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Avaliação histomorfométrica, imunoistoquímica e microtomográfica da ação da terapia laser de baixa potência no processo de reabsorção radicular durante movimentação ortodôntica induzida em ratos / Histomorphometric, immunohistochemistry and microtomography evaluation of the effect of low level laser therapy in root reabsorption process during orthodontic movement induced in rats

Suzuki, Selly Sayuri 01 June 2016 (has links)
A movimentação dentária induzida é um processo biológico complexo mediado por estímulos mecânicos, levando a um subsequente processo de remodelação óssea, podendo haver reabsorção indesejada da raiz dentária provocada pelo excesso de força. Uma vez que a movimentação ortodôntica se baseia em um processo inflamatório localizado, o propósito deste estudo foi avaliar os efeitos do laser de baixa potência no processo de remodelação óssea e reabsorção radicular, buscando correlacionar as mudanças metabólicas observadas a nível celular ocorridas nos dias iniciais da movimentação dentária às alterações teciduais observadas microscopicamente e à arquitetura e morfologia do trabeculado e cortical ósseo. Primeiros molares de sessenta e oito ratos machos Wistar foram submetidos à movimentação induzida, divididos em 3 grupos: controle negativo (nenhuma movimentação), não irradiado (movimentação sem irradiação) e laser (movimentação e irradiação com laser de baixa potência de comprimento de onda de 810 nm, potência de 100 mW, área de 0,02cm2 e energia de 1,5 J/ponto) e eutanasiados nos dias 3, 6, 9, 14 e 21. Mensurações da movimentação dentária e análises histomorfométricas foram realizadas em todos os dias estudados. Análise imunoistoquímica dos marcadores RANKL, OPG e TRAP e avaliações por microscopia eletrônica de varredura (MEV) foram feitas nos dias 3, 6 e 9 e o ensaio Western Blotting para proteínas RANKL e SOFAT e imagens de microtomografia computadorizada (MicroCT) nos dias 14 e 21. Os resultados deste estudo mostraram que a movimentação dentária foi significantemente maior no grupo Laser (aumento em média de 40%) em todos os dias avaliados. O lado de compressão mostrou maior expressão de RANKL e osteoclastos TRAP-positivos nos dias 3, 6 e 9 (p<0,05), promovendo significativa redução na área de osso alveolar presente no lado de compressão nos dias 6, 9 e 14 (p<0,05), e alterações microestruturais, como menor fração de volume ósseo/volume total, menor densidade óssea mineral aos 14 dias. A irradiação com laser também aumentou a expressão de RANKL e a citocina SOFAT no dia 14. No lado de tensão, houve maior expressão de OPG especialmente aos 9 dias (p<0,001) e significativo aumento na área de osso alveolar presente nos dias 14 (p<0,01) e 21 (p<0,05) histomorfometricamente e maior densidade óssea mineral e espessura das trabéculas aos 21 dias (p<0,01). Com relação às áreas de hialinização presentes, os resultados mostraram áreas significantemente reduzidas nos dias 3, 6 e 9 nos grupos irradiados, o que explica o menor número de odontoclastos na superfície radicular nestes dias e a redução significante das áreas de reabsorção radicular observadas nas lâminas histológicas nos dias 9, 14 e 21 e nas imagens de MEV nos dias 3 e 9. Os grupos irradiados também mostraram menor volume das lacunas de reabsorção radicular medidas no MicroCT nos dias 14 e 21, especialmente nos lados de compressão. O estudo concluiu que o laser de baixa potência influenciou a remodelação óssea, aumentou a atividade dos osteoclastos no lado da compressão, e estimulou a formação óssea no de tensão, acelerando significativamente o movimento dentário e potencialmente reduzindo as áreas de necrose no ligamento periodontal e, consequentemente, a reabsorção radicular. / Tooth movement is a complex biological process induced by mechanical stimulation, leading to a subsequent process of bone remodeling, concomitantly unwanted root resorption may occur caused by excessive force. Since orthodontic movement is based on a localized inflammatory process, the purpose of this study was to evaluate the effects of low-level laser therapy on the process of bone remodeling and root resorption, searching to correlate metabolic changes observed at cellular level in the initial days of tooth movement to tissue changes observed microscopically and both architecture and morphology of trabecular and cortical bone. Upper first molars of sixtyeight male Wistar rats were submitted to induced movement, divided into 3 groups: negative control (no movement), non-irradiated (movement without irradiation) and Laser (movement and irradiation using low level laser of 810 nm wavelength, 100 mW power, 0.02cm2 area, energy of 1.5J/point) and euthanized on days 3, 6, 9, 14 and 21. Measurements of tooth movement and histomorphometric analysis were performed at all days. Immunohistochemistry analysis of RANKL, OPG and TRAP markers and scanning electron microscopy (SEM) were made on days 3, 6 and 9. Western Blotting method to evaluate RANKL and SOFAT proteins and MicroCT images were performed on days 14 and 21. The results of this study showed that tooth movement was significantly greater in the irradiated side (increased in average of 40%) in all evaluated days. The compression side showed higher expression of RANKL and TRAP-positive osteoclasts on days 3, 6 and 9 (p <0.05), promoting significant reduction in alveolar bone area in the compression side on days 6, 9 and 14 ( p <0.05), and leading to microstructural changes such as decrease of the fraction of bone volume / total volume (BV/TV) and the bone mineral density (BMD) at 14 days. The laser also increased RANKL expression and SOFAT on day 14. On the tension side there was an increased expression of OPG especially after 9 days (p <0.001), a significant increase in alveolar bone area on days 14 (p < 0.01) and 21 (p <0.05) histomorphometrically and increase in bone mineral density and trabecular thickness after 21 days (p <0.01). Regarding hyalinized areas, the results showed significant reduced areas on days 3, 6 and 9 in irradiated groups, which explains the lower number of clastic cells on the root surface in these days, and a significant reduction of areas of root resorption observed in histology on days 9, 14 and 21 and on days 3 and 9 by SEM images. Irradiated groups also showed less volume of root resorption lacunaes measured by MicroCT on days 14 and 21, especially in the compression side. The study concludes that the low-level laser therapy had an effect on bone remodeling, increasing osteoclast activity on the compression side, and stimulating bone formation in tension side, resulting in significant tooth movement acceleration and potentially reducing the areas of necrosis in the periodontal ligament and consequently the root resorption process.
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Avaliação microscópica do efeito tópico do alendronato e do fluoreto de sódio na superfície radicular de dentes de ratos extraídos e reimplantados tardiamente / Microscopic analysis of the topical effect of alendronate and sodium fluoride on the root surface of extracted and delayed replanted rats\' teeth

Pereira, Adriana Lustosa 07 August 2009 (has links)
O tratamento de escolha para a avulsão dentária é o reimplante. Quando este é realizado tardiamente o tratamento da superfície radicular deve ser instituído com o objetivo de prevenir a reabsorção radicular. O objetivo deste trabalho foi comparar o efeito tópico das soluções de alendronato de sódio e de fluoreto de sódio no tratamento da superfície radicular em reimplantes tardios de dentes de ratos. Foram utilizados 72 incisivos superiores direitos extraídos e reimplantados. No grupo I, após o período extra-alveolar a seco de 60 minutos, fez-se o preenchimento do canal radicular com pasta de hidróxido de cálcio (CALEN®) e o reimplante. Nos grupos II, III e IV, após o período extra-alveolar a seco de 60 minutos, procedeu-se o tratamento da superfície radicular. No grupo II, os dentes foram imersos em solução de ácido cítrico pH 1,0 por 5 minutos, lavados em soro fisiológico por 5 minutos e mantidos em solução de fluoreto de sódio a 2% pH 5,5 por 20 minutos. No grupo III, os dentes foram imersos em solução de ácido cítrico pH 1,0 por 5 minutos, lavados em soro fisiológico por 5 minutos e mantidos em solução de alendronato de sódio a 3,2 mg/l por 10 minutos. No grupo IV, os dentes foram imersos em solução de hipoclorito de sódio a 1% por 30 minutos, lavados em soro fisiológico por 5 minutos e mantidos em solução de alendronato de sódio a 3,2 mg/l por 10 minutos. Os canais radiculares dos dentes dos grupos II, III e IV foram preenchidos com pasta de hidróxido de cálcio (CALEN®) e reimplantados. Transcorridos os períodos de 30, 90 e 120 dias do reimplante, os animais foram mortos, as peças obtidas e processadas em laboratório para análise microscópica. Os resultados mostraram que nenhum dos tratamentos foi capaz de evitar a anquilose; o tratamento com ácido cítrico e alendronato e ácido cítrico e fluoreto de sódio não evitou a ocorrência de reabsorções inflamatórias intensas; o tratamento com ácido cítrico e alendronato apresentou áreas mais intensas de reabsorção por substituição que o tratamento com hipoclorito de sódio e alendronato e não se observou reabsorções moderadas nem intensas no grupo tratado com hipoclorito de sódio e alendronato. / The treatment of choice for tooth avulsion is replantation. When this is done later, the treatment of root surface should be established with the objective to prevent root resorption. The objective of this research was to compare the topical effect of solutions of sodium alendronate and sodium fluoride in the treatment of root surface in delayed tooth replantations of rats teeth. It was used 72 rat maxillary right central incisors extracted and replanted. In group I, after the dry extra-alveolar period of 60 minutes, it was done the filling of the root canal with calcium hydroxide paste (CALEN®) and replantation. In the groups II, III and IV, after the dry extra-alveolar period of 60 minutes, it was proceeded the treatment of the root surface. In the group II, the teeth were immersed in citric acid solution pH 1.0 for 5 minutes, saline solution for 5 minutes and sodium fluoride at 2% pH 5.5 for 20 minutes. In the group III, the teeth were immersed in citric acid solution pH 1.0 for 5 minutes, saline solution for 5 minutes and sodium alendronate at 3.2 mg/l for 10 minutes. In the group IV, the teeth were immersed in sodium hypochlorite at 1% for 30 minutes, saline solution for 5 minutes and solution of sodium alendronate at 3.2 mg/l for 10 minutes. The root canals in the groups II, III and IV were filled with calcium hydroxide paste (CALEN®) and replantated. Passed the periods of 30, 90 and 120 days of the replantation, the animals were killed, samples obtained and processed in the laboratory for microscopic analysis. The results showed that none of the treatments was able to avoid ankylosis; treatment with citric acid and alendronate and citric acid and sodium fluoride did not prevent the occurrence of intense inflammatory resorption, the treatment with citric acid and alendronate showed more intense areas of replacement resorption than the treatment with sodium hypochlorite and alendronate, and it was not observed moderate or intense resorptions in the group treated with sodium hypochlorite and alendronate.
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Estudo comparativo entre as ações do nimesulida, arnica montana homeopática e arnica montana fitoterápica - possíveis aplicações na terapêutica da doença periodontal e na rotina do consultório odontológico / Comparative study of the actions of nimesulide, homeopathic arnica montana and arnica montana phytotherapic - possible applications in the treatment of periodontal disease and routine dental office

Cabresté, Adriana 02 October 2015 (has links)
Trata-se de estudo comparativo para avaliar a atividade dos medicamentos nimesulida, Arnica TM, Arnica 6CH comparados com H2O no tratamento da Doença Periodontal experimental induzida por ligadura em ratos. Esta doença se caracteriza por processo inflamatório que pode evoluir até ao ligamento periodontal e tecido ósseo provocando perda óssea. Mediadores produzidos pelo hospedeiro e substâncias do biofilme são responsáveis pelos danos que podem levar até a perda do elemento dentário. O objetivo deste trabalho foi desenvolver estudo exploratório descritivo para analisar, aprofundar e comparar os efeitos das medicações citadas, investigando possíveis inovações no tratamento da doença periodontal. A metodologia consistiu em: 1) colocação, sob anestesia, da ligadura no primeiro molar inferior esquerdo. 2) administração diária por gavagem de H2O (controle) (1&#x3BC;l/g), nimesulida (1&#x3BC;l/g, de uma suspensão com 5mg/ml), Arnica TM (8&#x3BC;l/300g) ou Arnica 6CH (3,21&#x3BC;l/300g) durante 14, 21 e 28 dias a quatro grupos de ratos Wistar (n=30/ grupo); 3) eutanásia e coleta de material para análises histológica, da perda óssea e RT-PCR (alvos: TNF-&#x3B1;, COX-2, IL-6, OPG e RANKL); 4) análise estatística paramétrica realizada por ANOVA a um ou dois critérios, seguida do teste de Tukey, ou por análise não paramétrica por Kruskal-Wallis, seguido do método de Dunns, nível de significância de 5%. Quanto à perda óssea, não houve diferença estatística entre os grupos e nenhum dos tratamentos foi capaz de contê-la. Os escores para o infiltrado inflamatório não mostraram diferença significativa entre os grupos nos períodos estudados. Quanto ao escore geral, que envolve intensidade do infiltrado inflamatório, migração do epitélio juncional, integridade do cemento e da crista óssea alveolar, não houve diferença significativa entre os grupos nos períodos. Na expressão do RNAm para as citocinas vimos para o TNF-&#x3B1; não haver diferença significativa entre os grupos, quando se analisou isoladamente os períodos de 14 e 28 dias. No entanto, no período de 21 dias, houve redução significativa no grupo nimesulida comparado ao grupo Arnica 6CH (&#x2217;p<0,05). Para a COX-2, não houve diferença significativa quanto à expressão do RNAm entre os grupos, analisando isoladamente cada período de estudo, sendo nítida a redução desta expressão no grupo Arnica 6CH em todos os períodos; para a IL-6, OPG e RANKL não houve diferença significativa quanto à expressão do RNAm entre os grupos nos períodos estudados. No entanto, no grupo Arnica 6CH nota-se tendência nítida para o aumento da expressão do RNAm para OPG, ao longo do tempo. Comparando com o grupo H2O a ação de cada medicamento quanto à expressão do RNAm para todas as citocinas, considerando o conjunto dos 3 períodos, vê-se redução significativa para a expressão de RNAm para COX-2 e RANKL após o tratamento com Arnica 6CH (&#x2217;p<0,05). O mesmo pode ser visto para a nimesulida quando se estuda a expressão do RNAm para RANKL (&#x2217;p<0,05). No estudo ficaram destacados os efeitos biológicos da Arnica 6CH sobre a leitura e transcrição do DNA, notadamente sobre genes relacionados à perda óssea, o que vislumbra a possibilidade de sua utilização terapêutica. / This is a comparative study to evaluate the activity of nimesulide medicines, Arnica TM, Arnica 6CH compared with H2O in the treatment of experimental periodontal disease induced by ligation in rats. This disease is characterized by an inflammatory process that may progress to the periodontal ligament and bone tissue leading to bone loss. Mediators produced by the host and biofilm substances are responsible for the damage that can lead to tooth loss. The aim of this exploratory and descriptive study was to analyze, deepen and compare the effects of the mentioned medications, investigating possible innovations in the treatment of periodontal disease. The methodology consisted of: 1) placing under anesthesia ligature in the first lower left molar. 2) daily administration by gavage H2O (control) (1&#x3BC;l/g), nimesulide (1&#x3BC;l/g, a suspension of 5 mg / ml), Arnica TM (8&#x3BC;l/300g) or Arnica 6CH (3,21&#x3BC;l/300g) for 14, 21 and 28 days to four groups of Wistar rats (n = 30 / group); 3) euthanasia and collection of material for histological, bone loss and RTPCRanalysis (targets: TNF-&#x3B1;, COX-2, IL-6, OPG and RANKL); 4) parametric statistical analysis performed by ANOVA to one or two criteria, followed by Tukey test, or nonparametric analysis by Kruskal-Wallis, followed by Dunns method, 5% significance level. Regarding the bone loss, there was no statistical difference between the groups and none of the treatments was able to contain it. The scores for the inflammatory infiltrate showed no significant difference between the groups in the study periods. Regarding the general score, which involves intensity of the inflammatory infiltrate, migration of the junctional epithelium integrity of the cement and the alveolar bone crest, there was no significant difference between groups in the periods. At the mRNA expression for the cytokines we saw for TNF-&#x3B1; no significant difference between groups when analyzed separately periods of 14 and 28 days. However, in the 21day period, there was significant reduction in nimesulide group compared to the Arnica 6CH group (&#x2217; p <0.05). For COX-2, there was no significant difference in mRNA expression between the groups, separately analyzing each study period, being sharper reduction of this expression in Arnica 6CH group in all periods; for IL-6, OPG and RANKL no significant difference in mRNA expression between the groups in the study periods. However, it is noted in the Arnica 6CH group a clear tendency to increase of the mRNA expression for OPG over time. Comparing with H2O group action of each medicine on the mRNA expression for all cytokines, considering the set of three periods, we see a significant reduction in mRNA expression for COX-2 and RANKL after treatment with Arnica 6CH (&#x2217; p <0.05). The same can be seen for nimesulide when studying the mRNA expression for RANKL (&#x2217; p <0.05). In the study were highlighted the biological effects of Arnica 6CH about reading and transcription of the DNA, notedly about genes related to bone loss, which envisions the possibility of its therapeutic use.
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Efeito da desmineralização ácida da interface enxerto-leito na consolidação de enxertos ósseos autógenos em bloco / Influence of acid demineralization of contacting osseous surfaces on the consolidation of autogenous onlay bone grafts

Domingues, Roberta Santos 24 May 2013 (has links)
Para testar a hipótese de que a desmineralização in situ das superfícies de contato enxerto-leito, e a forma como o enxerto é estabilizado ao leito, podem influenciar os mecanismos envolvidos na consolidação do enxerto, fragmentos ósseos de 10 mm de diâmetro foram removidos das metáfises proximais tibiais de 36 coelhos (Oryctolagus Cuniculus) e transplantados para uma área adjacente. Na tíbia esquerda dos animais, as superfícies de contato do enxerto e do leito hospedeiro foram desmineralizadas com ácido cítrico pH 1,0 por 3 minutos antes dos enxertos serem fixados ao leito. Na tíbia direita, o transplante do bloco ósseo não foi precedido de desmineralização. Metade dos enxertos foi imobilizada sobre o leito pela superposição de uma membrana não reabsorvível de politetrafluoretileno colada com cianoacrilato ao leito à distância da interface enxerto-leito. A outra metade dos enxertos foi fixada por um parafuso de titânio no centro do enxerto. Assim, foram formados 4 grupos de estudo: membrana (M), membrana + ácido (MA), parafuso (P) e parafuso + ácido (PA). Três animais de cada grupo forneceram espécimes para análise microscópica quantitativa e qualitativa aos 15, 30 e 45 dias de pós-operatório. A análise qualitativa demonstrou que não houve formação óssea na interface em nenhum espécime aos 15 dias e que nos demais períodos, em todos os grupos, a quantidade de tecido ósseo neoformado na interface e seu estágio de maturação aumentaram com o tempo. Ambos os métodos de fixação empregados foram eficientes em manter os enxertos em posição, porém a membrana promoveu menor reabsorção da estrutura do enxerto. A análise quantitativa computadorizada revelou que, aos 30 dias, os grupos MA e PA apresentaram maior área de formação óssea na interface (71,34 ± 12,03%; 56,74 ± 2,15% respectivamente) em relação aos grupos M e P (51,75 ± 11,02%; 43,95 ± 4,05% respectivamente) e superfícies de consolidação óssea mais extensas (93,41 ± 5,95%; 93,73 ± 4,96% respectivamente) do que os grupos sem tratamento ácido (73,49 ± 7,7%; 73,77 ± 11,77% respectivamente para M e P), sendo essas diferenças estatisticamente significantes (p<0,05). Aos 45 dias de pós-operatório, os grupos MA e PA (71,18 ± 8,9%; 58,97 ± 3,97% respectivamente) apresentaram resultados superiores aos grupos M e P (59,78 ± 11,28%; 46,08 ± 3,53% respectivamente) em relação à área de neoformação óssea na interface, porém essa diferença não foi significativa. Concluiu-se que a desmineralização ácida das superfícies contactantes nos enxertos ósseos autógenos em bloco na tíbia de coelhos promoveu a osteogênese na interface enxerto-leito e acelerou a consolidação dos enxertos. Além disso, quando o tratamento ácido foi associado ao uso de membrana como método de fixação, a consolidação e grau de reabsorção óssea foram otimizados. / In order to test the hypothesis that the demineralization \"in situ\" of contacting surfaces of bone graft/bone bed and the fixation method used for graft stabilization can influence the mechanisms involved in the consolidation of the graft, bone fragments of 10 mm in diameter were removed from the proximal tibial metaphysis of thirty-six male rabbits (Oryctolagus Cuniculus) and transplanted to an adjacent area. In the left tibia of the animals, the contacting surfaces of the graft and host bed were demineralized with citric acid pH 1.0 for 3 minutes before the grafts were fixed to the receptor bed. In the right tibia, the bone block transplantation was not preceded by demineralization. Half of the grafts were immobilized on the bone bed by a nonresorbable polytetrafluoroethylene membrane glued with cyanoacrylate adhesive to the host bed distant from the bone graft-bone bed interface. The other half of the grafts were fixed by a titanium screw in the center of the graft. Thus, four groups were formed: membrane (M), membrane + acid (MA), screw (P) and screw + acid (PA). Three animals from each group provided specimens for quantitative and qualitative microscopic analysis at 15, 30 and 45 days postoperatively. Qualitative analysis showed no significant bone formation at the interface in any specimen of the groups at 15 days and on the other periods in all groups, the amount of newly formed bone at the interface as well as the stage of bone maturation increased with time. Both fixation methods were effective in maintaining the graft in position, but the membrane resulted in less resorption of the graft. Quantitative analysis, performed by means of a computer program for image analysis, showed that at day 30, groups MA and PA, showed greater area of bone formation at the interface (71.34 ± 12.03%; 56.74 ± 2 15%) than groups M and P (51.75 ± 11.02%, 43.95 ± 4.05%) and more osseointegrated bone surfaces (93.41 ± 5.95%, 93.73 ± 4.96%) than those without acid treatment (73.49 ± 7.7%, 73.77 ± 11.77%), and these differences were statistically significant. At 45 days postoperatively MA and PA groups (71.18 ± 8.9%, 58.97 ± 3.97%) showed better results than the M and P groups (59.78 ± 11.28%, 46 , 08 ± 3.53%) compared to the area of new bone formation at the interface and osseointegrated surfaces, but these differences were not significant. It was concluded that the acid demineralization of contacting surfaces in autogenous onlay bone grafts in the tibia of rabbits promotes osteogenesis in bone graft-host bed interface and accelerates the consolidation of the grafts. Furthermore, the association of this surface treatment to the use of membrane/cyanoacrylate fixation method, optimizes the results regarding consolidation and degree of bone graft resorption.
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Avaliação in vitro da citotoxicidade do alendronato de sódio sobre fibroblastos de ligamento periodontal de humanos em cultura celular. / In vitro citotoxicity evaluation of sodium ale ndronate on cultured human periodontal ligament fibroblasts.

Correia, Vera de Fátima Padrão 27 April 2005 (has links)
Os processos de reabsorção radicular externa, geralmente, estão associados aos traumatismos dentários que atingem os tecidos de sustentação e suporte, principalmente a avulsão e a intrusão. A terapia endodôntica nesses casos, deve visar a estabilização ou paralisação deste processo através da utilização de medicação intracanal que possa inibir a atividade osteoclástica, como os bisfosfonatos desde que, esse fármaco seja biocompatível. Neste sentido, o objetivo desse estudo foi analisar a citotoxicidade do alendronato de sódio sobre fibroblastos do ligamento periodontal humano em cultura celular. As células foram cultivadas na densidade de 1 x 10 3 células/placa. Os grupos experimentais foram: G1 (controle) sem alendronato de sódio e G2, G3 e G4 com o alendronato nas concentrações de 10 -5 , 10 -6 e 10 -7 M respectivamente. Nos tempos experimentais de 1, 6, 12 e 24 horas (curto prazo) foi analisada a viabilidade celular e em 2, 4, 6 e 8 dias (longo prazo) a sobrevivência celular. Os resultados em triplicata foram analisados estatisticamente e mostraram que as culturas tratadas com a maior concentração da droga (G2), apresentaram porcentagens de viabilidade celular significantemente menores (p < 0.01), que as dos outros grupos (G1, G3 e G4) nos tempos de 12 e 24 horas. O crescimento celular nos grupos G2 e G3 foram similares. O G2 apresentou crescimento, significantemente menor que dos demais grupos (p < 0.05). Concluiu-se que o alendronato de sódio, em contato direto com fibroblastos de ligamento periodontal humano em cultura, é citotóxico em concentrações mais elevadas (10 -5 e 10 -6 M) / The external root resorption processes are usually associated with dental trauma, mainly avulsion and intrusion. In such cases, the endodontic therapy aims the process stabilization and paralysation, through utilization of medications that can inhibit the osteoclastic activity, like bisphosphonates, since this drug would be biocompatible. The aim of this study was to analyze the sodium alendronate citotoxicity on human periodontal ligament fibroblasts. Cells were plated in a density of 1 X 10 3 cells/dish. The experimental groups were: GI (control) no sodium alendronate, and GII, GIII and GIV with sodium alendronate at the concentrations of 10 -5 , 10 -6 and 10 -7 M, respectively. The experiment times were 1, 6, 12 and 24 hours (short term) for viability and 2, 4, 6 and 8 days (long term) for cell survival. Data in triplicate were statistically analyzed. Cultures treated with the highest alendronate concentration (GII)showed cell viability percentages significantly lower (p < 0.01) than those of the other groups (GI, GIII and GIV), at 12 and 24 hours. Cell growth on GII and GIII groups was similar. GII presented smaller growth than the other groups (p < 0.05). We concluded that sodium alendronate, on direct contact with human periodontal ligament fibroblasts, is citotoxic in concentrations higher than of 10 -6 M
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Efeito da Suplementação da Proteína do Soro do Leite na Saúde Óssea de Mulheres na Pós-Menopausa em Programa de Modificação do Estilo de Vida com Exercícios Físicos e Adequação Alimentar

Gollino, Loraine. January 2019 (has links)
Orientador: Eliana Aguiar Petri Nahas / Resumo: Objetivo: Avaliar se a suplementação da proteína do soro do leite (PSL) melhora a reabsorção óssea, em mulheres na pós-menopausa praticantes de exercício físico. Métodos: Estudo prospectivo de intervenção controlado, com 38 mulheres na pós-menopausa, com idade entre 50 a 70 anos, randomizadas em dois grupos: intervenção com PSL (n=19) ou controle (n=19). Foram incluídas mulheres com amenorreia acima de 12 meses, densitometria óssea normal dos últimos doze meses e praticantes do protocolo de exercícios físicos (especificar mais). O treinamento foi realizado três vezes por semana, composto de exercícios aeróbio e resistido. No grupo suplementado foi fornecido PSL, para ingestão diária, contendo 25g de proteína. O tempo de seguimento foi de 20 semanas, com avaliações nos momentos (inicial e final). As participantes foram avaliadas quanto à antropometria, ao consumo alimentar por meio do recordatório de 24 horas, variável laboratorial (bioquímicos e hormonais) e pelo marcador de reabsorção óssea, o s-CTX (serum C-terminal cross-linked telopeptides of type I collagen). A análise estatística foi per protocol, empregando-se delineamento em medidas repetidas no tempo (ANOVA), seguido do teste de comparação múltipla de Tukey ajustado para interação entre grupo x momento ou por distribuição Gama (variáveis assimétricas). Resultados: O estudo foi finalizado com 18 mulheres no grupo suplementado e 14 no grupo controle, com média de idade de 59±6 anos. Quanto aos parâmetros antropométrico... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: To evaluate the effect of whey protein supplementation (WPS) on bone resorption in postmenopausal women practicing physical exercise. Methods: We conducted a prospective, controlled study with 38 postmenopausal women aged 50 to 70 years, randomized into two groups: with PSL intervention (n = 19) or without PSL (n = 19, control). We included women with amenorrhea above 12 months, normal bone mineral density of the last twelve months and practitioners of the physical exercise protocol. The exercises were performed three times a week with aerobic and resistance training. In the intervention group, supplementation was provided daily, containing 25g of protein. Follow-up time was 20 weeks, with assessments at the start and end times. The participants were evaluated for anthropometry, food consumption through the 24-hour recall, laboratory parameters (biochemical and hormonal) and the bone resorption marker s-CTX (serum Cterminal cross-linked telopeptides of type I collagen). Statistical analysis was per protocol, using a time-repeated measures (ANOVA) followed by the Tukey multiple comparison test adjusted for group x moment interaction, or by gamma distribution (asymmetric variables). Results: We evaluated 18 women in the supplemented group and 14 in the control group, mean age 59±6 years. Regarding the anthropometric and laboratory parameters, no significant differences were observed between groups. In relation to the food consumption, at the initial moment, it was ob... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Papel dos receptores tipo NOD na modulação da reabsorção óssea em modelo de periodontite experimental / The role of NOD-like receptors in the modulation of bone resorption in experimental periodontitis model

Talita Pereira Prates 04 July 2014 (has links)
O biofilme bacteriano é o agente etiológico primário no desenvolvimento da resposta inflamatória observada na doença periodontal. Os receptores do tipo NOD (NLRs) são proteínas citosólicas que reconhecem componentes microbianos presentes no citoplasma liberados por bactérias invasoras. Sabendo que bactérias periodontopatogênicas têm a capacidade de invadir e colonizar diversas células do tecido periodontal, o presente projeto tem o objetivo de estudar a participação dos receptores do tipo NOD (NOD1 e NOD2) no reconhecimento das bactérias Porphyromonas gingivalis, na modulação da resposta imune e no processo de reabsorção óssea. Camundongos isogênicos machos da linhagem C57BL/6 (WT) e camundongos deficientes para o receptor NOD1 (NOD1-/-) e receptor NOD2 (NOD2-/-) foram infectados com Phorphyromonas gingivalis utilizando um modelo experimental de doença periodontal. O grau de reabsorção óssea foi avaliado por análise morfométrica macroscópica e histológica da maxila, além da quantificação do número de osteoclastos na crista óssea alveolar. O grau de inflamação local foi realizado por contagem do número total de bactérias orais, quantificação de neutrófilos no tecido gengival (MPO) e avaliação dos mediadores inflamatórios por ELISA. Foi também avaliada a expressão de marcadores osteogênicos e osteoclastogênicos no tecido gengival pela técnica de qPCR. Animais NOD1-/- e NOD2-/- apresentaram menor delta de reabsorção óssea quando comparados aos animais WT. Animais NOD2-/- infectados apresentaram debilitado controle bacteriano quando comparados aos animais WT infectados. Animais NOD1-/- e NOD2-/- infectados apresentaram baixa expressão de Cxcl1 e MPO quando comparados aos animais WT infectados. Além disso, foi observado que animais NOD2-/- infectados apresentaram reduzida produção de TNF-&alpha; e elevada produção de IL-10 quando comparados aos animais WT infectados. Não foi detectado diferença estatística na expressão de fatores osteogênicos, Runx2 e osteocalcina, entre animais WT, NOD1-/- e NOD2-/- infectados. Embora não houve diferença no número de células TRAP positivas presentes na crista óssea alveolar entre os grupos no tempo avaliado, animais WT infectados apresentaram elevada expressão gênica de RANKL/OPG quando comparados aos animais NOD2-/- infectados. Além disso, a expressão de marcadores de atividades dos osteoclastos, catepsina k e matrix metaloproteinase-9, foi significantemente baixa nos animais NOD1-/- e NOD2-/- infectados quando comparados aos animais WT infectados. Esses resultados permitem sugerir que independente das variáveis observadas, verificamos que a ausência dos dois receptores impede a rápida progressão da reabsorção óssea alveolar observada na periodontite, portanto os receptores NOD1 e NOD2 contribuem para progressão da reabsorção óssea no modelo experimental de periodontite. / The bacterial biofilm has been identified as an etiological agent in the pathogenesis of periodontal disease. The NOD-like receptors (NLRs) are cytoplasmic proteins that sense microbial by products released by invasive bacteria. Since periodontopathogenic bacteria are able to invade and colonize some periodontal tissue cells, the purpose of this study is to determine the role of NOD1 and NOD2 receptors in the recognition of invasive periodontopathogenic bacteria such as Porphyromonas gingivalis, modulating the immune response and bone resorption. Isogenic strain C57BL/6 males (WT), NOD1 (NOD1-/-) and NOD2 (NOD2-/-) knockout mice were infected with Porphyromonas gingivalis in an experimental model of periodontal disease. Alveolar bone resorption was evaluated by macroscopic and histological morphometric analysis, quantification of osteoclasts numbers in bone crest alveolar. Imune inflammatory response was evaluated by, bacterial load, neutrophils quantification and inflammatory mediators levels by ELISA. We also evaluated the osteogenic and osteoclastogenic markers expression in gingival tissue by Real time PCR techniques. NOD1-/- and NOD2-/- animals showed lower bone resorption when compared to WT animals. NOD2-/- infected animals expressed higher bacterial load compared to WT infected ones. NOD1-/- and NOD2-/- infected animals presented lower Cxcl1 and MPO levels compared to WT infected animals. In addition, NOD2-/- infected animals presented lower level of TNF-&alpha; and higher level of IL-10 when compared to WT infected animals. There was no significant difference in the osteogenic factors expression, Runx2 and osteocalcin, when compared NOD1-/- and NOD2-/- infected animals to WT infected ones. Although there was no difference in TRAP-positive cells number evaluated in the alveolar bone crest among the studied groups, WT infected animals showed elevated ratio RANKL/OPG when compared to NOD2-/- infected animals. Moreover, the expression of osteoclasts activity markers, cathepsin k and matrix metalloproteinase-9, was significantly lower in NOD1-/- and NOD2-/- infected animals compared to WT infected ones. These results suggest that NOD1 and NOD2 receptors contribute to progression of bone resorption in experimental model of periodontitis, since the lack of NOD like receptors impair the bone resorption.
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Papel dos receptores tipo NOD na modulação da reabsorção óssea em modelo de periodontite experimental / The role of NOD-like receptors in the modulation of bone resorption in experimental periodontitis model

Prates, Talita Pereira 04 July 2014 (has links)
O biofilme bacteriano é o agente etiológico primário no desenvolvimento da resposta inflamatória observada na doença periodontal. Os receptores do tipo NOD (NLRs) são proteínas citosólicas que reconhecem componentes microbianos presentes no citoplasma liberados por bactérias invasoras. Sabendo que bactérias periodontopatogênicas têm a capacidade de invadir e colonizar diversas células do tecido periodontal, o presente projeto tem o objetivo de estudar a participação dos receptores do tipo NOD (NOD1 e NOD2) no reconhecimento das bactérias Porphyromonas gingivalis, na modulação da resposta imune e no processo de reabsorção óssea. Camundongos isogênicos machos da linhagem C57BL/6 (WT) e camundongos deficientes para o receptor NOD1 (NOD1-/-) e receptor NOD2 (NOD2-/-) foram infectados com Phorphyromonas gingivalis utilizando um modelo experimental de doença periodontal. O grau de reabsorção óssea foi avaliado por análise morfométrica macroscópica e histológica da maxila, além da quantificação do número de osteoclastos na crista óssea alveolar. O grau de inflamação local foi realizado por contagem do número total de bactérias orais, quantificação de neutrófilos no tecido gengival (MPO) e avaliação dos mediadores inflamatórios por ELISA. Foi também avaliada a expressão de marcadores osteogênicos e osteoclastogênicos no tecido gengival pela técnica de qPCR. Animais NOD1-/- e NOD2-/- apresentaram menor delta de reabsorção óssea quando comparados aos animais WT. Animais NOD2-/- infectados apresentaram debilitado controle bacteriano quando comparados aos animais WT infectados. Animais NOD1-/- e NOD2-/- infectados apresentaram baixa expressão de Cxcl1 e MPO quando comparados aos animais WT infectados. Além disso, foi observado que animais NOD2-/- infectados apresentaram reduzida produção de TNF-&alpha; e elevada produção de IL-10 quando comparados aos animais WT infectados. Não foi detectado diferença estatística na expressão de fatores osteogênicos, Runx2 e osteocalcina, entre animais WT, NOD1-/- e NOD2-/- infectados. Embora não houve diferença no número de células TRAP positivas presentes na crista óssea alveolar entre os grupos no tempo avaliado, animais WT infectados apresentaram elevada expressão gênica de RANKL/OPG quando comparados aos animais NOD2-/- infectados. Além disso, a expressão de marcadores de atividades dos osteoclastos, catepsina k e matrix metaloproteinase-9, foi significantemente baixa nos animais NOD1-/- e NOD2-/- infectados quando comparados aos animais WT infectados. Esses resultados permitem sugerir que independente das variáveis observadas, verificamos que a ausência dos dois receptores impede a rápida progressão da reabsorção óssea alveolar observada na periodontite, portanto os receptores NOD1 e NOD2 contribuem para progressão da reabsorção óssea no modelo experimental de periodontite. / The bacterial biofilm has been identified as an etiological agent in the pathogenesis of periodontal disease. The NOD-like receptors (NLRs) are cytoplasmic proteins that sense microbial by products released by invasive bacteria. Since periodontopathogenic bacteria are able to invade and colonize some periodontal tissue cells, the purpose of this study is to determine the role of NOD1 and NOD2 receptors in the recognition of invasive periodontopathogenic bacteria such as Porphyromonas gingivalis, modulating the immune response and bone resorption. Isogenic strain C57BL/6 males (WT), NOD1 (NOD1-/-) and NOD2 (NOD2-/-) knockout mice were infected with Porphyromonas gingivalis in an experimental model of periodontal disease. Alveolar bone resorption was evaluated by macroscopic and histological morphometric analysis, quantification of osteoclasts numbers in bone crest alveolar. Imune inflammatory response was evaluated by, bacterial load, neutrophils quantification and inflammatory mediators levels by ELISA. We also evaluated the osteogenic and osteoclastogenic markers expression in gingival tissue by Real time PCR techniques. NOD1-/- and NOD2-/- animals showed lower bone resorption when compared to WT animals. NOD2-/- infected animals expressed higher bacterial load compared to WT infected ones. NOD1-/- and NOD2-/- infected animals presented lower Cxcl1 and MPO levels compared to WT infected animals. In addition, NOD2-/- infected animals presented lower level of TNF-&alpha; and higher level of IL-10 when compared to WT infected animals. There was no significant difference in the osteogenic factors expression, Runx2 and osteocalcin, when compared NOD1-/- and NOD2-/- infected animals to WT infected ones. Although there was no difference in TRAP-positive cells number evaluated in the alveolar bone crest among the studied groups, WT infected animals showed elevated ratio RANKL/OPG when compared to NOD2-/- infected animals. Moreover, the expression of osteoclasts activity markers, cathepsin k and matrix metalloproteinase-9, was significantly lower in NOD1-/- and NOD2-/- infected animals compared to WT infected ones. These results suggest that NOD1 and NOD2 receptors contribute to progression of bone resorption in experimental model of periodontitis, since the lack of NOD like receptors impair the bone resorption.
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Caracterização das paredes corticais do canal da mandíbula para avaliação de alterações causadas pela osteopenia/osteoporose / Characterization the mandibular canal walls to evaluate changes caused by osteopenia / osteoporosis

Camargo, Ângela Jordão 02 May 2013 (has links)
A osteoporose é uma epidemia mundial, exprime altas taxas de morbidade e mortalidade, resultando também em altos custos sociais. O exame de densitometria óssea por emissão dupla de raios-X (DXA) é o exame padrão ouro para o diagnóstico da doença. Porém, o alto custo e a disponibilidade de equipamentos, dificultam o acesso ao exame, principalmente nos países pobres e nos emergentes. Triar melhor, e mais precocemente os pacientes para realizar o DXA, é uma estratégia fundamental no combate a essa enfermidade. A radiografia panorâmica vem sendo utilizada na rotina do atendimento odontológico no mundo todo, e tem sido empregada como um método de triagem eficiente de pacientes com baixa densidade mineral óssea. O objetivo deste estudo foi analisar as paredes corticais do canal da mandíbula para a avaliação de possíveis alterações causadas pela osteopenia /osteoporose, na expectativa de indicar ou não a correlação entre a qualidade óssea mandibular e a qualidade óssea sistêmica. A amostra constituiu-se por 52 mulheres, com idade superior a 45 anos (56.4 ± 8.4 anos) divididas em três grupos de acordo com o exame de DXA: Grupo N (n= 26) normal nos três sítios (antebraço, quadril e coluna); Grupo E (n= 18) com osteopenia nos três sítios e Grupo O (n= 8) com osteoporose nos três sítios. Os resultados demonstraram que houve diferenças significativas na quantidade relativa de pixels pretos na região de ramo (R) do canal da mandíbula (p < 0.05) entre as médias verdadeiras quando comparada entre os grupos da amostra. Nas regiões do canal da mandíbula próximo ao forame mentual (FM) e no ângulo (A) e na análise da quantidade de fragmentos os testes estatísticos não evidenciaram a existência de diferenças significativas, apesar dos valores relativos apontarem uma tendência à maior reabsorção das paredes no grupo O e E em relação ao Grupo N. Concluiu-se que a análise das corticais do canal da mandíbula por meio da quantidade de pixels pretos pode ser um instrumento útil ao cirurgião-dentista na avaliação de baixa densidade mineral óssea. / Osteoporosis is a worldwide epidemic, expresses high morbidity and mortality, resulting also in high social costs. The bone densitometry by dual-energy X-ray absorptiometry (DXA) is the gold standard test for diagnosing the disease. However, its high cost and viability are restricted, especially in poor countries and emerging. Screening better and earlier patients to perform DXA, is a key strategy in combating this disease. Panoramic radiography has been used in routine dental care around the world, and has been employed as an efficient method of screening patients with low bone mineral density. The aim of this study was to analyze the cortical walls of the mandibular canal to evaluate possible changes caused by osteopenia / osteoporosis, hoping to indicate or not the correlation between mandibular bone quality and systemic. 52 women were included aged over 45 years (56.4 ± 8.4 years) were divided into three groups according to the DXA exam: Group N (n = 26) normal in three sites (forearm, hip and spine), Group E (n = 18) with osteopenia at the three sites and Group O (n = 8) with osteoporosis in the three sites. Significant differences were found between relative amount of black pixels in the region of the branch (R) of the mandibular canal (p <0.05) and the mean true when compared among groups of samples. In regions of the mandibular canal near the mental foramen (MF), angle (A) and analysis of the amount of fragments statistical tests did not show the significant differences, despite the figures suggest a trend to higher absorption in the walls the E group and to the detriment of group N. It was concluded that the analysis of the cortical the mandibular canal by the number of black pixels may be a useful to the dentist in the evaluation of low bone mineral density.
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Detecção da Reabsorção Radicular Apical após Tratamento Ortodôntico, em Longo Prazo, Utilizando Radiografia Periapical e Tomografia Computadorizada de Feixe Cônico / Long-term Evaluation of Root Resorption after Orthodontic Treatment Using Cone-Bean Computed Tomography

FREITAS, Jairo Curado de 15 April 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-07-29T15:25:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_jairo.pdf: 931467 bytes, checksum: 67fb8f2574746d963d0900c7b00a7423 (MD5) Previous issue date: 2011-04-15 / Aim: To detect Apical Root Resorption (ARR) after orthodontic treatment at 52-288 months using periapical radiography (PR) and cone beam computed tomography (CBCT). Methods: Radiographic images obtained from 58 patients, before (T1) and after orthodontic treatment (T2), and following 52-288 months of treatment were analized by three members of the Brazilian Board of Orthodontics. Apical structures were evaluated by PR images (T2 and T3), using Levander and Malmgren2 scores. The presence of ARR on CBCT images were detected only at T3. The Kolmogorov-Smirnov test was used for statistical analyses, and the level of significance was set at 5%. Kappa statistics determined interobserver agreement. Results: ARR more frequent were with scores 1 in T2 (51.6%) and T3 (53.1%), when evaluated by PR (p>0.05). When compared the frequencies of ARR in T3 among PR and CBCT images, the differences were significant for maxillary and mandibular pre-molar groups, and for mandibular molar group (p>0.05). The teeth with highest frequency of ARR presence using CBCT images were maxillary lateral incisors (94.5%) and mandibular central incisors (87.7%), while the bicuspids showed the lowest frequency. The CBCT images showed that the teeth involved in orthodontic treatment with extraction present higher ARR frequency (p<0.05). Conclusion: PR images suggested higher frequency of ARR compared with CBCT images for maxillary and mandibular pre-molar groups, and for mandibular molar group ARR did not change in long term. CBCT is a promising imaging method to be used in the diagnosis of ARR. / Objetivo: detectar reabsorção radicular apical (RRA) após tratamento ortodôntico, em longo prazo, por meio de imagens de radiografia periapical (RP) e tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC). Metodologia: as imagens radiográficas obtidas de dentes de 58 pacientes, antes (T1) e após o tratamento ortodôntico (T2) e decorridos no mínimo 52 meses deste (T3) foram analisadas por três membros do Board Brasileiro de Ortodontia e Ortopedia Facial. As estruturas apicais foram avaliadas por meio de imagens de RP (T2 e T3), utilizando o sistema de escores de Levander e Malmgren2 modificado. A presença de RRA nas imagens tomográficas obtidas em T3 foi detectada por um especialista em radiologia com experiência em TCFC. Os dados foram estatisticamente analisados pelo teste Kolmogorov-Smirnov com nível de significância de 5%. O Teste de Kappa determinou o nível de concordância entre os observadores. Resultados: As RRAs mais frequentes foram as de escore 1 em T2 (51,6%) e T3 (53,1%), quando avaliadas por RPs (p>0,05). Quando comparadas as frequências de RRAs em T3, entre imagens de RP e de TCFC, a diferença foi estatisticamente significante para o grupo de pré-molares da maxila e da mandíbula, e de molares mandibulares. Os dentes que apresentaram maior frequência de RRA analisados por meio de imagens de TCFC foram os incisivos laterais superiores (94,5%) e os centrais inferiores (87,7%), enquanto que os de menor frequência foram os pré-molares. As imagens de TCFC mostraram que os dentes envolvidos em tratamentos rtodônticos com extrações apresentaram maior frequência de RRA (p<0,05). Conclusão: As imagens de RP sugerem maior frequência de RRAs do que as imagens de TCFC para os grupos de pré-molares e molares, não evidenciando alteração em longo prazo. O método de imagem por TCFC é uma ferramenta promissora ao diagnóstico de reabsorção radicular apical.

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