46,5 cm. As amostras foram divididas em três grupos segundo Kadu e Kaikini (1987): Grupo 1 (zero a 8,6cm) da concepção ao 60o dia de gestação, Grupo 2 (8,7 a 26 cm) entre o 61o e o 105o dia e Grupo 3 (26,1 cm em diante) 106o até o nascimento. O DNA foi extraído através do método fenol-clorofórmio, obtendo-se uma quantidade inferior a 50 ngpor μl ao ser quantificado por comparação através de -lambda e visualizado em gel de agarose 1%. Na amplificação do material genético, foram utilizados os “primers” referentes aos genes SRY (116pb), encontrado no cromossomo Y presente apenas em machos, e Aml-X (300pb), de caráter autossômico, presente em ambos os sexos. Em todas as amostras foi possível realizar a sexagem fetal e os primers utilizados demonstraram ser bastante eficientes. O sexo foi confirmado pela análise morfológica dos fetos, com exceção do concepto cujo tubérculo genital ainda não havia migrado, comprovando a eficácia da ferramenta molecular PCR para este exame.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-11T13:06:12Z No. of bitstreams: 1 Ana Lydia Vasco A Peixoto.pdf: 2392494 bytes, checksum: da169ddb32ab0f7830d6e65c01995e93 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-11T13:06:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Lydia Vasco A Peixoto.pdf: 2392494 bytes, checksum: da169ddb32ab0f7830d6e65c01995e93 (MD5) Previous issue date: 2007-02-12 / The antioxidant substances prevent the oxidative damages during freezing/thawing processes and incubation period caused by ROS to sperm cells, improving the sperm parameters (vigor, motility and acrosome integrity), besides avoid damages to DNA. The aim of this study was to evaluate the effect of vitamin C and Trolox addition to diluent used to ram semen cryopreservation. The ejaculates of eleven rams were harvested by artificial vagina. After macrocospic (aspect, color and viscosity) and microscopica (motility and vigor) evaluation the pool was diluted in Tris-egg yolk (Exp. 1, 2 and 3) and Fiser (Exp. 2) and supplemented with antioxidant substances: G1) Diluent (Control); G2) Diluent + 600 mM/L of vitamin C; G3) Diluent + 60 mM/L of Trolox and G4) Diluent + 600 mM/L of vitamin C + 60 mM/L of Trolox. The freezing was done by automatized method using two curves: fast(C2= –0.5 oC/minute of 25 to 5 oC, and -12.5 oC/minute of 5 to –120 oC) to the Exps. 1 and 2, and slow (C1= –0.25 oC/minute of 25 to 5 oC, and –20 oC/minute of 5 to –120 oC) to the Exp. 2, and by conventional method (90 minutes), where after the refrigeration (5 °C) the samples were placed in liquid nitrogen during 10 minutes until reaching -120 oC (Exp. 2 and 3). The straws with 100 (Exp. 1), 75 (Exp. 2 and 3) and 200 (Exp. 2) x 106 spermatozoa were transferred into the liquid nitrogen storage container (-196 oC). The semen samples were evaluated after thawing (0 min; Exp. 1, 2, and 3) and after 30 (Exp. 1 and 2) and 60 min (Exp. 1, 2 and 3) of the incubation at 37 ºC according to progressive motility, vigor, oxidative stress, acrosome and DNA integrity (Exp. 1, 2 and 3) and sperm kinetics (MT, MT, VSL,VCL, VAP, LIN, STR, ALH, and BCF; Exp. 3). In the Exp. 1, there was significant difference (p<0.05) among evaluation times (0, 30 and 60 min) in the parameters of acrosome integrity and oxidative stress for the groups supplemented with vitamin C and Trolox and the Control group (p>0.05). However, in the Exp. 2 the percentages of PM, vigor and acrosome integrity had significant difference (p<0.05) between incubation times (0 and 60 min), being that the group supplemented with Trolox (G3) presented greater cell percentages with oxidative stress (p<0.05) when compared to the vitamin C group (G2). On the Exp. 3, there was evidence that the incubation time intervened on the sperm kinetics (MT, MP, VSL, VAP, LIN and STR), acrosome integrity and oxidative stress of sperm cells, besides presenting negative correlation between acrosome integrity and oxidative stress for the G3 group(Trolox), positive correlation between acrosome integrity and progressive motility to the G2 group (vitamin C) and negative correlation between oxidative stress and LIN to the G2 group(vitamin C) after 60 minutes of incubation. However, it can be concluded that the incubation time intervenes negatively on in vitro viability of the sperm cells independent of the vitamin C and Trolox adition; using the conventional method of cryopreservation of ram semen diluted in Tris-egg yolk, the vitamin C addition provides less oxidative stress on the spermatozoa after post-thawing; Using the automatized method of cryopreservation of ram semen diluted in Fiser, it should be used the slow curve of refrigeration (0.25 ºC/min) without necessity of vitamin C (600μM/L) and Trolox (60μM/L) addition and; Based on the kinetics, acrosome integrity, and oxidative stress, the addition of ascorbic acid and Trolox do not minimizes the negative effects of the cryopreservation and the incubation of ram semen at temperature of 37 oC after thawing. / Os antioxidantes previnem os danos oxidativos durante processos de congelação/descongelação e período de incubação causados pelas ROS/RNS às células espermáticas, melhorando os parâmetros espermáticos (vigor, motilidade e integridade acrossomal), além de evitar danos ao DNA. Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito da adição de vitamina C e Trolox ao diluidor utilizado para criopreservação de sêmen ovino, utilizando o ejaculado de onze carneiros colhidos através de vagina artificial. Após avaliação macroscópica (aspecto, cor e viscosidade) e microscópica (motilidade e vigor), o pool foi diluído em Tris-gema (Exp. 1, 2 e 3) e Fiser (Exp. 2) e suplementado com antioxidantes: G1) Diluente (Controle); G2) Diluente + 600 mM/L de vitamina C; G3) Diluente + 60 mM/L de Trolox e G4) Diluente + 600 mM/L de vitamina C + 60 mM/L de Trolox. A congelação foi realizada pelo método automatizado utilizando duas curvas: Rápida (C2= –0,5 oC/minuto, de 25 oC a 5 oC, e a -12,5 oC/minuto, de 5 oC a –120 oC) para os Exp. 1 e 2 e Lenta (C1= –0,25 oC/minuto, de 25 oC a 5 oC, e a –20 oC/minuto, de 5 oC a –120 oC) apenas para o Exp. 2, e pelo método convencional (90 minutos), onde após a refrigeração (5 °C) as amostras foram colocadas em nitrogênio líquido por 10 minutos até atingirem –120 oC (Exp. 2 e 3). As palhetas foram envasadas com 100 (Exp. 1), 75 (Exp. 2 e 3) e 200 (Exp. 2) x 106 espermatozóides e, em seguida, armazenadas em botijão criobiológico (-196 oC). As amostras de sêmen foram avaliadas imediatamente após a descongelação (0 min; Exp. 1, 2, e 3) e depois de 30 (Exp. 1 e 2) e 60 min (Exp. 1, 2 e 3) de incubação a 37 ºC (30 e 60 minutos), quanto à motilidade progressiva (MP), vigor, estresse oxidativo, integridade de acrossoma e de DNA (Exp. 1, 2 e 3) e quanto a motilidade cinética espermática (MT, MP, VSL, VCL,VAP, LIN, STR, ALH, e BCF; Exp. 3). No Exp. 1, houve diferença significativa (p<0,05) entre os tempos de avaliação (0, 30 e 60 min) nos parâmetros de integridade de acrossoma e estresse oxidativo para os grupos tratados com vitamina C e Trolox e o grupo controle (p>0,05). Todavia, no Exp. 2 os porcentuais para MP, vigor e integridade de acrossoma diferiram (p<0,05) entre tempos de incubação (0 e 60 min), sendo que o grupo suplementado com Trolox (G3) apresentou maiores porcentuais de células com estresse oxidativo (p<0,05), quando comparado ao grupo suplementado com vitamina C (G2). Para o Exp. 3, constatou-se que o tempo de incubação interferiu na cinética espermática (MT, MP, VSL, VAP, LIN e STR), na integridade acrossomal e no grau de estresse oxidativo, além de apresentar correlação negativa entre integridade acrossomal e estresse oxidativo para o G3 (Trolox), correlação positiva entre integridade do acrossoma e MT para o G2 (vitamina C) e negativa para estresse oxidativo e LIN para o G2 (vitamina C), após 60 minutos de incubação. Contudo, pode-se concluir que o tempo de incubação interfere negativamente na viabilidade in vitro das células espermáticas independente da adição de vitamina C e Trolox; ao se utilizar o método convencional de congelação de sêmen ovino diluído em Tris-gema, a adição de vitamina C e Trolox proporciona menos estresse oxidativo às células espermáticas imediatamente após a descongelação; Ao se usar o método automatizado de congelação de sêmen ovino diluído em Fiser, deve-se utilizar a curva lenta de refrigeração (0,25 ºC/min), sem necessidade da suplementação de vitamina C (600 mM/L) e Trolox (60 mM/L) ao diluente e, Com base na avaliação da cinética, da integridade acrossomal e do estresse oxidativo, a adição de ácido ascórbico e Trolox não minimiza os efeitos negativos da criopreservação e da incubação de sêmen ovino à temperatura de 37 oC, pós-congelação.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-15T14:32:59Z No. of bitstreams: 1 Daniela da Silva Pereira Campinho.pdf: 282831 bytes, checksum: 7ff72a635b08513f99aa70d049fc00d2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-15T14:32:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Daniela da Silva Pereira Campinho.pdf: 282831 bytes, checksum: 7ff72a635b08513f99aa70d049fc00d2 (MD5) Previous issue date: 2012-02-15 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The Ruminants Pestiviruses are often associated with temporary and subclinical or mild clinical signs, with the largest losses related to the infection of pregnant females that can cause fetal loss and birth of persistently infected (PI) animals. The Pestivirus are distributed in many countries, including Brazil, where studies in goats and sheep are scarce. Several studies have reported the use of molecular techniques for detection of Pestivirus, among them, the RT-PCR and the RT-qPCR.They are able to detect PI animals, which are the main source of the virus-Care in the herd. The objective of this study was to determined the lower limit of detection for Pestivirus from supernatant cell culture and serum samples from small ruminants using RT-PCR and qRT-PCR. The extraction of nucleic acids was performed with a commercial kit QIAamp ® MinElute ® Virus Spin, the reverse transcriptase reaction followed the protocol recommended by the manufacturer of the enzyme reverse transcriptase M-MLV. The evaluation of the detection limit of RT-qPCR and RT-PCR was performed using a Pestivirus calibration curve (dilution factor 10) with known and decreasing TCID50/mL called panpestivirus using primers (Vilcek et al., 1994).The detection limit of RT-qPCR in cell culture supernatant was 10-3 TCID50/mL and of RT-PCR was 10.2 TCID50/mL, since the lower limit of detection using sera weeding, sheep and Gibco ® Lamb as a diluent were TCID50/mL. The tests conducted under the conditions described in this study proved to be sensitive and can be used as a strategy for etiologic diagnosis of Pestivirus, especially for the molecular identification of IP animals, which is essential for the control of Pestiviroses. / Em ruminantes as pestiviroses são frequentemente associadas a infecções subclínicas ou com sinais clínicos leves e passageiros, sendo as maiores perdas relacionadas com a infecção de fêmeas prenhes que podem causar perdas fetais e nascimento de animais persistentemente infectados (PI). Os Pestivirus estão distribuídos em muitos países, inclusive no Brasil, onde estudos em caprinos e ovinos são escassos. Vários estudos têm relatado a utilização de técnicas moleculares para a detecção de Pestivirus, dentre elas a RT-PCR e a RT-qPCR que são capazes de detectar animais PI, principal fonte de manutenção do vírus no rebanho. Objetivou-se com este estudo determinar o limite mínimo de detecção para Pestivirus a partir de sobrenadante de cultura celular e soro de pequenos ruminantes utilizando a RT-PCR e qRT-PCR. A extração dos ácidos nucléicos foi realizada com kit comercial QIAamp® MinElute® Virus Spin, a reação de transcriptase reversa seguiu o protocolo recomendado pelo fabricante da enzima transcriptase reversa M-MLV. A avaliação do limite de detecção da RT-qPCR e RT-PCR para Pestivirus foi realizada utilizando uma curva de calibração (fator de diluição 10) com TCID50/mL conhecidas e decrescentes utilizando primers denominados panpestivírus. O limite de detecção da RT-qPCR em sobrenadante de cultura celular foi de 10-3 TCID50/mL e da RT-PCR foi de 10-2 TCID50/mL, já o limite mínimo de detecção utilizando os soros capino, ovino e Gibco® Lamb como diluentes foram de 1 TCID50/mL. Os ensaios realizados nas condições descritas nesse estudo demonstraram ser sensíveis, podendo ser utilizados como uma estratégia de diagnóstico etiológico do Pestivirus, sobretudo para a identificação molecular de animas PI, o que é essencial para o controle das pestiviroses.