Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná. Curso de Pós-Graduação em Agronomia. / Made available in DSpace on 2012-10-20T20:25:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química. / Made available in DSpace on 2012-10-21T11:28:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 203555.pdf: 1735912 bytes, checksum: e7644e34159f25f658f2eb91e7e44df0 (MD5)

Submitted by SAULO FERNANDO GOMES DE SOUZA null (saulo@fca.unesp.br) on 2016-04-26T12:11:10Z No. of bitstreams: 1 T E S E versão final.pdf: 2113924 bytes, checksum: acfdb19d1e24a5cdd65d3a218557f738 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-04-29T14:50:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sousa_sfg_dr_bot.pdf: 2113924 bytes, checksum: acfdb19d1e24a5cdd65d3a218557f738 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-29T14:50:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sousa_sfg_dr_bot.pdf: 2113924 bytes, checksum: acfdb19d1e24a5cdd65d3a218557f738 (MD5) Previous issue date: 2016-03-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A variação na profundidade de sementes e no espaçamento entre plantas proporcionam diferentes condições para as mesmas se desenvolverem. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a cultura do milho semeada em diferentes profundidades e espaçamentos entre plantas, e dessa maneira saber o quanto esses fatores influenciam nas características agronômicas e produtividade da cultura. O experimento foi conduzido em campo, na Fazenda Experimental Lageado, da Faculdade de Ciências Agronômicas – UNESP/Botucatu-SP. Foram realizados dois experimentos, sendo cada fator (profundidade de sementes e espaçamento entre plantas) avaliado separadamente. O experimento com diferentes profundidades de sementes contou com 10 tratamentos, no qual houve variação da profundidade de semeadura entre 2, 4, 6 e 8 cm, adotando diferentes opções de combinações. Nesse experimento além de todas as avaliações morfológicas também foi avaliada a velocidade de emergência das plântulas. O outro experimento foi avaliar diferentes espaçamento entre plantas e constou de 11 tratamentos, variando entre o espaçamento considerado ideal para o híbrido utilizado (17 cm, população de 69.200 plantas ha-1) e intervalos de 10%, 20%, 30%, 40% e 50% para mais e para menos. Ambos com delineamento em blocos ao acaso, com 4 repetições cada. O milho foi semeado manualmente em sistema de preparo de solo convencional, com auxílio de réguas graduadas de acordo com os espaçamentos entre plantas indicado para cada tratamento e a profundidade. Para a análise estatística dos dados, os valores foram submetidos à análise de variância (ANOVA), utilizando o teste F a 5% de probabilidade. Para a variação dos espaçamentos foi realizada análise de regressão com ajuste dos maiores coeficientes de determinação (p ≤0,05). Pode-se concluir que nas profundidades avaliadas houve diferença significativa para o índice de velocidade de emergência, a primeira contagem de plântulas e a emergência total das plantas. As maiores produtividades foram obtidas nas maiores profundidades. Quanto maior o espaçamento entre plantas maiores serão as espigas produzidas, não necessariamente obtendo maiores produtividades de grãos. Os melhores espaçamentos entre plantas variaram entre 17cm (69.200 pl ha-1) e 11,1 cm (105.980 pl ha-1) tendo se destacado como o espaçamento com os maiores valores de produtividade o de 13,7cm (85.850 pl ha-1). / The variation in depth of seeds and plant spacing provide different conditions for them to develop. Thus, the aim of this study was to evaluate the culture of corn sown at different depths and spacing between plants, and so to determine the effect the agronomic characteristics and crop yield. The experiment was carried out at the College of Agronomy – FCA/UNESP, Botucatu-SP. For depth and for sowing spacing two experiments were carried, by evaluating each individually. In the experiment with different depths of seeds were carried out 10 treatments, in which there was a variation of sowing depth of 2, 4, 6 and 8 cm, adopting different combinations among themselves. For depth of seeds, was also evaluated the speed of emergence of seedlings. For the spacing between plants were 11 treatments, ranging from the ideal of 17 cm between plants and population of plants of 69,200 ha-1, and variations of 10%, 20%, 30%, 40% and 50% besides of the ideal. The outline was random blocks, with four replicates per treatment. The corn seeds were sowed by hand in conventional tillage, with the aid of graduated rulers according to plant spacings and depths, according to each treatment. For statistical analysis, the data were submitted to analysis of variance (ANOVA) using the F test at 5% probability. For the variation of spacings was performed regression analysis with adjustment of the highest coefficients of determination (p≤0,05). It can be concluded that in the depths evaluated there were significant differences for the emergency speed index, the first count of seedlings and the full emergence. The highest yields were obtained for the deepest seeds. For more spaced plants each other, there was production of larger corncobs, but has no higher grain yield. For the spacing between plants the highlights were the 17cm (69,200 seeds ha-1) and 11.1 cm (105,980 seeds ha-1) and the higher productivity were in the spacing of plants of 13,7cm (85,850 seeds ha-1).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-04-11Bitstream added on 2014-06-13T18:53:25Z : No. of bitstreams: 1 gomes_rc_me_botib.pdf: 533455 bytes, checksum: eb300e92e9e567d067e514597c336c54 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Este trabalho se propos a avaliar farmacologicamente as partes aéreas de Vochysia tucanorum (Vochysiaceae), uma espécie típica do Cerrado, com potencial fitoterápico de ação gastroprotetora. A seleção desta espécie baseou-se nos estudos quimiotaxonomicos, pois esta não apresenta, até o presente, indicação popular no combate a úlceras gástricas. Os extratos orgânicos polares e apolares foram avaliados experimentalmente em modelo in vivo de indução de lesões gástricas por drogas antiinflamatórias não-esteroidais (DAINEs) e etanol acidificado. Devido a melhor solubilidade e desempenho do extrato metanólico, este extrato foi avaliado quanto a sua ação gastroprotetora frente a um indutor de lesões gástricas mais severas como o etanol absoluto em ratos. Após comprovação da atividade gastroprotetora do extrato metanólico, foram realizados modelos experimentais que comprovassem a participação do NO (óxido nítrico) e do grupamento sulfidrila no mecanismo de proteção do extrato. O extrato exerce sua ação gastroprotetora por ação sistêmica, exerce um efeito antisecretor sobre o suco gástrico, e atua sobre as modulações do NO endógeno. A partir do extrato metanólico foi obtida a fração enriquecida (fração butanólica), a qual foi avaliada para confirmação da atividade gastroprotetora. Com a realização do experimento de lesão gástrica induzida por etanol absoluto, foi comprovada a atividade gastroprotetora da fração butanólica e experimentos subseqüentes demonstraram que o mecanismo de proteção, dessa fração enriquecida, envolveu a participação expressiva do NO endógeno na ação gastroprotetora. A presença de terpenos na fração (uma classe de substâncias com conhecidas propriedades gastroprotetoras) e o isolamento dos compostos: ácido betulínico e uvaol, indicam o forte envolvimento destes constituintes na ação gastroprotetora de Vochysia tucanorum. / The present work aims to evaluate pharmacologically the aerial parts of Vochysia tucanorum (Vochysiaceae), a typical species of Cerrado, with phytotherapeutic potential of gastroprotective action. The selection of this species is based on chemotaxonomic studies, since, to date, this has not presented a popular indication to combat gastric ulcers. Polar and apolar organic extracts were evaluated experimentally in an in vivo model of induction of gastric lesions by non-steroidal antiinflammatory-drugs (NSAIDs) and acidified ethanol. Due to better solubility and performance of methanolic extract, its gastroprotective action was evaluated by its response to the induction of more severe gastric lesions, specifically by absolute ethanol in rats. After demonstrating the gastroprotective action of metanolic extract, experimental models were realized that may corroborate the participation of NO (nitric oxide) and the sulfhydryl group in the protection mechanism of the extract. The extract exercises its gastroprotective action systemically, it exerts an antisecretory effect on gastric juice, and acts on modulations of endogenous NO. An enriched fraction (butanolic fraction) was obtained from methanolic extract, which was evaluated for confirmation of gastroprotective activity. Experimental induction of gastric lesion by absolute ethanol corroborated the gastroprotective activity of the butanolic fraction; and subsequent experiments demonstrate that the protection mechanism of this enriched fraction involved the expressive participation of endogenous NO in gastroprotective action. The presence of terpenes in the fraction (one class of substances with known gastroprotective properties) and the isolation of two compounds, betulinic acid and uvaol, indicate strong involvement of these constituents in gastroprotective action of Vochysia tucanorum.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-03Bitstream added on 2014-06-13T18:42:24Z : No. of bitstreams: 1 sousa_jw_dr_botfca.pdf: 766384 bytes, checksum: eff3219ab4eaf8a9ec09babd554111dd (MD5) / Esta pesquisa foi conduzida em ambiente protegido na área experimental do Departamento de Recursos Naturais - Setor de Ciências Ambientais da Faculdade de Ciências Agronômicas - UNESP, Campus de Botucatu, SP, durante o período de 21/04 a 02/11/2000, para avaliar o efeito do polietileno difusor de luz com 150μm de espessura (P150d), sobre os componentes da radiação solar, balanços de ondas curtas e longas, saldo de radiação, temperatura e fluxo de calor no solo, temperatura e umidade relativa do ar, indicadores de crescimento e produção. Os resultados foram comparados com aqueles obtidos utilizando polietileno de 120 μm de espessura (P120), cujo ensaio foi conduzido entre 21/04 a 03/11/1999, ambos utilizados como cobertura do ambiente protegido cultivado com pimentão híbrido Elisa. O índice de produtividade obtido para o ambiente protegido com cobertura de P150d foi cerca de 50% maior do que o observado para o P120. As coberturas de P150d e P120 proporcionaram respectivamente, acréscimos de 26,82% e 16,71% na fração difusa, comprovando um maior efeito difusor do P150d ao longo do ciclo da cultura de pimentão. O índice do saldo de radiação obtido para o P150d foi maior do que o determinado para o P120, devido ao maior índice do balanço de ondas curtas do P150d, uma vez que os dois polietilenos avaliados apresentaram valores iguais para o índice do balanço de ondas longas. O índice do coeficiente de reflexão determinado para o ambiente protegido com cobertura de P150d, foi menor do que o observado para o P120, o que está associado ao maior índice de fração difusa do P150, em relação ao P120. / This experiment has been carried out under sheltered environment condition in the experimental area of the Natural Resource Department – Environmental Science Section of the Agricultural Science College – UNESP, Campus of Botucatu City, São Paulo State, from April 21st to November 2nd 2000. The objective was to assess the effect of a light diffuser polyethylene, 150 μm thickness, on solar radiation components, long and shortwave balance, net radiation, temperature and flow of heat in the soil, air temperature and relative humidity, as well as growth and yield indexes; compared to a 120 μm (P 120) transparent polyethylene. The latter assay was held from April 21st to November 3rd 1999. Both coverings were used when Elisa hybrid green pepper has been grown. The yield index for sheltered environmental condition with P 150d covering was about 50 % higher than that for P 120 P 150d and P 120 coverings have brought 26.82 % and 16.71 % increases, respectively to the diffuse fraction, confirming the higher diffuser effect of P 150d throughout the green pepper cycle. The index of net-radiation obtained for P 150d was higher than that for P 120, due to the higher index of P 150 d short-wave balance, since the two evaluated polyethylene coverings have shown the same values for the long-wave balance index. The reflexion coefficient index determined for P 150d sheltered environment was lower than that for P 120, which is related to the higher diffuse fraction index of P 150 compared to P 120.

Resumo: O gênero Phoradendron Nutt. (Viscaceae) no Estado do Paraná, Brasil. Phoradendron é um gênero taxonomicamente complexo de plantas hemiparasitas. Neste trabalho é proposto um estudo taxonômico do gênero para o estado do Paraná, com apresentação de descrições, ilustrações, mapas de distribuição geográfica, chaves de identificação e status de conservação segundo os critérios da União Internacional para Conservação da Natureza e Recursos Naturais (UICN). Foi analisado o material depositado nos herbários do estado do Paraná e dos acervos mais importantes do estados de São Paulo e Santa Catarina , além de espécimes coletados a campo. São descritas 14 espécies para o Paraná: Phoradendron bathyoryctum Eichler, P. berteroanum (DC.) Grisebach, P. chrysocladon A. Gray, P. coriaceum Mart. ex Eichler, P. crassifolium (Pohl ex DC.) Eichler, P. craspedophyllum Eichler, P. dipterum Eichler, P. ensifolium (Pohl ex DC.) Nutt., P. mucronatum (DC.) Krug & Urb., P. obtusissimum (Miq.) Eichler. P. piperoides (Kunth) Trelease, P. quadrangulare (Kunth) Griseb., P. reductun Trel. e P. undulatum (Pohl ex DC.) Eichler. Phoradendron berteroanum, P. crysocladon e P. craspedophyllum foram enquadradas dentro da categoria (CR), criticamente em perigo para o Estado e P. obtusissimum e P. mucronatum (EP) em perigo. As demais foram classificadas como quase ameaçadas (NT) e pouco preocupante (LC). Phoradendron craspedophyllum é citado pela primeira vez para o estado do Paraná.

Resumo: Orchidaceae é uma das maiores famílias dentre as angiospermas, possui cerca de 25.000 espécies e apresenta distribuição cosmopolita, porém em maior número nas regiões tropicais e subtropicais. Em relação ao neotrópico, a Floresta Atlântica Brasileira é uma das áreas mais ricas em orquídeas. No Brasil o número de espécies é de cerca de 2.400 distribuidas em 240 gêneros. Phymatidium é um gênero monofilético pertencente a subfamília Epidendroideae, tribo Cymbidiae e subtribo Oncidiinae. É caracterizado por plantas epífitas, que crescem geralmente na borda das matas, frequentemente encontradas no tronco e ramos de Myrtaceae e Rutaceae. O gênero é endêmico da América do Sul, restrito ao bioma Mata Atlântica no Brasil, Argentina e Uruguai. Consiste de nove espécies e duas variedades, algumas com ampla distribuição e outras altamente restritas. Dividido em três capítulos este trabalho tem como objetivo investigar as relações filogenéticas intra-genéricas e o melhor método para representar sua filogenia (Capitulo 1), estabelecer padrões de riqueza, diversidade, complementaridade e áreas de endemismo do gênero (Cap. 2) e apresentar sua flora para o estado do Paraná (Cap. 3). A partir de consultas a materiais de herbários nacionais e estrangeiros e coletas, levantaram-se características morfológicas qualitativas e quantitativas além de dados de ocorrência. Como hipótese filogenética para o gênero, escolheu-se a análise combinada de dados moleculares e morfológicos qualitativos, apesar dos dados morfológicos quantitativos possuírem sinal filogenético e fornecerem algumas sinapomorfias adicionais. As regiões com maior riqueza e diversidade estão concentradas no litoral brasileiro, iniciando no sul do Espírito Santo e alcançado o sul do estado de Santa Catarina. Nesta faixa também se encontram as áreas consideradas prioritárias para a conservação in situ e de alto endemismo para o gênero. No estado do Paraná, foram encontradas cinco espécies e duas variedades, distribuídas por 35 municípios, ocorrendo principalmente na Floresta Ombrófila Densa e Floresta Ombrófila Mista.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2001Bitstream added on 2014-06-13T19:24:27Z : No. of bitstreams: 1 lourenco_mv_dr_araiq.pdf: 869109 bytes, checksum: 309d6c297b12fceb302c8b5c561de256 (MD5) / Brosimum gaudichaudii Trécul é uma planta medicinal utilizada na medicina tradicional no tratamento de doenças de pele, assim como o vitiligo. As furanocumarinas lineares psoraleno e bergapteno são os principais compostos responsáveis por esse efeito. O medicamento “V” produzido a partir do vegetal Brosimum gaudichaudii é usado pela população no tratamento do vitiligo, por ser alegado que o mesmo contém bergapteno. Entretanto, nada é conhecido a respeito do conteúdo de bergapteno nesse medicamento. Além disso, o uso de furanocumarinas tem sido relacionado ao aumento na incidência de câncer de pele e outras desordens assim como mutação gênica e aberrações cromossômicas em humanos. Este trabalho reporta análises qualitativas e quantitativas do vegetal B. gaudichaudii e do medicamento “V” por CLAE-DAD e CG-EM. As análises mostraram que as furanocumarinas estão presentes em maiores quantidades no córtex das raízes do vegetal, e que o medicamento “V” contém derivados de ácidos graxos e apenas pequenas quantidades de psoraleno e bergapteno. De acordo com a composição do extrato polar de B. gaudichaudii e do medicamento “V”, os flavonóides 5,7,3’,4’-tetraidroxi-6-C-glucopiranosilflavona e 5,7,3’,4’-tetraidroxi-3-O-β-D-galactopiranosilflavonol foram identificados no extrato metanólico das folhas de B. gaudichaudii, mas estão ausentes no medicamento “V”. Ensaios biológicos para mutagenicidade mostraram que os extratos aquoso e metanólico do córtex das raízes do vegetal são mutagênicos enquanto que os do medicamento não apresentam mutagenicidade... / Brosimum gaudchaudii Trécul is a medicinal plant that has been used in traditional medicine to treat skin diseases such as vitiligo. The linear furanocoumarins psoralen and bergapten are the main compounds responsible for this effect. Drug “V” produced from B. gaudichaudii has been used by the population for the treatment of vitiligo because its alleged content of bergapten. However, nothing is known about the bergapten content in drug V. Furthermore, the use of furanocoumarins has been linked to a higher incidence of skin cancer and other disorders such as gene mutations and chromosomal aberrations in humans. This work reports the qualitative and quantitative analyses of B. gaudichaudii and drug “V” by HPLC and CG-MS. The analyses showed that furanocoumarins are present in large amounts in the root bark of the plant, and that drug “V” contains fatty acid derivatives and only small amounts of psoralen and bergapten. Concerning the polar composition of B. gaudichaudii and drug V, the flavonoids 5,7,3’,4’-tetrahydroxy-6-C-glucopyranosyl flavone and 5,7,3’,4’- tetrahydroxy-3-O-β-galactopyranosyl flavonol were identified in the methanolic extract of B. gaudichaudii leaves, but are absent in drug “V”. . Biological assays showed that the aqueous and methanolic extracts of the root bark of the plant are mutagenic, while drug “V” does not show mutagenicity. Preliminary cytotoxic assays showed that methanolic extracts of the root bark and of drug “V” are more cytotoxic than their respective aqueous extracts. In conclusion, B. gaudichaudii and drug “V” seems to present several differences not only in their chemical composition but also in the biological properties evaluated in this study.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2013. / Submitted by Luiza Silva Almeida (luizaalmeida@bce.unb.br) on 2013-07-29T19:55:06Z No. of bitstreams: 1 2013_AdjaciDiasdeBrito.pdf: 44501559 bytes, checksum: 25a940f662071a5e45968353c482e72b (MD5) / Approved for entry into archive by Leandro Silva Borges(leandroborges@bce.unb.br) on 2013-07-29T20:28:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_AdjaciDiasdeBrito.pdf: 44501559 bytes, checksum: 25a940f662071a5e45968353c482e72b (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-29T20:28:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_AdjaciDiasdeBrito.pdf: 44501559 bytes, checksum: 25a940f662071a5e45968353c482e72b (MD5) / Como consequência da atividade humana e do aumento populacional, têm aumentado o volume de resíduos urbanos derivados da agricultura. Estima-se que a produção mundial de café supere 85 milhões de toneladas anuais (até 2013), originando considerável quantidade do resíduo proveniente da elaboração da bebida, conhecido como borra de café. Considerando sua alta disponibilidade, e o fato de que o emprego in natura deste resíduo tem sido pouco praticado no meio agrícola, tem-se a oportunidade de, além de transformá-lo numa opção agrícola sustentável, diminuir o seu descarte e a poluição ambiental ocasionada pelo mesmo. Neste trabalho foram analisados os atributos químicos e a influência do resíduo de café (borra) como fertilizante orgânico e/ou condicionador do solo no desenvolvimento do cafeeiro produzido organicamente e no estabelecimento e desenvolvimento de plântulas de cafeeiro e de tomateiro. Os resíduos de café (borra) utilizados no estudo foram coletados em órgãos públicos e privados do Distrito Federal, ficando apropriado para utilização após as etapas de processamento descritas no item 2.2. No primeiro capítulo, o resíduo de café foi caracterizado através de análises químicas e espectroscópicas (Ressonância Magnética Nuclear – RMN) e estudou-se ainda sua dinâmica de mineralização de carbono e os efeitos deste material sobre o índice de área foliar e o número de botões florais em cafeeiro orgânico adensado. A cultivar utilizada foi a Obatã vermelho IAC 1669-20, com doses de resíduo de café de 2,0, 1,5, 1,0, 0,5 e 0,0 kg (controle) aplicadas na projeção da copa de cada árvore. O experimento foi composto com quatro repetições em blocos ao acaso, tendo-se cada parcela com 24 plantas. No segundo e terceiro capítulos, o resíduo de café foi expurgado e empregado como constituinte de substrato orgânico, sendo combinado com diversos outros produtos orgânicos e artificiais para germinação e desenvolvimento de plântulas de cafeeiro e tomateiro em casa de vegetação. Verificou-se que o resíduo de café (borra) in natura apresentou atributos químicos favoráveis para uso agrícola, onde doses crescentes deste material aumentaram o índice de área foliar e número de botões florais em cafeeiro orgânico adensado. A sua utilização como substrato interferiu negativamente na germinação, emergência e produção de biomassa em plântulas de cafeeiro e tomateiro. O efeito inibitório do RC, quando presente como componente em substratos, pode estar associado à ação de metabólitos secundários causadores de alelopatia, como a cafeína, tornando-se necessário identificar tais substâncias e suas concentrações relativas. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / As a consequence of human activity and population growth, there has been a steady increase in waste material derived from agriculture. The estimates on world coffee production are around 8.5 106 t per annum, originating considerable amounts of residue from coffee brewing. Its use could contribute to mineral nutrient cycling and to soil and substrate conditioning. However coffee powder residue (CPR) in natura has shown reduced application in agriculture. Moreover, due to its high availability, if appropriately exploited, it could contribute to substrate efficiency, becoming an alternative for modern seedling production and plant growth. Therefore, the intent has been to turn CPR into sustainable agricultural option, avoiding its disposal into the environment. This work aimed at analyzing the chemical attributes and evaluating the influence of CPR, pure or in mixtures to other substrates, as organic fertilizer or soil conditioner in organic coffee production and in biometric characteristics of tomato and coffee seedling. The coffee powder residue, containing high moisture after brewing, was collected in public and private companies of Federal District. After being left to natural drying, until reaching desirable moisture of 4 to 5 %, it was sieved and stored in plastic bags. This material was employed in field and greenhouse experiments. The first aimed at studying CPR as supplemental fertilizer and soil conditioner in densely planted organic coffee. Obatã cultivar, receiving 2.0, 1.5, 1.0, 0.5 and 0 kg (control), applied at canopy projection of every tree. Each plot containing 24 plants composed the experiment with four repetitions of randomized blocs. In the second experiment, CPR expurgated against insects, was employed as substrate component, combined in mass proportions with other organic and artificial products to evaluate germination and growth of tomato and coffee seedlings. In the experimental conditions, it was verified that CPR had favorable chemical attributes for agricultural use. Growing doses resulted in higher leaf area index and floral buds of coffee trees. Its utilization in substrates interfered on germination, emergence and biomass production of tomato and coffee seedlings. The inhibitory effect of coffee powder residue, when present in substrates, may be associated with allelopathic secondary metabolites, such as caffeine, turning necessary identification of these substances and their respective concentrations.

Toxinas Cry provenientes de Bacillus thuringiensis, também denominadas de δ- endotoxinas, possuem ampla atividade inseticida e são específicas para insetos de diferentes ordens, não sendo nocivas a mamíferos, aves, anfíbios ou répteis. Devido a esta característica, seus genes vêm sendo utilizados no desenvolvimento de plantas transgênicas, visando o controle de insetos-praga de culturas de importância econômica. Dentre estas, destaca-se o algodoeiro que tem como principais pragas o bicudo-do-algodoeiro (Anthonomus grandis) e a lagarta-do-cartucho (Spodoptera frugiperda), ambas causadoras de grandes prejuízos econômicos. Assim, este trabalho objetivou: caracterizar uma estirpe de Bt (S811) tóxica contra S. frugiperda e A. grandis, identificar e clonar os genes codificadores de toxinas Cry potenciais para o controle dessas pragas, expressar os genes em sistema heterólogo Escherichia coli e testar a toxicidade das toxinas contra as pragas em questão. Os resultados obtidos nas análises da estirpe por microscopia eletrônica revelaram a presença de cristais esféricos e bipiramidais, enquanto que a análise de SDS-PAGE detectou proteínas de massa molecular com cerca de 140 kDa e 80 kDa. Posteriormente, uma caracterização gênica, utilizando oligonucleotídeos específicos para genes cry, identificou três genes, cry1Ab, cry1Ia e cry8, sendo estes dois últimos de maior interesse. O gene cry8, que foi isolado pela técnica TAIL-PCR, codifica uma proteína com 58% de identidade de aminoácidos com outras toxinas Cry8, enquanto que o gene cry1Ia12 (isolado com oligonucleotídeos específicos) codifica uma proteína que possui 99% de identidade com as outras proteínas do tipo Cry1Ia descritas na literatura. As porções tóxicas dos genes foram clonadas e expressadas em E. coli produzindo as proteínas recombinantes Cry8 e Cry1Ia12 de aproximadamente 70 kDa (cada uma). As proteínas recombinantes causaram mortalidade de 50% para larvas de A. grandis com 230 μg/ml e 160 μg/ml de Cry1Ia12 e Cry8, respectivamente, enquanto que para larvas de S. frugiperda, apenas Cry1Ia12 foi tóxica causando mortalidade de 50% com 5 μg/ml. Todos estes estudos contribuirão para o desenvolvimento de plantas transgênicas de algodão, bem como para a geração de novas moléculas com maior toxicidade e especificidade utilizando a evolução molecular in vitro (DNA shuffling) destes genes. / Cry toxins or δ-endotoxins, produced by Bacillus thuringiensis, show broad activity against several orders of insects. In addition, they are harmless to mammals, birds, amphibian, and reptiles. Because of these characteristics, several genes have been used in the development of transgenic plants to control pests in important crops. Among them, the cotton crop is very important in Brazil and it has the cotton boll weevil, Anthonomus grandis, and the fall armyworm, Spodoptera frugiperda, as the major pests in this crop, which cause several economic damages. The objective of this work was: to characterize a Bt strain (S811), which is toxic towards S. frugiperda and A. grandis, to identify and clone the coding genes of the Cry toxins with potential to control these pests, to express the genes in Escherichia coli heterologous system, and to test the toxicity of the recombinant proteins towards the reported pests. Electronic microscopic analysis revealed the presence of bipyramidal and spherical crystals and SDS-PAGE analysis showed proteins with 140 kDa and 80 kDa of molecular weight mass. Further gene characterization, using specific primer sets to detect cry genes, identified three genes, cry1Ab, cry1Ia e cry8, although the cry1Ia e cry8 were the genes of major interest. The cry8 gene was isolated through TAIL-PCR techniques and encodes a protein 58% identical to other Cry8 toxins, while the protein deduced from cry1Ia12 gene showed 99% identity with other Cry1Ia toxins previously described. The cry1A12 and cry8 gene toxic fragments were cloned and expressed in E. coli, and the 70 kDa recombinant proteins of were tested against A. grandis and S. frugiperda. Cry1Ia12 toxin caused 50% mortality at 230 μg/ml and 5 μg/ml towards both A. grandis and S. frugiperda, respectively. Cry8 toxin caused 50% mortality only against A. grandis at 160 μg/ml. In addition to the transgenic cotton development program, these results will permit the generation of new molecules with higher toxicity and specificity for these pests through in vitro molecular evolution (DNA shuffling) of these genes.