Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 411954.pdf: 1943189 bytes, checksum: b8512a0b7a8966dc29fb921e76e53ab4 (MD5) Previous issue date: 2009-03-04 / Introdu??o: Os enxertos ?sseos continuam sendo utilizados com freq??ncia na resolu??o de situa??es cl?nicas com perda de subst?ncia ?ssea. A viabilidade das c?lulas ?sseas transferidas com o enxerto ? um dos fatores determinantes para as propriedades mec?nicas e fisiol?gicas do enxerto. Uma d?vida inerente ao procedimento cir?rgico quando se utiliza enxertos ?sseos vascularizados ?: ser? que o enxerto ?sseo manter? sua viabilidade atrav?s do ped?culo vascular com o decorrer do tempo? Atrav?s de um modelo experimental, almejamos criar infer?ncias sobre a viabilidade do enxerto ?sseo vascularizado da crista il?aca em ratos e verificar suas caracter?sticas histol?gicas. M?todos: Foram utilizados 23 ratos machos isog?nicos da linhagem Kyoto, os quais foram divididos em dois grupos, o primeiro composto por animais submetidos ? t?cnica do enxerto ?sseo vascularizado da crista il?aca baseado no ramo il?aco da art?ria iliolombar, e o segundo (grupo controle) submetidos ao mesmo procedimento que o primeiro com a adi??o da ligadura do ped?culo vascular. A viabilidade dos enxertos ?sseos foi verificada durante tr?s semanas, atrav?s da visualiza??o direta do enxerto, histologia e imuno-histoqu?mica. Resultados: Todos os enxertos vascularizados avaliados na primeira semana apresentaram viabilidade segundo a observa??o direta, histologia e imuno-histoqu?mica. Entretanto na segunda e terceira semana os enxertos mostraram-se invi?veis em 75% dos casos quando submetidos ? avalia??o segundo a observa??o direta e em 50% dos casos quando realizada a an?lise histol?gica e imuno-histoqu?mica. Conclus?o: Alguns enxertos vascularizados em sua concep??o tornaram-se invi?veis e passaram a se comportar como enxertos n?o-vascularizados sob a an?lise da observa??o direta e histol?gica. Apesar da possibilidade de falha, o uso de enxertos ?sseos vascularizados deve ser incentivado, pois a histologia descritiva demonstrou maior densidade celular na por??o ?ssea medular, oste?citos com maior funcionalidade na deposi??o de matriz ?ssea, com rede vascular intra-?ssea preservada.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 412278.pdf: 12034949 bytes, checksum: bfe7eb4f9da31dc0ee5ac031c3bafa5f (MD5) Previous issue date: 2009-04-02 / Introdu??o: O tratamento de elei??o para as corre??es de defeitos ?sseos ainda ? o enxerto ?sseo aut?geno. Suas principais limita??es, como o volume restrito na regi?o doadora, o p?s-operat?rio desconfort?vel nessa regi?o e a dif?cil aceita??o pelos pacientes, levaram ? busca por materiais que possam restaurar a forma e a fun??o do osso perdido com a excel?ncia do enxerto aut?geno, por?m com menos inconvenientes. O objetivo deste estudo ? comparar a porcentagem de neoforma??o ?ssea promovida pelo enxerto ?sseo aut?geno e tr?s tipos de materiais de substitui??o de caracter?sticas distintas em cavidades em f?mures de ratos. M?todos: Foram realizadas 2 cavidades de 5,4 x 2,7 mm, em cada f?mur (direito e esquerdo), de 14 ratos Wistar isog?nicos. Cada um dos 4 defeitos criados foi preenchido com o osso aut?geno ou com um dos tr?s materiais testados hidroxiapatita (HA), Genphos? (HA+ ?-TCP) e GenMix? (um enxerto ?sseo bovino composto). Ao final dos per?odos de 6 semanas (n=6) e 12 semanas (n=8), os animais foram sacrificados. As l?minas (coradas com Picro-Sirius) foram analisadas por microscopia ?tica normal e software espec?fico. Resultados: Os grupos com o osso aut?geno se mostraram muito superiores aos demais nos dois tempos analisados, tendo uma m?dia de neoforma??o ?ssea ? DP iguais a 90,6 ? 10,8 % em 6 semanas, e 98 ? 9,2 % em 12 semanas (p>0,0001 em ambos os tempos analisados). Em 6 semanas, os resultados para os demais grupos foram os seguintes: Genphos? 46 ? 7,1%, HA 43,1 ? 8,4% e GenMix? 57,3 ? 4,5%. Em 12 semanas, Genphos? 47,8 ? 11,1%, HA 39,9 ? 5,4%, GenMix? 59,7 ? 4,8 %. Discuss?o: O osso aut?geno apresentou um comportamento notadamente superior aos outros grupos nos 2 tempos analisados. Dentre os substitutos testados excetuando a compara??o HA com GemMix? em 12 semanas (p=0,007), n?o se conseguiu provar diferen?as que alcan?aram signific?ncia estat?stica. Conclus?es: Em ambos os tempos analisados, os tr?s materiais de substitui??o ?ssea testada se mostraram inferiores ao osso aut?geno na porcentagem de neoforma??o ?ssea.

Submitted by PPG Odontologia (odontologia-pg@pucrs.br) on 2018-06-27T16:07:31Z No. of bitstreams: 1 RAFAEL_DE_ARAUJO_NORONHA_DIS.pdf: 673617 bytes, checksum: 0e6162f0003c8204cabce0b4b4b0a140 (MD5) / Approved for entry into archive by Sheila Dias (sheila.dias@pucrs.br) on 2018-07-04T14:34:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RAFAEL_DE_ARAUJO_NORONHA_DIS.pdf: 673617 bytes, checksum: 0e6162f0003c8204cabce0b4b4b0a140 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-04T14:52:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RAFAEL_DE_ARAUJO_NORONHA_DIS.pdf: 673617 bytes, checksum: 0e6162f0003c8204cabce0b4b4b0a140 (MD5) Previous issue date: 2018-03-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Maxillofacial fractures of traumatic origin have a high incidence in the world population. These can be treated in different ways, ranging from conservative methods to widely invasive procedures. Among the multiple possibilities of treatment of this type of disease is the use of herbal medicines, where cannabidiol (CBD) is inserted. This is the main non-psychomimetic component of Cannabis sativa (Can-ns) and plays potent anti-inflammatory, antioxidant and analgesic effects in a variety of pathological conditions. The present dissertation is structured in the form of 2 scientific papers. The first one consists of a literature review, whose objective was to evaluate the mechanisms of action of CBD that may be involved in bone repair. The results of this study suggest that CBD is unable substance of interfering in the healing process of bone defects from its anti-inflammatory and antioxidant potential. The second is an experiment in an animal model, using 64 Wistar rats, divided into two groups (test with CBD and control). At the periods of two, four, six and eight weeks, they were evaluated clinically and histologically in the cicatricial process of mechanically induced bone defects in the skull cap of rats. It was found that the CBD exerted a beneficial effect in the fourth week after treatment where an increase in the mean of neoformed bone within the defect was observed, however, no statistically significant difference was observed in the healing process of the bone defects at the times analyzed. These results suggest the need to deepen the theme, aiming at a better understanding of the possible effects of CBD on bone metabolism and repair. / As fraturas ?sseas bucofaciais de origem traum?tica possuem uma elevada incid?ncia na popula??o mundial. Estas podem ser tratadas de distintas formas, que variam desde m?todos conservadores at? procedimentos amplamente invasivos. Dentre as m?ltiplas possibilidades de tratamento deste tipo de enfermidade, est? a utiliza??o de fitoter?picos, onde insere-se o canabidiol (CBD). Esse ? o principal componente n?o-psicomim?tico da Cannabis sativa (Can-ns) e desempenha potentes efeitos anti-inflamat?rios, antioxidantes e analg?sicos em diversas condi??es patol?gicas. A presente disserta??o est? estruturada na forma de 2 artigos cient?ficos. No primeiro foi realizada uma revis?o de literatura, cujo objetivo foi avaliar os mecanismos de a??o do CBD que possam estar envolvidos no reparo ?sseo. Os resultados deste estudo sugerem que o CBD ? uma subst?ncia capaz de interferir no processo cicatricial de defeitos ?sseos a partir do seu potencial antiinflamat?rio. O segundo trata de um experimento desenvolvido em modelo animal, utilizando 64 ratos Wistar, divididos randomicamente em 2 grupos (teste com CBD e controle). Avaliou-se cl?nica e histologicamente o efeito da administra??o intraperitoneal do CBD, na dose de 10 mg/kg/dia, por duas, 4, 6 e 8 semanas, no processo cicatricial de defeitos ?sseos mecanicamente induzidos em calota craniana de ratos. Constatou-se que o CDB exerceu um efeito ben?fico na quarta semana p?s tratamento onde observou-se um aumento na m?dia de osso neoformado no interior do defeito. Contudo n?o foi observada diferen?a estatisticamente significativa no processo cicatricial dos defeitos ?sseos nos tempos analisados. Estes resultados sugerem a necessidade de aprofundar o tema, visando uma melhor compreens?o sobre poss?veis efeitos do uso do CBD no metabolismo e reparo ?sseo.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 423502.pdf: 5239440 bytes, checksum: 32e82b4251252353febf2ca10f052662 (MD5) Previous issue date: 2009-09-30 / Esta pesquisa teve como objetivo avaliar, por m?todos histol?gicos, tomogr?ficos e f?sicos, o efeito do laser de baixa pot?ncia (LLLT 830 nm) no osso neoformado em mand?bulas de coelhos submetidas ? fratura, sem ou com distra??o osteog?nica (DO). Foram utilizados 10 coelhos para as an?lises histol?gicas (quatro para o grupo controle e seis para o experimental) al?m de cinco coelhos para as an?lises tomogr?ficas e f?sicas (um n?ofraturado, n?o-distra?do e sem irradia??o laser; um fraturado, n?o-distra?do e sem irradia??o laser; um fraturado, n?o-distra?do e com irradia??o laser; um fraturado, distra?do e sem irradia??o laser; um fraturado, distra?do e com irradia??o laser). Para os coelhos que sofreram alongamento ?sseo por DO foi adotado o seguinte protocolo: lat?ncia tr?s dias, ativa??o sete dias 0,7mm/d, e consolida??o 10 dias. Para os animais irradiados, utilizou-se o laser infravermelho (GaAl)As (J=830 nm, 40 mW) com o seguinte protocolo: dose pontual de 10 J/cm2, diretamente sobre o s?tio ?sseo submetido ? fratura e/ou DO, no per?odo de consolida??o ?ssea, respeitando-se intervalos de 48 horas. O percentual do osso neoformado foi maior no grupo com laser (57,89%) do que no controle (46,75%), p=0,006, conforme observado na an?lise histol?gica. A an?lise tomogr?fica revelou aumento da densidade, medida em Unidades Hounsfield (HU), dos ossos fraturados que foram irradiados com laser. Com rela??o ?s propriedades f?sicas, pareceu n?o haver grandes diferen?as entre os grupos que sofreram fratura. Nos ossos submetidos ? DO, o laser n?o promoveu altera??o da nanodureza, mas modificou os valores do m?dulo de elasticidade, na amostra estudada.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 435511.pdf: 4163986 bytes, checksum: 37629882e85d83ed66d26ed9bed14b82 (MD5) Previous issue date: 2011-10-26 / In order to accelerate and improve the quality of the osseointegration process has recently been given emphasis to growth factors. Thus, this thesis was aimed to evaluate the use of growth hormone (GH) on osseointegration of titanium implants. This thesis is composed of two papers, the first chapter is a review of literature on the use of growth factors, and, in particular GH in the process of bone repair. The second chapter is an experimental study to evaluate the topical use of rhGH in the osseointegration of nanotexturized titanium implants inserted in the tibia of rabbits. We used 14 animals randomly divided into rhGH-treated group and control group. In the rhGH-treated group was administered 1 IU of rhGH in surgical defect immediately before the placement of each implant. In the control group was not used rhGH. Each animal received two implants in the left tibia. The animals were sacrificed at 14 and 42 days after surgery. The peri-implant regions were avaluated by transmission and reflection on optical microscopy (OM), to pull out biomechanical testing of implants and scanning electron microscopy (SEM). In all analyzes the rhGH-treated groups showed better performance than the control groups, especially at 14 days. MO at 14 days in the rhGH-treated group have histological characteristics of proliferative repair phase with new bone formation and also marked cortical reaction from the endosteum and periosteum and at 42 days, the bone tissue has a lamellar appearance. The control group at 14 days also has characteristics of the inflammatory and moderate proliferative new bone formation, and with 42 days the new bone does not have lamellar characteristics. In the pull-out testing of the rhGH-treated group showed tension of 59.26N/cm2 and 29.69 N/cm2 at 14 and 42 days respectively. The control group showed tension of 33.88 N/cm2 and 25.99 N/cm2 respectively. The implants analyzed in the SEM showed in the rhGH-treated group at 14 days greater amount of bone attached, but at 42 days there were no differences between groups. The findings in this experiment corroborate the literature, which observed that rhGH increases the speed and amount of newly peri-implanted bone, especially in the early stages of bone repair. Thus, this thesis concludes that topical application of rhGH in the region peri-implant area induces new bone formation. / Com o intuito de acelerar e melhorar a qualidade do processo de osseointegra??o, recentemente tem sido dado ?nfase aos fatores de crescimento. Logo, foi objetivo dessa Tese avaliar o emprego do horm?nio do crescimento (GH) na osseointegra??o de implantes de tit?nio. Esse trabalho ? composto de dois artigos, o primeiro artigo ? uma revis?o de literatura sobre o emprego dos fatores de crescimento, e, em especial o GH, no processo de reparo do tecido ?sseo. O segundo artigo ? um estudo experimental no qual se avaliou o uso t?pico do rhGH no processo de osseointegra??o de implantes de tit?nio nanotexturizados inseridos na t?bia de coelhos. Foram utilizados 14 animais divididos aleatoriamente em grupo teste e controle. No grupo teste foi aplicado 1 IU de rhGH no defeito cir?rgico imediatamente antes da coloca??o de cada implante. No grupo controle n?o foi aplicado o rhGH. Cada animal recebeu 2 implantes na t?bia esquerda. Os animais foram sacrificados em 14 e 42 dias depois da cirurgia. As regi?es periimplantares foram submetidas ? microscopia ?ptica (MO) de transmiss?o e de reflex?o, e os implantes ao ensaio biomec?nico de pull out e a microscopia eletr?nica de varredura (MEV). Em todas as an?lises realizadas o grupo teste apresentou desempenho superior ao controle, principalmente aos 14 dias. Na MO aos 14 dias o grupo teste possu?a caracter?sticas histol?gicas da fase proliferativa do reparo com acentuada neoforma??o ?ssea e tamb?m a forma??o de uma esp?cie de calo ?sseo sobre a cortical ?ssea externa, e aos 42 dias o tecido ?sseo possu?a aspecto lamelar. O grupo controle aos 14 dias possu?a ainda caracter?sticas da fase inflamat?ria e proliferativa com moderada neoforma??o ?ssea, e aos 42 dias o tecido ?sseo neoformado ainda n?o possu?a caracter?sticas lamelares. No ensaio de pull-out o grupo teste apresentou tens?o de 59,26 N/cm2 e 29,69 N/cm2 aos 14 e 42 dias respectivamente, enquanto o grupo controle apresentou tens?o de 33,88 N/cm2 e 25,99 N/cm2 aos 14 e 42 dias, respectivamente. Os implantes analisados no MEV demonstraram no grupo teste aos 14 dias maior quantidade de tecido ?sseo aderido, por?m aos 42 dias n?o se observaram diferen?as entre os grupos. Os achados no experimento corroboram com a literatura, em que se observa que o rhGH aumenta a velocidade e quantidade de osso periimplantar neoformado, principalmente em est?gios iniciais do reparo ?sseo. Com base na revis?o de literatura pesquisada e com os resultados do presente experimento, conclue-se que a aplica??o t?pica de rhGH na regi?o periimplantar acelera o processo de neoforma??o ?ssea. O grupo controle aos 14 dias possu?a ainda caracter?sticas da fase inflamat?ria e proliferativa com moderada neoforma??o ?ssea, e aos 42 dias o tecido ?sseo neoformado ainda n?o possu?a caracter?sticas lamelares. No ensaio de pull-out o grupo teste apresentou tens?o de 59,26 N/cm2 e 29,69 N/cm2 aos 14 e 42 dias respectivamente, enquanto o grupo controle apresentou tens?o de 33,88 N/cm2 e 25,99 N/cm2 aos 14 e 42 dias, respectivamente. Os implantes analisados no MEV demonstraram no grupo teste aos 14 dias maior quantidade de tecido ?sseo aderido, por?m aos 42 dias n?o se observaram diferen?as entre os grupos. Os achados no experimento corroboram com a literatura, em que se observa que o rhGH aumenta a velocidade e quantidade de osso periimplantar neoformado, principalmente em est?gios iniciais do reparo ?sseo. Com base na revis?o de literatura pesquisada e com os resultados do presente experimento, conclue-se que a aplica??o t?pica de rhGH na regi?o periimplantar acelera o processo de neoforma??o ?ssea.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 464699.pdf: 3304843 bytes, checksum: 1c2d736171549331a5af746072affda0 (MD5) Previous issue date: 2014-11-26 / Mesenchymal stem cells hold great promise for tissues repair and regeneration, including bone defects. The association of these cells to a scaffold which resembles bone tissue structure and physiology is a major challenge in bone tissue engineering. The lyophilized bovine bone has a structure, chemical composition and mechanical properties similar to human bone marrow and acts as an excellent osteoconductive material. This in vitro study aimed to evaluate the growth of bone marrow mononuclear cells (BMMC) on a lyophilized bovine bone scaffold (Orthogen? - Baumer S.A., BR) covered with fibronectin; to verify if different cell densities interfere with the adhesion and proliferation of these cells and to evaluate whether the combination of platelet-rich plasma (PRP) interferes with adhesion and proliferation of BMMC grown on the lyophilized bovine bone scaffold. For this purpose, bone marrow cells obtained from a Kyoto rat were grown on blocks of lyophilized bovine bone coated with fibronectin in DMEM culture medium supplemented with 10% inactivated fetal bovine serum. The Orthogen? samples were distributed into four experimental groups, in triplicate, in three 24 wells culture plates and evaluated in three periods: 72 h, 96 h and 192 h. Group 1: lyophilized bovine bone + BMMC (5 x 104 cells / well); Group 2: lyophilized bovine bone + BMMC + PRP; Group 3: lyophilized bovine bone + fibroblasts (3T3); Group 4: lyophilized bovine bone + BMMC (15 x 104 cells / well). Cultures were incubated with the intercalating agent 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) for nuclear staining in order to evaluate the cell population density, by detection with confocal microscopy, of the number of cells adhered to the lyophilized bovine bone scaffolds, after 72 h, 96 h and 192 h. The analysis of the lyophilized bovine bone surface and the morphological aspects of the cells adhered to it was performed on one sample from each group, by scanning electron microscopy (SEM). Analysis of variance (ANOVA) with two factors showed a significant interaction between the main effects evaluated: group and time, with p < 0.001. Through the results of Bonferroni statistical test, significant difference was found in the average number of nuclei in the period of culture of 96 h in group 3, and the period of culture of 192 h in group 4, which was higher than the other groups. Through SEM analysis, mononuclear cells adhered to the lyophilized bovine bone scaffold were observed only in the groups 3 and 4, in the last, progressively, being already possible to observe cell morphology differentiation and to identify spherical and fusiform cells with cytoplasmic extensions. We concluded that BMMC cultured on a lyophilized bovine bone scaffold coated with fibronectin adhered and proliferated on the bone surface. BMMC cultured at a density of 15 x 104 cells / well, adhered and proliferated on the bone surface more evidently, when compared to the BMMC cultured at a density 5 x 104 cells / well, in the three culture periods evaluated. The association of PRP to BMMC culture on a lyophilized bovine bone scaffold increased, but not with statistical significance, the adhesion and proliferation on the bone surface. / As c?lulas-tronco mesenquimais det?m grande promessa para a repara??o e regenera??o de tecidos, inclusive de defeitos ?sseos. A associa??o destas c?lulas a um arcabou?o que se assemelhe ? estrutura e ? fisiologia do tecido ?sseo ? um dos grandes desafios da engenharia tecidual ?ssea. O osso bovino liofilizado, com estrutura e composi??o qu?mica similares ao osso humano medular, al?m de possuir propriedades mec?nicas compar?veis ?s do osso humano, atua como excelente material osteocondutor. O presente estudo in vitro teve como objetivos avaliar o cultivo de c?lulas mononucleares de medula ?ssea (CMMO) sobre um arcabou?o de osso bovino liofilizado (OrthoGen? - Baumer S.A., BR) recoberto com fibronectina; verificar se diferentes densidades celulares interferem na prolifera??o e na ades?o destas c?lulas e avaliar se a associa??o de plasma rico em plaquetas (PRP) interfere na ades?o e na prolifera??o das CMMO cultivadas sobre o arcabou?o de osso bovino liofilizado. Para isso, c?lulas da medula ?ssea obtidas de um rato Kyoto foram cultivadas sobre blocos de osso bovino liofilizado, recobertos com fibronectina, em meio de cultura DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino inativado. As amostras do OrthoGen? foram distribu?das em quatro grupos experimentais, em triplicata, em tr?s placas de cultura com 24 po?os e avaliadas em tr?s per?odos: 72 h, 96 h e 192 h. Grupo 1: osso bovino liofilizado + CMMO (5 x 104 c?lulas/po?o); Grupo 2: osso bovino liofilizado + CMMO + PRP; Grupo 3: osso bovino liofilizado + fibroblastos (3T3); Grupo 4: osso bovino liofilizado + CMMO (15 x 104 c?lulas/po?o). As culturas foram incubadas com o agente intercalante 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) para colora??o nuclear visando ? avalia??o de densidade populacional, por meio da detec??o por microscopia confocal, do n?mero de c?lulas aderidas aos arcabou?os de osso bovino liofilizado, ap?s 72 h, 96 h e 192 h. A an?lise da superf?cie do osso bovino liofilizado e das caracter?sticas morfol?gicas das c?lulas aderidas sobre ele o foram realizadas em uma amostra de cada grupo, com o aux?lio do microsc?pio eletr?nico de varredura. A an?lise de vari?ncia (ANOVA) com dois fatores mostrou intera??o significativa entre os efeitos principais avaliados: grupo e tempo, com valor de p < 0,001. Atrav?s dos resultados do teste estat?stico de Bonferroni, verificou-se diferen?a significativa da m?dia de n?cleos no per?odo de cultura de 96 h no grupo 3, e no per?odo de cultura de 192 h no grupo 4, a qual foi maior do que as dos demais grupos. Atrav?s da an?lise por microscopia eletr?nica de varredura foram observadas CMMO aderidas ao arcabou?o de osso bovino liofilizado somente no grupo 3 e no grupo 4, neste aumentando de forma progressiva, j? sendo poss?vel evidenciar diferencia??o na morfologia celular e identificar c?lulas esf?ricas e fusiformes com prolongamentos citoplasm?ticos. Conclui-se que as CMMO cultivadas sobre um arcabou?o de osso bovino liofilizado recoberto com fibronectina aderiram e proliferaram sobre a superf?cie ?ssea. As CMMO cultivadas numa densidade de 15 x 104 c?lulas / po?o, aderiram e proliferaram sobre a superf?cie ?ssea de forma mais evidente, quando comparadas ?s CMMO cultivadas numa densidade 5 x 104 c?lulas / po?o, nos tr?s per?odos de cultura avaliados. A associa??o de PRP ? cultura de CMMO sobre um arcabou?o de osso bovino liofilizado aumentou, mas n?o de forma estatisticamente significativa, a ades?o e a prolifera??o celular sobre a superf?cie ?ssea.

Submitted by PPG Odontologia (odontologia-pg@pucrs.br) on 2018-06-04T18:05:30Z No. of bitstreams: 1 NATALIA_PRADELLA_CIGNACHI_TES.pdf: 6840858 bytes, checksum: 8e5f3ae6a98395bf09135b6770903f35 (MD5) / Rejected by Sheila Dias (sheila.dias@pucrs.br), reason: Devolvido devido ? falta da capa institucional no arquivo em PDF. on 2018-06-14T14:34:13Z (GMT) / Submitted by PPG Odontologia (odontologia-pg@pucrs.br) on 2018-06-19T13:28:41Z No. of bitstreams: 1 NAT?LIA_PREDELLA_CIGNACHI_TES.pdf: 11102267 bytes, checksum: 121fbf4d2b9ae1c4a36e21d23ab3140d (MD5) / Approved for entry into archive by Sheila Dias (sheila.dias@pucrs.br) on 2018-06-27T14:32:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 NAT?LIA_PREDELLA_CIGNACHI_TES.pdf: 11102267 bytes, checksum: 121fbf4d2b9ae1c4a36e21d23ab3140d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-27T14:43:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 NAT?LIA_PREDELLA_CIGNACHI_TES.pdf: 11102267 bytes, checksum: 121fbf4d2b9ae1c4a36e21d23ab3140d (MD5) Previous issue date: 2018-01-25 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / This thesis encompasses two parts: firstly, we compared the bone healing in female and male mice, after induction of type 1 diabetes (T1D); secondly, the bone regeneration was evaluated in a menopause model induced by bilateral ovariectomy (OVX), with or without T1D induction. For the part I, the animals (female and male) were initially assigned into two groups, namely control or T1D (elicited by streptozotocin; STZ). In the part II, the females were divided into four experimental groups: sham-operated or OVX, with or without STZ T1D induction. After T1D induction, a monocortical femoral defect was created. In either parts of the present study, we evaluated the effects of supplementation with vitamin D3 and/or insulin. In the second part, the effects of estrogen replacement were also analyzed. Following 21 days of bone defect creation, the animals were euthanized; the femurs and blood were collected for posterior analysis. Both T1D females and males presented a reduction in body weight gain, associated with hyperglycemia. There were no changes in the serum levels of the pro-inflammatory cytokines [interleukin-1? (IL-1?), tumor necrosis factor (TNF) and interferon-? (IFN-?)] in all the evaluated groups. T1D mice of both sexes presented a delayed bone regeneration, according to the histological and micro-CT assessment. The supplementation with vitamin D3 restored the bone healing in female and male T1D mice, reaching values close to controls. The insulin therapy improved the bone remodeling in T1D mice of both sexes, but the effects of this hormone were superior in males. The evaluation of osteoclast activity did not reveal significant differences among the experimental groups. Real time PCR revealed slight differences in the mRNA expression of two transcription factors related to osteoblast differentiation, namely runx2 and osterix, as measured in the area into the bone defect. A higher upregulation of both factors was seen in T1D males treated with vitamin D3. Conversely, vitamin D3-treated T1D females displayed an upregulation of insulin-like growth factor 1 (IGF-1), further indication sex-related differences for the treatments. Besides the experimental protocols described for the 12 part I of this thesis, in the part II, we also evaluated some behavioral locomotor parameters and serum levels of calcium and alkaline phosphatase. OVX animals presented increased body weight gain, accompanied by uterus atrophy. Otherwise, T1D induction elicited a reduction of body weight gain, which was more pronounced in OVX-T1D animals. Serum levels of alkaline phosphatase were divergent in the non-diabetic and T1D OVX animals. Calcium or cytokine levels were similar in all the experimental groups. The sham-operated T1D, the non-diabetic OVX and the OVX-T1D groups presented a delayed bone regeneration, as indicated by histological and micro-CT analysis. Estrogen replacement improved the bone healing in all OVX groups. There was a trend toward an upregulation of IGF-1 mRNA in non-diabetic OVX animals, which was not mirrored in OVX-T1D mice. Locomotor parameters remained unaltered, except by a general reduction of rearing numbers in T1D animals. / A presente tese est? dividida em duas partes: na parte I, comparou-se a regenera??o ?ssea em camundongos f?meas e machos, com diabetes do tipo 1 (T1D). Na parte II, foi avaliada a regenera??o ?ssea no modelo de menopausa experimental induzido por ovariectomia (OVX), com ou sem T1D. Na parte I, os animais (machos e f?meas) foram divididos em dois grandes grupos: controle e T1D (induzido por estreptozotocina; STZ). Na parte II, os animais foram divididos em quatro grandes grupos: f?meas falso-operadas e OVX, com ou sem T1D. Ap?s a indu??o do T1D, foi criado um defeito ?sseo monocortical no f?mur. Nas duas partes do trabalho, foram avaliados os efeitos da suplementa??o com vitamina D3 e/ou insulina. Na segunda parte, tamb?m se avaliou o efeito da reposi??o hormonal com estradiol. Decorridos 21 dias do procedimento da cria??o do defeito, os animais foram eutanasiados; o f?mur e o sangue foram coletados para an?lises posteriores. Tanto as f?meas, quanto os machos T1D, apresentaram uma redu??o do ganho de peso corporal, associado ? hiperglicemia. N?o houve altera??es nos n?veis s?ricos das citocinas pr?-inflamat?rias interleucina-1? (IL-1?), fator de necrose tumoral (TNF) ou interferon-? (IFN?). Os animais T1D, de ambos os sexos, apresentaram um comprometimento na regenera??o ?ssea, como demonstrado pelas an?lises histol?gicas e de micro-CT. A suplementa??o com vitamina D3 reestabeleceu a regenera??o ?ssea em f?meas e machos T1D, apresentando valores pr?ximos aos encontrados nos animais do grupo controle. A terapia com insulina melhorou a remodela??o ?ssea nas f?meas e machos T1D; por?m, os efeitos foram mais pronunciados nos machos. A avalia??o da atividade osteocl?stica n?o revelou diferen?as significativas entre os grupos experimentais, ap?s a indu??o de T1D, em machos ou f?meas. Os resultados do PCR em tempo real para runx2 e osterix (dois fatores de transcri??o relacionados aos osteoblastos), no tecido ?sseo, n?o demonstraram nenhuma diferen?a significativa, exceto por um aumento nos n?veis de RNAm dos dois fatores nos camundongos machos T1D, que receberam suplementa??o com vitamina 10 D3. Por outro lado, f?meas T1D que receberam vitamina D3 apresentaram um aumento na express?o dos n?veis de RNAm para o fator de crescimento semelhante ? insulina do tipo 1 (IGF-1), quando comparado com os machos que tiveram o mesmo tratamento, sugerindo assim, diferen?as relacionadas ao sexo. Al?m das an?lises j? mencionadas anteriormente, na parte II da tese, par?metros comportamentais e n?veis s?ricos de c?lcio e fosfatase alcalina tamb?m foram analisados. Os resultados da segunda parte do trabalho demonstraram que os animais submetidos a OVX tiveram um aumento do peso corporal, com atrofia uterina. Em contrapartida, quando foi induzido T1D, houve uma diminui??o do peso corporal mais acentuada no grupo OVX que no grupo falso-operado. Os animais falso-operados e OVX T1D apresentaram hiperglicemia, confirmando o desenvolvimento do diabetes. Os n?veis s?ricos de fosfatase alcalina foram divergentes entre os grupos n?o-diab?ticos OVX e OVX T1D. N?o houve varia??es dos n?veis de c?lcio. Os animais falso-operados T1D, n?o diab?ticos OVX e OVX T1D apresentaram preju?zos similares na regenera??o ?ssea, como observado pelas an?lises histol?gicas e imagens de micro-CT. A reposi??o com estradiol melhorou a cicatriza??o ?ssea nos animais n?o-diab?ticos OVX e OVX T1D. Houve uma tend?ncia ao aumento nos n?veis de RNAm de IGF-1 no grupo OVX, o que n?o foi observado quando da associa??o de T1D e menopausa. N?o foram observadas diferen?as na atividade locomotora dos animais com T1D e/ou OVX, a n?o ser por uma diminui??o no n?mero de rearings no grupo falso-operado T1D, independente do tratamento com vitamina D3, insulina e estradiol, de forma isolada ou em associa??o.

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