Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mauricele Baldo.pdf: 791599 bytes, checksum: bae07fffa63ea2af6fe2884dfd9c37e6 (MD5) Previous issue date: 2008-03-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / One of the focus of the alternative agriculture is the disease control, wich include biological control, the induction of resistance in plants and the use of the natural products with antimicrobial activity and /or resistance induction. Basidiocarps extracts have been studied for disease control. This research focused the avaliation of the fungitoxic effect in the aqueous extracts of the mycelium (EAM), basidiocarps (EAB) and filtrate of culture (EAF) of Pycnoporus sanguineus, in the Colletotrichum lindemuthianum, and avaliate the control of anthracnose in the bean plant by theses extracts and the resistance induction through determination of activity of the enzyme peroxidase (POX), polyphenol oxidase (PFO), phenylalanine ammonia-lyase (PAL) and β-1,3 glucanase, besydes detection in situ of the reatives oxygen species (ROS) H2O2 and O2-. For the tests in vitro were utilized the extracts on concentration 1, 5, 10, 15 and 20%, avaliating the micelial growth and the germination of the C. lindemuthianum spores. In order to severity tests and determination of enzyme, extracts on concentrations 5 and 10% were applayed on the 1st trifoliate leaves of bean plant, three days before of the inoculation of the pathogen (1x104 conidia mL-1) on 1st s and 2nd s leaves. The same procediment was adopt for detection of ROS, instead utilized just EAM 5%, water, acibenzolar-S-methyl (150 mg i.a.L-1) and azoxystrobin fungicide (4 g. i. a. L-1). For the enzyme determination was amostrated the 1st s and 2nd s leaves at the moment of treatment and after 3, 6, 9, 12, 27 days. For ROS was made avaliations to 48, 96 and 192 hours after the inoculation. The results indicated direct antimicrobial activity of the extracts, having these extracts inhibited the germination, but they didn t inhibited the micelial growing. On plants, the EAF 5 e 10%, reduced 69 and 67% respectively, the severity on the 1st s leaves, while the fungicide and ASM reduced 87 and 76% respectively. On 2nd s leaves the more significative reductions were observed to EAB 10% and EAF 5 and 10%, with reduction of the severity of 63%. This reduction on severity can be associated with POX, PAL and β-1,3 glucanase what apresented alterations on the especific activity, what wasn t observed to PFO. The formation of H2O2 wasn t detected, on 48 and 96 hours. In 192 hours the EAB treatment apresented citoplasmatic desorganization and collapse of epidermic cell similar to the water control. In times 48 and 96 hours there was of the O2- in the EAM, EAB and ASM treatment. In 192 all of the treatments apresented reaction to O2- in epidermic cells and the mesophyll. This results apoint the potencial of P. sanguineus extracts for the control of in the anthracnose in bean plants, that can occurr by induction of the local and systemic resistance an/or antimicrobial direct activity / Um dos enfoques da agricultura alternativa é o controle alternativo de doenças, o qual inclui o controle biológico, a indução de resistência em plantas e o uso de produtos naturais com atividade antimicrobiana e/ou indutora de resistência. Extratos de basidiocarpos têm sido estudados no controle de doenças. Este trabalho teve como objetivos avaliar o efeito fungitóxico dos extratos aquosos de micélio (EAM), basidiocarpo (EAB) e filtrado de cultura (EAF) de Pycnoporus sanguineus, sobre Colletotrichum lindemuthianum; e avaliar o controle da antracnose em feijoeiro por estes extratos, bem como a indução de resistência pela determinação da atividade das enzimas peroxidase (POX), polifenoloxidase (PFO), fenilalanina amônia-liase (FAL) e β-1,3 glucanase; além de detecção in situ das espécies reativas de oxigênio (ERO s) H2O2 e O2-. Para os ensaios in vitro foram utilizados os extratos nas concentrações 1, 5, 10, 15 e 20%, avaliando-se o crescimento micelial e germinação de esporos de C. lindemuthianum. Para os ensaios de severidade e determinação das enzimas, extratos nas concentrações 5 e 10% foram aplicados nas 1as folhas trifoliadas de feijoeiro, três dias antes da inoculação do patógeno (1x104 conídios mL-1) realizada nas 1as e 2as folhas. O mesmo procedimento foi adotado para detecção das ERO s, porém utilizados apenas EAM e EAB 5%. Água, acibenzolar-S-metil (75 mg i. a. L-1) e fungicida azoxystrobin (4 g i. a. L-1) foram utilizados como tratamentos controle para todos os ensaios. Para a dosagem das enzimas foram amostradas as 1as e 2as folhas no momento dos tratamentos e após 3, 6, 9, 12 e 27 dias. Para ERO s foram feitas avaliações às 48, 96 e 192 h após inoculação. Os resultados indicaram atividade antimicrobiana direta dos extratos, tendo estes inibido a germinação, porém não apresentaram efeito inibitório do crescimento micelial. Nas plantas, os EAF 5 e 10%, reduziram 69 e 67%, respectivamente, a severidade nas 1as folhas, enquanto o fungicida e ASM reduziram 87 e 76%, respectivamente. Nas 2as folhas as maiores reduções foram observadas para EAB 10% e EAF 5 e 10%, com redução média da severidade de 63%. Esta redução na severidade pode estar associada com POX, FAL e β-1,3 glucanase que apresentaram alterações na atividade específica, o que não foi observado para PFO. Não foi detectada formação de H2O2 nas 48 e 96 h. Em 192 h os tratamentos EAB e EAM apresentaram desorganização citoplasmática e colapso das células epidérmicas semelhantes ao controle água. Nos tempos 48 e 96 h houve formação de O2- nos tratamentos EAM, EAB e ASM. Em 192 h todos os tratamentos apresentaram reação para O2- nas células epidérmicas e do mesófilo. Estes resultados indicam o potencial dos extratos de P. sanguineus no controle da antracnose do feijoeiro, que pode ocorrer tanto por indução de resistência local e sistêmica e/ou atividade antimicrobiana direta

Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-10T19:10:27Z No. of bitstreams: 1 Tese - Cynara da Cruz Camo.pdf: 966382 bytes, checksum: a67fb541e220aa0f3c790fac1deff0db (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-10T20:15:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Cynara da Cruz Camo.pdf: 966382 bytes, checksum: a67fb541e220aa0f3c790fac1deff0db (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-10T20:19:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Cynara da Cruz Camo.pdf: 966382 bytes, checksum: a67fb541e220aa0f3c790fac1deff0db (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-10T20:19:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - Cynara da Cruz Camo.pdf: 966382 bytes, checksum: a67fb541e220aa0f3c790fac1deff0db (MD5) Previous issue date: 2011-09-28 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Pycnoporus sanguineus are excellent decomposers of organic matter, presenting important role in its habitat. In this study, a strain of Pycnoporus sanguineus isolated from soil of rural area of Parintins, Amazonas, Brazil, was grown on solid medium of malt, 35 0C for 8 days to obtain a pure culture and malt liquid medium plus 2% glucose and 120 rpm for a period of 10 days to produce the enzyme xylanase, β-xylosidases, β-glucosidase, CMCase, and laccase avicelase. Among these enzymes, the production of xylanase was evaluated and the enzyme was partially purified and characterized. Optimum yield was obtained at pH 6.5 at 35 °C, 120 rpm and 196h of cultivation. The culture filtrate (200 mL), obtained under the conditions optimized in the previous steps, was precipitated at 70% ammonium sulfate and centrifuged for 60 min at 4 0C and rotation of 4000 rpm. One mL of the fraction precipitated in which xylanolytic activity was detected, was filtered using a filter Millex GV 0.22 micrometre (Durapore Membrane PYDF) and subsequently injected into a chromatograph type AKTA Purifier UPC 900, 5:11 UNICORN system, using an anion exchange column HiTrap SP XL 1 mL capacity, equilibrated in 50 mM Tris-HCl pH 7.4. The degree of purity, the fractions that showed xylanase activity, as well as their protein profiles were analyzed by electrophoresis on SDS-PAGE (12% polyacrylamide), where the molar mass of 39.44 kDa was determined. The optimal conditions for enzyme activity were 75 °C and pH 8.0. The thermal stability of the xylanase enzyme from P. sanguineus was partially purified high 65 to 85 ºC, being more stable 75 0C. The stability at different pHs was high between 4.5 and 8.8. With birchwood xylan (2.0 to 50 mg / mL), the Km value of the enzyme was 0.32786 mg / ml, and the Vmax value was 12.70648 mol min-1 mL-1 when the reaction was performed at 75 °C and pH 8.0. These results indicate the possible use of this enzyme complex industrial processes that require the use of xylanases at alkaline pH and high stability in different pHs and high temperatures. / Pycnoporus sanguineus são excelentes degradadores de matéria orgânica, apresentando importante papel em seu habitat. No presente trabalho, uma linhagem de Pycnoporus sanguineus isolada do solo de área rural do Município de Parintins, Amazonas, Brasil, foi cultivada em meio sólido de malte, a 350C, por 8 dias, para obtenção da cultura pura e meio líquido de malte acrescido de 2% de glicose e 120 rpm por um período de 10 dias para produção das enzimas xilanase, β-xilosidase, β-glicosidase, CMCase, avicelase e lacase. Entre essas enzimas, a produção de xilanase foi avaliada e a enzima foi parcialmente purificada e caracterizada. Produção ótima foi obtida em pH 6,5 a 35 °C, 120 rpm e 196h de cultivo. O filtrado de cultura (200 mL), obtido nas condições otimizadas nas etapas anteriores, foi precipitado a 70% de sulfato de amônia e centrifugado por 60 minutos a 40C e rotação de 4 000 rpm. Um mL da fração precipitada na qual detectou-se atividade xilanolítica, foi filtrado utilizando um filtro Millex GV 0,22μm (durapore PYDF Membrane) e posteriormente injetada em um cromatógrafo tipo AKTA Purifier UPC 900, sistema UNICORN 5.11; utilizando uma coluna de troca aniônica HiTrap SP XL, capacidade 1mL, previamente equilibrada no tampão Tris-HCl 50mM pH 7,4. O índice de pureza, das frações que apresentaram atividade xilanase, bem como seus perfis protéicos, foram analisadas eletroforeticamente em PAGE-SDS (12% de poliacrilamida), onde a massa molar determinada foi de 39,44 kDa. As condições ótimas para atividade da enzima foram 75 °C e pH 8,0. A estabilidade térmica da enzima xilanase de P. sanguineus parcialmente purificada foi alta de 65 a 85ºC, sendo mais estável a 750C. A estabilidade em diferentes pHs foi alta entre 4,5 e 8,8. Com xilano de birchwood (2,0 a 50 mg/mL), o valor de Km da enzima foi de 0,32786 mg/ml, e o valor de Vmax foi de 12,70648 μmol min-1 mL-1 quando a reação foi realizada a 75ºC e pH 8,0. Esses resultados indicam o possível emprego desse complexo enzimático em processos industriais que requeiram o uso de xilanases em pH alcalino e alta estabilidade em diferentes pHs e altas temperaturas.

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao francislene.pdf: 751721 bytes, checksum: e2b594633244a718bb345021ea1ae355 (MD5) Previous issue date: 2009-06-30 / The bioconversion is an area of the biotechnology that has increased in an expansive way, and it includes enzymatic reactions by microorganisms. These microorganisms that present enzymatic systems similar to those present in mammalian systems, it s the cytochrome P450 (CYP450). That s why the biotransformation an important alternative constitute as models for drug metabolism study. The Pycnoporus sanguineus is a filamentous fungi, basidiomycete of the Polyporaceae family and laccase producer (EC 1.10.3.2), an oxidoreductase enzyme. It was evaluated the influence of flavonoids naringin, naringenin, and quercetin in the growth of P. sanguineus, production of laccase in differents culture media. It was performed various conditions of reaction, such as temperature, agitation and the time of the flavonoids addition. The bioconversion processes were carried out for 24 up to 96 hours and monitored by TLC and HPLC to confirm the existence of potential metabolites. It was used purified laccase of the Pycnoporus sanguineus to evalute the participation of laccase in metabolites of naringin production. Pycnoporus sanguineus developed in differents culture media tested. Naringenin and naringin presented the capability to induce the laccase production by P. sanguineus, whereas quercetin and rutin inhibited the laccase production. The incubation using PDSM did not producted laccase. It was detected several of metabolites, whereas the incubations using quercetin acquired fourteen differents metabolites and the incubations using naringenin producted nine metabolites and naringin producted eight metabolites. In biocatalytic assay under 28ºC and 150rpm using naringin it was not detected the presence of metabolites / A bioconversão é uma área da biotecnologia que tem crescido extensamente e inclui reações enzimáticas por meio de microrganismos. Dentre os microrganismos utilizados destacam-se os fungos filamentosos, que apresentam um sistema enzimático semelhante ao dos seres humanos, o citocromo P450 (CYP, P450), responsável pelo metabolismo dos fármacos. O Pycnoporus sanguineus é um basidiomiceto da família Polyporaceae produtor de lacase (EC 1.10.3.2), que é uma enzima da classe das oxidoredutases. Neste trabalho, foi avaliada a influência dos flavonóides naringina, naringenina e quercetina no crescimento de P. sanguineus e produção de lacase em diferentes meios de culturas. Foram utilizadas condições reacionais variadas como alteração de temperatura, agitação e o tempo de adição dos flavonóides. As reações de bioconversão de flavonóides por P. sanguineus foram realizadas por um período de 24 a 96 horas e monitoradas por CCD e CLAE para verificar a presença de possíveis metabólitos. Aplicou-se a lacase purificada do P. sanguineus para avaliar a participação desta enzima na produção dos metabólitos da naringina. O fungo cresceu nos meios de cultura testados. A naringenina e a naringina apresentaram a capacidade de induzir a produção de lacase pelo fungo, enquanto a quercetina inibiu a produção da mesma. Nas incubações com o meio PDSM não houve a produção de lacase. Nos ensaios de bioconversão foram detectados vários metabólitos nas incubações com microrganismo inteiro, sendo que nas incubações com quercetina foram obtidos catorze metabólitos diferentes. Nas incubações com naringenina foram produzidos nove metabólitos e a naringina levou à produção de oito metabólitos. No ensaio biocatalítico a 28°C e 150rpm na presença de naringina não foi evidenciada a presença de metabólitos

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO DEFINITIVA c ficha catalografica.pdf: 2149699 bytes, checksum: ebcbff0f45d07e12d12a9708947a59eb (MD5) Previous issue date: 2009-07-15 / Tyrosinase (E.C.1.14.18.1) is an enzyme of industrial interest that catalyses the ohydroxylation of monophenols (monophenolase activity) and the oxidation of o-diphenols to reactive o-quinones (diphenolase activity), both reactions using molecular oxygen. Pycnoporus sanguineus (L. ex Fries) Murril, is a white rot fungi capable of producing tyrosinase and widely distributed in nature. It is found in regions of mild climate and in tropical forest. The production and characterization of tyrosinase from P. sanguineus were investigated. The selection of inductors, determination of the luminosity influence, biomass and culture media in the production of tyrosinase and the effect of inhibitors on enzyme activity were determined. The fungus produced intracellular tyrosinase and the higher activity was observed using 0.15% L-tyrosine as inducer, in the presence of light, with inoculum of 10 mycelium discs, medium malt extract broth 2%, incubation at 30°C, and constant agitation of 150 rpm, during 2 days. 6 mmol.L-1 salicylhydroxamic acid (SHAM) and 6 mmol.L-1 phenylthiourea (PTU) inhibited 100% of the tyrosinase activity. 0.1 mmol.L-1 sodium azide inhibited 4.15% of tyrosinase activity, while no inhibition was observed after addition of 0.1 mmol.L-1 of phenylmethanesulfonyl fluoride (PMSF). Using L-dopa as substrate, the intracellular crude extract presented optimum pH of 6,6, optimum temperature of 45°C, low stability at 50°C, maintaining about 50% of the activity after 15 min of incubation. The tyrosinase production was confirmed by non-denaturing polyacrylamide gel electrophoresis, using commercial fungal tyrosinase as positive control / A tirosinase (E.C.1.14.18.1), também conhecida como polifenoloxidase ou catecolase, é uma enzima de interesse industrial que catalisa a o-hidroxilação de monofenóis (atividade monofenolase) e a subseqüente oxidação do o-difenol resultante em o-quinonas reativas (atividade difenolase), usando oxigênio molecular. O Pycnoporus sanguineus (L. ex Fries) Murril, um fungo de decomposição branca (white rot) capaz de produzir a tirosinase, é amplamente distribuído na natureza, sendo encontrado em regiões de clima mais ameno e em florestas tropicais. A produção e caracterização da tirosinase produzida por P. sanguineus foi investigada. Foi realizada seleção de indutores, determinação da influência da luminosidade, biomassa e meios de cultura na produção de tirosinase, bem como o efeito de inibidores sobre a atividade enzimática. O extrato bruto enzimático foi caracterizado quanto ao pH ótimo, temperatura ótima e termoestabilidade. Os resultados obtidos demonstraram que o fungo produziu tirosinase intracelular e a mais alta atividade ocorreu com a utilização de 0,15% de L-tirosina como indutor, na presença de luz, com inóculo de 10 discos de micélio fúngico, meio caldo extrato de malte 2%, incubação à 30°C e agitação de 150 rpm, durante 2 dias. Ácido salicilhidroxâmico (SHAM) 6 mmol.L-1 e feniltiouréia (PTU) 6 mmol.L-1 inibiram 100% da atividade de tirosinase. Azida sódica 0,1 mmol.L-1 inibiu 4,15% da atividade de tirosinase, enquanto nenhuma inibição foi observada após adição de fluoreto de fenilmetanosulfonil (PMSF) 0,1 mmol.L-1. Utilizando a L-dopa como substrato, o extrato bruto intracelular apresentou pH ótimo de 6,6, temperatura ótima de 45°C, baixa estabilidade à temperatura de 50°C, mantendo apenas cerca de 50% de atividade após 15 minutos de incubação. A produção da tirosinase foi comprovada através de eletroforese em gel de poliacrilamida não desnaturante, tendo como controle positivo tirosinase fúngica comercial

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:40:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Clair_Aparecida_Viecelli.pdf: 3245600 bytes, checksum: 6a717a259ab803789f1491915e655fe3 (MD5) Previous issue date: 2012-05-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The bean (Phaseolus vulgaris) has a significant economic and social importance, but the production is affected by fungal diseases such as angular leaf spot (Pseudocercospora griseola) and common bacterial blight (Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli), which depend primarily of chemical control for the management, compromising, however, environmental quality and health of the farmer and consumer. In order to develop an alternative product that respects the environment, dry extract of rosemary (Rosmarinus officinalis), turmeric (Curcuma longa) and Pycnoporus sanguineus were submited to accelerated stability tests, antimicrobial activity, effects on vegetative growth of bean and efficiency in reducing the severity of that disease. Thus were used concentrations of 50, 100, 150 and 200 mg L-1, water and chemical fungicides (azoxystrobin 40 mg L-1) for angular leaf spot and antibiotic (22.5 mg L-1 + oxytetracycline 225 mg L-1 streptomycin) for common bacterial blight. The best result was field-tested on area under the disease progress curve (AUDPC) and on aspects of productivity. To the extract of rosemary, the results report that the validity is 24 months. To turmeric extracts and P. sanguineus the validity depending on the pathosystem, and to angular leaf spot, the validity of the extract of turmeric is 24 months, and when it seeks to control bacterial blight shelf life is 18 months. Likewise, extract of P. sanguineus to control angular leaf spot the validity of 24 months and for the bacterial blight 12 months. In vitro, only rosemary extract showed no antimicrobial activity on P. griseola, the other treatments tended to inhibit the germination of P. griseola and the multiplication of X. axonopodis pv. phaseoli. All treatments tended to increase fresh and dry mass of shoots and roots of beans. The severity of both diseases in the greenhouse was not reduced for the extract of P. sanguineus, but was reduced for concentrations of 150 mg L-1 for rosemary extract and 50 mg L-1 for turmeric. Those latter concentrations were tested in the field with 1, 2 and 3 shots at intervals of 14 days after planting. In the field, the dry extract of rosemary reduced the AACPD and increased the productivity (kg ha-1) with one application 14 days after planting. To angular leaf spot, and with three applications for common bacterial blight. To the extract of turmeric, it is suggested three applications for controlling both diseases. These treatments were similar to chemical controls. Thus study conducted with rosemary and turmeric provides an efficient product for the control of angular leaf spot and bacterial blight of bean. These products, along with P. sanguineus, are being tested in different cultures to disease control, and may extend the recommendation for other plants, being a viable alternative and environmentally friendly for agricultural production, respecting the environment, the producer and consumer / A cultura do feijoeiro (Phaseolus vulgaris) apresenta importância significativa no âmbito socio econômico mundial, porém, a produção é comprometida por doenças fúngicas como a mancha angular (Pseudocercospora griseola) e bacteriana como o crestamento comum (Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli), que dependem basicamente de controle químico para o manejo, comprometendo, em contrapartida, a qualidade ambiental e a saúde do agricultor e consumidor. Com o objetivo de desenvolver um extrato alternativo aos fungicidas, formulou-se extrato seco de alecrim (Rosmarinus officinalis), cúrcuma (Curcuma longa) e Pycnoporus sanguineus e realizou-se testes de estabilidade acelerada, atividade antimicrobiana direta, efeitos sobre o desenvolvimento vegetativo do feijoeiro e eficiência na redução da severidade dessas doenças. Foram usadas concentrações de 50, 100, 150 e 200 mg L-1, além da testemunha água, e controles químicos fungicida (azoxystrobin 40 mg i.a. L-1) para os ensaios com mancha angular e antibiótico (22,5 mg L-1 de oxitetraciclina + 225 mg L-1 de estreptomicina) para o crestamento bacteriano comum. O melhor resultado foi testado a campo avaliando-se a área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD) e aspectos de produtividade. Para o extrato seco de alecrim, os resultados indicaram que a validade é de 24 meses. Houve especificidade da validade dos extratos de cúrcuma e P. sanguineus dependendo do patossistema, assim, para a mancha angular do feijoeiro, a validade do extrato seco de cúrcuma é de 24 meses, e quando se visa controlar o crestamento bacteriano comum a validade é de 18 meses. Da mesma forma, a validade do extrato seco de P. sanguineus para mancha angular é de 24 meses e para o crestamento bacteriano é de 12 meses. In vitro, apenas o extrato de alecrim não apresentou atividade antimicrobiana direta sobre P. griseola, os demais tratamentos tenderam a inibir a germinação de P. griseola e a multiplicação de X. axonopodis pv. phaseoli. Todos os tratamentos tenderam a incrementar massa fresca e seca da parte aérea e raiz do feijoeiro. A severidade de ambas as doenças em casa de vegetação não foi significativa para o extrato de P. sanguineus, no entanto a severidade foi reduzida para a concentração de 150 mg L-1 para o extrato de alecrim e 50 mg L-1 para cúrcuma. Estas últimas concentrações foram testadas a campo com 1, 2 e 3 aplicações em intervalos de 14 dias a partir da semeadura. A campo, o extrato seco de alecrim reduziu a AACPD e incrementou a produtividade (Kg ha-1) quando realizado uma aplicação aos 14 dias da semeadura, em plantas desafiadas com P. griseola, e três aplicações para o crestamento bacteriano comum. Para o extrato de cúrcuma, houve necessidade de três aplicações para controlar ambas as doenças. Estes tratamentos foram superiores a testemunha e semelhantes ao controle químico. Em suma, a pesquisa desenvolvida com alecrim e cúrcuma fornece um extrato eficiente para o controle da mancha angular e do crestamento bacteriano comum do feijoeiro. Esses extratos, juntamente com P. sanguineus, estão sendo testados em diferentes culturas para o controle de doenças, podendo ampliar a recomendação para outras plantas, sendo uma alternativa viável e ecologicamente correta para a produção agrícola, respeitando o meio ambiente, o produtor e o consumidor

O uso de plantas na cura de enfermidades tem sido objeto de muitos estudos e desde épocas remotas está ligado ao desenvolvimento cultural de civilizações. Estudos anteriores em espécies de Myristicaceae descrevem a ocorrência da classe de lignóides como principal metabólito secundário. Variedades de estruturas químicas e de atividades biológicas são atribuídas aos lignóides. Estes metabólitos encontram-se acumulados em todas as partes da planta, principalmente nos frutos, onde os compostos predominantes são neolignanas. O presente trabalho foi realizado com Virola molissima que se encontra dispersa na Reserva Adolpho Ducke, situada nas proximidades de Manaus-AM. Os frutos foram coletados durante o mês de novembro, estação de seca na região. Não existe registro de estudo fitoquímico desta espécie. A partir de extratos de pericarpos, arilos, tegumentos e amêndoas dos frutos da Virola molissima foram isoladas por fracionamento cromatográfico as neolignanas tetrahidrofurânica, ariltetralônica e diarilbutânica. As neolignanas isoladas foram identificadas por comparação de seus dados de Ressonância Magnética Nuclear de Hidrogênio e de Carbono Treze, com aqueles descritos na literatura. A atividade antifúngica da neolignana ariltetralônica, pura ou em mistura, foi testada contra basidiomicetos Pycnoporus sanguineus, Trametes villosa e Lenzites trabeas. Estes fungos são xilófagos e causam o apodrecimento da madeira. / The use of plants in the treatment of diseases has been object of many studies, and since remote ages, the issue is linked to the cultural development of civilizations. Previous studies on Myristicaceous species described the occurrence of lignoids as its main secondary metabolites, which are known by varieties of chemical structures and biological activities. These lignoids are accumulated in all parts of the plant, mainly in the fruits, where the major constituent are neolignans. Present work was carried out on Virola molissima dispersed in Adolpho Ducke Reserve, located around Manaus, Amazon State, Brazil. Its fruits were collected during November, a month of dry season in this region. This species has not been phytochemically studied. Tetrahydrofuran, aryltetralone and dibenzylbutane neolignans were isolated from the extracts of pericarps, arils, seed coats and seeds of V. molissima fruits, by chromatographic fractionations. The structures of the isolated neolignans were elucidated through a Nuclear comparison between Magnetic Resonance of 1Hidrogen and 13Carbon data, and those described in the literature. The antifungal activity of the aryltetralone neolignan, pure or in mixture, was assayed against basidiomycetes Pycnoporus sanguineus, Trametes villosa and Lenzites trabeas. These fungi are xylophagus and they cause the decay of the wood.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-10-23T12:13:09Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Eli José Miranda Ribeiro Júnior - 2015.pdf: 709119 bytes, checksum: baa5cef4451e6bd53886e3cc249f19df (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-10-23T12:15:43Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Eli José Miranda Ribeiro Júnior - 2015.pdf: 709119 bytes, checksum: baa5cef4451e6bd53886e3cc249f19df (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-23T12:15:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Eli José Miranda Ribeiro Júnior - 2015.pdf: 709119 bytes, checksum: baa5cef4451e6bd53886e3cc249f19df (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-01-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Laccase is a poliphenoloxidase enzyme that catalyzes the oxidation of phenolic compounds in the corresponding quinones. The current obtained in this redox process can be used for quantitative analysis. In this work, a carbon paste biosensor modified gluteraldehyde functionalized silica and an enzymatic extract of the “Pycnoporus sanguineus” fungi as a lacase source is proposed for phenol determination. The effect of carbon paste and electrolyte composition, pH from 3,0 to 8,0, start potential from 0,55 to 0,25mV, scan rate from 5 to 25 mV s-1 and potential pulse amplitude from 10 to 60mV on the differential pulse voltammetric response was investigated. A linear correlation of R² = 0,9946 was obtained for the phenol content (catechol) in the concentration range from 50 to 500nMol L-1, with a detection limit of 30nMol L-1. This biosensor was used for the determination of different kinds of phenolic compounds, presenting a better response for catechol. / A lacase é uma enzima poliphenoloxidase que catalisa a oxidação de compostos fenólicos nas correspondentes quinonas. A corrente obtida neste processo redox pode ser usada para a análise quantitativa da concentração dos fenóis na água. Neste trabalho, é proposto o uso de um biossensor modificado para a determinação de fenol. O biossensor de pasta de carbono com sílica funcionalizada foi modificado com glutaraldeído e um extrato enzimático de fungos “Pycnoporus sanguineus” como uma fonte de lacase. O efeito da pasta de carbono e da composição de electrólito, permite trabalhar com pH compreendido entre 3,0 - 8,0, e um potencial inicial entre 0,55 - 0,25mV. A velocidade de varrimento foi de 5 a 25mV s-1 e amplitude de pulso de 10 a 60mV, estudando-se na resposta voltamétrica de pulso diferencial .Uma correlação linear de R2 = 0,9946 foi obtida para o teor de fenol (catecol) na gama de concentrações de 50 a 500nMol L-1, com um limite de detecção de 30nMol L-1. Este biossensor foi utilizado para a determinação de diferentes tipos de compostos fenólicos, apresentando uma melhor resposta para o catecol.

O uso de plantas na cura de enfermidades tem sido objeto de muitos estudos e desde épocas remotas está ligado ao desenvolvimento cultural de civilizações. Estudos anteriores em espécies de Myristicaceae descrevem a ocorrência da classe de lignóides como principal metabólito secundário. Variedades de estruturas químicas e de atividades biológicas são atribuídas aos lignóides. Estes metabólitos encontram-se acumulados em todas as partes da planta, principalmente nos frutos, onde os compostos predominantes são neolignanas. O presente trabalho foi realizado com Virola molissima que se encontra dispersa na Reserva Adolpho Ducke, situada nas proximidades de Manaus-AM. Os frutos foram coletados durante o mês de novembro, estação de seca na região. Não existe registro de estudo fitoquímico desta espécie. A partir de extratos de pericarpos, arilos, tegumentos e amêndoas dos frutos da Virola molissima foram isoladas por fracionamento cromatográfico as neolignanas tetrahidrofurânica, ariltetralônica e diarilbutânica. As neolignanas isoladas foram identificadas por comparação de seus dados de Ressonância Magnética Nuclear de Hidrogênio e de Carbono Treze, com aqueles descritos na literatura. A atividade antifúngica da neolignana ariltetralônica, pura ou em mistura, foi testada contra basidiomicetos Pycnoporus sanguineus, Trametes villosa e Lenzites trabeas. Estes fungos são xilófagos e causam o apodrecimento da madeira. / The use of plants in the treatment of diseases has been object of many studies, and since remote ages, the issue is linked to the cultural development of civilizations. Previous studies on Myristicaceous species described the occurrence of lignoids as its main secondary metabolites, which are known by varieties of chemical structures and biological activities. These lignoids are accumulated in all parts of the plant, mainly in the fruits, where the major constituent are neolignans. Present work was carried out on Virola molissima dispersed in Adolpho Ducke Reserve, located around Manaus, Amazon State, Brazil. Its fruits were collected during November, a month of dry season in this region. This species has not been phytochemically studied. Tetrahydrofuran, aryltetralone and dibenzylbutane neolignans were isolated from the extracts of pericarps, arils, seed coats and seeds of V. molissima fruits, by chromatographic fractionations. The structures of the isolated neolignans were elucidated through a Nuclear comparison between Magnetic Resonance of 1Hidrogen and 13Carbon data, and those described in the literature. The antifungal activity of the aryltetralone neolignan, pure or in mixture, was assayed against basidiomycetes Pycnoporus sanguineus, Trametes villosa and Lenzites trabeas. These fungi are xylophagus and they cause the decay of the wood.

Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2017-04-13T17:31:31Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Giovana Rech.pdf: 196743 bytes, checksum: c2a7f372a48a43103520ef163e0726eb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-13T17:31:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Giovana Rech.pdf: 196743 bytes, checksum: c2a7f372a48a43103520ef163e0726eb (MD5) Previous issue date: 2017-04-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES.