Orientador : Quivo S. Tahin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:01:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guimaraes_Fernando_M.pdf: 6409808 bytes, checksum: b00bbe4789b48d0d1db9bccfd6503ad3 (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: O modelo experimental que utiliza a 7.12-dimetilbenzantraceno CDMBA) para induzir dose única do a tumorgênese mamária tem permitido confirmar a importância da ingestão de lipídios no desenvolvimento tumoral. Tem-se atribuido aos ácidos graxos constituintes dos lipídios dietários. Segundo a familia a qual pertencem. alterações observadas no tempo de aparecimento e o número de tumores mamários. após a indução química da tumor gênese. Dessa forma dietas ricas em ácidos graxos poliissaturados CAGPl) da familia n-6 são mais efetivos no crescimento tumoral do que ácidos graxos saturados CAGS) e há evidências de que os ácidos graxos poliinsaturados da familia n-3 teriam um efeito inibitório no crescimento tumoral. Foi objetivo deste pelos trabalho observar as possíveis alterações promovidas lipidios dietários e/ou agente cancerígeno. Afetando o desenvolvimento de ductos e estruturas terminais da glândula mamária, alterações nas populações de células epiteliais dos tipos escuras coe) e intermediárias ClC) é ainda nas populações de mastócitos e eosinófilos relacionados ao tecido mamário. Para Tanto ratas Sprague-Dawley foram alimentadas logo após o desmame com dietas semi-sintéticas. isocalóricas contendo 10% de lip1dios provenierites de diferentes fontes: 1) óleo de girassol COG). rico em ácidos graxos da fam11ia _-6; 2) óleo de sardinha (OS) rico em ácidos graxos n-3 e 3) óleo de coco COC) rico em ácidos graxos saturados. Foram administrados 20 mg de DMBA por intubação gástrica aos 45 dias de idade. Após o término do experimento Caos 60 dias de idade) a segunda glândula mamária toráxica direita foi retirada e processada de forma a se obter montagens totais das mesmas o que permitiu o exame anatómico da estrutura glandular. Em seguida as montagens totais foram desfeitas para inclusão em parafina e corne seriado das glândulas mamárias. Foi observado ao n1vel das montagens totais alterações morfológicas entre as glâdulas mamárias dos diferentes grupos. dietários. Nas glândulas mamárias das ratas alimentadas com a dieta OG ou OC foram obervados um maior número de alvéolos do que nódulos terminais. enquanto naquelas alimentadas com a dieta OS havia maior número de nódulos terminais que alvéolos. Estes resultados indicam graus de amadurecimento glandular diferentes entre os grupos dietários. As populações de De mostraram-se significativamente alteradas entre ratas tratadas com DMBA e seuS respectivos controles. nos ductos do grupo dietário OG (controles 14.69 :t2.34 e tratados com DMBA 13.61 :t2.34) e alvéolos dos rupos dietários OS (controles 15.15 :t2.13 e tratados com DMBA 13.42 :t1 . 94) eoc (controles 15.73 tl.62 e tratados com DMBA 14.05 :t1.93). os quais apresentaram uma redução no número destas células A população de IC mostrou-se significativamente aumentada nas ratas tratadas com DMBA em-relação as controles nogrupo dietário OG. afetando ductos(controles 1.33 :t0.35 e tratados com DMBA 2.31 :t1.44) e alvéolos (controles 1.06 :t0.42 e tratados com DMBA 2.43 :tl.09). Foram observados um menor número de e o sinófilos nas glándulas mamárias de ratas tratadas com DMBA em relação às controles nos grupos dietários ricos em AGPI (OG p< 0.0005 e OS p< 0.005). enquanto na dieta OC (rica em AGS) ocorreu o inverso (p< 0.05). De um modo geral as glândulas de ratas tratadas com DMBA apresentaram um maior número de mastócitos do que o das ratas controles. alteração significativa nas dietas OG Cp< 0.01). OS (p< 0.01) e OC (p< 0.0006). As alterações observadas ao nível das montagens totais :foram discutidas em :função do baixo conteúdo de ácido linoléico na dieta OS e possivel ação dos AGPI n-3. presentes nesta dieta sobre o metabolismo dos AGPI n-6. As alterações nas populações de células epiteliais. Principalmente IC. . sugerem tratar ¿se dos primeiros eventos observados durante acarcinogênese mamária experimental. As variações observadas nas populações de mastócitos e eosinófilos foram discut.idas tanto em termos de uma ação dos liídeos dietários como pela ação experimental associada ao DMBA / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas

Las enfermedades pulmonares intersticiales difusas (EPID), constituyen un grupo variado de trastornos inflamatorios difusos de las vías aéreas inferiores causadas por inflamación, fibrosis (cicatritzación) de las paredes alveolares y grosor del espacio intersticial. Como muchas de estas EPID dan lugar a la formación de fibrosis, también se las llama fibrosis pulmonar (FP). Tanto la fisiopatología de la enfermedad como los mecanismos bioquímicos que se desencadenan son poco conocidos. La lesión pulmonar inducida por fármacos como la bleomicina, es heterogénea y rápida en su inicio, con una fase de alveolitis inicial caracterizada por la presencia de edema intersticial y de infiltración de células inflamatorias como los neutrófilos, macrófagos y limfocitos, que a su vez conducirán a una proliferación de los fibroblastos. Después hay una segunda fase, más fibrótica, que se caracteriza por la deposición de colágeno y de otros componentes de la matriz extracelular que resultarán en una distorsión de la arquitectura pulmonar. Como creemos que los parámetros biomecánicos pueden ser de gran utilidad en el seguimiento de las estrategias terapéuticas así como también del conocimiento general de la historia natural de las EPID, queremos saber cuál es la influencia de la respuesta inflamatoria en las diferentes fases evolutivas de la FP sobre la biomecánica del parénquima. Por eso utilizamos un modelo murino de lesión pulmonar de dos semanas o de un mes de durada, inducida por dosis única o dosis repetidas de bleomicina respectivamente. En el primer trabajo, utilizamos tiras de paánquima pulmonar para el estudio biomecánico (elastancia, resistencia (R0) e histeresividad (mi(0)) los días 3, 7 y 15 después de una instilación única sub-letal de bleomicina. Se analizaron también el impacto de la inflamación pulmonar (mieloperoxidasa (MPOL), índice de inflamación pulmonar (LI) y el contenido de agua pulmonar (WL)) y de la remodelación pulmonar (hidroxiprolina (HPL) y fibras elásticas) en los mismos días en los que se hizo el estudio mecánico. Los hallazgos más significativos sugieren que este modelo proporciona nuevas evidencias para la comprensión de la fisiopatología de la lesión pulmonar inducida por bleomicina y la relación entre los cambios inflamatorios y la mecánica del tejido pulmonar. Los parámetros disipativos del tejido pulmonar se vieron modificados después de la lesión: tanto R0 como mi(0) estuvieron correlacionadas con la MPOL, WL y LI. No encontramos correlaciones significativas entre HPL y los parámetros mecánicos, pero si de la elastina con mi(0) i el grosor de la paret alveolar. En el segundo trabajo, usamos tiras de parénquima pulmonar para hacer el estudio mecánico el día 28 después de una instilación única sub-letal o después de tres dosis de bleomicina cada dos semanas. Se analizó el impacto de la inflamación pulmonar (MPOL y LI) y de la remodelación pulmonar (fibras de colágeno) en los mismos días en que se hizo el estudio mecánico. En el modelo de tres dosis repetidas por bleomicina se halló una infiltración de células inflamatorias, un incremento de la MPO y de las fibras de colágeno, la presencia de focos fibroblásticos y un aumento tanto de la elastancia (H) como de la amortiguación tisular (G), 28 dáas después de la última dosis. Sin embargo, en el modelo de dosis única, el colágeno aumentó sin que hubiesen cambios significativos en la mecánica pulmonar.

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003-12-12Bitstream added on 2015-01-26T13:30:15Z : No. of bitstreams: 1 000214602.pdf: 7397115 bytes, checksum: 517e467c2c728fcb27cd32698e43ccc4 (MD5) / O objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento de candidose e a recuperação de Candida albicans na cavidade bucal de ratas controles e ovariectomizadas. Foram utilizadas 124 ratas não portadoras do gênero Candida na cavidade bucal, divididas em dois grupos: controle e ovariectomizado. Em cada grupo, quatro ratas foram utilizadas para avaliação morfológica do dorso da língua por microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura; e 58 ratas receberam inoculações de C. albicans para estudo da candidose e recuperação de leveduras. O desenvolvimento de candidose no dorso da língua foi observado em microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura nos períodos de seis horas, 24 horas, sete e 15 dias após a última inoculação. A recuperação de C. albicans foi realizada através de coletas de amostras bucais em intervalos de tempo de um, dois, cinco, sete dias, e progressivamente, a cada 15 dias até a obtenção de culturas negativas para leveduras. Os resultados foram analisados estatisticamente pelos testes t de Student e Mann-Whitney. A morfologia do dorso da língua das ratas do grupo ovariectomizado não infectado por Candida foi semelhante ao controle. Entre as ratas infectadas, o grupo ovariectomizado exibiu menor quantidade de lesões de candidose em relação ao controle. A recuperação de C. albicans da cavidade bucal dos animais ovariectomizados foi inferior aos controles em todos os períodos de observação. Concluiu-se que a candidose e a recuperação de C. albicans na cavidade bucal das ratas foram menos freqüentes no grupo ovariectomizado em relação ao controle / The purpose of this work was to observe the development of candidosis and the recovery of C. albicans from the oral cavity of control and ovariectomized rats. Hundred twenty-four rats originally negative for the Candida spp. in the oral cavity were divided into two groups: control and ovariectomized. ln each group, four rats were used for tongue dorsum morphologic analysis by optical microscope and scanning electron microscope; and 58 rats received inoculations of C. albicans for the study of candidasis and recovery of yeasts. The development of candidosis on the tongue dorsum was observed in optical microscope and scanning electron microscope in the periods of six hours, 24 hours, seven days and 15 days after the last inoculation. The recovery of C. albicans was performed through oral samples collected at one, two, tive, seven days and progressively at each 15 days until negative cultures for the yeasts were obtained. The results were statistically analyzed by the t-student and Mann-Whitney tests. The tongue dorsum of the control and ovariectomized rats, not infected by Candida, presented normal aspect. Among lhe infected rats, the ovariectomized group showed less quantity of candidosis lesions in relation to control. The recovery of C. albicans from the oral cavity of ovariectomized animals was lower in relation to control in all periods of observation. lt could be concluded lhat candidosis and recovery of C. albicans ln the oral cavity of rats were less frequent in the ovariectomized group in relation to control

Made available in DSpace on 2016-08-12T18:48:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-05-27. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T18:50:49Z : No. of bitstreams: 1 000330860.pdf: 13047534 bytes, checksum: 92d77fe97cf0c27c557f8015600c47df (MD5) / Este trabalho destinou-se a avaliar os efeitos dos diferentes períodos de início da terapia de reposição hormonal estrogênica na evolução da periodontite induzida em ratas ovariectomizadas. Para tanto foram utilizadas 65 ratas ovariectomizadas aos três meses de idade, compondo dois grupos, experimental e controle, que receberam 17ß estradiol ou placebo respectivamente, em diferentes períodos de início; possibilitando a formação de cinco subgrupos de cada situação, de acordo com o período de início do tratamento/placebo: imediato, uma, duas, três e quatro semanas após a ovariectomia. A formação de um terceiro grupo (grupo sham), em que foi realizada a simulação da ovariectomia, possibilitou a comparação dos eventos ocorridos entre as ratas estrógeno deficiente com as ratas estrógeno suficiente. Após quatro semanas da ovariectomia ou de sua simulação foi colocada uma ligadura com fio de algodão ao redor da coroa dos segundos molares da maxila, mantida por cinco semanas, quando as ratas foram sacrificadas. Realizaram-se análises macroscópicas, como grau de mobilidade dentária, envolvimento de furca ou perda óssea alveolar, radiográfica, onde foi avaliado o suporte ósseo, histológica e histomorfométrica. Os resultados revelaram que a depleção do estrógeno decorrente da ovariectomia, não teve efeito direto no osso alveolar adjacente às raízes dos segundos molares da maxila. De acordo com as condições experimentais, a terapia de reposição hormonal estrogênica não retardou a progressão da periodontite induzida / The aim of this study was to investigate the effect of different periods of estrogen replacement therapy onset on the progression of experimental periodontitis in ovariectomized rats. Sixty five female Wistar rats were ovariectomized and divided into two groups, experimental and control that received 17ß estradiol or vehicle, respectively. Each group was subdivided into five subgroups that started the treatment immediately, one, two, three and four weeks after the ovariectomy. Another eight rats underwent sham surgery. A month after ovariectomy or sham surgeries, a cotton ligature was placed around the maxillary second molars. Thirty five days after ligature placement, the animals were killed. It was analyzed the macroscopic, radiographic, microscopic and histometric aspects of the periodontal area. The results indicated that estrogen-deficient state may not have a direct effect on the alveolar bone adjacent to the maxillary second molar roots. Under the conditions of this experiment, estrogen replacement therapy did not delay the progression of induced periodontitis

Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnológico / Heme (Ferro Protoporfirina IX), uma molécula ubíqua presente em organismos de todos os reinos, é composta de um átomo de ferro ligado a um anel tetrapirrólico. Como grupamento prostético de apoproteínas inativas, o heme desempenha várias funções biológicas determinadas em parte pelo polipeptídeo associado a ele. Doenças de hemólise elevada ou dano celular extensivo podem levar a altos níveis de heme livre , como a anemia falciforme, malária, febres hemorrágicas e sepse. O heme induz estresse oxidativo e tem diversas propriedades próinflamatórias. Uma das principais características da resposta inflamatória é o recrutamento de leucócitos da vasculatura para os tecidos. O heme parece afetar este processo de muitas maneiras: a) induzindo a expressão de moléculas de adesão em células endoteliais in vitro ou in vivo; b) aumentando a permeabilidade vascular; c) aumentando a expressão e secreção de quimiocinas; d) induzindo a migração de leucócitos in vivo e in vitro. O mecanismo pelo qual o heme ativa as células do sistema imune inato causando inflamação não é totalmente compreendido. Nós recentemente observamos que o heme ativa macrófagos através do TLR-4. Considerando que o heme induz a migração de neutrófilos in vitro, nós hipotetizamos que o heme tenha um efeito quimiotático direto sobre este leucócito através da ativação de um receptor acoplado a proteína G. Nós mostramos que o heme induz a migração de neutrófilos in vivo e in vitro e estimula a secreção de citocinas de forma dose-dependente. Sangue, hemoglobina e diversos análogos do heme apresentam uma capacidade semelhante em recrutar neutrófilos in vivo. Por outro lado, a biliverdina e as mesoporfirinas não são eficientes em recrutar neutrófilos e o tratamento com mesoporfirina in vivo inibe o efeito do heme sobre o recrutamento. Finalmente, o efeito quimiotático do heme foi revertido com o uso de toxina pertussis. Tomados em conjunto, estes resultados sugerem que o heme induza a quimiotaxia de neutrófilos através da ativação de um receptor acoplado a proteína G. / Heme (Iron Protoporphyrin IX), a ubiquitous molecule present in organisms of all kingdoms, is composed of an atom of iron linked to the four ligand groups of porphyrin. As a prosthetic moiety on inactive apo-heme proteins, heme provides a wide range of biological functions determined in part by the polypeptide associated to it. Diseases of increased hemolysis or extensive cell damage can lead to high levels of free heme, as sickle cell anemia, malaria, hemorrhagic fevers, and sepsis. Heme induces oxidative stress and has several proinflammatory activities. A hallmark of the inflammatory response is the recruitment of leukocytes out of the vasculature to tissues. Heme seems to affect this process in several ways: a) inducing cell adhesion molecule expression on endothelial cells in vitro or in vivo; b) increasing vascular permeability; c) enhancing chemokine expression and secretion; d) inducing migration of leukocytes in vivo and in vitro. The mechanism by which heme activates cells of the innate immune system causing inflammation is not fully characterized. We have recently observed that heme activates macrophages through TLR-4. Considering that heme induces neutrophil migration in vitro, we hypothesize that heme has a direct chemotactic effect on this leukocyte through activation of a G protein coupled receptor. In the present work we show that heme induces neutrophil migration in vivo and in vitro and stimulates the secretion of the inflammatory cytokines, IL-6 and TNF-a, in a dose-dependent fashion. Blood, hemoglobin and diverse heme analogs are also able to induce neutrophil recruitment. In contrast, biliverdin and mesoporphyrins are not efficient to recruit neutrophil and mesoporphyrin treatment in vivo inhibits the heme-induced neutrophil migration. Finally, the chemotactic effect of heme was abolished by pertussis toxin treatment in vitro . Taken together, these results suggest that heme induces neutrophil chemotaxis by activation of a G protein coupled receptor.

Orientador: Yasmin Rodarte carvalho / Banca: José Tadeu Tesseroli de Siqueira / Banca: Vanessa Soares Lara / Banca: Adriana Aigotti Haberbeck Brandão / Banca: Nelson Luiz de Macedo / Resumo: Este trabalho destinou-se a avaliar os efeitos dos diferentes períodos de início da terapia de reposição hormonal estrogênica na evolução da periodontite induzida em ratas ovariectomizadas. Para tanto foram utilizadas 65 ratas ovariectomizadas aos três meses de idade, compondo dois grupos, experimental e controle, que receberam 17ß estradiol ou placebo respectivamente, em diferentes períodos de início; possibilitando a formação de cinco subgrupos de cada situação, de acordo com o período de início do tratamento/placebo: imediato, uma, duas, três e quatro semanas após a ovariectomia. A formação de um terceiro grupo (grupo sham), em que foi realizada a simulação da ovariectomia, possibilitou a comparação dos eventos ocorridos entre as ratas estrógeno deficiente com as ratas estrógeno suficiente. Após quatro semanas da ovariectomia ou de sua simulação foi colocada uma ligadura com fio de algodão ao redor da coroa dos segundos molares da maxila, mantida por cinco semanas, quando as ratas foram sacrificadas. Realizaram-se análises macroscópicas, como grau de mobilidade dentária, envolvimento de furca ou perda óssea alveolar, radiográfica, onde foi avaliado o suporte ósseo, histológica e histomorfométrica. Os resultados revelaram que a depleção do estrógeno decorrente da ovariectomia, não teve efeito direto no osso alveolar adjacente às raízes dos segundos molares da maxila. De acordo com as condições experimentais, a terapia de reposição hormonal estrogênica não retardou a progressão da periodontite induzida / Abstract: The aim of this study was to investigate the effect of different periods of estrogen replacement therapy onset on the progression of experimental periodontitis in ovariectomized rats. Sixty five female Wistar rats were ovariectomized and divided into two groups, experimental and control that received 17ß estradiol or vehicle, respectively. Each group was subdivided into five subgroups that started the treatment immediately, one, two, three and four weeks after the ovariectomy. Another eight rats underwent sham surgery. A month after ovariectomy or sham surgeries, a cotton ligature was placed around the maxillary second molars. Thirty five days after ligature placement, the animals were killed. It was analyzed the macroscopic, radiographic, microscopic and histometric aspects of the periodontal area. The results indicated that estrogen-deficient state may not have a direct effect on the alveolar bone adjacent to the maxillary second molar roots. Under the conditions of this experiment, estrogen replacement therapy did not delay the progression of induced periodontitis / Doutor

Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Sheila Cavalca Cortelli / Banca: Elizabete Brasil dos Santos / Banca: Luiz Eduardo Blumer Rosa / Banca: Yasmin Rodarte Carvalho / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento de candidose e a recuperação de Candida albicans na cavidade bucal de ratas controles e ovariectomizadas. Foram utilizadas 124 ratas não portadoras do gênero Candida na cavidade bucal, divididas em dois grupos: controle e ovariectomizado. Em cada grupo, quatro ratas foram utilizadas para avaliação morfológica do dorso da língua por microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura; e 58 ratas receberam inoculações de C. albicans para estudo da candidose e recuperação de leveduras. O desenvolvimento de candidose no dorso da língua foi observado em microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura nos períodos de seis horas, 24 horas, sete e 15 dias após a última inoculação. A recuperação de C. albicans foi realizada através de coletas de amostras bucais em intervalos de tempo de um, dois, cinco, sete dias, e progressivamente, a cada 15 dias até a obtenção de culturas negativas para leveduras. Os resultados foram analisados estatisticamente pelos testes t de Student e Mann-Whitney. A morfologia do dorso da língua das ratas do grupo ovariectomizado não infectado por Candida foi semelhante ao controle. Entre as ratas infectadas, o grupo ovariectomizado exibiu menor quantidade de lesões de candidose em relação ao controle. A recuperação de C. albicans da cavidade bucal dos animais ovariectomizados foi inferior aos controles em todos os períodos de observação. Concluiu-se que a candidose e a recuperação de C. albicans na cavidade bucal das ratas foram menos freqüentes no grupo ovariectomizado em relação ao controle / Abstract: The purpose of this work was to observe the development of candidosis and the recovery of C. albicans from the oral cavity of control and ovariectomized rats. Hundred twenty-four rats originally negative for the Candida spp. in the oral cavity were divided into two groups: control and ovariectomized. ln each group, four rats were used for tongue dorsum morphologic analysis by optical microscope and scanning electron microscope; and 58 rats received inoculations of C. albicans for the study of candidasis and recovery of yeasts. The development of candidosis on the tongue dorsum was observed in optical microscope and scanning electron microscope in the periods of six hours, 24 hours, seven days and 15 days after the last inoculation. The recovery of C. albicans was performed through oral samples collected at one, two, tive, seven days and progressively at each 15 days until negative cultures for the yeasts were obtained. The results were statistically analyzed by the t-student and Mann-Whitney tests. The tongue dorsum of the control and ovariectomized rats, not infected by Candida, presented normal aspect. Among lhe infected rats, the ovariectomized group showed less quantity of candidosis lesions in relation to control. The recovery of C. albicans from the oral cavity of ovariectomized animals was lower in relation to control in all periods of observation. lt could be concluded lhat candidosis and recovery of C. albicans ln the oral cavity of rats were less frequent in the ovariectomized group in relation to control / Doutor

En trasplante hepático (TH), la lesión por isquemia-reperfusión (I/R) es la causa principal tanto del mal funcionamiento como del fallo primario del injerto hepático. Y si esto ocurre en hígados sanos, aun son mayores los casos de mal función o fallo primario cuando el injerto es esteatósico, ya que estos hígados toleran peor que los normales la lesión por I/R. Además, la esteatosis es la causa del mayor número de hígados no aptos para el trasplante, acentuando la problemática de la falta de injertos para TH. Por ello, es evidente la necesidad de desarrollar estrategias protectoras para minimizar los efectos adversos de la lesión por I/R en hígados esteatósicos. Los efectos perjudiciales del Sistema Renina-Angiotensina (RAS) y de la proteína transportadora de retinol tipo 4 (RBP4) en varias patologías están bien documentados pero no se sabe si estarían implicados en la lesión por I/R en TH. Por otro lado, el precondicionamiento isquémico (PCI) basado en la inducción de breves periodos de I/R, reduce la lesión por I/R asociada a TH, pero se desconocen en gran parte sus mecanismos protectores. En la presente tesis se investigó el papel del RAS y del RBP4 en la lesión por I/R en injertos esteatósicos y no esteatósicos sometidos a TH, así como su implicación en los beneficios del PCI. Además de esto, se evaluaron los mecanismos de protección de estrategias farmacológicas o quirúrgicas, como el PCI capaces de modular el RAS y el RBP4 en ambos tipos de injertos. Para alcanzar estos objetivos, se utilizó el modelo experimental de TH ortotópico utilizando ratas de la cepa Zucker. Los resultados obtenidos indicaron que la Angiotensina II, principal efectora del RAS, está implicada en la lesión por I/R en injertos hepáticos no esteatósicos, pero no en los beneficios del PCI. Asimismo se demostró que los antagonistas de los receptores de la Angiotensina II protegieron a los injertos no esteatósicos a través de la sobrerregulación de la ERK1/2. Estas estrategias no fueron de utilidad en presencia de esteatosis. En el caso de los injertos hepáticos esteatósicos se ha señalado por primera vez la implicación de la Angiotensina 1-7 (Ang 1-7), otro potente efector del RAS, en la lesión por I/R, demostrando propiedades perjudiciales de la Ang 1-7 no conocidas anteriormente. Además se describió un nuevo mecanismo protector del PCI, en el cual el PCI, a través de AMPK, induce la generación de RBP4, que a su vez reduce la sobre-expresión del PPARγ, protegiendo así a los injertos esteatósicos. Esto señaló por primera vez un efecto beneficioso del RBP4 que no había sido descrito anteriormente en ninguna patología. Adicionalmente, se describieron las siguientes estrategias terapéuticas específicas para los injertos esteatósicos: el antagonista del receptor de la Ang 1-7 redujo el daño trasplante, reduciendo asÍ la lista de espera en TH. Estos hallazgos también podrían contribuir a nuevas aplicaciones del PCI en la práctica clínica en TH, ya que los mecanismos protectores descritos del PCI refuerzan su papel como estrategia protectora y muestran al PCI como una estrategia quirúrgica sencilla que puede ejercer los mismos efectos beneficiosos que varias de las estrategias farmacológicas propuestas. / Numerous steatotic livers are discarded as unsuitable for transplantation because of their poor tolerance of ischemia-reperfusion (I/R). The injurious effects of renin-angiotensin system (RAS) and retinol-binding protein 4 (RBP4) in various pathologies are well documented. Ischemic preconditioning (PC) based on brief periods of I/R protects steatotic liver grafts against I/R injury, but the responsible mechanism is poorly understood. The aims of this doctoral thesis were: a) to investigate the role of RAS and RBP4 in I/R injury associated with non-steatotic and steatotic liver transplantation and the benefits of PC in such situations, and b) to examine protective mechanisms of pharmacological or surgical strategies such as PC, able to modulate RAS and RBP4 in both type of grafts. For this, Zucker rats were submitted to liver transplantation with or without preconditioning. Our results showed that Angiotensin II, the main effector of RAS, is involved in I/R injury in non-steatotic grafts, but not in the benefits of PC. Thus, Angiotensin II receptor antagonists protected non-steatotic grafts against damage and this protection was associated with ERK 1/2 over-expression. These strategies were ineffective in steatotic grafts. In the presence of steatosis, Angiotensin 1-7 (Ang 1-7), another effector of RAS, played a role in I/R injury in steatotic grafts. Additionally, it has been described that PC through AMPK, induced RBP4 and this in turn reduced PPARγ, thus protecting steatotic grafts against I/R injury. Results obtained herein also led to describe the following therapeutic strategies specific for steatotic grafts: Ang 1-7 receptor antagonists reduced hepatic damage through reduction of peroxynitrite formation; and therapies that induce RBP4, such as PCI of pretreatment with RBP4, as well as PPARγ antagonists, also protected steatotic grafts against I/R injury in liver transplantation. In terms of clinical application, these therapies might open new avenues for steatotic liver transplantation and improve the initial conditions of donor livers with low steatosis that are available for transplantation. Such therapies could also increase the use of numerous steatotic livers currently discarded for transplantation, thus reducing the risk of death of those patients on liver transplant waiting lists.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-10Bitstream added on 2014-06-13T19:03:31Z : No. of bitstreams: 1 goncalves_gam_dr_botfmvz.pdf: 987293 bytes, checksum: 2f6198976c5d2283c70f3a12e6471c43 (MD5) / Apesar do avanço tecnológico da avicultura no Brasil e no mundo, as salmoneloses ainda são um fator limitante do sistema de criação. Os sorotipos Enteritidis e Typhimurium de Salmonella enterica subespécie enterica são os principais responsáveis por infecções em aves e nos homens, onde um ponto crítico no ciclo para ocorrência de infecções humanas se dá durante o abate de lotes contaminados durante o processamento causando uma contaminação cruzada dos subprodutos avícolas durante o processamento industrial. No presente estudo tratamos com fagoterapia por gavagem em aves em jejum no período de pré-abate (analisando cecos e inglúvio) e por imersão da carcaça, recortes e ovos contaminados com S. Enteritidis (SE). Ao término do estudo a fagoterapia por gavagem proporcionou a redução (P<0,01) da contagem de SE nos cecos das aves e eliminou a contaminação ingluviana; o uso da fagoterapia por imersão também proporcionou a redução (P<0,01) da contaminação por SE em carcaça e recortes de frangos e eliminou a contaminação do agente na casca de ovos. Observamos também que o tratamento combinado do coquetel contendo bacteriófagos isolados de diferentes origens não apresentou resultados melhores do que o contendo bacteriófagos de mesma origem e que os bacteriófagos isolados de água residual hospitalar apresentaram melhor desempenho nos experimentos / Not available

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As infecções causadas pelos Papilomavírus humanos (HPV) são as Doenças Sexualmente Transmissíveis mais freqüentes em todo mundo. Cerca de 30% destas infecções são persistentes, fato associado ao aumento significativo do risco de neoplasia cervical. Assim, o acompanhamento das infecções persistentes, associadas aos HPV de alto risco, funcionaria como medida preventiva contra o câncer. Por esta razão, entra em discussão qual a melhor técnica de detecção da infecção e rastreamento das pacientes. A fim de contribuir para esse estudo, nossa pesquisa comparou as técnicas de Captura do Híbrido (HCAII) e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), ambas utilizadas para a detecção do genoma viral. Foram estudadas 1616 amostras de pacientes do sexo feminino, atendidas nos Laboratório Sérgio Franco, durante o ano de 2001. Para o teste de Captura do Híbrido foi usado o kit da Digene Hybrid Capture II (HCAII), onde os tipos de HPV são agrupados em sondas: grupo A (baixo-risco) e grupo B (alto-risco) e para o PCR foram usados os primers genéricos MY09/11, e os primers específicos para o gene E6 dos HPV de alto-risco (HPV 16,18,31,33 e 35), e E7 (HPV 58). Das 1616 amostras 745 (46,1%) eram positivas para algum tipo de HPV. E destas, a maior parte (91,4%) apresentou infecção com HPV de alto-risco sozinho ou conjuntamente ao de baixo-risco, caracterizando uma população com alto risco de desenvolver câncer. A média de idade das pacientes foi de 30 anos, o que coincidiu também com a faixa etária de maior número de mulheres infectadas no nosso estudo. Das 1616 amostras selecionamos ao acaso 97 para serem submetidas a PCR, desde que também apresentassem o resultado da Citopatologia no mesmo período. A PCR detectou em 79 pacientes o DNA do HPV, enquanto que na HCAII obtivemos 68 amostras positivas. Neste grupo, o tipo mais prevalente pela PCR foi o HPV16 (48%), seguido do HPV18 (40%), HPV35 (8%), 31 (4%), e os HPV 33 e 58 não foram detectados. Nossos dados apontam a maior sensibilidade da PCR, conforme descrito na literatura. Considerando o diagnóstico citopatológico, os dois testes se mostraram concordantes com o mesmo: conforme o aumento da severidade do diagnóstico pelo teste de Papanicolau, maior o número de casos de HPV detectados. A concordância entre HCAII e a PCR foi de 78,4%. Entretanto, em alguns casos, ressaltando-se aqueles classificados como Alterações Inflamatórias, a PCR apresentou maior prevalência de HPV que a HCAII: a positividade pela PCR foi de 78,8% e pela HCAII foi de 48,8% que podem ser justificados por resultados falsos-negativos e falsos-positivos comuns às duas técnicas. A carga viral obtida pela HCAII mostrou uma média crescente até as lesões de baixograu (LSIL) e uma queda nas lesões de alto-grau, mas de modo geral, a análise foi inconclusiva, presentando valores com significância estatística somente para as LSIL. Considerando o custo ainda elevado destas duas técnicas, as implicações na prevenção e no tratamento das infecções pelo HPV, concluímos que tanto a HCAII como a PCR podem ser utilizadas juntamente com a citopatologia (Papanicolau), que já é o exame de eleição para o rastreamento das pacientes, direcionados principalmente para mulheres acima dos 35 anos de idade. Isto porque, acima desta idade há um aumento das chances de estarmos frente às infecções persistentes, que constituem o principal fator de risco para a carcinogênese. Sendo assim, o uso combinado poderia significar medida mais efetiva de prevenção contra o câncer cervical. / The Human Papillomavirus (HPV) infections are the most frequent Sexually Transmitted Diseases worldwide. Nearly 30% of these infections are persistent, fact associated with a significant increase in risk for cervical neoplasia. Thus, the screening of persistent infections, associated with high-risk HPV types, would result in prevention of the cancer. For this reason, there is a search for which is the best technique of detection of HPV infection and patient screening. In order to contribute for this study, our research compared the techniques of Hybrid Capture Assay and Polimerase Chain Reaction, both used in the diagnosis of HPV infection. For that, 1616 samples of female patients had been studied. They were attended at Laboratorio Sergio Franco, during year 2001. For the Hybrid Capture Assay the kit Digene Hybrid Capture II was used (HCAII), where the HPV types are separated in: group A (low-risk) and group B (highrisk), and for the PCR, we used generic primers MY09/11, and specific primers for the E6 gene of high-risk HPV types (HPV 16,18,31,33,35) and E7 (HPV 58). Of all 1616 samples, 745 (46,1%) were positive for some HPV type. And the most part (91,4%) presented high risk HPV infection alone or with one low-risk HPV type, characterizing a population with high risk to develop cancer. The age average of the patients was 30 years, what also agreed with the age band of most part of infected women in our study. Within the 1616 samples, we selected 97 for PCR analysis, if the patient presented the citopathological diagnosis from the same period. The PCR detected HPV DNA in 79 patients, while in HCAII we found 68 positive samples. The most prevalent HPV type detected by the PCR was the HPV16 (48%), followed of HPV18 (40%), HPV35 (8%),31 (4%) while HPV 33 and 58 had not been detected in this samples. Our data pointed that PCR had the highest sensitivity, as described in literature. Both PCR and HCAII showed good agreement with the results from Citopathology: the increase of severity of Pap diagnosis corresponded to an increase in HPV detection by PCR and HCAII. The general agreement between HCAII and PCR was 78.4%. However, in the cases of Inflammatory Alterations, the PCR was more efficient than the HCAII; the positivity for the PCR was of 78,8% and for the HCAII it was of 48,8%, justified by either false-positive or false-negative results, related to both techniques. The viral load obtained by HCAII showed an upward trend from normal to LSIL with a fall in HSIL. But measures were generally inconclusive, with statistic significant values restricted to LSIL. Considering the high costs of these techniques, the implications in the prevention and the treatment of HPV infections, we conclude that both HCAII and PCR can be used to complement the Citopathology (Papanicolau), that is used to screening HPV in the general population. This would result in effective prevention against the cervical cancer, mainly, in women above of 35 years old, since this age group may represent the one with persistent HPV infections, that constitute the main risk factor for carcinogenesis.