Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The use of plants as antioxidants is becoming a very important alternative in the food industry and animal production. The Lippia alba is a native plant to Brazil that posses phenolic compounds and essential oils in composition. In this study, the aim was evaluating the inclusion of the leaf from L. alba in the diet from silver catfish (Rhamdia quelen) regarding growth, hematology, metabolism and oxidative parameters. For this, we conducted an experiment lasting 60 days in a re-use water system (20 tanks/250L) with biological filtration. Daily analyzes were performed for the control of chemical and physical parameters of the rearing water. Was used 500 silver catfish (initial weight= 6.22±0.77 g) which were distributed in the experimental units in a completely randomized experimental design (5 treatments and 4 repetitions). L. alba used was grown in UFSM, campus Frederico Westphalen - RS, Brazil. The treatments were: control (no addition leaf); 0.5; 1; 1.5 and 2% inclusion from L. alba leaf powder. All diets had the same composition matrix, containing: 37.49% PB and 10.04% lipídios. The fish were fed to apparent satiety, in three daily meals. At the end of the experiment, they were measured performance parameters and carried out the collection of biological material for evaluation of haematological, metabolic and oxidative parameters. Decrease was observed in growth and smaller in hematological parameters of fish proportional to the inclusion of the leaf in the diets. In higher levels of inclusion of L. alba, occurs undesirable change in metabolis, as increased from alanine aminotransferase in the plasma, indicating liver damage. The presence of L. alba in the diets result in a decreased lipid peroxidation of the muscle and increased of non protein thiols in the gills and muscle. This indicates that the plant has antioxidant potential to silver catfish. Therefore, at the levels tested, the addition of L. alba leaf powder in diets for silver catfish juveniles is not recommended. / O uso de plantas como antioxidantes está se tornando uma alternativa importante na indústria de alimentos e de produção animal. A Lippia alba é uma planta nativa do Brasil que possuí compostos fenólicos e óleos essenciais com elevada atividade antioxidante em sua composição. Neste estudo, o objetivo foi avaliar a inclusão da folha de L. alba na dieta de jundiás (Rhamdia quelen) no crescimento, hematologia, metabolismo e parâmetros oxidativos. Para isso, foi realizado um experimento com duração de 60 dias em um sistema de recirculação de água (20 tanques/250L) com filtragem biológica. Diariamente foram realizadas análises para controle dos parâmetros químicos e físicos da água de criação. Utilizou-se 500 jundiás (peso inicial= 6,22±0,77 g) que foram distribuídos nas unidades experimentais em um delineamento experimental inteiramente casualisado (5 tratamentos e 4 repetições). A L. alba utilizada foi cultivada na UFSM, campus Frederico Westphalen - RS, Brasil. Os tratamentos testados foram: controle (sem inclusão de folha); 0,5; 1; 1,5 e 2% de inclusão do pó da folha de L. alba. Todas as dietas testadas tinham a mesma matriz de composição, contendo 37,49% PB e 10,04% de lipídios. Os peixes foram alimentados até a saciedade aparente, em três refeições diárias. Ao final do experimento, foram aferidos parâmetros zootécnicos e realizada a coleta de material biológico para avaliação dos parâmetros hematológicos, metabolicos e oxidativos. Foi observada diminuição no crescimento e piora nos parâmetros hematológicos dos peixes proporcional à inclusão da folha nas dietas. Nos maiores níveis de inclusão da L. alba, ocorreram alterações metabólicas não desejáveis, como aumento de alanina aminotransferase no plasma, indicando dano hepático. A presença de L. alba nas dietas resultou em diminuição da peroxidação lipídica do músculo e aumento dos tióis não proteicos nas brânquias e no músculo. Isto indica que a planta apresenta potencial antioxidante em jundiás. Portanto, nos níveis testados, a adição do pó da folha de L. alba nas dietas para juvenis de jundiá não é recomendada.

The objective of this study was to verify survival and growth of silver catfish (Rhamdia quelen) fingerlings in different concentrations of dissolved oxygen, as well as its effect on glycogen, glucose, and protein in the liver, kidney, and muscle and activity of the hepatic catalase. In the first experiment 10 fingerlings were used (2.23 ± 0.13 g) in each experimental unit (2 liters) for determination of the lethal concentration (LC-50) in 96 hours for dissolved oxygen. Fingerlings were exposed to 0.40 ± 0.05, 0.76 ± 0.07, 1.04 ± 0.14, and 1.68 ± 0.32 mg/L of dissolved oxygen (three replicates per treatment). In the second experiment 10 fingerlings (4.99 ± 0.18 g) were used for experimental unit (40 liters), and were exposed to 1.96 ± 0.08, 3.10 ± 0.10, 4.14 ± 0.09, 5.20 ± 0.07, and 6.16 ± 0.03 mg/L of dissolved oxygen (three replicates per treatment) for 30 days. LC50 was 0.52 mg/L (confidence interval 0.42 - 0.61). In the growth experiment positive correlation was observed between dissolved oxygen and standard length, weight, specific growth rate, and biomass, and negative correlation for food conversion and catalase. Levels of hepatic glycogen reduced with the increase of oxygen levels. Glucose and the lactate showed variable levels. In the muscular tissue, glicogen levels decreased with the increase of oxygen concentration and glucose and lactate presented variations in the different treatments. There was no significant difference among treatments in the renal glycogen levels, either protein levels of the studied tissues. The best oxygen level for development of silver catfish is above 4.3 mg/L of dissolved oxygen. / Este trabalho teve como objetivo verificar a sobrevivência e o crescimento de alevinos de jundiá (Rhamdia quelen) em diferentes concentrações de oxigênio dissolvido, bem como o seu efeito nos níveis de glicogênio, glicose, proteína no fígado, rim, músculo e a atividade da catalase hepática. No primeiro experimento foram utilizados 10 alevinos (2,23 ± 0,13 g) por unidade experimental (2 litros) para determinação da concentração letal (CL-50) em 96 horas para oxigênio dissolvido. Foram expostos a 0,40 ± 0,05; 0,76 ± 0,07; 1,04 ± 0,14 e 1,68 ±0,32 mg/L de oxigênio dissolvido (três repetições por tratamento). No segundo experimento 10 alevinos (4,99 ± 0,18 g) por unidade experimental (40 litros) foram expostos a 1,96 ± 0,08; 3,10 ± 0,10; 4,14 ± 0,09; 5,20 ± 0,07 e 6,16 ± 0,03 mg/L de oxigênio dissolvido (três repetições por tratamento) por 30 dias. A CL50 foi 0,52 mg/L (intervalo de confiança 0,42 - 0,61). No experimento de crescimento observou-se correlação positiva entre oxigênio dissolvido e comprimento padrão, peso, taxa de crescimento específico, biomassa e correlação negativa na conversão alimentar e catalase. Os níveis de glicogênio hepático apresentaram redução com o aumento da concentração de oxigênio. A glicose e o lactato apresentaram níveis variados. No tecido muscular, os níveis de glicogênio diminuíram com o aumento da concentração de oxigênio e a glicose e lactato apresentaram variações nos diferentes tratamentos. No tecido renal não foi observada diferença no conteúdo de glicogênio. As proteínas do tecido hepático, muscular e renal não apresentaram variações entre os tratamentos. A faixa ideal para o desenvolvimento de alevinos de jundiá é acima de 4,3 mg/L de oxigênio dissolvido.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / In this study, silver catfish (Rhamdia quelen) were exposed to commercial formulation to 2,4-D herbicide at 0.0 (control) 0.5 or 2.0 mg L-1 for 90 days or 96 hours. After the exposure were evaluated the growth, mucous layer composition, metabolic parameters, TBARS formation in different tissues and liver catalase activity. R. quelen showed reduction on some growth parameter as final mean mass that decrease on 37% and 46% respectively to 0.5 or 2.0 mg L-1, total body length to 15 % to high concentration tested. Daily mass gain reduced to 55% and 58% to both concentrations tested. The specific growth decrease of 1.20 (control) to 0.72 and 0.60 respectively to both concentrations tested. The factor of condition reduced 22% and 12% for 0.5 or 2.0 mg L-1 2,4-D concentration. The silver catfish showed alterations on mucous layer contents as decrease of soluble sugar at both concentrations tested and increase of protein levels at 2.0 mg L-1 to herbicide concentration after 90 days and 96 hours of exposure. Fish exposed to 2,4-D herbicide at 0.5 or 2.0 mg L-1 presented glycogen reduction and protein level in the liver tissue after 90 days of exposure. But this tissue showed increase in lactate and glucose levels at both concentrations tested. The liver tissue of R. quelen after 96 h of exposure showed increased to glycogen level and reduced to lactate and protein levels to both concentrations tested, but were not significantly difference to glucose values. The muscle tissue after 90 days of exposure to 2,4-D showed reduced to glycogen and protein values at high concentration tested and decreases to glucose at both 2,4-D concentrations. Lactate levels were increased to 0.5 or 2.0 mg L-1 to 2,4-D herbicide. After 96 h of exposure this tissue presented reduced to glycogen and lactate levels, but the glucose and protein values was not altered as compared to control values. The kidney tissue showed decrease to glycogen and glucose values, but lactate was increased at both concentrations of 2,4-D and protein levels were not altered as compared to control values. This tissue after 96 h of exposure to 0.5 or 2.0 mg L-1 of herbicide showed decrease to lactate levels, but glycogen, glucose and protein values was not altered. The plasm metabolites presented reduction of lactate and protein levels at both concentrations tested. Glucose was not altered after 90 days of exposure. After 96 h the plasm showed reduction in lactate level, but glucose and protein was not significantly alteration as compared to control values. Catalase activity showed enhanced to both experimentation and both concentrations, values as compared to control. TBARS formation after 90 days to 2,4-D exposure showed decrease to liver tissue, but enhanced in white muscle. TBARS in brain tissue was not altered in this experimentation. After 96 h of 2,4-D exposure TBARS levels enhanced to liver tissue and was not alteration in the brain and white muscle tissue as compared to control values. Data demonstrated that 2,4-D herbicide alter the some growth parameters after long time exposure. Besides, this herbicide causes alterations on metabolic parameter and oxidative stress after 90 days and 96 hours of exposure. / Neste estudo, jundiás (Rhamdia quelen) foram expostos a uma formulação comercial do herbicida 2,4-D: 0,0 (controle), 0,5 ou 2,0 mg L-1 por 90 dias ou 96 horas. Após os períodos experimentais foram avaliados o crescimento (90 dias), composição do muco, parâmetros metabólicos, formação de TBARS em diferentes tecidos e atividade da catalase. R. quelen apresentou redução em alguns parâmetros do crescimento como média da massa final que reduziu 37% e 45% respectivamente para 0,5 ou 2,0 mg L-1, comprimento total do corpo de 15% para a concentração 2,0 mg L-1. O ganho de massa diário reduziu 55% e 58% para ambas as concentrações testadas. O crescimento específico diminuiu de 1,20 (controle) para 0,72 e 0,60 respectivamente para ambas as concentrações testadas. O fator de condição reduziu 22% e 12% para as concentrações de 0,5 ou 2,0 mg L-1 de 2,4-D. Os jundiás apresentaram alterações no muco como o decréscimo do açúcar solúvel para ambas as concentrações testadas e aumento nos níveis de proteína em 2,0 mg L-1 do herbicida após 90 dias e 96 horas de exposição. Os peixes expostos ao herbicida 2,4-D a 0,5 ou 2,0 mg L-1 apresentaram redução nos níveis de glicogênio e proteína no tecido do fígado após 90 dias de exposição. Mas este tecido apresentou aumento nos níveis de glicose e lactato para ambas as concentrações testadas. O fígado de R. quelen após 96 horas de exposição apresentou aumento nos níveis de glicogênio e redução nos níveis de lactato e proteína em ambas as concentrações testadas, mas não teve diferença significativa nos valores de glicose. O tecido muscular após 90 dias de exposição ao 2,4-D mostrou redução nos valores de glicogênio e proteína na concentração mais alta testada e decréscimo na glicose para ambas as concentrações de 2,4-D, porém os níveis de lactato aumentaram em ambas as concentrações testadas. Após 96 h de exposição o músculo apresentou redução nos níveis de glicogênio e lactato quando comparado com os valores do controle. O tecido do rim mostrou redução nos valores de glicogênio e glicose, mas um aumento no lactato para ambas as concentrações de 2,4-D e os níveis de proteína não estiveram alterados quando comparados com os valores de controle. Este tecido após 96 h de exposição a 0,5 ou 2,0 mg L-1 do herbicida mostraram decréscimo nos níveis de lactato, mas os valores de glicogênio, glicose e proteína não estiveram alterados. Os metabólitos do plasma apresentaram redução nos níveis de lactato e proteína para ambas as concentrações testadas. A glicose não esteve alterada após 90 dias de exposição. Depois de 96 h o plasma mostrou redução nos níveis de lactato, mas glicose e proteína não tiveram alteração significante quando comparadas com os valores do controle. A atividade da catalase hepática mostrou aumento para ambos os experimentos em ambas as concentrações testadas. A formação de TBARS após 90 dias de exposição ao 2,4-D mostrou decréscimo no tecido do fígado, mas aumento no músculo branco. TBARS no cérebro não esteve alterado neste experimento. Após 96 h de exposição, os níveis de TBARS aumentaram no tecido do fígado e não tiveram alteração nos tecidos do cérebro e músculo branco quando comparado com os valores do controle. Os dados demonstram que o herbicida 2,4-D altera alguns parâmetros do crescimento após longo tempo de exposição. Em adição, este herbicida causa alterações nos parâmetros metabólicos e estresse oxidativo após 90 dias e 96 horas de exposição.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This work was conducted to evaluate the growth and metabolism of jundiá fed protein concentrates of sunflower meal and crambe as a substitute source of vegetable protein, 25 and 50% of animal protein. The work was divided into two distinct phases. The first consisted in obtaining and characterization of protein concentrates of sunflower meal and crambe methodology using concentration by isoelectric pH (Smith et al, 1946), with modifications. We obtained values of 51.42 and 50.37% crude protein and yield of 48.30 and 50.32% respectively. Regarding the profile of amino acids, the protein concentration in crambe meal increased levels of lysine and methionine in 50.29 and 122.00%, respectively. In sunflower protein concentrate increased by 41.5 and 186%. In the second phase the biological assay was conducted for 52 days in water recirculation system. We used 300 jundiás with average initial weight of 14.59 ± 0.18 g, these animals were housed in 15 experimental units of 280L net volume of each. The initial stocking density was 1.04 g fish / L water. We evaluated two levels (25 and 50%) partial replacement of protein coming from the flour meat and swine bone by protein concentrates in question. At the end of the period, there were no statistical differences for weight (W). The feed conversion ratio (FCR) was higher in the Control and CPFG-25% diets (P <0.05). There was no significant difference (P> 0.05) for specific growth rate (SGR), relative weight gain (RWG) e average daily gain (ADG). In relation to condition factor (CF), the highest values were found in the diet CPFG-25%. There was no statistical difference (P> 0.05) in dry matter, protein and crude protein deposited (CPD) in carcasses of animals subjected to different diets. We found a higher lipid content and total fat deposited (TFD) in the diet CPFG-50%. For carcass yield (CY) and digestive rates was not significant between the experimental diets. The activities of digestive enzymes trypsin and chymotrypsin showed no statistical differences in diets. There was no significant difference for any of the analyzed blood parameters (glucose, total circulating protein, albumin, cholesterol and triglycerides). The animals diet CPFG-25% had higher liver glycogen stock (p <0.05). It was found increased activity (p <0.05) of the enzyme glutamic-pyruvic transaminases (GPT) in animals of the control diet. Was observed increase in the concentration of free amino acids in fish fed diet CPFG- 25%. It can be concluded that the use of protein concentrates of sunflower meal and crambe meal did not affect growth and weight gain of fish as well as metabolism. The protein concentrate of sunflower meal was more metabolically efficient than crambe meal. The animals fed diet CPFG-25% had improved metabolic efficiency of use of the ingredients. / Este trabalho foi conduzido a fim de avaliar o crescimento e metabolismo de jundiás alimentados com concentrados proteicos de farelos de girassol e crambe como substitutos de fonte protéica de origem vegetal, em 25 e 50% da proteína. O trabalho foi dividido em duas fases distintas. A primeira consistia na obtenção e caracterização dos concentrados proteicos dos farelos de girassol e crambe utilizando-se metodologia de concentração através do pH isoelétrico (SMITH et al., 1946), com modificações. Obtiveram-se valores de 51,42 e 50,37% de proteína bruta e rendimento de 48,30 e 50,32%, respectivamente. Em relação ao perfil de aminoácidos, a concentração protéica no farelo de crambe elevou os teores de lisina e metionina em 50,29 e 122,00%, respectivamente. No concentrado proteico de girassol houve aumento de 41,5 e 186%. Na segunda fase foi conduzido o ensaio biológico durante 52 dias, em sistema de recirculação de água. Foram utilizados 300 jundiás com peso médio inicial de 14,59±0,18g, esses animais foram alojados em 15 unidades experimentais de 280L de volume útil cada. A densidade de estocagem inicial foi de 1,04g de peixe/L de água. Foram avaliados dois níveis (25 e 50%) de substituição parcial da proteína advinda da farinha de carne e ossos suína pelos concentrados proteicos em questão. Ao final do período experimental não houve diferença estatística para peso (P). A conversão alimentar aparente (CAA) foi maior nas dietas Controle e CPFG-25% (P<0,05). Não houve diferença significativa (P>0,05) para taxa de crescimento específico (TCE), ganho de peso relativo (GPR), ganho de peso diário (GPD). Em relação ao fator de condição (FC), os maiores valores foram encontrados na dieta CPFG-25%. Não houve diferença estatística (P>0,05) no teor de matéria seca, proteína e proteína bruta total depositada (PBTD) na carcaça dos animais submetidos às distintas dietas. Foi encontrado maior teor de lipídeos e gordura total depositada (GTD) na dieta CPFG-50%. Para rendimento de carcaça (RC) e índices digestivos não houve significativa entre as dietas experimentais. As atividades das enzimas digestivas tripsina e quimotripsina não apresentaram diferenças estatísticas nas dietas testadas. Não houve diferença significativa para nenhum dos parâmetros sanguíneos analisados (glicose, proteínas totais circulantes, albumina, colesterol e triglicerídeos). Os animais da dieta CPFG-25% apresentaram maior estoque de glicogênio hepático (p<0,05). Detectou-se aumento da atividade (p<0,05) da enzima transminase glutamopirúvica (TGP) nos animais da dieta controle. Foi verificado aumento no teor de aminoácidos livres nos peixes que receberam a dieta CPFG-25%. Pode-se concluir que a utilização dos concentrados proteicos de farelos de girassol e crambe, não afeta o crescimento e ganho de peso dos peixes bem como o metabolismo. O concentrado proteico de farelo de girassol mostrou-se mais eficiente metabolicamente do que o farelo de crambe. Os animais que receberam a dieta CPFG-25% apresentaram a melhor eficiência de uso metabólico dos ingredientes.

O presente estudo analisou o conteúdo digestório de 221 indivíduos de seis espécies de peixes, do reservatório de Ribeirão das Lajes (Piraí-RJ), sendo 44 exemplares da espécie Loricariichthys castaneus, 56 de Parauchenipterus striatulus, 46 de Metynnis maculatus, 40 de Astyanax bimaculatus, 31 de Astyanax parahybae e 4 de Rhamdia quelen. O intuito foi o de estabelecer suas dietas, através do emprego do índice de importância alimentar (IAi), verificar a existência de diferenças na alimentação entre épocas seca e chuvosa e ainda as suas relações tróficas no ambiente aquático em questão. Não foram observadas grandes alterações da dieta das espécies estudadas entre épocas do ano. Foi evidenciada uma utilização de recursos alimentares semelhantes entre as espécies, que puderam ser divididas em dois grupos: um composto por espécies de hábitos onívoros com tendência a insetivoria e que empregaram recursos alóctones em suas dietas, formado por A. bimaculatus, A. parahybae e P. striatulus e outro contendo L. castaneus, R. quelen e M. maculatus que apresentaram uma maior amplitude de itens ingeridos, sendo muitos itens associados ao substrato e alguns a coluna dágua. Existiu uma sobreposição alimentar entre as espécies onívoras, todavia a ampla disponibilidade de recursos alimentares passíveis de serem explorados pelos peixes no reservatório faz com que esta sobreposição não se converta em possível competição por alimentos. Além disso, as espécies exploraram secundariamente itens alimentares diferenciados em suas dietas. / The present study analyzed the digestive contents of 221 individuals of six fish species, from Ribeirão das Lajes reservoir (Piraí-RJ). There were 44 specimens of Loricariichthys castaneus, 56 Parauchenipterus striatulus, 46 Metynnis maculatus, 40 Astyanax bimaculatus, 31 Astyanax parahybae and 4 Rhamdia quelen. The aim was to establish their diets, through the use of alimentary importance index (IAi), to verify the existence of differences in their feeding between different seasons of the year, and their trophic relationships to their environment. There were no great alterations to the diets of the analyzed species between the seasons of the year. All species used similar food resources, which could be divided into two groups: one composed of species with omnivorous habits with tendencies to insectivory and which apply allochthonous resources in their diets, formed by A. bimaculatus, A. parahybae e P. striatulus and another one with L. castaneus, R. quelen e M. maculatus that presented larger amplitudes of ingested items, which many items were associated with the substratum and a few to the water column. There is an alimentary overlap between the omnivorous species, however the great availability of food resources, capable of being exploited by the fishes in this reservoir, probably diminishes competition for food. Moreover the species also exploited different kinds of secondary food items.

The aim of the work was to evaluate the effect of different protein and lipid sources of animal and vegetable origin on the reproductive performance of black catfish Rhamdia quelen females. Three experiments were accomplished with duration of 90 days each, divided in three phases: Phase I, Reproducers feeding; phase II, Induced reproduction and eggs and larvae incubation; phase III, Larvae culture. Fifteen females of black catfish (around 700g) were used for experiments 1 and 2, and 500g for experiment 3. The females were distributed in three net cages of 1m³, 5 fish (4 females for induction and 1 for oocyte collection). The fish were fed for ten weeks using three diets as treatments: experiment 1, meat and bone meal and soybean meal (CS), fish meal and soybean meal (PS) and yeast and soybean meal (LS); For experiment 2, the effect of substitution of the meat and bone meal for the soybean meal in increasing levels was evaluated (0%, 35%, 70%), that were treatments CS 0, CS 35 and CS 70; In experiment 3, pork fat (BP), sunflower oil (OG) and Canola oil (OC). After induced spawning, samples of ten eggs were collected at the moment of the fishes spawning, at 3, 9, 12, 18 and 24 hours. Also samples of ten larvae were collected, at the moment of the eclosion, at 12, 24, 36 and 48 hours. Three samples of larvae of each incubator in the density of 30 larvae/l, were collected and fed during 14 days. Changeable zoogenic were esteem for phases I and III and reproductive for phase II. In experiment 1, females fed with the diet of treatment LS, had shown minor profit in weight, the eggs had equally minor weight. For the embryonic evelopment treatments, CS and PS were superior to treatment LS in the variable (DSV). In the larval development in the incubators, treatment CS showed better performance for the variable (CT). For the experiment 2, females fed with diets CS 70, had not answered the spawning of fishes. The embryonic development, larval vitelline and larvae were superior in treatment CS 0 for the variable (DO and AO), (CT and AT), (CT, CP, Area, SOB) respectively. In experiment 3, the larvae development in the incubators, treatment BP was minor that treatment OG in the variable (CT), equally treatment BP was minor that treatments OG and OC for the variable (DSV). For the larval development until the 14 days treatment OC was greater that treatment BP for the variable (CT and CP). We can conclude that the use of Meat and Bone meal and Soybean meal as protein sources are presented as good option in the feeding of reproductive females of black catfish. The pork fat is so good as sunflower and canola oils as lipid sources for reproductive females and they provide good development of the embryo and jundiá s larvae / No trabalho avaliou-se o efeito de diferentes fontes protéicas e lipídicas de origem animal e vegetal sobre o desempenho reprodutivo de fêmeas de jundiá Rhamdia quelen. Foram realizados três experimentos, de 90 dias cada, divididos em três fases: fase I, Alimentação de reprodutores; fase II, Reprodução induzida e incubação de ovos e larvas; fase III, Larvicultura. Foram utilizadas 15 fêmeas de jundiá com peso aproximado de 700g para os experimentos 1 e 2, e 500g para o experimento 3. As fêmeas foram distribuídas em três tanques-rede de 1m³, sendo 5 peixes por tanque rede (4 fêmeas para indução e 1 para coleta de ovócitos) e alimentadas durante dez semanas com três dietas experimentais. No experimento 1 testaram-se Farinha de Carne e Ossos e Farelo de Soja (CS), Farinha de Peixe e Farelo de Soja (PS) e Levedura de Cana e Farelo de Soja (LS). No experimento 2, avaliou-se o efeito de substituição da Farinha de Carne e Ossos pelo Farelo de Soja na ração CS do experimento 1 em níveis crescentes, sendo os tratamentos CS 0, CS 35 e CS 70. No experimento 3, testaram-se a Banha de Porco (BP), Óleo de Girassol (OG) e Óleo de Canola (OC) como fontes de lipídios. Após desova, foram coletadas amostras de dez ovos, às 0, 3, 9, 12, 18 e 24 horas. Após a eclosão foram coletadas amostras de dez larvas às 0, 12, 24, 36 e 48 horas e medidas, e três amostras de larvas de cada incubadora foram alimentadas durante 14 dias. Foram estimadas variáveis zootécnicas para as fases I e III e reprodutivas para fase II. No experimento 1, as fêmeas do tratamento LS, mostraram menor ganho em peso, igualmente os ovos tiveram menor peso. Para o desenvolvimento embrionário os tratamentos CS e PS foram superiores ao tratamento LS na variável Diâmetro do Saco Vitelino (DSV). No desenvolvimento larval nas incubadoras, o tratamento CS mostrou melhor desempenho para Comprimento Total (CT). No experimento 2, as fêmeas alimentadas com dieta CS 70, não responderam a desova. O desenvolvimento embrionário, larval vitelino e larval foi superior no tratamento CS 0 para as variáveis (DO e AO), (CT e AT), (CT, CP, Área, SOB), respectivamente. No experimento 3, no desenvolvimento das larvas nas incubadoras, o tratamento BP foi menor que o tratamento OG na variável (CT), e igualmente o tratamento BP foi menor que os tratamentos OG e OC para a variável (DSV). Para o desenvolvimento larval até os 14 dias o tratamento OC foi maior que o tratamento BP para as variáveis (CT e CP). Conclui-se que a farinha de carne e ossos e farelo de soja (até 60% de inclusão) são boas fontes protéicas para fêmeas reprodutoras de jundiá. A banha de porco é tão eficiente quanto óleo de girassol e canola como fontes lipídicas para fêmeas reprodutoras e proporcionam bom desenvolvimento embrionário e das larvas de jundiá

The present study examined the effect of experimentally elevating dietary Ca2+ and water hardness on survival and growth of silver catfish, Rhamdia quelen, exposed to different waterborne NH3 and O2 levels. In the dietary Ca2+ experiment of determination of NH3 lethal concentration in 96 h (LC50-96h) juveniles (4.06±0.27g and 7.82±1.2cm) were exposed to five different NH3 levels (in mg.L-1): 0.107±0.007 (control), 0.36±0.021, 0.773±0.074, 1.170±0.071 and 1.63±0.315 and four dietary Ca2+ levels (in % Ca2+): 0.45, 0.95, 1.45, and 2.45. In the waterborne Ca2+ experiment of LC50-96h juveniles (1.85±0.6g and 6.0±0.54cm) were maintained at five different NH3 levels (mg.L-1): 0.097±0.017 (control), 0.356±0.037, 0.779±0.141, 1.459±0.185 and 1.770±0.070 and four water hardness levels (in mg CaCO3.L-1): 34.5±4.4, 62.0±5.7, 116.0±9.3, and 174.0±22.42. In the dietary Ca2+ experiment of determination of O2 lethal concentration in 96 h (LC50-96h) juveniles (4.75 + 0.65 g e 7.56 + 0.61 cm) were exposed to five different O2 levels (in mg.L-1): (0.41±0.13, 0.71±0.15, 0.97±0.13, 1.44±0.35 e 6.41±0.60 mg/L) and four dietary Ca2+ levels (in % Ca2+): 0.45, 0.95, 1.45, and 2.45. In the waterborne Ca2+ experiment of LC50-96h juveniles (3.66 ± 0.75 g e 7.32± 0.5 cm) were maintained at five different O2 levels (mg.L-1): (0.27±0.10, 0.74±0.26, 1.33±0.14, 1.74±0.32 e 6.55±0.02 mg.L-1) and four water hardness levels (in mg CaCO3.L-1): (28, 116, 116 e 180). In the growth experiment juveniles (2.27±0.14g and 6.9±0.13cm) were exposed to two NH3 levels (mg.L-1), 0.021±0.001 and 0.623±0.039, and four water hardness levels (mg CaCO3.L-1): 32.1±4.6, 63.1±5.9, 119.9±10.0, and 177.3±8.1 for 40 days. In the growth experiment juveniles (3.66±0.75g and 7.32±0.5cm) were exposed to two O2 levels (1.47±0.04 and 6.46±0.06 mg.L-1), and four water hardness levels (mg CaCO3.L-1): 30±2.0, 61±2.5, 121±3.0 e 180±3.0 for 15 days. The NH3 LC50-96h was 0.73 mg.L-1 (0.63 - 0.84) in the dietary Ca2+ experiment, and LC50-96h was significantly higher in juveniles fed 0.45 and 0.95% dietary Ca2+. Water hardness did not change significantly NH3 LC50-96h, which was1.20 mg.L-1 (1.10 - 1.24). Weight gain, biomass and specific growth rate at end of the growth experiment were significantly higher in juveniles exposed to 0.021 mg.L-1 NH3 than those exposed to 0.623 mg.L- NH3. The increase of water hardness impaired all measured parameters in juveniles exposed to the lowest NH3 level, but increased them in those exposed to the highest NH3 level. The O2 LC50-96h was 0.89 mg/L (CI 0.64 1.34 mg/L) in the dietary Ca2+ experiment, and LC50-96h was significantly higher in juveniles fed 2.45 e 0.45% dietary Ca2+. Weight gain, biomass, length and specific growth rate at end of the growth experiment were significantly higher in juveniles exposed to 6.46±0.06 than those exposed to 1.47±0.04 mg.L-1O2 . The increase of water hardness increased all measured parameters in juveniles exposed to the lowest O2 level, but them impaired in those exposed to the highest O2 level. This study indicates that low dietary Ca2+ enhanced survival of silver catfish exposed to high NH3 and low O2 levels, and that the increase of water hardness is recommended only when this species is raised in waters with high growth NH3 and low O2 levels. / Este trabalho teve como objetivos verificar os efeitos da adição de Ca2+ na ração e na água na sobrevivência e crescimento de juvenis de jundiá (Rhamdia quelen) submetidos a diferentes níveis de amônia e oxigênio dissolvido. No experimento para verificar a eficácia da adição de Ca2+ na ração sobre a concentração letal 96h (CL50-96h) da amônia (NH3) os juvenis (4.06±0.27g e 7.82±1.2cm) foram expostos a cinco níveis de NH3 (em mg/L): 0,107±0,007 (controle); 0,360±0,021; 0,773±0,074; 1,170±0,071 e 1,630±0,315 e quatro níveis de Ca2+ na dieta (em % Ca2+): 0,45; 0,95; 1,45 e 2,45. Para verificar a eficácia do Ca2+ na água sobre a CL50-96h da NH3 , os juvenis (1,85±0,6g e 6,0±0,54cm) foram mantidos em cinco níveis de NH3 (mg/L): 0,097±0,017 (controle); 0,356±0,037; 0,779±0,141; 1,459±0,185 e 1,770±0,070 e quatro níveis de dureza (em mg CaCO3/L): 34,5±4,4; 62,0±5,7; 116,0±9,3 e 174,0±22,42. No experimento para avaliar a eficácia da adição de Ca2+ na ração sobre a CL50-96h do O2, os juvenis (4,75±0,65g e 7,56±0,61cm) foram expostos a cinco níveis de O2 (em mg/L): (0,41±0,13; 0,71±0,15; 0,97±0,13; 1,44±0,35 e 6,41±0,60 mg/L) e quatro níveis de Ca2+ na dieta (em % Ca2+): 0,45; 0,95; 1,45 e 2,45. Para verificar a eficácia do Ca2+ na água sobre a CL50-96h do O2, os juvenis (3,66±0,75g e 7,2±0,5cm) foram mantidos em cinco níveis de O2 (mg/L): 0,27±0,10; 0,74±0,26; 1,33±0,14; 1,74±0,32 e 6,55±0,02 mg.L-1) e quatro níveis de dureza (em mg CaCO3/L): (28, 116, 116 e 180). Para verificar a influência do Ca2+ na água sobre a sobrevivência e o crescimento, os juvenis (2,27±0,14g e 6,9cm) foram mantidos em dois níveis de NH3 (mg/L), 0,021±0,001 e 0,623±0,039, e quatro níveis de dureza na água (mg CaCO3/L): 32,1±4,6; 63,1±5,9; 119,9±10,0 e 177,3±8,1 por 40 dias. No segundo experimento de crescimento, os juvenis (3,66±0,75g e 7,32±0,5cm) foram mantidos dois níveis de O2 (1,47±0,04 e 6,46±0,06 mg/L), e quatro níveis de dureza na água (mg CaCO3/L): 30±2,0; 61±2,5; 121±3,0 e 180±3,0 por 15 dias. A CL50-96h para NH3 foi de 0,73 mg.L-1 (CI 0,63 0,84) no experimento com Ca2+ na dieta, com uma diferença significativa nos juvenis alimentados com 0,45 e 0,95% de Ca2+ na dieta. A dureza na água não influenciou a LC50-96h NH3, que foi de 1,20 mg/L (CI 1,10 - 1,24). No experimento para avaliar a influência dos níveis de NH3 no crescimento, o ganho de peso, biomassa e taxa de crescimento específico foram significativamente maiores nos juvenis expostos ao nível mais baixo de NH3 , do que naqueles mantidos no nível mais alto de NH3. Nesse experimento o aumento da dureza prejudicou os juvenis expostos ao nível mais baixo de NH3, mas o aumento beneficiou os juvenis mantidos no nível mais alto de NH3 em todos os parâmetros avaliados. A CL50-96h para o O2 foi de 0.89 mg/L (CI 0,64 1,34 mg/L) no experimento com Ca2+ na dieta e foi maior nos juvenis alimentados com 2.45 e 0.45% de Ca2+ na dieta. O ganho de peso, a biomassa, o comprimento e a taxa de crescimento específico foram significativamente maiores nos juvenis mantidos nas concentrações de 1,47±0,04 mg/L O2 do que os expostos a 6,46±0,06 mg/L O2. O aumento da dureza foi positivo para todos os parâmetros medidos nos juvenis expostos ao nível mais baixo de O2, mas prejudicou aqueles submetidos ao nível mais alto de O2. Este estudo indicou que dietas com baixos níveis de Ca2+ aumentam a sobrevivência de juvenis de jundia expostos a altos níveis de NH3 e baixas concentrações de O2, e ao aumento da dureza da água pode ser recomendada somente quando essa espécie é submetida a situações de hipóxia e altos níveis de NH3.

A produção de peixes em cativeiro somente é possível com reprodução artificial, e sabe-se que a manipulação em peixes é um estímulo estressor. Devido ao crescente interesse no bem-estar animal, anestésicos estão sendo utilizados para a manipulação em peixes. O eugenol é um anestésico natural que possui ampla disponibilidade no mercado, apresenta baixo custo e é considerado seguro para o manipulador e para o meio ambiente. O objetivo desse estudo foi verificar se o uso de diferentes concentrações de eugenol (0, 30, 40, 50 e 60 mg/L), no manejo reprodutivo de Rhamdia quelen, causa alterações nos perfis do cortisol plasmático dos reprodutores e se influencia na qualidade do sêmen fresco e descongelado. Foram utilizados 75 machos de R. quelen sexualmente maturos, com peso de 500 g, selecionados aleatoriamente e distribuídos nos cinco tratamentos conforme as doses de eugenol utilizadas. Foram avaliadas as seguintes variáveis: taxa e tempo de motilidade, concentração espermática, taxa de fertilização, funcionalidade mitocondrial, integridade de membrana e de DNA, morfologia espermática e concentração de cortisol plasmático. Os animais anestesiados com as concentrações de 40 e 50 mg/L de eugenol apresentaram menores níveis de cortisol plasmático comparados ao controle, ou seja, se estressaram menos. A utilização de 30, 40 e 50 mg/L de eugenol manteve a qualidade seminal do sêmen fresco, já no sêmen descongelado, a qualidade foi mantida com o uso de 30 e 40 mg/L de eugenol. Esses resultados evidenciam que é possível conciliar a redução do estresse com a produção, pois cortisol plasmático foi reduzido e os parâmetros seminais se mantiveram após os tratamentos. / The production of fish in captivity is only possible with artificial reproduction, and it is known that the handling is a stressful stimulation to the fish. Currently, the interest in animal welfare has been increased. Therefore anesthetic have been used to make the handling of the fish. Eugenol is a natural anesthetic that has a broad market availability, is inexpensive and is considered safe for the handler and the environment. The aim of this study was to determine whether the use of different concentrations of eugenol (0, 30, 40, 50 and 60 mg/L) in the reproductive management of Rhamdia quelen cause changes in the profiles of plasmatic cortisol and quality of fresh and thawed semen. Seventy five males of R. quelen sexually mature and weighing 500 g, were randomly selected and distributed in five treatments according to the dose of eugenol used. The following variables were evaluated: motility and time of motility, sperm concentration, fertilization rate, mitochondrial function, membrane and DNA integrity, sperm morphology and concentration of plasmatic cortisol. The animals anesthetized with concentrations of 40 and 50 mg/L of eugenol showed lower plasmatic cortisol levels compared to the control, therefore they were less stressed. The use of 30, 40 and 50 mg / L of eugenol maintaining sperm quality of fresh semen, whereas the quality of thawed is maintained with the use of 30 and 40 mg / L of eugenol. These results show that it is possible conciliate animal welfare with the production, since the seminal parameters were not altered.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The techniques of sex reversal serve to highlight existing advantages on one of the sexes in different fish species, several species of commercial interest have been considered in this respect. Recent studies show that in silver catfish there is higher growth in female compared to male, but there is still no data regarding dose, active hormone, or stage of development and application of hormones for sex reversal. Therefore, the objective of this study was to determine dose and active principles of female steroid hormone levels for sex reversal in catfish larvae, as well as evaluating its growth under the effect of these treatments. The inclusion of 10, 20, 40 and 50 mg/kg feed of estradiol benzoate and the active principles of estradiol: valerate, ciprionate and 17b-estradiol level of 30 mg/kg was tested for 20 days. Histological analysis of gonads at 40 days showed up to 96% females at doses 20, 40 and 50 mg/kg feed. Larvae fed the highest hormone level (50 mg / kg feed) had lower weight values compared to other treatments. There was no significant difference in survival between the larval treatments. Testing the active ingredients of estradiol up to seven days, the average weight of larvae of the diet without hormone was higher than the other treatments. At 21 days of the experiment only larvae of the treatment with ciprionate of estradiol showed lower weight compared to the other treatments, which did not differ between themselves. At 40 days of experiment the weight gain in larvae fed 30mg/kg of ciprionate of estradiol was superior to the others. There were no significant differences between treatments on sex reversal of the larvae by adding 30mg/kg of valerate, ciprionato, 17ß-estradiol and without hormone. / As técnicas de inversão sexual servem para destacar vantagens existentes sobre um dos sexos nas diferentes espécies de peixes, várias espécies de interesse comercial já foram analisadas sob este aspecto. Pesquisas recentes demonstram crescimento superior da fêmea jundiá em relação ao macho na fase adulta, mas não existem ainda dados de dosagens, princípios ativos hormonais, nem estágio de aplicação e desenvolvimento da espécie sob o efeito de tratamento de inversão sexual. Sendo assim, o objetivo desta pesquisa foi determinar níveis e princípios ativos hormonais femininos para a inversão sexual de larvas de jundiá avaliando o seu crescimento. Foram testados as inclusões de 10, 20, 40 e 50 mg/kg de ração de benzoato de estradiol e os princípios ativos do estradiol: valerato, ciprionato e 17ß-estradiol no nível de 30 mg/kg ração por 20 dias experimentais. A análise histológica das gônadas aos 40 dias experimentais demonstrou até 96% de fêmeas nas dosagens 20, 40 e 50 mg/kg de hormônio na ração. Larvas alimentadas com o maior nível de hormônio (50mg/kg de ração) apresentaram menores valores de peso em relação aos demais tratamentos. Não houve diferença significativa na sobrevivência larval entre os tratamentos. Testando os princípios ativos do estradiol aos sete dias, o peso médio das larvas da dieta sem hormônio foi maior que os demais tratamentos. Aos 21 dias do experimento somente o tratamento com ciprionato de estradiol apresentou peso inferior em relação aos demais tratamentos, os quais não tiveram diferenças entre si. Nos 40 dias do experimento o ganho de peso por ocasião da inclusão de 30mg/kg de ciprionato de estradiol foi superior aos demais. Não houve diferenças significativas entre os tratamentos na inversão sexual das larvas pela inclusão de 30mg/kg de valerato, ciprionato, 17ß-estradiol e sem hormônio.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:28:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseLVFS.pdf: 1728899 bytes, checksum: bc471c12c5b9a5facb5d37eff4d56da4 (MD5) Previous issue date: 2006-05-26 / Financiadora de Estudos e Projetos / The ions Ca2+, Mg2+ and the water pH influence the morphological and morphometric characters and also in the ionic regulation of fish. The objective of this study was describe the morphological and morphometric development pattern of Rhamdia quelen embryo and larvae; and to identify and determine the distribution of mucous and chloride cells in order to evaluate the effect of water pH and hardness in different Ca2+ and Mg2+ concentration. After fertilization the eggs were maintained at water pH 7.0 and 8.0 with three different Ca2+: Mg2+ concentrations (mg L-1): hardness 20 mg L-1 CaCO3 (5.0 Ca2+: 2.08 Mg2+, control) and hardness 70 mg L-1 CaCO3 (20 Ca2+:5.59 Mg2+ and 23 Ca2+: 2.08 Mg2+) at 24±1oC. The eggs (24 h post fertilization- hpf) and larvae (each 6 hours) 6 to 48 and 216 h post hatchery (hph) were collected to analyze the hatching rate, survival and larvae growth, morphological and morphometrics characters associates the vision (eye), feeding (development and functionality digestive tract) and swimming abilities (fins), the distribution of mucus and chloride cells, Na+/K+-ATPase activity enzyme, and whole body ionic content in embryo and larvae homogenate. The fertilization, hatching rate, post-hatch survival, weight and length (48 and 216h) were higher in pH 8,0 and did not show significance difference related with Ca2+: Mg2+ concentrations. These suggest that the pH 8.0 is indicated to Rhamdia quelen larvae culture. The increase of water hardness to 70 mg L-1 CaCO3, mainly 20 mg L-1 Ca2+ and 5,59 mg L-1 Mg2+ concentrations is recommended to both pH device improve the total body area larvae. The increase of hardness with 23 mg L-1 Ca2+, is not adequate for Rhamdia quelen larvae, as this Ca2+ concentration occurs an ionic unbalance Na+ and Cl- in both pHs. However, the morphology did not change by pH and Ca2+: Mg2+ concentrations used. The developmental stage between 6-216 hph was considered as critic period, device the development of osmorregulatory structures (gills, intestine and kidney) and the necessary changes to begin the exogenous feeding (open mouth, digestive tract, urogenital hole). Therefore, it is important information to researches and/or fisheries to improve the techniques and handlings for Rhamdia quelen early stages larvae culture to optimize the environmental conditions. The mucous cell density show a relation with water Ca2+ concentration, and it is suggest that beyond the possible adaptive responses, apparently the mucous cells number in silver catfish larvae (Rhamdia quelen) are influenced by hardness (Ca2+ increases) and water pH in the early phases. The larvae cultivated in pH 7.0 show high mucous cell and chloride cell number than in pH 8.0. The water hardness 70 mg L-1 CaCO3 (independently Ca2+ and Mg2+ concentration) changed the chloride cell density in the first hours post hatchery (6-12 h), and the number of these cells was lower in both pHs. Then, these results suggest that the mucous and chloride cell number can be modulated by ionic environmental condition in the early develpment of silver catfish larvae after hatchery. The thesis was organized in chapters, a general introduction and the objectives, and it was followed by chapter 1 about morphology and morphometry of embryo and larvae, chapter 2 about the distribution of mucous cells and chapter 3 about the distribution the chloride cells of silver catfish (Rhamdia quelen) embryo and it was with an integrated synthesis of study, the general conclusions and finish considerations. / Os íons Ca2+, Mg2+ e o pH da água de cultivo podem influenciar nas características morfológicas e morfométricas assim como na regulação iônica em peixes. Os objetivos deste estudo foram descrever o padrão morfológico e morfométrico básico do desenvolvimento de embriões e larvas de jundiá, Rhamdia quelen; identificar e avaliar a distribuição das células mucosas e de cloreto e verificar o possível efeito do pH e da dureza da água em diferentes concentrações de Ca2+ e Mg2+ sobre essas variáveis. Após a fertilização os ovos foram mantidos em água com pH 7,0 e 8,0 com 3 diferentes concentrações de Ca2+: Mg2+ na água (mg L-1): dureza 20 mg L-1 CaCO3 (5,0 Ca2+: 2,08 Mg2, controle) e dureza 70 mg L-1 CaCO3 (20 Ca2+:5,59 Mg2+ e 23 Ca2+: 2,08 Mg2+) a 24±1oC. Os ovos (24 horas após fertilização) e larvas (a cada 6 horas) de 6 a 48 e 216 h após eclosão foram coletados tanto para observação quanto para avaliação da percentagem de eclosão, sobrevivência e crescimento das larvas; dos caracteres morfológicos e morfométricos associados à visão (presença do olho), alimentação (desenvolvimento e funcionalidade do trato digestivo) e habilidade natatória (presença das nadadeiras) e também para identificação das células mucosas e de cloreto, atividade específica da enzima Na+/K+-ATPase e composição iônica corporal do homogeneizado de embriões e larvas. A percentagem de fertilização, eclosão, sobrevivência após eclosão, sobrevivência final, peso e comprimento (em 48 e 216h) foram maiores em pH 8,0 e não houve diferença significativa em relação às concentrações de Ca2+: Mg2+, sugerindo ser esse pH o indicado para o cultivo de larvas de Rhamdia quelen. O aumento da dureza da água para 70 mg L-1 CaCO3, principalmente nas concentrações de 20mg L-1 de Ca2+ e 5,59 mg L-1 de Mg2+ é recomendado por favorecer o aumento da área corporal total das larvas em ambos pHs. O aumento da dureza com a concentração de Ca2+ igual a 23 mg L-1 na água em ambos os pHs não parece ser o mais adequado para o cultivo das larvas de Rhamdia quelen, principalmente porque sugere um desequilíbrio ionoregulatório entre Na+ e Cl- nos pHs avaliados. Entretanto, a morfologia em função da seqüência de eventos temporais do desenvolvimento, não foi alterada pelos pHs 7,0 e 8,0 e nem pelas concentrações de Ca2+ :Mg2+ na água utilizada. O estágio de desenvolvimento entre 6-216 h após eclosão foi considerado como período crítico, devido ao desenvolvimento das estruturas relacionadas à osmorregulação (brânquias, intestino e rins) e as modificações necessárias à alimentação exógena (abertura da boca, trato digestivo e poro urogenital). Portanto, estas informações são importantes para pesquisadores e/ou produtores na determinação de técnicas de manejo nas fases iniciais de vida de Rhamdia quelen, contribuindo para o estudo biológico desta espécie em ambiente de cultivo. A densidade de célula mucosa apresentou uma relação com o Ca2+ na água, sugerindo que, além de uma possível resposta adaptativa, aparentemente existe uma influência osmorregulatória entre as células mucosas das larvas de jundiá (Rhamdia quelen) e a dureza da água principalmente em função do Ca2+, influenciada pelo pH da água nas fases larvais avaliadas. Ás larvas cultivadas em pH 7,0 sugerem maior número de células mucosas e de cloreto do que em pH 8,0. A dureza da água de 70 mg L-1 CaCO3 (independente das concentrações de Ca2+ e Mg2+) influenciou na densidade total de células de cloreto nas primeiras fases após eclosão (6- 12h), ocorrendo uma diminuição no número destas células em ambos os pHs. Portanto, há evidências de que o número de células mucosas e de cloreto é modulado nas larvas de jundiá de acordo com a concentração iônica do ambiente de cultivo nas primeiras fases após a eclosão. Esta tese foi organizada em forma de capítulos, contendo inicialmente uma introdução e objetivos do trabalho seguido pelo capítulo 1, referente à morfologia e morfometria de embriões e larvas, capítulo 2 referente à distribuição de células mucosas e o capítulo 3 a distribuição de células de cloreto em embriões e larvas de Jundiá (Rhamdia quelen). Para uma síntese geral integrada do trabalho esta tese foi finalizada com uma tese foi finalizada com conclusões gerais e considerações finais.