Objetivou-se com essa pesquisa analisar o bem-estar animal e o desempenho zootécnico de matrizes suínas nas fases de gestação e maternidade e leitões na fase de maternidade, criadas em sistemas de baias coletivas sem e com acesso a piquete. O experimento foi realizado no setor de suinocultura da PUSP-FC, da Universidade de São Paulo (USP), Campus Fernando Costa, na cidade de Pirassununga, entre os meses de novembro de 2015 e março de 2016, durante a fase reprodutiva das matrizes suínas; gestação e maternidade. Para isso, foram utilizadas 13 matrizes da linhagem TopGen Afrodite® (linhagem formada pelas raças Large White e Landrace), com as mesmas características fisiológicas (segunda ordem de parto), submetidas a um delineamento inteiramente ao acaso. Foram avaliados os índices zootécnicos da cobertura ao desmame (peso; ganho de peso; escore da condição corporal; das matrizes; número de leitões nascidos vivos; número de natimortos; peso inicial dos leitões; peso final dos leitões), indicadores hormonais (coleta do fluido oral - cortisol salivar), fisiológicos de conforto térmico (temperatura de pele nas regiões da cabeça, paleta e lombo), e parâmetros de bem-estar animal (com base no ambiente e em observações do animal). A partir dos resultados constatamos que as avaliações do ambiente físico e incidência de lesão e doença, as concentrações de cortisol e as temperaturas da surperfície corporal não diferiram entre os sistemas (P>0,05); as matrizes e leitões permaneceram a maior parte do tempo inativos com olhos fechados e quando estavam ativos, os animais alojados no sistema de baias coletivas com acesso à piquete externo forragearam mais do que as matrizes alojadas no outro tratamento; em relação ao desempenho zootécnico observou-se que as matrizes tiveram aumento de peso ao longo da gestação (P1; P2), perderam peso durante o período de lactação (P3) e os demais parâmetros não diferiram entre os sistemas de alojamentos (P>0,05). Com isso, conclui-se que as matrizes alojadas em baias coletivas sem e com acesso à piquete externo tiveram um bem-estar e desempenho zootécnico adequado e equivalente. / The objective of this research was to analyze the animal welfare and the zootechnical performance of sows in the gestation and maternity stages, created in group-housed without and with access to external area. The experiment was carried out in no pig industry of PUSP-FC, University of São Paulo (USP), at the Fernando Costa Campus, in the city of Pirassununga, between November 2015 and March 2016, during a reproductive phase of Swine matrices; Pregnancy and maternity. For this, 13 sows of the lineage TopGen Afrodite® (lineage formed by Large White and Landrace races), with the same physiological characteristics, were submitted to a completely random design. The zootechnical indexes of weaning coverage, hormonal weights, hormonal indicators (collection of oral fluid - salivary cortisol), physiological thermal comfort (skin temperature in the heads, palette and loins), and animal welfare parameters (Based on the environment and animal observations). (P> 0.05). From the results obtained in the physical examination and incidence of lesions and diseases, such as cortisol concentrations and body surface temperatures; As permanent sows and piglets in most of the time the products are closed and in which they were found, animals not housed in the system of collective- housed with access to external area foraged more than the matrices housed in the other treatment; (P2), lost weight during the lactation period (P3) and the others did not differ between the housing systems (P> 0.05). Thus, it was concluded that matrices lived in group-housed without and with access to external area had adequate and equivalent welfare and zootechnical performance.

Foi investigado o valor diagnóstico da resposta alérgica cutânea à tuberculina e do ELISA indireto, com antígeno recombinante MPB 70, em leitões experimentalmente sensibilizados, pela via intramuscular, com suspensões oleosas de M. bovis ou M. avium inativados. Foram utilizados 91 animais divididos em quatro grupos. Os grupos A e B, cada um com 25 indivíduos, grupos C e D com 21 e 20 indivíduos respectivamente, balanceando-se as características de raça, linhagem, faixa etária e sexo. Aos 21 dias de idade, todos os animais foram submetidos a uma triagem com a aplicação de tuberculina PPD de M. bovis, pela via intradérmica na base da orelha e não houve qualquer tipo de reação. Decorridos 60 dias do teste tuberculínico de triagem, o grupo A, recebeu injeção intramuscular de 0,5 mL de uma suspensão oleosa de M. avium estirpe D4; o grupo B, recebeu 0,5 mL de uma suspensão oleosa de M. bovis estirpe AN5; o grupo C (controle I), recebeu 0,5 mL do adjuvante oleoso e o grupo D (controle II), recebeu 0,5 mL de solução fisiológica. Foi realizado o exame histopatológico de biopsias das reações cutâneas e a colheita de sangue para o teste de ELISA de captura. Após 30 dias da sensibilização, foi efetuada a prova de tuberculinização comparativa com reação medida pela variação da espessura da pele com paquímetro às 0h, 24h, 48h e 72h, após a aplicação das tuberculinas. No teste comparativo, lido às 72 horas, a reação foi considerada negativa quando a diferença das reações entre o PPD bovino e o PPD aviário foi menor que 6,7 mm; suspeito ou inconclusivo quando a diferença se situou na faixa de 6,7 a 7,5 mm; e positiva para o tipo de PPD, considerando-se tuberculose para PPD M. bovis e micobacteriose para PPD M. avium, quando a diferença da reação foi superior a 7,5 mm. Nos exames histopatológicos, foi observado intenso infiltrado inflamatório linfocitário no local das reações intradérmicas dos animais testados com o PPD homologo ao tipo de micobactéria utilizada na suspensão oleosa sensibilizante. O ensaio de ELISA com antígeno, MPB 70 recombinante, foi capaz de revelar a presença de anticorpos contra o M. bovis, porém não revelou anticorpos para M. avium. / The diagnostic value of the cutaneous allergic response to tuberculin and Indirect ELISA test was investigated using MPB 70 recombinant antigen, in piglets experimentally sensitized intramuscularly with the oily suspensions of inactivated M. bovis or M. avium. The ninety-one animals used were divided into four groups. The groups A and B were formed each with 25 individuals, and groups C and D, with 21 and 20 individuals, respectively, balancing the characteristics of race, ancestry, age and sex. At the age of 21 days, all the animals were submitted to the screening test with the use of M. bovis PPD, by the intradermal route at the base of the ear and no reaction was detected. Sixty days after the screening tuberculin test, animals of the group A were injected intramuscularly with 0.5 mL of oily suspension of M. avium D4 strain; animals of group B received 0.5 mL of an oily suspension of M. bovis, AN5 strain; and the members of group C (control I) received 0.5 mL of an oily adjuvant and the individuals of group D (control II) received 0.5 mL of saline solution. Histological examinations of biopsies of skin reactions were carried out and blood collections made for capture ELISA. Following 30 days of sensitization, comparative skin reactions were measured by the variation in skin thickness with a caliper at 0h, 24h, 48h an 72h after applications of tuberculins. In the comparative test measured at 72h, the reaction was considered negative when the difference of the reactions between bovine PPD and avian PPD was less than 6.7 mm; suspected or inconclusive, when the difference stood in the range of 6.7 to 7.5 mm; and positive according to the type of PPD, considering tuberculosis the M. bovis PPD and mycobacteriosis the M. avium PPD, when the difference of the reaction was greater than 7.5 mm. In histopathological examinations, intense lymphocytic inflammatory infiltrate were observed at the site of intradermal reactions of the animals tested with PPD homologous to the type of mycobacteria used in sensitizing oil suspension. The ELISA assay with MPB 70 recombinant antigen was able to reveal the presence of antibodies against M. bovis, but did not reveal antibodies to M. avium.

A dor é um fenômeno multidimensional, que geralmente desencadeia reações emocionais desconfortáveis quando identificada. Sua relação com injúria tecidual pode ser interpretado como um mecanismo adaptativo de defesa à integridade do organismo, tendo em vista sua preservação evolutiva. Porém, o substrato neurobiológico do organismo parece determinar a complexificação do repertório comportamental em diferentes espécies. Nesse sentido, o córtex cingulado anterior (CCA) tem sido amplamente descrito em mamíferos modulando diferentes aspectos da dor. O presente trabalho utilizou os testes algesimétricos de vocalização e da formalina em cobaias, para se avaliar o decurso temporal do efeito da microinjeção de agonistas e antagonistas GABAérgico (muscimol e bicuculina); colinérgico (carbacol e atropina) e opioidérgico (morfina e naloxona). A microinjeção de bicuculina (1 nmol / 0,2 µl) exacerbou as respostas nociceptivas em ambos os testes, porém diferentes doses de muscimol (0,5, 1 e 2 nmol / 0,2 µl), não modificaram as respostas. O efeito da bicuculina foi bloqueado em ambos os testes pela microinjeção prévia de muscimol (1 nmol/ 0,2 µl) no CCA. A microinjeção de carbacol (2,7 nmol /0,2 µl) neste substrato promoveu antinocicepção, evidenciada por meio da atenuação da amplitude das vocalizações, mas não pelo teste da formalina. Esse efeito foi bloqueado pela administração prévia de atropina (0,7 nmol /0,2 µl) e de naloxona (2,7 nmol /0,2 µl). A microinjeção de morfina (4,4 nmol /0,2 µl) promoveu antinocicepção em ambos os testes. Concluímos que a inibição do tônus GABAérgico no CCA exacerba os comportamentos nociceptivos e que a antinocicepção promovida por carbacol pode ter sido mediada pelo sistema de opióides endógenos, tendo em 9 vista o bloqueio do seu efeito com naloxona. Além disso, a estimulação opióide promove uma contundente antinocicepção. / Pain is a multidimensional phenomenon which usually triggers uncomfortable emotional reactions when identified. Its relation injury can be interpreted as an adaptive mechanism to defend the integrity of the body given its evolutionary conservation. However the neurobiological substrate of the body seems to determine the complexification of behavioral repertoire in different species. Thus, the anterior cingulated cortex (ACC) has been widely described in mammals by modulating different cognitive aspects of pain. This study used algesimetric tests of vocalization and formalin in guinea pigs to evaluate the time course of the effect of microinjection of GABA agonists and antagonists (bicuculline and muscimol) and cholinergic (carbachol and atropine) beyond the opioid antagonist naloxone. The microinjection of bicuculline (1 nmol / 0,2 µl) exacerbated the nociceptive behavior in both tests but different doses of muscimol (0,5; 1 e 2 nmol / 0,2 µl) did not change the responses. The effect of bicuculline was blocked in both tests by prior microinjection of muscimol (1 nmol / 0,2 µl) in the ACC. The microinjection of carbachol (2,7 nmol / 0,2 µl) on this substrate promoted antinociception as evidenced by attenuation of the amplitude of the vocalizations, but not by the formalin test. This effect was blocked by prior administration of atropine (0,7 / 0,2 µl) and naloxone (0,7 nmol / 0, 2 µl). The microinjection of morphine (4,4 nmol / 0,2 µl) promoted antinociception in both tests. We conclude that inhibition of GABAergic tone in the ACC exacerbates nociceptive behaviors and that the antinociception promoted by carbachol may 11 have been mediated by endogenous opioid system in order blocking its effect with naloxone. In addition opioid stimulation promotes a striking antinociception.

O parênquima pulmonar periférico tem sido estudado como um componente da resposta inflamatória na asma. Durante uma constrição induzida, a resistência do tecido aumenta em diferentes modelos de asma. Aproximadamente 60% dos pacientes asmáticos possuem respostas imediata e tardia. A resposta tardia é caracterizada por obstrução mais grave de vias aéreas. No presente estudo, foi avaliada a mecânica de fatias de parênquima pulmonar em cobaias sensibilizadas com ovoalbumina (OVA), tentando reproduzir ambas as repostas imediata e tardia. A mecânica oscilatória de fatias pulmonares foi realizada em um grupo controle (C), em um grupo de resposta imediata (IM) e em dois grupos de resposta tardia: 17 (T1) e 72 (T2) horas após o último desafio com ovoalbumina. Medidas de resistência (R) e elastância (E) foram obtidas antes e depois do desafio com OVA nos grupos C e IM e antes e depois do desafio com Acetilcolina (ACh) em todos os grupos. Com o uso de morfometria, foram avaliadas as densidades de eosinófilos e de células musculares lisas, assim como o conteúdo de colágeno e elastina nas fatias pulmonares. Os valores de R e E basais e pós-agonista estão aumentados nos grupos IM, T1 e T2 quando comparados com o grupo C (p = 0.001). A análise morfométrica mostrou um aumento na densidade de eosinófilos nas fatias de tecido periférico dos grupos IM e T2 quando comparados com o grupo C (p < 0.05). Houve uma correlação positiva significante entre a densidade de eosinófilos nas fatias de parênquima dos grupos C, T1 e T2 e os valores de R e E pós-ACh (r = 0,71, p = 0.001 e r = 0,74, p < 0.001, respectivamente). Os resultados mostram que o parênquima pulmonar está envolvido na resposta tardia deste modelo de inflamação alérgica crônica e que a resposta constritora nesta fase está relacionada à inflamação eosinofílica. / The peripheral lung parenchyma has been studied as a component of the asthmatic inflammatory response. During induced constriction, tissue resistance increases in different asthma models. Approximately 60% of the asthmatic patients show early and late responses. The late response is characterized by more severe airway obstruction. In the present study, we evaluated lung parenchymal strips mechanics in ovalbumin-sensitized guinea pigs, trying to reproduce both early and late inflammatory responses. Oscillatory mechanics of lung strips were performed in a control group (C), in an early response group (ER), and in two late response groups: 17 (L1) and 72 (L2) hours after the last ovalbumin challenge. Measurements of resistance and elastance were obtained before and after ovalbumin challenge in C and ER groups and before and after Acetylcholine challenge in all groups. Using morphometry, we assessed the density of eosinophils and smooth muscle cells, as well as collagen and elastin content in lung strips. The baseline and post-agonist values of resistance and elastance were increased in ER, L1 and L2 groups compared with C (p = 0.001). The morphometric analysis showed an increase in alveolar eosinophil density in ER and L2 groups compared with C group (p < 0.05). There was a significant correlation between eosinophil density in parenchymal strips of C, L1 and L2 groups and values of resistance and elastance post-Acetylcholine (r = 0.71, p = 0.001 and r=0.74, p < 0.001, respectively). The results show that the lung parenchyma is involved in the late response of this guinea pig model of chronic allergic inflammation and the constriction response in this phase is related to the eosinophilic inflammation.

A comparação entre cobaias (Cavia porcellus) e preás (Cavia aperea) fornece dados relevantes para se entender o processo de domesticação (Künzl e Sachser, 1999). No presente trabalho, foram registradas e analisadas sonograficamente (1) a vocalização de alerta, drr, em cobaias e em duas amostras de preás, uma observada em Münster (Alemanha), constituída de animais provenientes da Argentina, e outra constituída de animais provenientes de Itu (São Paulo) e (2) a vocalização de corte, purr, em cobaias e preás de Münster. Encontrou-se diferenças significativas entre C. porcellus e ambas as populações de C. aperea nos parâmetros temporais do drr (duração dos pulsos e dos intervalos entre eles e taxa de emissão) assim como diferenças significativas entre as populações de preás de Münster e de Itu (freqüências mínima e máxima da fundamental e freqüência máxima do chamado). No caso do purr, também houve diferenças significativas nos parâmetros temporais das espécies. Estes resultados demonstram a influência da domesticação e de fatores ecotípicos sobre a comunicação vocal e podem, juntamente com a análise sonográfica dos chamados de outras espécies do gênero Cavia, servir para resolução de questões filogenéticas deste grupo. Estudos com playbacks cruzados poderão eventualmente mostrar em que medida as diferenças de vocalização afetam o comportamento social e reprodutivo dos animais. / Comparision of guinea pigs (Cavia porcellus) and wild cavies (C. aperea) provides privileged models for the understanding of the behavioral effects of domestication (Künzl & Sachser, 1999). We here present a comparision between alarm (drr) and courtship (purr) vocalizations in domestic and wild types of cavies. We recorded and analyzed sonographically such calls in guinea pigs from our laboratory stock and in two samples of wild cavies, one from Münster University (Germany), bred from individuals captured in Argentina, and one from Itu (State of São Paulo). There were significant differences between domestic and both wild cavies samples in the temporal features of the drr (pulse duration, interpulse interval duration and rate of emission) and between the Münster and Itu samples in frequency related features (minimum and maximum freqüencies of the fundamental and maximum frequency of the call). Courtship calls purr of domestic and wild cavies from Münster also differed in temporal acoustical features. Our results show that both domestication and ecotypic factors may influence vocal communication. Playback studies could eventually show to what extent there is interspecific discrimination of the acoustic features of the alarm and courtship calls of cavies.

A necessidade de tratamentos mais eficazes e menos invasivos para os pacientes, em adição à capacidade de diferenciação celular da medula óssea sugere que o transplante de células mononucleares totais poderia ser uma das melhores formas de tratamento para as diversas patologias existentes. Entretanto, vários fatores implicam sobre a viabilidade das células da medula óssea dos quais destacamos a ausência de padronização de protocolo de criopreservação que permita a manutenção da viabilidade celular, sendo altamente necessário o desenvolvimento de estudos nesta área. Deste modo, neste estudo, após a anestesia de um grupo de animais foi realizada punção da medula óssea, separação das células mononucleares e avaliação da viabilidade. Foram testados oito meios diferentes para criopreservação das células. O meio de congelamento A é composto por 20% dimetilsulfóxido (DMSO), 40% Dulbecco´s Modified Eagle´s Médium (DMEM) e 40% de Plasma Autólogo, o meio de congelamento B contém 20% dimetilsulfóxido (DMSO), 40% Roswell Park Memorial Institute (RPMI) e 40% de Plasma Autólogo, o meio de congelamento C tem em sua composição 20% dimetilsulfóxido (DMSO), 40% soro fetal bovino (SFB) e 40% plasma autólogo, o meio de congelamento D é composto de 20% dimetilsulfóxido (DMSO) e 80% de plasma autólogo, o meio E constitui-se de 5% dimetilsulfóxido (DMSO), 47,5% de Dulbecco\'s Modified Eagle\'s Médium (DMEM) e 47,5% de plasma autólogo, o meio F contém 5% dimetilsulfóxido (DMSO), 47,5% de Roswell Park Memorial Institute (RPMI) e 47,5% de plasma autólogo, o meio G contém 5% dimetilsulfóxido (DMSO), 47,5% de soro fetal bovino (SFB) e 47,5% de plasma autólogo e o meio H constitui-se de 5% dimetilsulfóxido (DMSO) e 95% de plasma autólogo. Após as análises realizadas pela técnica de citometria de fluxo, o meio mais eficiente na criopreservação das células mononucleares de suínos foi o protocolo D por possuir maior concentração de plasma autólogo e crioprotetor. / The necessity of the most efficient and less invasive treatments for the patients, in addition to the capacity of cellular differentiation of the bone marrow suggests that the transplant of mononuclear total cells might be one of the best treatment for several pathologies. Meantime, several factors influence on the viability of the cells of the bone marrow as the absence of standardization of criopreservação protocol which could allow the maintenance of the cellular viability, being an important issue of investigation. In this study, after the anaesthesia of a group of animals, samples of bone marrow were collected, following the separation of the mononuclear cells and evaluation of the viability. Eight different protocols were tested for cells criopreservation. The protocol A by 20% dimetilsulfóxido (DMSO), 40% Dulbecco\'s Modified Eagle\'s Médium (DMEM) and 40% autologus plasma, B protocol conatained 20% dimetilsulfóxido (DMSO), 40% Roswell Park Memorial Institute (RPMI) and 40% autologus plasma, the C protocol was composed 20 % dimetilsulfóxido (DMSO), 40% bovine fetal serum (SFB) e 40% autologus plasma, D protocol was made using 20% dimetilsulfóxido (DMSO) and 80% autologus plasma, E protocol was constituted by 5% dimetilsulfóxido (DMSO), 47,5% de Dulbecco\'s Modified Eagle\'s Médium (DMEM) and 47,5% autólogo plasma, the F contains 5% dimetilsulfóxido (DMSO), 47,5% de Roswell Park Memorial Institute (RPMI) and 47,5% autologo plasma, the protocol G was compoed by 5% dimetilsulfóxido (DMSO), 47,5% de bovine feta serum (SFB) and 47,5% autologus plasma and the H protocol was 5% dimetilsulfóxido (DMSO) and 95% autologus plasma. After flux citometer analyses, the most efficient protocol in criopreservation of the mononuclear cells of pigs was the protocol D which was composed the by the most amount of autologus plasma and crioprotectant.

Introdução: A variação da pressão de pulso (PP) tem se mostrado ser uma ferramenta indicadora da responsividade à terapia de fluídos em estudos clínicos e experimentais. Entretanto, esses parâmetros ainda não foram adequadamente estudados em situações de variação aguda da viscosidade sanguínea, como ocorre durante hemodiluição normovolêmica aguda (HNA). O propósito desse estudo é comparar o comportamento do PP em modelo experimental de HNA em suínos com reposição volêmica com solução salina ou colóide. Métodos: Vinte e um suínos de peso médio de 32kg foram anestesiados e randomizados em três grupos de estudo: HES, o sangue removido foi reposto com solução de amido hidroxietílico 6%; SS, solução salina a 0,9% utilizada na reposição volêmica, e grupo controle, no qual os animais foram somente anestesiados. Parâmetros hemodinâmicos foram mensurados no início do procedimento (basal) (T0), metade processo de HNA (T2), 1 hora e 2 horas depois da HNA (T3 e T4 respectivamente), e imediatamente e 1 hora depois da retransfusão sanguínea (T5, T6). Os dados foram submetidos à análise de variância para medidas repetidas, seguida de teste de Tukey. As distribuições das variáveis mensuradas em mais de uma condição de avaliação, sem distribuição normal, foram comparadas com o teste Friedman e os grupos foram comparados com o teste de Mann-Whitney. Os valores de p<0,05 foram considerados estatisticamente significantes. Resultados: Depois da HNA, os parâmetros dinâmicos de responsividade a reposição volêmica, representados pelo PP, foram diferentes quando os animais foram tratados com solução colóide ou cristalóide (6,1 ± 2,5 e 14,1 ± 3,4 respectivamente). Os parâmetros estáticos tais como pressão de oclusão de artéria pulmonar (HES 11 ± 3; SS 8 ± 3) e pressão venosa central (HES 8 ± 2; SS 7 ± 4) são contraditórios quando comparados com PP. Conclusão: Durante o processo de HNA a solução colóide mantém os valores de PP próximos ao basal quando comparado com o grupo solução salina, provavelmente devido à diferença na meia vida do HES e da solução salina no espaço intravascular. / Background: Pulse pressure variation (PPV), have been shown to be useful tools to indicate fluid responsiveness in clinical and experimental studies. However, this parameter has not been adequately explored in situations of acute variation of blood viscosity, as happens in acute normovolemic hemodilution (ANH). The purpose of this research was to compare the behavior of PPV in a porcine model of ANH replaced with either normal saline or starch. Methods: Twenty one pigs 32Kg were anesthetized and randomly allocated in three groups: HES, blood removal was replaced with 6% hydroxyethyl starch; NS, normal saline was utilized as fluid replacement, and CONTROL, animals remained anesthetized without any intervention. Hemodynamic parameters were measured at baseline (T0), middle of ANH (T1), immediately after ANH (T2), 1h and 2h after ANH (T3 and T4 respectively), and immediately and 1h after blood re-infusion (T5,T6). Data were submitted to analysis of variance for repeated measures followed by Tukey test or Friedman test followed by Mann-Whitney test when appropriate. P<0.05 was considered statistically significant. Results: After ANH, dynamic parameters of fluid responsiveness, herein represented by PPV, presented different response when animals were treated with either starch (6,1 ± 2,2) or saline (14,1 ± 3,4). Besides, static parameters: pulmonary artery wedge pressure (HES 11 ± 3; 8 ± 3) and central venous pressure (HES 8 ± 2; NS 7 ± 4) presented contradictory values when compared to PPV. Conclusion: During ANH process colloids restored PPV values to baseline when compared o to normal saline, probably due to a difference in half-lives of HES and normal saline in the intravascular space.

Hemodiluição normovolêmica aguda é um procedimento utilizado para diminuir a necessidade de transfusões sangüíneas em diversas cirurgias de grande porte. Poucos trabalhos avaliam as alterações hemodinâmicas e perfusão tecidual através de estudo ecocardiográfico e tonometria gástrica. Foram utilizados 23 porcos (peso 46.6 ± 6.0 kg) anestesiados com quetamina, fentanil e propofol e instrumentados para monitorização hemodinâmica convencional. Os animais foram randomizados em três grupos 30 minutos após estabilização da anestesia: Grupo I (Controle), Grupo II (amido hidroxietílico) e Grupo III (Ringer lactato). Os animais do grupo II e III foram submetidos ao protocolo de hemodiluição com hematócrito alvo de 15%. A retirada de sangue foi realizada em 30 minutos e a expansão plasmática feita simultaneamente com amido hidroxietílico ou Ringer lactato nas proporções de 1:1 ou 1:3 em relação ao sangue retirado. Os parâmetros hemodinâmicos e de oxigenação, pH gástrico, ecocardiografia transesofágica (fração de ejeção através do método Simpson) foram coletados antes da hemodiluição (T0), no fim do procedimento de hemodiluição (T1) e após uma e duas horas (T2, T3). Os dados foram submetidos a análise de variância para medidas repetidas, seguida pelo teste Tukey e teste T student. Resultados: Em relação aos parâmetros do grupo controle, não houve diferença significante durante todo o procedimento. No grupo II e grupo III, houve aumento no índice cardíaco após hemodiluição (T0=5,80±1,46; T1=10,64±1,69 L.min-1.m2 e T0=5,53±1,18, T1=7,91±1,40 L.min-1.m2 respectivamente), e diminuição do índice de resistência vascular sistêmica (T0=1753±336, T1=822±140 dina.s.cm-5.m-2 e T0=1673±566, T1=1026±190 dina.s.cm-5.m-2 respectivamente), ambos estatisticamente significante. A fração de ejeção apresentou aumento significativo após a hemodiluição no grupo II. O pH gástrico diminuiu significativamente no grupo III. O lactato arterial aumentou de forma significante no grupo III após a hemodiluição. A microscopia eletrônica do ventrículo esquerdo mostraram discreta destruição de miofilamentos no grupo II. Houve destruição importante nas miofibrilas no grupo III. Conclusão: Estes resultados sugerem que na hemodiluição moderada a grave, o amido hidroxietílico consegue preservar melhor a estabilidade hemodinâmica do que a solução de Ringer lactato. / Normovolemic acute hemodilution is a procedure utilized to decrease the needs of blood transfusion during a variety of surgical procedures. Nevertheless, there are few works that evaluate its pulmonary effects as well as hemodynamic changes by means of echocardiography and tonometric evaluation. Methods: 23 anesthetized pigs (weight 46.6 ± 6.0 kg) were instrumented for standard hemodynamic monitoring. In order to prevent possible effects of inhaled anesthetics on pulmonary mechanics, intravenous anesthesia was chosen and consisted of ketamine, fentanyl and propofol administered throughout the study. Thirty minutes after anesthesia stabilization animals were randomized in three groups: Group I (Control), Group II (hydroxyethyl starch) and Group III (Lactated Ringer’s). Animals of group II and III were submitted to acute normovolemic hemodilution to reach a pre-established hematocrit around 15%. Blood withdrawal was accomplished in thirty minutes and plasma expansion was performed simultaneously with hydroxyethyl starch or Lactated Ringer’s administered in a proportion of 1:1 or 3:1 in relation to the amount of bloods withdrawn. Hemodynamic, gastric pH, transesophageal echography (ejection fraction, by Simpon method) and oxygen transport were measured before blood withdrawal (T0), at the end of hemodilution (T1), one and two hours after the end of hemodilution (T2, T3). Data were submitted to analysis of Variance for repeated measures followed by the Tukey test and also to a student T test. Results: In regard to all parameters of Group I (Control), there were no significant difference during the whole procedure. In Group II and Group III, there was an increase in cardiac index after hemodilution (T0=5.80±1.46; T1=10.64±1.69 L.min-1.m2 and T0=5.53±1.18, T1=7.91±1.40 L.min-1.m2), and a decrease in systemic vascular resistance index (T0=1753±336, T1=822±140 dyne.s.cm-5.m-2 and T0=1673±566, T1=1026±190 dyne.s.cm-5.m-2), both statistically significant. Ejection Fraction increased significantly after hemodilution in group II. Gastric pH decreased significantly in Group III, and arterial lactate increased significantly after hemodilution in group III. Electron microscopy of left ventricular bipsies showed a slight destruction in filament and preserved myofibrillar ultrastructure in group II. There was important destruction in myofibrillar ultrastructure in group III. Conclusion: These results suggest that in severe hemodilution, hydroxyethyl starch preserves hemonodynamic stability better than Lactate Ringer’s.

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Influenza A viruses are important pathogens of humans, other mammals and birds. Swine are considered to be the ‘mixing vessel’ for influenza viruses because of their susceptibility to infection with not only swine influenza viruses but also human and avian influenza viruses. After infection of pigs with different influenza viruses, reassortment events between genomic RNA segments and point mutations can take place which can result in novel influenza virus strains capable of causing human pandemics. To combat infections, vaccination is available in many countries for humans, but not typically used in pigs. However, anti-influenza drugs have been used to treat livestock, and mutations conferring drug resistance occur in circulating strains. The mechanisms responsible for the emergence and spread of drug resistant mutations against amantadine and oseltamivir have been studied previously but often gave conflicting results. Therefore, this PhD thesis focused on resolving the mechanisms responsible for this rapid drug resistance spread. In chapter one I examine the extent of reassortment events in swine influenza A viruses by analysing within subtype reassortment and extrapolating the results for the between subtype reassortment. Reassortment is one of the mechanisms that can be responsible for mutations, conferring resistance to drugs, to spread between strains, and thus spread in the host population. The findings of this chapter show that the genomic segments most prone to reassortment code for a polymerase (PB1) and both glycoproteins, within all three subtypes studied. Since particular mutations in the matrix protein (MP) segment cause resistance to amantadine, my study focused on MP compared to other segments and revealed moderate level of reassortment. MP reassorts well with polymerases, both within and between subtype, while nonstructural (NS) is least likely to reassort. Chapter two of this thesis aimed at resolving the origin and spread of the most common drug resistance conferring mutation in swine influenza viruses which causes amantadine resistance. I show first that this mutation occurred in swine influenza viruses and was therefore not transmitted from the recently ancestral avian influenza strains, and second that the prevalence of resistance in swine influenza viruses is due to functional linkage of mutations at other sites and not by direct drug pressure. In chapter three I examine the mechanisms responsible for the rapid rise and spread of oseltamivir resistance in human influenza H1N1 viruses which arose in the absence of drug use. The primary mutation lies in the neuraminidase glycoprotein but because of the close functional interaction I focus on changes in haemagglutinin that occurred in association with resistance. The results showed several mutations in haemagglutinin were associated with resistance suggesting selection acting on haemagglutinin in order to balance the activity of both glycoproteins. Overall these results show the importance of functional linkage between segments as a mechanism for the occurrence of drug resistance conferring mutations, and reassortment as a means of spreading these mutations into newly emerging strains.