Submitted by Karl Pettersson (karl_pettersson_@hotmail.com) on 2010-08-19T14:53:08Z No. of bitstreams: 1 DissertaçãoKP.pdf: 713010 bytes, checksum: b3806525ae53d3e9ab94874d7b024a1f (MD5) / Approved for entry into archive by Vitor Souza(vitor.souza@fgv.br) on 2010-08-23T15:16:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissertaçãoKP.pdf: 713010 bytes, checksum: b3806525ae53d3e9ab94874d7b024a1f (MD5) / Made available in DSpace on 2010-08-23T17:57:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissertaçãoKP.pdf: 713010 bytes, checksum: b3806525ae53d3e9ab94874d7b024a1f (MD5) Previous issue date: 2010-05-25 / Este estudo analisa os fatores que influenciaram a escolha de empresas de petróleo no Brasil a explorar os blocos licitados pela Agencia Nacional de Petróleo (ANP). Os acordos de Exploração & Produção da ANP definem um Programa Exploratório Mínimo a ser feito no bloco licitado, mas os resultados mostram que em muitos casos esse programa exploratório não foi cumprido. Os resultados empíricos mostram que vários fatores afetam a decisão de perfurar poços, entre elas o bonus final oferecido pelo bloco, a participação da Petrobras e a localização geográfica do bloco. A regulação também teve uma influência importante na exploração de blocos, pela indicação da intensidade de poços a ser perfurados e pela flexibilidade de cessão no controle dos blocos. Os resultados também mostram que novas informações têm um papel importante na decisão de perfuração, especialmente informações sobre o preço do petróleo, o prêmio pago pelo lance vencedor e as atividades prévias de perfurações em blocos vizinhos após a licitação. O estudo utiliza uma amostra de 88 blocos licitados durante as quatro primeiras rodadas de licitações da ANP e a incidência de perfurações de poços nesses blocos entre o período de 1999 a 2009. / This study examines the factors that influenced the choice of oil companies in Brazil to explore the tracts tendered by The National Petroleum Agency (ANP). Agreements for Exploration & Production by ANP define an exploration program to be conducted on auctioned tracts, but the results show that in many cases this exploratory program was not fulfilled. The empirical results show that several factors affect the decision of drilling wells, including the final bonus paid for the tract, the participation f Petrobras, and the geographic location of the tract. Regulation also had an important influence on the exploration of tracts, by giving indications of the intensity of wells to be drilled and the flexibility to transfer controlled tracts. The results also show that new information has an important role in the choice of drilling, especially information concerning oil prices, the premium price paid for the tract during the auction and previous drilling activities in neighboring tracts after the auction. The study uses a sample of 88 tracts tendered during the first four rounds of ANP and compares the results of the actual drilling of wells in these tracts between the period of 1999 to 2009.

SILVA, Wildson Max Barbosa da. Contribuição ao conhecimento químico de Calliandra mucugeana e Calliandra sessilis. 2016. 93 f. Tese (Doutorado em química)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2013. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-06-03T17:58:47Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_wmbsilva.pdf: 3534414 bytes, checksum: 9e4a8961d96e9314ae0e27c71aa94d1e (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-20T20:40:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_wmbsilva.pdf: 3534414 bytes, checksum: 9e4a8961d96e9314ae0e27c71aa94d1e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-20T20:40:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_wmbsilva.pdf: 3534414 bytes, checksum: 9e4a8961d96e9314ae0e27c71aa94d1e (MD5) Previous issue date: 2012 / This work describes the chemical investigation of Calliandra sessilis and Calliandra mucungeana (Fabaceae). The Chemical prospection of the root extracts of the two species resulted in the isolation and characterization of steroids, diterpenes and fatty esters. From the hexane extract were isolated a ternary mixture of the steroids β-sitosterol, espinasterol and estigmasterol, the pentacyclic triterpene lupeol, besides a diterpene of skeleton cassane, 2,12-dioxo-3- hydroxy-15,17-epoxy-cassa-13(15),14(17)-diene. From the ethanol extract were isolated a binary mixture of bis-(2,3-dihydroxypropil) tetracosanodioate and bis-(2,3- dihydroxypropil) docosanodioate, as well as, a glucosidal steroidal mixture constituted of β-sitosterol, espinasterol and estigmasterol. The structural determinations of isolated compounds were performed by spectrometric techniques, such as: infrared (IR), mass spectrometry (IES-MS) and proton nuclear magnetic resonance (1H NMR) 13-carbon ( 13C NMR), including dimensional techniques (COSY, HSQC and HMBC), besides comparison with described data. / Este trabalho descreve a investigação química das espécies Calliandra sessilis e Calliandra mucungeana (Fabaceae). A Prospecção química dos extratos das raízes das respectivas espécies permitiu o isolamento e caracterização de esteroides, diterpenos e ésteres graxos. Do extrato hexânico foram isolados a mistura ternárias dos esteroides, β-sitosterol, espinasterol e estigmasterol, o triterpeno pentacíclico lupeol, além de um diterpeno de esqueleto cassano 2,12-dioxo-3-hidróxi-15,17-epóxi-cassa-13(15),14(17)-dieno. Do extrato etanólico foram isolados uma mistura binária dos ésteres tetracosanodioato de bis-(2,3-diidroxipropila) e docosanodioato de bis-(2,3-diidroxipropila) e ainda, a mistura dos esteroides glicosilados, β-sitosterol, espinasterol e estigmasterol. Na determinação estrutural dos compostos isolados, utilizou-se técnicas espectométricas como: infravermelho (IV), espectrometria de massas (EM-IES) e ressonância magnética nuclear de hidrogênio (RMN 1H) e carbono-13 (RMN 13C), incluindo técnicas bidimensionais (COSY, HSQC e HMBC ) além de comparação com dados descritos na literatura.

Submitted by Teresa Cristina Rosenhayme (teresa.rosenhayme@cprm.gov.br) on 2014-11-25T11:16:26Z No. of bitstreams: 1 Leo Rodrigues Teixeira (D).pdf: 6770864 bytes, checksum: 6353776bf7d1538e78e5481d83a8c299 (MD5) / Approved for entry into archive by Roberta Silva (roberta.silva@cprm.gov.br) on 2014-11-25T11:24:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Leo Rodrigues Teixeira (D).pdf: 6770864 bytes, checksum: 6353776bf7d1538e78e5481d83a8c299 (MD5) / Approved for entry into archive by Roberta Silva (roberta.silva@cprm.gov.br) on 2014-11-25T11:24:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Leo Rodrigues Teixeira (D).pdf: 6770864 bytes, checksum: 6353776bf7d1538e78e5481d83a8c299 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-25T11:24:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leo Rodrigues Teixeira (D).pdf: 6770864 bytes, checksum: 6353776bf7d1538e78e5481d83a8c299 (MD5) Previous issue date: 1997-09

Submitted by Teresa Cristina Rosenhayme (teresa.rosenhayme@cprm.gov.br) on 2015-07-14T13:31:12Z No. of bitstreams: 1 tese.pdf: 81518269 bytes, checksum: 9013953a709ab1204f88e41db99170d7 (MD5) / Approved for entry into archive by Roberta Silva (roberta.silva@cprm.gov.br) on 2015-07-15T12:14:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 tese.pdf: 81518269 bytes, checksum: 9013953a709ab1204f88e41db99170d7 (MD5) / Approved for entry into archive by Roberta Silva (roberta.silva@cprm.gov.br) on 2015-07-15T12:14:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 tese.pdf: 81518269 bytes, checksum: 9013953a709ab1204f88e41db99170d7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-15T12:24:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese.pdf: 81518269 bytes, checksum: 9013953a709ab1204f88e41db99170d7 (MD5) Previous issue date: 2013

Programa de Pós-Graduação em Evolução Crustal e Recursos Naturais, Departamento de Geologia, Escola de Minas, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Anderson Gamarano (andersongamarano@hotmail.com) on 2015-11-10T13:46:49Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_MapeamentoGeoquímicoEstabelecimento.pdf: 42694228 bytes, checksum: 0bbf4397c39cc2fe4670e5dbbfa62525 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2015-11-12T13:19:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_MapeamentoGeoquímicoEstabelecimento.pdf: 42694228 bytes, checksum: 0bbf4397c39cc2fe4670e5dbbfa62525 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-12T13:19:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_MapeamentoGeoquímicoEstabelecimento.pdf: 42694228 bytes, checksum: 0bbf4397c39cc2fe4670e5dbbfa62525 (MD5) Previous issue date: 2015 / O mapeamento geoquímico e a determinação de valores de referência vem obtendo uma crescente importância nos últimos anos, pois contribuem para o tripé de desenvolvimento sustentável (saúde, meio ambiente e economia) de um país. A confecção destes mapas contribui para a localização espacial de áreas com anomalias permitindo a identificação das suas prinicipais fontes, ao passo que a determinação dos valores de referência também é fundamental para distinguir os valores considerados padrão para uma determinada área das anomalias, bem como avaliar a extensão da poluição de uma mesma área. Neste trabalho, o mapeamento geoquímico de alta densidade com os respectivos valores de referência são apresentados, ambos com enfoque ambiental. Foram coletadas 541 amostras de sedimentos de corrente em todo o Quadrilátero Ferrífero, proporcionando uma densidade de amostragem de 1 amostra para cada 13 km2. Para determinar os valores de referência foram testadas diferentes metodologias, a saber: média +2 desvio padrão, mediana +2 MAD, boxplot UIF, análise fractal, análise espacial e as metodologias associadas. Para confecção dos mapas geoquímicos foi utilizada a técnica de interpolação denominada inverso da distância ponderada (IDW). Os resultados indicam que as técnicas mais antigas de determinação de valores de referência, a Média + 2x desvio padrão e a Mediana + 2x MAD não são efetivas para a separação das anomalias, pois superestimam ou subestimam a faixa de referência. As metodologias Análise fractal e Boxplot UIF apresentaram, para a grande maioria dos elementos, valores bem próximos, confirmando que o intervalo de referência está correto e, demonstrando que ambas são as mais adequadas para ambientes geológicos complexos. Contudo, o Cu, Fe, Pb e Ti apresentaram valores 30 a 46% discrepantes entre as metodologias. No entanto, observou-se que os valores obtidos via Análise fractal demonstraram ser mais condizentes com a distribuição espacial dos elementos, além de ter apresentado os outliers em locais onde notadamente são observados impactos ambientais significativos ou a presença de litotipos ricos no elemento. Com relação aos mapas geoquímicos, observou-se que 72 a 78% da área do QF não apresenta anomalias para os elementos estudados e estes valores podem ser considerados como o background litológico, cerca de 15 a 24% da área estudada apresenta anomalias que podem ser atribuídas tanto aos tipos de rocha aflorantes quanto à influência antrópica, os quais podem ser enquadrados como altos valores de referência, e 2 – 12% do total da área apresentam valores anômalos que são considerados outliers, sendo relacionados com a a interferência humana, principalmente com a mineração. Este primeiro mapeamento geoquímico da alta densidade feito no QF permitiu delinear um controle efetivo da litologia na composição química dos sedimentos, estabelecer um padrão de comportamento bem definido para cada tipo de rocha, o que permitiu a detecção de anomalias ocorridas em função da ação antrópica. Além disso, demonstrou espacialmente quais comunidades, cidades e bacias hidrográficas estão expostas a riscos ambientais e por isso necessitam ser monitoradas e protegidas. ________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: The geochemical mapping and determination of reference values received increasing importance in recent years, because contribute to sustainable development tripod (health, environment and economy) of a country. These maps contributes to the spatial location of areas with anomalous concentrations allowing the identification of their major sources, whereas the determination of reference values is also essential to distinguish the normal values from anomalies and to assess the extent of pollution a certain area. Here, results from a high-density geochemical mapping and derived related reference values are presented, both with environmental focus. 541 stream sediment samples have been collected across the Iron Quadrangle, Brazil, with a density of 1 sample per 13 km2. To determine the reference values were tested different methodologies: mean + 2x standard deviation, median + 2x MAD, boxplot UIF, fractal analysis, spatial analysis and associated methodologies. Geochemical maps were compiled using the inverse distance weighted (lDW) interpolation method. The results shows that the most ancient techniques for determination of reference values , the mean + 2x standard deviation and median + 2x MAD are not effective to distinguished normal concentrations from anomalies because overestimate or underestimate the reference range. The fractal analysis and Boxplot UIF show, for most of the elements, very close values, confirming that the reference range is correct, demonstrating that both are the most appropriate for complex geological environments. However, Cu, Fe, Pb and Ti showed conflicting values with a difference of 30-46% between methodologies. However, the values obtained through fractal analysis proved to be more consistent with the spatial distribution of elements, and also presented outliers in regions where strong environmental impacts are observed, or in basins that presenting rock types rich in the element. With regards about geochemical maps, 72 to 78% of the IQ area shows exclusively geogenic concentration ranges for the elements studied, and these values can be considered as the background lithology. About 15 to 24% represent positive anomalies, likely related to both near surface rock types and to human interference, which can be classified as high normal range.Distinct anthropogenic anomalies, notably from mining activities explain 2–12% of all samples. This first high density geochemical mapping allowed delineate the role of lithology on the elemental composition of the sediments and establish well-defined behaviour pattern of elements for each rock type, which allowed the detection of anthropogenic anomalies. In addition, the new high-density mapping also allows delineating those localities, cities and basins that are exposed to higher environmental risks and thus need to be monitored and protected.

Made available in DSpace on 2016-01-13T13:27:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-15. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-13T13:33:00Z : No. of bitstreams: 1 000855254.pdf: 5885285 bytes, checksum: b3fd3d0ee13e84e2b552976e5ddcba21 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Esse trabalho consiste na aquisição de dados de magnetometria terrestre numa área compreendida por duas ocorrências cupríferas denominadas Capão Grande e Victor Teixeira, localizadas no interior do município de Caçapava do Sul-RS. Os dados resultantes da aplicação desse método geofísico foram adquiridos com o propósito de caracterizar a subsuperfície para verificar uma potencial relação de conexão entre as mineralizações dessas ocorrências de cobre. A ocorrência Capão Grande tem como encaixante as rochas sedimentares da Bacia do Camaquã. Já a ocorrência Victor Teixeira está inserida em rochas metamórficas do Escudo Sul-Rio- Grandense. Na caracterização de subsuperfície foram empregados levantamentos de medidas de intensidade do campo magnético total ao longo de perfis e sob a forma de malha no intervalo de 2300 m entre as ocorrências mineralizadas. Essas medidas foram processadas em conjunto, e os produtos resultantes foram os mapas do campo magnético total, passa banda profundo, passa banda raso e amplitude do sinal analítico. Análises e discussões posteriores desses mapas com a sobreposição das principais informações geológicas da área e de resultados geofísicos de interesse de estudos anteriores permitiram a definição de que as mineralizações das ocorrências estudadas não apresentam conexão em subsuperfície / This paper consists of the acquisition of terrestrial magnetometry data in an area comprised of two mineralized occurrences copper called Capão Grande and Victor Teixeira, located in the city of Caçapava do Sul, in the south of Brasil. The resulting data from the application of this geophysical method characterizing the subsurface to check a potential connection relationship between these copper mineralization occurrences. The Capão Grande occurrence has the enclosing sedimentary rocks of the Camaquã Basin. Victor Teixeira occurrence is inserted into metamorphic rocks Sul-Rio-Grandense Shield. In characterizing subsurface magnetic surveys were employed intensity of the total magnetic filed measurements along the profiles and in the form of mesh in the of 2300 m between the mineralized occurrences. These measurements were processed together, and the products resulting were, the total field maps, band pass deep, band pass shallow, and the analytic signal amplitud. Analysis and further discussion of these maps with the overlay of the main geological information of the area and geophysical results of interest from previous studies allowed the definition of the mineralization of the cases studied show no connection in the subsurface

Orientador : Prof. Dr. Armando João Dalla Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias Sociais Aplicadas, Programa de Pós-Graduação em Desenvolvimento Ecônomico. Defesa : Curitiba, 17/03/2016 / Inclui referências : f. 89-93 / Resumo: As reservas de petróleo no Brasil devido as características geológicas encontram-se nas bacias sedimentares localizadas ao longo da costa em solo oceânico em uma região conhecida como província do pré-sal. Contudo, não havia tecnologia disponível no setor petrolífero para a exploração e produção em um ambiente tão adverso. Com o propósito de desenvolver tecnologia para a exploração e produção de petróleo no pré-sal. A Petrobras constituiu um sistema de inovação gerenciado pelo (CENPES) com o objetivo de coordenar as atividades de P&D desenvolvidas pelos seus parceiros. Para tal, estabeleceu uma rede complexa conforme o modelo tripple helix, agrupada por temas de interesse denominada como: redes temáticas. Composta por Instituições de ensino e pesquisa pública e particulares e empresas de base tecnológica. Em 2006 a Petrobras encontrou óleo e gás no pré-sal; em 2007 implantou o Programa Tecnológico para o Desenvolvimento da Produção dos Reservatórios do Pré-sal (PROSAL). Esta dissertação tem como objetivo analisar a evolução do aprendizado tecnológico a evolução do conhecimento a partir do sistema de inovação da Petrobras. A conclusão geral foi a constatação de que o sistema tecnológico implantado pela Petrobras, permitiu a companhia produzir conhecimento e gerar tecnologia para viabilizar a produção e permitir ao país a autossuficiência em petróleo. Palavras-chave: Sistema de Inovação. Redes Temáticas. Petrobrás. Exploração do Pré-Sal. / Abstract: Oil reserves in Brazil due to geological features are found in sedimentary basins located along the coast on the ocean floor in a region known as the pre-salt province. However, there was no technology available in the oil sector for exploration and production in such a harsh environment. In order to develop technology for the exploration and production of oil in the pre-salt. Petrobras was an innovation systemmanaged by (CENPES) in order to coordinate R & D activities carried out by itspartners. To this end, it established a complex network as tripple helix model, grouped by topics of interest known as thematic networks. Composed by educational institutions and public and private research and technology-based companies. In 2006, Petrobras found oil and gas in the pre-salt; in 2007 It was established the Technological Program for the Development of Production of Pre-salt reservoirs (Prosal). This thesis aims to analyze the evolution of technological learning the evolution of knowledge from Petrobras innovation system. The general conclusion was the fact that the technological system implemented by Petrobras allowed the company to produce knowledge and generate technology to enable the productionand enable the country to self-sufficiency in oil.Keywords: Innovation System. Thematic Networks. Petrobras. Exploration Pre-Salt.

Orientador: Sidnei Pires Rostirolla / Co-orientadores: Antonio C. G. de Andrade e Silva, Paulo César Soares / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná / Obra acompanhada de CD-Rom / Resumo: São abordados nesta dissertação elementos de organização, documentação e tratamento de informação exploratória georreferenciada, destacando pontos de modelagem conceituai e lógicorelacional topológica de um ambiente de suporte à decisão dirigido à delimitação de áreas mais favoráveis para prospecção mineral em detalhe e semidetalhe. É tomada, como estudo de caso, a avaliação da favorabilidade de terrenos proterozóicos da região do Vale do Ribeira (PR-SP) para depósitos exalativos-sedimentares de Chumbo-Zinco, a partir da integração entre um modelo de depósito e um banco de feições geológicas mapeadas em escala 1:100.000 diagnosticas dos processos geradores deste. Os resultados são exibidos numa aplicação computacional desenvolvida em ambiente Inprise Delphi® para operação em IBM-PC sob Windows,® capaz de exibir dados selecionados segundo critérios de consulta estruturada e também mapas de favorabilidade exploratória. A dissertação tem assim um enfoque metodológico, procurando agregar ao repertório geológico elementos de análise de sistemas e programação orientadas a objetos. / Abstract: Elements of organization, documentation and manipulation of spatial exploratory information are discussed in this dissertation, with emphasis being placed on conceptual and georelational modeling of décision-support information systems in mineral exploration. A case study is presented, in which Bayesian favorability scores for the presence of sedimentary-exhalative lead-zinc deposits are mapped over Precambrian metasedimentary terrains in Vale do Ribeira, Southern Brazil. The favorability scores are assessed from integration and analysis of a class model of such mineral deposits and 1:100.000 representations of geologic features diagnostic of their forming processes. Results are displayed in a Windows® based computer application, not only the implementation of which but also the database construction and the favorability assessment are examples of how object-oriented concepts can be applied to geological analysis.

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-03. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:06Z : No. of bitstreams: 1 000865034_20171203.pdf: 153851 bytes, checksum: 30ebdc494e0c9267585653b781683912 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-12-08T12:00:13Z: 000865034_20171203.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-12-08T12:01:06Z : No. of bitstreams: 1 000865034.pdf: 1774770 bytes, checksum: cbbb1c1e9d8ae900c12fb9153a166e2e (MD5) / A partir de uma biblioteca metagenômica de um consórcio microbiano degradador de óleo diesel, um clone (PL3C3) expressando um novo gene de protease foi selecionado dentre vinte e seis positivos para degradação de azocaseína. Através do sequenciamento, foi analisado um contig e identificado uma ORF que codifica a proteína, denominada ORF19 composta por 966 pb, 321 aminoácidos, exibindo 69% de identidade com uma alfa/beta hidrolase de Parvibaculum lavamentivorans DS-1(número de acesso ABS62095.1). A sequência da ORF19 após análise em um banco de dados de protease - MEROPS - mostrou 74,3% de identidade com uma serino-protease da família S9U (número de acesso MER095859). Através da análise filogenética, foi possível sugerir que a ORF19 é um novo membro desta família exibindo a tríade catalítica e motivos conservados característicos. A massa molecular da proteína foi estimado em 35 kDa, tendo por base a sua composição em aminoácidos e estimativas junto ao programa Protparam, e considerando o padrão de migração eletroforética da proteína em condições desnaturantes. O gene da ORF19 foi clonado no vetor de expressão pET28a, porém, a proteína recombinante não foi super-expressa em Escherichia coli BL21 (DE3). Contudo, a troca de hospedeiro, vetor, e estudos para uma super-expressão é necessário para a obtenção da proteína, visando sua futura caracterização. Este estudo contribui para a descoberta de uma nova serino-protease utilizando abordagens moleculares, como a metagenômica / From a metagenomic library of a microbial consortium that degrades diesel oil, a clone (PL3C3) expressing a novel protease gene was selected from twenty six positive for azocasein degradation. Through sequencing, an analysis was made contig and identified an ORF encoding a protein, called ORF19 composed of 966 bp, 321 amino acids, exhibiting 69% identity with an alpha / hydrolase beta Parvibaculum lavamentivorans DS-1 (accession number ABS62095. 1). The sequence of ORF19 after analysis of a protease database - MEROPS - showed 74.3% identity with a serine protease family S9U (access number MER095859). Through phylogenetic analysis, it was possible to suggest that ORF19 is a new member of this family displaying the catalytic triad and characteristic conserved motifs. The molecular mass of the protein was estimated at 35 KDa, based on its amino acid composition and estimates Protparam by the program, and considering the pattern of electrophoretic migration of the protein under denaturing conditions. The ORF19 gene was cloned into the pET28a expression vector, but not the recombinant protein was overexpressed in E. coli BL21 (DE3). However, the exchange of host, vector, and studies for overexpression is required to obtain the protein, for their further characterization. This study contributes to the discovery of a new serine protease using molecular approaches, as metagenomic

Orientador: Eliana Gertrudes de Macedo Lemos / Banca: Maria Célia Bertolini / Banca: Eleni Gomes / Banca: Mariana Carina Frigieri / Banca: Marcos Túlio de Oliveira / Resumo: A análise de mineração de dados genômicos de Mesorhizobium sp. revelou a presença de uma ORF de 1257pb contendo o gene mesoamp, que codifica uma proteína de 418 aminoácidos. A sequência de aminoácidos deduzida apresenta 50% de identidade com uma amino-peptidase termoestável de Thermus thermophilus, membro da família de peptidase M29, e oito assinaturas caraterísticas das metalo-protease termofílicas foram encontrados. O gene mesoamp foi clonado e expresso em Escherichia coli. A massa molecular da proteína foi avaliada por SDS-PAGE e filtração em gel, o que indicou que a proteína apresenta 45,72kDa e 88,05kDa, respectivamente, sugerindo uma estrutura dimérica da enzima recombinante. A enzima foi nomeada como MesoAmp. Em seguida realizou-se a modelagem 3D estrutural, que mostrou uma região de dimerização e uma região de ligação ao substrato altamente conservada contendo os resíduos de ligação a metais e o resíduo catalítico. A enzima apresentou atividade ótima em pH 8,5 e temperatura de 45°C, foi fortemente ativada por Co2+ e Mn2+, nestas mesmas condições de reação, a enzima apresentou Km e Kcat de 0,2364±0,018mM e 712,1±88,12seg-1, respectivamente. Além disso, foi verificado uma notável estabilidade da enzima em solventes orgânicos e elevadas concentrações de NaCl, além de um alto grau de reutilização sem perda apreciável de atividade o que torna MesoAmp única, este trabalho estabelece as bases para potenciais aplicações biotecnológicas e/ou o desenvolvimento de tecnologias su... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The genomic data mining analysis of a Mesorhizobium sp. revealed the presence of a 1257-bp open reading frame containing the Mesoamp gene, which encodes a protein of 418 amino acids. The deduced amino acid sequence was 50% identical to the thermostable amino-peptidase from Thermus thermophilus, a member of peptidase family M29, and eight fingerprints signatures for a thermophilic metalloprotease were found. The mesoamp gene was cloned and overexpressed in Escherichia coli. The molecular mass of the protein was assessed by SDS-PAGE and gel filtration, which indicated the protein weighs 45.72kDa and 88.05kDa, respectively, suggesting a dimeric structure of the recombinant enzyme. The enzyme was designated as MesoAmp. The 3D structural modeling showed a dimerization region with highly conserved catalytic and binding metal residues. The enzyme exhibited optimum activity at pH 8.5 and 45°C and was strongly activated by Co2+ and Mn2+ . Under these reaction conditions, the enzyme displayed Km and Kcat values of 0.2364±0.018mM and 712.1±88.12seg-1, respectively. Additionally, the remarkable stability of the enzyme in organic solvents, its activity at high concentrations of NaCl and the high degree of reuse without appreciable loss of activity makes MesoAmp unique. In summary, this work lays the foundation for potential biotechnological applications and/or the development of environmentally friendly technologies and describes the first solvent and halo-tolerant amino-peptidases ident... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor