O câncer de colo do útero é a segunda principal causa de morte em mulheres por câncer, sendo causado principalmente pela infecção persistente por HPV. A principal forma atual de prevenção desse câncer é a realização de exames citológicos periódicos e a vacinação profilática disponibilizada recentemente pelo Ministério da Saúde. Entretanto, tais ações visam a prevenção da infecção por HPV ou a detecção de lesões, pois não há um tratamento específico contra infecções e lesões já estabelecidas. Dentre as proteínas expressas por HPV, L2 está presente no capsídeo viral e é bem conservada entre diversos tipos de HPV, enquanto E6 é uma proteína oncogênica capaz de induzir a transformação maligna das células. Este estudo visa o desenvolvimento de uma vacina profilática e terapêutica capaz de proteger contra a infecção por diversos tipos virais, assim como combater as células já modificadas por qualquer tipo de HPV. Assim, foi construído um vetor vacinal contendo peptídeos selecionados das proteínas L2 e E6 de HPV16 testadas em modelo murino, para avaliar sua eficiência como vacina de DNA ministrada antes ou após desafio com células tumorais. Os ensaios em modelo animal demonstraram que a vacina foi capaz de induzir a produção de anticorpos específicos anti-L2 e anti-E6, assim como induzir a produção de citocinas TNF e impedir o desenvolvimento tumoral de células HPV-positivas. Portanto, foi possível concluir que o vetor construído foi capaz de induzir uma resposta imune humoral e celular em camundongos, capaz de prevenir contra o HPV, assim como tratar os cânceres a ele associados. / Cervical cancer is the second most frequent cause of death in women due to cancer, mainly caused by persistent HPV infection. The primary prevention method of this cancer is through periodic cytological exams and prophylactic vaccination which has been recently made available by the Ministry of Health. However, such actions aim towards prevention of HPV infection or the detection of lesions, since there is no specific treatment against pre-existing infections and injuries. Among the proteins expressed by HPV, L2 is present in the viral capsid and is well conserved among several types of HPV, whereas E6 is an oncogenic protein, capable of inducing malignant mutations in cells. This study aims towards the development of a prophylactic and therapeutic vaccine, capable of protecting against infections caused by several viral types, as well as combating cells which have already been modified by any type of HPV. Thus, a vaccine vector, containing peptides selected from HPV16s L2 and E6 proteins, tested in the murine model, was constructed in order to evaluate its efficiency as a DNA vaccine, to be administered either before or after challenging with tumour cells. The animal model assays demonstrated that the vaccine was able to induce the production of anti-L2 and anti-E6 specific antibodies, as well as TNF cytokines, and to prevent tumour development in HPV-positive cells. Therefore, it was possible to conclude that the designed vector was indeed able to induce humoral and cellular immune responses in mice, capable of preventing against HPV, as well as of treating cancers associated with it.

INTRODUÇÃO: A epidermodisplasia verruciforme (EV) é uma rara genodermatose, associada ao beta-papilomavírus humano (Beta-HPV) e alto risco de desenvolvimento de câncer de pele. As claudinas são proteínas transmembranas expressas nos diversos epitélios e podem se alterar na carcinogênese. Para melhor compreensão do papel do Beta-HPV na carcinogênese cutânea, realizou-se um estudo da expressão das claudinas nos pacientes com e sem EV. MÉTODOS: Um painel de anticorpos anti-claudina -1, -2, -3, -4, -5, -7 e -11 foi empregado para analisar a expressão dessa proteína em 108 amostras de pele normal, 39 verrugas planas e 174 carcinomas espinocelulares cutâneo (CEC), obtidas de 33 pacientes com epidermodisplasia verruciforme (EV) e 112 indivíduos saudáveis (não EV- NEV). As amostras de CEC foram organizadas em 4 microarranjos teciduais. A análise estatística foi realizada por regressão logística para verificar as alterações do perfil de claudinas na carcinogênese e sua relação com idade, sexo e fotoexposição crônica nos doentes com EV e o grupo NEV. RESULTADOS: A expressão focal da claudina-1 apresentou associação com o CEC (p < 0,001) e a expressão não difusa (focal ou negativa) da claudina-2 esteve associado a verruga plana (p < 0,001), nos grupos EV e NEV. A expressão focal da claudina-3 apresentou associação com o CEC (p < 0,001), bem como a imunomarcação nuclear da claudina-3 (p < 0,001), em ambos os grupos. Adicionalmente, a chance da expressão nuclear da claudina-3 foi 53% menor nas áreas não fotoexpostas. A claudina-5 apresentou maiores porcentagens de expressão focal na pele normal, de expressão difusa no CEC e na verruga plana EV, e de expressão negativa na verruga plana NEV. O grupo EV apresentou menor chance de expressão focal e negativa (p < 0,001). Além disso, a negatividade da claudina-5 esteve associada a verruga plana (p < 0,001) e menor média de idade (p < 0,001). As claudinas -4, -7 e -11 apresentaram expressão difusa em quase todas as amostras estudadas, nos grupos EV e NEV. CONCLUSÕES: Verificou-se aumento progressivo da claudina-5 na carcinogênse cutânea e esse processo apresentou relação com a EV. Redução da expressão das claudinas -1 e -3 foi observada nos carcinomas cutâneos, e da claudina-2 nas verrugas planas, no entanto, não puderam ser relacionadas à infecção pelo beta-HPV. Idade e fotoexposição crônica foram fatores que influenciaram a expressão da claudina-5 e a expressão nuclear da claudina-3, respectivamente / BACKGROUND: Epidermodysplasia verruciformis (EV) is a rare genodermatosis, related to human beta-papillomavirus (Beta-HPV), with high risk for developing skin cancer. Claudins are transmembrane proteins expressed in epithelia and may be altered on carcinogenesis. Toward better understanding the role of Beta-HPV in cutaneous carcinogenesis, claudin expression study was performed in lesions of patients with and without EV. METHODS: A panel of anti-claudin antibodies was assembled to analyze claudins -1, -2, -3, -4, -5, -7 and -11 expression, by immunohistochemistry technique, in samples of 108 normal skin, 39 flat warts and 174 cutaneous squamous cell carcinomas (SCC), obtained from 33 patients with EV and 112 individuals without EV (not-EV - NEV). The SCC samples were organized in tissue microarrays. Statistical analysis was performed by logistic regression, aiming to verify changes in claudin profile in carcinogenesis and its relationship with age, sex and chronic sun exposure area, in patients with and without EV. RESULTS: Claudin-1 focal expression was associated with SCC (p < 0.001) and claudin-2 focal or negative expression with flat wart (p < 0.001), in EV and NEV groups. Claudin-3 focal expression was related with SCC (p < 0.001), as well as the nuclear immunostaining of claudin-3 (p < 0.001), in both groups. Additionally, chance of claudin-3 nuclear expression was 53% lower in not sun exposed areas. For claudin-5, focal expression was more common in normal skin, diffuse expression in SCC annd EV flat wart, and negative expression in NEV flat wart. The EV group showed lower chance of focal and negative expression (p < 0.001). In addition, the negativity of claudin-5 expression was associated with flat wart (p < 0.001) and lower mean age (p < 0.001). Claudins -4, -7 and -11 showed, in both groups, diffuse expression in almost all studied samples. CONCLUSIONS: Claudin-5 increasing expression was observed in cutaneous carcinogenesis and this process showed association with EV. Claudin-1 and -3 down expression were observed in cutaneous carcinomas, and claudin-2 in flat warts, however, they could not be related with Beta-HPV infection. Age and chronic sun exposure area were factors that influenced claudin-5 and claudin-3 nuclear expression, respectively

O desenvolvimento do câncer cervical está associado à infecção por alguns tipos de Papilomavírus Humano (HPV). Entre os mecanismos de carcinogênese associados ao HPV incluem-se alterações em moléculas que modulam a manutenção de componentes da matriz extracelular (MEC), como as metaloproteinases de matriz (MMP) e alguns de seus reguladores. A proteína RECK (reversion inducing cysteine rich protein with kazal motifs) apresenta função essencial na remodelação tecidual e na angiogênese fisiológica ou tumoral, através da regulação pós-transcricional da atividade de MMP-2, MMP-9 e MMP-14 (MT1-MMP). Resultados publicados previamente por nosso grupo apontam para a correlação entre a expressão da oncoproteína E7 de HPV16, a alta expressão e atividade de MMP-9 e a baixa expressão de seus reguladores, TIMP-2 e RECK. A expressão de RECK também é baixa em lesões do colo uterino de alto grau e em amostras de câncer cervical, quando comparadas a amostras de pacientes com cervicite. O presente estudo visa determinar o papel de RECK no processo de tumorigênese mediado por HPV. Para isto, estabelecemos linhagens derivadas de tumor de colo de útero (SiHa, SW756 e C33A) que superexpressam RECK a partir de transdução com lentivírus. Os efeitos da superexpressão de RECK sobre o potencial tumorigênico de SiHa, SW756 e C33A foram avaliados em modelos de estudo in vivo e in vitro. De maneira geral, a superexpressão de RECK foi associada com a capacidade reduzida de invasão em câmara de Matrigel® e de formação de colônia independente de ancoragem. Ainda, camundongos nude inoculados s.c. com células tumorais superexpressando RECK apresentaram atraso no estabelecimento e crescimento tumoral e sobrevida global estendida quando comparados aos controles. Ambos tumores derivados de SiHa RECK e SW756 RECK apresentaram redução na frequência de células tumorais e endoteliais, ao passo que mostrarm aumento no infiltrado inflamatório. Esta observação foi acompanhada de redução na população de neutrófilos e potenciais células mieloderivadas supressoras em tumores de ambas as linhagens. Em tempo, analisamos séries de dados de expressão de CIN e carcinomas cervicais do banco de dados GEO e verificamos que a hipermetilação do gene RECK e a inibição da expressão de mRNA de RECK são eventos precoces no desenvolvimento do câncer de colo de útero. Avaliamos que a baixa expressão de RECK foi associada a progressão de lesões CIN3+ e ao aumento de metástases em linfonodo pélvico em pacientes com câncer de colo de útero. Ademais, notamos que o tratamento com quimio radioterapia levou ao aumento dos níveis de mRNA de RECK em um outro grupo de pacientes com câncer de colo de útero. Concluímos que a superexpressão de RECK (i) reduz o potencial tumorigênico de linhagens celulares derivadas de colo de útero independente do status de infecção por HPV e que (ii) o seu efeito sobre as populações intratumorais se mostrou específico para as linhagens infectadas por HPV. Estes resultados apontam para uma possível interação entre as alterações no microambiente tumoral associadas ao HPV e a função de RECK. Finalmente, a regulação negativa da expressão de RECK é um evento precoce na história natural do câncer cervical. / Persistent infection with high-risk Human Papillomavirus (HPV) types is the main etiologic factor for the development of cervical cancer. The HPV carcinogenic mechanisms include alterations in extracellular matrix (ECM) components, as matrix metalloproteinases (MMP) and its regulators. The Reversion-inducing Cysteine-rich protein with Kazal motifs (RECK) plays a central role on tissue remodeling, tumor angiogenesis and exert inhibitory effects on the transcription, synthesis, activation and activity of MMP-2, MMP-9 e MMP-14 (MT1-MMP). As previously published by our group, it has been observed a correlation between the HPV16 E7 oncoprotein expression, the up-regulation of MMP-9 and the down-regulation of its inhibitors, RECK and tissue inhibitor of metalloproteinases 2 (TIMP-2). Also, RECK expression was downregulated in cervical intraepithelial neoplasias grades 2 and 3 (CIN2/3) and invasive carcinoma samples levels when compared with clinical samples of pacients diagnosed with cervicitis. The present study aims to determine the role of RECK in HPV mediated tumorigenesis. In order to do so, we generated cervical tumors derived cell lines (SiHa, SW756 e C33A) superexpressing RECK by lentiviral transduction followed by FACS. We assessed the effects of RECK superexpression in the tumorigenic potential of SiHa, SW756 e C33A using both in vitro and in vivo protocols. Overall, RECK superexpression is associated with reduced chamber invasion and reduced anchorage independent colony formation. Moreover, nude mice injected s.c. with RECK superexpressing tumor cells presented (i) delayed tumor establishment and (ii) increased overall survival, when compared with controls. Both SiHa and SW756 superexpressing RECK presented decreased frequency of tumor and endothelial cells, whilst showed increase in inflammatory infiltrate population. This observation was followed by a decrease in potential myeloid derived suppressor cell and neutrophil populations in both SiHa RECK and SW756 RECK tumors. Additionally, we observed hipermethylation and premature and consistent downregulation of RECK mRNA expression in CIN and cervical cancer expression datasets from GEO database. We observed that reduced RECK expression was associated with CIN3+ progression and increased pelvic lymph node metastasis in cervical cancer patients. Furthermore, we found that chemo radiotherapy treatment led to increased levels of mRNA in another set of cervical cancer patients. We conclude that RECK superexpression reduces the tumorigenic potential of cervical cancer derived cell lines regardless of HPV infection status. However, we found that the effect of RECK over the intratumoral cells populations is specific to HPV infected tumor cell lines. These results points to a possible interaction between HPV associated tumor microenvironment alterations and RECK. Finally, RECK downregulation is an early event in the natural history of cervical cancer.

O Papilomavírus Humano (HPV) é uma prevalente infecção do mundo atual, sendo o comportamento sexual um fator determinante para a o acometimento da infecção. O objetivo deste trabalho foi estudar o HPV em diferentes sítios de infecção, buscando um maior entendimento do seu mecanismo de disseminação. Foram analisadas amostras das mucosas cervical, oral e do sangue de 50 pacientes do sexo feminino. Foram identificados o HPV-16, HPV-18, HPV-31 e HPV-33. Nenhuma paciente foi negativa para os quatro tipos nos três sítios. O HPV-16 foi o mais detectado e o mais prevalente nos três sítios, simultaneamente, 32 pacientes apresentaram esse perfil. Todos os tipos virais presentes no sangue, também estavam presentes na mucosa cervical, na mucosa oral ou em ambas. Foram identificados seis achados citológicos, sugestivos da infecção pelo HPV. Foi realizada a detecção dos transcritos virais de E6, E6/E7 e L1 nos três sítios. Os resultados do nosso trabalho demonstram a alta prevalência do HPV, a atividade viral nos três sítios analisados e a provável disseminação do vírus. / Human papillomavirus (HPV) is one of the most prevalent infections of the current world, with sexual behavior being one determining fator of infection. The objective of this study was to study HPV in different sites of infection, seeking a better understanding of its mechanism and spreading. Cervical, oral and blood mucosa samples from 50 female patients were analyzed. HPV-16, HPV-18, HPV-31 and HPV-33 were identified. No patient was negative in the four types at all three sites. HPV-16 was the most detected and the most prevalent in the three sites, simultaneously, 32 patients presented this profile. All viral types present in the blood were also present in the cervical mucosa, oral mucosa, or both. Six cytological findings were identified, suggestive of infection by HPV. Detection of viral transcripts of E6, E6 / E7 and L1 was performed at the three sites. The results of our study demonstrate the high prevalence of HPV, viral activity in the three sites analyzed and the probable virus spreading.

Infecção pelo HPV é o principal fator de risco para câncer cervical. Os tumores apresentam microambiente complexo, células tumorais e inflamatórias integram sinais modulando a atividade de vias de sinalização. Caracterizamos o estado de ativação de três vias de sinalização importantes para a progressão tumoral. Com o aumento do grau da lesão, observamos: aumento da expressão de NF&#954;B e Akt fosforiladas no microambiente tumoral; redução de NF&#954;B fosforilada e aumento de STAT3 e Akt fosforiladas em leucócitos circulantes. Em modelos experimentais, a via de NF&#954;B também encontra-se inibida, principalmente em células apresentadoras de antígenos. Para testar se a modulação de vias de sinalização poderiam alterar as respostas a tumores, tratamos linfócitos B de pacientes com agonista de CD40, ativador de NF&#954;B, e observamos aumento do potencial de apresentação antigênica. Nossos resultados mostram o panorama do estado de ativação de importantes vias de sinalização para a progressão tumoral e trazem a possibilidade de uma ferramenta imunomoduladora. / Cervical cancers have HPV infection as a main factor. HPV tumors recruit leucocytes and change their phenotype as an evasion mechanism. We tried to understand how the tumor influences the immune cells behavior, analyzing signaling pathways important to tumor progression in cervical biopsy and PBMC from patients with high-grade lesions and cancer. We find an increase in NF&#954;B activation in immune cells from tumor microenvironment, but a decrease in PBMC. We could not find any difference in STAT3 signaling pathway in the tumor microenvironment, however, there was an activation increase in PBMC. Both tumor microenvironment immune cells and PBMC had an increase in Akt signaling pathway. To identify a possible strategy to reverse the tumor influence, we stimulated B lymphocytes from patients with sCD40L, achieving an increase in the numbers of CD80+CD86+ cells. Our results demonstrate a tumor effect over the immune cells, with an important systemic effect. However, the approach used to stimulate B lymphocytes from patients present us with a possible immunotherapy.

A história natural do câncer cervical invasivo começa com uma infecção produtiva pelo Papiloma vírus humana (HPV) na camada basal do epitélio. Infecções persistentes por vírus de HPVs de alto risco poderão provocar lesões que eventualmente darão origem ao carcinoma invasivo. Sabe-se que o infiltrado inflamatório pode ter um papel importante na evolução da doença. Neste trabalho, quantificamos e caracterizamos fenotipicamente linfócitos T, macrófagos e neutrófilos nas lesões precursoras assim como no carcinoma invasivo. Além disso, para determinar se existia alguma relação entre as populações foi realizada uma análise de correlação entres as populações descritas. Por outro lado, tentando determinar o efeito sistêmico do tumor avaliou-se a frequência de subtipos de monócitos circulantes e através de ensaios alogênicos foi avaliada a capacidade estimuladora das células dendríticas diferenciadas de monócitos circulantes. Os dados apresentados ajudarão a entender o papel que as células do sistema imune podem ter sobre a progressão da doença. / The natural history of cervical cancer begins with a human papilloma virus (HPV) infection of the cells of the basal layer of the epithelium. Persistent infection by high risk HPVs can originate precancerous lesions that may progress to invasive cancer. It has been established the role of the infiltrated inflammatory cells on the progression of the disease. In this work, the phenotype and the frequency of T lymphocytes, macrophages and neutrophils were characterized both in precursor lesions as in invasive carcinoma. In order to stablish a possible relation between the characterized cells, we made a correlation analysis. On the other hand, trying to determine the systemic effect of the tumor we evaluated the frequency of circulating monocyte subtypes and the capacity of dendritic cells to stimulate allogeneic T cells. The data presented will help to understand the role of the immune system cells on the progression of the disease.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MICHELLE CHRISTINE CARLOS RODRIGUES.pdf: 555304 bytes, checksum: 013acceaa7a318df34a1985d5405b098 (MD5) Previous issue date: 2011-09-16 / HIV-infected women are more likely to be infected with high-risk HPV genotypes that have the potential for progressing to cervical cancer. To Know the prevalence of type-specific human papillomavirus (HPV) infections in HIV-infected women is necessary in order to plan effective screening and preventive strategies in such population. Here, we compare the prevalence of infections with multiple HPV types and cytological abnormalities in two groups of women, HIV-positive and HIVnegative, in the city of Goiânia-GO, Brazil. Cervical smears obtained from 57 HIVpositive and 57 HIV-negative women were collected in a preservative medium and submitted to DNA extraction. HPV-DNA detection and genotyping were performed by using the Linear Array HPV Genotyping Test according to the manual provided by the manufacturer. Both groups were similar in regard to social aspects, demographics and behavioral characteristics. HPV DNA was significantly more prevalent in HIV-positive women, compared to HIV-negative women (56.7% vs. 28.3%, p = 0.003). Coinfections with HPV multiple genotypes was also more prevalent in the HIV-positive group (88.2% vs. 58.8%, p = 0.028). HPV16 was the most prevalent in both groups. Cytological abnormalities were observed in 5.3% of HIV-negative women and in 29.8% HIV-positive women. The presence of HPV was significantly associated with cytological abnormalities only in HIV-negative women. Our results demonstrated a greater prevalence of HPV infection in the HIV-positive group of women, with a greater prevalence of infection with multiple genotypes. We here emphasize the need of frequent monitoring of HIV-infected women, in order to allow early detection and efficient treatment for cervical intraepithelial neoplasia (CIN) in this high-risk group. / Mulheres infectadas pelo HIV são mais susceptíveis à infecção por HPVs de alto risco oncogênico, que apresentam um potencial para a progressão para o câncer cervical. Conhecer a prevalência dos tipos específicos do papilomavirus humano nas mulheres HIV infectadas é necessário para planejar um rastreamento eficaz e estabelecer estratégias preventivas em tal população. Aqui, pudemos comparar a prevalência de infecções por múltiplos genótipos de HPV e de alterações citológicas em dois grupos de mulheres, HIV-positivas e HIV-negativas, da cidade de Goiânia- GO, Brasil. Esfregaços cervicais obtidos de 57 mulheres HIV-positivas e 57 mulheres HIV-negativas foram colhidos em meio conservante e enviadas para extração de DNA. A detecção de DNA e genotipagem do HPV foram realizadas usando o Kit Linear Array HPV Genotyping Test, de acordo com o manual fornecido pelo fabricante. Ambos os grupos foram semelhantes no que diz respeito à demografia, aos aspectos sociais e comportamentais. A detecção do DNA de HPV foi significativamente mais prevalente em mulheres HIV positivas, em comparação com as mulheres HIV-negativas (56,7% vs. 28,3%, p = 0,003). Coinfecção por vários genótipos de HPV também foi mais prevalente no grupo de HIV-positivas (88,2% vs. 58,8%, p = 0,028). O HPV16 foi o genótipo mais prevalente em ambos. Anormalidades citológicas foram observadas em 5,3% das mulheres HIV-negativas e 29,8% das mulheres HIV-positivas. A presença de HPV foi significativamente associada com anormalidades citológicas somente nas mulheres HIV-negativas Nossos resultados demonstraram uma maior prevalência de infecção por HPV no grupo de mulheres HIV-positivas, com um elevado número de casos de infecção por vários genótipos. Enfatizamos aqui a necessidade de monitoramento frequente de mulheres infectadas pelo HIV, de modo a permitir o diagnóstico precoce e tratamento eficaz para neoplasia intra-epitelial cervical (NIC) neste grupo de alto risco.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GUILHERME PETITO.pdf: 1076353 bytes, checksum: 35ed726e32ffa4f2f32eee9bafc7c8a7 (MD5) Previous issue date: 2014-06-25 / The human papillomavirus (HPV) has been associated with the risk and prognosis of oral cavity and oropharynx carcinomas. This study aimed to estimate the prevalence and genotype distribution of HPV 16 and 18 in oral cavity and oropharyngeal carcinomas, as well as their associations with clinical and histopathological factors of tumors. It is a retrospective descriptive study, with gathered data analysis of 82 medical records and paraffin blocks containing specimens of oral cavity carcinomas and oropharynx diagnosed at the Hospital Araújo Jorge (HAJ), in Goiânia-GO, between 2005 and 2007. The chain reaction polymerase (PCR) was used for HPV detection and genotyping. Among the 82 evaluated patients, 78% were male. The average age of patients was 58 years. Risk factors, like smoking (78 %) and ethylism (70.8 %), were registered in the studied group. HPV DNA was detected in 21 cases (25.6%; 95% CI: 16.9 to 36.6) of which 33.3% were HPV 16 and 14.3% HPV 18. The presence of metastases lymph node and deaths were less common in tumors with HPV, suggesting a better prognosis for these cases, however, the differences between the groups were not statistically significant. The data described in the present study, regarding the presence of the HPV genome, and the high risk oncogenic genotypes, HPV16 and HPV18, in oral cavity and oropharynx carcinomas highlights the importance of vaccination against HPV in such tumours. / O Papilomavírus humano (HPV), tem sido associado com o risco e o prognóstico dos carcinomas da cavidade oral e orofaringe. Este estudo teve como objetivo estimar a prevalência e a distribuição genotípica do HPV 16 e 18 em carcinomas de cavidade oral e orofaringe, bem como suas associações aos fatores clínicos e histopatológicos dos tumores. É um estudo retrospectivo descritivo, com dados coletados análise de 82 prontuários e de blocos de parafina contendo espécimes de carcinomas de cavidade oral e orofaringe diagnosticados no Hospital Araújo Jorge (HAJ), em Goiânia-GO, entre 2005 e 2007. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi usada para detecção e genotipagem do HPV. Dentre os 82 pacientes avaliados, 78% eram do sexo masculino. A média de idade dos pacientes foi de 58 anos. Fatores de risco, como tabagismo (78%) e etilismo (70,8%) foram registrados no grupo estudado. O DNA do HPV foi detectado em 21 casos (25,6%; IC 95%: 16,9 36,6) dos quais 33,3% eram o HPV 16 e 14,3% o HPV 18. A presença de metástases linfonodais e os óbitos foram menos frequentes nos tumores que apresentaram HPV, sugerindo um melhor prognóstico para esses casos, porém, as diferenças entre os grupos não foram estatisticamente significativas. Os dados descritos no presente estudo, com relação à presença do genoma do HPV, incluindo os genótipos de alto risco, HPV16 e HPV18, destacam a importância de vacinação contra o HPV no controle dos carcinomas de cavidade oral e orofaringe.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-10-17T13:09:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_PerfilMulheresRibeirinhas.pdf: 2298059 bytes, checksum: 1c7ff2839e200c25e7e84f2a6fa63b56 (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-10-25T16:10:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_PerfilMulheresRibeirinhas.pdf: 2298059 bytes, checksum: 1c7ff2839e200c25e7e84f2a6fa63b56 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-25T16:10:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_PerfilMulheresRibeirinhas.pdf: 2298059 bytes, checksum: 1c7ff2839e200c25e7e84f2a6fa63b56 (MD5) Previous issue date: 2015 / O papilomavírus humano (HPV) é responsável pela infecção sexualmente transmissível mais comum no mundo e é reconhecido como principal agente causador do câncer do colo do útero, porém pouco se conhece sobre a prevalência deste vírus em comunidades isoladas da Amazônia. Objetivamos neste estudo identificar, entre mulheres de comunidades ribeirinhas de diversos municípios do Estado do Pará - Brasil, a prevalência geral e específica dos tipos 16 e 18 da infecção pelo HPV, construindo um perfil epidemiológico das mulheres positivas para o vírus e seus tipos em questão. No período compreendido entre fevereiro e dezembro de 2008, foram coletadas amostras de cérvice uterina de mulheres ribeirinhas através de busca ativa para a realização do exame citopatológico. Nestas amostras, foi realizada a pesquisa molecular de HPV através da reação em cadeia da polimerase convencional (PCR) seguida de uma PCR em tempo real específica para os tipos 16 e 18. Das 353 amostras analisadas, 58 (16,4%) foram positivas para HPV, 8 (2,3%) foram identificadas positivas para o tipo 16 e 5 (1,4%) positivas para o tipo 18 havendo um caso de infecção múltipla pelos tipos investigados. Mulheres abaixo dos 16 anos apresentaram 34,6% taxa de prevalência e mulheres entre 52 e 66 anos taxa de 29,8% (p = 0,003), mulheres que relataram possuir único parceiro sexual fixo apresentaram menor prevalência da infecção viral (11,8%) (p<0,001). Houve um aumento relativo na presença viral de acordo com a severidade citológica apresentada (p=0,026). Não foi constatada associação estatística entre os tipos virais 16 e 18 com as variáveis epidemiológicas investigadas. A presença de HPV e seus tipos mais associados ao câncer de colo de útero destaca a importância de ações específicas, voltadas para a prevenção da transmissão e o rastreamento das lesões relacionadas a este vírus, em comunidades ribeirinhas a Amazônia brasileira. / The human papilomavírus (HPV) is the cause of the most common sexually transmitted infection in the world and is recognized as the main causative agent of cervical cancer, but little is known about the prevalence of this virus in isolated communities in the Amazon. We aimed in this study to identify among women in riverside communities of several municipalities in the state of Pará - Brazil, the general and specific prevalence of HPV infection and HPV types 16 and 18, building an epidemiological profile of women positive for the virus and these types. Between February and December 2008, cervical samples riverside women were collected on active serach for the Pap smear testing. In these samples, molecular analysis of HPV were performed by conventional polymerase chain reaction (PCR) followed by real-time PCR to diagnose types 16 and 18. Of the 353 samples tested, 58 (16.4%) were positive for HPV , of these 8 (2,3%) were identified positive for type 16 and 5 (1,4 %) were positive for type 18 with one case of infection by both types investigated . Women under 16 years had 34.6 % prevalence had rate and women between 52 and 66 years rate of 29.8 % (p=0.003), women who reported having only one fixed sexual partner had lower prevalence of viral infection (11,8%) (p<0,001). There was a relative increase in viral presence in accordance with the severity cytological shown (p = 0.026). There was no statistical association between viral types 16 and 18 with the variables investigated. The presence of HPV and its most associated with cervical cancer types highlights the importance of specific actions aimed at the prevention, transmission and screening of lesions related to this virus in the river communities of the target municipalities.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-10-17T14:29:49Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_PrevalenciaAspectosClinicos.pdf: 2027324 bytes, checksum: 19142576468daf624f8eb02de2042beb (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-10-30T16:09:56Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_PrevalenciaAspectosClinicos.pdf: 2027324 bytes, checksum: 19142576468daf624f8eb02de2042beb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-30T16:09:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_PrevalenciaAspectosClinicos.pdf: 2027324 bytes, checksum: 19142576468daf624f8eb02de2042beb (MD5) Previous issue date: 2014 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O Vírus da Imunodeficiência Adquirida (HIV) tem se mostrado um potencializador dos mecânismos oncogênicos da Infecção Genital pelo Papilomavírus humano (HPV), acredita-se que o estado de imunocompetência do hospedeiro possa ter algum papel na evolução das lesões cervicais. O HPV infecta uma grande parcela da população feminina mundial, sendo a DST (Doença Sexualmente Transmissivel) mais comum no mundo com aproximadamente 291 milhões das mulheres portadoras desse vírus. Essa informação mantém relação com a incidência anual de quase 500 mil casos de câncer de colo do útero. De acordo com o Instituto Nacional do Câncer (INCA), este é o segundo câncer mais incidente na população brasileira, e o mais incidente no Pará. O objetivo do estudo é de detectar a prevalência e os aspectos clínicos e epidemiológicos nas mulheres HIV postivas infectadas pelo HPV. Trata-se de estudo transversal-analítico. As amostras são de pacientes atendidas no Centro de Testagem e Aconselhamento (CTA) do município de Tucuruí no período de março de 2011 a julho de 2013,para detecção e contagem de células T CD4 e CD8 foi realizado a técnica de nested-PCR, e qPCR, e as lâminas foram coradas pelo método de Papanicolaou. A prevalência encontrada do HPV foi de 68%. A maior parte era casada/união estável (63,5%), analfabetas/fundamental incompleto (50%). Em relação aos antecedentes ginecológicos, 94,59% utilizam camisinha em todas as relações, a mediana de idade da coitarca foi de 13 anos, sendo que apenas 24,3% tiveram a primeira relação com 14 anos ou menos. Dentre as entrevistadas, 82,4% tiveram 2 ou mais parceiros sexuais durante a vida, com mediana de 6 parceiros. A infecção por HIV é considerada um fator de risco para o desenvolvimento do câncer de colo uterino e durante a pesquisa foram correlacionados dados que demonstravam a contagem de CD4+ ser inversamente proporcional ao surgimento dessa enfermidade. Oitenta por cento das amostras que estavam positivas para o DNA HPV foram detectáveis aos 9 subtipos (6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 52, 58) estudados, e 88% das amostras positivas para o DNA HPV foram subtipadas com 1 ou mais subtipos de alto risco para o câncer do colo uterino. A avaliação da população de mulheres soropositivas em relação à presença de HPV e seus subtipos foram de grande importância para auxiliar no diagnóstico precoce e tratamento, fornecem subsídios para programas regionalizados de prevenção e manejo dessas infecções. / The Human Immunodeficiency Virus (HIV) has been shown to potentiate the oncogenic mechanisms of Genital Infection by the human papillomavirus (HPV) , it is believed that the state of immunocompetence of the host may play a role in the evolution of cervical lesions . HPV infects a large proportion of women worldwide , with an STD (sexually transmitted disease) more common in the world with approximately 291 million carriers of this virus women. This keeps information related to the annual incidence of nearly 500,000 cases of cervical cancer . According to the National Cancer Institute (INCA) , this is the second most frequent cancer in a Brazilian population and more common in Pará The objective is to detect the prevalence and clinical and epidemiological aspects of the HIV -infected women postivas HPV. It is cross - analytical study . The samples are from patients treated at the Counseling and Testing Center (ATC) of the municipality of Tucuruí from March 2011 to July 2013 for detection and enumeration of CD4 and CD8 T cells was performed the technique of nested- PCR , and qPCR , and the slides were stained by the Papanicolaou method. The prevalence of HPV was 68 % . Most were married / common-law marriage (63.5 %) , illiterate / incomplete primary (50 % ). Regarding gynecological history, 94.59 % used condoms in all relationships , the median age of first sexual intercourse was 13 years , and only 24.3 % had their first intercourse at age 14 or less . Among the respondents, 82.4 % had 2 or more sexual partners during their lifetime , with a median of 6 partners . HIV infection is considered a risk factor for development of cervical cancer and during the survey data showed that the CD4 + count is inversely proportional to the emergence of this disease were correlated . Eighty percent of the samples that were positive for HPV DNA were detectable after 9 subtypes (6, 11, 16 , 18, 31 , 33, 35 , 52, 58) studied, and 88% positive DNA HPV of the samples were subtyped with one or more subtypes high risk for cervical cancer . The population estimate of HIV positive women for the presence of HPV and its subtypes were of great importance to aid in the early diagnosis and treatment , provide subsidies to regionalized programs for the prevention and management of these infections.