CAPES; Fundação Araucária / A espécie Moringa oleifera (Moringaceae) é uma planta que possui ampla aplicação industrial, alto valor nutricional e que, além disso, também exibe diversas atividades biológicas. Utilizadas na medicina popular, as folhas de M. oleifera já demonstraram possuir grande variedade de moléculas bioativas, inclusive compostos fenólicos, os quais são, possivelmente, os responsáveis pelo potencial antioxidante desta parte da planta. Apesar do crescente interesse sobre a espécie e, especificamente, sobre o seu potencial fitoquímico, são escassos os trabalhos que relatam o isolamento e a identificação dos compostos bioativos presentes nas suas folhas, principalmente em exemplares cultivados no Brasil. Sendo assim, os objetivos deste trabalho foram comparar dois métodos de extração de compostos bioativos e, na sequência, isolar bioguiadamente compostos com atividade antioxidante das folhas de M. oleifera coletadas no município de Itajaí (Santa Catarina, Brasil). O monitoramento bioguiado foi realizado com ensaios in vitro de determinação da atividade antioxidante: capacidade de redução do reagente Folin-Ciocalteau, FRAP, sequestro dos radicais DPPH e ABTS, além do ORAC. A técnica de CLAE-DAD foi utilizada para a caracterização química e acompanhamento das etapas do isolamento. A principal diferença prática entre os métodos de extração avaliados foi o preparo de um extrato hidroalcoólico inicial, no processo de extração 1. A partir dos resultados de determinação da atividade antioxidante, interpretados com o auxílio de ferramentas estatísticas (teste de Tukey e teste t pareado), foi possível perceber que o potencial das folhas de M. oleifera sofreu variações em função da forma de extração e dos solventes utilizados. Em geral, as frações produzidas a partir do processo de extração 1 apresentaram maior atividade antioxidante e perfis cromatográficos com sinais mais intensos. Com base nestes resultados, a fração obtida com acetato de etila, no processo de extração 1, foi selecionada para dar sequência ao isolamento bioguiado. A purificação desta fração em coluna aberta preenchida com sílica gel gerou 61 subfrações, as quais, após análise de CCD, foram agrupadas em 18. A avaliação da atividade antioxidante das subfrações agrupadas mostrou que cinco apresentavam grande potencial. Contudo, em função do rendimento, apenas três puderam dar sequência ao isolamento. Nesta etapa, uma análise adicional foi realizada: a determinação da atividade antioxidante por CLAE on-line com o ABTS•+, que permitiu definir quais dos compostos presentes nas três subfrações possuíam maior potencial e, por isso, seriam isolados. Desta forma, cinco compostos foram isolados pela técnica de CLAE semipreparativa, sendo que dois foram testados frente ao ensaio de sequestro do DPPH•. Os valores de EC50 obtidos, 30,34 e 38,72 μg/mL, estão próximos aos encontrados na literatura para substâncias isoladas de outras matrizes naturais. A técnica de RMN permitiu identificar um flavonol glicosilado. Os resultados deste trabalho mostraram que as folhas de M. oleifera coletadas em Itajaí são fonte de compostos fenólicos com potencial antioxidante e, por isso, promissoras para aplicação nas indústrias de cosméticos, alimentos e farmacêutica. / Moringa oleifera (Moringaceae) is a plant that has wide industrial application, high nutritional value and, also, exhibits several biological activities. Used in folk medicine, M. oleifera leaves have already been shown to possess a wide variety of bioactive molecules, including phenolic componds, which are possibly responsible for the antioxidant potential of this part of the plant. Despite the growing interest in this species and, specifically, in its phytochemical potential, there are few studies about the isolation and identification of bioactive compounds present in M. oleifera leaves, especially in specimens grown in Brazil. Therefore, the aims of this work were to compare two methods for extracting bioactive componds and, than, to isolate compounds with antioxidant activity of M. oleifera leaves collected in Itajaí (Santa Catarina, Brazil) by a bioguided study. The bioguided monitoring was carried out with in vitro assays to determine the antioxidant activity: Folin-Ciocalteau reagent reduction capacity, FRAP assay, DPPH and ABTS radical scavenging methods and, also, the ORAC assay. HPLC-DAD technique was used for chemical characterization and monitoring of the isolation stages. The main practical difference between the evaluated extraction methods was the preparation of an initial hydroalcoholic extract, in the extraction process 1. From the results of the antioxidant activity determination, interpreted with the aid of statistical tools (Tukey’s test and paired t-test), it was possible to see that the potential of M. oleifera leaves varied depending on the extraction form and on the solvents used. In general, the fractions prepared from the extraction process 1 showed higher antioxidant activity and chromatographic profiles with more intense signals. Based on these results, the fraction obtained with ethyl acetate, in the extraction process 1, was selected for the bioguided isolation. The purification of this fraction on an open column of silica gel generated 61 subfractions, which, after TLC analysis, were grouped in 18. The evaluation of the antioxidant activity of grouped subfractions showed that five of them presented great potential. However, depending on the yield, only three could follow the isolation. In this step, an additional analysis was performed: the determination of the antioxidant activity by an on-line HPLC method with the ABTS•+. This technique allowed defining which of the compounds presented in each subfraction had higher potential and, therefore, would be isolated. In this way, five compounds were isolated by semipreparative HPLC, two of them were tested by the DPPH• scavenging assay. The obtained EC50 values, 30.34 and 38.72 μg/mL, are close to those found in literature for substances isolated from other natural matrices. The NMR technique allowed identifying a flavonol glucoside. The results of this work showed that M. oleifera leaves collected in Itajaí are source of phenolic compounds with antioxidant potential and, therefore, are promising for the application in cosmetics, food and pharmaceutical industries.

Made available in DSpace on 2015-05-14T13:00:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3314099 bytes, checksum: 6718a7629561d518b36935f1ca31ec59 (MD5) Previous issue date: 2013-10-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The fungi have become, over the last two decades, a major cause of illness in humans. Fungi of the genus Penicillium can be found in various substrates and affect immunocompromised people, hospitalized patients, many animals and plants, as well as compromise the quality of air indoors. The indiscriminate use of antibiotics and the resulting framework of resistance of microorganisms to conventional antimicrobial therapy has been stimulating researchers to seek alternative sources of these compounds, among them products derived by medicinal plants. Tendency to get phytochemicals from extracts, fractions, fixed or essential oils obtained from plant species is currently observed. In this context, the present study evaluated the in vitro antifungal activity of seven phytochemicals: carvacrol, citral, geraniol, linalool, pcymene, terpinolene and thymol, against twelve strains of Penicillium. Firstly, screening was carried out to find the phytochemical with the best activity by determining the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) by the broth microdilution technique. Following, the tests were proceeded with thymol, which were: determination of Minimum Fungicidal Concentration (MFC), effect of the phytochemical on mycelial growth kinetics, interference of thymol on germination of conidia and evaluation of the influence of thymol on the fungal morphology. To this end, we selected two strains, one that was more resistant and another with a more sensitive profile. The value of thymol MIC50 and MIC90 was 128μg/ml, while the CFM value ranged from 128μg/ml to 1024μg/ml. It was observed total radial mycelial growth inhibition at the three thymol concentrations used (128μg/ml, 256μg/ml and 512μg/ml) over 14 days of exposure. In the study of the interference of thymol on the conidia germination was observed inhibitory effect. At the concentration of 512μg/mL was found greater than 80% inhibition, at 256 μg/mL inhibition was higher than 75%, while in 128μg/mL inhibition was higher than 60%, all this for both strains tested, revealing concentration-dependent inhibitory effect. In the presence of thymol, morphological changes were observed in mycelial structure, such as decrease in the amount of conidia, reduction in the formation of reproductive structures with the appearance of rudimentary reproductive structures, besides the abnormal development of hyphae. Given the above, it is concluded that thymol has antifungal activity against strains of Penicillium and therefore represents a new possibility in the arsenal of products for the treatment of infections caused by this fungus. / Os fungos tornaram-se, ao longo das últimas duas décadas, uma das principais causas de doença em humanos. Fungos do gênero Penicillium podem ser encontrados nos mais variados substratos e afetam indivíduos imunocomprometidos, pacientes hospitalizados, animais e plantas diversas, além de comprometerem a qualidade do ar de ambientes internos. O uso indiscriminado de antibióticos e o decorrente quadro de resistência dos microrganismos à terapêutica antimicrobiana convencional vem impulsionando os pesquisadores a buscarem fontes alternativas desses fármacos, dentre elas, produtos de plantas medicinais. Observa-se, atualmente, uma tendência à obtenção de fitoconstituintes a partir de extratos, frações, óleos fixos ou essenciais, obtidos de espécies vegetais. Nesse contexto, o presente estudo avaliou a atividade antifúngica in vitro de sete fitoconstituintes: carvacrol, citral, geraniol, linalol, pcimeno, terpinoleno e timol, sobre doze cepas de Penicillium. Primeiramente, realizou-se uma triagem para encontrar o fitoconstituinte com melhor atividade, através da determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM), pela técnica de microdiluição. A seguir, prosseguiram-se os testes com o timol, quais foram: determinação da Concentração Fungicida Mínima (CFM), efeito do fitoconstituinte sobre a cinética de crescimento micelial do fungo, interferência do timol sobre a germinação dos conídios e avaliação da influência do timol sobre a micromorfologia fúngica. Para tanto, foram selecionadas duas cepas, uma que se mostrou mais resistente e outra com perfil mais sensível. O valor da CIM50 do timol, bem como da CIM90, foi 128μg/ml, já o valor da CFM variou de 128μg/ml a 1024μg/ml. Observou-se total inibição do crescimento micelial radial, nas três concentrações de timol utilizadas (128μg/ml, 256μg/ml e 512μg/ml), ao longo de 14 dias de exposição. No estudo da interferência do timol sobre a germinação dos conídios, observou-se efeito inibitório. Na concentração de 512μg/mL foi encontrada uma inibição superior a 80%, em 256 μg/mL a inibição foi superior a 75%, enquanto que em 128μg/mL a inibição foi superior a 60%, para as duas cepas testadas, revelando um efeito inibitório dependente da concentração. Na presença do timol, foram observadas alterações morfológicas na estrutura micelial, tais como diminuição do número de conídios, redução da formação de estruturas de reprodução com surgimento de estruturas reprodutivas rudimentares, além de desenvolvimento anormal das hifas. Diante do exposto, conclui-se que o timol apresenta atividade antifúngica contra cepas de Penicillium e, conseqüentemente, representa uma nova possibilidade no arsenal de produtos para o tratamento de infecções por este fungo.

O estudo envolveu dois experimentos com o objetivo de avaliar o efeito de estratégias de alimentação sobre o estresse oxidativo, consumo, metabólitos sanguineos, a evolução da produção e composição do leite de vacas de diferentes composições raciais durante o período de transição. Estudo 1:Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado, com medidas repetidas no tempo e 24 vacas da raça Jersey foram distribuídas nos tratamentos controle - sem a adição de extratos vegetais (CON), adição de 10 gramas/dia de extrato de orégano (EO) e adição de 5,0 g/dia de extrato de chá verde (ECV).O fornecimento de extrato de orégano melhorou a eficiência alimentare a produção de leite em relação ao extrato de chá verde. A adição de extratos vegetais na dieta reduziu o radical livre(ROS) DCFE, contribuindo para redução do estresse oxidativo. Estudo 2:Foi utilizado o delineamento experimental inteiramente casualizado, em arranjo fatorial 2x2 (duas composições raciais e dois planos nutricionais no pré parto) com seis repetiçõese medidas repetidas no tempo. Durante 21 dias pré parto, novilhas Girolando F1 (½ Holandês ½ Gir) e Holandês receberam a mesma dieta total misturada (TMR), variando somente a quantidade ofertada (plano nutricional): 1,69 ou1,89% do peso corporal(PC) de matéria seca No pós parto, os animais receberam dietas semelhantes formuladas conforme as recomendações do NRC (prevista para raça Holandês). O plano nutricional de 1,89% do PC aumentou a concentração de ácidos graxos não esterificados (AGNE) no pré parto,a concentração de glicose no pós parto e o estresse oxidativo durante todo o período experimental em relação ao plano nutricional 1,69% do PC. Os animais da raça Girolando F1apresentaram os maior ECC durante todo o período experimental, menor ingestão de matéria seca no pré e pós parto e menor consumo de energia metabólica no pós parto;aumento da concentração de creatinina e AGNE no pré parto e maior concentração de glicose no pós parto; menor produção de leite, menor concentração de lactose em relação a animais Holandês.Diferenças metabólicas como as concentrações de AGNE, creatinina e glicose entre as composições raciais podem ter influenciado as variáveis indicativas de estresse oxidativo. O plano nutricional 1,89% do PC durante o período seconão deve ser oferecido, independentemente da composição racial. Animais Girolando F1 devem ser manejados de forma distinta de animais Holandês durante o período de transição, pois apresentam diferenças de consumo e metabolismo. / The study was performed based on two trialsand aimed of evaluating the effect of feeding strategies on oxidative stress, consumption, blood metabolites, milk production and milk composition of cows of different racial compositions during the transition period. Trial 1: we used a completely randomized design, with repeated measures along the time, where 24 Jersey cows were distributed in two diets: control - without the addition of plant extracts (CON), addition of 10 grams per day of oregano extract (OE) and addition of 5.0 grams per day of green tea extract (GTE). The supply of OE improvedfeed conversion during the postpartum period and milk production compared to GTE. The addition of plant extracts in the diet reduces the free radical (ROS) DCFE, contributing to the reduction of oxidative stress. Trial 2: A completely randomized experiment design was used, in a 2x2 factorial arrangement (two racial compositions and two nutritional plans in prepartum), with time-repeated measures (during days), with four treatments and six repetitions (heifers) in each treatment. For 21 day before of prepartum, nuluparous females Girolando F1 (½ Holstein ½ Gir) and Holstein received the same total mixed diet (TMR), varying only the amount offered (nutritional plan): 1.69 and 1.89% of (BW) of dry matter. In the postpartum the animals received the same basal diet formulated according to the recommendations of the NRC (predicted for Holstein) The nutritional plane of 1.89% showed a higher concentration of calcium and non-esterified fatty acids (NEFA) in the prepartum, higher concentration of glucose in the postpartum period and greater oxidative stress throughout the experimental period in relation to the nutritional plane 1,69% of the PC. The animals Girolando F1 had the highest ECC during the experimental period, lower intake of dry matter in the pre and postpartum, and lower metabolic energy consumption in the postpartum period; increased creatinine concentration and NEFA in prepartum and higher postpartum glucose concentration; lower milk yield, lower lactose concentration in relation to Hostein animals. Metabolic differences such as the concentrations of NEFA, creatinine and glucose among racial compositions may have influenced the variables indicative of oxidative stress. The nutritional plan 1.89%CP supply during the dry period should not be indicated. Girolando F1 animals should be handled differently from Holstein animals during the transition period, as they exhibit differences in intake and metabolism.

abstract: Food system and health characteristics were evaluated across the last Waorani hunter-gatherer group in Amazonian Ecuador and a remote neighboring Kichwa indigenous subsistence agriculture community. Hunter-gatherer food systems like the Waorani foragers may not only be nutritionally, but also pharmaceutically beneficial because of high dietary intake of varied plant phytochemical compounds. A modern diet that reduces these dietary plant defense phytochemicals below levels typical in human evolutionary history may leave humans vulnerable to diseases that were controlled through a foraging diet. Few studies consider the health impact of the recent drastic reduction of plant phytochemical content in the modern global food system, which has eliminated essential components of food because they are not considered "nutrients". The antimicrobial and anti-inflammatory nature of the food system may not only regulate infectious pathogens and inflammatory disease, but also support beneficial microbes in human hosts, reducing vulnerability to chronic diseases. Waorani foragers seem immune to certain infections with very low rates of chronic disease. Does returning to certain characteristics of a foraging food system begin to restore the human body microbe balance and inflammatory response to evolutionary norms, and if so, what implication does this have for the treatment of disease? Several years of data on dietary and health differences across the foragers and the farmers was gathered. There were major differences in health outcomes across the board. In the Waorani forager group there were no signs of infection in serious wounds such as 3rd degree burns and spear wounds. The foragers had one-degree lower body temperature than the farmers. The Waorani had an absence of signs of chronic diseases including vision and blood pressure that did not change markedly with age while Kichwa farmers suffered from both chronic diseases and physiological indicators of aging. In the Waorani forager population, there was an absence of many common regional infectious diseases, from helminthes to staphylococcus. Study design helped control for confounders (exercise, environment, genetic factors, non-phytochemical dietary intake). This study provides evidence of the major role total phytochemical dietary intake plays in human health, often not considered by policymakers and nutritional and agricultural scientists. / Dissertation/Thesis / Ph.D. Anthropology 2012

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / The pulsed light (PL) is a technology emergent used as abiotic stressor to increase the content of phytochemicals of fruits and vegetables. However, their effects vary depending on the cultivar, the dose hormetic, the mode of application of dose and the maturation stage of fruits. In this work, we start from the main hypothesis that changes in the metabolism of the fruits of mangoes treated with low doses of pulsed light would trigger responses that result in a positive impact on the content of phytochemicals, without any negative effect on the fruit quality parameters. This work was divided into three chapters. Chapter I is a literature review and state of the art of the main topics covered throughout the study. In the second chapter (experiment I), mangoes mature physiologically (maturation stage 3) were subjected to a hormetic dose of pulsed light 0.6 J cm-2 and analyzed after 7 days storage at 20 ÂC, for the physicochemical characteristics [soluble solid (SS), titratable acidity (TA), SS/TA ratio, overall appearance, color and firmness], enzymatic antioxidant metabolism [superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and ascorbate peroxidase (APX)] and non-enzymatic [ascorbate, total carotenoids, total anthocyanins, yellow flavonoids, total phenolic, mangiferin content and total antioxidant activity], membrane integrity [lipid peroxidation (MDA), hydrogen peroxide content and electrolyte leakage], phenylalanine ammonia lyase activity (PAL), enzymes of enzymatic browning [polyphenoloxidase (PPO), peroxidase of guaiacol (GPOD) and activity of enzymes wall cell [pectinmethylesterase (PME) and polygalacturonase (PG)] and the influence of treatment on tissue histology. The activity of antioxidant enzymes such as catalase and superoxide dismutase was found to be substantially enhanced in both the epicarp and the mesocarp of fruits exposed to PL after 7 days at 20 ÂC. There were no differences in indicators of cell wall and membrane integrity such as MDA content suggesting that the PL-associated oxidative stress was effectively prevented by the enhanced activity of antioxidant enzymes after 7 days. Activities of cell wall enzymes were reduced after 7 days in the PL-treated fruits. Microscopic as well as macroscopic observations confirmed that PL-treated fruits were not damaged. We observed that contents in total carotenoids, in total phenolic, and, to a lesser extent, in vitamin C, were dramatically increased after 7 days, generally in both the epicarp and the mesocarp PL-treated resulting in fruits with high antioxidant capacity. Carotenoids increased 350% in treated-pulp at J7. The higher levels in phenolics in treated-peel (+97%) were associated with enhanced activity of PAL (+98%) and enhanced content in mangiferin (+42%). Although G-POD in the mesocarp and PPO in the epicarp increased 1268% and 22% respectively, after 7 days in the PL-treated fruits, we did not observe increases in browning. Was observed at the end of the experiment I an increase of phytochemicals in mangoes subjected to hormetic dose of 0.6 J cm-2 without negative changes in fruit quality. In the third chapter (experiment II), mangoes minimally processed (maturation stage 4) were subjected to four different treatments: control (not flashed), 1 pulse, 4 pulses, and 1 pulse (4 days) prior to storage at 6 ÂC in order to assess whether the mode of application of the different doses used could interfere on physiochemical variables [firmness, color, SS, loss weight and rate respiration] the bioactive compounds [ascorbate (AsA) and carotenoids] and total antioxidant activity by a storage period of 7 days at 6 ÂC. Samples flashed with 1 pulse during 4 alternated days (4 x 0.6 J cm-2 = 2.80 J cm-2) increased the total ascorbate (AsA) (~40% more than the control) at time 7 days but the cubes of mangoes are darker than treatment that received the same dose of 4 successive pulses (2.80 J cm-2). At end of storage fresh cut mangoes received 4 successive pulses exhibited a better quality in comparison to the other treatments that was associated a higher content carotenoid (0.894 mg g-1) and antioxidant activity (~145 μmol trolox 100 g-1). In conclusion, our data suggest that a hormetic dose of pulsed light can be used to increase concentrations of phytochemical compounds without negative effects on the quality criteria. / A luz pulsada (LP) à uma tecnologia emergente usada como estressor abiÃtico para aumentar o teor de fitoquÃmicos em frutos e vegetais. No entanto, seus efeitos variam dependendo da cultivar, da dose hormÃtica, do modo de aplicaÃÃo da dose e do estÃdio de maturaÃÃo do fruto. Neste trabalho, partimos da hipÃtese de que alteraÃÃes no metabolismo dos frutos de mangas tratadas por baixas doses de luz pulsada desencadeariam respostas que resultariam em um impacto positivo sobre o conteÃdo de fitoquÃmicos, sem qualquer efeito negativo sobre os parÃmetros de qualidade dos frutos. Este trabalho foi dividido em trÃs capÃtulos. O capÃtulo I trata de uma revisÃo de literatura e estado da arte dos principais tÃpicos abordados ao longo do estudo. No segundo capÃtulo (experimento I), mangas fisiologicamente maduras (estÃgio de maturaÃÃo 3) foram submetidas a uma dose de luz pulsada de 0,6 J cm-2 e analisadas decorridos 7 dias de armazenamento a 20 ÂC, quanto Ãs caracterÃsticas fisico-quÃmicas [sÃlidos solÃveis (SS), acidez titulÃvel (AT), relaÃÃo SS/AT, aparÃncia geral cor, firmeza], metabolismo antioxidante enzimÃtico [dismutase do superÃxido (SOD), catalase (CAT) e peroxidase do ascorbato (APX)] e nÃo-enzimÃtico [vitamina C, carotenÃides totais, antocianinas totais, flavonÃides amarelos, polifenÃis totais, conteÃdo de mangiferina e atividade antioxidante total], integridade de membrana [peroxidaÃÃo lipÃdica (MDA), perÃxido de hidrogÃnio e extravasamento de eletrÃlitos], atividade da fenilalanina amÃnia liase (PAL), atividade das enzimas de escurecimento [polifenoloxidase (PPO) e peroxidase do guaiacol (G-POD)], atividade das enzimas de parede celular [pectinametilesterase (PME) e poligalacturonase (PG)] e a influÃncia do tratamento na histologia dos tecidos. A atividade das enzimas antioxidantes como a dismutase superÃxido e a catalase encontraram-se elevadas tanto na polpa quanto na casca dos frutos expostos à LP apÃs 7 dias a 20 ÂC. NÃo foram encontradas diferenÃas significativas nos indicadores de parede celular e integridade de membrana como o MDA, sugerindo que o estresse oxidativo associado à LP foi efetivamente prevenido atravÃs do aumento da atividade das enzimas antioxidantes apÃs 7 dias. Atividades das enzimas de parede celular foram reduzidas apÃs 7 dias nos frutos tratados. ObservaÃÃes macroscÃpicas e microscÃpicas confirmaram que os frutos nÃo foram danificados pela LP. O conteÃdo de carotenÃides totais, fenÃlicos, e em menor extensÃo, a vitamina C, foram dramaticamente aumentados apÃs 7 dias, tanto no epicarpo como mesocarpo tratados pela LP, resultando em frutos com alta capacidade antioxidante. CarotenÃides aumentaram 350% na polpa tratada pela LP apÃs 7 dias. Os nÃveis mais elevados de compostos fenÃlicos (+97%) na casca tratada foram associados a uma atividade aumentada da PAL (+98%) e conteÃdo de mangiferina (+42%). As atividades da G-POD no mesocarpo e da PPO no epicarpo aumentaram 1268% e 22% respectivamente, apÃs 7 dias nos frutos tratados, no entanto, nÃo foi observado escurecimento dos frutos. Observou-se, ao final do primeiro experimento, um aumento dos fitoquÃmicos em mangas submetidas a dose hormÃtica de 0,6 J cm-2 sem alteraÃÃes negativas na qualidade dos frutos. No terceiro capÃtulo (experimento II), mangas minimamente processadas (estÃgio de maturaÃÃo 4), foram submetidas a quatro diferentes tratamentos: controle, 1 pulso, 4 pulsos e 1 pulso por dia durante 4 dias, com o objetivo de avaliar se o modo de aplicaÃÃo da LP poderia interferir nas variÃveis fisico-quÃmicas [firmeza, SS, cor, perda de matÃria fresca e taxa de respiraÃÃo], compostos bioativos [carotenÃides e vitamina C] e atividade antioxidante total quando armazenamentos durante 7 dias a 6 ÂC. Amostras que receberam 4 pulsos alternados (4 x 0,7 J cm-2 = 2,80 J cm-2), aumentaram o conteÃdo de ascorbato total (~40%) apÃs 7 dias, no entanto, os cubos apresentaram-se mais escuros do que o tratamento que recebeu a mesma dose de 4 pulsos sucessivos. No final do perÃodo de armazenamento, as mangas minimamente processadas que receberam 4 pulsos sucessivos exibiram uma melhor qualidade em comparaÃÃo com os demais tratamentos, que foi associado ao elevado teor de carotenÃides (0,894 mg g-1 MF) e atividade antioxidante (~145 μmol trolox 100 g-1). Como conclusÃo, nossos dados sugerem que uma dose hormÃtica de luz pulsada pode ser utilizada para aumentar as concentraÃÃes de compostos fitoquÃmicos sem efeitos negativos na qualidade de frutos de mangas âTommy Atkinsâ.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-04-29T15:20:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) dissertaçao1.2novaantimicrobiana1final1.2.pdf: 1493025 bytes, checksum: 3516ce495abc1dca6a61ef9a8cbe8786 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-29T15:20:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) dissertaçao1.2novaantimicrobiana1final1.2.pdf: 1493025 bytes, checksum: 3516ce495abc1dca6a61ef9a8cbe8786 (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / FACEPE / Propriedades farmacológicas de plantas são reconhecidas, empiricamente, há séculos. Neste aspecto, o interesse por vegetais deve-se, sobretudo, à aptidão destes em produzir compostos biologicamente ativos. As samambaias, apreciadas pelo uso ornamental, são utilizadas para a cura de doenças. Além da atividade antimicrobiana, várias outras, tais como antioxidante, antinociceptiva, antitumoral, anti-inflamatória, citotóxica são relatadas como propriedades biológicas destes vegetais. Com a ascensão das doenças crônicas não transmissíveis, especialmente das doenças do aparelho circulatório e das neoplasias, e a persistência das doenças infecciosas e parasitárias, marcadas pela resistência microbiana a antibióticos, a busca por novos fármacos com ação antimicrobiana e citotóxica torna-se imprescindível. Diante deste contexto, este estudo objetivou avaliar a atividade antimicrobiana e citotóxica dos extratos de Asplenium serratum L. e Marsilea minuta L., samambaias ocorrentes no Brasil, e descritas na terapêutica popular. Os extratos metanólico de A. serratum e etanólico de M. minuta foram obtidos, respectivamente, por esgotamento a frio e maceração. A análise fitoquímica foi feita por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) para os padrões quercetina e cafeína. Na atividade antimicrobiana foram utilizadas bactérias padrão, Escherichia coli, Shigela flexneri, Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus MSSA, e a Concentração Inibitória Mínima (CIM) foi determinada pelo método de microdiluição, com concentrações variando de 5mg/mL a 0,005mg/mL. O sinergismo, testado contra E. coli e S. aureus MSSA, foi realizado pelo método checkerboard. A citotoxicidade foi verificada através do método MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio), frente a células tumorais humanas NCI-H29, HEp-2, MCF-7 e HL-60. A quercetina e cafeína foram sugeridas como constituintes de M. minuta. Os extratos apresentaram CIM de 5,0 mg/mL frente à S. aureus MSSA e S. typhimurium, e de 2,5 mg/mL contra E. coli e S. flexneri. Em sinergismo, perante S. aureus MSSA, apresentaram atividade bactericida em concentrações ≥ 2,56 mg/mL (A. serratum) e ≥ 0,33 mg/mL (M. minuta). No caso de E. coli, a ação bactericida foi ≥ 1,31 mg/mL (A. serratum) e ≥ 2,62 mg/mL (M. minuta). Os extratos foram considerados inativos frente às células tumorais testadas, com percentuais de inibição inferiores a 50 % para concentração de 50 μg/ mL. Portanto, foi possível concluir que os extratos das espécies em estudo possuem potencial antimicrobiano e exibem efeito sinérgico, além de apresentarem metabólitos, ainda a serem identificados. / Pharmacological properties of plants are recognized, empirically, for centuries. In this aspect, interest in plants is mainly because their ability to produce biologically active compounds. Ferns, appreciated by their ornamental use, are utilized to cure diseases. Besides antimicrobial activity, several others properties such as antioxidant, anti-nociceptive, antitumor, anti-inflammatory, cytotoxic and biological are reported for these plants. With the rise of non-communicable chronic diseases, especially circulatory diseases and neoplasms, and the persistence of infectious and parasitic diseases, marked by microbial resistance to antibiotics, the search for new drugs with antimicrobial and cytotoxic action becomes imperative. In front of this context, this study aimed to evaluate antimicrobial and cytotoxic activity of extracts from Asplenium serratum L. and Marsilea minuta L., occurring ferns in Brazil, described in popular therapy. Extracts, methanolic of A. serratum and ethanolic of M.minuta, were obtained, respectively, by cold exhaustion and maceration. Phytochemical analysis was performed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) for standards of quercetin and caffeine. Default bacteria Escherichia coli, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus MSSA, were used in antimicrobial activity. The Minimal Inhibitory Concentration (MIC) was determined by the microdilution method, with concentrations ranging from 5mg / mL to 0.005 mg / mL. Synergism tested against E. coli and S. aureus MSSA was executed by checkerboard method. Cytotoxicity was assessed by MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide) against human tumor cells, NCI-H29, HEp-2, MCF-7 and HL -60. Quercetin and caffeine have been suggested as constituents of M. minuta. The extracts showed MIC of 5.0 mg / mL against S. aureus MSSA and S. typhimurium, and 2.5 mg / mL against E. coli and S. flexneri. In synergism, against S. aureus MSSA, fern extracts showed bactericidal activity at concentrations ≥ 2.56 mg / mL (A. serratum) and ≥ 0.33 mg / mL (M. minuta). In the case of E. Coli, the bactericidal action was ≥ 1.31 mg / mL (A. serratum) and ≥ 2.62 mg / mL (M. minuta). The extracts were considered inactive in front of the tumor cells tested, with percentages lower than 50% inhibition at concentration of 50 μg / ml. Therefore, the extracts of studied species have antimicrobial potential and exhibits synergistic effect, besides having metabolites, yet to be identified.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:25:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_gisely_correa_de_moura.pdf: 950084 bytes, checksum: e2834e43f9fde7d2d8b65bf5826d57d6 (MD5) Previous issue date: 2013-07-30 / The objective of this study was to evaluate the growth, production and fruit quality of blueberry under different plant management. The parameters evaluated in Southern Brasil, were: nitrogen and sulfur dosages and pruning intensity. It was also corrield out a cultivar test to choose, the ones with better fruit quality in environmental conditions of Turin, northern Italy. Four experiments were conducted to reach the objectives: (1) the nitrogen influence, using ammonium sulfate (NH4)2SO4 with 21% N2 and 23% sulfur as a nitrogen source, (2) influence of sulfur dosages (in grams per m3 of pots), (3) evaluation of intensity of pruning, and (4) evaluation of cultivars Aurora, Berkeley, Bluecrop, Bonifacy, Brigittablue, Draper, Duke, Emerald, group 'Northen highbush', and Gulfcoast, Jewel, Legacy, Liberty, Millenia, Misty, The ' Neal, Ozarkblue, Palmetto, Primadonna, Sebring, Snowchaser, SouthernBelle, Springhigh, Springwide, Star Group 'southern highbush'. The last experiment was conducted in Torino, Italy, during the 2011/2012 growth season. In all experiments the variables analyzed were production and fruit quality, achieved through physical and chemical analysis, and the presence of phytochemicals in fruits. In the first two experiments, were also evaluated the minerals present in fruits. The conclusions were: the nitrogen applied on soil does not alter plant growth and productivity. Among the physico-chemical characteristics of fruits, only total acidity is changed according to the nitrogen dosages. Anthocyanins, phenolic compounds and antioxidant activity are influenced by nitrogen. Fruit yield and plant growth were not altered with the sulfur application, in the first production year. Moreover, phenolic compounds exhibit quadratic response and the total acidity decreased influenced by the sulfur applications. In relation to the analysis of cultivars in Italy, Aurora, Draper, Bekeley, Bluecrop, Bonifacy, Brigitta, Legacy, Liberty, may be considered late in the conditions of Torino. The cultivar O'Neal has the most concentrated harvest. The cultivar Jewel is one of the best in respect to physico-chemical composition, but should be further investigated in respect to adaptability. Legacy and Palmetto have high levels of polyphenols, with good fruit size and appearance. / Este estudo teve como objetivo avaliar o crescimento, a produção e a qualidade das frutas de mirtileiros, sob diferentes formas de manejo de plantas. Os fatores avaliados foram: doses de nitrogênio, doses de enxofre e intensidades de poda. Além disso, foi avaliado, por meio de competição de cultivares, aquelas que apresentavam melhor qualidade de frutos, nas condições edafoclimáticas de Torino, norte da Itália. Para isso foram realizados quatro experimentos. (1) influência de doses de nitrogênio, utilizando como fonte o sulfato de amônio (NH4)2SO4 com 21% de N2 e 23% de enxofre; (2) influência de doses de enxofre em gramas por m3 de substrato; (3) avaliação da intensidade de poda; e (4) avaliação de cultivares Aurora, Berkeley, Bluecrop, Gulfcoast, Jewel, Legacy, Liberty, Millenia, Misty, O'Neal, Ozarkblue, Palmetto,Primadonna, Sebring, Snowchaser, Southernbelle, Springhigh, Springwide, StarItália, durante o ano de (2011/2012). Em todos os experimentos as variáveisresposta foram produção e qualidade de frutos, alcançada por meio de análises físico-químicas e presença de fitoquímicos nos frutos. Nos dois primeiros experimentos foram avaliados, ainda, os mineirais presentes nos frutos. Conclui-se que: as doses de nitrogênio aplicadas no solo não alteram produtividade e crescimento de plantas. Dentre as características físicoquímicas dos frutos, apenas acidez total titulável é alterada pelas doses de nitrogênio. Antocianinas, compostos fenólicos e atividade antioxidante, são influenciadas pelas doses de nitrogênio. A produção de frutos e o crescimento de plantas, não foram alterados com as aplicações de enxofre, no primeiro ano de produção. Por outro lado, compostos fenólicos respondem de forma quadrática e a acidez total diminuiu, influenciada pelas aplicações de enxofre. Quanto à análises das cultivares na Italia, Aurora, Draper, Bekeley, Bluecrop, Bonifacy, Brigitta, Legacy, Liberty, podem ser consideradas tardias, nas condições de Torino. A cultivar O'Neal possui a colheita mais concentrada. A cultivar Jewel é uma das melhores com relação à composição físico-química, mas deve ser melhor estudada com relação à adaptabilidade. Legacy e Palmetto apresentam elevados teores de polifenóis, com frutos de bom tamanho e aparência.

O estudo envolveu dois experimentos com o objetivo de avaliar o efeito de estratégias de alimentação sobre o estresse oxidativo, consumo, metabólitos sanguineos, a evolução da produção e composição do leite de vacas de diferentes composições raciais durante o período de transição. Estudo 1:Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado, com medidas repetidas no tempo e 24 vacas da raça Jersey foram distribuídas nos tratamentos controle - sem a adição de extratos vegetais (CON), adição de 10 gramas/dia de extrato de orégano (EO) e adição de 5,0 g/dia de extrato de chá verde (ECV).O fornecimento de extrato de orégano melhorou a eficiência alimentare a produção de leite em relação ao extrato de chá verde. A adição de extratos vegetais na dieta reduziu o radical livre(ROS) DCFE, contribuindo para redução do estresse oxidativo. Estudo 2:Foi utilizado o delineamento experimental inteiramente casualizado, em arranjo fatorial 2x2 (duas composições raciais e dois planos nutricionais no pré parto) com seis repetiçõese medidas repetidas no tempo. Durante 21 dias pré parto, novilhas Girolando F1 (½ Holandês ½ Gir) e Holandês receberam a mesma dieta total misturada (TMR), variando somente a quantidade ofertada (plano nutricional): 1,69 ou1,89% do peso corporal(PC) de matéria seca No pós parto, os animais receberam dietas semelhantes formuladas conforme as recomendações do NRC (prevista para raça Holandês). O plano nutricional de 1,89% do PC aumentou a concentração de ácidos graxos não esterificados (AGNE) no pré parto,a concentração de glicose no pós parto e o estresse oxidativo durante todo o período experimental em relação ao plano nutricional 1,69% do PC. Os animais da raça Girolando F1apresentaram os maior ECC durante todo o período experimental, menor ingestão de matéria seca no pré e pós parto e menor consumo de energia metabólica no pós parto;aumento da concentração de creatinina e AGNE no pré parto e maior concentração de glicose no pós parto; menor produção de leite, menor concentração de lactose em relação a animais Holandês.Diferenças metabólicas como as concentrações de AGNE, creatinina e glicose entre as composições raciais podem ter influenciado as variáveis indicativas de estresse oxidativo. O plano nutricional 1,89% do PC durante o período seconão deve ser oferecido, independentemente da composição racial. Animais Girolando F1 devem ser manejados de forma distinta de animais Holandês durante o período de transição, pois apresentam diferenças de consumo e metabolismo. / The study was performed based on two trialsand aimed of evaluating the effect of feeding strategies on oxidative stress, consumption, blood metabolites, milk production and milk composition of cows of different racial compositions during the transition period. Trial 1: we used a completely randomized design, with repeated measures along the time, where 24 Jersey cows were distributed in two diets: control - without the addition of plant extracts (CON), addition of 10 grams per day of oregano extract (OE) and addition of 5.0 grams per day of green tea extract (GTE). The supply of OE improvedfeed conversion during the postpartum period and milk production compared to GTE. The addition of plant extracts in the diet reduces the free radical (ROS) DCFE, contributing to the reduction of oxidative stress. Trial 2: A completely randomized experiment design was used, in a 2x2 factorial arrangement (two racial compositions and two nutritional plans in prepartum), with time-repeated measures (during days), with four treatments and six repetitions (heifers) in each treatment. For 21 day before of prepartum, nuluparous females Girolando F1 (½ Holstein ½ Gir) and Holstein received the same total mixed diet (TMR), varying only the amount offered (nutritional plan): 1.69 and 1.89% of (BW) of dry matter. In the postpartum the animals received the same basal diet formulated according to the recommendations of the NRC (predicted for Holstein) The nutritional plane of 1.89% showed a higher concentration of calcium and non-esterified fatty acids (NEFA) in the prepartum, higher concentration of glucose in the postpartum period and greater oxidative stress throughout the experimental period in relation to the nutritional plane 1,69% of the PC. The animals Girolando F1 had the highest ECC during the experimental period, lower intake of dry matter in the pre and postpartum, and lower metabolic energy consumption in the postpartum period; increased creatinine concentration and NEFA in prepartum and higher postpartum glucose concentration; lower milk yield, lower lactose concentration in relation to Hostein animals. Metabolic differences such as the concentrations of NEFA, creatinine and glucose among racial compositions may have influenced the variables indicative of oxidative stress. The nutritional plan 1.89%CP supply during the dry period should not be indicated. Girolando F1 animals should be handled differently from Holstein animals during the transition period, as they exhibit differences in intake and metabolism.

The use of plants for cosmeceutical applications is becoming more important since “safer” and more “natural” skin products are gaining popularity. The effect of different drying methods and storage conditions on metabolite changes and biological activity of two species with cosmeceutical application namely Greyia flanaganii and Leucosidea sericea were investigated using 1H-NMR metabolomics. The multivariate analysis (PCA and OPLS-DA), and 1H-NMR sample spectra were used to analyse the significant differences (P<0.05) resulting from the different treatments. The effect of these treatments on anti-tyrosinase and anti-bacterial (against Staphylococcus aureus) activity of G.flanaganii and L.sericea ethanol leaf extracts respectively, was further investigated to assess the quality. Four different drying methods adopted were freeze drying, oven drying at 50°C, air drying at room temperature and sun drying in a greenhouse. The dried leaf extracts were stored in three different conditions of fridge, freezer and shade conditions and samples from each storage condition taken for analysis at three and six months of storage. The chemical constituents of the leaf extracts of both species were not affected by the drying method and the storage condition, but the concentrations of the metabolites changed. The treatments did not show a significant difference (P<0.05) on the biological activity of the extracts. However, G.flanaganii plant material harvested from the University of Pretoria exhibited a higher anti-tyrosinase activity than material harvested from Mothong heritage site. In G. flanaganii freshly freeze and oven dried extracts exhibited a higher anti-tyrosinase activity with fifty percent inhibitory (IC50) activity of 16.8±0.69 μg/ml and 15.73±0.85 μg/ml respectively than the activity of sun and air dried with IC50 values of 33.08±0.78 μg/ml and 36.86±2.01 μg/ml respectively. The metabolite concentrations and anti-tyrosinase activity dropped significantly after storage. Leucosidea sericea oven and freeze dried extracts, exhibited good anti-bacterial activity with a minimum inhibitory concentration (MIC) value of 0.25 μg/ml and 0.125 μg/ml respectively as compared to sun and air dried extracts with the same MIC value of 0.5 μg/ml. Freeze dried samples showed the best anti-bacterial activity (MIC 0.125 μg/ml) compared to other drying methods. Fridge and freezer storage conditions enhanced the activity of stored sample. / College of Agriculture and Environmental Sciences / M. Sc. (Agriculture)

Phytochemicals are recognized as playing an important role in cancer prevention by fruits and vegetables. The avocado is a widely grown and consumed fruit that is high in nutrients and low in calories, sodium, and fats. Studies have shown that phytochemicals extracted from the avocado fruit selectively induce cell cycle arrest, inhibit growth, and induce apoptosis in precancerous and cancer cell lines. Our recent studies indicate that phytochemicals extracted with chloroform from avocado fruits target multiple signaling pathways and increase intracellular reactive oxygen leading to apoptosis. This review summarizes the reported phytochemicals in avocado fruit and discusses their molecular mechanisms and targets. These studies suggest that individual and combinations of phytochemicals from the avocado fruit may offer an advantageous dietary strategy in cancer prevention.