Orientador: Paulo Pinto Joazeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-15T06:40:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nascimento_MariaAmaliaCavinato_M.pdf: 2973013 bytes, checksum: eef160eabbd2d1426a9f2e0795702488 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: É reconhecido que a sínfise púbica de algumas espécies de mamíferos, incluindo camundongos, passa por transformações estruturais durante a prenhez e no período pós-parto. Estas transformações incluem o surgimento de um ligamento interpúbico e o amolecimento deste tecido nos dois últimos dias antes do parto. Este ligamento permite a separação dos ossos púbicos, garantindo a passagem segura do feto pelo canal de parto. Após o parto ocorre a involução deste ligamento. Ambos os períodos de remodelação tecidual envolvem grandes modificações da matriz extracelular e de seus componentes, bem como um balanço entre proliferação e morte celular programada. A galectina-3, uma lectina animal com especificidade de ligação por ß-galactosídeos, é uma proteína amplamente distribuída entre diferentes tipos de células e tecidos, podendo ser encontrada dentro das células tanto no núcleo quanto no citoplasma, ou ainda na superfície celular ou no espaço extracelular. Através de interações específicas com diversos ligantes intra e extracelulares, a galectina-3 participa de numerosos processos fisiológicos e patológicos, como por exemplo, desenvolvimento, reações imunes, controle do ciclo celular, apoptose e metástase. Este estudo teve como objetivo localizar a expressão de galectina-3 nas populações celulares que compõem esta articulação durante o período de prenhez, a fim de investigar seu possível envolvimento nos processos de remodelação da sínfise. Foi observado que a galectina-3 está presente em todas as populações celulares que compõem a sínfise púbica e o ligamento interpúbico de todos os grupos estudados. Além disso, a galectina-3 é co-localizada com a a-actina de músculo liso em alguns tipos celulares. A quantificação da detecção de galectina-3 nos permitiu observar que ela é expressa em diferentes concentrações durante o período estudado. Esses resultados nos permitiram concluir que a galectina-3 parece estar envolvida na remodelação da sínfise púbica, através de sua participação na ativação de células semelhantes a fibroblastos, no ciclo celular, na diferenciação e nos processos de morte celular programada. / Abstract: It is recognized that the pubic symphysis of some mammal species, including mice, undergoes structural transformations during pregnancy and post-partum. These transformations include the emerging of an interpubic ligament and softening of this tissue in the two last days of pregnancy. This ligament allows the pelvic bones separation, warranting fetus self passage through the birth channel. After delivery this ligament involutes. Both periods of tissue remodeling involve changes in extracellular matrix and its components, as so a balance between cell proliferation and death. Galectin-3, an animal lectin with specificity for ß-galactosídes, is widely spread among different types of cells and tissues, thus being found inside the cells in the cytoplasm and in the nucleus, on cell surface or in the extracellular space. Through specific interactions with a variety of intra and extracellular ligands galectin-3 participates of numerous physiological and pathological processes, like for example, development, immune reactions, cell cycle control, apoptosis and metastasis. This research had the objective to localize galectin-3's expression in mouse pubic symphysis cells during pregnancy, and to investigate its involvement in the pubic remodeling process. It was observed that galectin-3 is present in all pubic cells populations of all of the studied groups. Besides that, galectin-3 is colocalized with a-smooth muscle actin in some cell types. Quantifying of galectin-3 detection revealed that this protein is expressed in different concentrations during the studied period. These results allowed us to conclude that galectin-3 seems to be involved in mouse pubic symphysis remodeling, probably working in the activation of fibroblast like cells, on cell cycle, on differentiation and in the processes of programmed cell death. / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Made available in DSpace on 2016-08-03T16:30:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARIANA HELENA SILVA CARVALHO.pdf: 1374377 bytes, checksum: d3acb9dc6dfb090205a23da802efddcb (MD5) Previous issue date: 2011-12-07 / The purpose of this study was to evaluate cephalometrically, the vertical facial skeletal pattern in subjects with natural normal occlusion and different malocclusions, correlation with the mandibular symphysis and evaluate sexual dimorphism. The sample consisted of 200 cephalometric radiographs divided in five groups based on occlusion type: group A, patients with natural normal occlusion and groups B, C, D and E, patients with malocclusions, each group being divided equally by sex and mean age between 13 and 16 years old. The sample was classified into three morphological patterns of vertical face, according to the facial height ration (FHR), proposed by SIRIWAT & JARABAK or Quotient Jarabak in: Hyperdivergent, Neutral and Hypodivergent. It was used the GoMe.VT variable, from VIGORITO analysis to assess the symphysis inclination and its correlation with the vertical facial patterns. After data collection and statistical tests evaluation; q-square test, "T" Student test and Pearson correlation, it was concluded that Hypodivergent was the most frequent in all patients studied, with 70%, and the greater frequency of this pattern was found in Class II malocclusion, division 2, with 87,5%, prevalence of some other existing standards in different classes of occlusions. We found a positive correlation between the inclination of the mandibular symphysis and Quotient Jarabak only for malocclusion Class I and Class III malocclusion. There was no significant statistical difference between the sexes and the morphology classification when the five groups were compared, however, when the groups were analyzed separately, significant differences were found between the sexes. / O propósito deste estudo foi avaliar cefalometricamente, o padrão esquelético vertical da face em indivíduos com oclusão normal natural e nas diferentes maloclusões e sua correlação com a sínfise mandibular, além de avaliar a presença de dimorfismo sexual. A amostra foi composta de 200 telerradiografias cefalométricas, divididas quanto ao tipo de oclusão, em cinco grupos: grupo A, com pacientes portadores de oclusão normal natural e grupos B, C, D e E, com pacientes portadores de maloclusões, sendo cada grupo, dividido igualmente quanto ao sexo e apresentando idade média entre 13 e 16 anos. A amostra foi classificada em 3 padrões morfológicos verticais da face, de acordo com o índice da altura facial (FHR), proposto por SIRIWAT & JARABAK ou Quociente de Jarabak, em: Hiperdivergente, Neutro e Hipodivergente. Foi utilizada a variável GoMe.VT, da análise de VIGORITO, para avaliar a inclinação da sínfise e sua correlação com os padrões verticais faciais. Após a coleta de dados e da avaliação dos testes estatísticos; qui-quadrado, teste t de Student e da correlação de Pearson, concluiu-se que, o padrão Hipodivergente em todos os pacientes estudados foi o mais frequente, com 70%, sendo que a maior frequência deste padrão foi encontrado na maloclusão Classe II, divisão 2, com 87.5%, existindo outras prevalências de alguns padrões em diferentes classes de oclusões. Foi encontrada uma correlação positiva entre a inclinação da sínfise mandibular e o quociente de Jarabak apenas para a maloclusão Classe I e maloclusão Classe III. Não houve diferença estatisticamente significante entre os sexos e a classificação da morfologia quando comparados os cinco grupos, porém, quando os grupos foram analisados separadamente, foram encontradas diferenças significantes entre os sexos.

Orientadores: Paulo Pinto Joazeiro, Cláudio Chrysostomo Werneck / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-18T04:27:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Consonni_SilvioRoberto_M.pdf: 3398352 bytes, checksum: 7a1238aba907982b903dec23fbc0470d (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A organização das fibras elásticas envolve a síntese e a deposição de moléculas em uma sequência altamente regulada para assegurar as características elásticas nos estágios iniciais do desenvolvimento. Durante e prenhez, os tecidos pélvicos ricos em fibras elásticas se alteram para permitir um parto seguro e essa remodelação é essencial para o parto normal. A sínfise púbica de camundongos também remodela em um processo controlado por hormônios. Este fenômeno compreende a "transformação" da fibrocartilagem em um ligamento interpúbico (LIp) seguido por seu relaxamento antes do parto. Após o primeiro parto, o processo de retorno ocorre e assegura a homeostase dos tecidos pélvicos. Ainda, alterações no suporte dos órgãos pélvicos foram descritas em animais geneticamente modificados para proteínas envolvidas na elastogênese como a lysyl oxidase-like 1 (LOXL1), fibulina-3 e 5. Como ligamentos são as principais estruturas de suporte dos órgãos pélvicos, o objetivo deste estudo foi avaliar a elastogênse no desenvolvimento do LIp durante a prenhez de camundongos. Assim, camundongos selvagens C57Bl/06 e deficientes em fibrilina-1 virgens, prênhes e no pós-parto foram estudados usando microscopia de luz convencional, microscopia confocal a laser, microscopia eletrônica de transmissão, western blotting e real-time PCR. Ambos os animais selvagens e deficientes em fibrilina-1 apresentaram classicamente a separação dos ossos púbicos, a formação e relaxamento do LIp e a involução deste no pós-parto. Esses processos sugeriram um padrão no qual as células controlam a remodelação da matriz extracelular sob sinalização hormonal e molecular. A ultra-estrutura dos tecidos fibrocartilaginosos apresentou delgadas microfibrilas aleatoriamente distribuídas entre os fibrocondrócitos. Na formação do LIp, foram observadas fibras elásticas com conglomerados de material amorfo distribuídos entre as microfibrilas. O LIp mostrou fibras elásticas e todos os componentes teciduais alinhados na direção da abertura da articulação interpúbica antes do parto. O estudo imuno-histoquímico e de expressão gênica relativa quantitativa indicou que durante o desenvolvimento do LIp em camundongos selvagens, elastina/tropoelastina, fibrilina-1 e 2, LOXL1, fibulina-5 e TGF-? foram regulados espacial e temporalmente, e estas moléculas poderiam contribuir para a síntese de novas fibras elásticas que asseguram a elasticidade necessária para a cintura pélvica durante o preparo para o parto e também no fechamento da articulação no pós-parto. Entretanto, se comparados com o animal selvagem, a análise indicou alteração na expressão gênica relativa da tropoelastina, fibrilina-1, LOXL1, fibulina-5 e TGF-?, diferentemente da morfologia muito similar observada em camundongos selvagens. Neste estudo, o camundongo deficiente em fibrilina-1 não apresentou prolapso de órgãos pélvicos após o primeiro parto como o deficiente em LOXL1 (Liu et al., 2004), nem modificações morfológicas que poderiam ser relacionadas ao enfraquecimento dos tecidos pélvicos. No entanto, este é o primeiro estudo que relata disfunções pélvicas nos camundongos deficientes em fibrilina-1 multíparos, usados como matrizes reprodutivas. Em conclusão, a formação das fibras elásticas que ocorreu na sínfise púbica de camundongos durante a vida adulta possui características únicas de um modelo que pode ser usado para compreensão dos processos normais e patológicos, principalmente aqueles relacionados aos animais geneticamente modificados para proteínas envolvidas na elastogênese. Assim, este trabalho traz à luz as evidências das profundas modificações que a sínfise púbica de camundongos passa durante a prenhez com a síntese de novas fibras elásticas, o que pode contribuir na compreensão dos mecanismos biológicos para formação das fibras elásticas / Abstract: The organization of elastic fibers involves the synthesis and the deposition of molecules in a high regulated sequence to ensure the elastic characteristics in the early stages of development. During pregnancy, elastic fibers-enriched pelvic tissues change to allow safe delivery and this remodeling is essential to the vaginal delivery. The mouse pubic symphysis articulation also remodels in a controlled hormonal process. This phenomenon comprises the "transformation" of the fibrocartilage into an interpubic ligament (IpL) followed by its relaxation before parturition. After the first parturition, recovery process occurs to ensure the pelvic tissue homeostasis. Adding to that, pelvic organ support impairment had been described in genetically modified mouse for the proteins involved in the elastogenesis such as lysyl oxidase-like 1 (LOXL-1), fibulin-3 and -5. Since, ligaments are the main supportive structures of pelvic organs, the aim of this study was to evaluate the elastogenesis in the IpL development during mouse pregnancy. Thus virgin, pregnant and postpartum C57Bl/06 wild-type and fibrillin-1mg?/+ female mice were studied using light, confocal, transmission electron microscopy, western blotting and real-time PCR. Both, wild-type and fibrillin-1mg?/+ female mice showed classically the separation of the pubic bones, the formation and relaxation of the IpL and the recovery at postpartum. These processes suggested a pattern which cells control the extracellular matrix remodeling under hormonal and molecular signaling. The ultra-structure of the fibrocartilaginous tissue had slender bundles of microfibrils randomly distributed among the fibrochondrocytes. By the time IpL is formed, there were seen elastic fibers, which consist of small conglomerates of amorphous material, distributed among the bundles of microfibrils. The IpL showed elastic fibers and all tissue compounds aligned to the opening axis of the articulation before parturition. The immunohistochemical study and quantitative gene expression indicated that during IpL development in wild-type mice, tropoelastin/elastin, fibrillin-1, fibrillin-2, LOXL-1, fibulin-5 and TGF-? were spatial and temporal regulated, and these molecules might contribute to the synthesis of new elastic fibers that assure the elasticity that is needed to the pelvic girdle during preparation for parturition and also the recovery at postpartum. However, compared to wild-type mice, alterations were found in the quantitative gene expression of elastin, fibrillin-1, LOXL-1, fibulin-5 and TGF- ?, different from the morphology that was very similar to the one that was observed in wild-type mice. In this study, the fibrillinmg?/+ mice did not show pelvic organ prolapse after the first parturition as LOXL1-/- did (Liu et al., 2004), neither morphological modifications that could be related to the weakness of pelvic tissue. However, this is the first work about pelvic dysfunctions in multiparous fibrillin-1mg?/+ mice used as reproductive matrices. In conclusion, the elastic fiber assembly that occurred in the mouse pubic symphysis during the adult life has characteristics of a model that could be used to understand normal and pathological processes, mainly those related to genetically modified mice for the proteins involved in the elastogenesis. Then, this work may bring readers up-to-date with accumulating evidence that the mouse pubic symphysis undergoes remarkable modifications during pregnancy with new synthesized elastic fibers and may contribute to our understanding of the biological mechanisms about elastic fiber assembly / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Paulo Pinto Joazeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-05T05:28:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Veridiano_AdrianoMora_M.pdf: 13328877 bytes, checksum: 8cdd5c8e051145c4210f83e267962da1 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Uma dramática mudança na sínfise púbica de camundongos é observada no final da prenhez. Recentemente demonstramos que estas mudanças na sínfise púbica durante a prenhez, parto e pós-parto estão diretamente associadas com componentes da matriz extracelular principalmente colágeno, fibras do sistema elástico, proteoglicanos e glicosaminoglicanos. A remodelação tecidual envolve um equilíbrio dinâmico entre proliferação celular e morte celular programada assim como as alterações nos componentes estruturais da matriz extracelular. Deste modo, é importante considerar estes dois comportamentos celulares quando investigamos os mecanismos que regulam a remodelação do tecido interpúbico; durante o seu crescimento ao final da prenhez, parto e subseqüente involução no período pós-parto. A proliferação e a morte celular programada foram identificadas por detecção imunohistoquímica, PCNA e TUNEL respectivamente os índices de proliferação e morte celular foram determinados por analises morfométricas. Os nossos resultados demonstraram que a proliferação celular foi intensa durante o período de formação do ligamento, entre os 015 e 018 de prenhez. Entretanto, no 019, dia do parto, ocorre uma queda abrupta dos índices de o 5dpp. As análises quantitativas de morte celular, mostraram resultados opostos quando comparados com os índices de proliferação celular. Por exemplo, no 019, inicia-se um declínio nos índices de proliferação celular. Realmente, neste dia são encontrados os mais altos índices de morte celular. Quando nós observamos simultaneamente proliferação e morte celular durante o início da prenhez a renovação do ciclo celular é claramente proliferativo, produzindo hiperplasia para no final da prenhez o ciclo ser dirigido para morte celular programada. Interessantemente, embora altos níveis de morte celular durante a involução pós-parto pode ser mostrada pelas células TUNEL positivas, não fomos capazes de observar núcleos picnóticos. Núcleos picnóticos com uma razoável freqüência deveriam ser observados nesta situação, aonde morte celular programada ocorre em altos níveis. O processo de autofagia, uma variação da morte celular programada denominada apoptose foi discutida como um mecanismo alternativo de eliminação celular na involução do ligamento interpúbico no período pós-parto / Abstract: Marked changes in mice pubic symphysis occurs by the end of pregnancy. Recently, we demonstrated that these changes in the pubic symphysis during the period under study are directly associated with extracellular matrix components remodeling mainly collagen, elastic fibers system, proteoglycans and glycosaminoglycans. Tissue remodeling involves a dynamic balance between cell proliferation and programmed cell death as well as changes in the extracellular matrix components. Therefore, it is important to consider these both cellular behaviors when investigating the mechanism that regulates the interpubic tissue remodeling; growth during Iate pregnancy and partum ensuring involution during the postpartum period. Proliferating and programmed death cells were identified by immunohistochemistry, PCNA and TUNEL detection, respectively, and the rates at which these processes occurred were determined by morphometric analysis. Our results demonstrated that cellular proliferation was intense during the period of ligament formation, from 015 to 018, thereafter abruptly declining on 019. From parturition (019) onwards, an ever increasing decline in the cellular proliferation levels could be observed. The quantitative analyses of cellular death, showed opposite results when compared to cellular proliferation. For example, on 019, has initiated the decrease on the proliferative index. Likewise, on this day that occur one of the highest levei of cellular death. When we observed simultaneously proliferation and cellular death, during the early pregnancy the cycle of cellular renovation is clearly proliferative, producing hyperplasia for in the later pregnancy the cycle be directing by programmed cellular death. Interestingly, although the high levels of the cellular death during postpartum involution could be show by the TUNEL positive cells, we were unable to observed picnotic nucleus. We would expect to find picnotic nucleus with reasonable frequency in this situation, where programmed cellular death occurs in a great extension. The process of autophagy, a variation of classical apoptotic cellular death was discussed as an alternative mechanism of the cell elimination in the postpartum Iigament involution / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Paulo Pinto Joazeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T07:41:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rosa_RenataGiardini_M.pdf: 17497902 bytes, checksum: 703ffbe86316dbd66437c0d105646fed (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Durante a prenhez de alguns roedores ocorre um acentuado processo de remodelação da sínfise púbica (SP). No camundongo, esta articulação fibrocartilaginosa é gradativamente formada por um tecido conjuntivo fibroso, resultando no ligamento interpúbico (LI) entre os coxins de cartlagem na etapa final da prenhez. Logo após o parto, este ligamento é rapidamenteremodelado e o espaço entre os ossos púbicos se fecha por volta do quinto dia pós-parto. Sabe-se que o hormônio relaxina facilita o crescimento e remodelação dos órgãos do trato reprodutor feminino, alterando a regulação dos processos bioquímicos envolvidos na remodelação da matriz extracelular (MEC) do útero gravídico e da cérvice. Porém pouco se conhece sobre a sínfise em relação ao envolvimento de metaloproteinases (MMPs) nessa remodelação. Assim como, da participação de células inflamatórias, que poderiam estar envolvidas no processo de remodelaçãoda sínfise púbica do camundongodurantea prenhez. Neste estudo, foram utilizadas sínfises de camundongos virgens e ligamento interpúbico de animais prenhes para a detecção de MMPsin vivo e in vitro (explante de 24 horas). As MMPs da família das gelatinases (MMP-2 e MMP-9) foram caracterizadas pela zimografia e por meio de ensaios imunohistoquímicos,assim como a MMP-8 (colagenase2) associada,quase que exclusivamente, com o processo inflamatório. Também foram utilizadas microscopia eletrônica de transmissão e microspia de luz associada às colorações seletivas para evidenciar os tipos celulares que poderiam estar participandodo processo de remodelaçãoda sínfise púbica. A zimografia demonstrou a presença das gelatinases MMP-2 e MMP-9, ambas como pré e pró-enzimas, na SP e no LI. Imunohistoquímicadetectou a reação positivade gelatinasese também de MMP-8em células seme~hantesaos fibroblastos. A caracterização morfológica evidenciou que as células semelhantesa fibroblastos na sínfise de animais virgens estão próximasa matriz pericelular, ao passo que durante a prenhez, há um aumento deste subcompartimento, entre célula e matriz. As análises qualitativas e quantitativas, mostramum reduzido númerode granulócitosna sínfise de animaisvirgens e no ligamento intepúbico durante a prenhez. Dados obtidos neste trabalho suportam a hipótese de que as gelatinases estão envolvidas na remodelação da sínfise por processos intrínsecos, evidenciando que tanto as modificaçõesdo fenótipo de células semelhantes a fibroblastos, como as modificaçõesquímicas da MEC, são fundamentais para o rearranjo desta articulação durante a prenhez, parto e pós-parto no camundongo. A extensão da remodelação da MEC sugere o papel dos hormônios da prenhez na modulação da interação célula-matriz independentemente de uma reação do tipo inflamatória descrita em outros órgãos durante a prenhez / Abstract: During pregnancy of some rodents a deep remodeling occurs in the pubic symphysis (PS). In the mouse, these fibrocartilagenousarticulation are gradually replaced by a dense connective tissue, forming the interpubic ligament (IL) at the end of pregnancy. Right after birth, this ligament is rapidly remodeled and the space between the two bones is quickly closed, five days after birth. It is well known that hormones such as relaxin, facilitates the growth and remodeling of organs in female reproductive tract, changing the regulation of biochemical processes that are involved in the remodeling of the extracellular matrix (ECM) of the uterus and cervix during pregnancy. However, little are known about pubic symphysis in when the subject is the involvement of metalloproteinases (MMPs) in this remodeling, as well as the participation of inflammatorycells that could be involved in the remodeling process of the mouse pubic symphysisduring pregnancy. In this study were used pubic symphysis of virgin mice and interpubic ligament in pregnant animais for the detection of MMPs in vivo and at in vitro (24h explants). MMPs from the gelatinase family (MMP-2 and MMP-9) were characterized by zymography and by immunohistochemistryessays, also MMP-8 (collagenase 2) that is believed to be associated almost exclusively with an inflammatory processoTransmission electron microscopy and light microscopy was also used associated with selectively staining, to evidence type of cells that could be involved in the pubic symphysis remodeling. Zymographydemonstratedthe presenceof gelatinases MMP-2 and MMP- 9 both in inactive and active forms, at the PS and IL. Immunohistochemistry,at the pubic symphysis and interpubic ligament, detected the expression of gelatinases and also MMP-8 in cells that were similar to fibroblasts. Morphological characterization evidenciated that cells that are similar to fibroblasts in the pubic symphysis of virgin animais are closely related to the pericellular region, being that during pregnancy,these spaces suffers an increase in this sub-compartment between cell and matrix. Qualitative and quantitative , analysis demonstratedlittle granulocytes in the pubic symphysis of virgin animais and in the interpubic ligament during pregnancy. Results that were obtained from this work support the hypothesis that the gelatinases could be involved in pubic symphysis remodeling through intrinsic processes, being evident that, both cellular phenotype modifications and also chemical modifications of the ECM, are fundamental to the rearrange of this articulation during mouse pregnancy, birth and pos-partum. The extensive remodeling of the ECM suggests hormonal role of the pregnancy in the modulation of the interaction between cell-matrix independently of an inflammatoryreaction in other organs during pregnancy / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Olga Maria de Toledo Correa, Paulo Pinto Joazeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T13:23:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Garcia_EduardoAnselmo_M.pdf: 5637432 bytes, checksum: 7856ba76c45912e029c4e039ce280e21 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O tecido interpúbico no camundongo é conhecido pelas rápidas adaptações sofridas devido as novas demandas impostas durante a prenhez, parto e pós-parto. O desenvolvimento de um ligamento interpúbico é explicado em parte pelas modificações observadas na hidratação deste tecido, assim como, pela presença de Ácido Hialurônico (AH). O presente estudo focou-se na presença do AH na sínfise púbica, uma vez que pouco se sabe a respeito do seu papel durante as modificações sofridas neste período. A localização e quantificação do AH, por meio de uma sonda específica para AH, foi feita em amostras de sínfises púbicas de camundongos virgens, com 12 a 18 dias de prenhez, no dia do parto (D19) e durante o 3° e 5° dia pós-parto. A análise quantitativa fluorométrica indicou um aumento gradual no AH do tecido interpúbico durante a prenhez, seguido de uma diminuição já presente no dia do parto. A análise histoquímica demonstrou a presença de AH na matriz extracelular deste tecido assim como dentro das células. Baseado nestes resultados, pudemos demonstrar a provável participação do AH em três processos. Quando encontrado na matriz extracelular, o AH contribui para a formação de uma estrutura flexível, de consistência rígida, que vai permitir a passagem do feto pelo canal de parto. Ao passo que, quando encontrado intracelularmente, o AH contribui em dois processos distintos: até o 18° dia de prenhez, o AH participa nos processos de proliferação celular, através de possíveis interações com moléculas e estruturas importantes neste processo. O AH talvez também contribua para a proliferação através da formação de uma zona hidratada ao redor das células facilitando o destacamento das mesmas de seu substrato. Finalmente, após o parto e até o 5° dia pós-parto o AH contribui para a manutenção do fenótipo miofibroblástico destas células ajudando no processo de involução sofrido pelo tecido interpúbico no pós-parto / Abstract: The interpubic tissue in mice is known to rapidly adapt itself to the ali new demands imposed during pregnancy, partum and post-partum. The development of an interpubic ligament may be explained, in part, due to the modifications observed in the hydration of this tissue, as well as, the presence of hyaluronan (HA). The present study focuses on the presence of HA in the pubic symphysis, since still very little is known of its role during the modifications suffered through this period. The localization and quantification of HA using a HA-probe were studied in samples of mice pubic symphyses from virgin, 12th to 18th days of pregnancy, the day of delivery (D19) and during 3 and 5 days post-partum. The quantitative fluorimetric analysis indicated a gradual increase of HA in the interpubic tissue throughout pregnancy, being followed by a decrease already present on the day of the delivery. In addition, the histochemical analysis demonstrated the presence of HA in the extracellular matrix of the tissue as well as within its cells. Based on these results, it can be shown that HA may participate in three processes during pregnancy, partum and post-partum. While found in the extracellular matrix, HA contributes in the formation of a flexible structure, yet of rigid consistency, that allows the passage of the embryo for the birth canal. Whereas, while found intracellular, HA contributes in two distinct processes: until the 18th day of pregnancy, HA participates in the process of cellular proliferation through its possible interaction with mitotic cells. HA may also contribute to cellular proliferation through the formation of a hydrated zone from parturition as well as the 5th day post-partum HA contributes to the maintenance of the myofibroblastic phenotype of these cells, aiding in the process of involution suffered by the interpubic tissue following parturition / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Paulo Pinto Joazeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-27T11:46:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castelucci_BiancaGazieri_M.pdf: 5603376 bytes, checksum: 36691ec0b0e4ba6ebab8bc72c2ce99ed (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A sínfise púbica (SP) faz parte do conjunto de elementos do sistema musculoesquelético que oferece suporte aos órgãos pélvicos. Em alguns animais, como camundongos e cobaias, esta junção fibrocartilaginosa passa por drásticas modificações hormonalmente reguladas durante a prenhez, resultando no afastamento dos ossos púbicos e na formação de um ligamento elástico (LiP) que facilita a passagem dos fetos durante o parto. Assim como o LiP, a cérvice uterina (CV) também sofre extensa remodelação durante a prenhez e ambos apresentam similaridades no que diz respeito à composição tecidual, proliferação celular e regulação por relaxina e hormônios esteroides. Embora alguns achados relacionem o relaxamento da SP da e CV à ativação de uma resposta pró-inflamatória sem a participação de granulócitos, a participação de outros leucócitos no remodelamento da SP durante o parto e pós-parto ainda não foi devidamente investigada em camundongos. Com a finalidade de caracterizar aspectos que envolvem a participação de leucócitos neste remodelamento realizamos o presente estudo visando à caracterização morfológica e análise da expressão gênica destas células durante o relaxamento (dias 12, 18 e 19ddg) e a remodelamento da SP no pós-parto (dias 1 e 3dpp) associadas à depleção de monócitos/macrófago. A análise morfológica demonstrou a presença de monócitos/macrófagos, positivos para os marcadores dos antígenos 7/4 e F4/80 respectivamente, dispersos na matriz e no interior de lacunas do LiP entre 18ddg e 3dpp nos grupos controle e tratados. No grupo controle, as análises de PCR em tempo real demonstraram o aumento da expressão de receptor (Ccr2) característico de monócitos inflamatórios nos tecidos interpúbicos, no final da prenhez e pós-parto. Durante a separação dos ossos púbicos, as evidencias indicaram tendência à polarização dos macrófagos favorável ao fenótipo anti-inflamatório M2 (Arg1). No relaxamento houve aumento dos fenótipos pro-inflamatório M1 (Il1a, Tnfa) e anti-inflamatório M2 (Il10); enquanto no pós-parto (1dpp) houve aumento na expressão de genes caraterísticos do fenótipo M1 e queda da expressão relativa de Arg1, simultaneamente ao remodelamento da matriz necessário a reorganização da articulação interpúbica. Posteriormente, no 3dpp, apesar da manutenção dos níveis de expressão de Il1a e Tnfa houve aumento da expressão de Il10, Arg1 e Tgfb, genes relacionados ao fenótipo M2, o que potencialmente pode ser associado à ativação de mecanismos de reparo tecidual necessários à reaproximação dos ossos púbicos. A depleção de monócitos/macrófagos nas etapas de separação e relaxamento dos tecidos interpúbicos, assim como no 3dpp favoreceu a polarização de macrófagos de fenótipo M1 (Il1a, Tnfa), resultando em alterações na compactação da matriz extracelular. Este estudo demonstra que os fagócitos mononucleares são células importantes no processo fisiológico do remodelamento da SP do camundongo durante a prenhez, parto e pós-parto. Estas células atuam por meio de mecanismos finamente regulados capazes de garantir o sucesso da reparação tecidual de estruturas suportes da cavidade pélvica do camundongo / Abstract: The pubic symphysis (PS) is part of the musculoskeletal system elements that provide support to the pelvic organs. In mice, this fibrocartinaginous joint undergoes hormonally regulated changes during pregnancy involving the pubic bones reabsortion and formation of an elastic ligament (IpL) that leading to a safe delivery. At this period, the uterine cervix (UC) also undergoes an extensive remodeling sharing some similarities with the IpL tissue like connective tissue composition, cell proliferation and hormonal regulation of that process. Although some findings relate the relaxation of PS and UC to the activation of a pro-inflammatory response without the granulocytes involvement, others leukocytes participation in PS remodeling at the delivery and postpartum were not well investigated in mice. In order to characterize aspects of the participation of leukocytes in the PS remodeling we conducted the morphological characterization and analysis of gene expression of these cells during relaxation (12, 18 and 19 days of pregnancy) and the remodeling of the PS postpartum (1 and 3dpp) associated with the depletion of monocytes / macrophages. Morphological analysis revealed the presence of positive cells for antigen 7/4 and F4 / 80, monocytes and macrophages respectively, dispersed in the matrix and inside gaps of the IpL between the 18dp and 3dpp in the control and treated groups. In control group, the real-time PCR analysis showed increased expression of the characteristic inflammatory monocytes receptor (Ccr2) at the interpúbicos tissues on late pregnancy and postpartum. During pubic bones separation, evidences indicated that macrophages preferentially tend to polarize in the anti-inflammatory phenotype M2 (Arg1). At the relaxation of IpL pro-inflammatory M1 (Il1a, Tnfa) and anti-inflammatory M2 (I110) phenotypes was increased; in the meantime, parallel to the remodeling of the extracellular matrix necessary to the interpúbica joint reorganization at postpartum (1dpp), there was an increase in the expression of genes characteristic of M1 phenotype and decreasing in the Arg1 relative expression. Subsequently, at the 3dpp, despite the maintenance in expression levels of Il1a and Tnfa there was an increased in M2 phenotype-related genes expression (Il10, Arg1 and Tgfb) potentially involved in the activation of tissue repair mechanisms necessary to pubic bones reapproximation. Depletion of monocytes / macrophages at separation and interpubic tissue relaxation, as well as 3dpp favored the M1 macrophage phenotype polarization (Il1a, Tnfa), leading to changes in the extracellular matrix compression. This study shows that mononuclear phagocytes are important cells in the physiological process of mice PS remodeling during pregnancy, labor and postpartum. These cells act through finely regulated mechanisms to ensure the successfull tissue repair of the pelvic support structures in mice / Mestrado / Biologia Tecidual / Mestra em Biologia Celular e Estrutural

Os ligamentos são estruturas estabilizadoras estáticas das articulações e desempenham um papel importante na junção mecânica. Podem ser influenciadas por fatores de diversas naturezas, inclusive adaptações sofridas durante o período puerperal. Na gravidez existem grandes modificações hormonais que preparam o organismo materno para o desenvolvimento do embrião e feto, bem como para a parturição. Assim, sob ação hormonal os ligamentos e a sínfise púbica têm suas características mecânicas alteradas preparando a mãe para o parto. Este trabalho teve por objetivo caracterizar mecanicamente as modificações sofridas na sínfise púbica e no ligamento cruzado anterior do joelho, durante a gestação e na fase final. Para o estudo foram utilizadas 44 ratas da raça Wistar, com massa corporal inicial média de 301.1 / 8,1g e idade aproximada de 100 dias. Os animais foram divididos em três grupos experimentais: o grupo controle, grupo prenhez I e o grupo prenhez II. Para constituição do grupo prenhez I e II, fêmeas férteis foram acasaladas com machos e o coito foi comprovado pela presença de espermatozóides no lavado vaginal obtido da fêmea. Confirmando a prenhez, os animais foram mantidos em gaiolas até o décimo sexto dia para o grupo prenhez I e sacrificados, para o grupo prenhez II foi esperado até o vigésimo dia de gestação e sacrificados, sendo coletados a pelve e os joelhos de ambos os grupos. Após preparo, a sínfise púbica e o ligamento cruzado anterior do joelho foram ensaiados mecanicamente em tração, com obtenção dos seguintes parâmetros: carga no limite máximo e rigidez. Os resultados comparados com as fêmeas controles não prenhes mostraram que para a sínfise púbica houve aumento da rigidez e diminuição da carga no limite máximo. Para o ligamento cruzado anterior não houve diferença significativa entre os grupos / Ligaments are static stabilizer structures of the joints and play an important role in the mechanical junction. They may be influenced by factors of several natures, including adaptations suffered during the puerperal period. There are in pregnancy big hormonal modifications that prepare the maternal organism for the embryo and fetus development, as well to parturition. Thus, under hormonal actions the ligaments and the pubic sinfisis have their mechanical features shifted preparing the mother for the labor. This paper aimed to point out the shifts occurred by the pubic sinfisis and by the knee anterior cruciate ligament during pregnancy and in the final phase. For the study were used 44 mice Wistar breed, corporal average mass of 301,1 / 8,1g and approximated age of 100 days. They were divided into 3 experimental groups: control group, pregnancy I group and pregnancy II group. For the disposition of the control group, the animals were expected to complete 120 days, then sacrificed and collected the pelvis and the knees. For pregnancy group I and II, fertile females were mated with males and the coitus was proved with the presence of spermatozoids in the vaginal washed obtained from the female. Once confirmed pregnancy, the animals were kept in cages until the 16th day for pregnancy group I and so only collected the animal’s pelvis. For pregnancy group II was expected until the 23rd day of pregnancy and sacrificed, being collected the pelvis and the knees. After preparing, the pubic sinfisis and the anterior cruciate ligament of the knee were mechanically tested in traction, obtaining the following parameters: load in maximum border line and stiffness. The results compared with non pregnant females showed that to the pubic sinfisis there was an increase of stiffness and a load in maximum border line decrease. For the anterior cruciate ligament there was no significant difference between the groups

Os ligamentos são estruturas estabilizadoras estáticas das articulações e desempenham um papel importante na junção mecânica. Podem ser influenciadas por fatores de diversas naturezas, inclusive adaptações sofridas durante o período puerperal. Na gravidez existem grandes modificações hormonais que preparam o organismo materno para o desenvolvimento do embrião e feto, bem como para a parturição. Assim, sob ação hormonal os ligamentos e a sínfise púbica têm suas características mecânicas alteradas preparando a mãe para o parto. Este trabalho teve por objetivo caracterizar mecanicamente as modificações sofridas na sínfise púbica e no ligamento cruzado anterior do joelho, durante a gestação e na fase final. Para o estudo foram utilizadas 44 ratas da raça Wistar, com massa corporal inicial média de 301.1 / 8,1g e idade aproximada de 100 dias. Os animais foram divididos em três grupos experimentais: o grupo controle, grupo prenhez I e o grupo prenhez II. Para constituição do grupo prenhez I e II, fêmeas férteis foram acasaladas com machos e o coito foi comprovado pela presença de espermatozóides no lavado vaginal obtido da fêmea. Confirmando a prenhez, os animais foram mantidos em gaiolas até o décimo sexto dia para o grupo prenhez I e sacrificados, para o grupo prenhez II foi esperado até o vigésimo dia de gestação e sacrificados, sendo coletados a pelve e os joelhos de ambos os grupos. Após preparo, a sínfise púbica e o ligamento cruzado anterior do joelho foram ensaiados mecanicamente em tração, com obtenção dos seguintes parâmetros: carga no limite máximo e rigidez. Os resultados comparados com as fêmeas controles não prenhes mostraram que para a sínfise púbica houve aumento da rigidez e diminuição da carga no limite máximo. Para o ligamento cruzado anterior não houve diferença significativa entre os grupos / Ligaments are static stabilizer structures of the joints and play an important role in the mechanical junction. They may be influenced by factors of several natures, including adaptations suffered during the puerperal period. There are in pregnancy big hormonal modifications that prepare the maternal organism for the embryo and fetus development, as well to parturition. Thus, under hormonal actions the ligaments and the pubic sinfisis have their mechanical features shifted preparing the mother for the labor. This paper aimed to point out the shifts occurred by the pubic sinfisis and by the knee anterior cruciate ligament during pregnancy and in the final phase. For the study were used 44 mice Wistar breed, corporal average mass of 301,1 / 8,1g and approximated age of 100 days. They were divided into 3 experimental groups: control group, pregnancy I group and pregnancy II group. For the disposition of the control group, the animals were expected to complete 120 days, then sacrificed and collected the pelvis and the knees. For pregnancy group I and II, fertile females were mated with males and the coitus was proved with the presence of spermatozoids in the vaginal washed obtained from the female. Once confirmed pregnancy, the animals were kept in cages until the 16th day for pregnancy group I and so only collected the animal’s pelvis. For pregnancy group II was expected until the 23rd day of pregnancy and sacrificed, being collected the pelvis and the knees. After preparing, the pubic sinfisis and the anterior cruciate ligament of the knee were mechanically tested in traction, obtaining the following parameters: load in maximum border line and stiffness. The results compared with non pregnant females showed that to the pubic sinfisis there was an increase of stiffness and a load in maximum border line decrease. For the anterior cruciate ligament there was no significant difference between the groups

The distraction osteogenesis is a surgical technique used in the dentistry for the transversal discrepancies correction of the jaw, having as basic principle the intrinsic capacity of some tissue development when submitted to the stress caused by slow and continuous traction. To obtain the osteogenesis success, the distractors osteogenesis symphysianic have to minimize any bone parts displacement. This work had the purpose to evaluate the stability of a distractor symphysis through three-dimensional models of finite elements where different setting positions and different amounts of setting screws are evaluated. The stability was evaluated through the determination of vertical displacements in the load direction in the range of 20 up to 140 N. Additionally; the results of an experimental analysis had been used to adjust the numerical models of finite elements. It was observed that, for the load profile applied, the stability is not a function of setting screws number. The stiffness of the distractor at cut region was the cause of the differences between fixations. In the distractor lower position setting the displacements levels had been lesser, indicating a better distractor stability. / A distração osteogênica é uma técnica cirúrgica utilizada na Odontologia para a correção de discrepâncias transversais da mandíbula, tendo como princípio fundamental a capacidade intrínseca de alguns tecidos vivos de se desenvolverem quando submetidos à tensão provocada por tração lenta e contínua. Para se conseguir sucesso na osteosíntese, os distratores osteogênicos sinfiseanos têm que minimizar qualquer tipo de movimento entre os segmentos ósseos obtidos com o corte. Este trabalho tem por finalidade avaliar a estabilidade de um tipo de distrator da sínfise mentoniana através de modelos tridimensionais de elementos finitos onde são avaliadas diferentes posições de fixação e diferentes quantidades de parafusos de fixação. A estabilidade foi avaliada através da determinação dos deslocamentos verticais na direção do carregamento variando as cargas de 20 a 140 N. Paralelamente, foram utilizados os resultados de uma análise experimental para ajustar os modelos numéricos de elementos finitos. A análise indicou que, para o tipo de cargas aplicadas, a estabilidade não depende do número de parafusos de fixação e sim da rigidez do distrator na região do corte. Na posição de fixação inferior do distrator os níveis de deslocamentos foram menores, indicando uma melhor estabilidade do distrator. / Mestre em Engenharia Mecânica