OBJETIVOS: Avaliar a eficácia de um meio de criopreservação sintético para sêmen humano contendo fosfolipídios e antioxidantes (ANTIOX-PL, Invitra/Supera Parque de Inovação e Tecnologia de Ribeirão Preto) em comparação com o meio convencional à base de gema de ovo (TEST-yolk buffer, Irvine Scientific), mensurada pelos parâmetros in vitro de motilidade progressiva dos espermatozoides e índice de fragmentação do DNA espermático. MÉTODOS: Ensaio clínico de não-inferioridade. Foram recrutados 63 homens (julho de 2015 a outubro de 2016), com idade entre 18 a 50 anos, amostra seminal com volume >= 1,5 mL, concentração de espermatozoides >= 15 x 106/mL e motilidade progressiva >= 32%. O sêmen foi dividido em duas alíquotas com volumes iguais, randomizadas aleatoriamente nos grupos estudo (ANTIOX-PC) e controle (TEST-yolk buffer) para receberem os meios de criopreservação. A avaliação dos desfechos foi cega para atribuição de grupo, verificados antes do congelamento e após o descongelamento. Os dados foram comparados pelo teste t pareado pelo SAS versão 9.3; ?=0,05. RESULTADOS: A motilidade progressiva (p=0.83) e o índice de fragmentação do DNA (p=0.32) analisados nas amostras de sêmen congeladas com o meio A (ANTIOXPL) não apresentaram diferença significativa em relação às que foram congeladas com o meio B (TEST-yolk buffer). A concentração (p=0.02), a concentração total (p=0.02), o percentual de espermatozoides I (p<0.01) e a vitalidade (p<0.01) foram superiores nas amostras congeladas com o meio B (TEST-yolk buffer). A motilidade não progressiva (p<0.01) e a motilidade total (p<0.01) foram superiores nas amostras congeladas com o meio A (ANTIOX-PC). E a morfologia (p=0.07) não apresentou diferença significativa entre os meios de criopreservação. CONCLUSÕES: Em relação aos desfechos primários analisados, motilidade progressiva dos espermatozoides e índice de fragmentação do DNA espermático, a nova formulação proposta neste projeto de pesquisa, ANTIOX-PC, mostrou-se não inferior ao meio convencional, TEST-yolk buffer. / OBJECTIVES: To evaluate the efficacy of a synthetic cryopreservation medium for human semen containing phospholipids and antioxidants (ANTIOX-PC, Invitra / Supera Parque de Inovação e Tecnologia de Ribeirão Preto) compared to conventional egg yolk medium (TEST-yolk buffer, Irvine Scientific), measured by the in vitro parameters of progressive sperm motility and sperm DNA fragmentation index. METHODS: Non-inferiority clinical trial. 63 men (July 2015 to October 2016), aged 18 to 50 years, seminal sample with volume >= 1,5 mL, spermatozoa >= 15 x 106/mL and progressive motility >= 32% were recruited. The semen was divided into two aliquots with equal volumes, randomly randomized in the study (ANTIOX-PC) and control (TEST-yolk buffer) groups to receive cryopreservation media. The evaluation of the outcomes was blind to group assignment, verified before freezing and after thawing. The data were compared by the t-test paired by SAS version 9.3; ? = 0.05. RESULTS: Progressive motility (p=0.83) and DNA fragmentation index (p=0.32) analyzed in the semen samples frozen with medium A (ANTIOX-PL) showed no significant difference in relation to those frozen with the medium B (TEST-yolk buffer). The concentration (p=0.02), the total concentration (p=0.02), the percentage of immobile spermatozoa (p<0.01) and vitality (p<0.01) were higher in the samples frozen with medium B TEST-yolk buffer). Nonprogressive motility (p<0.01) and total motility (p <0.01) were higher in samples frozen with medium A (ANTIOX-PC). And the morphology (p=0.07) showed no significant difference between the cryopreservation media. CONCLUSIONS: The new formulation proposed in this research project, ANTIOX-PC, was not inferior to the conventional medium, TEST-yolk buffer, in relation to the primary endpoints analyzed, sperm motile spermatozoa and sperm DNA fragmentation index.

Este trabalho teve como objetivo principal avaliar o sêmen da jararaca ilhoa, Bothrops insularis, quanto ao volume, motilidade, vigor e concentração, além de verificar se estes paramentos estão relacionados ao comprimento ou massa dos animais ou se variam ao longo das estações, uma vez que esta espécie possui ciclo reprodutivo sazonal. Para tanto, foram avaliadas amostras de sêmen de 18 machos, com comprimento rostro-cloacal (CRC) variando de 43,5 a 73,70 cm, pertencentes ao plantel do Laboratório de Ecologia e Evolução do Instituto Butantan, entre os meses de agosto de 2012 e maio de 2013. O sêmen de Bothrops insularis apresentou coloração variando de esbranquiçada a amarelada e consistência cremosa e espessa. Foi possível observar amostras de sêmen viáveis em todos os 18 animais avaliados, indicando que animais com CRC igual ou acima de 43,5 cm já são sexualmente maduros. O espermatozoide de Bothrops insularis é filiforme, possui cabeça alongada, fina e com formato pontiagudo, seguindo o padrão morfológico descrito para outros Squamata. Não foi observada nenhuma relação entre o comprimento, massa e cada um dos parâmetros seminais avaliados. Foi observada variação significativa da motilidade e da concentração do sêmen de Bothrops insularis entre as estações, porém o volume e o vigor do sêmen não variaram. Foi no outono, época de cópula da espécie, que o sêmen apresentou as maiores médias para os parâmetros avaliados. / This study aimed to evaluate sperm parameters of the golden lancehead, Bothrops insularis, including appearance, sperm motility, vigor, volume and concentration, determine if these parameters varied with body size or weight and to verify whether these vestments vary throughout seasons, since this species has a seasonal reproductive cycle. Samples of semen of 18 males with snout-vent length (SVL) ranging from 43.5 to 73.70 cm, belonging to the squad of the Ecology and Evolution Laboratory at Instituto Butantan, were collected between August 2012 and May 2013. Sperm color from Bothrops insularis ranged from whitish to yellowish, and a creamy and thick consistency. Viable sperm was observed in samples from all 18 males evaluated, indicating that animals with SVL equal to or above 43.5 cm are sexually mature. Sperm of Bothrops insularis is thready, has elongated, thin and pointed shaped head, following the morphological pattern described for other Squamata. No relationship between length, mass and each of seminal parameters evaluated was observed. Significant variation of concentration and motility of semen from Bothrops insularis between seasons was observed, but volume and vigor did not change. It was during Fall, mating season of the species, that sperm had the highest means for all parameters evaluated.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_rafael_tonieto.pdf: 295673 bytes, checksum: cde6d39f839653a9d49de2dfbef8ef62 (MD5) Previous issue date: 2008-10-24 / The low pregnancy rates obtained with artificial insemination using frozen ram semen make its routine use unfeasible. As the cryopreservation process causes injuries in the sperm cells, the development of extenders that include state-of-the art cryoprotectant solutions is justified. This study tested the inclusion of low density lipoprotein (LDL) and trehalose in extenders for freezing ram semen, by evaluating parameters of post-thawing semen quality. In the first experiment, 3 treatments were compared: Tris including 20% egg yolk and 5% glycerol (T1); Tris including 10 mM trehalose (T2); and T1 including 50 mM trehalose (T3). Sperm motility did not differ across treatments (P > 0.05), but T2 presented higher proportion of sperm cells having membrane integrity (P < 0.05). In the second experiment, 4 treatments were compared: Tris including 20% egg yolk (T1); T1 including 5% glycerol (T2); T1 including 100 mM trehalose (T3); and t1 including 100 mM trehalose and 5% glycerol (T4). Sperm motility and membrane integrity were higher for T2, T3 and T4 than for T1 (P < 0.05), but acrossome integrity did not differ among treatments (P > 0.05). In the third experiment, four treatments were compared: Tris including 20% egg yolk and 100 mM trehalose; and T1 with the replacement of egg yolk by LDL including 5% glycerol (T2); 100 mM trehalose (T3); and 100 mM trehalose and 5% glycerol (T4). Sperm motility and membrane integrity were higher for T2 and T3 than for the other treatments (P < 0.05), but there was no further difference among the LDL treatments (P > 0.05). Acrossome integrity did not differ across treatments (P > 0.05). Therefore, the inclusion of LDL and trehalose as cryoprotectants in extenders for frozen ram semen was associated with improvement in post-thawing sperm motility and membrane integrity. / Em ovinos, as baixas taxas de prenhez obtidas com inseminação artificial com sêmen congelado inviabilizam o seu uso como rotina. Provocando o processo de criopreservação lesões nos espermatozóides, o desenvolvimento de diluentes que incluam crioprotetores de excelência se justifica. Este trabalho testou a inclusão da lipoproteína de baixa densidade (LDL) e da trealose em diluentes para congelamento de sêmen ovino, a partir da avaliação de parâmetros de qualidade seminal pós-descongelamento. No primeiro experimento, foram comparados 3 tratamentos: Tris com 20% de gema de ovo e 5% de glicerol (T1); Tris com 100 mM de trealose (T2); e T1 com 50 mM de trealose (T3). A motilidade não diferiu entre os tratamentos (P > 0,05), mas o T2 apresentou maior proporção de gametas com membranas íntegras (P < 0,05). No segundo experimento, foram comparados 4 tratamentos: Tris com 20% de gema de ovo (T1); T1 com 5% de glicerol (T2); T1 com 100 mM de trealose (T3); e T1 com 100 mM de trealose e 5% de glicerol (T4). A motilidade e a integridade da membrana espermática do T2, T3 e T4 foram superiores a do T1 (P > 0,05), mas a integridade do acrossoma não diferiu (P > 0,05) em todos os tratamentos. No terceiro experimento, foram comparados 4 tratamentos: Tris com 20% de gema de ovo e 110 mM de trealose (T1); Tris com 8% de LDL, incluindo 5% de glicerol (T2); Tris com 8% de LDL, incluindo 110 mM de trealose (T3); Tris com 8% de LDL, incluindo 110 mM de trealose e 5% de glicerol (T4). A motilidade dos espermatozóides para o T2 e para o T3 foram superiores aos demais tratamentos (P < 0,05), mas, com relação à integridade de membrana, não houve diferença entre os tratamentos com LDL (P > 0,05). A integridade do acrossoma não diferiu entre os tratamentos (P > 0,05). Portanto, o uso de LDL e trealose como crioprotetores foi associado com melhorias na motilidade e na integridade da membrana espermática, no sêmen ovino, após o descongelamento.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:38:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_diones_bender_almeida.pdf: 702296 bytes, checksum: 79cdf77bf0f5d2b12aa8fc733442f59d (MD5) Previous issue date: 2012-02-27 / The Nile tilapia (Oreochromis niloticus) is one of the most significant species of the current fish farming. All knowledge related to the reproductive behavior of this species is important for defining some selection criteria as well as a better understanding of their reproductive characteristics. Therefore, this research aimed to evaluate the spermatic characteristics of the semen, together with the reproductive acting of females of three different strains of Nile tilapia (Supreme, Premium Aquabel and Chitralada). These evaluations are necessary before establishing genetic breeding program for the species, in order to determine what kind of selection criteria will be used. The collections of data related to the reproducers of both sexes were taken in the Aquabel Pisciculture Station, located in Rolândia/PR. Thirty males were used in the seminal evaluation and seventy five females in the reproductive evaluation of each strain. The reproduction of the females was observed for seven weeks through weekly collections. It was evaluated parameters as volume of eggs/spawing, number and weight of eggs/female, number of eggs/Kg of fish, hatching rates, percentage of females that had not spawned, porcentage of spawning/week, more than two spawning during the seven weeks, average of the spawnings in chronological order and the frequency of spawnings. Of the evaluated strains, the PA presented higher averages for all of the parameters morfometrics and for great majority of the appraised reproductive parameters. As the male influence is as important as for the female in the reproductive process, it was aimed to identify by certain variables, productive and reproductive indexes in the semen that could be selected. Among them it can be mentioned the pH, semen collection, velocity and type of movement, motility, concentration, spermatic viability and integrity of membrane, mitochondrial and DNA. Looking for to identify the line to gather the largest number of desirable characteristics for cultivation, SUP is highlighted by presenting better results for great majority of these parameters. All these variables, for both males and females, are fundamental because in the fertilization process it is necessary that they have good quality. After the choice of these variables it would be possible to identify, among the worked strains, the more appropriate ones for the implantation of a future genetic breeding program. / A tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) é uma das espécies mais significativas da piscicultura atual. Todo conhecimento relativo ao comportamento reprodutivo dessa espécie é importante para se definirem determinados critérios de seleção assim como uma melhor compreensão de suas características reprodutivas. Para isso, este projeto de pesquisa teve como objetivo avaliar as características espermáticas do sêmen, juntamente com o desempenho reprodutivo de fêmeas de três diferentes linhagens de tilápias do Nilo (Supreme, Premium Aquabel e Chitralada). Essas avaliações são necessárias antes de se estabelecer um programa de melhoramento genético para essa espécie, a fim de determinar que tipos de critérios de seleção serão utilizados. As coletas de dados relacionados aos reprodutores de ambos os sexos foram realizadas na Estação de Piscicultura Aquabel, localizada no município de Rolândia/PR. Foram utilizados 30 machos na avaliação seminal e 75 fêmeas na avaliação reprodutiva de cada linhagem. A reprodução das fêmeas foi realizada durante sete semanas através de coletas semanais, onde se avaliou parâmetros como volume de ovos/desova, número e peso de ovos/fêmea, número de ovos/Kg de peixe, taxa de eclosão, porcentagem de fêmeas que não desovaram, porcentagem de desovas/semana, mais de duas desovas durante as sete semanas, média das desovas em ordem cronológica e frequência de desovas. Das linhagens avaliadas a PA apresentou médias consideradas superiores para todos os parâmetros morfométricos e para grande maioria dos parâmetros reprodutivos avaliados. Como a influência do macho é tão importante quanto à da fêmea no processo reprodutivo, buscou-se identificar através de determinadas variáveis, índices produtivos e reprodutivos no sêmen, que pudessem ser selecionados. Dentre eles podemos citar o pH, coloração, velocidade e tipo de movimentação, motilidade, concentração, viabilidade espermática e integridades de membrana, mitocôndria e DNA. Buscando identificar a linhagem que reunisse o maior número de características desejáveis ao cultivo, a SUP se destacou por apresentar melhores resultados para grande maioria desses parâmetros. Todas essas variáveis, tanto nos machos como nas fêmeas, são fundamentais de serem estudadas porque no processo de fertilização é necessário que as mesmas apresentem boa qualidade. Somente após a escolha dessas variáveis é que podemos identificar, dentre as linhagens trabalhadas, aquela (s) mais adequada (s) para a implantação de um futuro programa de melhoramento genético.

A capacidade de preservar a viabilidade do sêmen pelo emprego das biotecnologias, como refrigeração e criopreservação, oferece muitas vantagens a equideocultura. O estresse oxidativo é um dos principais entraves para estas biotecnicas e advêm do ataque de distintas espécies reativas de oxigênio (EROs). Assim, o objetivo do presente estudo foi verificar o impacto das diferentes EROs sobre os espermatozoides com e sem plasma seminal. Foram colhidos ejaculados de 13 garanhões Mangalarga Marchador de fertilidade conhecida. Os ejaculados foram divididos em duas frações (A e B). As frações foram centrifugadas (2200g/10min) e o pellet com os espermatozoides foi ressuspendido em solução salina fisiológica ou plasma seminal de modo que as duas frações apresentassem a mesma concentração final (sptz/mL). Ambas as frações (A e B) tiveram 4 alíquotas de 400&micro;L retiradas e submetidas a 3 sistemas distintos de produção de EROs (xantina + xantina oxidase que produz anion superóxido; peróxido de hidrogênio; ferro + vitamina C que produz radical hidroxil) e malondialdeído. Após a incubação, as amostras A e B foram avaliadas de acordo com os testes funcionais (coloração de eosina-nigrosina para membranas, fast-green/rosa bengala para acrossomos, coloração 3-3&#39;diaminobenzidina para atividade mitocondrial e SCSA&trade; para susceptibilidade a denaturação de cromatina) e avaliação do índice de peroxidação lipídica (TBARs).Todas as análises estatísticas foram realizadas pelo programa SAS System for Windows. A susceptibilidade do espermatozoide equino ao estresse oxidativo é variável de acordo com a espécie reativa de oxigênio empregada na incubação; as espécies mais deletérias no presente experimento foram a malondialdeído e principalmente o radical hidroxil o que já era esperado. Houve um efeito benéfico quanto a manutenção das funções celulares e status oxidativo em amostras cujo plasma seminal foi preservado. A proteção atribuída ao plasma seminal influenciou parâmetros como atividade mitocondrial, susceptibilidade a denaturação acida da cromatina e índice de peroxidação lipídica. O plasma seminal exerceu mais pronunciada proteção aos eventos desencadeados pela malondialdeído / Biotechnologies such as chilling and cryopreservation of equine semen have been largely used in horse breeding due to its importance on storage and propagation of genetic material. The oxidative stress is one of the main causes of poor results related to the fertility of processed stallion sperm. Oxidative injuries are mainly due to the attack of different reactive oxygen species (ROS). Thus, the aim of the present study was to evaluate the impact of distinct ROS attack on equine spermatozoa with and without seminal plasma. The collection of one ejaculate of thirteen Mangalarga fertile stallions were performed. Ejaculates were divided in two aliquots (A and B). These aliquots were centrifuged (600G /10 min) and pellets were resuspended in saline solution (0,9%) or seminal plasma certifying that each sample had the same concentration (sptz/mL). Both aliquots (A and B) were divided in four samples of 400 &micro;L each and incubated with four ROS generating systems (superoxide anion; hydrogen peroxide; hydroxil radical and malondialdehyde). After the 30 incubation, all the samples were evaluated for membrane integrity (eosin-nigrosin stain), acrosome integrity (simple stain of fast-green/ Bengal rose), 3-3&#39;diaminbenzidine for mitochondrial activity and SCSA&trade; for the chromatin suceptibility to the acid denaturation. Lipid peroxidation was accessed by TBARs assay. Statistical analysis was performed using SAS System for Windows. The susceptibility of equine sperm to the oxidative stress is different in each ROS generation system; but the most deleterious ROS were hydroxyl radical and malondialdehyde. A positive effect of seminal plasma on the sperm viability was observed which may be linked to its protective role. The protection occurred in mitochondria, chromatin and against lipid peroxidation. Higher beneficial effect of seminal plasma was observed in samples treated with malondialdehyde

OBJETIVOS: Avaliar a eficácia de um meio de criopreservação sintético para sêmen humano contendo fosfolipídios e antioxidantes (ANTIOX-PL, Invitra/Supera Parque de Inovação e Tecnologia de Ribeirão Preto) em comparação com o meio convencional à base de gema de ovo (TEST-yolk buffer, Irvine Scientific), mensurada pelos parâmetros in vitro de motilidade progressiva dos espermatozoides e índice de fragmentação do DNA espermático. MÉTODOS: Ensaio clínico de não-inferioridade. Foram recrutados 63 homens (julho de 2015 a outubro de 2016), com idade entre 18 a 50 anos, amostra seminal com volume >= 1,5 mL, concentração de espermatozoides >= 15 x 106/mL e motilidade progressiva >= 32%. O sêmen foi dividido em duas alíquotas com volumes iguais, randomizadas aleatoriamente nos grupos estudo (ANTIOX-PC) e controle (TEST-yolk buffer) para receberem os meios de criopreservação. A avaliação dos desfechos foi cega para atribuição de grupo, verificados antes do congelamento e após o descongelamento. Os dados foram comparados pelo teste t pareado pelo SAS versão 9.3; ?=0,05. RESULTADOS: A motilidade progressiva (p=0.83) e o índice de fragmentação do DNA (p=0.32) analisados nas amostras de sêmen congeladas com o meio A (ANTIOXPL) não apresentaram diferença significativa em relação às que foram congeladas com o meio B (TEST-yolk buffer). A concentração (p=0.02), a concentração total (p=0.02), o percentual de espermatozoides I (p<0.01) e a vitalidade (p<0.01) foram superiores nas amostras congeladas com o meio B (TEST-yolk buffer). A motilidade não progressiva (p<0.01) e a motilidade total (p<0.01) foram superiores nas amostras congeladas com o meio A (ANTIOX-PC). E a morfologia (p=0.07) não apresentou diferença significativa entre os meios de criopreservação. CONCLUSÕES: Em relação aos desfechos primários analisados, motilidade progressiva dos espermatozoides e índice de fragmentação do DNA espermático, a nova formulação proposta neste projeto de pesquisa, ANTIOX-PC, mostrou-se não inferior ao meio convencional, TEST-yolk buffer. / OBJECTIVES: To evaluate the efficacy of a synthetic cryopreservation medium for human semen containing phospholipids and antioxidants (ANTIOX-PC, Invitra / Supera Parque de Inovação e Tecnologia de Ribeirão Preto) compared to conventional egg yolk medium (TEST-yolk buffer, Irvine Scientific), measured by the in vitro parameters of progressive sperm motility and sperm DNA fragmentation index. METHODS: Non-inferiority clinical trial. 63 men (July 2015 to October 2016), aged 18 to 50 years, seminal sample with volume >= 1,5 mL, spermatozoa >= 15 x 106/mL and progressive motility >= 32% were recruited. The semen was divided into two aliquots with equal volumes, randomly randomized in the study (ANTIOX-PC) and control (TEST-yolk buffer) groups to receive cryopreservation media. The evaluation of the outcomes was blind to group assignment, verified before freezing and after thawing. The data were compared by the t-test paired by SAS version 9.3; ? = 0.05. RESULTS: Progressive motility (p=0.83) and DNA fragmentation index (p=0.32) analyzed in the semen samples frozen with medium A (ANTIOX-PL) showed no significant difference in relation to those frozen with the medium B (TEST-yolk buffer). The concentration (p=0.02), the total concentration (p=0.02), the percentage of immobile spermatozoa (p<0.01) and vitality (p<0.01) were higher in the samples frozen with medium B TEST-yolk buffer). Nonprogressive motility (p<0.01) and total motility (p <0.01) were higher in samples frozen with medium A (ANTIOX-PC). And the morphology (p=0.07) showed no significant difference between the cryopreservation media. CONCLUSIONS: The new formulation proposed in this research project, ANTIOX-PC, was not inferior to the conventional medium, TEST-yolk buffer, in relation to the primary endpoints analyzed, sperm motile spermatozoa and sperm DNA fragmentation index.

Orientador: Carlos Roberto Teixeira / Resumo: O cão selvagem Cerdocyon thous, mais conhecido como cachorro-do-mato, estão suscetíveis a problemas como predação, caça e atropelamentos. A colheita e criopreservação do sêmen torna-se uma técnica auxiliar para a conservação ex situ, para tanto, estudos iniciais de caracterização seminal devem ser desenvolvidos. Esta espécie pode servir como modelo para espécies seriamente ameaças. O objetivo do trabalho foi realizar a colheita de sêmen por estimulação digital do pênis após o condicionamento dos animais, relatar as características seminais para a espécie, mensurar volume testicular e dimensões da próstata por ultrassom, além de relatar parâmetros Dopplerfluxométricos. Utilizamos machos adultos, (n=5), com idade média de 3 anos, (variando de 2 a 5 anos), pesando em média (± DP) 7 kg mantidos em cativeiro. O condicionamento teve início em maio de 2018, sendo que foram utilizados 13 ejaculados para as avaliações. Média e desvio padrão foram calculados. Com volume médio de 463,8  164,9 µL e concentração de 393,2  49,5 X 106 espermatozoides/mL, motilidade total 68,0  1,7%, progressiva 48,8 1,4% e rápidos 57,2  1,9%. Na avaliação morfológica foi encontrada alta prevalência de defeitos de cabeça (acrossomo, pequena anormal, diadema defect e formas teratológicas). O volume testicular 2,2 cm3 (0,2) para o testículo esquerdo e 2,1 cm3 (0,2) testículo direito, próstata com dimensão crâniocaudal e dorsoventral respectivamente, 2,3 cm (0,2) e 1,5 cm (0,1cm). Na avaliação ultrasso... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The crab-eating fox Cerdocyon thous, known as the forest fox, is susceptible to problems such as predation, hunting and running over. Semen collection and cryopreservation becomes the main technique used for ex situ conservation. Therefore, initial studies of seminal characterization should be developed. This species can serve as a model for seriously threatening species. The objective of this study was to collect semen by digital penis stimulation after animal conditioning, to report seminal characteristics for the species, measure testicular volume and prostate dimensions by ultrasound, and report Triplex doppler velocometric parameters. We used 5 animals, males, adults, weighing 7 kg on average kept in captivity. The conditioning began in May 2018, 35 ejaculates were obtained, but just 13 were used for the evaluations. The results were expressed as average and standard error. The ejaculates presents 463.8µL ±164.9 of average volume, average concetration of 393.2 ±49.5 x 106 / mL, total motility average, progressive and rapid of 68 ±1.7%; 48.8 ±1.4%; 57.2 ±1.9% respectively. In the morphological evaluations, high prevalence of defects were observed (acrosomal injury, small abnormality and teratological forms). The testicular volume was 2.2 ±0.2 cm3 for the left testis and 2.1 ±0.2 cm3 right testis, prostate with cranio-caudal and dorsoventral dimensions respectively, 2.3 ±0.2 and 2.1 ±0.2cm. At Triplex doppler ultrasound evaluation, systolic peak velocity (SPV) with a highe... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Objetivo: Avaliar a função gonadal de pacientes do sexo masculino com lúpus eritematoso sistêmico (LES). Métodos: 35 pacientes do sexo masculino com LES (critérios do Colégio Americano de Reumatologia) foram avaliados prospectivamente segundo características demográficas, manifestações clínicas, tratamento prévio e atual da doença, avaliação urológica, ultra-sonografia testicular com Döppler, perfil hormonal, análise do sêmen incluindo morfologia e detecção de anticorpos anti-espermatozóides, e esses pacientes foram comparados com 35 controles saudáveis pareados para idade. Resultados: Os pacientes com LES apresentaram medianas reduzidas do: volume testicular em ambos os testículos (p=0,003 e p=0,004), número total de espermatozóides (p=0,002) e número total de espermatozóides móveis em relação aos controles. Assim como, a média de volume do sêmen e a percentagem de formas normais de espermatozóides foram menores nos pacientes com LES versus controles (p=0,015 e p=0,015). Todos os pacientes com LES apresentaram alterações do sêmen e por isso foram subdivididos de acordo com a gravidade destas alterações em: grupo A com 18 pacientes (teratozoospermia) e grupo B com 17 pacientes (azoospermia ou teratozoospermia, em associação com oligozoospermia e/ou astenozoospermia. A freqüência do uso da pulsoterapia com ciclofosfamida endovenosa (PCE) após a espermarca foi maior no grupo B em relação ao grupo A (p=0,001), assim como as medianas da dose cumulativa de PCE (p=0,005), número de pulsos (p=0,005) e duração da PCE (p=0,006). Além disso, as medianas dos volumes testiculares por ultra-sonografia, em ambos os testículos, foram menores no grupo B em relação ao grupo A (p=0,001 e p=0,001). Os níveis elevados de FSH foram também maiores no grupo B em relação ao A (p=0,018). Conclusões: Pacientes com LES têm uma alta freqüência de alterações do sêmen associados a redução do volume testicular. A utilização de PCE após a espermarca foi o principal fator de uma potencial lesão testicular definitiva. / Objective: To assess gonadal function in male systemic lupus erythematosus (SLE) patients. Methods: Thirty-five consecutive male SLE patients (American College Rheumatology criteria) were prospectively evaluated for demographic, clinical features, previous and current treatment, urologic evaluation, testicular Döppler ultrasound, hormone profile, semen analysis including morphology and anti-sperm antibodies, and to compare them to 35 agematched healthy controls. Results: SLE patients had a lower median testicular volume in both testes (p=0.003 and p=0.004), total sperm count (p=0.002) and total motile sperm count (p=0.004) compared to controls. Likewise, the mean sperm volume and percentage of normal sperm forms were lower in SLE versus controls (p=0.015 and p=0.015). Since all SLE patients (100%) had semen alterations they were further subdivided according to the severity of theses abnormalities in: group A with 18 patients (teratozoospermia) and group B with 17 patients (azoospermia or teratozoospermia in combination with oligozoospermia and/or asthenozoospermia). Of note, the frequency of intravenous cyclophosphamide (IVCYC) after the first ejaculation was higher in group B than in A (p=0.001), likewise the higher median cumulative dose (p=0.005), number of pulses (p=0.005), and duration of IVCYC (p=0.006). Moreover, the medians of testicular volume measured by ultrasound in both testicles were lower in group B compared to A (p=0.001 and p=0.001). Interestingly, elevated FSH levels were higher in group B compared to A (p=0.018). Conclusions: SLE patients have a high frequency of sperm abnormalities associated with reduced testicular volume. The post-pubertal IVCYC use was the major factor of permanent potential damage to the testes.

A necessidade de criopreservação seminal vem aumentando cada vez mais, concomitantemente à evolução das biotecnologias aplicadas à reprodução animal. Sabe-se que a principal causa da diminuição do desempenho reprodutivo de um touro, criado em clima tropical, é o estresse térmico. Raças de origem européia (Bos taurus taurus) são consideravelmente mais sensíveis à essas condições climáticas quando comparadas aos animais de origem indiana (Bos taurus indicus). Esses animais não adaptados podem apresentar decréscimo na qualidade espermática, como alterações estruturais, funcionais e maior suscetibilidade ao estresse oxidativo, após a descongelação do sêmen. Para avaliar essa hipótese, foram utilizadas amostras criopreservadas de 40 touros, sendo 20 da raça Nelore (Bos taurus indicus) e 20 da raça Simental (Bos taurus taurus), criados em clima tropical, dessas, 10 amostras seminais de cada raça foram coletadas durante inverno e 10 durante o verão. Após a descongelação das amostras, foram realizados os testes espermáticos convencionais como motilidade progressiva, vigor e índice de motilidade espermática, e os testes funcionais tais como integridade de membrana plasmática (Eosina/Nigrosina), integridade acrossomal (POPE), integridade de DNA (Ensaio Cometa) e atividade citoquímica mitocondrial (3\'3 diaminobenzidina DAB). Também foi avaliada a suscetibilidade das células espermáticas à peroxidação lipídica induzida, através da mensuração da concentração de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Os dados foram analisados levando em conta as classes: raça (Nelore e Simental) ou estação do ano (verão e inverno), através do programa SPSS 13.0 para Windows. A variável DAB I foi maior (p=0,04) nas amostras dos touros Nelore em comparação com Simentais (17,85 &plusmn; 2,38 vs 11,4 &plusmn; 1,84). Observou-se o efeito das estações do ano sobre as variáveis motilidade progressiva (26,50% inverno e 13,30% verão; p=0,02), DAB I (22,32% inverno e 13,30% verão; p=0,04) e DAB III (13,88% inverno e 22,10% verão; p=0,01), somente no sêmen dos touros Nelore, e o efeito das raças (p=0,03) sobre as variáveis DAB I (22,34% Nelore e 11,60% Simental) e DAB III (13,88% Nelore e 21,19% Simental), apenas durante o inverno, quanto ao nível de TBARS, não foi verificado diferença entre nenhum grupo. Houve correlação entre alguns testes funcionais e convencionais, porém a variável integridade de DNA não correlacionou com nenhum teste convencional. Esses resultados podem indicar que a peroxidação lipídica sofrida, espontaneamente, pelos touros Europeus, devido ao estresse térmico, selecionou espermatozóides mais resistentes à criopreservação. / Seminal cryopreservation technique has been increasing concomitant reproductive biotechnologies. It is known that heat stress is the main cause that affects bulls reproductive performance under tropical environment. European breeds (Bos taurus taurus) are much more sensible to these conditions than Indian breeds (Bos taurus indicus). These non-adapted animals present a fast decrease in sperm quality as structural and functional parameters and higher oxidative stress susceptibility. In order to test this hypothesis, cryoprotected semen samples of twenty Nelore (Bos taurus indicus) and twenty Simmental (Bos taurus taurus) bulls, raised under tropical conditions, were analyzed; ten samples of each breed were collected during summer and ten during winter. After thawing, semen samples were submitted to following conventional tests: progressive motility, vigor and sperm motility index (IME), and following functional tests: plasmatic membrane integrity (eosin-nigrosin), acrosomal membrane integrity (POPE), DNA fragmentation (Comet Assay) and mitochondrial activity (3\'3 diaminobenzidine - DAB). The spermatozoa susceptibility to the induced lipid peroxidation followed by measurement of thiobarbituric acid reactive substances concentration (TBARS), was used as an oxidative stress index. Statistical analysis were performed for breed (Nelore and Simmental) and season (summer and winter), using SPSS 13.0 for Windows. Comparing Nelore and Simmental, DAB I was higher (p=0,04) in the first group (17,85 &plusmn; 2,38 and 11,4 &plusmn; 1,84, respectively). Season effect was observed only in Nelore samples on: progressive motility (26,50% winter and 13,30% summer; p=0,02), DAB I (22,32% winter and 13,30% sumer; p=0,04) and DAB III (13,88% winter and 22,10% summer; p=0,01); and breed effect (p=0,03) was observed only during winter on: DAB I (22,34% Nelore and 11,60% Simmental) and DAB III (13,88% Nelore and 21,19% Simmental). TBARS index, did not differ in breed or season. Correlations were observed between some of functional and conventional tests, however, the DNA integrity did not correlate with any conventional test. These results may indicate that probably, the spontaneous peroxidation that European bulls suffer due to the heat stress may have selected sperm more resistant to the cryopreservation.

Os bichos-preguiça são animais extremamente sensíveis e sofrem com a destruição e a fragmentação das matas. Apresentam baixa taxa de crescimento populacional e necessitam serem mais estudados para que se possa pensar na preservação da espécie. Este estudo teve como objetivo captar informações sobre o sêmen deste animal. Para tanto 18 machos foram capturados em Manaus (AM), Valença (RJ) e Santos (SP), quinze da espécie Bradypus trydactilus e três B. variegatus. Após a captura, os animais foram anestesiados com cloridrato de quetamina (Vetaset&reg; ? Fort Dodge) na dosagem de 10mg/kg associada com cloridrato de xilazina (Kensol&reg; ? König), na dosagem de 1mg/kg, administrado por via intra-muscular. Os eletrochoques foram aplicados em seqüências de três intensidades progressivas de choques, com dez repetições para cada intensidade e variação de 10 mA entre elas. Iniciou-se com 20 mA, atingindo o máximo de 60 mA. A cada série de 3 intensidades de choque realizou-se um intervalo de aproximadamente 3 minutos, após o qual se reiniciou a seqüência com 10 mA acima da mA inicial da seqüência anterior. Cada estímulo durou aproximadamente 3 segundos. O sêmen colhido foi processado conforme as técnicas utilizadas para animais domésticos, realizou-se também preparação para microscopia eletrônica de varredura. Todos os animais ejacularam uma pequena quantidade de sêmen, porém em alguns o volume ejaculado foi insuficiente para a realização do espermiograma completo. Os espermatozóides apresentaram grande variedade de defeitos e as características observadas nas colheitas do primeiro semestre eram distintas das observadas no segundo semestre, porém os dados ainda não foram suficientes para a padronização do sêmen ou para definições mais precisas da existência de sazonalidade. Embora maiores estudos sejam necessários, este estudo foi pioneiro e mostrou a possibilidade de colheita de sêmen através da eletroejaculação nesta espécie. / Sloths are extremely sensitive animals that suffer with the destruction and fragmentation of forests. They present a low population growth rate and need to be further studied for the preservation of the species. This study intended to contribute with information about their semen. In order to do that, 18 male individuals were captured in Manaus (AM), Valença (RJ), and Santos (SP), fifteen of them belonging to the Bradypus tridactylus, and three to the B. Variegatus spieces. After being captured, animals were anesthetized with an intramuscular injection of a combination of 10mg/kg ketamine hydrochloride (Vetaset&reg; ? Fort Dodge) and 1mg/kg of xylazine hydrochloride (Kensol&reg; ? König). Electroshocks were givem in sequences of three progressive intensities, with ten repetitions for each intensity and variation of 10 mA between them. They started with 20 mA and peaked at 60 mA. For each series of 3 shock intensities, there was an interval of approximately 3 minutes, after which they received a new sequence 10 mA above the initial mA of the previous sequence. Each stimulus lasted about 3 seconds. The semen collected was processed according to the techniques used for domestic animals. Spermatozoa were also analyzed by electron scanning microscopy. All animals ejaculated small quantities of semen, and in some of them the volume ejaculated was not enough for a complete spermiogram. Spermatozoa presented a wide variety of defects and the features seen in the collections of the first half of the year were different from those seen in the specimen collected in the second half of the year. Nevertheless, the data were not sufficient to standardize semen, neither to define seasonality more precisely. Although further studies are necessary, this study has shown the possibility of collecting semen through electroejaculation in this species.