Made available in DSpace on 2014-08-20T14:38:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_thomas_normanton_guim.pdf: 4396202 bytes, checksum: f6b683245c353d6dd0119b22f2ffba98 (MD5) Previous issue date: 2011-02-11 / The mammary neoplasms are tumors that most affect bitches and represent a problem of great impact in veterinary medicine. Malignant tumors are associated to high mortality due to tumor recurrence or metastasis. This study aimed to evaluate prognostic factors of low cost and easy to perform diagnostic routines, capable of predicting the biological behavior of these tumors. The samples were collected from 114 bitches submitted surgical excision of mammary neoplasms from 2004 to 2008. The patients followed over a period of two years after therapy. This study did not include animals that had distant metastasis at diagnosis. Information regarding to ovariohysterectomy concurrent with the removal of the neoplasm, recurrences, time of observation of the tumor, age and weight of the animals were obtained through standard protocols for submission of tumors. The samples were fixed in 10% formalin, measured, the margins of interest identified with India ink and were systematically cleaved allowing full evaluation of the specimen. Histological sections were stained with hematoxylin-eosin and evaluated under light microscopy. The dependent variables evaluated were: histologic type, histologic grading, histological stage, invasion to adjacent tissues, neoplastic emboli in blood or lymphatic vessels, mitotic index and status of surgical margins. The variables were compared among themselves and with the survival time of postoperative animals. Survival evaluation was used log-rank test and evaluation of the variables between them was used Kruskall-Wallis. The results were presented by estimating survival curves using the Kaplan-Maier method. The values were statistically significant when p<0.05. The following variables were significantly associated with survival: age at diagnosis (p=0.004), size of tumor (p<0.000), histological type, histological grade (p=0.000), histological stage (p<0.000), invasion to adjacent tissues (p=0.033), presence of neoplastic emboli in blood or lymphatic vessels (p=0.000), mitotic index (p=0.006) and recurrence (p=0.034). Sized animals (p=0.591), ovariohysterectomy concurrent surgical excision (p=0.74), time observation of the tumor (p=0.3) and surgical margin status (p=0.369) showed no prognostic significance. Additionally, there was significant statistical correlation between the following variables: size of tumor with histological grade (p<0.000), histological stage (p=0.008) and mitotic index (p=0.002); histological grading with histological type and histological stage (both P<0.000); and histological stage with histological type and mitotic index (both p<0.000). The variables significantly associated with survival were helpful in determining the prognosis of the animals. There was an increase of characteristics that indicate malignancy with increasing the size of tumors. The evaluated factors are inexpensive and can be done relatively quickly. They should be used routinely by veterinary pathologists, can help clinicians and surgeons in therapeutic decisions for carrier animals. / Os neoplasmas mamários são os tumores que mais acometem as cadelas e representam um problema de grande impacto em medicina veterinária, uma vez que, quando malignos, implicam em alto índice de mortalidade, devido à recorrência tumoral ou metástases. O presente trabalho teve como objetivo avaliar fatores prognósticos de baixo custo e fácil realização na rotina diagnóstica, capazes de predizer o comportamento biológico desses tumores. As amostras foram coletadas de 114 cadelas submetidas à exérese cirúrgica de neoplasmas mamários no período de 2004 a 2008, acompanhadas durante um período de dois anos após a terapia. Não foram incluídos neste estudo animais que apresentavam metástases distantes no momento do diagnóstico. Informações relativas à realização de ovariohisterectomia concomitante à remoção do neoplasma, ocorrência de recidiva, tempo de evolução do tumor, idade e porte dos animais foram obtidas através de fichas padrão de encaminhamento de tumores. As amostras após fixadas em formol a 10% foram mensuradas, tiveram suas margens de interesse identificadas com tinta nanquim e foram clivadas sistematicamente de forma que a peça cirúrgica fosse avaliada de forma completa. Cortes histológicos foram obtidos, corados com hematoxilina-eosina e avaliados em microscopia de luz. Os parâmetros avaliados foram: tipo histológico, graduação histológica, estágio histológico, invasão para tecidos adjacentes, presença de êmbolos neoplásicos em vasos sanguíneos ou linfáticos, índice mitótico e status das margens cirúrgicas. As variáveis avaliadas foram comparadas entre si e com o tempo de sobrevida pós-cirúrgica dos animais. Para avaliação da sobrevida foi utilizado teste de log-rank e para avaliação das variáveis entre si foi utilizado teste de Kruskall- Wallis. Os resultados foram apresentados através de curvas de estimativa de sobrevida de Kaplan-Maier. Os valores foram estatisticamente significativos quando p<0,05. As seguintes variáveis foram significativamente associadas com sobrevida: idade no momento do diagnóstico (p=0,004), tamanho do neoplasma (p<0,000), tipo histológico, graduação histológica (p=0,000), estágio histológico (p<0,000), invasão para tecidos adjacentes (p=0,033), presença de êmbolos neoplásicos em vasos sanguíneos ou linfáticos (p=0,000), índice mitótico (p=0,006) e recidiva ou ocorrência de novos tumores (p=0,034). Porte dos animais (p=0,591), realização de ovariohisterectomia concomitante a exérese cirúrgica (p=0,74), tempo de evolução tumoral (p=0,3) e status das margens cirúrgicas (p=0,369) não apresentaram significância prognóstica. Adicionalmente, houve correlação estatística significativa entre as seguintes variáveis: tamanho do neoplasma com graduação histológica (p<0,000), estágio histológico (p=0,008) e índice mitótico (p=0,002); graduação histológica com tipo e estágio histológico (ambos p<0,000); e estágio histológico com tipo histológico e índice mitótico (ambos p<0,000). As variáveis estudadas associadas significativamente com sobrevida pós-cirúrgica foram úteis na determinação do prognóstico dos animais. Houve um aumento de características que indicam malignidade conforme aumenta o tamanho dos neoplasmas. Os fatores avaliados possuem baixo custo e podem ser realizados com relativa rapidez, devendo ser empregados de forma rotineira por patologistas veterinários, auxiliando clínicos e cirurgiões nas decisões terapêuticas para os animais portadores.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:38:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_diane_bender_schiavon.pdf: 500386 bytes, checksum: 48fa2cd250b94f5f938cb28a34fe2107 (MD5) Previous issue date: 2011-02-24 / Bovine Mastitis is a disease that causes high damage to milk production. Phytotherapy is the basis of Tagetes minuta L. can be used for disease control agroecological production units. The study aimed to evaluate application of antiseptics from medicinal plant from the postmilking teat disinfection. The treatments consisted of commercial iodine with treatment 1, used as teat pos-dipping on the right side, and hydro alcoholic extract from leaves of Tagetes minuta and macerated seeds Linum usitatissimum L., both at 10%, used on teats left as pos-dipping, cows in a commercial production unit that had, in average of 60 milking animals during the experiment that lasted 12 weeks. The prevalence of subclinical mastitis was evaluated using the CMT test once a week. Test mug of dark background was done at all milking. Sample of milk from all quarters was collected weekly for the isolation and characterization of present microorganisms . The incidence of new intramammary infections was calculated using the number of infection-free days by quarters, counted by weekly analysis of milk from all quarters in blood agar culture, as the denominator and the number of new cases as the numerator, defined as culture positive by Staphylococcus spp. or Streptococcus spp. in Sampling of milk per room. The index was corrected to 1000 / 4 days. Exclusion criteria: infection with Streptococcus spp or Staphylococcus spp in early labor and up to two weeks after a collection microbiologically positive. Animals with two successive collections negative after a positive were considered cured and reintroduced in the counting of days without infection. The chi-square test was used to compare the frequency of events between treatments. The CMT's weekly prevalence ranged in group 1 between 29.5% and 17.1%, and group 2 from 29.7% to 19.6%, not significantly different in any of weeks. The incidence of positive cultures for Staphylococcus / Streptococcus was 3.93 and 6.96 / 1000 / 4 / day for Groups 1 and 2 respectively, p = 0.057. There were four cases of mastitis clinic during the experiment, two in each treatment. We concluded the use of plant extracts for the disinfection of teats pos-dipping can be useful systems for milk production agro ecological. / Mastite bovina é a doença que causa os maiores prejuízos na produção leiteira. A fitoterapia a base de Tagetes minuta pode ser utilizada para controle da enfermidade em unidades de produção agroecológicas. O trabalho objetivou avaliar a aplicação de anti-sépticos obtidos de planta medicinal na desinfecção de tetos pós-ordenha. Os tratamentos consistiram em iodo comercial como tratamento 1, utilizado como pós-dipping nos tetos do lado direito, e extrato hidroalcoolico de folhas de Tagetes minuta L. e macerado de sementes de Linum usitatissimum L., ambos à 10%, utilizados nos tetos esquerdos como pos-dipping de vacas em uma unidade de produção comercial que possuía, em média, 60 animais em ordenha durante o experimento que teve duração de 12 semanas. A prevalência de mastite sub-clínica foi avaliada utilizando o teste de CMT uma vez por semana. Teste da caneca de fundo escuro foi realizado em todas as ordenhas. Amostra de leite de todos os quartos foi coletada semanalmente para isolamento e caracterização dos microrganismos presentes. A incidência de novas infecções intra-mamárias foi calculada utilizando o número de dias livres de infecção por quarto, contados pela análise semanal de leite de todos os quartos em cultura de Agar sangue, como denominador, e o número de casos novos como numerador, definido como cultura positiva para Staphylococcus spp. ou Streptococcus spp. na amostragem do leite por quarto. O índice foi corrigido para 1000 quartos dia. Foram critérios de exclusão: infecção por Streptococcus spp ou Staphylococcus spp no início do trabalho e até duas semanas após uma coleta microbiologicamente positiva. Animais com duas coletas sucessivas negativas após uma positiva foram considerados curados e reintroduzidos na contagem de dias sem infecção. O teste do qui-quadrado foi utilizado para comparação das frequências dos eventos entre os tratamentos. A prevalência semanal do CMT variou no grupo 1 entre 29,5% e 17,1%, e no grupo 2 de 29,7% a 19,6%, não diferindo significativamente em nenhuma das semanas. A incidência de cultura positiva para Staphylococcus/Streptococcus foi de 3,93 e 6,96/1000 quartos/dia para os grupos 1 e 2 respectivamente, com p=0,057. Houve quatro casos de mastite clínica durante o experimento, dois em cada tratamento. Concluímos que o uso de extratos de plantas na desinfecção de tetos pós-ordenha pode ser útil aos sistemas de produção de leite agroecológico.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2016-09-14T12:35:40Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_anna_chaffe.pdf: 1013600 bytes, checksum: c74b0933541fa24344b4f7bfa852c454 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-09-14T17:58:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_anna_chaffe.pdf: 1013600 bytes, checksum: c74b0933541fa24344b4f7bfa852c454 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-14T17:58:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_anna_chaffe.pdf: 1013600 bytes, checksum: c74b0933541fa24344b4f7bfa852c454 (MD5) Previous issue date: 2014-05-29 / Sem bolsa / Staphylococcus spp é uma bactéria gram positiva ubíquo na natureza, freqüentemente presente na pele e mucosas de animais, inclusive nos seres humanos. Esse gênero está envolvido numa série de enfermidades localizadas, como infecções de feridas cutâneas ou mais profundas, mastite, otite externa e média; e em enfermidades sistêmicas, neste caso, fortemente relacionadas a procedimentos invasivos, tanto em medicina humana como veterinária. O objetivo deste trabalho foi avaliar a importância de Staphylococcus coagulase positivo meticilina resistente (MRSA) em cães hígidos domiciliados e não-domiciliados (mucosa nasal e anal), cães com enfermidades de pele (dermatite) e otite (local enfermo), leite de quartos bovinos mastísticos, estudantes do Curso de Medicina Veterinária - UFPel (mucosa nasal) e trabalhadores em saúde animal (mucosa nasal), bem como prospecção de plantas medicinais como alternativas de controle. Foram coletadas amostras de cães hígidos domiciliados com proprietário (n ≥ 83) e cães hígidos não domiciliados (n ≥ 83), estes últimos recolhidos ao módulo canil do Centro de Controle de Zoonoses da Prefeitura Municipal de Pelotas, RS. Cães com enfermidades de pele ou otite (n > 50) foram angariados junto a clinicas particulares e nos serviços de atendimento do Hospital Veterinário (HCV) da Faculdade de Veterinária - UFPel. Estudantes de veterinária do curso de Medicina Veterinária da UFPel (n = 83) e trabalhadores em saúde animal (nº não inferior a 50) foram convidados a participar do projeto. Amostras de leite de quartos bovinos mastísticos (n > 500) foram obtidas da rotina de trabalho do Laboratório de Doenças Infecciosas e de produtores da região sul do Rio Grande do Sul. Foi avaliada a atividade “in vitro” de extratos hidralcoólicos de 5 plantas com indicativo etnográfico, como carqueja (Baccharis trimera), capim-limão (Andropogon ceriferus), jambolão (Syzygium cumini), aroeira (Schinus terebinthifolius raddi), chinchilho (Tagetes minuta L.), frente a 9 cepas de Staphylococcus coagulase positivo meticilina resistente (MRSA), nas quais foram testadas através de uma triagem, com posterior cálculo da Concentração Inibitória Mínima (CIM) realizado pelo método de diluição em micro placa (Schuch, 2007). Os procedimentos laboratoriais foram executados no Laboratório de Doenças Infecciosas da Faculdade de Veterinária UFPel. Os resultados indicaram que amostras isoladas de cães hígidos domiciliados e não domiciliados apresentam S. coagulase positiva sendo que as amostras de cães não domiciliados apresentaram maior freqüência de Staphylococcus spp. (80%), S. coagulase positiva (44,3%) e S. meticilina resistente (MRSA) (10,3%), comparada às amostras de cães domiciliados. Os cães na faixa de um a seis anos apresentaram-se em maior número, sendo 107 amostras isoladas em relação às outras faixas de idade (n=192). Os cães de porte médio (n = 93) apresentaram maior percentual de S. coagulase positiva e resistência a meticilina. Não houve diferença significativa em relação ao sexo dos animais. Nas amostras isoladas de cães com otite (n = 53) / dermatite (n = 9) observa-se uma maior freqüência para Staphylococcus coagulase positiva e resistência a meticilina nas amostras coletadas de cães com otite. Foram também avaliadas as amostras S. coagulase positivas resistentes em relação à idade, porte, sexo, pelagem e espécies encontradas. Em amostras de leite de bovinos com mastite (n = 497) observou-se um percentual de 32,8% de amostras isoladas S. coagulase positiva e 9,7% S. coagulase positivas meticilina resistentes (MRSA). Em 83 amostras nasais de alunos da graduação da Faculdade de Veterinária a maior representatividade de amostras S. coagulase positiva e S. coagulase positiva meticilina resistente ocorreu em alunos que estavam acima do 7° semestre, em relação ao total de amostras positivas para Staphylococcus spp (n=66) representando 20% de S. coagulase positiva resistência à meticilina. Dos 60 trabalhadores, 9% (n=43) eram do sexo feminino onde 7% (n=28) eram veterinários e 20% (n=5) serventes com amostras nasais coagulase positiva resistente à meticilina. Entre todas as amostras de Staphylococcus coagulase positiva, ocorreu uma maior frequência de Staphylococcus pseudointermedius, fazendo parte da normalidade da microflora cutânea, em particular as mucosas como nariz, boca e ânus. / Staphylococcus spp is a ubiquitous gram positive bacteria in nature, often present in the skin and mucosa of animals, including humans. This genre is involved in a number of localized diseases such as skin infections or deeper wounds, mastitis, otitis externa and media; and systemic diseases, in this case closely related invasive procedures, both in human and veterinary medicine. The objective of this study was to evaluate the importance of methicillin resistant Staphylococcus coagulase positive (MRSA) in healthy dogs domiciled and non- domiciled (nasal and anal mucosa, dogs with skin diseases (dermatitis) and otitis (patient site), milk room cattle with mastitis, students from Veterinary Medicine College - UFPel (nasal mucosa) and in animal health workers (nasal mucosa), as well as exploration of medicinal plants as alternative control. Were sampled healthy dogs domiciled with the owner (n≥83) and healthy dogs not domiciled (n≥83), these last ones carried to the module Kennel Center for Zoonosis Control of the City of Pelotas, RS. Dogs with skin diseases or otitis (n>50) were raised from the private clinics and Clinic Veterinary Hospital (CVH), from Veterinary College services – UFPel. Students from Veterinary Medicine - UFPel (n=83) and workers in animal health (number not less than 50) were invited to participate of research. Milk samples from the forth cattle with mastitis (n>500) were obtained from the routine work of the Infectious Diseases Lab and producers from southern Rio Grande do Sul to "in vitro" activity wateralcoholic extracts of 5 plants was evaluated ethnographic indicative as gorse (Baccharis trimera),lemongrass(Andropogon ceriferus),jambolan(Syzygium cumini), mastic (Schinus terebinthifolius raddi), Chinchilho (Tagetes minuta L.) against to 9 strains of Staphylococcus coagulase positive methicillin resistant (MRSA) which were tested through screening, with subsequent calculation of the minimum inhibitory concentration (MIC ) performed by microplate dilution method (Schuch, 2007). Laboratory procedures were performed in the Infectious Diseases Lab, Veterinary College, UFPel. The results indicated that the samples from isolates of healthy dogs and not domiciled resident and resident dogs had a higher frequency of Staphylococcus spp (80 %), S. coagulase positive (44.3 %) and methicillin - resistant S. (MRSA) (10.3%) compared samples of pet dogs . Dogs in the range of 1 to 6 years showed up in greater numbers, being 107 samples isolated over other age groups (n=192).The medium-sized dogs (n = 93) showed a higher percentage of coagulase-positive S. and resistance to methicillin. There was no significant difference regarding to the sex of the animals. In isolates from dogs with otitis (n=53)/dermatitis (n=9) observed a higher frequency for Staphylococcus coagulase positive and methicillin resistance in the samples collected from dogs with otitis. We also rated the samples S. resistant coagulase positive in relation to age, size, sex, pelage and located species. In milk samples coming from cattle with mastitis (n=497) was observed a percentage of 32.8 % of isolated S. coagulase positive samples and 9.7 % S. Methicillin Resistant Coagulase Positive (MRSA). In 83 nasal samples from undergraduate students, Veterinary College, the most representative samples of S. coagulase positive and coagulase-positive methicillin resistant S. occurred in students 9 who were above the 7th semester in relation to total samples positive for Staphylococcus spp (n = 66) representing 20 % of coagulase-positive S. methicillin resistance. Among the 60 workers, 9 % (n=43) were female, where 7 % (n=28) were veterinarians, 20 % (n=5) servants with methicillin resistant coagulase positive nasal sample. Among all the samples of coagulase positive, were observed with most frequence Staphylococcus pseudointermedius, belonging to the usual microflora of the skin and mucous membranes, especially the nose, mouth and anus.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2016-09-15T16:50:29Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_mario_coppola.pdf: 733232 bytes, checksum: aefd4ed8b53d5285cb8c54b6894c3fc1 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-09-15T19:51:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_mario_coppola.pdf: 733232 bytes, checksum: aefd4ed8b53d5285cb8c54b6894c3fc1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-15T19:51:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_mario_coppola.pdf: 733232 bytes, checksum: aefd4ed8b53d5285cb8c54b6894c3fc1 (MD5) Previous issue date: 2014-04-04 / Sem bolsa / A mastite bovina é uma doença importante dos rebanhos leiteiros por trazer prejuízos à sanidade e produção. Os objetivos desse estudo foram isolar Staphylococcus de amostras de leite de casos de mastite bovina clínica e subclínica no Rio Grande do Sul, confirmar a presença de S. aureus através da amplificação do gene nuc por PCR, identificar os genes das EEs A, B e D e os grupos agr I-IV e a relação entre os genes dos grupos agr e de EEs. Duzentas e sessenta e seis amostras de leite foram analisadas, sendo 218 provenientes de vacas com mastite subclínica e 48 de casos clínicos. Bactérias do gênero Staphylococcus foram isoladas em 88 amostras. A identificação por PCR confirmou 58 amostras como S. aureus, o que correspondeu a 21,7% do total de amostras, 25 foram classificadas como Staphylococcus coagulase negativa (SCN) e 5 como coagulase positiva. Nas amostras de leite originárias de vacas com mastite subclínica e nos casos clínicos o isolamento de S. aureus foi superior aos SCN e Staphylococcus coagulase positiva. S. aureus foi isolado em maior número de rebanhos, comparado aos SCN e Staphylococcus coagulase positiva. Esses 58 isolados de S. aureus juntamente com outros 32 isolados de casos de mastite bovina no Rio Grande do Sul pertencentes ao banco de isolados do Laboratório de Bacteriologia do IPVDF, num total de 90 isolados foram testados por PCR para a presença de genes dos grupos agr I-IV e das EEs A, B e D. O gene agr mais frequente foi agr-III, seguido por agr-I. Quanto à distribuição por rebanhos, foi identificada maior ocorrência do gene agr-III. O gene de EEs mais encontrado foi sea e quanto à relação entre gene de EEs e agr, foi observada associação significativa entre a presença de sea e agr-I. / Bovine mastitis is an important disease of dairy cattle, which affects sanity and production. The objectives of this study were to isolate Staphylococcus on milk samples from subclinical and clinical cases in the Rio Grande do Sul state, to confirm the presence of S. aureus through amplification of the nuc gene by PCR, to identify the occurrence of enterotoxin (SE) genes A, B e D and agr I-IV groups in S. aureus and the relationship among agr genes and SEs. Two hundred sixty six milk samples were analyzed, 218 from cows with subclinical mastitis and 48 from clinical cases. The Staphylococcus genus was identified in 88 samples. The PCR identification confirmed 58 samples as S. aureus which corresponded to 21,7% of all samples, 25 were classified as CNS and 5 as coagulase positive In milk samples from cows with subclinical mastitis and clinical cases, the isolation of S. aureus was superior to CNS and coagulase positive Staphylococcus. S. aureus was isolated on most herds compared to CNS and coagulase positive Staphylococcus. This 58 isolates of S. aureus with others 32 isolates of bovine mastitis cases from Bacteriology Laboratory of IPVDF, were tested through PCR to presence of agr-I-IV groups and SEs A, B e D genes. The most frequent agr gene was agr-III, followed by agr-I. On herds, the most occurrence gene was agr-III. The most frequent SEs gene found was sea and as for the relationship among SEs genes and agr genes, occurred association for sea and agr-I.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-03-28T16:35:14Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Leticia_Fiss_Resumo.pdf: 132018 bytes, checksum: bf6cc9a5c580e6d6228123ddca70c8d1 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-03-28T21:01:19Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Leticia_Fiss_Resumo.pdf: 132018 bytes, checksum: bf6cc9a5c580e6d6228123ddca70c8d1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-28T21:01:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Leticia_Fiss_Resumo.pdf: 132018 bytes, checksum: bf6cc9a5c580e6d6228123ddca70c8d1 (MD5) Previous issue date: 2015-09-30 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Esta tese relata um surto de paratuberculose diagnosticado em bovinos de corte em uma propriedade na região Sul do Rio Grande do Sul. Foram descritos os aspectos epidemiológicos e clínico-patológicos da doença. Os animais eram criados extensivamente e apresentaram quadro de emagrecimento progressivo e diarreia crônica. O diagnóstico foi realizado pelas lesões macroscópicas e pela histopatologia. Fragmentos dos órgãos foram fixados em formalina 10%, incluídos em parafina, cortados com 5 μm de espessura e corados pela técnica de hematoxilina e eosina (HE) e Ziehl-Neelsen (ZN). Fezes foram encaminhadas ao Departamento de Medicina Veterinária, Área de Medicina Veterinária Preventiva da Universidade Federal Rural de Pernambuco para o cultivo de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis em meio Löwenstein Jensen com micobactina e para realização da PCR. Histologicamente havia enterite granulomatosa principalmente no dudeno, jejuno, íleo, ceco, colon e reto. Havia, ainda, linfangite e linfaadenite granulomatosa. Pela coloração de ZN foram observados numerosos bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR) no interior de macrófagos, células gigantes de Langhans e nos linfonodos mesentéricos no duodeno, jejuno, íleo ceco e reto. Não houve crescimento bacteriano nas amostras de fezes e cinco amostras amplificaram a sequência genética IS900 específica do Mycobacterium avium subesp. paratuberculosis. Concluiu-se que a paratuberculose ocorre, também, em bovinos de corte criados extensivamente no sul do Rio Grande do Sul e pode ter uma prevalência maior do que se supõe na região, sendo necessárias medidas efetivas de controle desta doença que, por vezes, ainda é considerada exótica no Brasil. Por ser uma doença ainda pouco diagnosticada e pouco conhecida na região e que apresenta sinais clínicos inespecíficos, um segundo trabalho foi realizado visando determinar as principais doenças que ocorrem na região Sul do Rio Grande do Sul, que cursam com diarreia e afetam bovinos de corte maiores de dois anos de idade. Para isso realizou-se um levantamento nos arquivos do Laboratório Regional de Diagnóstico identificando-se os protocolos de necropsia nos quais era mencionada a diarreia como um sinal clínico relevante. Observou-se que as causas de diarreia em bovinos com dois anos ou mais de idade são poucas e bem conhecidas na região, sendo de fácil diagnóstico. Destaca-se a intoxicação por Senecio spp., em bovinos maiores de três anos, que causa prejuízos econômicos relevantes devido a sua ampla distribuição na região do estudo e ao seu difícil controle. Com relação aos bovinos entre dois e três anos as parasitoses de modo geral foram as mais importantes causas de diarreia representando 70% dos casos. / This thesis reports an outbreak of paratuberculosis diagnosed in beef cattle at a farm in the southern region of Rio Grande do Sul.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-03-29T14:40:38Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Paula_ Finger.pdf: 1449446 bytes, checksum: 187acc2c0bf320c4c451486502eed5f2 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-04-05T17:52:50Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese_Paula_ Finger.pdf: 1449446 bytes, checksum: 187acc2c0bf320c4c451486502eed5f2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-05T17:52:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese_Paula_ Finger.pdf: 1449446 bytes, checksum: 187acc2c0bf320c4c451486502eed5f2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-12-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A bronquite infecciosa das galinhas (BIG) é uma enfermidade viral altamente contagiosa que causa predominantemente lesões respiratórias que se manifestam clinicamente por espirros e estertores tráqueo-bronquiolares, podendo levar a sinais mais severos, com diminuição na fertilidade e redução da produção de ovos. O vírus da bronquite infecciosa das galinhas (IBV) codifica quatro proteínas estruturais, sendo a nucleoproteína uma das mais importantes na geração de resposta imune das aves, sendo também a mais abundante e, ainda, se caracteriza por possuir a sequência de aminoácidos bem conservada. A vacinação é a principal forma de controle da enfermidade, porém surtos da doença ainda ocorrem com frequência, causando grandes prejuízos na avicultura. Em vista disso, o objetivo deste trabalho foi produzir imunobiológicos que possam contribuir no monitoramento sorológico das aves. Para tanto, a proteína N foi expressa em Escherichia coli, obtendo-se uma proteína recombinante (rN) na forma solúvel. A partir dessa proteína recombinante, foi padronizado um teste ELISA e também produzidos anticorpos monoclonais frente a rN. Para o teste de ELISA foram utilizados 389 soros, os quais já haviam sido testados pelo Kit comercial, sendo o ELISA padronizado e comparado ao IDEXX. Os resultados obtidos para o teste ELISA demonstraram uma sensibilidade de 90,16% e especificidade de 90,34% ao comparar com o Kit comercial. Para o anticorpos monoclonais, foram selecionados três principais hibridomas, sendo estes testados frente a diferentes vírus aviários. Os anticorpos monoclonais produzidos foram específicos ao reconhecer apenas o vírus da bronquite e a proteína recombinante (rN), não havendo reação cruzada com outros vírus aviários. Os insumos produzidos durante o trabalho são promissores para utilização de rotina em laboratório que realiza diagnóstico de BIG. / The infectious bronchitis (IB) is a highly contagious viral disease that causes predominantly respiratory injuries that manifest clinically and invariably by sneezing and tracheo-bronchial throes and may lead to more severe signs with decreased fertility and reduced egg production. The infectious bronchitis virus (IBV) encodes four major structural proteins, the nucleoprotein being the most important in the immune response of the birds, since it is abundant and has a well conserved sequence. Vaccination is the primary means of disease control but outbreaks still occur frequently, causing major losses in poultry. As a result, the objective was to produce immunobiologicals that may contribute to the serological monitoring of birds. Therefore, the N protein was expressed in Escherichia coli, yielding a recombinant protein (RN) in soluble form. From this recombinant protein was a standard ELISA test and also produced monoclonal antibodies against rN. For the ELISA test were used 389 sera, which had been tested by the commercial kit, with the standardized ELISA and compared to IDEXX. The results obtained for the ELISA test showed a sensitivity of 90.16% and a specificity of 90.34% when compared to the commercial kit. For monoclonal antibodies, three primary hybridomas were selected, these being tested against different avian viruses. The produced monoclonal antibodies were specific to only recognize the virus bronchitis and recombinant protein (rN), with no cross-reactivity with other avian viruses. The inputs produced during work are promising for routine use in the laboratory that performs IB diagnostic.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-05-05T16:57:11Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Aryse_Martins.pdf: 857909 bytes, checksum: 6af8a55ce9256458f340496528f323af (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-05T17:12:02Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Aryse_Martins.pdf: 857909 bytes, checksum: 6af8a55ce9256458f340496528f323af (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-05T17:12:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Aryse_Martins.pdf: 857909 bytes, checksum: 6af8a55ce9256458f340496528f323af (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / Sem bolsa / Parâmetros sanguíneos básicos e peso corpóreo são rotineiramente utilizados para monitoramento do estado geral de Pinguins-de-Magalhães em reabilitação, sendo inclusive considerados critérios para liberação de acordo com protocolos estabelecidos. No entanto, estudos mostrando o perfil de variação destes parâmetros durante o desenvolvimento da aspergilose nestes animais não são conhecidos. Neste sentido, este trabalho objetivou determinar curva de peso, de hematócrito (Ht) e de proteínas plasmáticas totais (PPT) em pinguins com aspergilose. O estudo do tipo caso-controle retrospectivo foi realizado com pinguins em reabilitação no Centro de Recuperação de Animais Marinhos, (CRAM-FURG) em Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brasil, os quais foram classificados em dois grupos, sendo o grupo caso composto por pinguins com aspergilose, confirmada post mortem a partir de achados necroscópicos associados ao cultivo microbiológico e a histopatologia, e o grupo controle composto por pinguins sadios, que foram liberados. Para a determinação das curvas, foram coletados dados de nove amostras sequenciais, realizadas em média a cada sete dias, durante um período máximo de 81 dias, sendo estes submetidos a análise de variância (ANOVA) com teste post-hoc de Bonferroni. Ao todo, 140 animais foram estudados (50% casos e 50% controles). Pinguins com aspergilose diferiram significativamente do grupo controle em todos os parâmetros analisados. O peso médio, na primeira coleta foi de 2.747g no grupo caso e 2.875g no grupo controle. Os animais com aspergilose apresentaram média de peso menor que animais liberados ao longo de toda a reabilitação. O ganho de peso dos animais com aspergilose ocorreu somente nas três primeiras coletas, com estabilização ou perda de peso nas coletas posteriores, até seu desfecho. Em relação ao hematócrito (Ht) o valor médio na primeira coleta, foi de 38% e 44% nos grupos caso e controle, respectivamente. No grupo de pinguins com aspergilose foi detectado um declínio progressivo na curva dos valores de Ht ao longo do período de reabilitação, os quais permaneceram abaixo do limite inferior de referência para a espécie (42% ± 4%) desde a terceira coleta até seu desfecho, enquanto o grupo controle apresentou valores dentro da referência para a espécie em todas as coletas. A primeira coleta de dados de PPT demonstrou um valor médio similar, de 6,4g/dL e 6g/dL, entre os grupos caso e controle, respectivamente. No entanto, na análise da curva, o grupo com aspergilose apresentou aumento progressivo desses valores durante toda a reabilitação, alcançando um valor médio de 10,3g/dL na nona coleta, diferentemente do grupo controle, que permaneceu estável a partir da sexta coleta, com valores entre 7,9 e 8g/dL. Neste trabalho podemos observar que estes parâmetros, além de serem critérios para liberação de pinguins também podem ser utilizados como indicadores de animais potencialmente infectados, uma vez que o resultado das curvas geradas a partir das análises mostraram diferenças pontuais no grupo de pinguins com aspergilose quando comparado com animais sadios. O estabelecimento desse perfil pode servir como parâmetro para início de terapia preemptiva para aspergilose ou de investigação diagnóstica mais específica. / Basic blood parameters and body weight are routinely used to monitor the general condition of Magellanic penguins in rehabilitation, including being considered criteria for release in accordance with established protocols. However, studies showing the variation of these parameters during the development of aspergillosis in these animals is not known. Thus, this study aimed to determine the curve of weight, hematocrit (Ht) and total plasma proteins (PPT) in penguins with aspergillosis. The study of retrospective case-control was carried out with penguins during rehabilitation at Centro de Recuperação de Animais Marinhos (CRAM-FURG) in Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brazil, which were classified into two groups: the case group composed by penguins with aspergillosis, confirmed post mortem from necroscopic findings associated with microbiological culture and histopathology, and the control group consisted by healthy penguins, which were released. For the determination of the curves, data were collected from nine sequential samples, performed on average every seven days for a maximum period of 81 days, which underwent to analysis of variance (ANOVA) with post-hoc Bonferroni. A total of 140 animals were studied (cases 50% and 50% control). Penguins with aspergillosis were significantly different from the control group in all analyzed parameters. The average weight in the first collection was 2.747g in the case group, and 2.875g in the control group. Animals with aspergillosis showed a lower mean weight than animals released throughout the rehabilitation. The weight gain of the animals with aspergillosis occurred only in the first three collections, with stabilization or weight loss in later collections until the last collection. Regarding the hematocrit (Ht) the average value in the first collection, was 38% and 44% in the case and control groups, respectively. In the group of penguins with aspergillosis a progressive decline was detected in the curve of Ht values throughout the rehabilitation period, which remained below of the lower reference limit for the specie (42% ± 4%) from the third until the last collection, while the control group had values within the reference for the specie in all samples. The first collection of PPT data showed a similar average value of 6.4g/dL and 6g/dL, between case and control groups, respectively. However, the analysis of the curve of the group with aspergillosis showed progressive increase of these values throughout the rehabilitation, reaching an average of 10,3g / dL in the ninth collection, unlike the control group, which remained stable since the sixth collection, values between 7.9 and 8 g / dL. In this work we can see that these parameters besides being penguins criteria for release can also be used as indicators of potentially infected animals, as a result of the curves generated from the analysis showed significant differences in penguins group with aspergillosis when compared with healthy animals. The establishment of this profile can be used as parameters for early preemptive therapy for aspergillosis or more specific diagnosis.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-05-10T12:24:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Iuri_Marmitt.pdf: 852955 bytes, checksum: ac2dc85e19825c4faf88872ef3c3aa22 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-10T13:43:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Iuri_Marmitt.pdf: 852955 bytes, checksum: ac2dc85e19825c4faf88872ef3c3aa22 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T13:43:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Iuri_Marmitt.pdf: 852955 bytes, checksum: ac2dc85e19825c4faf88872ef3c3aa22 (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / No Brasil, a produção pecuária tem papel importante na economia. As doenças parasitárias dos animais de produção causam grande impacto produtivo na produção pecuária, e também, devido ao caráter zoonótico de algumas delas, podem oferecer riscos à saúde humana. O serviço de inspeção veterinária se encarrega de realizar os controles necessários para evitar que produtos contaminados cheguem ao consumo humano. A planificação dos diagnósticos realizados na inspeção post-mortem, aliada ao cruzamento com os dados de origem dos animais, é uma importante ferramenta para elencar quais as doenças mais prevalentes e quais os principais fatores epidemiológicos envolvidos nestas doenças, auxiliando na tomada de decisões para efetuar medidas de controle. Para tanto foram realizados dois estudos: Um estudo para investigar a prevalência geral de lesões correspondentes a cisticercose, hidatidose e fasciolose em carcaças de bovinos, suínos, ovinos e bubalinos abatidos em matadouros-frigoríficos de todo o estado do Rio Grande do Sul, Brasil, inspecionados pelo Serviço de Inspeção Estadual (SIE) da Secretaria da Agricultura, Pesca e Agronegócio do Estado do Rio Grande do Sul, no período de Dezembro de 2012 a Maio de 2013. Os suínos abatidos nas condições deste estudo não apresentaram casos de cisticercose, e obtiveram uma prevalência de lesões por doenças parasitárias de 0,007%, demonstrando níveis mínimos de contaminação. Os bovinos apresentaram índices baixos de cisticercose (0,6%), porém os índices de fasciolose (6,5%) e hidatidose (4,6%) demonstram que o estado ainda é endêmico para estas doenças. Nos abates de ovinos obteve-se prevalência alta para hidatidose (15,5%), demonstrando a doença ainda como um risco desta atividade. O conhecimento de tais dados pode servir de base para o planejamento de controle das doenças e também para avaliação da eficácia dos sistemas produtivos em manter os rebanhos livres de doenças. O segundo estudo avaliou a influência das diferentes idades e diferentes sistemas de terminação na prevalência de Hemoncose e/ou a presença de formas adultas de Haemonchus spp em bovinos no momento do abate. O sistema de manejo na recria e terminação alterou significativamente a prevalência de Haemonchus spp. em bovinos abatidos. Novilhos Superprecoces têm 5,91 vezes mais chance de estarem parasitados por Haemonchus spp. no momento do abate do que bovinos abatidos com mais de 36 meses de idade. As contagens de ovos de helmintos por grama de fezes em Novilhos Superprecoces foram significativamente superiores as de bovinos com idade tradicional de abate. Ressalta-se a importância da detecção do parasitismo por inspeção no abate e exame laboratorial das fezes, para servir de norte para a avaliação da eficácia de programas sanitários e detectar possíveis falhas ou riscos de manejo, possíveis causadores de prejuízos nos sistemas pecuários. / In Brazil, livestock production plays an important role in the economy. Parasitic diseases of livestock cause great impact on production, and also due to zoonotic characteristics of some of them, may offer risks to human health. The veterinary inspection service is in charge of the necessary controls to prevent contaminated products from reaching the human consumption. The planning of diagnoses made by post-mortem inspection, together with the linkage with the data of animal origin, is an important tool to determine what the most prevalent diseases and what the main epidemiological factors involved in these diseases, assisting in making decisions to make control measures. Therefore, we conducted two studies: A study to investigate the overall prevalence of lesions corresponding cysticercosis, hydatidosis and fascioliasis in beef, swine, sheep and buffaloes slaughtered in all abattoirs inspected by the State Inspection Service (SIE) of the Secretariat of Agriculture, Fisheries and Agribusiness State of Rio Grande do Sul, in the period December 2012 to May 2013. The pigs slaughtered in the conditions of this study showed no cases of cysticercosis, and obtained a prevalence of injuries parasitic diseases of 0.007%, showing minimum levels of contamination. The cattle have low rates of cysticercosis (0.6%), but the prevalences of fascioliasis (6.5%) and hydatid disease (4.6%) show that the state is still endemic for these diseases. In sheep slaughter gave high prevalence for cystic echinococcosis (15.5%), demonstrating the disease still is a risk of this activity. Knowledge of such data can serve as a basis for disease control planning and also to evaluate the effectiveness of production systems to keep livestock free of diseases. The second study evaluated the influence of different ages and different finishing systems in the prevalence of hemoncosis and or the presence of adult stages of Haemonchus spp in cattle at slaughter. The management system in growing and finishing influences significantly the prevalence of Haemonchus spp. in slaughtered cattle. Super-young steers have 5.91 times more likely to be infected with Haemonchus spp. at slaughter than slaughtered bovine animals over 36 months of age. The helminth egg counts per gram of feces in Super-young steers were significantly higher than those of traditional cattle slaughter age. We emphasize the importance of detection of parasitism by inspection at slaughter and laboratory examination of feces to serve guidance for the evaluation of the effectiveness of health programs and detect possible failures or risks managements, which are possible causes of losses in livestock systems.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-05-10T15:44:04Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Karina_Guterres.pdf: 1168488 bytes, checksum: ee487fb25ae70ca05360b35977d6d470 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-10T15:51:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Karina_Guterres.pdf: 1168488 bytes, checksum: ee487fb25ae70ca05360b35977d6d470 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T15:51:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Karina_Guterres.pdf: 1168488 bytes, checksum: ee487fb25ae70ca05360b35977d6d470 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Esporotricose é uma micose subcutânea que afeta humanos e animais, sendo causada por fungos do complexo Sporothrix, incluindo a espécie S. brasiliensis. O itraconazol é considerado o fármaco de primeira escolha para o tratamento, porém algumas espécies fúngicas têm demonstrado maior resistência a este antifúngico. Neste contexto, tem se buscado novos tratamentos, destacando-se pesquisas com plantas medicinais. Dessa forma, objetivou-se avaliar a atividade antifúngica do extrato hidroalcoólico de Bauhinia forficata frente a isolados de Sporothrix brasiliensis. A técnica de microdiluição em caldo foi utilizada para avaliar sensibilidade de sete isolados fúngicos (n=1 canino e n=6 felinos) frente a dez concentrações do extrato (100 a 0,19mg/mL), utilizando-se como controle positivo itraconazol (0,5-64 μg/ml). Nas concentrações estudadas foi evidenciada CIM de 100 mg/mL do extrato hidroalcoólico de B. forficata frente ao S. brasiliensis, porém os valores de CFM foram superiores a 100 mg/mL para todos isolados. Em relação ao itraconazol, cinco dos isolados (71,4%) apresentaram CFM de 64 μg/ml. Maiores estudos acerca da atividade da planta, utilizando outras formas de extratos, diferentes concentrações e outras partes vegetais devem ser realizados, visto que esta apresenta atividade frente a outros microrganismos, incluindo fungos, podendo vir a ser um bom alvo para estudo no tratamento da esporotricose. / Sporotrichosis is a subcutaneous mycosis affecting humans and animals and is caused by Sporothrix complex of fungi, including species S. brasiliensis. Itraconazoleis considered the drug of choice for treatment, but some fungal species have shown greater resistance to this antifungal. In this context, has sought new treatments, especially research on medicinal plants. This work aimed to evaluate the antifungal activity of hydroalcoholic extract of Bauhinia forficata against isolates of Sporothrix brasiliensis. The broth microdilution technique was used to evaluate sensitivity seven fungal isolates (n = 1 canine and n = 6 feline) against ten extract concentrations (100 to 0,19 mg/mL) , using as a positive control itraconazole (0,5 - 64 mg/mL). The concentrations studied was observed MIC of 100 mg / mL of alcoholic extract of B. forficata against S. brasiliensis, but the CFM values were greater than 100 mg / mL for all isolates. Regarding itraconazole, five isolates (71,4 %) showed 64 CFM/mL. Further studies on the plant activity using other forms of extracts, different concentrations and other plant parts must be carried out, as it has activity against other microorganisms, including fungi and could be a good target for study in the treatment of sporotrichosis.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-05-12T13:41:13Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Maureen_Fernandes.pdf: 925477 bytes, checksum: adc4b50d524df10be1448912c874f299 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-12T21:22:55Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Maureen_Fernandes.pdf: 925477 bytes, checksum: adc4b50d524df10be1448912c874f299 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-12T21:22:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Maureen_Fernandes.pdf: 925477 bytes, checksum: adc4b50d524df10be1448912c874f299 (MD5) Previous issue date: 2015-12-03 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / O objetivo deste trabalho foi a expressão da região conservada da proteína do nucleocapsídeo do vírus da cinomose (aa 222-316) em Escherichia coli e posterior avaliação de suas propriedades antigênicas e imunogênicas. Para tal, a região conservada do gene da proteína do nucleocapsídeo do vírus da cinomose canina (NP CDV) foi selecionada e codón otimizada para expressão em E. coli. O gene sintético foi inserido em um vetor pAE e clonado em cepas E. coli TOP10F. A proteína recombinante foi expressa em E. coli cepa Star e purificada por cromatografia de afinidade. A concentração de proteína obtida após purificação foi aproximadamente 300 mg/mL. A expressão da proteína recombinante NP do CDV (rCDVNP) foi confirmada por eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e Western blot utilizando anticorpos monoclonais anti His tag. A antigenicidade da rCDVNP foi demonstrada por Western blot e ELISA indireto, empregando soros de cães positivos e negativos para cinomose canina. A rCDVNP foi inoculada em galinhas e imunoglobulina Y (IgY) foi purificada a partir da gema de ovo, utilizando o método de delipidação com água destilada acidificada e precipitação com sulfato de amônia. A purificação de IgY foi confirmada por SDS-PAGE e a concentração média de IgY que se obteve foi 28,55 mg/mL. A produção de IgY anti-rCDVNP foi analisada por Western blot e ELISA indireto. Os resultados demonstraram que o gene sintético codificante da região conservada da NP do CDV foi clonado com sucesso utilizando o vetor pAE em E. coli, resultando posteriormente na expressão de porção da NP na forma recombinante. A rCDVNP demonstrou ser antigênica, uma vez que os soros de cães positivos para cinomose canina reconheceram a proteína. A rCDVNP foi imunogênica após inoculação em galinhas, sendo possível o isolamento e purificação de alta concentração de IgY específica a partir de gema de ovo. Estes resultados sugerem que tanto a rCDVNP quanto a IgY anti-rCDVNP produzida podem ser utilizadas como ferramentas úteis em ensaios de imunodiagnóstico da cinomose canina. / The purpose of this study was the expression of the conserved region of Canine distemper virus nucleocapsid protein (aa 222-316) in Escherichia coli and subsequent evaluation of its antigenic and immunogenic properties. The conserved region of Canine distemper virus nucleocapsid (CDV NP) gene was selected and codon optimized for E. coli expression. The synthetic gene was inserted in a pAE vector and cloned into E. coli TOP10F strain. The recombinant protein was expressed in E. coli Star strain and purified by affinity chromatography. The protein yield after purification was approximately 300 mg/mL. Recombinant CDV NP (rCDVNP) expression was confirmed by sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and Western blot analysis by using His-Tag monoclonal antibodies. The rCDVNP antigenicity was demonstrated by Western blot and ELISA, employing positive and negative CDV dog sera. The rCDVNP was inoculated in hens and immunoglobulin Y (IgY) was isolated and purified from egg yolk, according the delipidation method with acidified distilled water and the precipitation method with ammonium sulfate. The purification of IgY was confirmed by SDS-PAGE and the mean yield of IgY was 28.55 mg/mL. The production of IgY anti-rCDVNP was analyzed by Western blot and ELISA assays. The results showed that the synthetic gene coding the conserved region of the NP CDV was successfully cloned using pAE vector in E. coli, resulting in the expression of a recombinant NP. The rCDVNP proved to be antigenic, since distemper positive dog sera recognized the protein. The rCDVNP proved to be immunogenic after inoculation in hens and it was possible to isolate and purify high concentration of specific IgY from egg yolk. These results suggest that both rCDVNP as IgY anti-rCDVNP produced can be used as useful tools in immunodiagnostic assays of canine distemper.