Made available in DSpace on 2016-02-26T13:40:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 ana_gomes_ioc_mest_2013.pdf: 3769985 bytes, checksum: 5b0d10edd1b81d3e7fce34b7bfe59af0 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Uma nova espécie da família Olig ancanthorhynchidae (Acanthocephala) Phosthenochis sp. foi coletada do intestino delgado do cachorro - do - mato Cerdocyon thous Linnaeus, 1766 (Canidae: Carnivora) no bioma Pantanal e descrita através da microscopia de luz e eletrônica de varredura. Caracterí sticas diferenciam esta espécie das demais descritas para este gênero, tais como tamanho do corpo, posição do leminisco, tamanho do ovo, hospedeiro e distribuição geográfica. Características morfológicas obtidas por microscopia eletrônica de varredura, com o presença de duas papilas laterais no pescoço, a presença de farpas nos ganchos e de colar festonado auxiliaram a identificação da espécie. Adicionalmente, foi depositado no GeneBank a seqüência obtida através do gene ribossomal 18S. As análises por micr oscopia de luz e eletrônica de varredura e moleculares adicionam infomações importantes para estudo da taxonomia deste grupo. Palavra chave: Helminto , A canthocephala, Prosthenorchis, cachorro - do- mato, Pantanal / A new species of Oligancanthorhynchidae (Achant h ocephala) Phosthenochis sp. is described from specimens collected from the small intestine of the crab - eating fox Cerdocyon thous Linnaeus, 1766 (Canidae: Carnivora) in the Brazilian Panta nal wetland and the new species were analyzed by light and scanning electron microscopy. Characteristic features distinguishing the new species from others already described were obtained, such as size of the body, the leminici position, size of the eggs, host and geographical distribution. Therefore, details of the surface body such as the presence of two lateral papillae in the proximal region of the proboscis, the presence of barbs in hooks and robust and festooned collar obtained by scanning electron mi croscopy helped to identify the species. In addition, the DNA sequence of the new species by 18S ribosomal gene was deposited in GeneBank. The analyses based on light microscopy and scanner electron microscopy, as well as the molecular analyses helped to o btain important information for the taxonomic study of the group.

Made available in DSpace on 2016-03-04T13:41:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 298.pdf: 6648152 bytes, checksum: f25c66813284e5a9559290d392d6569a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014 / O debate sobre os modelos explicativos do processo saúde-doença abarca desde dimensões dabiologia dos seres vivos, até a dinâmica social e as práticas culturais, sendo informado pordiferentes campos disciplinares, tais como biologia, sociologia, antropologia, economia etc.Este debate não é amparado apenas nos estudos de contextos atuais, mas também de elementosque evidenciam traços da presença humana ancestral e articulam a reconstrução de antigoscenários da dinâmica saúde-doença das populações, por meio de vestígios biológicos ousocioculturais. Nessa perspectiva, surge ao final da década de 1970 a Paleoparasitologia, ciênciadedicada ao estudo de parasitoses em populações ancestrais por intermédio de materialarqueológico e fóssil. Ainda que os trabalhos iniciais apresentassem achados de caráterprincipalmente descritivos, o uso atual de métodos epidemiológicos e técnicas molecularesproporciona uma análise mais abrangente na conjugação de dados arqueológicos a modelosecológicos e culturais pré-históricos sobre doenças. O objetivo principal deste estudo consistiuem demonstrar como se configurou a Paleoparasitologia, por meio do exame de sua produçãoacadêmica em artigos ao longo dos primeiros trinta anos de seu estabelecimento (1980-2009).O estudo serviu-se de perspectivas bibliométricas e epistêmicas como ferramentascomplementares na análise identitária de seu domínio de saber. A avaliação quantitativa e omapeamento de redes colaborativas foram conduzidos com base em métodos da bibliometria ecientometria. / Como complemento, e visando examinar o caráter epistemológico daPaleoparasitologia, o conjunto de dados foi submetido a um método desenvolvido com base nodiscurso de segunda ordem (ou metaciência) proposto por Imre Lakatos, sua Metodologia dosProgramas de Pesquisa Científica. Diversamente às apreciações correntes, que ora a evocamcomo especialidade da Parasitologia, ora a consideram como ramo da Paleopatologia, a análiserealizada produziu indícios de que a Paleoparasitologia possui elementos constitutivos que aclassificam como disciplina própria, ou como ciência, na visão lakatosiana de Programa dePesquisa Científica.

Made available in DSpace on 2016-05-31T12:40:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 viviane_fernandes_ioc_mest_2015.pdf: 5190293 bytes, checksum: 4ac1474636e152c4455544df6d3ddc95 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A região Neotropical conta com a maior biodiversidade de peixes no mundo. No Brasil ocorrem 1.236 espécies de peixes marinhos, entre eles Kyphosus incisor (Cuvier, 1831) e K. sectatrix (Linnaeus, 1758) (Kyphosidae). K. incisor (\201Cpirangica\201D) é uma espécie nectônica costeira que ocorre no Oceano Atlântico tropical e subtropical. No Brasil estudos com kifosídeos são escassos. Com o objetivo de avaliar a helmintofauna de K. incisor da costa do Rio de Janeiro, foram coletados e analisados 22 peixes obtidos com pescadores na praia de Copacabana (n=9) e no mercado de peixes da Central Estadual de Abastecimento do Rio de Janeiro (n=13). Um exemplar de K. sectatrix proveniente da Baia de Ilha Grande foi examinado em caráter comparativo. Os parasitos coletados foram fixados em álcool a 70%, AFA ou formalina a 4%. Os Nematoda foram clarificados e examinados em lâminas temporárias com glicerina, os Platyhelminthes foram corados em Paracarmim de Mayer ou Tricrômico de Gomori, os Acanthocephala foram corados em Paracarmim de Mayer e examinados em lâminas permanentes montadas em Bálsamo do Canadá. Alguns Monogenea foram montados alternativamente em meio de Hoyer, Gray e Wess, ácido pícrico com glicerina (GAP) ou Berlese A identificação taxonômica foi feita através de morfometria, desenhos em câmara clara, estudos por microscopia eletrônica de varredura e técnicas moleculares. Foram calculadas a prevalência, amplitude de intensidade, abundancia média e desvio padrão para cada espécie de parasito. Foram coletados 1.312 parasitos, pertencentes a 7 taxa: Monogenea (Pseudobivagina sp., Acleotrema sp. e Acleotrema lamothei), Trematoda (Opisthadena dimidia e Aponurus laguncula), Nematoda (Pseudascarophis brasiliensis), Acanthocephala (Filisoma sp.). Acleotrema spp. apresentaram a maior prevalência (72,7%), seguido por Pseudobivagina sp. (54,5%) e P. brasiliensis (45,4%). K. incisor é referido como novo hospedeiro para Pseudobivagina sp., O. dimidia, A. laguncula, P. brasiliensis e Filisoma sp. e esta é a primeira ocorrência de Pseudobivagina sp., O. dimidia e Filisoma sp. no oceano Atlântico. Este estudo indica a presença de 3 espécies novas (2 Monogenea e 1 Acanthocephala) / The Neotropical region has the greatest fish biodiversity in the world. In Brazil there are 1,236 species of marine fish, including Kyphosus incisor (Cuvier, 1831) and K. sectatrix (Linnaeus, 1758) (Kyphosidae). K. incisor ("yellow sea chub") is a coastal nektonic species that occurs in tropical and subtropical Atlantic Ocean. In Brazil studies on kyphosids are scarce. In order to assess the helminthes of K. incisor off the coast of Rio de Janeiro, 22 fish were obtained from fishermen off Copacabana beach (n = 9) and at the State Central Fish Market in Rio de Janeiro (n = 13) to be analyzed. A specimen of K. sectatrix from the Ilha Grande Bay was examined for comparative data. The collected parasites were fixed in 70% alcohol, AFA or 4% formalin. The Nematoda were clarified and studied in temporary slides with glycerol, Platyhelminthes were stained with Mayer´s Paracarmine or Gomori's Trichrome the Acanthocephala were stained with Mayer´s Paracarmine and mounted in permanent slides with Canada balsam. Some Monogenea were mounted alternately in Hoyer, Gray and Wess, picric acid with glycerol (GAP) or Berlese. The taxonomic identification was made through measurements, drawings with camera lucida, and studies by scanning electron microscopy and molecular techniques. The prevalence, intensity amplitude, average abundance and standard deviation for each parasite species were calculated. A total of 1,312 parasites, belonging to 7 taxa: Monogenea (Pseudobivagina sp., Acleotrema sp. and Acleotrema lamothei), Trematoda (Opisthadena dimidia and Aponurus laguncula), Nematoda (Pseudascarophis brasiliensis), Acanthocephala (Filisoma sp.). Acleotrema spp. had the highest prevalence (72.7%), followed by Pseudobivagina sp. (54.5%) and P. brasiliensis (45.4%). K. incisor is a new host record for Pseudobivagina sp., O. dimidia, A. laguncula, P. brasiliensis and Filisoma sp. and this is the first occurrence of Pseudobivagina sp., O. dimidia and Filisoma sp. in the Atlantic Ocean. These results indicate the presence of three new species (2 Monogenea and Acanthocephala). / 2016-Jul-09

Submitted by Maurílio Figueiredo (maurilioafigueiredo@yahoo.com.br) on 2013-03-13T22:26:00Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_InfluênciaManutençãoLeishmania.PDF: 347399 bytes, checksum: 25dc8ca820f87dc97fb24a9b64724315 (MD5) / Approved for entry into archive by Neide Nativa (neide@sisbin.ufop.br) on 2013-03-15T16:03:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_InfluênciaManutençãoLeishmania.PDF: 347399 bytes, checksum: 25dc8ca820f87dc97fb24a9b64724315 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-15T16:03:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_InfluênciaManutençãoLeishmania.PDF: 347399 bytes, checksum: 25dc8ca820f87dc97fb24a9b64724315 (MD5) Previous issue date: 2008 / Parasitos pertencentes ao gênero Leishmania quando são mantidos em cultura por passagens sucessivas apresentam redução na infecciosidade. As cepas infectantes dos parasitos possuem maior atividade ecto-nucleotidásica do que as não infectantes. Para avaliar a existência de correlação entre o tempo de manutenção em cultura, a infecciosidade e a hidrólise de nucleotídeos em Leishmania amazonensis o parasito citado foi mantido em cultura por passagens sucessivas. Os parasitos mantidos em cultura por poucas passagens (p<15) apresentaram maior hidrólise dos nucleotídeos ATP, ADP e AMP e maior porcentagem de formas infectantes quando comparados com aqueles mantidos em cultura por várias passagens (p>100). Para avaliar o curso da infecção causada por passagens diferentes do parasito, os camundongos C57BL/6 foram inoculados na pata com formas promastigotas totais ou metacíclicas. O curso da infecção foi acompanhado por um período de oito semanas. Os camundongos inoculados com os parasitos mantidos em cultura por poucas passagens desenvolveram lesões maiores e produziram IFN- em menor quantidade quando comparados com o grupo de animais que recebeu o inóculo dos parasitos mantidos em cultura por várias passagens. Não foi verificada a produção de IL-4. O re-isolamento de parasitos, dos animais inoculados com os parasitos mantidos em cultura por várias passagens, mostra que apenas uma passagem pelo hospedeiro vertebrado não alterou a atividade ecto-nucleotidásica. O observado indica que a manutenção dos parasitos em cultura pode selecionar aqueles que apresentam reduzida atividade ecto-nucleotidásica. O tratamento dos parasitos mantidos em cultura por poucas passagens com adenosina causou alteração no metabolismo de nucleotídeos e na infecciosidade dos mesmos. Os dados sugerem a existência de correlação entre o tempo de manutenção em cultura, a infecciosidade e a atividade ecto-nucleotidásica em L. amazonensis. _______________________________________________________________________________ / ABSTRACT: It is usually accepted that maintenance of Leishmania parasites in culture leads to a decrease in the parasite’s ability to cause infection in the vertebrate host. Previous work from our laboratory suggests that the infectivity of different Leishmania species correlates with the level of ecto-nucleotidasic activity. Studies from other laboratories, also demonstrated that no infectivity strains of Leishmania amazonensis have decreased apirasic activity. Based on these evidences, the present study evaluated the correlation between the maintenance of L. amazonensis in culture for several passages (>100), the ecto-nucleotidasic activity, its infectivity and the immune response induced by the infection in C57BL/6 mice. Our results show that long term culture of L. amazonensis not only leads to decreased metacyclogenesis but, more importantly, that these parasites present reduced ecto-nucleotidasic activity. This decreased infectivity is associated with a decrease in IFN-g production by lymph node and spleen cells. Furthermore, re-isolation of long term cultured parasites from lesions of infected mice did not recover the level of ectonucleotidasic activity. Finally, we show that treatment of L. amazonensis promastigote cultures with adenosine leads to a decreased ability to hydrolyze extracellular ATP and ADP and that infection by these parasites resulted in decreased lesion development. Our results reinforce the hypothesis that infectivity by Leishmania parasites is, at least, partially dependent on the activity of ecto-nucleotidases.

Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2014-08-28T15:20:52Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_AnáliseImunogenicidadeEficácia.pdf: 1364971 bytes, checksum: a989e5ba2831ca2c1404a7c4ee79ac51 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-08-29T16:32:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_AnáliseImunogenicidadeEficácia.pdf: 1364971 bytes, checksum: a989e5ba2831ca2c1404a7c4ee79ac51 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-29T16:32:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_AnáliseImunogenicidadeEficácia.pdf: 1364971 bytes, checksum: a989e5ba2831ca2c1404a7c4ee79ac51 (MD5) Previous issue date: 2013 / É consenso que a estratégia mais racional para o controle da leishmaniose visceral, que tem como agente etiológico a Leishmania chagasi (sinonímia L. infantum), seria o emprego de uma vacina que proteja o cão impedindo o seu papel de reservatório doméstico do parasito. Assim, considerando o camundongo como modelo experimental amplamente utilizado em ensaios pré-clínicos vacinais anti-Leishmania, é de extrema importância analisar, neste modelo, candidatos vacinais de forma pareada e simultânea. Neste sentido, este projeto avaliou um ensaio pré-clínico vacinal, para análise comparativa de aspectos relacionados a imunogenicidade e eficácia dos candidatos vacinais contra leishmaniose visceral, entre os quais: Leish-Tec® (LT), Leishmune® (LM) e vacina LBSap (composta de antígeno bruto de L. braziliensis e saponina). Dessa forma, camundongos BALB/c foram imunizados com três doses de cada vacina e, após trinta dias da última dose vacinal, os animais foram desafiados experimentalmente com promastigotas de L. chagasi. Trinta dias após o desafio, os animais foram submetidos a eutanásia. Nos tempos antes da 1° dose vacinal (T0), 14 dias após a 3° dose (T1) e antes da eutanásia (T2), amostras de sangue foram coletadas do plexo orbital para realização do leucograma e avaliação do perfil imunofenotípico, ex vivo, de leucócitos circulantes. O baço e o fígado foram coletados no tempo T2 para avaliação da carga parasitária pela técnica de PCR em tempo real. Os resultados obtidos indicam que todas as vacinas são incócuas e seguras para a administração. Dentre as principais alterações relacionadas ao estabelecimento de mecanismos imunoprotetores destaca-se o aumento dos níveis de células NK CD3-CD49b+ observado em T2 para os diferentes grupos vacinais (LT, LM, LBSap). Além disto, ao se avaliar a imunidade adaptativa, foi observado no grupo LT aumento de linfócitos T totais CD3+ em T2, que pode ser associado ao aumento da subpopulação de linfócitos T CD3+CD4+ no mesmo período. De forma interessante, a imunização com vacina LBSap induziu aumento da população de linfócitos T totais CD3+ tanto após o protocolo vacinal (T1) como após o desafio experimental (T2). Este aumento relatado no grupo LBSap parece ser reflexo da expansão da população de linfócitos T CD4+ nos mesmos tempos (T1 e T2). Semelhantemente, o grupo LM apresentou este mesmo perfil de reposta imune com aumento de linfócitos T CD4+ tanto em T1 como em T2. Este perfil imunofenotípico parece ter favorecido o controle do parasitismo tecidual tanto no baço como no fígado para as diferentes vacinas avaliadas. Neste contexto, foi observada redução da carga parasitária esplênica de 36% (LT), 63% (LM) e 42% (LBSap). Além disto, a análise da carga parasitária hepática revelou redução do parasitismo de 48% (LT), 71% (LM) e 62% (LBSap). Estes resultados parecem indicar o estabelecimento de mecanismos imunoprotetores pelos diferentes imunobiológicos avaliados, compatível com a redução da carga parasitária no baço e figado de camundongos imunizados com as vacinas LT, LM e LBSap. Buscando ampliar a identificação de biomarcadores associados a indução de imunoproteção, será realizada como perspectiva a dosagem de imunoglobulinas anti-Leishmania (IgG, IgG1, IgG2a e IgG2b), bem como a análise do perfil de citocinas. ___________________________________________________________________________ / ABSTRACT: The most rational strategy to control visceral leishmaniasis, that presented Leishmania chagasi (syn. L. infantum) as etiological agent, would be the vaccine for protecting the dog and blocking the domestic parasite reservoir status. Thus, considering the experimental mouse model is widely used in anti-Leishmania vaccine pre-clinical trials, it is extremely important to analyze, in this model, vaccine candidates in a simultaneous approach. In this sense, a vaccine pre-clinical trial was performed, including analysis of immunogenicity and protection levels, in different groups, as follows: Leish-Tec®, Leishmune® and LBSap (composed by L. braziliensis antigens plus saponin). Thus, BALB/c mice were inoculated with three doses of each vaccine and challenged with L. chagasi. Thirty days post-challenge all animals were submitted to euthanasia. At the time points before the first dose (T0), after third dose (T1; 14 days after the last dose) and 30 days after L. chagasi challenge (T2) the blood was collected in order to evaluate the hemogram and ex vivo immunophenotyping in whole blood leukocytes. The spleen and liver were collected at T2 for analyzing parasite load quantified by real time PCR. Results displayed that all vaccines are safe and innocuous to the administration in mice. Among the major changes related to the establishment of imunoprotetor mechanisms NK cells (CD3-CD49b+) presented increased levels at T2 in the different vaccine groups (LT, LM, LBSap). Furthermore, the induction of adaptive immunity was observed in LT group showing higher CD3+ T-lymphocytes at T2, which can be associated with CD3+CD4+ T-subset at same time. Interestingly, LBSap immunizations induced higher CD3+ T-lymphocytes in both after vaccine protocol (T1) and experimental challenge (T2). This data would be associated in LBSap group to increased levels in the CD3+CD4+ T-subsets at the same time (T1 and T2). Similarly, LM group presented the same immune profile, displaying increased levels in CD3+CD4+ T-lymphocytes in both T1 and T2. This immunophenotypic profile seems to act in the spleen and liver parasitism control considering the different evaluated vaccines. In this context, the reduction in the spleen parasite load was 36% (LT), 63% (LM) and 42% (LBSap). Moreover, analysis in the liver parasite load demonstrated reduction of 48% (LT), 71% (LM) and 62% (LBSap). These results suggest the establishment of immunoprotection mechanisms in the different evaluated vaccines as related by control in the spleen and liver parasite burden considering LT, LM and LBSap immunized mice. Aiming to further analyze the additional biomarkers associated with immunoprotection, analyzes of anti-Leishmania immunoglobulins (IgG, IgG1, IgG2a and IgG2b) and the cytokine profile will be performed as perspective.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-05-24T17:25:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 339015.pdf: 1208047 bytes, checksum: 54c40fda1d1463ed1c22128a7d14b41d (MD5) Previous issue date: 2015 / Este estudo investigou a fauna de parasitos metazoários associada às brânquias do saramunete Pseudupeneus maculatus capturado no litoral do estado de Pernambuco, Brasil. Foram identificadas oito espécies pertencentes aos seguintes taxa: Monogenea Haliotrema caraïbensis, Haliotrema caballeroi e Haliotrema golvani); Crustacea Rocinela signata, Hamaticolax scutigerulus e Caligidae gen. sp.; Cestoda Nybelinia indica e Pseudolacistorhynchus noodti. Os parasitos mais prevalentes foram: Monogenea (100%), H. scutigerulus (35%), N. indica (11,7%), R. signata (8,3%), Caligidae gen. sp. (3,33%) e P. noodti (0,83%). O saramunete é um novo hospedeiro para R. signata e Pernambuco é uma nova localidade para H. scutigerulus.<br> / Abstract : This study investigated the parasite fauna associated with the gills of spotted goatfish Pseudupeneus maculatus captured in the dry and rainy seasons on the Coast of the Pernambuco State, Brazil. Eight species of parasites were identified belonging to the following taxa: Monogenea Haliotrema caraibense, Haliotrema caballeroi and Haliotrema golvani); Crustacea Rocinela signata, Hamaticolax scutigerulus and Caligidae gen. sp.; Cestoda Nybelinia indica and Pseudolacistorhynchus noodti. The most prevalent parasites were: Monogenea (100%), H. scutigerulus (35%), N. indica (11.7%), R. signata (8.3%), Caligidae gen. sp. (3.33%) and P. noodti (0.83%). Spotted goatfish is a new host of R. signata and Pernambuco is a new locality for H. scutigerulus.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 323983.pdf: 15967957 bytes, checksum: 73e988954f562fc25856a73113d136bb (MD5) Previous issue date: 2013 / Neste estudo investigou-se a biologia e a influência da temperatura e da salinidade da água sobre o desenvolvimento de Aphanoblastella mastigatus (Dactylogyridae), parasito do jundiá Rhamdia quelen, em condições experimentais. Para tanto, tornou-se evidente a necessidade de desenvolver uma técnica prática e capaz de oferecer condições ambientais controladas nesse tipo de estudo. Assim, um aparelho novo e fácil de ser construído para coleta de ovos de Monogenea é descrito e ilustrado. Espécimes de A. mastigatus coletados nas brânquias do jundiá foram caracterizados morfologicamente. Informações adicionais sobre a morfologia da espécie são propostas, assim como uma chave dicotômica para identificação de Aphanoblastella. A embriogenia de A. mastigatus ocorreu em 72 horas. A larva nadou ativamente por aproximadamente três horas; os movimentos foram rápidos e erráticos, intercalados com pequenos períodos de descanso, onde a larva nadou lentamente por alguns segundos. Oncomiracídio com células ciliadas em três zonas; haptor armado com sete pares de ganchos e um par de âncoras dorsais. Dois dias após adesão ao hospedeiro, uma delicada barra dorsal foi observada no haptor da pós-oncomiracídio. Quatro a cinco dias após adesão, a pós-larva aumentou em tamanho e completou o desenvolvimento do haptor. Acredita-se que A. mastigatus pode atingir maturidade sexual sete dias após adesão ao hospedeiro. A temperatura da água não influenciou significativamente a taxa de oviposição nem o sucesso de infestação de A. mastigatus nas temperaturas analisadas; por outro lado, a adição de cloreto de sódio (9 g/l) na água inviabilizou não só a sobrevivência do parasito mas também a viabilidade dos ovos. Esse resultado indica que seu uso é eficiente como tratamento profilático. Futuros estudos são recomendados utilizando intervalos de temperatura e intensidades de infestação maiores para verificar a influência da temperatura na longevidade larval e sucesso de infestação de A. mastigatus. <br>

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-10-19T12:45:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 339015.pdf: 1208047 bytes, checksum: 54c40fda1d1463ed1c22128a7d14b41d (MD5) Previous issue date: 2015 / Este estudo investigou a fauna de parasitos metazoários associada às brânquias do saramunete Pseudupeneus maculatus capturado no litoral do estado de Pernambuco, Brasil. Foram identificadas oito espécies pertencentes aos seguintes taxa: Monogenea Haliotrema caraïbensis, Haliotrema caballeroi e Haliotrema golvani); Crustacea Rocinela signata, Hamaticolax scutigerulus e Caligidae gen. sp.; Cestoda Nybelinia indica e Pseudolacistorhynchus noodti. Os parasitos mais prevalentes foram: Monogenea (100%), H. scutigerulus (35%), N. indica (11,7%), R. signata (8,3%), Caligidae gen. sp. (3,33%) e P. noodti (0,83%). O saramunete é um novo hospedeiro para R. signata e Pernambuco é uma nova localidade para H. scutigerulus.<br> / Abstract : This study investigated the parasite fauna associated with the gills of spotted goatfish Pseudupeneus maculatus captured in the dry and rainy seasons on the Coast of the Pernambuco State, Brazil. Eight species of parasites were identified belonging to the following taxa: Monogenea Haliotrema caraibense, Haliotrema caballeroi and Haliotrema golvani); Crustacea Rocinela signata, Hamaticolax scutigerulus and Caligidae gen. sp.; Cestoda Nybelinia indica and Pseudolacistorhynchus noodti. The most prevalent parasites were: Monogenea (100%), H. scutigerulus (35%), N. indica (11.7%), R. signata (8.3%), Caligidae gen. sp. (3.33%) and P. noodti (0.83%). Spotted goatfish is a new host of R. signata and Pernambuco is a new locality for H. scutigerulus.

Orientador : Profª. Drª. Andréa Emilia Marques Stinghen / Coorientador : Profª. Drª. Wesley Maurício de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciencias Biológicas (Microbiologia, Parasitologia e Patologia Básica). Defesa: Curitiba, 16/02/2016 / Inclui referências : f. 54-61 / Resumo: p-Cresil Sulfato (PCS) e Indoxil Sulfato (IS) são toxinas urêmicas ligadas à proteínas, responsáveis por muitas das consequências clínicas da uremia, tais como a disfunção endotelial na doença renal crônica (DRC). Os transportadores de ânions orgânicos (OATs), representam uma família de transportadores que medeiam a absorção de uma vasta gama de moléculas e também de toxinas urêmicas por células tubulares proximais. No presente estudo investigamos a captação de PCS e IS por OAT1 e OAT3 em células endoteliais vasculares humanas. O PCS foi sintetizado a partir de seu precursor p-cresol através de sulfatação utilizando ácido clorossulfônico/KOH a fim de obter um sal de potássio. A caracterização do PCS foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), espectrometria de massa (EM) e Ressonância Magnética Nuclear de H1 e C13. As células endoteliais humanas foram tratadas com as concentrações normal, urêmica e urêmica máxima de PCS (0,08, 1,75 e 2,6 mg/L) e IS (0,6, 53 e 236 mg/L) respectivamente, com e sem Probenicid (Pb), comumente utilizado como agente uricosúrico, e descrito como um inibidor de OATs. A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio de Brometo de 3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio (MTT). A captação de PCS e IS foi avaliado em extratos de células endoteliais à 4 e 37ºC por CLAE. OAT1 e OAT3 foram avaliados por western blot e imunocitoquímica. A expressão da quimiocina monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) foi avaliada por ELISA em sobrenadante de células endoteliais tratadas com PCS e IS com e sem Pb após cinética de 0, 3 e 6 h. A viabilidade celular diminuiu significativamente após 24 h de tratamento com PCS (P<0,05) e IS (P<0,001) de uma forma dose dependente para IS, e foi restabelecida após o tratamento com Pb. A captação de PCS e IS analisados por CLAE mostrou que a 37ºC ocorre a internalização celular de PCS e IS, e quando o Pb foi adicionado, houve a inibição da captação para ambas as toxinas, o que sugere que os OATs estão envolvidos na captação e transporte celular de PCS e IS. Além disso, à 4ºC foi observada uma internalização diminuída. A análise por western blot e imunocitoquímica mostraram que tanto OAT1 quanto OAT3 estão envolvidos na captação de PCS e IS em células endoteliais, com maior expressão de OAT1. A expressão de MCP-1 foi aumentada após 3 e 6 h de tratamento com PCS e IS, mas diminuiu após o tratamento com Pb. Em conclusão, PCS e IS servem como substratos para OATs em células endoteliais humanas e sua captação é mediada por estes transportadores. O bloqueio seletivo dos OATs pode servir como uma estratégia terapêutica para inibir a expressão de biomarcadores inflamatórios vasculares, tais como a quimiocina MCP-1, uma das principais moléculas no processo de aterosclerose urêmica. Nossos resultados podem ser úteis para melhor compreender os mecanismos celulares e moleculares da toxicidade urêmica em pacientes com DRC e reverter em novas estratégias terapêuticas nestes pacientes. Palavras-chave: toxicidade urêmica, p-cresil sulfato, indoxil sulfato, OATs, captação. / Abstract: Protein bound uremic toxins such as p-cresyl sulfate (PCS) and indoxyl sulfate (IS) are responsible for many of the uremia clinical consequences, such as endothelial dysfunction in chronic kidney disease (CKD) patients. Organic anion transporters (OATs), are a family of transporters that mediate the uptake of a wide range of molecules, and have being enrolled in the uptake of uremic toxins on e.g. proximal tubular cells. In this study we investigated whether OAT 1 and OAT 3 are enrolled in the uptake of PCS and IS in human vascular endothelial cells. PCS was synthesized by p-cresol sulfatation using chlorosulfonic acid/KOH in order to obtain a potassium salt, and characterized by high performance liquid chromatography (HPLC), mass spectrometry (MS) and 13C and 1H Nuclear Magnetic Resonance Spectra. Indoxyl sulfate was purchased commercially. Human endothelial cells (E.A.hy 926 - ATCC CRL 2922) were treated with normal, uremic and maximum uremic concentrations of PCS (0.08 mg/L, 1.75 mg/L and 2.6 mg/L) and IS (0.6 mg/L, 53 mg/L and 236 mg/L) respectively, with and without Probenicid (Pb), commonly used as a uricosuric agent and described as an OAT inhibitor. Cell viability was assessed by MTT. The PCS and IS up take was analyzed in endothelial cells extracts at 4°C and 37°C by High-performance liquid chromatography (HPLC). OAT 1 and OAT 3 were assessment by western blot and immunocytochemistry. Cell viability decreases after 24h of PCS (P<0,05) and IS (P<0,001) treatment in a dose dependent manner. The uptake of PCS and IS in cells extracts analyzed by HPLC, showed that at 37 ºC the cell internalization occurs for PCS and IS and when Pb was added, there was no evidence of both toxins, suggesting that OATs are involved in the active cellular transport of PCS and IS. In addition no uptake activity was noted at 4°C. Western blot and immunocytochemistry analysis showed that both OAT1 and OAT3 are involved in the uptake of PCS and IS in endothelial cells, with larger contribution by OAT1. MCP-1 expression increased after 3 and 6h of PCS and IS treatment, but decreased after Pb treatment. In conclusion, PCS and IS serve as OATs substrates in human endothelial cells and their uptake is mediated by OATs. The selective blockage of OATs could serve as a therapeutic strategy to inhibit he expression of vascular inflammatory biomarkers, such as Protein MCP-1, one of the main molecules in the uremic atherosclerosis process. Our findings could be useful to better understand the cellular and molecular mechanisms of uremic toxicity in CKD patients. Key-words: uremic toxicity, p-cresyl sulfate, indoxyl sulfate, OATs, uptake.

Orientadora : Drª Giseli Klassen / Coorientador : Prof. Dr. Emanuel M. de Souza / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciencias Biológicas (Microbiologia, Parasitologia e Patologia Básica). Defesa: Curitiba, 14/10/2016 / Inclui referências : f. 68-88 / Área de concentração: Patologia / Resumo: O câncer de mama é o tipo de câncer que mais acomete as mulheres em todo o mundo, tanto em países desenvolvidos como em países em desenvolvimento. É uma doença heterogênea, com diferenças em suas características clínicas, moleculares e biológicas. Tradicionalmente, os marcadores de imunohistoquímica em conjunto com os parâmetros clínico-patológicos são usados para classificar esse tipo de câncer e prever a evolução da doença. Dentre os subtipos moleculares de câncer de mama, os carcinomas triplo negativo (TNG) são definidos pela ausência de expressão de receptores hormonais e do gene HER2. Cerca de e 80% dos TNG apresentam o fenótipo basal, por expressar proteínas que caracterizam células mesenquimais e são denominados como o subtipo basalóide (BLBC) de câncer de mama. Os TNG são os subtipos mais agressivos de câncer de mama, com pior prognóstico, e ausência de terapia específica. Estudos anteriores do grupo de pesquisa, evidenciaram que o gene ADAM33, pode ser silenciado por hipermetilação do DNA no câncer de mama. Diversas proteínas da família ADAM já foram relacionadas ao desenvolvimento e progressão de tumores. Diante dessas observações, a expressão diferencial do gene ADAM33 motivou ao nosso grupo de pesquisa investigar se a proteína ADAM33 poderia ser utilizada como um biomarcador no câncer de mama. No presente estudo, foram produzidos anticorpos monoclonais contra a proteína ADAM33 para que esse pudesse ser utilizado em ensaios de imunohistoquímica em amostras parafinadas de câncer de mama. Para isso, após a obtenção de um hibridoma secretor e ensaios de caracterização de anticorpo monoclonal, esse foi utilizado, juntamente com um painel de marcadores moleculares (RE, PR, HER2, EGFR, CK 5/6, CK14, CK17, c-Kit e Ki- 67) em 212 amostras de tumores de mama. E pode-se comparar os escores da proteína ADAM33 com os dados clínico-patológicos das pacientes, para determinar sua importância como um marcador de prognóstico ou preditivo para o câncer de mama. A baixa expressão da proteína ADAM33 foi relacionada com TNG e BLBC, e com uma menor sobrevida global e sobrevida livre de metástases. O achado mais importante deste trabalho é que a baixa expressão de ADAM33 no câncer de mama tem um valor prognóstico independente. A diminuição da expressão dessa proteína está associada ao risco de desenvolvimento de metástases e morte. Assim, a avaliação de ADAM33 por IHQ poderia ser utilizado como um marcador de prognóstico para os subtipos TNG e BLBC. / Abstract: Breast cancer is the most common cancer in women around the world. It is a heterogeneous disease with differences in its clinical, molecular and biological features. Traditionally, immunohistochemical markers together with clinicopathologic parameters are used to classify breast cancer and to predict disease outcome. Triplenegative breast cancer (TNBC) is a particular type of breast cancer that is defined by a lack of expression of hormonal receptors and HER2 gene. About 80% of TNBC also have a basal-like phenotype (BLBC) with expression of cytokeratin 5/6 and/or EGFR, characterized by protein expression of mesenchymal cells. TNG are the most aggressive subtypes of breast cancer with worse prognosis and lack of specific therapy. In that regard, the ADAM33 gene is silenced by DNA hypermethylation in breast cancer, which suggests that ADAM33 might be useful as a molecular marker. In the present study, we have produced monoclonal antibodies against the ADAM33 protein and have investigated role of ADAM33 protein in 212 breast tumor samples breast cancer. We compare clinicopathological information and the expression of a panel of IHC markers (ER, PR, HER2, EGFR, CK 5/6, CK14, CK17, c-Kit and Ki67) with the ADAM33 protein scores to determine whether ADAM33 protein is clinically efficient as a prognostic or predictive marker for breast cancer. We compare the ADAM33 protein scores with clinicopathological data from 212 patients to determine their importance as a predictor and prognostic marker for breast cancer. The low expression of ADAM33 protein was related to TNBC and BLBC, and with a lower overall survival and metastasis-free survival. The most important finding of this study is that low ADAM33 expression in breast cancer has an independent prognostic value. Decreasing the expression of this protein is associated with risk of development of metastases and death. Thus, the evaluation of ADAM33 protein by IHC could be used as a prognostic marker for TNBC and BLBC subtypes.