Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 437833.pdf: 963349 bytes, checksum: 9fc7ce9b6fb62b2118fc694c4bf21677 (MD5) Previous issue date: 2012-03-02 / Hyperargininemia is a rare disease caused by an innate error of the metabolism (EIM) biochemically characterized by the accumulation of arginine in body tissues due to arginase deficits. Mental retardation and other neurological symptoms are common in hyperargininemic patients. Several mechanisms have been proposed to describe the neurotoxicity of hiperargininemia, such as changes in antioxidant enzyme systems and neurotransmission. The purinergic system is an important pathway for which uses extracellular nucleotides and nucleosides as signaling molecules. The extracellular ATP degradation and the consequent adenosine production are performed by a cellular surface enzyme family known as ectonucleotidases, which include the NTPDases (nucleoside triphosphate diphosphoohydrolases) and the ecto-5?-nucleotidase. Adenosine is a neuromodulator that acts through the activation of P1 metabotropic receptors (A1, A2A, A2B, A3) and plays a role as an endogenous neuroprotector. Thus, the NTPDase and ecto-51-nucleotidase control the levels of nucleotides and nucleosides, modulating the purinergic system. Whereas the zebrafish is an important tool for the study of developmental biology and the hiperargininemia is a disease that occurs in the early stages of development, the objective of this study was to evaluate the effects of arginine exposure in zebrafish larvae on different biochemical, behavioral, and molecular parameters. The results showed that exposure to arginine at a concentration of 0.1 mM in larvae of the zebrafish from to 7 days post-fertilization (dpf) was capable of changing ectonucleotidase activities, promoting an increase of ATP, ADP, and AMP hydrolysis and as causing morphological changes, such as larvae body size reduction, but did not alter the locomotor activity of animals. Acute arginine exposure (1h) in adult zebrafish was not able to alter the activity of ectonucleotidases. These data demonstrate that arginine can affect the ectonucleotidase activities and morphological parameters in zebrafish larvae, suggesting that the purinergic system is a target for neurotoxic effects induced by arginine in the early stages of developmental. / Hiperargininemia ? uma doen?a rara causada por um erro inato do metabolismo (EIM) bioquimicamente caracterizado pelo ac?mulo de arginina nos tecidos devido ? defici?ncia de arginase. Retardo mental e outras doen?as neurol?gicas s?o sintomas comuns em pacientes hiperarginin?micos. Diversos mecanismos foram propostos para descrever a neurotoxicidade da hiperargininemia, tais como, altera??es nos sistemas enzim?ticos antioxidantes e de neurotransmiss?o. O sistema purin?rgico ? uma importante rota de sinaliza??o celular que utiliza nucleot?deos e nucleos?deos extracelulares como mol?culas sinalizadoras. A degrada??o do ATP extracelular ? realizada por uma fam?lia de enzimas localizadas na superf?cie celular conhecidas como ectonucleotidases, que inclui as NTPDases (nucleos?deo trifosfato difosfoidrolases) e a ecto-5?-nucleotidase. A adenosina ? um neuromodulador que atua atrav?s da ativa??o de receptores metabotr?picos do tipo P1 (A1, A2A, A2B, A3) e pode agir como um neuroprotetor end?geno. As NTPDases hidrolisam nucleot?deos tri- e difosfatados originando a adenosina. Assim, as NTPDases e ecto-5 -nucleotidase controlam os n?veis de nucleot?deos e nucleos?deos, modulando o sistema purin?rgico. Considerando que o peixe-zebra ? uma importante ferramenta para o estudo da Biologia do Desenvolvimento e que a hiperargininemia ? uma doen?a que ocorre nas fases iniciais do desenvolvimento, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do tratamento com arginina em larvas de peixezebra em diferentes par?metros bioqu?micos, comportamentais e moleculares. Foram avaliados os efeitos da exposi??o in vivo de larvas e adultos de peixe-zebra na atividade das ectonucleotidases e na locomo??o. Os resultados obtidos demonstraram que a exposi??o ? arginina na concentra??o de 0.1 mM em larvas de peixe-zebra do 3? ao 7? dia p?s-fertiliza??o (dpf) foi capaz de alterar a atividade das ectonucleotidases, promovendo um aumento na hidr?lise de ATP, ADP e AMP, assim como causar altera??es moleculares e morfol?gicas, como diminui??o do tamanho corporal, por?m n?o alterou a atividade locomotora dos animais. A exposi??o aguda (1h) a arginina em peixes zebra adultos n?o foi capaz de alterar a atividade das ectonucleotidases. Esses dados demonstram que a arginina pode afetar a atividade das ectonucleotidases e par?metros morfol?gicos em larvas de peixe-zebra, sugerindo que o sistema purin?rgico ? um alvo para os efeitos neurot?xicos induzidos pela arginina, nas fases iniciais do desenvolvimento.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 440822.pdf: 1496271 bytes, checksum: ed1a67fe6439eb139b2edd2275228d18 (MD5) Previous issue date: 2012-01-27 / Cadmium is considered the seventh most dangerous substance in the environment and is classified as carcinogen type I, potentially affecting a wide range of living organisms, including humans. In addition to its wide systemic impact and potential lethality, cadmium has been associated to neurobehavioral defects that may also compromise animals ecological status and survival. Despite its potential impact, the comprehension of cellular and molecular mechanisms underlying cadmium deleterious effects on animals behavior is still scarce. This study aimed to evaluate the behavioral effects of cadmium for 1 or 7 days at environmentally relevant concentrations (10 μg/L, 100 μg/L and 1000 μg/L) on zebrafish and to analyze brain oxidative stress and apoptotic markers. Cadmium-exposed zebrafish exhibited a generalized increase in locomotor activity after 1 and 7 days of treatment at all doses in all parameters evaluated, including distance travelled in a 5-min. evaluation period, mean speed and mobile periods. This hyperlocomotory effect significantly compromised animals general performance in exploring a new environment, which was evident in all cadmium exposed animals decreased path efficiency and altered distribution on the water column. Additionally, our results confirmed previous reports of increased oxidative damage in fishes exposed to cadmium and specifically demonstrated higher levels of damaged proteins in brain samples of animals exposed to cadmium at 100 μg/L for 1 day and at 10 μg/L for 7 days when compared to their respective control groups. Lipid peroxidation was also significantly increased in animals brain after 1 day cadmium exposure at 100 μg/L. Real-Time PCR analysis of transcripts for p53 and bax were not altered after 1 day cadmium exposure, but significantly increased after 7 days. Our results present evidence of cadmium deleterious effects on zebrafish cognitive functions and raise attention to the fact that its manifestation appears already after a one day exposure to 10 μg/L, a concentration accepted by most international regulating agencies / O c?dmio ? considerado a s?tima subst?ncia mais perigosa presente no ambiente e ? classificado como carcinog?nico tipo I, potencialmente afetando uma grande quantidade de seres vivos, incluindo os humanos. Ademais, o c?dmio tem sido associado a defeitos neurocomportamentais que podem comprometer o status ecol?gico e a sobreviv?ncia de animais. Apesar do potencial impacto, a compreens?o dos mecanismos celulares e moleculares por tr?s de seus efeitos delet?rios no comportamento de animais ? ainda escassa. Este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos comportamentais do c?dmio por 1 e 7 dias a concentra??es relevantes no ambiente (10 μg/L, 100 μg/L and 1000 μg/L) em zebrafish e analisar o estresse oxidativo e marcadores de apoptose no enc?falo. Animais expostos ao c?dmio apresentaram aumento na atividade locomotora ap?s 1 e 7 dias de tratamento em todas as concentra??es e par?metros avaliados, incluindo dist?ncia percorrida num per?odo de 5 minutos, velocidade m?dia e per?odos m?veis. A hiperlocomo??o afetou significativamente o desempenho dos animais em explorar um novo ambiente em todos os grupos tratados, evidenciado por uma diminui??o na efici?ncia de percurso e alterada distribui??o na coluna d ?gua. Adicionalmente, nossos resultados confirmaram estudos pr?vios sobre aumento no dano oxidativo em peixes quando expostos ao c?dmio e especialmente demonstraram n?veis mais elevados de dano a prote?nas em amostras de enc?falo em animais tratados a 100 μg/L por 1 dia e a 10 μg/L por 7 dias quando comparados aos seus respectivos controles. Lipoperoxida??o aumentou significativamente no enc?falo de animais expostos por 1 dia a 100 μg/L. An?lises dos marcadores p53 e bax por Real-time PCR apresentaram nenhuma altera??o ap?s 1 dia de exposi??o, mas significativamente aumentaram ap?s 7 dias. Nossos resultados apresentam evid?ncias dos efeitos delet?rios do c?dmio no comportamento de zebrafish e chama aten??o para o fato de que a manifesta??o de seus efeitos aparece a partir de 1 dia de exposi??o a 10 μg/L, uma concentra??o aceita por muitas ag?ncias de regulamenta??o internacional

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 442629.pdf: 4545565 bytes, checksum: 75785599771804ca3f6535bc606e1454 (MD5) Previous issue date: 2012-08-09 / The clinical depression treatment faces serious obstacles as the disease mechanism is not fully elucidated. In addition, there are no effective means to predict and prevent depression as well as any biological method of diagnosis. The use of antidepressants is still the basis of the treatments for depression. Lithium has been used clinically as effective drug to treat all phases of bipolar disorder, including major depression. The Selective serotonin re-uptake inhibitors (SSRIs), such as fluoxetine and citalopram, and Tricyclic antidepressant (TCA) as clomipramine are drugs constantly used for depression treatment. Recent evidence has shown an involvement of adenosine and its receptors in the pathophysiology of depression. ATP can be stored and co-released with other neurotransmitters like serotonin and can be hydrolyzed by a cell-surface enzyme family known as ectonucleotidases. Among these members, we highlight the nucleoside triphosphate diphosphohtdrolases (NTPDases) and ecto-5'-nucleotidase. They are able to control the availability of ligands such as ATP and adenosine to its specific receptors. Adenosine deaminase (ADA) can promote the hydrolytic deamination of adenosine to inosine, modulating the extracellulr levels of this neuromodulator. In cholinergic signaling, after its release, acetylcholine (ACh) promotes the activation of specific muscarinic or nicotinic receptors and thus, it promotes diverse cellular responses. ACh is hydrolyzed by acetylcholinesterase (AChE) in acetate and choline in synaptic cleft. The zebrafish has been used in research behavioral neuroscience and is also a choice model for elucidating the development and function of neuronal circuitry. Considering the cholinergic and purinergic signaling are important participation in the CNS and these neurotransmitter pathways have been identified and characterized in zebrafish, the objective of this study was to evaluate the effect of antidepressants on ectonucleotidases, ADA and ACh activities, which are essential enzymes in the modulation of these signaling pathways in the zebrafish brain. We evaluated the ex vivo effects of fluoxetine (1-10 ?M), clomipramine (1-10 ?M), citalopram (70-300 ?M) on ectonucleotidases and ADA activities. It has been also analyzed the in vitro (1 to 1000 ?M) and ex vivo (1 to 10mg/L) effect of lithium on ectonucleotidases and AChE activities and gene expression. There was a significant inhibition of ADP hydrolysis after ex vivo exposure to lithium at 5 and 10 mg/L, whereas an inhibitory effect was observed for AMP hydrolysis only at 10 mg/L. The same treatment decreased the AChE activity in a concentration of 10mg/L. Lithium did not induce significant changes in the analysis of gene expression patterns in the concentrations tested. In vivo treatment, there were no significant changes inectonucleotidases and AChE activities. Treatment with clomipramine promotes an inhibition ecto-5'-nucleotidase activities at the concentration of 5?M when compared to the control group. For ADA activity, we also observed a significant inhibition in the treatment with clomipramine at concentrations of 5 and 10 ?M in membrane fractions of zebrafish brain. However, treatment with fluoxetine and citalopram did not alter ectonucleotidases and ADA activities in the zebrafish brain. Our findings may contribute to a better understanding of pharmacology of antidepressants and their interaction with the cholinergic and purinergic neurotransmission. / O tratamento cl?nico da depress?o enfrenta s?rios obst?culos j? que o mecanismo da doen?a n?o ? totalmente elucidado. Al?m disso, n?o existem meios eficazes para prever e prevenir a depress?o bem como nenhum m?todo biol?gico de diagn?stico. O uso de f?rmacos antidepressivos ainda ? a base dos tratamentos para depress?o. O l?tio tem sido usado clinicamente como f?rmaco eficaz para tratar todas as fases do transtorno bipolar, incluindo depress?o aguda. Os inibidores seletivos da recapta??o de serotonina (ISRSs), como fluoxetina e citalopram, e os antidepressivos tric?clicos (TCA), como a clomipramina, s?o f?rmacos constantemente utilizados para o tratamento da depress?o. Evid?ncias recentes mostram o envolvimento da adenosina e seus receptores na patofisiologia da depress?o. O ATP pode ser armazenado e co-liberado, juntamente com outros neurotransmissores, como serotonina e noradrenalina, e pode ser hidrolisado at? adenosina por uma fam?lia de enzimas de superf?cie celular, conhecidas como ectonucleotidases. Dentre elas, destacam-se as Nucleos?deo Trifosfato Difosfoidrolases (NTPDases) e a ecto-5?-nucleotidase, capazes de controlar a disponibilidade de ligantes como ATP e adenosina aos seus receptores espec?ficos. A Adenosina desaminase (ADA) pode promover a desamina??o hidrol?tica da adenosina em inosina, modulando os n?veis extracelulares deste neuromodulador. Na sinaliza??o colin?rgica, a acetilcolina (ACh), ap?s liberada, promove a ativa??o de receptores muscar?nicos ou nicot?nicos, e desta maneira a ACh promove diversas respostas celulares. A ACh que permanece na fenda sin?ptica ? hidrolisada pela acetilcolinesterase (AChE) em acetato e colina. O peixe-zebra tem sido utilizado na pesquisa da neuroci?ncia comportamental, sendo tamb?m um modelo de escolha para elucidar o desenvolvimento e a fun??o do circuito neuronal. Considerando que as sinaliza??es purin?rgica e colin?rgica t?m importante participa??o no sistema nervoso central e que essas vias de neurotransmiss?o j? est?o caracterizadas em peixe-zebra, o objetivo desse estudo foi avaliar o efeito de f?rmacos antidepressivos na atividade das ectonucleotidases, ADA e AChE, enzimas essenciais na modula??o destas vias de sinaliza??o em c?rebro de peixe-zebra. Foram avaliados os efeitos ex vivo da fluoxetina (1-10 ?M), clomipramina (1-10 ?M) e citalopram (70-300 ?M) na atividade das ectonucleotidases e ADA. Foi analisado tamb?m o efeito in vitro (1 a 1000 ?M) e ex vivo (1-10mg/L) do l?tio sobre a atividade e express?o g?nica das ectonucleotidases e AChE.A exposi??o ao l?tio inibiu a hidr?lise de ADP nas concentra??es de 5 e 10mg/L e inibiu a hidr?lise de AMP na concentra??o de 10mg/L quando comparado ao grupo controle. Este mesmo tratamento diminuiu a atividade da AChE na concentra??o de 10mg/L.O l?tio n?o induziu altera??es significativas na an?lise do padr?o de express?o g?nica. No tratamento in vitro, n?o foram observadas altera??es na atividade das ectonucleotidases e AChE. O tratamento com a clomipramina mostrou uma inibi??o na atividade da ecto-5?-nucleotidase na concentra??o de 5 ?M quando comparado ao grupo controle. Na atividade da ADA tamb?m observamos uma inibi??o significativa no tratamento com a clomipramina nas concentra??es de 5 e 10 ?M em fra??es de membrana de c?rebro de peixe-zebra. Entretanto, o tratamento com fluoxetina e citalopram n?o alterou a atividade das ectonucleotidases e ADA no c?rebro do peixe-zebra. Nossos resultados podem contribuir para uma melhor compreens?o da farmacologia dos f?rmacos antidepressivos e a sua intera??o com a neurotransmiss?o colin?rgica e purin?rgica.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:52:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 395026.pdf: 912444 bytes, checksum: 3f972cb8319f016d0d39d73663465e15 (MD5) Previous issue date: 2007-07-25 / Nos dias de hoje, desconsiderar o diversificado comportamento do consumidor ? algo muito arriscado para as empresas diante do atual mercado competitivo. Manter o cadastro de clientes e segmentar o mercado atrav?s do uso de dados demogr?ficos deixou de ser uma ferramenta de marketing para ser uma tarefa obrigat?ria. O momento sugere a necessidade de as empresas conhecerem mais o comportamento de compra de seus clientes. Assim, o presente estudo visa estudar o comportamento do consumidor, buscando identificar e avaliar os atributos valorizados no processo de compra de autom?veis de alto valor. Os objetivos espec?ficos deste estudo foram alcan?ados atrav?s da etapa explorat?ria e da etapa descritiva, que teve a utiliza??o da t?cnica estat?stica multivariada Conjoint Analysis. Foram identificados os atributos considerados importantes no momento da compra de um autom?vel de alto valor e, posteriormente, foram definidos os seis atributos mais importantes e seus pesos relativos. Na fase da pesquisa qualitativa, o atributo Seguran?a apresentou destaque. Por?m, ao aplicar-se a pesquisa quantitativa, cujos seis principais atributos eram apresentados conjuntamente, o atributo Conforto foi o que apresentou maior peso seguido pelo atributo Pre?o. Os demais atributos em ordem de import?ncia foram Marca, Seguran?a, Atendimento e Beleza.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:52:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 396496.pdf: 1537914 bytes, checksum: e6aae17d82fd2900e0eed4b12aa17a2c (MD5) Previous issue date: 2007-08-29 / A busca da efic?cia empresarial passa, invariavelmente, pelo conhecimento do comportamento humano. O marketing, como ?rea da Administra??o, respons?vel por prover o alcance dos objetivos organizacionais atrav?s da satisfa??o das necessidades e desejos dos consumidores, tem o maior interesse na compreens?o do comportamento dos indiv?duos. Os valores, por sua vez, t?m um papel muito importante na determina??o desse comportamento. Compartilhando deste interesse o estudo identificou diferen?as e semelhan?as no sistema de valores, presentes em estudantes argentinos, brasileiros e uruguaios, permitindo a gera??o de perfis dos indiv?duos. Para tanto, e baseado na Escala de Valores de Rokeach (1973), realizou-se uma pesquisa de ?mbito intercultural, na fronteira e em capitais de prov?ncias e estados, na Argentina, Brasil e Uruguai. O resultado da pesquisa permitiu entender quais valores s?o preferenciais e importantes nas escolhas destes estudantes, tanto no que se refere aos objetivos de vida, quanto ?s formas de conduta social. Examinando-se os valores relacionados aos objetivos de vida, identificaram-se perfis de indiv?duos movidos por sentimentos de paz e justi?a; pelo sucesso pessoal e social; pela valoriza??o do ser ; pela sensa??o de bem-estar e prioridade ? fam?lia e, movidos pela necessidade de autonomia e amizade verdadeira. Com rela??o ? forma de conduta social adotada pelos respondentes, identificaram-se os estere?tipos: senhor de si ; de bem com a vida ; confi?vel, laissezfaire ; audacioso e obediente. Verificou-se, por exemplo, que os homens d?o mais valor ao sucesso pessoal e ao reconhecimento social do que as mulheres. Estas valorizam mais a simplicidade e seguran?a e, s?o mais confi?veis e alegres em seus relacionamentos. Os brasileiros valorizam mais o sucesso pessoal e profissional do que argentinos e uruguaios. Os resultados apontaram diferen?as significativas na estrutura de valores dos respondentes dessas diferentes culturas, o que indica a necessidade de respeitar essas diferen?as na elabora??o de estrat?gias de marketing pelas organiza??es.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:52:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 384452.pdf: 707992 bytes, checksum: 5935b7a58abb92e57087f1ac34164ca1 (MD5) Previous issue date: 2006-08-30 / Na ultima d?cada, o mercado consumidor homossexual passou a despontar como um segmento significativo de neg?cios, isso porque, gays e l?sbicas come?aram a assumir sua orienta??o sexual, em fun??o do aumento de sua aceita??o social e, a demonstrar suas prefer?ncias como consumidores. O potencial de consumo dos homossexuais, aparentemente, ? expressivo, necessitando investiga??es que apontem as vari?veis demogr?ficas e comportamentais desse segmento. Nesse contexto, esse estudo pretendeu analisar, por meio de uma pesquisa explorat?ria e quantitativa, os atributos e as motiva??es de compra de vestu?rio e lazer considerados mais importantes pelos homossexuais masculinos do estado do Rio Grande do Sul. Os resultados obtidos demonstram que os atributos mais importantes s?o: conforto que a roupa proporciona e seguran?a no lazer. As motiva??es mais significativas, por sua vez, s?o: atendimento sem preconceito e oportunidade de conhecer novos lugares.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-05-18T11:58:07Z No. of bitstreams: 1 468720 - Texto Completo.pdf: 6747791 bytes, checksum: dc8f03c538738774e24f74700ad72365 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-18T11:58:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 468720 - Texto Completo.pdf: 6747791 bytes, checksum: dc8f03c538738774e24f74700ad72365 (MD5) Previous issue date: 2015-03-03 / New animal models for neurodegenerative diseases study are necessary for the knowledge of molecular mechanisms and behavioral patterns involved on the progression of dementias as Alzheimer?s Disease (AD) as well as for new therapies development. We characterized four neurodegenerative approaches including: (1) ?-amyloid(1-42) peptide injection, one of the hallmark proteins of patients with AD. In this model, we observed that intra-ventricular brain injection of ?-amyloid soluble oligomers in 24hpf embryos caused an increase in tau phosphorylation followed by cognitive deficits at 5dpf, both results being reversed by Lithium treatment, a tau kinase (GSK-3?) inhibitor. (2) The inhibition of exon 8 splicing of Presenilin-1, protein responsible for the Amyloid Precursor Protein (APP) cleavage, was achieved using Morpholino oligonucleotides. This approach caused a dysfunction of Presenilin-1, characteristic of patients with the familiar form of AD, that disturbed cognitive behavior and caused morphological phenotype similar to the ones observed by modifications of Notch pathway. We also developed two transgenic animals, (3) one overexpressing through a heat-shock promoter the ?-amyloid protein. These animals when exposed to a temperature of 37?C activate the heat-shock protein expression and as a consequence amyloid-? protein, one of the hallmark proteins of AD. The second transgenic animal (4) we knocked-out the Appb gene using TALEN as a genetic manipulation technic. This model will provide a better understanding of Appb function during animal development and AD progression. Those four animal models include features suggesting that, when used separately or in combination, can hereafter elucidate those pathways interactions and clarify the cellular and molecular mechanism associated with cognitive deficits during Alzheimer?s disease progression. With these models we were able to characterize zebrafish as a potential animal model, not just for understanding the role of those proteins over neurodegenerative process, but also on their normal functions in the system. Besides that, zebrafish have been used for a few years in pharmacological tests, and the development of animal models for Alzheimer?s disease as ours, make this animal a robust model for development of new treatments for this and other diseases. / Novos modelos para o estudo de doen?as neurodegenerativas s?o necess?rios para a caracteriza??o dos mecanismos moleculares e comportamentais envolvidos na progress?o de dem?ncias como a Doen?a de Alzheimer (DA), al?m de serem importantes para a identifica??o de novos alvos com potencial terap?utico. Aqui caracterizamos quatro abordagens neurodegenerativas incluindo: (1) A inje??o do pept?deo ?-amil?ide(1-42), uma dos principais pept?deos alterados em pacientes com DA. Neste modelo observamos que a inje??o de olig?meros sol?veis de ?-amil?ide no ventr?culo cerebral de embri?es de 24hpf causou um aumento na fosforila??o da prote?na tau em res?duos de est?gios iniciais da DA acompanhados por d?ficit cognitivo aos 5dpf, ambos revertidos pelo tratamento com L?tio, inibidor da enzima GSK-3? que fosforila tau. (2) Realizamos tamb?m a inibi??o do splicing do ?xon 8 da prote?na Presenilina-1, membro do complexo gama-secretase que ? respons?vel pela clivagem da Prote?na Precursora do Amil?ide (APP), atrav?s do bloqueio com oligonucleot?deos Morfolinos. Esta abordagem causou uma altera??o na funcionalidade da Presenilina-1, caracter?stica de pacientes com a forma familiar da DA, comprometendo a cogni??o dos animais e ocasionando altera??es morfol?gicas similares ?s causadas pela modifica??o da via Notch. Tamb?m realizamos a produ??o de dois animais transg?nicos, o primeiro (3), superexpressando a prote?na ?-amil?ide atrav?s de um promotor heat-shock. Estes animais quando expostos a uma temperatura de 37?C ativam a express?o das prote?nas heat-shock e por consequ?ncia a express?o da prote?na ?-amil?ide, que como dito anteriormente ? uma das principais altera??es em pacientes com a DA. O segundo (4), inibindo a express?o da APP atrav?s da t?cnica de manipula??o gen?tica utilizando TALEN. Este ultimo modelo ir? fornecer informa??es importantes sobre a participa??o desta prote?na durante desenvolvimento e a progress?o da DA. Estes quatro modelos abrangem caracter?sticas que sugerem que, quando usados separadamente ou em combina??o, poder?o contribuir tanto na elucida??o de mecanismos celulares e moleculares associados a d?ficits cognitivos quanto nas intera??es destas vias com a DA. A possibilidade de desenvolver modelos complementares com abordagens diversas em um mesmo organismo confirma o potencial do zebrafish n?o s? para o entendimento da participa??o destas prote?nas no processo neurodegenerativo mas tamb?m em suas fun??es normais no sistema nervoso.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-05-20T12:50:04Z No. of bitstreams: 1 469018 - Texto Completo.pdf: 1309740 bytes, checksum: 2aed89fbf06476e1b1522282c9325099 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-20T12:50:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 469018 - Texto Completo.pdf: 1309740 bytes, checksum: 2aed89fbf06476e1b1522282c9325099 (MD5) Previous issue date: 2015-02-18 / The ethanol exposure during early embryonic development can cause morphological and behavioral changes even when ingested in low doses. Growth retardation, microcephaly and mental retardation are some of the features observed in children with FAS (fetal alcohol syndrome) whose mothers ingested ethanol during pregnancy. The mechanisms by which ethanol affects embryonic development and cause such changes have not been fully elucidated. The increase in the extracellular adenosine levels after chronic and acute exposure to ethanol indicates that the purinergic system has an important role in this situation. Adenosine is a neuromodulator that acts through the activation of metabotropic receptors type P1 (A1, A2A, A2B and A3) and can act as an endogenous neuroprotector. In the extracellular space, adenosine can be produced by sequential hydrolysis of adenosine triphosphate (ATP) held by ectonucleotidases, a cascade of a family of enzymes located on the cell surface, which the key process to hydrolyze to adenosine is performed by ecto-5'-nucleotidase. The use of zebrafish in toxicology studies and development offers a number of advantages. Its size and breeding allow the maintenance of a large quantity of fish in a relatively small space. The production of a large number of eggs and the development occurs rapidly, and progresses through well-defined steps. Recent studies have employed the zebrafish as a model for fetal alcohol syndrome and demonstrated that embryonic exposure to ethanol results in phenotypes comparable to those observed in other vertebrate models. The objective of this study was to evaluate the role of adenosine metabolism in the morphological and locomotor parameters of zebrafish larvae exposed to ethanol. The results showed that in addition to morphological damage already known, there is a change in the enzymatic activity of ecto-5'-nucleotidase in larvae of seven days, in both treatments, acute and chronic, independent of gene expression form, which in time was not changed. Pre-treatment with AOPCP, an inhibitor of ecto-5'- nucleotidase, was unable to prevent the morphological damage in a relevant way, although statistically there was a slight prevention. Pre-treatment with dipyridamole, an adenosine transport blocker further worsened the effects caused by ethanol. Considering the changes that occur in extracellular levels of adenosine after exposure to ethanol and the involvement of the purinergic system in early stages of development, our results suggest that there is a combined action of the enzyme ecto-5'-nucleotidase and nucleoside transporters in this rising of extracellular adenosine levels, with emphasis on the inhibition of nucleoside transporters. Additionally, we can infer that there is a correlation between elevated levels of adenosine and morphological defects after exposure to ethanol. These results suggest that the purinergic system is a target for the toxic effects induced by ethanol in the early stages of development. / A exposi??o ao etanol durante as fases iniciais de desenvolvimento embrion?rio pode causar altera??es morfol?gicas e comportamentais, mesmo quando ingerido em baixas doses. Retardo no crescimento, microcefalia e retardo mental s?o algumas das caracter?sticas observadas em crian?as portadoras da SAF (s?ndrome alco?lica fetal), cujas m?es ingeriram etanol durante a gesta??o. Os mecanismos pelos quais o etanol afeta o desenvolvimento embrion?rio e causa tais altera??es ainda n?o foram completamente desvendados. O aumento extracelular da adenosina ap?s exposi??es cr?nicas e agudas ao etanol indica que o sistema purin?rgico tem um importante papel nesses mecanismos. A adenosina ? um neuromodulador que atua atrav?s da ativa??o de receptores metabotr?picos do tipo P1 (A1, A2A, A2B e A3) e pode agir como um neuroprotetor end?geno. No espa?o extracelular, a adenosina pode ser produzida pela hidr?lise sequencial da adenosina trifosfato (ATP) realizada pela cascata das ectonucleotidases, uma fam?lia de enzimas localizada na superf?cie celular, sendo o processo chave ? hidr?lise da adenosina monofosfato (AMP) ? adenosina ? realizada pela ecto-5?- nucleotidase. A utiliza??o do peixe-zebra em estudos toxicol?gicos e de desenvolvimento oferece uma s?rie de vantagens. Seu tamanho e a forma de cria??o permitem a manuten??o de uma grande quantidade de peixes em um espa?o relativamente pequeno. O cruzamento resulta em um grande n?mero de ovos e o desenvolvimento ocorre rapidamente, e progride atrav?s de etapas bem definidas. Estudos recentes t?m empregado o peixe-zebra como modelo para a s?ndrome alco?lica fetal e demonstrado que a exposi??o embrion?ria ao etanol resulta em fen?tipos compar?veis com aqueles observados em outros modelos vertebrados. O objetivo deste estudo foi avaliar o papel do metabolismo da adenosina nos par?metros morfol?gicos e locomotores de larvas de peixe-zebra expostas ao etanol. Os resultados obtidos demonstraram que al?m dos danos morfol?gicos j? conhecidos, h? altera??o na atividade enzim?tica da ecto- 5?-nucleotidase em larvas de 7 dias, em ambos os tratamentos, agudo e cr?nico, de uma forma independente da express?o g?nica, que por sua vez, n?o foi alterada. O tratamento pr?vio com AOPCP, um inibidor da ecto-5?-nucleotidase, n?o foi capaz de prevenir os danos morfol?gicos de forma relevante, embora estatisticamente verificou-se uma leve preven??o. O pr?-tratamento com dipiridamol, um bloqueador do transporte de adenosina, piorou ainda mais os efeitos causados pelo etanol. Considerando as mudan?as que ocorrem nos n?veis extracelulares de adenosina ap?s exposi??es ao etanol e o envolvimento do sistema purin?rgico em est?gios iniciais do desenvolvimento, nossos resultados sugerem que existe uma a??o combinada da enzima ecto-5?-nucleotidase e dos transportadores de nucleos?deos nesta eleva??o dos n?veis extarcelulares de adenosina, com ?nfase na inibi??o dos transportadores de nucleos?deos. Adicionalmente, podemos inferir que h? uma correla??o entre a eleva??o dos n?veis de adenosina e os defeitos morfol?gicos caracter?sticos da exposi??o ao etanol. Tais resultados sugerem que o sistema purin?rgico ? um alvo para os efeitos t?xicos induzidos pelo etanol nas fases iniciais do desenvolvimento.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-10-06T11:26:04Z No. of bitstreams: 1 475533 -Texto Completo.pdf: 1514608 bytes, checksum: 0800ba0d547d1387404075a0ad1c27a1 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-06T11:26:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 475533 -Texto Completo.pdf: 1514608 bytes, checksum: 0800ba0d547d1387404075a0ad1c27a1 (MD5) Previous issue date: 2015-06-25 / This work consists of replication and validation of the study by Bonner (2010) on customer interactivity and performance of new products in development projects. The initial study tested the relationship between the participation of the customer in new product development projects, the quality of customer information used in the projects and the impact of these dimensions on the performance of these products. Moreover, it was also established moderating effect caused by the newness of the product and the product's embeddedness on the client desktop. The original study was based on the communication literature and adopted an organizational learning vision based on the flow of communication. To validate this study in the Brazilian context was held to adapt the scale used by Bonner (2010) to portuguese language and used data collection with survey on a valid sample of 155 respondents from all over Brazil, belonging to the industrial sector, characterized by are machinery and equipment manufacturers. Data were analyzed with the use of structural equation modeling. The theoretical dimensions investigated were confirmed, and the relationships between them. The moderating effect caused by the newness of the product and embeddedness the product in the customer's work environment was also confirmed. As a result we obtained a valid instrument adapted to the Brazilian context. / Este trabalho consiste na replica??o do estudo realizado por Bonner (2010) sobre a interatividade do cliente e o desempenho de novos produtos. O modelo te?rico testado admite que a qualidade das informa??es, obtidas do cliente atrav?s da intera??o, impacta no desempenho do produto novo. Al?m disso, tamb?m foram estabelecidos efeitos de modera??o pelas vari?veis ?novidade do produto? e ?inser??o do produto? no ambiente de trabalho do cliente. O estudo original tomou como base a literatura de comunica??o, adotando uma vis?o de aprendizagem organizacional com base na fluidez da comunica??o. A escala utilizada por Bonner (2010) foi traduzida para a l?ngua portuguesa e os dados foram coletados atrav?s do uso de question?rio quantitativo, a amostra v?lida foi de 155 respondentes de todo o Brasil, pertencentes ao setor industrial, caracterizados por serem fabricantes de m?quinas e equipamentos. A an?lise dos dados foi dada atrav?s da modelagem de equa??es estruturais. O modelo te?rico e suas dimens?es foram confirmados atrav?s da an?lise fatorial confirmat?ria, teste de consist?ncia interna, validade convergente e discriminante. O efeito de modera??o causado pela novidade do produto e pela inser??o do produto no ambiente de trabalho do cliente tamb?m foi confirmado. Como resultado, obteve-se um instrumento v?lido adaptado para o contexto brasileiro, atrav?s do qual foram obtidos resultados similares aos encontrados por Bonner (2010).

Made available in DSpace on 2016-04-26T18:14:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Daniela de Queiroz Picchiai.pdf: 564041 bytes, checksum: 70762e27f3ed8170f628c4f853bd1639 (MD5) Previous issue date: 2014-12-02 / This dissertation has the main objective investigate the recent changes in the orientation market research that makes increasing use of digital databases as a source of information about consumers. The work begins by analyzing the methodologies of market research already established, of qualitative source, from data collection, sample character, such as questionnaires and interviews, focuses on attitudes and behaviors of consumers, and starting from this creates marketing communication strategies for institutions interested in this information. With the emergence of Big Data, the statement changes. In the evolution of this path, we highlight the increasingly important reflections of philosophers (Foucault, Deleuze) and communication theorists (Martin-Barbero, Jenkins) about our role current in society of control. That must mean, for our study, an increasingly centered on search for patterns of behavior by way of digital data. With the influence of new technologies, the digital universe and the arrival of Big Data, the market research proceeds to analyze the data from environments such as businesses databases or activities on social networks, and check what kind of consumption pattern can be identified. With that, they could theoretically build a communication to induce and direct the actions and consumers choices. As a result, the research compares two formats of action utilized by companies as a strategy for reaching possible consumers: the first, as a base, has qualitative tools and an understanding of the social environment and determined segments; the second considers the enormous dimension of existing techniques in the online environment that influence people's behavior.The work reflects on how business communication strategies are utilized by brands in order to involve and generate recognition from its audiences. As a working methodology, we use the following authors: Harold Lasswell, for identifying the influence of research in advertising communication; Jesús Martín-Barbero, one of the first scholars to understand the mediation between individuals and social environments; Philip Kotler and Gilbert A. Churchill, central authors in the understanding of marketing techniques; Michel Foucault, Felix Guattari and Gilles Deleuze to recognize how the look of Big Data articulated in our society of control. The dissertation considers that communication has a decisive role in influencing individuals' choices and constantly searches for the previous path in this process, in order to recognize and emphasize the variables that lead to these choices / Esta dissertação tem como objetivo principal investigar as recentes mudanças na orientação das pesquisas de mercado, que fazem uso cada vez maior de bases de dados digitais como fonte de informação sobre os consumidores. O trabalho começa analisando as metodologias de pesquisa mercadológica já consolidadas, de natureza qualitativa, que a partir de levantamentos de dados, de caráter amostral, tais como questionários e entrevistas, busca compreender atitudes e comportamentos dos consumidores e, assim, criar estratégias de comunicação mercadológica para as instituições interessadas nessa informação. Com o surgimento das análises ditas de Big Data, o cenário muda. Na evolução desse caminho, destacamos o papel cada vez mais importante das reflexões de filósofos (Foucault, Deleuze) e teóricos da comunicação (Martin-Barbero, Jenkins) sobre nossa atual sociedade de controle. Isso deve significar, para nosso estudo, um caminho cada vez mais centrado na busca por padrões de comportamento através de dados digitais. Com a influência das novas tecnologias, do universo digital e com a chegada do Big Data, a pesquisa de mercado passa a analisar os dados retirados de ambientes tais como as bases de dados das empresas ou de atividades em redes sociais, e verificam quais tipos de padrão de consumo podem ser identificados. Com isso, poderiam em tese construir uma comunicação para induzir e direcionar as ações e escolhas dos consumidores. Com isso, o trabalho compara dois formatos de ação utilizados pelas empresas como estratégia para atingir possíveis consumidores: o primeiro tem como base ferramentas qualitativas e compreensão do ambiente social de determinados segmentos; o segundo considera a gigantesca dimensão de técnicas existentes no ambiente online que influenciam o comportamento das pessoas. O trabalho faz uma reflexão sobre como as estratégias de comunicação são utilizadas pelas empresas para envolver e gerar identificação em seus públicos. Como metodologia de trabalho, utilizamos os seguintes autores: Harold Lasswell, para identificar a influência das pesquisas na comunicação publicitária; Jesús Martín-Barbero, um dos primeiros estudiosos a compreender as mediações entre indivíduos e ambientes sociais; Philip Kotler e Gilbert A. Churchill, autores centrais no conhecimento das técnicas de marketing; Michel Foucault, Felix Guattari e Gilles Deleuze para reconhecer como o olhar do BigData se articula com nossa sociedade de controle. A pesquisa conclui que a comunicação mercadológica tem um papel decisivo na indução das escolhas dos indivíduos e busca constatar o caminho percorrido nesse processo, para assim reconhecer e pontuar os fatores que conduzem a essas escolhas