Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-21T13:36:14Z No. of bitstreams: 1 Paulo Cesar Vasco de Albuquerque Peixoto.pdf: 344249 bytes, checksum: dd3eefd193ab58cfcdb099090c32ef23 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-21T13:36:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paulo Cesar Vasco de Albuquerque Peixoto.pdf: 344249 bytes, checksum: dd3eefd193ab58cfcdb099090c32ef23 (MD5) Previous issue date: 2008-02-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In order to evaluate the effect of adding antioxidants Trolox and Glutathione reduced on the in vitro viability of dog cryopreserved sperm, semen samples were harvested from animals of the breeds French Bulldog (n=1), Basset Hound (n=2) e Rottweiler (n=1), through digital manipulation. Then proceeded to the evaluation macroscopic (color, appearance, volume) and microscopic (progressive motility, vigor, DNA, acrosome integrity and oxidative stress), followed by dividing the volume of semen on four aliquots, according to the experiments and experimental groups: Experimental 1 - G1 = Tris- Egg yolk (control group); G2 = Tris- Egg yolk + 200 uM of Trolox and G3 = Tris- Egg yolk + 300 uM of Trolox; Experimental 2 - G1 = Tris- Egg yolk (Control group); G2 = Tris- Egg yolk + 2 uM of GSH and G3 = Tris-Egg yolk + 5 uM of GSH; Experimental 3 - G1 = Tris- Egg yolk (control group); G2 = Tris- Egg yolk + 200 uM of Trolox; G3 = Tris- Egg yolk + 2 uM of GSH and G4 = Tris- Egg yolk + 200 uM of Trolox + 2 uM of GSH. The samples were packaged in straws (0.25 mL), cryopreserved in freezing machine (TK3000) and stored in liquid nitrogen (-196 oC). After thawing a 37 oC and incubation during 60 minutes, it was detected that MP, vigor and sperm with intact acrosomes had significant difference (P<0.05) only among incubation times, on the three experiments. In the Exp. 2, G2 and G3 groups had higher (P<0,05) percentage of sperm with oxidative stress. So, it can be concluded that the incubation time interfere on the in vitro viability of the sperm cells, independently of Trolox and GSH addition; and GSH, on the concentration of 2 and 5 uM, should be added to diluent of dog semen cryopreservation. / Com o objetivo avaliar o efeito da adição dos antioxidantes Trolox e Glutationa reduzida (GSH) na viabilidade in vitro de espermatozóides criopreservados de cães, amostras de sêmen foram colhidas de animais das raças Buldogue Francês (n=1), Basset Hound (n=2) e Rottweiler (n=1), através de manipulação digital. A seguir, procedeu-se à avaliação macroscópica (cor, aspecto, volume) e microscópica (motilidade progressiva, vigor, concentração, integridade do acrossoma e do DNA, e estresse oxidativo), e divisão do volume de sêmen em quatro alíquotas, de acordo com os experimentos e grupos experimentais. Experimento 1: G1 = Tris-gema (Grupo Controle); G2 = Tris-gema + 200uM de Trolox e G3 = Tris-gema + 300 uM de Trolox; Experimento 2: G1 = Tris-gema (Grupo Controle); G2 = Tris-gema + 2 uM de GSH e G3 = Tris-gema + 5 uM de GSH; Experimento 3: G1) Tris-Gema (Grupo Controle); G2) Tris-Gema + 200 uM de Trolox; G3) Tris-Gema + 2 uM de GSH; G4) Tris-Gema + 200 uM Trolox + 2 uM de GSH. As amostras foram envasadas em palhetas (0,25 mL), criopreservadas em máquina de congelação (TK 3000) e armazenadas em nitrogênio líquido (–196 oC). Após descongelação a 37 oC (0 min) e incubação durante 60 minutos, constatou-se que os resultados de MP, vigor e porcentual de espermatozóides com acrossomas íntegros evidenciaram diferença significativa (P<0,05) apenas entre os tempos de incubação, nos três experimentos. No Exp. II, os grupos experimentais (G2 e G3) apresentaram maior (P<0,05) porcentual de células sem estresse oxidativo. Conclui-se que o tempo de incubação interfere na viabilidade in vitro das células espermáticas, independente da adição de antioxidantes Trolox e/ou GSH; recomenda-se a adição do antioxidante GSH, nas concentrações de 2 uM e 5 uM, ao diluente utilizado para criopreservação do sêmen de cães.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-21T14:00:15Z No. of bitstreams: 1 Pedro Leopoldo Jeronimo Monteiro Junior.pdf: 660976 bytes, checksum: ed13725ce4ca27d354f333998ece958e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-21T14:00:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pedro Leopoldo Jeronimo Monteiro Junior.pdf: 660976 bytes, checksum: ed13725ce4ca27d354f333998ece958e (MD5) Previous issue date: 2011-02-18 / The development of reproductive biotechnology has contributed to increase production and productivity of bovine livestock, enabling a more effective increase of production of genetically superior animal. Multiple Ovulation Embryo Transfer (MOET) enables the production of more than one calf per female per year. With the introduction of sexed semen in commercial scale, MOET increased its use, due to limiting factors of in vitro fertilization, associated with embryo cryopreservation. Despite considerable advances in the sexing process, fertility rate obtained using this type of semen is still less than that with use of conventional unsorted semen. The aim of this research was to study the effect of semen (unsorted or sorted) and Artificial Insemination (AI) time in the fertilization rate of superovulated Bos taurus cattle. Donors (n=9) were treated with intravaginal progesterone releasing device plus 3 mg estradiol benzoate at random stage of estrous cycle (Day 0). Superstimulation treatments began on Day 4, with 200 mg FSH-p, administered in decreasing doses, during four days with two applications daily, at 12 h interval. Along with the fifth and sixth FSH dose were administered 0,150 mg d-Cloprostenol. The intravaginal device was removed on the D7,5 and on D8,5 25 mg of LH were administered. The AI’s were performed according to the type of semen (unsorted or X-sorted) and AI time: G1= unsorted semen and AI 12 and 24 h after received LH (Control Group); G2= X-sorted semen and AI 12 and 24 h after received LH; G3= X-sorted semen and AI 24 and 36 h after received LH. Each cow was submitted to three superovulatory treatments (cross-over experimental design). On D15 embryos were recovered by nonsurgical method, evaluated and classified. The percentage of fertilized ova to G1, G2 and G3 groups were 60.87% (42/69), 10.00% (9/90) and 36.54% (19/52), respectively, being G1 group superior (p<0,05) than G2 and G3 groups, while G3 was superior than G2 (p<0,05). It can be concluded that AI with sexed semen in superovulated Bos taurus cows can be administered 24 and 36 h after LH injection. However, further studies should be conducted to achieve fertilization rate similar to that obtained with unsorted semen. / O desenvolvimento da biotecnologia da reprodução vem contribuindo decisivamente para o aumento da produção e da produtividade na pecuária bovina, ao possibilitar a exploração mais efetiva de animais de valor genético superior. A transferência de embrião por multipla ovulação (MOET) possibilita a produção de mais de uma cria por fêmea por ano. Com a introdução do sêmen sexado em escala comercial, a MOET foi impulsionada, levando em consideração os fatores limitantes da fertilização in vitro, relacionados à criopreservação de embriões. Apesar dos consideráveis avanços no processo de sexagem espermática, a taxa de fertilidade obtida com uso deste tipo de sêmen ainda é menor do que aquela obtida com uso do sêmen convencional. Objetivou-se estudar o efeito do tipo de sêmen (convencional ou sexado) e do momento de inseminação artificial (IA) na taxa de fertilização de vacas Bos taurus superovuladas. Em dia aleatório do ciclo estral, correspondendo ao D0, as vacas (n=9) receberam um implante intravaginal de Progesterona (P4), associado a 3 mg de Benzoato de estradiol. No D4 teve início a estimulação folicular com 200 mg FSH-p, administrado em doses descrescentes, durante quatro dias, com duas aplicações diárias, a intervalo de 12 h. Juntamente com a 5ª e a 6ª dose de FSH foram administradas 0,150 mg d-Cloprostenol. O implante de P4 foi retirado no D7,5 e no D8,5 foram administrados 25 mg de LH. As inseminações foram realizadas de acordo com o tipo de sêmen (convencional ou sexado) e o momento das IAs: G1= sêmen convencional e IAs 12 e 24 h após a administração de LH (grupo controle); G2= sêmen sexado e IAs 12 e 24 h após a administração do LH; G3= sêmen sexado e IAs 24 e 36 h após a administração do LH. Cada fêmea foi submetida a três tratamentos superovulatório (cross-over). No D15 os embriões foram coletados, pelo método não-cirúrgico, avaliados e classificados. O percentual de estruturas fertilizadas para os grupos G1, G2 e G3, foram de 60,87% (42/69), 10,00% (9/90) e 36,54% (19/52), respectivamente, sendo o G1 superior (p<0,05) aos G2 e G3, enquanto o G3 foi superior (p<0,05) ao G2. Desta forma, conclui-se que a inseminação artificial com sêmen sexado em vacas Bos taurus superovuladas pode ser procedida 24 e 36 h após a administração do LH. Todavia, mais estudos devem ser realizados visando obter taxa de fertilização semelhante àquela obtida com sêmen convencional.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-03T14:12:07Z No. of bitstreams: 1 Sildivane Valcacia Silva.pdf: 2091723 bytes, checksum: a3f1920b1bf7539ac7a5652276f36b57 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-03T14:12:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sildivane Valcacia Silva.pdf: 2091723 bytes, checksum: a3f1920b1bf7539ac7a5652276f36b57 (MD5) Previous issue date: 2010-04-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this work was to evaluate the effect of addition of antioxidants superoxide dismutase (SOD), glutathione (GSH), catalase (CAT), vitamin E (Trolox), and the association between CAT and SOD to Tris egg-yolk ram semen freezing extender. We used five Santa Inês breed rams, with history of fertility, and the ejaculates obtained by artificial vagina. The pool of semen samples were diluted in Tris egg-yolk plus glycerol 5% supplemented with antioxidants, according to the experiments and experimental groups: Exp 1 (G1= control group, G2= 25 U/mL SOD; G3= 50 U/mL SOD; G4= 100 U/mL SOD; G5= 2 mM GSH; G6= 5 mM GSH and G7= 7 mM GSH) and Exp 2 (G1= control group, G2= 30 μM Trolox, G3= 60 μM Trolox, G4= 120 μM Trolox, G5= 25 U/mL CAT, G6= 50 U/mL CAT; G7= 100 U/mL CAT, G8= 100 U/mL SOD + 25 U/mL CAT), at concentration of 240 x 106 spermatozoa/mL. Semen was stored in straws (0.25 mL), frozen using an automated system and stored in liquid nitrogen (- 196 °C). After thawing (37 ºC/30 seconds), samples were analyzed for plasma membrane integrity (iMP), acrosome (IAC) and mitochondrial membrane potential (MMP) with fluorescent probes, kinematics sperm by CASA, and ultrastructure spermatozoa by transmission electron microscopy (TEM). In Exp 1, evaluation was performed in vivo, with the semen used in embryo transfer program. In the Exp 1, significant differences (P<0.05) were observed among groups for total motility (MT), straightness (STR) and oscillation index (WOB) and the GSH 7 mM was lower in MT and higher in STR, and GSH 5 e 7 mM groups were greater in WOB when compared to control, SOD 25 and 100 U/mL. Ultrastructure study showed acrosome better (P<0.05) preserved after freezing in SOD (50 and 100 U/mL) and GSH (5 and 7 mM), whereas mitochondria from control group together with 7 mM GSH suffered further damage. The plasma membrane remained preserved after freezing, regardless of group. For in vivo fertilization, SOD group gave better results than GSH (P>0.05). For Exp 2, CAT 100 U/mL showed a lower percentage (P<0.05) of spermatozoa with intact acrosome. Significant differences (P<0.05) were observed among groups on the kinematics sperm (progressive motility, linearity, straightness, oscillation index, straight line velocity and velocity average path), and were higher for Trolox (30 and 60 μM) and lower for CAT (50 and 100 U/mL). On ultrastructural evaluation, CAT (50 and 100 U/mL) had lower acrosome preservation (P<0.05) and CAT 25 U/mL was higher (P<0.05) than CAT 100 U/ml for the preservation of plasma membrane. Thus, we conclude that the addition of GSH at a concentration of 7mm and 50 CAT and 100 U/mL do not preserve the structural integrity of spermatozoa after cryopreservation; the addition of SOD 100 U/mL, Trolox 60 and 120 mM, and association of CAT 25 U/mL + SOD 100 U/mL provide better preservation of sperm membranes of ram after freezing. / Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da adição dos antioxidantes superóxido dismutase (SOD), glutationa reduzida (GSH), catalase (CAT), vitamina E (Trolox), e a associação entre CAT e SOD ao diluente Tris-gema de congelação do sêmen ovino. Foram utilizados cinco reprodutores ovinos da raça Santa Inês, com histórico de fertilidade, sendo os ejaculados obtidos pelo método de vagina artificial. Os ejaculados foram avaliados e submetidos à formação do pool, diluído em Tris-gema e glicerol 5%, acrescido de antioxidantes de acordo com o experimento e o grupo experimental: Exp. 1 (G1= Controle; G2= 25 U/mL de SOD; G3= 50 U/mL de SOD; G4= 100 U/mL de SOD; G5= 2 mM de GSH; G6= 5 mM de GSH; G7= 7 mM de GSH) e Exp. 2 (G1= Controle; G2= 30 μM de Trolox; G3= 60 μM de Trolox; G4= 120 μM de Trolox; G5= 25 U/mL de CAT; G6= 50 U/mL de CAT; G7= 100 U/mL de CAT; G8= 25 U/mL de CAT + 100 U/mL de SOD), na concentração de 240 x 106 espermatozoides/mL. O sêmen foi acondicionado em palhetas (0,25 mL), congelado utilizando sistema automatizado e armazenado em nitrogênio líquido (- 196 ºC). Após descongelação (37 oC/30 segundos), as amostras foram submetidas à análise de integridade da membrana plasmática (iMP), acrossoma (iAc) e potencial de membrana mitocondrial (PMM) com sondas fluorescentes; cinética espermática, pelo CASA; e ultraestrutura dos espermatozoides, por microscopia eletrônica de transmissão. No Exp. 1, foi realizada avaliação in vivo, com o sêmen utilizado em programa de transferência de embriões. Diferenças significativas (P<0,05) foram observadas entre grupos para motilidade total (MT), retilinearidade (STR) e índice de oscilação (WOB), sendo o GSH 7mM inferior (P<0,05) na MT e superior na STR, e os grupos GSH 5 e 7 mM commaior (P<0,05) WOB em comparação ao controle, SOD 25 e 100 U/mL. Na análise ultraestrutural, evidenciou-se que o acrossoma foi melhor preservado (P<0,05), pós-congelação, nos grupos SOD 50 e 100 U/mL e GSH 2 e 5 mM, enquanto que o acrossoma e as mitocôndrias do grupo Controle, juntamente com o GSH 7 mM, sofreram maiores danos (P<0,05). Para a fertilização in vivo, o grupo SOD conferiu resultados numericamente superiores aos grupos controle e GSH. Para o Exp. 2, o CAT 100 U/mL apresentou menor porcentual (P<0,05) de espermatozoides com acrossoma íntegros. Diferenças significativas (P<0,05) foram observadas entre grupos na cinética espermática (motilidade progressiva, linearidade, retilinearidade, índice de oscilação, velocidade em linha reta e velocidade média do percurso), sendo superiores para os grupos Trolox 30 e 60 μM e inferiores para os grupos CAT 50 e 100 U/mL. Na avaliação ultraestrutural, os grupos CAT 50 e 100 U/mL apresentaram menor preservação (P<0,05) do acrossoma, enquanto o CAT 25 U/mL foi superior (P<0,05) ao CAT 100 U/mL para a preservação da membrana plasmática e o SOD 25 U/mL foi inferior (P<0,05) aos demais grupos na preservação da mitocôndria. Assim, conclui-se que a adição de GSH na concentração de 7mM e CAT 50 e 100 U/mL não preservam a integridade estrutural de espermatozoides ovinos pós-criopreservação; a adição de SOD 100 U/mL, Trolox 60 e 120 μM, e a associação de CAT 25 U/mL + SOD 100 U/mL proporcionam maior preservação das membranas de espermatozóides congelados de ovinos.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-04-26T14:22:10Z No. of bitstreams: 1 Francisco da Silva Alves Pinheiro Neto.pdf: 921233 bytes, checksum: b1c400716d08c4c8eda9b498ec02ec89 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-26T14:22:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Francisco da Silva Alves Pinheiro Neto.pdf: 921233 bytes, checksum: b1c400716d08c4c8eda9b498ec02ec89 (MD5) Previous issue date: 2015-04-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The aim of this study was to compare the results of different protocols of Timed Artificial Insemination (TAI) using sexed semen on reproductive effciency in Girolando cattle. Sixty two heifers were used, being clinically health with a body condition between 2,5 and 3,5, divided randomly into 03 groups: control (n = 21), FSH / LH (n = 21) and eCG (n = 20). All animals received the same hormonal treatment to synchronize estrus, consisting in placing on D0 (5:00 PM) intra-vaginal device with 750 mg progesterone (P4), and 2 mg of estradiol benzoate (EB). In D8 (5:00 PM) device were removed and 2 mL of prostaglandin (0.500 mg cloprostenol) was administered. On D9 all animals received 1 mg of estradiol benzoate (EB) (5:00 PM), and were inseminated on D11 at 5:00 PM, 60 hours after device removal. On D8, heifers were randomly assigned into 3 groups. Control group without FSH / LH and eCG; Group FSH / LH - 25 IU FSH and LH administered after device removal, Group eCG - 300 IU eCG administered after device removal. Heifers were examined by ultrasonography 35 days after AI for pregnancy diagnosis and 45 days or evaluation of embryonic death. The pregnancy rate for control groups, FSH / LH and eCG were respectively 19%, 28% and 35%. Data were analyzed by chi-square, with 5% significance level. No signicant difference was seen between-groups. When it was compared control group and eCG Group in heifers that were not cycling there was a significant difference in pregnancy rate. It is concluded that in cycling animals, eCG and FSH / LH does not interfere with pregnancy rates, however in those heifers that were not cycling or had smaller than 8 mm follicles, eCG had a favorable effect thereby increasing substantially the results. / O objetivo deste trabalho foi comparar o resultado de diferentes protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF), utilizando-se sêmen sexado sobre a eficiência reprodutiva em novilhas Girolando. Foram utilizadas 62 novilhas clinicamente hígidas e com escore corporal entre 2,5 e 3,5 , divididas aleatoriamente em 03 grupos: controle (n=21), FSH/LH (n=21) e eCG (n=20). Todos os animais receberam o mesmo tratamento hormonal para sincronização do estro, consistindo na colocação de dispositivo intra-vaginal com 750 mg de progesterona (P4) no D0 às 17:00 horas e aplicação de 2 mg de benzoato de estradiol (BE). No D8 às 17:00 horas foram retirados os implantes e aplicado 2 ml de prostaglandina (0,500 mg cloprostenol). No D9 todos os animais receberam 1 mg de benzoato de estradiol (BE) ás 17:00 horas. E foram inseminadas no D11 às 5:00 horas, isto é 60 horas após retirada do implante. No D8, as novilhas foram distribuídas aleatoriamente em 3 Grupos. Grupo controle sem FSH/LH e eCG, Grupo FSH/LH – 25 UI de FSH e LH aplicados na retirada do implante, Grupo eCG – 300 UI de eCG aplicados na retirada do implante. As novilhas foram examinadas por ultrassonografia 35 dias após a IA para diagnóstico de gestação e aos 45 dias para avaliação de perda embrionária. O percentual de prenhez para os grupos Controle, FSH/LH e eCG foram respectivamente 19%, 28% e 35%. Os dados foram avaliados pelo teste do Qui-quadrado, com nível de significância de 5%. Não houve diferença significativa entre os grupos. Ao avaliarmos a taxa de prenhez entre o Grupo Controle e o Grupo eCG em novilhas que não estavam ciclando houve uma diferença significativa. Conclui-se que em animais cíclicos, a eCG e o FSH/LH não interferiram nas taxas de prenhez. Entretanto quando comparado com os animais acíclicos ou que tinham folículos menores que 8 mm, a eCG teve um efeito favorável melhorando substancialmente os resultados.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-05-05T15:17:26Z No. of bitstreams: 1 Luciana de Barros Carvalho Beltrao.pdf: 2236019 bytes, checksum: 93191d79c75ec90a537294288eba2d9d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-05T15:17:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luciana de Barros Carvalho Beltrao.pdf: 2236019 bytes, checksum: 93191d79c75ec90a537294288eba2d9d (MD5) Previous issue date: 2013-10-04 / Ovine are characterized as seasonal poliestrous animals, where reproductive activity is intensified in certain times of the year, with interdependence of a greater or lesser exposure to sunlight or photoperiod. Although sperm production of rams stay stead the whole year, it is well known that there is a drop of seminal quality during the period of non-reproductive breeding season mainly in temperate regions where such photoperiod effect is punctual. However, few studies have been devoted to the influence of photoperiod on reproduction of sheep in tropical regions where variability of photoperiod is shorter. The objective of this experiment was to test the effectiveness of exogenous melatonin on seminal quality improvement in hair sheep at Agreste Meridional Region of Pernambuco State. Eight Santa Inês hair sheep were divided into 2 groups of 4 animals, a treatment group (TG), subjected to exogenous melatonin subcutaneous implants (Melovine ®, CEVA), and a control group (CG) subjected to subcutaneous application of 1 mL of saline as a placebo. Both groups were kept in barns with a mean luminosityof 11.26 hrs/day, for 120 days. During this period, it was evaluated the effect of exogenous melatonin on scrotal circumference, sperm concentration and serum concentrations of testosterone and melatonin by nightly and morning blood sample collections to establish influence in the concentrations of these hormones, correlating with the effect of seasonality. Data were compared using analysis of variance (ANOVA). The contrasts between means were evaluated through Student-Newman-Keuls test. There was a significant increase in serum concentration of melatonin in TG compared to CG, on the first 3 morning and evening collections (p < 0.05). No differences were observed in the 2 latest. Serum concentration of melatonin has demonstrated a night/day rhythm characteristic in both TG and CG groups with a difference in the mean concentration ofCG melatonin in the morning (3.9 pg/mL) compared with the night sample (59.56 pg/mL), however, this difference was not observed in TG (572.45 pg/mL vs 939.52 pg/mL). An increased serum concentration of melatonin was directly proportional to the increase in scrotal circumference. Also, a significant increase was observed in sperm concentration in TG 45 days after the placement of implants. Serum testosterone concentration increased significantly in TG 45 days after placement of the implants when it began a decline in concentration of melatonin. The results of this study demonstrated that treatment with exogenous melatonin in hair sheep at tropical region had a positive effect on scrotal circumference, on sperm concentration and on serum testosterone concentration suggesting that even in tropical regions where there is not a marked difference in photoperiod, melatonin plays a role in the reproductive processes. / Ovinos são caracterizados como animais poliéstricos estacionais, onde a atividade reprodutiva está intensificada em determinadas épocas do ano, com interdependência de uma maior ou menor exposição à luz solar ou fotoperíodo. Apesar da produção espermática de carneiros se manter por todo ano, é sabido que há uma queda da qualidade seminal durante o período de estação não reprodutiva principalmente em regiões de clima temperado onde esse efeito do fotoperíodo é pontual. Entretanto, poucos estudos têm se dedicado à influência do fotoperíodo na reprodução de ovinos em regiões de clima tropical onde a variabilidade do fotoperíodo é menor. O objetivo deste experimento foi testar a eficácia do uso de melatonina exógena na melhoria da qualidade seminal em carneiros deslanados no Agreste Meridional do Estado de Pernambuco. Oito carneiros da raça Santa Inês foram divididos em 2 grupos de 4 animais, um grupo tratamento (GT), submetidos a implantes subcutâneos de melatonina exógena (Melovine®, CEVA), e um grupo controle (GC) , submetidos a solução salina 1 mL (placebo) subcutâneo, foram mantidos em apriscos com luminosidade média de 11h26’h/dia, por 120 dias. Durante esse período foi avaliado o efeito da melatonina exógena na circunferência escrotal, concentração espermática e concentrações séricas de testosterona e melatonina através de coletas quinzenais no horário matutino e vespertino para estabelecer a influência nas concentrações desses hormônios, correlacionando assim, com a ação da sazonalidade. Os dados foram comparados através de análise de variância (ANOVA). Os contrastes entre médias foram avaliados através do método de Student-Newman-Keuls. Houve um aumento significativo na concentração sérica de melatonina no GT comparado ao GC, nas 3 primeiras coletas matutina e vespertina (p<0.05). Nas 2 últimas coletas não foi observado diferenças. A concentração sérica de melatonina demonstrou um ritmo característico de noite/dia em ambos grupos GT e GC com diferença significativa na concentração média no GC da melatonina na manhã (3.9 pg/mL) comparado com a amostra da noite (59.56 pg/mL), entretanto, essa diferença não foi observada no GT (572.45 pg/mL vs 939.52 pg/mL). O aumento da concentração sérica de melatonina foi diretamente proporcional ao aumento da circunferência escrotal. Foi observado ainda, aumento significativo na concentração espermática no GT 45 dias após a colocação dos implantes. A concentração de testosterona sérica aumentou significativamente no GT 45 dias após a colocação dos implantes quando iniciou uma queda na concentração de melatonina. Os resultados deste trabalho demonstraram que o tratamento com melatonina exógena em carneiros deslanados em região tropical teve um efeito positivo no aumento da circunferência escrotal, no aumento da concentração espermática e no aumento da concentração sérica de testosterona sugerindo que mesmo em regiões tropicais onde não há uma diferença marcante de fotoperíodo, a melatonina participa ativamente dos processos reprodutivos.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-11-07T12:26:07Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 322344 bytes, checksum: 13bb225c59e8db9b27ea88b70dc244bd (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-07T12:26:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 322344 bytes, checksum: 13bb225c59e8db9b27ea88b70dc244bd (MD5) Previous issue date: 2018-07-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A raça Nelore é a principal raça utilizada na pecuária brasileira, sendo a de maior rebanho comercial do mundo. Com a utilização das técnicas reprodutivas, principalmente a inseminação artificial, torna-se importante estimar parâmetros genéticos para as características reprodutivas de touros, a fim de elucidar mais as características e vislumbrar a possibilidade de sua inclusão como critério de seleção. Ao todo 17 características divididas em características biométricas do testículo, características físicas e morfológicas do sêmen e características vesiculares tiveram seus parâmetros genéticos estimados neste trabalho para uma população de touros Nelore com idade de 18 a 36 meses. Utilizou-se o modelo animal uni e bi característico para a estimação dos componentes de (co)variância. O grupo de contemporâneos foi considerado como efeito fixo e a idade como co-variável. Dentre as estimativas de herdabilidade, é importante ressaltar que perímetro escrotal, característica biométrica mais avaliada em touros, apresentou herdabilidade de 0,47, sendo esse valor similar ao encontrado para todas as outras características biométricas (0,34 a 0,48). Já dentre as características físicas e morfológicas, houve maior discrepância entre as estimativas de herdabilidade encontradas (0,05 a 0,49) e, dentre elas, é pertinente destacar a motilidade espermática (0,07) que afeta diretamente a fertilidade do touro e as características morfológicas, defeitos espermáticos maiores, menores e totais (0,49, 0,17 e 0,39). Em relação as correlações genéticas estimadas, nota-se correlação alta e favorável entre as características biométricas do testículo, sugerindo que apenas uma delas pode ser usada como critério de seleção. Entre todas as características, pode-se observar correlações variando de baixas a altas, porém sempre favoráveis. Assim, os resultados evidenciam que a escolha do perímetro escrotal como critério de seleção para fertilidade de machos é bastante acertada, por provocar mudanças favoráveis nas características de qualidade do sêmen. / Nelore is the main breed used in Brazilian cattle production, being the largest commercial herd in the world. The use of reproductive techniques, especially artificial insemination, increase the importance of genetic parameters estimation for bull’s reproductive traits. Genetic parameters increase the knowledge about the trait and provides information about their use as selection criteria. Seventeen traits divided into testis biometry, physical and morphological semen traits and vesicular traits had their genetic parameters estimated in this study for a Nelore bulls population aged 18 to 36 months. Single and multi-trait animal models were used to estimate (co)variance components. Contemporary group was used as fixed effect and age as a co-variable. Among the estimates of heritabilities, it is important to emphasize that the scrotal circumference, which is the most frequently biometric trait evaluated in bulls, had heritability of 0.47. This value was similar to the findings for all other biometric traits (0.34 to 0.48). Among the physical and morphological traits, there was high variability between heritability estimates (0.05 to 0.49). Among them, it can be highlighted the sperm motility heritability (0.07), which is a trait that directly affects the bull fertility. Across semen morphological traits, the major, minor and total sperm defects exhibited heritability 0.49, 0.17 and 0.39, respectively. The genetic correlations were high and favorable between biometric testis traits. This result, suggest that only one trait can be used as a selection criterion. The genetic correlations between all traits varied from low to high, but they were favorable. Thus, the results show that the scrotal circumference is an appropriate selection criteria for male fertility, since it can cause favorable changes in semen quality traits.

Submitted by MARCOS LEANDRO TEIXEIRA DE OLIVEIRA (marcosteixeira@ufv.br) on 2018-11-12T11:31:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1597909 bytes, checksum: 6fb796bc17a56a608f0d6023bb14284b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-12T11:31:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1597909 bytes, checksum: 6fb796bc17a56a608f0d6023bb14284b (MD5) Previous issue date: 2018-03-21 / Foram realizados dois diferentes experimentos com o sêmen de suínos da raça Piau: o primeiro referiu-se à criopreservação seminal e o segundo, ao efeito da sazonalidade no perfil proteômico do plasma seminal e nas características físicas e morfológicas do sêmen. No primeiro experimento, foram utilizadas vinte coletas de cinco machos. O extensor de congelamento foi baseado em extensor de gema de lactose e ovo, adicionado a 2 % de glicerol, 3 % de dimetilacetamida. A adição de conjugados de colesterol carregados com ciclodextrina foi realizada após centrifugação, quando o sêmen foi diluído com o extensor de resfriamento. Quatro grupos foram submetidos ao seguinte tratamento: sem adição (grupo 1); 1,5 mg de colesterol carregado com ciclodextrina / 120x10 6 espermatozoides (grupo 2); 1,5 mg de colestanol carregado com ciclodextrina / 120x10 6 espermatozoides (grupo 3); 1,5 mg de esperma desmosterol carregado com ciclodextrina / 120x10 6 espermatozoides (grupo 4). Para analisar a qualidade pós-descongelamento, foram verificadas a motilidade e a morfologia espermática. Além disso, para verificar a viabilidade dos espermatozoides, foram utilizados o teste hiposmótico, a coloração supravital e o teste fluorescente. Os valores médios registrados para a motilidade espermática total imediatamente após a descongelação foram de 54,5 ± 5,8, 55,5 ± 5,3, 53,7 ± 6,7 e 52,5 ± 6,6 %, respectivamente, para os grupos de um a quatro, sem diferença entre eles (p> 0,05). Em relação ao teste fluorescente, os resultados foram 28,3 ± 13,2, 26,9 ± 12,2, 22,2 ± 11,4 e 32,0 ± 15,3 %, respectivamente, para os grupos de um a quatro, também sem diferença entre os grupos (p> 0,05). Da mesma forma, testes complementares para avaliação da integridade e funcionalidade da membrana plasmática não mostraram diferença entre os tratamentos (p> 0,05). Em conclusão, o uso de conjugados de colesterol carregados com ciclodextrina adicionados à membrana plasmática do esperma não demonstrou qualquer efeito aditivo no aumento e / ou manutenção da motilidade do espermatozoide. No experimento 2, foram utilizados dez varrões da raça Piau, aprovados previamente como férteis por exame andrológico e as coletas de sêmen foram realizadas mensalmente para análise, durante o período de um ano, avaliando motilidade, vigor, morfologia, concentração/ mL e concentração total. O perfil protéico do plasma seminal foi obtido por eletroforese bidimensional, as análises de imagem dos géis foram realizadas pelo programa ImageMaster 2D Platinum 6,0 (GE Healtcare®) e a identificação das proteínas foi por espectrometria de massas usando MALDI-TOF/TOF, com o software Mascot Daemon para a busca em banco de dados. A validação das proteínas identificadas entre os tratamentos foi realizada pelo programa SCAFOLD (95 %). No presente estudo, observou-se que as estações climáticas do ano influenciaram a qualidade do sêmen, e que no inverno houve maior alteração na morfologia espermática em relação ao verão, com mais defeitos espermáticos maiores e totais (p<0,05), porém esses valores ainda se mostram dentro dos padrões de qualidade seminal preconizados para a espécie. Em relação à motilidade espermática progressiva, vigor e concentração espermática, não sofreram influência das estações climáticas do ano (p>0,05). Importantes proteínas do plasma seminal de varrões da raça Piau foram identificadas e validadas, destacando-se as espermadesinas. Foram reportadas correlações significativas entre as características seminais e alguns spots. Ao longo das estações do ano, dez spots foram observados como diferencialmente abundantes. / Two different experiments were carried out on the semen of Piau pigs: the first one referred to seminal cryopreservation and the second one, to the effect of seasonality on the proteomic profile of seminal plasma and on the physical and morphological characteristics of semen. In the first experiment, twenty samples of five males were used. The freezer extender was based on lactose and egg yolk extender, added to 2 % glycerol, 3 % dimethylacetamide. The addition of cyclodextrin loaded cholesterol conjugates was performed after centrifugation, when the semen was diluted with the cooling extender. Four groups were submitted to the following treatment: no addition (group 1); 1.5 mg of cyclodextrin-loaded cholesterol / 120x10 6 spermatozoa (group 2); 1.5 mg of cyclodextrin-loaded cholestanol / 120x10 6 spermatozoa (group 3); 1.5 mg of cyclodextrin-loaded desmosterol sperm / 120x10 6 spermatozoa (group 4). In order to analyze the post-thawing quality, the sperm motility and morphology were verified. In addition, to verify the viability of the spermatozoa, hyposmotic test, supravital staining and fluorescent test were used. The mean values recorded for the sperm motility immediately after thawing were 54.5 ± 5.8, 55.5 ± 5.3, 53.7 ± 6.7 and 52.5 ± 6.6 % , respectively, for groups one to four, with no difference between them (p> 0.05). Regarding the fluorescent test, the results were 28.3 ± 13.2, 26.9 ± 12.2, 22.2 ± 11.4 and 32.0 ± 15.3 %, respectively, for the groups one to four, also with no difference among groups (p>0.05). Likewise, complementary tests to assess the integrity and functionality of the plasma membrane showed no difference among treatments (p> 0.05). In conclusion, the use of cyclodextrin-loaded cholesterol conjugates added to the plasma sperm membrane did not demonstrate any additive effect on the increase and / or maintenance of sperm motility. In the experiment 2, ten boars of the Piau breed, previously approved as fertile by andrological examination, were used and the semen collections were carried out monthly for analysis during one year, evaluating motility, vigor, morphology, concentration / mL and total concentration. The protein profile of the seminal plasma was obtained by bidimensional electrophoresis, the image analyzes of the gels were performed by ImageMaster 2D Platinum 6.0 program (GE Healtcare®) and the identification of the proteins was obtained by mass spectrometry using MALDI-TOF/TOF, with Mascot Daemon software for database search. The validation of the proteins identified among the treatments was performed by the SCAFOLD program (95 %). In the present study, it was observed that the seasons of the year influenced semen quality, and that in winter there was a greater change in sperm morphology than in summer, with more major and total sperm defects (p <0.05), however these values are still within the seminal quality standards recommended for the species. Regarding progressive sperm motility, vigor and sperm concentration, they were not influenced by climatic seasons of the year (p>0.05). Important proteins of the seminal plasma of Piau boars were identified and validated, especially the spermadines. Significant correlations were reported between seminal characteristics and some spots. Throughout the seasons, ten spots were observed as differentially abundant.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Henrique T Ferraz.pdf: 1183822 bytes, checksum: ed042db9d31cddd0733900fbcb2fe0d7 (MD5) Previous issue date: 2011-12-21 / Desenvolveu-se este estudo com o intuito de verificar as associações entre a forma dos testículos, as alterações histológicas no parênquima testicular e a qualidade seminal. Quarenta e dois animais, entre 30 e 36 meses de idade e que seriam castrados para terminação, tiveram o sêmen coletado. Logo após o procedimento cirúrgico amostras de três porções (proximal, intermediária e distal) de seus testículos foram colhidas e fixadas em formol 10%. Realizou-se a avaliação andrológica destes animais e a preparação de lâminas histológicas para avaliação do parênquima testicular. Foram avaliados: forma testicular (FORM); movimento massal (MMAS); vigor espermático (VIG); motilidade individual progressiva (MOT); concentração espermática (CONC); defeitos espermáticos maiores (DEFMAI), menores (DEFMEN) e totais (DEFTOT); distância média entre os túbulos seminíferos (DISTMED); espessura média do epitélio seminífero (ESPMED); e percentagem média de colágeno intersticial (COLMED). O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado. Animais com testículo classificado como longo apresentaram menor DISTMED, maior ESPMED e menor COLMED, além de valores superiores quanto aos aspectos físicos e morfológicos do ejaculado. A DISTMED foi menor e a ESPMED foi maior na porção mais distal do testículo. As correlações de DISTMED, ESPMED e COLMED com os DEFTOT foram, respectivamente, 0,51; -0,39; e 0,29. Assim, pode-se concluir que: 1) testículos de forma alongada sofrem menos lesões teciduais no parênquima testicular, apresentando maior produção e melhor qualidade seminal; 2) as porções distais dos testículos demonstram menos lesões ao tecido espermático; e 3) as menores distâncias entre os túbulos seminíferos, a maior espessura do epitélio seminífero e a menor concentração de colágeno intersticial nos testículos estão relacionadas à melhoria da qualidade seminal.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2015-02-02T12:38:54Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Dayane Regina Lenz - 2014.pdf: 1740475 bytes, checksum: d7938a3de3e5450796e3a70fadfb2c8b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-02-05T12:25:41Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Dayane Regina Lenz - 2014.pdf: 1740475 bytes, checksum: d7938a3de3e5450796e3a70fadfb2c8b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-05T12:25:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Dayane Regina Lenz - 2014.pdf: 1740475 bytes, checksum: d7938a3de3e5450796e3a70fadfb2c8b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-03-10 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / The objective of the study is to characterize the semen of tambaqui Colossoma macropomum during the breeding season and to evaluate the efficiency of four cryoprotectants added to the extender on sperm cryopreservation of tambaqui and to define the best protocol for thawing. Three semen samples were collected at regular intervals from ten males (pool). In the first stage of the experiment the characterization of semen in natura was performed and it was subjected to the routine analysis in optical microscopy: motility, vigor, life time and counting the number of spermatozoa. In the second stage of the experiment cryopreservation of semen was performed. The cryoprotectants glycerol, dimethylsulfoxide (DMSO), dimethylformamide (DMF) and methanol were tested at a ratio of 10.0%. For the assessment of viability and comparison of treatments testing of post-thaw samples in vivo was performed in three different protocols for each cryoprotectant, in thawing time 15, 30 and 45 seconds, 30°C temperature, totalizing 12 treatments with five replicates each. Quantitative variables were subjected to analysis of variance (ANOVA) and Tukey test while qualitative variables were subjected to the Freedman test with 0.05 significance. No significant differences (p> 0.05) were observed for most of the evaluated parameters. The sperm concentration was higher in the first sampling (14.54 billion sperm /mL) and the lifetime decreased at the end of the experiment. The cryoprotectant medium containing methanol and thawing for 30 s was the treatment that showed the best results fertilization (77.65%/). / Objetivou-se com o trabalho caracterizar o sêmen detambaqui durante a época reprodutiva e avaliar a eficiência de quatro crioprotetores adicionados ao meio diluidor na criopreservação do sêmen de tambaqui (Colossoma macropomum) e definir o melhor protocolo de descongelamento. Foram realizadas três coletas com intervalos regulares de amostras de sêmen (pool) de dez reprodutores. Na primeira etapa do experimento foi realizada a caracterização do sêmen in natura, sendo submetido a análises de rotina em microscopia óptica: motilidade, vigor espermático, tempo de vida e contagem do número de espermatozoides. Na segunda etapa do experimento foi realizada a criopreservação do sêmen. Os crioprotetores testados foram: glicerol, dimeltilsulfóxido (DMSO), dimetilformamida (DMF) e metanol, na proporção de 10,0%. Para a avaliação da viabilidade e comparação dos tratamentos foi realizado o teste in vivo das amostras pósdescongelamento em três protocolos diferentes para cada crioprotetor, em que foram testados os tempos de descongelamento de 15, 30 e 45 s, na temperatura de 30ºC, totalizando 12 tratamentos com cinco repetições. As variáveis quantitativas foram submetidas à análise de variância (ANOVA) e teste de Tukey e as variáveis qualitativas ao teste de Friedman, com significância de 0,05. Não foram observadas diferenças significativas (p>0,05) para a maioria dos parâmetros avaliados. A concentração espermática foi maior na primeira coleta (14,54 bilhões de espermatozoides/mL) e o tempo de vida diminuiu ao final do experimento. O meio crioprotetor contendo metanol com descongelamento por 30 s foi o tratamento que apresentou os melhores resultados de fertilização (77,65%).

Os ácidos graxos poliinsaturados garantem a fluidez à membrana plasmática do espermatozóide. No entanto, as duplas ligações presentes, os tomam mais susceptíveis aos efeitos nocivos da peroxidação lipídica que produz grande quantidade de radicais livres. A adição do antioxidante Glutationa reduzida (GSH) poderia conferir proteção aos espermatozóides de ovinos submetidos a criopreservação contra danos, em membranas plasmáticas, acrossomais, DNA e atividade mitocondrial causados pelo estresse oxidativo. O objetivo do presente experimento foi: avaliar se a GSH protege os espermatozóides ovinos criopreservados contra danos causados pelo estresse oxidativo. Foram colhidos ejaculados de quatro carneiros adultos. As amostras foram avaliadas após a criopreservação (TI). As análises convencionais foram: concentração, motilidade, vigor e morfologia. As análises funcionais foram: integridade de membrana, integridade acrossomal, integridade de cromatina e atividade mitocondrial. O sêmen foi criopreservado utilizando o diluidor Tris-gema-critrato suplementado com GSH (controle, 1, 5 e 10mM). Uma alíquota de cada amostra foi submetida ao protocolo de peroxidação lipídica induzida e subseqüente quantificação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico(TBARS). As análises estatísticas foram realizadas utilizando o Sistema SAS para Windows. Os resultados indicam que não houve efeito do tratamento com GSH sobre as variáveis avaliadas pelos testes convencionais. A GSH diminuiu a proporção de acrossomas íntegros. Amostras tratadas com 5mM de GSH apresentaram menor percentual de células com membranas íntegras quando comparadas com as amostras controle e aquelas tratadas com 10 mM; , o percentual de células sem atividade mitocondrial foi influenciado pela GSH também não houve de efeito nas TBARS. As amostras do grupo controle foram mais susceptíveis à desnaturação da cromatina. Em conclusão, a adição do antioxidante Glutationa reduzida (GSH) confere proteção ao DNA e à atividade mitocondrial de espermatozóides de ovinos. / It is well known that sperm is extremely susceptible to the oxidative stress. This occurs especially due to the high content of poly-unsaturated fatty acids (PUF As) in its plasma membrane. The PUF As provide the necessary fluidity to the plasma membrane, which allows the sperm to move. However the double bonds present in those fatty acids are more susceptible to the oxidative stress. Therefore, sperm is highly dependent of the extra-celluIar environment antioxidant protection. Studies in human indicate that cryopreservation may lead to damages to the sperm due to the oxidative stress. The objective of this experiment was to study if the antioxidant glutathione (GSH) may protect ovine cryopreserved sperm against the damages caused by the oxidative stress. Semen samples of four rams were collected using an artificial vagina. Samples were then cryopreserved using Tris-egg yolk extender supplemented with different concentrations of reduced glutathione (control, 1, 5 and 10 mM). After thawing, samples were evaluated using conventional (motility and vigor) and functional tests (membrane integrity and mitochondrial activity). An aIiquot of each thawed sample was submitted to the protocol of induced lipid peroxidation using ascorbate (20 mM) and ferrous sulphate (4 mM), with the further measurement of the tiobarbituric acid reactive substances (TBARS), as an index of oxidative stress. This technique aims to evaIuate sperm oxidative status by its susceptibility to the lipid peroxidation. Statistical analysis was performed using SAS system for Windows. The results indicate that there was no effect of GSH on the variables assessed by conventional tests. GSH decreased the proportion of intact acrosomes. Samples treated with 5 mM GSH showed a lower percentage of cells with intact membranes when compared with control sampIes and those treated with 10 mM, the percentage of cells with mitochondriaI activity was affected by GSH and there was also no effect on TBARS. Samples from the control group were more susceptible to denaturation of chromatin. In conclusion, the addition of the antioxidant Glutathione (GSH) offers protection to DNA and mitochondrial activity of ovine sperm.