Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-16T14:31:59Z No. of bitstreams: 1 Edivaldo Rosas.pdf: 659763 bytes, checksum: 489e95ded0734db81a8a937256c893d6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-16T14:31:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Edivaldo Rosas.pdf: 659763 bytes, checksum: 489e95ded0734db81a8a937256c893d6 (MD5) Previous issue date: 2008-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The use of molecular biology in animal reproduction to identifying the sex genetic allows the producer has better reproductive planning, facilitating the coordination of actions aimed at rationalizing production and profitability. The objective of this study was to determine methods for the identification of the sex of the goats and sheep, using different concentrations of DNA (150, 100, 50, 1, 0.5, 0.2 and 0.1 ng) extracted from blood of both sexes, as a possibility for application in sexing embryos pre-implantating, sperm and animals pseudo-hermaphrodites. It was performed polymerase chain reaction (PCR) multiplex for the SRY gene (116bp) found in the Y chromosome, the gene for Aml-X (300pb) found on the X chromosome, in addition the sequences corresponding to genes ZFX / ZFY containing 445 and 447bp respectively. The use of these methods presented showed accuracy of 100% in samples of blood goat and sheep, in low concentrations, at least 0.2ng (SRY/Aml-X) and 1.0ng (SRY/ZFXZFY), which suggests the feasibility of the technique for determining sexual in these species. / A utilização de ferramentas moleculares na identificação do sexo genético permite ao produtor um melhor planejamento reprodutivo, elevando o valor dos animais avaliados e facilitando a coordenação de ações que visem racionalizar produção e lucratividade. Objetivou-se com o presente estudo determinar métodos que permitam a identificação do sexo genético das espécies caprina e ovina, utilizando diferentes concentrações de DNA (150, 100, 50, 1, 0,5, 0,2 e 0,1ng) extraído de sangue de ambos os sexos, como uma possibilidade de aplicação em exames embrionários pré-implantacionais, sexagem espermática e identificação do sexo em animais pseudo-hermafrotidas. Foram realizadas reações em cadeia da polimerase (PCR) multiplex para o gene SRY (116pb) encontrado no cromossomo Y, para o gene Aml-X (300pb) encontrado no cromossomo X, além das seqüências correspondentes aos genes ZFX/ZFY que contêm 445 e 447pb respectivamente. A utilização destes métodos apresentou acurácia de 100% nas amostras de sangue caprino e ovino, com eficiência em quantidades de DNA de até 0,2ng (SRY e Aml-X) e 1,0ng (SRY e ZFX/ZFY), o que sugere a viabilidade da técnica para determinação sexual embrionária destas espécies.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-17T12:45:26Z No. of bitstreams: 1 Eduardo Levi Sousa Guarana.pdf: 2109954 bytes, checksum: f0acb1cbcb8908ca98a1cd46800161e4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-17T12:45:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eduardo Levi Sousa Guarana.pdf: 2109954 bytes, checksum: f0acb1cbcb8908ca98a1cd46800161e4 (MD5) Previous issue date: 2011-02-18 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / This study aimed to evaluate the dynamics of the intramammary infection on different stages of lactation (beggining, middle and ending) and its impact in the physical-chemical composition of milk from Santa Inês ewes. Thirty four primiparous and multiparous Santa Inês ewes raised under semi-intensive and submitted to the same sanitary and nutritional management during all lactation period were studied. The moments of evaluation and sampling were approximately 10 days before parturition (colostrum formation phase), 15 days postpartum (dpp), 30 dpp, 60 dpp and 90 dpp (weaning), moments in which it was conducted clinical examination of the mammary gland. The bacteriological and susceptibility profile of isolates were performed at all times; and in the postpartum moments also perform the direct counting of somatic cells (SCC) and physico-chemical evaluation of milk (fat, protein and lactose contents, density, Dornic acidity, electric conductivity, pH and chloride content). Based on bacterial growth samples were characterized as being from healthy (G1) or infected mammary glands (G2) in the respective moments. Variance analysis was employed and the F statistics with its respective level of significance (p) was calculated; in the descriptive study of the variables studied it was used a frequency distribution (%).All ewes were seronegative for lentiviruses. It was observed an elevation (P<0,05) in the somatic cell count, characterizing the inflammatory process with consequent elevation, although mild, in the fat, protein and chloride contents, pH elevation and reduction in lactose content, and those alterations were more significant in the final stage of lactation. The pre-parturition phase showed a high percentage of bacterial isolation from apparently healthy mammary glands, as well as at the end of lactation. Coagulase-negative Staphylococcus was the most frequently isolated from subclinical cases, which prevailed. The value of somatic cell direct count and the percentage of bacterial isolation which characterize the intramammary infection showed elevated values insofar as it intensifies the reaction of the CMT. A high antimicrobial sensitivity to ampicilin, cefalotin and cefoxitin was verified for Gram-positive bacteria. As for Gram-negative bacteria a good sensitivity to ampicilin, cefoxitin and sulphazotrin was verified. / Objetivou-se neste estudo, avaliar a dinâmica da infecção intramamária nas diferentes fases da lactação (início, meio e final) e seu impacto sobre a composição físico-química do leite em ovelhas da raça Santa Inês. Foram acompanhadas 34 ovelhas primíparas e multíparas da raça Santa Inês criadas em sistema semi-intensivo e submetidas ao mesmo manejo higiênico-sanitário e nutricional durante todo o período de lactação, sendo avaliadas aproximadamente 10 dias antes do parto (fase de formação do colostro), 15 dias pós-parto (dpp), 30 dpp, 60 dpp e 90 dpp (desmame), momentos em que foi realizado exame clínico da glândula mamária. O cultivo bacteriológico e o perfil de sensibilidade dos isolados foram realizados em todos os momentos; e nos momentos pós-parto realizou-se também a contagem direta de células somáticas (CCS) e avaliação físico-química do leite (teor de gordura, proteína, lactose, densidade, acidez Dornic, condutividade elétrica, pH e teor de cloretos). Baseado no crescimento bacteriano, as amostras foram caracterizadas como provenientes de glândulas sadias (G1) ou infectadas (G2) nos respectivos momentos. Foi empregada a análise de variância e calculada a estatística F e seu respectivo nível de significância (p), e no estudo descritivo das variáveis estudadas empregou-se a distribuição de frequências (%). Todas as ovelhas foram negativas na sorologia para lentivírus. Foi observada elevação (P<0,05) na contagem de células somáticas caracterizando o processo inflamatório, com consequente elevação, apesar de pequena intensidade no teor de gordura, proteína e cloretos e pH, e redução no teor de lactose, sendo estas alterações mais marcantes na fase final de lactação. A fase que precede o parto apresentou alto percentual de isolamento bacteriano de glândulas aparentemente sadias, bem como, na fase inicial da lactação. O Staphylococcus coagulase negativo foi o agente mais frequentemente isolado dos casos subclínicos, que prevaleceram. O valor da contagem direta de células somáticas e o percentual de isolamento bacteriano, que caracterizam a infecção intramamária, apresentaram valores aumentados à medida que se intensifica a reação do CMT. Uma alta sensibilidade antimicrobiana foi verificada para as bactérias Gram positivas frente à ampicilina, cefalotina e cefoxitina e para as bactérias Gram negativas houve uma boa sensibilidade frente à ampicilina, cefoxitina e sulfazotrim.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-24T15:24:25Z No. of bitstreams: 1 Edivaldo Rosas Santos Junior.pdf: 600124 bytes, checksum: b586f72fa1aa6d9040b988d57db4cab4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-24T15:24:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Edivaldo Rosas Santos Junior.pdf: 600124 bytes, checksum: b586f72fa1aa6d9040b988d57db4cab4 (MD5) Previous issue date: 2010-02-24 / This study aimed to determine the Effect of heat stress during maturation of oocytes and in vitro production of embryos in goats and sheep. Ovaries were collected in a slaughterhouse and transported to the Laboratory of Biotechnical Reproduction of UFRPE. The cumulus oophorus complexes (COCs) were collected by the technique of "slicing" of the follicles from 2 to 6 mm in diameter and selected based on morphological classification and placed on the basic stages. In 10 replicates the COCs were submitted to the caloric heat stress at 41 ° C for 0 (the thermoneutral 39° C), 3, 6, 12, 18 and 24 hours of maturation in vitro. The percentage of oocytes was determined in the maturation, fertilization, cleaved (D-3), stage of 8-16 cells (D-4), morale (D-5), blastocyst(D-8) after fertilization and blastocyst positive for apoptosis by TUNEL assay. Significant difference (P < 0.05) in all time periods of heat stress in ripening. In sheeps the fertilization, D-3,D-4, D-5 and D-8 was not significantly different (P > 0.05) between the times of 18 vs 24 hours in blastocyst TUNEL positive at 0 vs 3, 3 vs 6, 12 vs 18 and 18 vs 24 h of heat stress. The results in goats showed on maturation, fertilization, D-3, D-4, D-5. The D-8 was not significantly different (P > 0.05) between the periods of 3 vs 6 to 18 vs 24 h and the blastocyst TUNEL positive at 0 vs 3, 3 vs 6, 12 vs 18 and 18 vs 24 h of heat stress. Under the conditions observed in this study, the results indicate that the time in which the oocyte is exposed to heat stress during maturation in vitro is essential to define the embryonic development and their level of apoptotic cells. / Esse estudo teve como objetivo determinar o efeito do estresse térmico durante a maturação de oócitos e seu reflexo na produção in vitro de embriões nas espécies caprina e ovina. Os ovários foram coletados em abatedouro e transportados ao Laboratório de Biotécnicas da Reprodução da UFRPE. Os complexos cumulus oophorus (CCOs) foram coletados pela técnica de “slicing” dos folículos entre 2 a 6 mm de diâmetro, selecionados com base na morfologia e colocados em meio básico de maturação. Nas 10 repetições, os CCOs foram submetidos aos tratamentos de estresse térmico calórico a 41°C por 0 (termoneutralidade a 39°C), 3, 6, 12, 18 e 24 horas de maturação in vitro. Os dados foram avaliados na maturação, fecundação, clivagem (D-3), estádio de 8-16 células (D-4), mórula (D-5), blastocisto (D-8) após fecundação e blastocistos positivos para apoptose através do ensaio de TUNEL. Foi observada diferença significativa (P < 0,05) em todos os tempos estudados de estresse térmico na maturação em ambas espécies. Em caprinos, houve diferença significativa (P < 0,05) também na fecundação, D-3, D-4, D-5. No D-8 não foi observada diferença significativa (P > 0,05) entre os tempos de 3 vs 6 e 18 vs 24 h e nos blastocistos TUNEL positivos nos tempos de 0 vs 3, 3 vs 6, 12 vs 18 e 18 vs 24 h de estresse térmico. Em ovinos, não foi observada diferença significativa (P > 0,05) na fecundação, D-3, D-4, D-5 e D-8 entre os tempos de 18 vs 24h e nos blastocistos TUNEL positivos nos tempos de 0 vs 3, 3 vs 6, 12 vs 18 e 18 vs 24h de estresse térmico. Nas condições observadas neste estudo, os resultados permitem concluir que o tempo em que o oócito é exposto ao estresse térmico durante a maturação in vitro é fundamental para definir o desenvolvimento embrionário e o nível apoptótico de suas células.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-25T12:11:06Z No. of bitstreams: 1 Eduardo Luiz Cavalcanti Caldas.pdf: 343939 bytes, checksum: 1af9249e373770cb37beca7e31337a00 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-25T12:11:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eduardo Luiz Cavalcanti Caldas.pdf: 343939 bytes, checksum: 1af9249e373770cb37beca7e31337a00 (MD5) Previous issue date: 2011-07-25 / The aim of this study, divided into two trials, was to evaluate the male effect associated with management strategies on the reproductive performance of Santa Inês ewes raised in a semi-extensive regime. In the first experiment, consisting of three treatments (T1, T2 and T3), was evaluate the effect of the separation distance between male and female, before the breeding season of 45 days, on the reproductive activity of pluriparous ewes (n = 60). They were kept at distances of 3.000 m (T1), 3 m (T2) and 300 m (T3) from the breeders (n = 3) 60 days before of the experiments during both the dry season and the rainy season. In dry season, the first manifestation of estrus averaged at 15.45 ± 10.36 (T1), 9.25 ± 6.41 (T2) and 13.05 ± 10.24 (T3) days. In rainy season, the average was 8.73 ± 5.84 (T1), 9.30 ± 5.62 (T2) and 6.10 ± 5.66 (T3) days. There was no difference in treatment (P > 0.05) during these different climatic conditions. Estrus induction occured in 100% of the females in T1, T2 and T3 in both climatic periods. Estrus synchronization on the first five days of mating season only occured in 20% of the females during dry season, being 30% (T1), 15% (T2) and 15% (T3). In rainy season, synchronisation occured in 40% of females, being 30% (T1), 35% (T2) and 45% (T3), with no differential treatment (P > 0.05) between both climatic periods. The pregnancy percentages in dry and rainy seasons were 85% (T1), 80% (T2) and 75% (T3), with no differential treatment (P > 0.05) between both climatic periods. Prolificacy in dry season was 1.29 (T1), 1.38 (T2) and 1.13 (T3) and in rainy season it was 1.12 (T1), 1.25 (T2) and 1.26 (T3) with no differential treatment (P > 0.05) between rainy and dry seasons. In the second experiment, consisting of three treatments (DT0, DT24, DT48), was evaluate the effect of temporary interrupt of sucking on the reproductive performance of pluriparous ewes (n = 60) with offspring. At DT0 (n = 20), there was no interruption of sucking while at DT24 (n = 20), interrupted of sucking for 24 hours and at DT48 (n = 20), interruption of sucking for 48 hours. Breeders were kept away from the females (n= 60), without visual, odor or hearing contact for 60 days before the breeding season of 45 days during the dry season. Estrous percentages were 90% (DT0), 100% (DT24) and 100% (DT48), with no difference (P > 0.05) among treatments. Estrous synchronization up to the 5th day of mating season was 15% (DT0), 30% (DT24) and 25% (DT48), with no difference among treatments. Pregnancy percentages were 38.4% (DT0), 60.0% (DT24) and 45.0%(DT48) with no difference (P > 0.05) among treatments. Prolificness was 1.43 (DT0), 1.17 (DT24) and 1.22 (DT48), with no difference (P > 0.05) among treatments. The results of the first experiment allow us to conclude that the ram effect can be obtained simply by avoiding physical contact between the breeder and the female as well as that the 45 day mating season can take place in both the rainy and dry season. The data from the second experiment allow us to conclude that temporary weaning is efficient to induce estrous, however is not to synchronize estrous as well as to increase the pregnancy rate and prolificacy of Santa Inês ewes in the breeding season of 45 days during dry period. / O objetivo neste estudo, dividido em dois experimentos, foi avaliar o efeito macho associado a estratégias de manejo sobre o desempenho reprodutivo de ovelhas da raça Santa Inês criadas em regime semi-extensivo. No primeiro experimento, constituído de três tratamentos (T1, T2 e T3), foi avaliado a influência da distância do afastamento entre macho e fêmea, antes da estação de monta de 45 dias, sobre o desempenho reprodutivo de fêmeas pluríparas (n = 60). As ovelhas foram afastadas por 3.000 m (T1), 3 m (T2) e 300 m (T3) de distância dos reprodutores (n = 3) 60 dias antes dos experimentos durante os períodos climáticos de seca e chuva. No período seco, o valor médio da primeira manifestação de estro foi de 15,45 ± 10,36 (T1), 9,25 ± 6,41 (T2) e de 13,05 ± 10,24 (T3) dias e no período chuvoso foi de 8,73 ± 5,84 (T1), 9,30 ± 5,62 (T2) e de 6,10 ± 5,66 (T3) dias, não havendo diferença (P > 0,05) dentro e entre tratamentos, bem como entre os diferentes períodos climáticos. A indução do estro ocorreu em 100% das fêmeas no T1, T2 e T3 em ambos os períodos climáticos. A sincronização dos estros nos primeiros cinco dias da estação de monta do período seco ocorreu somente em 20% das fêmeas, sendo de 30% (T1), 15% (T2) e de 15% (T3), não havendo diferença (P > 0,05) entre os tratamentos. No período chuvoso ocorreu em 40% das fêmeas, sendo de 30% (T1), 35% (T2) e de 45% (T3), não existindo diferença (P > 0,05) entre os tratamentos. A porcentagens de prenhez nos períodos seco e chuvoso foram de 85% (T1), 80% (T2) e de 75% (T3), não havendo diferença (P > 0,05) dentro e entre os tratamentos. A prolificidade no período seco foi de 1,29 (T1), 1,38 (T2) e de 1,13 (T3) e no período chuvoso foi de 1,12 (T1), 1,25 (T2) e de 1,26 (T3), não havendo diferença (P > 0,05) entre os tratamentos de ambos períodos climáticos. No segundo experimento, constituído de três tratamentos (DT0, DT24, DT48), foi avaliado o efeito do desaleitamento temporário associado ao efeito macho sobre o desempenho reprodutivo de ovelhas pluríparas (n = 60), com cria ao pé. No DT0 (n = 20), não houve interrupção do aleitamento, no DT24 (n = 20), o aleitamento foi interrompido por 24 horas e no DT48 (n = 20) foi interrompido por 48 horas. As ovelhas (n = 60) foram afastadas dos reprodutores (n = 3) sem contato visual, olfativo e auditivo 60 dias antes do início da estação de monta de 45 dias durante o período de seca. As porcentagens de estro foram de 90% no DT0 e de 100% no DT24 e DT48, não diferindo (P > 0,05) entre os tratamentos. A sincronização dos estros até o 5o dia da estação de monta foi de 15% (DT0), 30% (DT24) e de 25% (DT48), não havendo diferença entre os tratamentos. As porcentagens de prenhez foram de 38,4% (DT0), 60,0% (DT24) e de 45,0% (DT48), não se constatando diferença (P > 0,05) entre os tratamentos. A prolificidade foi de 1,43 (DT0), 1,17 (DT24) e de 1,22 (DT48), não havendo diferença (P > 0,05) entre os tratamentos. Os resultados do primeiro experimento permitem concluir que o efeito macho pode ser obtido evitando-se apenas o contato táctil entre reprodutor e fêmea, bem como que a estação de monta de 45 dias pode ser realizada tanto no período seco quanto no chuvoso. Com os dados do segundo experimento conclui-se que o desaleitamento temporário é eficiente para induzir o estro, mas não para sincronizá-lo e tampouco para elevar o índice de prenhez e a prolificidade das ovelhas da raça Santa Inês na estação de monta de 45 dias durante o período de seca.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-25T13:14:10Z No. of bitstreams: 1 Elielete Maria Pires de Azevedo.pdf: 1214708 bytes, checksum: c870297fcafd480a47f0be9c7c4e26d3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-25T13:14:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Elielete Maria Pires de Azevedo.pdf: 1214708 bytes, checksum: c870297fcafd480a47f0be9c7c4e26d3 (MD5) Previous issue date: 2007-02-26 / This work was divided in three chapters, had the objective to establish fetal measurement parameters that allow appreciate the age of gestation (IG) and birth fetal weight with one or two ultra-sonografic examinations with, to determine the ideal moment to sex goat and ovine embryos comparing the average migration period of the genital tubercle between sex, race and species, to evaluate the accuracy of the fetal sexing between sexes, as well as defining the best plans for sexing of goat and ovine embryos. In the first chapter experiment 156 Dorper, Morada Nova and Damara embryos had been monitored, from 30 to 45 days of gestation, being measured the céfalo-coccígeo length (CCC), area (AC), perimeter (PC) and volume (VC) of concept and area (AV), perimeter (PV) and volume (VV) of the embryonic vesicle. All you create them had been weighed after the birth immediately. The equations had not evidenced existence of relation (P > 0,05) between the photometric parameters and the fetal weight to the birth, however, they had shown to high correlation (P < 0,05) with the pregnancy age and amongst the parameters, the CCC were what it presented greater efficiency. In the experiment of as the chapter two 280 embryos in 24-hour intervals had been monitored, of the 30 to the 60 day of gestation in the sheep and of the 40 to the 60 day in goats, with ultrasound. The average time of migration of the TG in the ovine species (41, 3 ± 3,1 days) was lesser (P < 0.05) that in the goat species (47,2 ± 2,3 days) and in this species, the migration of the TG of the embryos of the race of Saanen was more delayed (P < 0.05) of that in the too much races. Ahead of the results concludes that the fetal sexing in the ovine is precocious of the one than in the goat ones and that the sex of the embryo does not influence in the average time of migration of the TG. In the experiment of the third chapter 280 embryos from 219 females were monitored , being examined goats between Days 40 and 60 and sheeps on Days 30 to 60 of pregnancy, with an ultrasound equipped with linear transducer (6.0 and 8.0 MHz), by transrectal via. Of the visualized plans, longitudinal the ventral was considered most efficient to sex foetus in both the species, a time that are acquired images of the initial period of genital tubercle migration, beyond the visualization of other structures, as umbilical lace, nipples, prepuce, mammary gland and escrotal bag. / Este trabalho, constituído de três capítulos, teve por objetivos estabelecer parâmetros fetométricos que permitam estimar a idade de gestação (IG) e o peso fetal ao nascimento com um ou dois exames ultra-sonográficos, determinar o momento ideal de sexar fetos caprinos e ovinos comparando o período médio de migração do tubérculo genital entre sexo, raça e espécies, avaliar a acurácia da sexagem fetal entre sexos, bem como definir os melhores planos de abordagem ultrasonográfica para sexagem de fetos caprinos e ovinos. No experimento do primeiro capítulo foram monitorados 164 fetos das raças Dorper, Morada Nova e Damara aos 30 e 45 dias de gestação, sendo mensurados o comprimento céfalo-coccígeo (CCC), área do concepto (AC), perímetro do concepto (PC) e volume do concepto (VC) e área da vesícula (AV), perímetro da vesícula (PV) e volume da vesícula (VV). Todas as crias foram pesadas imediatamente após o nascimento. As equações não evidenciaram existência de relação (P > 0,05) entre os parâmetros fetométricos e o peso fetal ao nascimento, todavia, mostraram alta correlação (P < 0,05) com a idade gestacional e dentre os parâmetros, sendo o comprimento céfalo-coccígeo o que apresentou maior eficiência. Baseado nos resultados concluiu-se que aquele ultra-som associado com equações de regressão lineares específicas, pode ser utilizado para determinar a idade gestacional. No experimento do segundo capítulo foram monitorados com ultra-som 317 fetos em intervalos de 24 horas, do 30º ao 60º dias de gestação em ovelhas e do 40º ao 60º dias em cabras, com ultra-som. O tempo médio de migração do TG na espécie ovina (41.3 ± 3.1 dias) foi menor (P < 0.05) que na espécie caprina (47.2 ± 2.3 dias) e nessa espécie, a migração do TG dos fetos da raça de Saanen foi mais tardia (P < 0.05) do que nas demais raças. Diante dos resultados conclui-se que a sexagem fetal nos ovinos é mais precoce do que nos caprinos e que o sexo do feto não influencia no tempo médio de migração do TG. No experimento do terceiro capítulo foram avaliadas imagens ultra-sonográficas de 280 fetos das espécies caprina e ovina submetidos à sexagem fetal entre o 40° e 60º dias em cabras e 30º e 60º dias em ovelhas. Conclui-se que dos planos visualizados, o longitudinal ventral foi considerado o mais eficiente para sexar fetos em ambas as espécies (52.86%), uma vez que são captadas imagens do período inicial de migração de tubérculo genital, além da visualização de outras estruturas, como cordão umbilical, tetas, glândula mamária e prepúcio e bolsa de escrotal. Palavras-chave: ultra-sonografia, fetometria, sexagem, planos ultra-sonográficos.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-25T14:02:10Z No. of bitstreams: 1 ERica Paes Barreto.pdf: 2810391 bytes, checksum: c2a8c78628d4782cffb353f0779d8f36 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-25T14:02:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ERica Paes Barreto.pdf: 2810391 bytes, checksum: c2a8c78628d4782cffb353f0779d8f36 (MD5) Previous issue date: 2010-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The aim of the present study was to evaluate the clinical, epidemiological, parasitological and reproductive aspects of the T. gondii natural and experimental infection in sheep. Firstly, Toxoplasma gondii venereal transmission via experimental infection was studied 41 seronegative sheep divided in three groups: G1, where 15 females were inseminated with semen containing 6.5 X 104 tachyzoites; G2, where 15 females were inseminated with semen containing 4 X 107 tachyzoites; and G3: 11 females inseminated with tachyzoite-free semen. In order to confirm the T. gondii infection via semen, serological tests were performed as well as the DNA of the parasite was detected in the blood using nested PCR at 0, 7, 14, 21, 28, 49,63 and 123 days post-infection (p.i.). In the G1 only 5/15 (33.3%) of the females seroconverted, while in G2 15/15 (100%)seroconverted. Regarding nested PCR analysis, it was observed that 14/15 (93.3%) of the females in the G1 and 14/15 (93.3%) from G2 were positives for T. gondii. On the other hand, in G3 all samples were negative. In addition, the reproductive disturbances were diagnosed using ultrasound and it was observed that in G1,9/15 (60%) presented embryonic reabsorption and 40% kept gestation, showing normal or dystocic delivery, stillborns and uterine atony. In the G2, embryonic reabsorption was present in 15/15 (100%) of the sheep associated with other pathologies such as 2/24 (8.3%) hydrometra, 2/24 (8.3%) mucometra and 2/24(8.3%) follicular cysts. In the G3, 8/11 of females kept gestation and delivered healthy fetuses. Besides, histopathology showed toxoplasmosis-like lesions in placentas as well as nested PCR was positive for all organs from stillborn and placenta examined. In the next step of the study, 24 non-pregnant sheep (G1 and G2) were submitted to controlled mating season and 15/24 (62.5%) got pregnant while 9/24(37.5%) did not. Those who did not get pregnant presented reproductive pathologies such as anestrous (66.6%), follicular cysts (11.1%), hydrometra and mucometra (22.2%). Next, it was investigated the elimination of Toxoplasma gondii in semen from naturally infected males. In this regard, 65 males were submitted to anti-T. gondii antibody screening using Indirect Immunofluorescence (IFI). Animals serologically positive were submitted to semen collection for parasite DNA detection. In the serological test 6/65 (9.2%) of the animals were positive. In the nested PCR using semen 4/6 (66.6%) of the animals were also positive. In the third series of experiments, 245 organs from stillborns and 28 placentas from sheep with reproductive disturbances were evaluated. Following necropsy, brain, cerebellum, spinal cord, lungs, heart, spleen, liver and placenta were harvest for nested PCR and histopathology. Nested PCR confirmed three fetuses and 2 stillborns (14.3%) positive for T. gondii in fetal organs and placenta, where heart and placenta were the most affected ones. Histopathology evidenced macroscopic damage suggesting T. gondii infection in 2/35 (5.7%) of the placentas, and toxoplasmosis-like damage in placentas with non-supurative infiltration, several necrosis focuses associated to tissue cysts. In conclusion, insemination using fresh semen experimentally contaminated with different doses of tachyzoites from T. gondii is capable of infecting sheep and produce reproductive pathologies, compromising the reproductive life of females. The detection of the proliferative form of the parasite in semen from males naturally infected by nested PCR reinforces the need for intensifying studies about the possibility ofhorizontal transmission of the parasite via semen in sheep. In addition, we reported the involvement of T. gondii in aborted fetuses and placentas of sheep naturally infected in Brazil; these data have not been described earlier in the literature. / Objetivou-se com este trabalho, estudar os aspectos clínicos, epidemiológicos, patológicos e reprodutivos da infecção natural e experimental por Toxoplasma gondii em ovinos. No primeiro, estudou-se a transmissão venérea do T. gondii através da infecção experimental via sêmen em 41 ovelhas soronegativas e divididas em três grupos: G1: 15 fêmeas inseminadas com sêmen contaminado com 6,5 X 104 taquizoítos; G2: 15 com 4 X 107 taquizoítos e G3: 11 fêmeas inseminadas com sêmen sem taquizoítos. Para a confirmação da infecção pelo T. gondii foram realizados exames sorológicos e detecção do DNA parasitário no sangue, através do PCR nested aos 0, 7, 14, 21, 28, 49, 63, 123 dias pós infecção (p.i.). No G1 apenas 5/15 (33,3%) fêmeas soroconverteram, enquanto que no G2 15/15 (100%) soroconverteram. Na PCR nested observou-se que 14/15 (93,3%) das fêmeas do G1 e 14/15 (93,3%) do G2 foram positivas para T. gondii e no G3 todas as amostras foram negativas. Os transtornos reprodutivos foram diagnosticados através de exames ultra-sonográficos e observou-se que no G1, 9/15 (60%) apresentaram reabsorção embrionária e 40% delas mantiveram a gestação, observando-se partos normais e distócicos, natimortos e atonia uterina. No G2 observaram-se reabsorções embrionárias em 15/15 (100%) das ovelhas e outras patologias como 2/24 (8,3%) hidrometra, 2/24 (8,3%) mucometra e 2/24(8,3%) cistos foliculares. No G3, 8/11 fêmeas gestaram e pariram fetos viáveis. No exame histopatológico observaram-se lesões características da toxoplasmose em placentas e PCR nested positiva em todos os órgãos dos natimortos e placentas examinados. Em uma próxima etapa do estudo, as 24 ovelhas não gestantes (G1 e G2) foram submetidas à estação de monta controlada e destas 15/24 (62,5%) emprenharam. Aquelas que não emprenharam apresentaram patologias reprodutivas como:anestro (66,6%), cistos foliculares (11,1%), hidrometra e mucometra (22,2%). No segundo experimento pesquisou-se a eliminação de T. gondii no sêmen de reprodutores ovinos naturalmente infectados. Foram utilizados 65 reprodutores submetidos inicialmente à pesquisa de anticorpos anti-T. gondii por meio da técnica de Imunofluorescência Indireta (IFI). Os animais sorologicamente positivos foram submetidos à colheita de sêmen para detecção do DNA parasitário. Na sorologia observaram-se 6/65 (9,2%) animais positivos. No PCR nested de sêmen 4/6 (66,6%) animais foram positivos. No terceiro experimento foram examinados 245 órgãos de fetos abortados e natimortos, além de 28 placentas procedentes de ovelhas com distúrbios reprodutivos. À necropsia foram coletados fragmentos de cérebro, cerebelo, medula, pulmão, coração, baço, fígado e placenta para realização do PCR nested e exame histopatológico. Na PCR nested foram confirmados três fetos e dois natimortos (14,3%) positivos para T. gondii em órgãos fetais e placentas, destacando-se o coração e a placenta como órgão de predileção. No exame histopatológico foram observadas lesões macroscópicas sugestivas da infecção por T. gondii em 2/35 (5,7%) das placentas, além de lesões características da toxoplasmose nas placentas como infiltração não supurativa, múltiplos focos de necrose e mineralização, além da presença de cistos teciduais. A partir dos resultados obtidos, conclui-se que a inseminação utilizando sêmen fresco experimentalmente contaminado com diferentes doses de taquizoítos de T. gondii é capaz de infectar ovelhas e provocar patologias reprodutivas, comprometendo a vida reprodutiva das fêmeas. A detecçãoda forma proliferativa do parasito no sêmen de reprodutores naturalmente infectados por meio da técnica da PCR nested, reforça a necessidade de intensificar os estudos sobre a possibilidade da transmissão horizontal do parasito via sêmen na espécie ovina. Além disso, constatou-se envolvimento de T. gondii em fetos abortados e em placentas de ovinos naturalmente infectados no Brasil; esses dados não haviam sido descritos anteriormente na literatura.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-06T12:44:45Z No. of bitstreams: 1 Ellen Cordeiro Bento Silva.pdf: 751581 bytes, checksum: b7e4f33697071f1105ffa3e9cf312bdc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-06T12:44:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ellen Cordeiro Bento Silva.pdf: 751581 bytes, checksum: b7e4f33697071f1105ffa3e9cf312bdc (MD5) Previous issue date: 2010-02-26 / Aiming to evaluate the effect of adding different cryoprotectants (glycerol, ethylene glycol or acetamide) and antioxidants (resveratrol and quercetin) on in vitro viability of ram thawed semen samples, four adult males, Santa Ines crossbred, were used. After collect semen using an artificial vagina, aliquots of semen were evaluated macroscopic and microscopically and the pool of semen was divided and diluted in Tris-yolk medium, according to experiments and experimental groups. For the Experiment I, which evaluated the cryoprotectants addition, the experimental groups were classified as: G1 = Tris-yolk egg + 5% glycerol, G2 = Tris-yolk egg + 3% ethylene glycol, G3 = Tris-yolk egg + 5% ethylene glycol; G4 = Tris-yolk egg + 2% acetamide, G5 = Tris-yolk egg + 7% acetamide. However, the Experiment II, which were used the antioxidant treatments, was divided in three sub experiments: Exp 1 [resveratrol (0, 5, 10, 15 and 20 μg/mL, respectively, R0, R5, R10, R15 and R20)]; Exp 2 [quercetin (0, 5, 10, 15 and 20 μg/mL, respectively, Q0, Q5, Q10, Q15 and Q20)], and Exp 3 [without antioxidant (RQ0), 10 μg/mL of resveratrol (R10), 5 μg/mL of quercetin (Q5), and 10 μg/mL of resveratrol + 5 μg/mL of quercetin (R10Q5)]. After dilution, aliquots of semen were packed in straws (0.25 mL), frozen (-196 °C) and evaluated after thawing (37 oC/30 seconds) for progressive motility (PM), vigor, plasma membrane integrity (PMi), mitochondrial membrane potential (MMP) and acrosome integrity (ACi). It was found that in Experiment I, G1 showed higher PM (P<0.05) than G3, G4 and G5; vigor was higher (P<0.05) than G4 and G5; and PMi higher (P<0.05) than G2, G3, G4 and G5. However, there was no significant difference (P>0.05) among groups on the MMP and ACi parameters. In Experiment II, there was no difference among groups on the PM, vigor, PMi and ACi. MMP had significant difference (P<0.05) among experimental groups of their three sub experiments. So, in Exp 1, R0 group (36.67±8.01%) was higher than R20 (22.33±6.16%); in Exp 2, Q0 group (36.25±8.12%) was higher (P<0.05) than Q10 (9.33±6.54%), Q15 (6.25±5.98%) and Q20 (5.17±5.08%), and the Q5 (20.58±12.05%) was higher (P<0.05) than Q15 (6.25±5.98%) and Q20(5.17±5.08%) groups; and in Exp 3, RQ0 group (39.00±16.79%) was higher (P<0.05) than Q5 (18.00±13.76%) and R10Q5 (14.42±7.47%) groups. It can be concluded that glycerol (5%) is more effective in protecting ram spermatozoa submitted to deleterious effects of freezing than ethylene glycol (3 and 5%) and acetamide (2 and 7%); the addition of resveratrol and quercetin phenolic antioxidants, alone or in combination, reduces mitochondrial membrane potential of sperm frozen ram; and other studies should be performed to evaluate different concentrations and the effect of the addition on the fertility rate of ewes inseminated artificially. / Objetivando-se avaliar o efeito da adição de diferentes crioprotetores (glicerol, etileno glicol ou acetamida) e antioxidantes (resveratrol – R e quercetina – Q) na viabilidade in vitro de amostras congeladas de sêmen ovino, foram utilizados quatro reprodutores adultos, mestiços da raça Santa Inês. Após colheita com vagina artificial, alíquotas de sêmen foram avaliadas macroscópica e microscopicamente e o pool de sêmen foi subdividido e diluído em Tris-gema, de acordo com os experimentos e grupos experimentais. No Experimento I, no qual foram avaliados os crioprotetores, os grupos experimentais foram classificados como: G1 = Tris-gema + 5% de glicerol; G2 = Tris-gema + 3% de etileno glicol; G3 = Tris-gema + 5% etileno glicol; G4 = Tris-gema + 2% de acetamida; e G5 = Tris-gema + 7% de acetamida. Em contrapartida, o Experimento II, no qual foram utilizados os tratamentos com antioxidantes, foi dividido em três subexperimentos: Exp. 1 [resveratrol (0, 5, 10, 15 e 20 μg/mL, respectivamente, R0, R5, R10, R15 e R20)]; Exp. 2 [quercetina (0, 5, 10, 15 e 20 μg/mL, respectivamente, Q0, Q5, Q10, Q15 e Q20)]; e Exp. 3 [sem antioxidante (RQ0), 10 μg/mL de resveratrol (R10), 5 μg de quercetina/mL (Q5), e 10 μg/mL de resveratrol + 5 μg/mL de quercetina (R10Q5)]. As alíquotas de sêmen, devidamente diluidas, foram então envasadas em palhetas (0,25 mL) e congeladas (-196 oC), sendo avaliadas após descongelação (37 oC/30 segundos) quanto a motilidade progressiva (MP), vigor, integridade de membrana plasmática (iMP), potencial de membrana mitocondrial (PMM) e integridade do acrossoma (iAC). Constatou-se que no Experimento I, o G1 apresentou MP superior (P<0,05) a G3, G4 e G5; vigor superior (P<0,05) a G4 e G5 e iMP superior (P<0,05) a G2, G3, G4 e G5, sem evidenciar diferença significativa (P>0,05) para PMM e iAC. No Experimento II, não se verificou diferença significativa (P>0,05) entre os grupos para os parâmetros MP, vigor, iMP e iAC. O PMM apresentou diferença significativa (P<0,05) entre os grupos experimentais de seus três subexperimentos, de modo que no Exp. 1, o grupo R0 (36,67±8,01%) foi superior ao R20 (22,33±6,16%); no Exp. 2, o grupo Q0 (36,25±8,12%) foi superior (P<0,05) ao Q10 (9,33±6,54%), Q15 (6,25±5,98%) e Q20(5,17±5,08%), assim como o Q5 (20,58±12,05%) foi superior (P<0,05) ao Q15 (6,25±5,98%) e Q20 (5,17±5,08%); e no Exp. 3, o grupo RQ0 (39,00±16,79%) foi superior (P<0,05) ao Q5 (18,00±13,76%) e R10Q5 (14,42±7,47%). Conclui-se que o glicerol (5%) é mais eficaz na proteção dos espermatozoides ovinos submetidos aos efeitos deletérios da congelação do que o etileno glicol (3 e 5%) e a acetamida (2 e 7%), e que a adição dos antioxidantes fenólicos resveratrol e quercetina, isolados ou em associação, reduz o potencial de membrana mitocondrial de espermatozoides ovinos submetidos à congelação, devendo outros estudos serem realizados visando avaliar diferentes concentrações, bem como o efeito da adição na taxa de fertilidade de ovelhas inseminadas artificialmente.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-06T13:30:06Z No. of bitstreams: 1 Erica Paes Barreto Xavier Moraes.pdf: 1264843 bytes, checksum: d90047f80f8b0ca76e8fc19d53fbfa13 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-06T13:30:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erica Paes Barreto Xavier Moraes.pdf: 1264843 bytes, checksum: d90047f80f8b0ca76e8fc19d53fbfa13 (MD5) Previous issue date: 2006-03-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Four experiments have been performed to evaluate the efficiency of ultrasound to detect precocious uterine alterations, pregnancy and sex of the fetus in goat and sheep. The first study determined the incidence of hydrometra and mucometra in Saanen, Alpine American, Boer and Anglo-Nubiana breeds submitted to ultrasound examination to detected early pregnancy using linear (6.0 and 8,0 MHz) and micronconvex (5.0 and 7,5 MHz) transducers. The females that showed uterine liquid or mucus were examined 15 days later to confirm the pathological state and treated with 0.5 mg prostaglandin that did not present estrus. Out of the 143 females examined, 63 (41.9%) were pregnant, 67 (51.6%) were non-pregnant, 11 (6.4%) had hydrometra and 2 (1.6%) had mucometra, corresponding to an incidence of 11%. Moreover, out of the 13 treated females 100% were pregnant. It was concluded that ultrasound is an important tool to detect uterine alterations and that prostaglandin is an efficient treatment for hydrometra and mucometra. The second study tested the viability transrectal linear (6.0 and 8.0 MHz) versus transvaginal micro-convex (5.0 and 7.5 MHz) ultrasound transducers for pregnancy diagnosis in Saint Ines sheep (n = 145). In Group (G) I females (n = 30) were between 15th to 29th days of gestation, in Group II (n = 28) were between 30th to 59th days, in Group III (n = 35) were between 60th to 89th days, in Group IV (n = 32) were between 90th to 139th days and Group V (n = 20) was formed by non-pregnant females. The average time, in seconds, to accomplish the pregnancy diagnosis using either transrectal or transvaginal method was 9.02±5.57 and 11.74±7.06 in GI, 13.90±16.49 and 11.37±12.19 in GII, 56.07±41.21 and 128.33±66.23 in GIII, 5.37±3.40 and 2.69±1.90 in GIV and 14.27±17.60 and 20.35±18.17 in GV, respectively. The transrectal examination was faster (P<0.05) in GI, GIII and GV and slower in GIV and equal (P> 0.05) in GII. It was concluded that pregnancy diagnosis in sheep can be carried out through both methods considering the accessibility, however, the transrectal method was suggested to be faster. In the third study Saint Ines sheep was used to determine the efficiency of ultrasound to evaluate embryonic-fetal development, especially to determine the date of first sign of pregnancy. Sixty pregnant sheep 15th to 45th days of gestation were subjected to ultrasound using a linear transrectal transducer with double frequency (6 and 8 MHz). The identification of earliest and the latest parameters of evaluation were performed between days 15th to 19th (16.7±1.3), day for intra-uterine fluid. The presence of embryonic vesicle was determined between days 16th to 22th (18.6±1.4), day of embryo between 18th to 26th (22.8±1.9), placentoms between days 20th to 29th (25.1±2.0), heartbeat between days 24th to 29th (25.9±1.4), amniotic membrane between days 24th to 32th (27.4±1.8), head and upper body differentiation between days 30th to 37th (33.4±2.2), fetus movement between days 30th to 38th (34.2±2.0), umbilical cord between days 32th to 39th (35.1±1.5), button of the anterior and posterior members between days 34th to 39th (36.7±1.5), ocular globe between days 39th to 43th (40.9±1.2). These results allowed to conclude that the first signs of gestation can be identified as soon as day 15 days of gestation. However, it is wise diagnose pregnancy after day 24 when it is possible to visualize the fetus and the heart beat. In the fourth study the objective was ultrasound during the initial phase of pregnancy to determine embryonic and fetal losses and to identify the sex of the conceptus of Saint Ines sheep. The females (n = 132) were examined in the 30th day to confirm pregnancy and determine embryo viability or loss. The sex or loss of the fetus was determined on days 40th, 50th and 60th using a linear transrectal transducer (6.0 and 8.0 MHz). The sex was identified through the localization of the genital tubercle or the visualization of the external genital. Out of the 160 conceptus examined there was 10.0% (16/160) of losses, being 5.6% (9/160) during embryonic phase and 4.4% (7/160) during the fetal phase, showing no difference (P> 0.05) between both phases. In single gestation there was less conceptus losses 3.9% (73/76) (P< 0.05) which occurred between days 40th and 50th day as well 50th and 60th. One concludes that the ultrasound is an efficient tool to diagnosis early gestation, to monitor embryonic and fetal loss and to identify to the sex Saint Ines of embryos from 50th day of gestation. / Foram conduzidos quatro experimentos para avaliar a eficiência da ultra-sonografia na detecção precoce de alterações uterinas, gestação e constatação do sexo fetal de caprinos e ovinos. No primeiro estudo determinou-se a incidência de hidrometra e mucometra em fêmeas das raças Saanen, Alpina Americana, Boer e Anglo-Nubiana submetidas a exame ultra-sonográfico para diagnosticar precocemente a gestação utilizando-se transdutores linear (6,0 e 8,0 MHz) e micro-convexo (5,0 e 7,5 MHz). As fêmeas com útero contendo líquido ou muco foram novamente examinadas 15 dias depois e, confirmando-se o estado patológico, receberam 0,5 mg de prostaglandina (Dinoprost) que foi repetida 11 dias após naquelas que não mostraram estro. Das 143 fêmeas examinadas, 63 (41,9%) estavam prenhes, 67 (51,6%) não prenhe, 11 (6,4%) com hidrometra e 2 (1,6%) com mucometra, correspondendo a uma incidência de 11% dessas patologias e das 13 fêmeas tratadas 100% apresentaram-se gestantes. Conclui-se que a ultra-sonografia é uma importante ferramenta para detectar alterações uterinas e que a prostaglandina é eficiente no tratamento da hidrometra e mucometra. No segundo testou-se a viabilidade do diagnóstico de gestação em ovelhas Santa Inês (n = 145) pelas vias transretal e transvaginal utilizando, respectivamente, os transdutores linear (6,0 e 8,0 MHz) e micro-convexo (5,0 e 7,5 MHz). No Grupo I, as fêmeas (n = 30) encontravam-se entre o 15º e o 29º dia de gestação, no Grupo II (n = 28) entre o 30º e o 59º dia, no GIII (n = 35) entre o 60º e o 89º dia, no GIV (n = 32) entre o 90º e o 139º e o GV (n = 20) foi formado por fêmeas vazias. O tempo médio, em segundos, para a realização do diagnóstico de gestação, respectivamente, pelas vias transretal e transvaginal foi de 9,02±5,57 e 11,74±7,06 no GI, 13,90±16,49 e 11,37±12,19 no GII, 56,07±41,21 e 128,33±66,23 no GIII, 5,37±3,40 e 2,69±1,90 no GIV e 14,27±17,60 e 20,35±18,17 no GV. O exame transretal foi mais rápido (P < 0,05) no GI, no GIII e no GV, mais lento no GIV e igual (P > 0,05) no GII. Conclui-se que o diagnóstico de gestação em ovelhas pode ser realizado por ambas as vias considerando a acessibilidade, todavia, é sugerida a via transretal quando é considera a rapidez do exame. No terceiro estudo teve-se o objetivo de avaliar ultra-sonograficamente o desenvolvimento embrionário-fetal de ovinos da raça Santa Inês, com o intuito de identificar a data da primeira visualização dos principais parâmetros da gestação. As avaliações ultra-sonográficas foram realizadas com transdutor linear de dupla freqüência (6 e 8 MHz) por via transretal, utilizando-se 60 ovelhas gestantes, entre o 15° e o 45° dia de gestação. A identificação mais precoce e mais tardia dos parâmetros avaliados ocorreu entre o 15º e o 19º (16,7±1,3) dia de gestação para líquido intra-uterino, entre o 16º e o 22º (18,6 ± 1,4) dia para vesícula embrionária, entre o 18° e o 26º (22,8±1,9) dia para embrião, entre o 20º e o 29º (25,1±2,0) dia para placentomas, entre o 24º e o 29º (25,9±1,4) dia para batimento cardíaco, entre o 24º e o 32º (27,4 ± 1,8) dia para membrana amniótica, entre o 30º e o 37º dia (33,4±2,2) para diferenciação entre cabeça e tronco, entre o 30º e o 38º (34,2±2,0) dia para movimento do feto, entre o 32º e o 39º (35,1±1,5) dia para cordão umbilical, entre o 34º e o 39º (36,7±1,5) dia para botão dos membros anteriores e posteriores e entre o 39º e o 43º (40,9±1,2) dia para globo ocular. Os resultados permitem concluir que é possível identificar os primeiros sinais de gestação já no 15º dia, todavia, é prudente que o diagnóstico de gestação somente seja emitido a partir do 24º dia, quando é possível visualizar o embrião e seus batimentos cardíacos No quarto estudo objetivou-se monitorar, ultra-sonograficamente, a fase inicial da gestação para determinar as perdas embrionária e fetal e identificar o sexo dos conceptos de ovelhas Santa Inês. As fêmeas (n = 132) foram examinadas no 30º dia após a cobertura para diagnosticar a gestação, no 35º para confirmar a gestação e observar a viabilidade ou a perda embrionária e no 40º, 50º e 60º dias para avaliar a perda e identificar o sexo dos fetos, utilizando-se um transdutor linear (6,0 e 8,0 MHz) por via transretal. O sexo foi identificado através da localização do tubérculo genital ou da visualização da genitália externa. Dos 160 conceptos monitorados foram registradas 10,0% (16/160) de perdas, sendo 5,6% (9/160) durante a fase embrionária e 4,4% (7/160) na fase fetal, não havendo diferença (P > 0,05) entre ambas as fases. Nas gestações simples, a perda de conceptos, 3,9% (3/76), foi menor (P < 0,05) do que nas múltiplas, 15,5% (13/84). A acurácia da sexagem fetal no 40º dia da gestação foi inferior (P < 0,05) ao do 60º dia, não havendo diferença (P > 0,05) entre o 40º e o 50º dia, bem como entre o 50º e o 60º dia. Conclui-se que a ultra-sonografia é eficaz para diagnosticar precocemente a gestação, monitorar as perdas embrionária e fetal e identificar o sexo de fetos da raça Santa Inês a partir do 50º dia de gestação.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-07T14:12:03Z No. of bitstreams: 1 Filipe Queiros Gondim Bezerra.pdf: 680484 bytes, checksum: 8941d5bb069bfda96fd37c2db5f99b53 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-07T14:12:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Filipe Queiros Gondim Bezerra.pdf: 680484 bytes, checksum: 8941d5bb069bfda96fd37c2db5f99b53 (MD5) Previous issue date: 2010-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study aimed to determine the effect of seasons on nuclear maturation in vitro and inductions of cell death by apoptosis in sheep oocytes as well as the effect on the ability of develop from oocytes in vitro sheep embryos. The ewes ovaries during the dry season (October to March) and rainy season (April-September) were collected in a slaughterhouse and transported to the Laboratory of Biotechnical Reproduction of UFRPE. The cumulus oophorus complexes (COCs) were collected by the technique of "slicing" of the follicles from 2 to 6 mm in diameter and selected based on morphology. In this stage were performed 12 repetitions, where the COCs were subjected to maturation, and in vitro fertilization. The percentage of cleaved oocytes was determined on day 3 (D-3) and the oocytes that developed to the stages of 8-16 cells (D-4), morula (D-5) and blastocyst (D-8) after fertilization. The blastocysts quality was assessed with the pigment DAPI and the determination of blastomeres positive for apoptosis and DNA fragmentation by TUNEL test. It was found significant difference (P <0.05) during D-3 and D-4 fertilization stages. No significant difference (P>0.05) was observed on morula and blastocyst in vitro maturation phases and DNA fragmentation (TUNEL). In the stage 25 oocytes were placed in maturity basic medium (MBM). After maturation, we determined the stage of maturity with the nuclear dye DAPI, the enzyme activity of group II caspases with reagent PhiPhiLux-G1D2 and DNA fragmentation (TUNEL). In the stages of nuclear maturation stages of germinal vesicle, metaphase I, telophase I and metaphase II showed no significant difference (P> 0.05). Significant difference (P <0.05) in enzyme activity of caspases in vitro matured oocytes. The DNA fragmentation was not significantly different (P> 0.05). Under the conditions observed in this study, the results indicate that there was no effect of season on in vitro nuclear maturation and apoptosis of oocytes as well as on the development of oocytes and in vitro production of sheep embryos. / Este estudo teve como objetivo determinar o efeito das estações do ano na maturação nuclear in vitro e na indução da morte celular por apoptose em oócitos ovino também como o efeito na capacidade de desenvolvimento de oócitos na produção in vitro de embriões da espécie ovina. Os ovários de ovelhas na estação seca (outubro a março) e chuvosa (abril a setembro) foram colhidos em abatedouro e transportados ao Laboratório de Biotécnicas da Reprodução da UFRPE. Os complexos cumulus oophorus (CCOs) foram colhidos pela técnica de “slicing” dos folículos entre 2 a 6 mm de diâmetro e selecionados com base na morfologia. Nesta etapa foram realizadas 12 repetições, onde os CCOs foram submetidos a maturação, fertilização e cultivo in vitro. A porcentagem de oócitos clivados foi determinada no dia 3 (D-3) e os oócitos que se desenvolveram aos estádios de 8-16 células (D-4), mórula (D-5) e blastocisto (D-8) após a fecundação. A qualidade dos blastocistos foi avaliada com o corante DAPI e a determinação deblastômeros positivos para apoptose e fragmentação de DNA através do teste de TUNEL. Foi encontrada diferença significativa (P < 0,05) nas fases fertilização, D-3 e D-4. Não apresentaram diferença significativa (P > 0,05) às fases de maturação in vitro, mórula e blastocisto e na fragmentação de DNA (TUNEL). Em outra etapa 25 oócitos foram colocados em meio básico de maturação (MBM). Após a maturação, foi determinado o estádio de maturação nuclear com o corante DAPI, a atividade das enzimas Caspases do grupo II com reagente PhiPhiLux-G1D2 e fragmentação de DNA (TUNEL). Nos estádios de maturação nuclear as fases de Vesícula Germinativa, Metáfase I, Telófase I e Metáfase II não apresentaram diferença significativa (P > 0,05). Foi encontrada diferença significativa (P < 0,05) na atividade das enzimas Caspases dos oócitos maturados in vitro. A fragmentação do DNA não apresentou diferença significativa (P > 0,05). Nas condições observadas neste estudo, os resultados permitem concluir que não houve efeito da estação do ano na maturação nuclear in vitro e na apoptose de oócitos também como na capacidade de desenvolvimento de oócitos e na produção in vitro de embriões da espécie ovina.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-10T15:34:59Z No. of bitstreams: 1 Glenda Monica Luna de HolandA.pdf: 444206 bytes, checksum: d1d34c55bd78ea1a03a288bdfe9bda63 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-10T15:34:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Glenda Monica Luna de HolandA.pdf: 444206 bytes, checksum: d1d34c55bd78ea1a03a288bdfe9bda63 (MD5) Previous issue date: 2009-02-27 / Identifying genes that influence sheep prolificity opens up a promising research path; when added to other measures, this procedure may result in greater productivity and allow the investigation of other factors involved in the follicular dynamics of these animals. The aim of the present study was to search for Booroola (FecB) and Galway (FecXG) mutations using the PCR-RFLP technique on sheep of the “Santa Inês” and “Morada Nova” breeds with a history of prolificity. Among the “Santa Inês” breed, 393 females with a history of single offspring per delivery and 181 with two or more offspring per birth were analyzed, along with 23 males and 282 females of the “Morada Nova” breed (170 with one offspring per birth and 112 with two or more offspring). Blood collected through a jugular puncture was used to obtain leukocytes and extract DNA using the phenol-chloroform technique. Genes of interest for studying FecB and FecXG mutations were amplified from specific primers submitted to the action of Ava II and Hinf I endonucleases, respectively.Analysis of the fragments obtained in agarose gel revealed the existence of the FecB gene in 1.04% of “Santa Inês” breed females with a history of two or more offspring per birth and was not found in “Morada Nova” females. FecXG mutation was not found in any of the animals studied. It was concluded that FecB mutations, although present in “Santa Inês” females, are of low frequency and therefore not a good tool for selecting prolific sheep. Moreover, the prolificity observed among the “Santa Inês” and “Morada Nova” breeds is not related to FecB or FecXG mutations. / A identificação de genes que influenciam na prolificidade de ovinos proporciona a abertura de um caminho promissor para a pesquisa; este, quando somado a outras medidas, poderá resultar ganho em produtividade e possibilitar a investigação de outros fatores envolvidos na dinâmica folicular dessa espécie. Este estudo objetivou pesquisar a existência de mutações Booroola (FecB) e Galway (FecXG) através da técnica PCR-RFLP, em ovelhas das raças Morada Nova e Santa Inês, com histórico de prolificidade. Da raça Santa Inês, foram analisadas 393 fêmeas com histórico de uma cria por parto e 181 com duas ou mais crias por parto além de 23 machos. Outras 282 fêmeas foram da raça Morada Nova, das quais, 170 constituíram o grupo de uma cria por parto e outras 112 fêmeas compuseram o grupo de duas ou mais crias por parto. O sangue coletado através de punção da jugular foi usado para obtenção dos leucócitos e extração do DNA pela técnica fenol-clorofórmio. Os genes de interesse para estudo das mutações FecB e FecXG foram amplificados a partir de primersespecíficos e submetidos à ação das endonucleases Ava II e Hinf I, respectivamente. A análise dos fragmentos obtidos em gel de agarose revelou a existência do gene FecB em 1,04% das fêmeas da raça Santa Inês com histórico de duas, ou mais, crias por parto, não sendo observado nas fêmeas Morada Nova. A mutação FecXG não foi observada em nenhum dos animais estudados. Conclui-se que a mutação FecB, embora presente em fêmeas Santa Inês, está em baixa freqüência e não é uma boa ferramenta para seleção de ovelhas prolíficas; ademais, a prolificidade observada nas raças Santa Inês e Morada Nova não está relacionada com as mutações FecB ou FecXG.